JPH02291278A - テイコマイシンａ↓２純粋単―ファクター２ - Google Patents
テイコマイシンａ↓２純粋単―ファクター２Info
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- JPH02291278A JPH02291278A JP1276997A JP27699789A JPH02291278A JP H02291278 A JPH02291278 A JP H02291278A JP 1276997 A JP1276997 A JP 1276997A JP 27699789 A JP27699789 A JP 27699789A JP H02291278 A JPH02291278 A JP H02291278A
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- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
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- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、テイコマイシンＡ２ファクター２の実質的に
純粋な形状の抗生物質およびそれを製造する方法に関す
る。
純粋な形状の抗生物質およびそれを製造する方法に関す
る。
テイコマイシンＡ２は、同化しうる炭素原、窒素原およ
び無機塩を含有する培地中に菌株■免１１几ｑ且土ａｎ
ｅｓ Ｔｅｉｃｈｏｍ ｃｃｔｉｃｕｓ ｎｏｕ
． ｓｐ． ＾丁ＣＣ３１１２１を培養して得られ
るいくつかの異なる抗生物質のうちのひとつである。ベ
ルギー特許Ｎα８３９．２５９をみよ。上記引用の特許
記載の方法によると、テイコマイシンＡ．Ａ２およびＡ
３を含有する抗生物質の混合物を、発酵ブロスより、水
に混和しない適当な有機溶媒で抽出し、抽出溶媒より沈
殿させる一般的方法で採取する。
び無機塩を含有する培地中に菌株■免１１几ｑ且土ａｎ
ｅｓ Ｔｅｉｃｈｏｍ ｃｃｔｉｃｕｓ ｎｏｕ
． ｓｐ． ＾丁ＣＣ３１１２１を培養して得られ
るいくつかの異なる抗生物質のうちのひとつである。ベ
ルギー特許Ｎα８３９．２５９をみよ。上記引用の特許
記載の方法によると、テイコマイシンＡ．Ａ２およびＡ
３を含有する抗生物質の混合物を、発酵ブロスより、水
に混和しない適当な有機溶媒で抽出し、抽出溶媒より沈
殿させる一般的方法で採取する。
■
ついでテイコマイシンＡ２を、ｓｅｐｈａｄｅｘ 上
の力ラムクロマトグラフィーを用いて得られた抗生物質
混合物より分ける。スルホン化ボリスチレン樹脂を通し
て精製したあとのティコマイシンＡ２は１組のペーパー
およびＮ層クロマトグラフィーシステムでのＲｆ値を含
めた、広く１連の種々の化学的物理的バラメーターで特
徴づける。クロマトグラフィーで、化合物は真に単一生
成物として振？ｒつだ。
の力ラムクロマトグラフィーを用いて得られた抗生物質
混合物より分ける。スルホン化ボリスチレン樹脂を通し
て精製したあとのティコマイシンＡ２は１組のペーパー
およびＮ層クロマトグラフィーシステムでのＲｆ値を含
めた、広く１連の種々の化学的物理的バラメーターで特
徴づける。クロマトグラフィーで、化合物は真に単一生
成物として振？ｒつだ。
予期されなかったこととして、今回、テイコマイシンＡ
２は、実際には、いくつかの一緒に生成する非常に類似
した抗生物質の混合物を包含することが分った。それら
の主なファクターは、テイコマイシンＡ２ファクター１
、ティコマイシンＡ ファクター２、テイコマイシンＡ
２ファクタ−３、テイコマイシンＡ２ファクター４およ
びテイコマイシンＡ２ファクター５と命名された。さら
に、これらの純粋な単一なファクターは、それらが、感
受性の微生物に対し高度の抗生物質活性を有する点で、
テイコマイシンＡ２複合物から区別されることが分った
。
２は、実際には、いくつかの一緒に生成する非常に類似
した抗生物質の混合物を包含することが分った。それら
の主なファクターは、テイコマイシンＡ２ファクター１
、ティコマイシンＡ ファクター２、テイコマイシンＡ
２ファクタ−３、テイコマイシンＡ２ファクター４およ
びテイコマイシンＡ２ファクター５と命名された。さら
に、これらの純粋な単一なファクターは、それらが、感
受性の微生物に対し高度の抗生物質活性を有する点で、
テイコマイシンＡ２複合物から区別されることが分った
。
本発明の抗生物質を製造するには、上記引用のベルギー
特許記載のテイコマイシンＡ２より出発し、高効率クロ
マトグラフ法により抗生物質複合物を単一のファクター
に分け主要なものを採取する。
特許記載のテイコマイシンＡ２より出発し、高効率クロ
マトグラフ法により抗生物質複合物を単一のファクター
に分け主要なものを採取する。
本明細書中に記載の゛テイコマイシンＡ２“テイコマイ
シンＡ２複合物″または“抗生物質複合物″の用ｇＨは
、たとえば、本明ａＳ中に引用するベルギー特許８３９
．２５９の記載により得られ、そこでテイコマイシンＡ
２と命名されている、上記の同時に生産ざれる５種の抗
生物質ファクターを含有する混合物を意味する。この複
合物を、主な、純粋な単一ファクターに分けることは、
逆相分配クロマトグラフィーまたはイオンー交換クロマ
トグラフィーで行ないうる。前者では、カラムの充填に
不活化シリカゲルを用い、展開にはアセトニトリル／ギ
酸アンモニウム水溶液のグラジエント溶出を用いるのが
便宜であり、後者では、静止相に、ゲル型の弱陰イオン
交換体を用い、溶出システムに、水性緩衝液または水性
緩衝液と非水性溶媒との混合物を用いるのが適当である
。特に、希ギ酸アンモニウム水溶液とアセトニトリルと
の混合物に溶解したテイコマイシン△２の溶液をシラン
化シリカゲルカラムに通し、同じ溶媒システムでカラム
をグラジエント溶出する。アガロースのジエチルアミノ
エチル誘導体を静止相に用い、Ｍ衝溶液または緩衝溶液
と非水混和性の溶媒との混合物を用いて徐々に溶出して
分ける。
シンＡ２複合物″または“抗生物質複合物″の用ｇＨは
、たとえば、本明ａＳ中に引用するベルギー特許８３９
．２５９の記載により得られ、そこでテイコマイシンＡ
２と命名されている、上記の同時に生産ざれる５種の抗
生物質ファクターを含有する混合物を意味する。この複
合物を、主な、純粋な単一ファクターに分けることは、
逆相分配クロマトグラフィーまたはイオンー交換クロマ
トグラフィーで行ないうる。前者では、カラムの充填に
不活化シリカゲルを用い、展開にはアセトニトリル／ギ
酸アンモニウム水溶液のグラジエント溶出を用いるのが
便宜であり、後者では、静止相に、ゲル型の弱陰イオン
交換体を用い、溶出システムに、水性緩衝液または水性
緩衝液と非水性溶媒との混合物を用いるのが適当である
。特に、希ギ酸アンモニウム水溶液とアセトニトリルと
の混合物に溶解したテイコマイシン△２の溶液をシラン
化シリカゲルカラムに通し、同じ溶媒システムでカラム
をグラジエント溶出する。アガロースのジエチルアミノ
エチル誘導体を静止相に用い、Ｍ衝溶液または緩衝溶液
と非水混和性の溶媒との混合物を用いて徐々に溶出して
分ける。
分離操作はＨＰＬＣでモニターする。類似のＨＰＬＣプ
ロフィールを有寸る分画を合併し、望むならば調製用Ｈ
ＰＬＣでさらに精製し脱塩する。
ロフィールを有寸る分画を合併し、望むならば調製用Ｈ
ＰＬＣでさらに精製し脱塩する。
これらの溶液より、有機溶媒を蒸発させ、水をストリッ
プして小容伍とし、過剰の、化合物の溶解しない有機溶
媒を加えて、生成物を沈殿させる。
プして小容伍とし、過剰の、化合物の溶解しない有機溶
媒を加えて、生成物を沈殿させる。
本発明方法をさらによく説明するためにつぎに具体例を
示す。しかし、示した特定の条件で本発明を制限するわ
けでない。テイコマイシンＡ２ファクター１、２、３、
４および５の分離ベルギー特許８３９．２５９に記載の
方法で得られたテイコマイシンＡ２複合物の１０グラム
を０．２％ギ酸アンモニウムーアセトニトリル（９ ：
１ ）混合物の１リットルに溶解し、１規定Ｎａｏ＋
−＋でｐＨ７．５に調整する。この溶液をシラン化シリ
カゲル６Ｑ （Ｈｅｒｃｋ ）の５００グラムを含有す
るカラムに通す。
示す。しかし、示した特定の条件で本発明を制限するわ
けでない。テイコマイシンＡ２ファクター１、２、３、
４および５の分離ベルギー特許８３９．２５９に記載の
方法で得られたテイコマイシンＡ２複合物の１０グラム
を０．２％ギ酸アンモニウムーアセトニトリル（９ ：
１ ）混合物の１リットルに溶解し、１規定Ｎａｏ＋
−＋でｐＨ７．５に調整する。この溶液をシラン化シリ
カゲル６Ｑ （Ｈｅｒｃｋ ）の５００グラムを含有す
るカラムに通す。
カラムは、０．２％ギ酸アンモニウム溶液中１０％から
２０％までのアセトニトリルの直線状グラジエントで溶
出する。全容聞は１０リットルとする。
２０％までのアセトニトリルの直線状グラジエントで溶
出する。全容聞は１０リットルとする。
２０ｄ宛の分画を集めＨＰＬＣでヂエツクする。
次表に、代表的なＨＰＬＣ分離におけるテイコマイシン
Ａ２ファクター１、２、３、４および５における保持時
間《ｔＲ》を示す。操作条件は次表に示す。
Ａ２ファクター１、２、３、４および５における保持時
間《ｔＲ》を示す。操作条件は次表に示す。
表 １
テイコマイシンＡ２
ファクター 保持時間（分）１
２１． ２ ２ ２２．６ ３ ２３． ３ ４ ． ２５．８ ５ ２６．４ ３，５−ジヒドロキシ ８．８４トルエン （内部標準） カラム： ５ｕ ＺｏｒｂａｘＯＯＤＳ （Ｄｕ Ｐ
ｏｎｔ ）移動相：４０分のうちに、Ａ中０％Ｂから５
０％Ｂまで直線状グラジエント Ａ）２５ｓＨ ＮａＨ２ＰＯ４／アセトニトリル（９
：１）０．１Ｎ ＮａＯＨで１）Ｈ６．Ｏに緩衝 Ｂ）２５１８ ＮａＨ２ ｐｏ４／７セトニトリル（
３：７）０．ＩＮ ＮａＯＨでｐＨ６．０に緩衝 流 速：２ｍ／分 検出器： ２ ５ ４ ｒｖでのＵ．Ｖ．フォトメータ
ー同じＨＰＬＧプロフィールの分画を集め、溶媒を減圧
で蒸発させる。残った水溶液を、シラン化シリカゲノレ
（６０） （Ｈｅｒｃｋ ）の１０グラムを含有する
カラムに通す。カラムは蒸留水で洗いギ酸アンモニウム
を除き、５０％水性アセトニトリルで溶出する。溶出液
は水を蒸発しやすくするためにブタノールを加えて小容
吊に濃縮し、ついで１：１アセトンーエチルエーテル混
合物で沈殿させる。
２１． ２ ２ ２２．６ ３ ２３． ３ ４ ． ２５．８ ５ ２６．４ ３，５−ジヒドロキシ ８．８４トルエン （内部標準） カラム： ５ｕ ＺｏｒｂａｘＯＯＤＳ （Ｄｕ Ｐ
ｏｎｔ ）移動相：４０分のうちに、Ａ中０％Ｂから５
０％Ｂまで直線状グラジエント Ａ）２５ｓＨ ＮａＨ２ＰＯ４／アセトニトリル（９
：１）０．１Ｎ ＮａＯＨで１）Ｈ６．Ｏに緩衝 Ｂ）２５１８ ＮａＨ２ ｐｏ４／７セトニトリル（
３：７）０．ＩＮ ＮａＯＨでｐＨ６．０に緩衝 流 速：２ｍ／分 検出器： ２ ５ ４ ｒｖでのＵ．Ｖ．フォトメータ
ー同じＨＰＬＧプロフィールの分画を集め、溶媒を減圧
で蒸発させる。残った水溶液を、シラン化シリカゲノレ
（６０） （Ｈｅｒｃｋ ）の１０グラムを含有する
カラムに通す。カラムは蒸留水で洗いギ酸アンモニウム
を除き、５０％水性アセトニトリルで溶出する。溶出液
は水を蒸発しやすくするためにブタノールを加えて小容
吊に濃縮し、ついで１：１アセトンーエチルエーテル混
合物で沈殿させる。
上記の操作で純テイコマイシンＡ２ファクター１（４１
０ｍｇ）およびフ７ｔクター２（７７０ＩｒＦ９）をう
る。テイコマイシンＡ２ファクター３は、テイコマイシ
ンＡ２ファクター２と１＝１混合物となっているものを
、つぎの操作条件で精製する。半調製用のＨＰＬＣを用
いる。
０ｍｇ）およびフ７ｔクター２（７７０ＩｒＦ９）をう
る。テイコマイシンＡ２ファクター３は、テイコマイシ
ンＡ２ファクター２と１＝１混合物となっているものを
、つぎの操作条件で精製する。半調製用のＨＰＬＣを用
いる。
カラム： Ｗｈａｔｍａｎ Ｐａｒｔｉｓｉｌ■ＯＤＳ
Ｍ９１０／５０移動相：０．２％ギ酸アンモニウム
水溶液／アセトニトリル（７６ ： ２４）。
Ｍ９１０／５０移動相：０．２％ギ酸アンモニウム
水溶液／アセトニトリル（７６ ： ２４）。
流 速：４．！Ｍ／分
検出ｇＳ：Ｕ．Ｖ．フォトメーター２ ５ ４ ｎｍ添
加伍：２０■ この場合ＨＰＬＧで各分画をチェックして精製をモニタ
ーした。
加伍：２０■ この場合ＨＰＬＧで各分画をチェックして精製をモニタ
ーした。
純テイコマイシンＡ２ファクター２を含有する分画およ
び純テイコマイシンＡ２ファクター３を含有する分画を
合併し、脱塩し前記のように沈殿させた。（収ｆｆｉ：
５１０Ｉ１ｇのティコマイシンＡ２ファクター２および
５２０■のテイコマイシンＡ２ファクター３》。
び純テイコマイシンＡ２ファクター３を含有する分画を
合併し、脱塩し前記のように沈殿させた。（収ｆｆｉ：
５１０Ｉ１ｇのティコマイシンＡ２ファクター２および
５２０■のテイコマイシンＡ２ファクター３》。
第１のカラムから得られる、ファクター４および５を１
：１の割合に含有する分画（約５ ０ ０＃ｉＦ）、平
行して実施した第２の分離より同様に得られたファクタ
ー４および５の混合物含有別のプール（約４ ９ ＱＩ
ｌｌｇ）を合併し、テイコマイシンＡ２ファクター３の
精製について上記した操作条件を用いる半ＷＪＶ用１−
ＩＰＬｃで分け、３５０ｑのテイコマイシンＡ２ファク
ター４および３００ｒ＃ｇのテイコマイシンＡ２ファク
ター５を得た。テイコマイシンＡ２の純単一ファクター
の化学的一物埋的特徴 テイコマイシンＡ２ファクター１は白色無定型粉末で、
加熱すると、約２２０℃で暗化し始め、２２５℃で完全
に分解する。つぎの特徴を有する。
：１の割合に含有する分画（約５ ０ ０＃ｉＦ）、平
行して実施した第２の分離より同様に得られたファクタ
ー４および５の混合物含有別のプール（約４ ９ ＱＩ
ｌｌｇ）を合併し、テイコマイシンＡ２ファクター３の
精製について上記した操作条件を用いる半ＷＪＶ用１−
ＩＰＬｃで分け、３５０ｑのテイコマイシンＡ２ファク
ター４および３００ｒ＃ｇのテイコマイシンＡ２ファク
ター５を得た。テイコマイシンＡ２の純単一ファクター
の化学的一物埋的特徴 テイコマイシンＡ２ファクター１は白色無定型粉末で、
加熱すると、約２２０℃で暗化し始め、２２５℃で完全
に分解する。つぎの特徴を有する。
ａ）ｐＨ＞７．０およびｐｔ！＜２（７）水、ジメチル
ホルムアミド、ジメチルスルホキサイド、およびプロピ
レングリコールに自由に溶解する。
ホルムアミド、ジメチルスルホキサイド、およびプロピ
レングリコールに自由に溶解する。
メチルセロソルブおよびグリセロールに僅溶メタノール
およびエタノールに難溶、クロロホルム、ベンゼン、ｎ
−ヘキサン、アセトニトリル、エチルエーテル、アセト
ン、酢酸エチル、四ｊｎ化炭素にほとんど不溶 ｂ）第１図に紫外部吸収スペクトルを示す。つぎの吸収
極大を示す。
およびエタノールに難溶、クロロホルム、ベンゼン、ｎ
−ヘキサン、アセトニトリル、エチルエーテル、アセト
ン、酢酸エチル、四ｊｎ化炭素にほとんど不溶 ｂ）第１図に紫外部吸収スペクトルを示す。つぎの吸収
極大を示す。
１％
０．１Ｎｍ酸中：λ ２７８ｎｍ（Ｅ ＩＱｌｌ＝
ＷａＸ ４９．５＞ ｐＨ７．４リン酸塩緩衝液中二 １％ λ ２７８ｒｖ（Ｅ ＝５０．０）＋１ａＸ
１α０．１Ｎ水酸化ナトリ
ウム中：λ ２９７ｎｍＩａＸ １％ （Ｅ ＝７２．１） １ａＲ Ｃ）第２図にヌジョール中の赤外部吸収スペクトルを示
す。つぎに吸収極大である。３７００−３１００，２９
６０−２８４０ （ヌジョール）、１６４５、１５９０
、１５１０、１４６０（ヌジョール＞、１３７５（ヌジ
ョール）、１３０５、１２３０、１１８０、１１５５、
１０６０，１０２５、９７０、８９０、８４５、８１５
、７２０（ヌジョール）： ｄ》 不活性気体中約１４０℃にあらかじめ乾燥した（
％△Ｗ＝８．５＞試料の元素分析値の大体のバーセント
組成（平均値）をつぎに示す：炭素５６、７０％；水素
４．９０％；窒素６．６５％；塩素３．８０％；酸素（
差で＞２７．９５％。
ＷａＸ ４９．５＞ ｐＨ７．４リン酸塩緩衝液中二 １％ λ ２７８ｒｖ（Ｅ ＝５０．０）＋１ａＸ
１α０．１Ｎ水酸化ナトリ
ウム中：λ ２９７ｎｍＩａＸ １％ （Ｅ ＝７２．１） １ａＲ Ｃ）第２図にヌジョール中の赤外部吸収スペクトルを示
す。つぎに吸収極大である。３７００−３１００，２９
６０−２８４０ （ヌジョール）、１６４５、１５９０
、１５１０、１４６０（ヌジョール＞、１３７５（ヌジ
ョール）、１３０５、１２３０、１１８０、１１５５、
１０６０，１０２５、９７０、８９０、８４５、８１５
、７２０（ヌジョール）： ｄ》 不活性気体中約１４０℃にあらかじめ乾燥した（
％△Ｗ＝８．５＞試料の元素分析値の大体のバーセント
組成（平均値）をつぎに示す：炭素５６、７０％；水素
４．９０％；窒素６．６５％；塩素３．８０％；酸素（
差で＞２７．９５％。
ｅ）５μＺｏｒｂａｘＯＯＤＳカラムヲ用イル逆相１−
ＩＰＬＣで、４０分で溶液Ａ中Ｏ％から５０％までの溶
液Ｂの直線状グラジェントで溶出（溶液Ａ：２５１１８
のＮａＨ２ ＰＯ４／７セトニトリル（ ９／１ ）０
．，ＩＮのＮａＯＨでｐＨ６．０に緩衝、溶液Ｂ：２５
ｍＮのＮａＨ２Ｐｏ４／アセトニトリ／Ｌ／ （ ３／
７ ） 、０．１ＮＩ）ＮａＯＨでｐＨ６．０に緩衝）
、流速２ｄ／分（内部標準：３．５−ジヒドロキシート
ルエンｔｎ ｓ．８４分）。
ＩＰＬＣで、４０分で溶液Ａ中Ｏ％から５０％までの溶
液Ｂの直線状グラジェントで溶出（溶液Ａ：２５１１８
のＮａＨ２ ＰＯ４／７セトニトリル（ ９／１ ）０
．，ＩＮのＮａＯＨでｐＨ６．０に緩衝、溶液Ｂ：２５
ｍＮのＮａＨ２Ｐｏ４／アセトニトリ／Ｌ／ （ ３／
７ ） 、０．１ＮＩ）ＮａＯＨでｐＨ６．０に緩衝）
、流速２ｄ／分（内部標準：３．５−ジヒドロキシート
ルエンｔｎ ｓ．８４分）。
ｆ）数滴のＤ２０添加ＤＭＳＯ−ｄ６中濃度２５Ｎ／０
．５ｄで測定して、２ ７ ０ ＨＩＩＺの’ｌ−Ｉ
Ｎ Ｍ Ｒスペクトル（仝スペクトルは第３図に示す）
はつぎの群のシグナルを示す（ Ｔ Ｍ Ｓを内部標準
として：δ−０． ＯＯｐｐｍ ） ：０．８−１．５
（ｍ）： １．７−２．３ （ｍ）：２．７−４．０
（ｍ）：４，Ｏ−４．７ （ｍ）；４．８−５．８
（ｍ）；６．２−８．１ （ｍ＞。
．５ｄで測定して、２ ７ ０ ＨＩＩＺの’ｌ−Ｉ
Ｎ Ｍ Ｒスペクトル（仝スペクトルは第３図に示す）
はつぎの群のシグナルを示す（ Ｔ Ｍ Ｓを内部標準
として：δ−０． ＯＯｐｐｍ ） ：０．８−１．５
（ｍ）： １．７−２．３ （ｍ）：２．７−４．０
（ｍ）：４，Ｏ−４．７ （ｍ）；４．８−５．８
（ｍ）；６．２−８．１ （ｍ＞。
Ｑ） Ｍ官能基を有し、塩を形成する。
ｈ）塩を形成する塩基性官能基を有する。
：》 高速原子衝撃（ＦＡＢ）をイオン原に用いる質伍
スペクトル分析で測定して分子量は約１８７５ （ＦＡ
Ｂ質聞スベクトルの測定についてはたとえばＨ． Ｂａ
ｒｂｅｒ等、Ｎａｔｕｒｅ１２ ９ ３、Ｎ（１５ ８
３ ０、２７０−７５ （１９８１））。
スペクトル分析で測定して分子量は約１８７５ （ＦＡ
Ｂ質聞スベクトルの測定についてはたとえばＨ． Ｂａ
ｒｂｅｒ等、Ｎａｔｕｒｅ１２ ９ ３、Ｎ（１５ ８
３ ０、２７０−７５ （１９８１））。
テイコマイシンＡ２ファクター２は白色無定型粉末で２
１０℃に加熱すると暗化し、２５０℃で完全に分解ずる
。つぎの特性を有する。
１０℃に加熱すると暗化し、２５０℃で完全に分解ずる
。つぎの特性を有する。
ａ）ｐｔ−１＞７．０またはｐｌｌ＜２の水、ジメチル
ホルムアミド、ジメチルスルホキサイドおよびプロピレ
ングリコールに自由に溶解し；メチルセロソルブおよび
グリセロールに僅溶で；メタノールおよびエタノールに
難溶で；クロロホルム、ベンゼン、ｎ−ヘキサン、アセ
トニ１・リル、エチルエーテル、アセ１−ン、酢酸エチ
ル、四塩化炭素に不溶である。
ホルムアミド、ジメチルスルホキサイドおよびプロピレ
ングリコールに自由に溶解し；メチルセロソルブおよび
グリセロールに僅溶で；メタノールおよびエタノールに
難溶で；クロロホルム、ベンゼン、ｎ−ヘキサン、アセ
トニ１・リル、エチルエーテル、アセ１−ン、酢酸エチ
ル、四塩化炭素に不溶である。
ｂ）第４図に紫外部吸収スペクトルを示す。つぎの吸収
極大を与える。
極大を与える。
リン酸Ｍ衝液ｐｌｌ７．４中：
０．１Ｎの水酸化ナトリウム中：
Ｃ》 第５図にヌジョール中の赤外部吸収スペクトルを
示す。つぎの吸収極大を認める。３ ７００−３１００
、２９６０−２８６０ （ヌジョール）、１６４５、１
５９０、１５１０１１４６０（ヌジョール）、１３７５
（ヌジョール）、１３００１１ ２６０、１ ２３０、
１ １８０、１ １ ５０、１０６０，１０２５、９７
０，８９０，８４５、８１５、７２０（ヌジョール）。
示す。つぎの吸収極大を認める。３ ７００−３１００
、２９６０−２８６０ （ヌジョール）、１６４５、１
５９０、１５１０１１４６０（ヌジョール）、１３７５
（ヌジョール）、１３００１１ ２６０、１ ２３０、
１ １８０、１ １ ５０、１０６０，１０２５、９７
０，８９０，８４５、８１５、７２０（ヌジョール）。
ｄ）元素分析値、不活性気体中で試料を約１４０℃に加
熱したあと（％ΔＷ＝９．８）の大体のパーセント組成
（平均）をつぎに示す：炭素、５６．１５％；水素、５
．１５％；窒素、６．３０％：塩素、３．９０％；酸素
（差》、２８． ５０％。
熱したあと（％ΔＷ＝９．８）の大体のパーセント組成
（平均）をつぎに示す：炭素、５６．１５％；水素、５
．１５％；窒素、６．３０％：塩素、３．９０％；酸素
（差》、２８． ５０％。
ｅ） ５ ｕ ＺｏｒｂａｘＯＯ Ｄ Ｓ力ラムを
用いる逆相ＨＰＬＣで、４０分で溶液Ａ中、溶液ＢのＯ
％から５０％までの直線状グラジエント（溶液Ａ：２５
ｎ＋ＨのＮａＨ２ ＰＯ４ ／アセトニトリル（ ９／
１ ＞、ｏ．１ＮのＮａＯｌ−１でａｌｌ６．０に緩衝
。溶液Ｂ：２５＋ａＨのＮａｌ−１，ＰＯ４／アセ１一
二１〜リル（３／７）０．ＩＮのＮａＯＨでｐｌｌ６．
０にＭ衝》で、２−／分で溶出し、保持時間（ｔＲ）２
２．６分。（内部標準：３．５−ジヒドロキシトルエン
、ｔＲ８．８４分）。
用いる逆相ＨＰＬＣで、４０分で溶液Ａ中、溶液ＢのＯ
％から５０％までの直線状グラジエント（溶液Ａ：２５
ｎ＋ＨのＮａＨ２ ＰＯ４ ／アセトニトリル（ ９／
１ ＞、ｏ．１ＮのＮａＯｌ−１でａｌｌ６．０に緩衝
。溶液Ｂ：２５＋ａＨのＮａｌ−１，ＰＯ４／アセ１一
二１〜リル（３／７）０．ＩＮのＮａＯＨでｐｌｌ６．
０にＭ衝》で、２−／分で溶出し、保持時間（ｔＲ）２
２．６分。（内部標準：３．５−ジヒドロキシトルエン
、ｔＲ８．８４分）。
ｆ）Ｄ２０数滴添加ＤＭＳＯ−ｄ６中で記録した２７０
ＨＩＩＺの１ＨＮＭＲ（第６図に示す》はつぎのシグナ
ル群を示す（１度２５１ｒｔｇ／０． ５ａｉ！）（Ｔ
ＭＳの内部標準をδ＝０． ００１１１）ＩＢ ） ：
０．７−１．５ （ｍ）；１．８−２．２ （ｍ）；２
．７−４．５ （ｍ）：４．６−５．７ （ｍ）：６．
２−８．１ （ｍ）。
ＨＩＩＺの１ＨＮＭＲ（第６図に示す》はつぎのシグナ
ル群を示す（１度２５１ｒｔｇ／０． ５ａｉ！）（Ｔ
ＭＳの内部標準をδ＝０． ００１１１）ＩＢ ） ：
０．７−１．５ （ｍ）；１．８−２．２ （ｍ）；２
．７−４．５ （ｍ）：４．６−５．７ （ｍ）：６．
２−８．１ （ｍ）。
ｇ）塩を形成する酸官能基を有する。
ｈ） ｊ！を形成するＭＡ１４官能基を有する。
ｉ） ＦＡＢマススペクトルで測定して約１８７７の
分子紺。
分子紺。
テイコマイシンＡ２ファクター３は白色無定型の粉末で
、加熱すると２０５℃で分解を始め、２５０℃で完全に
分解する。つぎの特性を有する：ａ） Ｉ）Ｉ１＞７
． ０またはＩ）Ｉ１＜２．０の水、ジメチルホルムア
ミド、ジメチルスルホキサイドおよびプロピレングリコ
ールに自由に溶解し；メチルセロソルブおよびグリセロ
ールに僅溶で：メタノールおよびエタノールに難溶で；
クロロホルム、ベンゼン、ｎ−ヘキサン、アセトニトリ
ル、エチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、四塩化炭
素にほとんと不溶である。
、加熱すると２０５℃で分解を始め、２５０℃で完全に
分解する。つぎの特性を有する：ａ） Ｉ）Ｉ１＞７
． ０またはＩ）Ｉ１＜２．０の水、ジメチルホルムア
ミド、ジメチルスルホキサイドおよびプロピレングリコ
ールに自由に溶解し；メチルセロソルブおよびグリセロ
ールに僅溶で：メタノールおよびエタノールに難溶で；
クロロホルム、ベンゼン、ｎ−ヘキサン、アセトニトリ
ル、エチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、四塩化炭
素にほとんと不溶である。
ｂ）紫外部スペクトルを第７図に示すが、極大吸収はつ
ぎのようである。
ぎのようである。
４９． ２＞
ｐＨ７．４のリン酸緩衝液中；
０．ＩＮの水酸化ナトリウム中；
Ｃ）第８図にヌジョール中の赤外部スペクトルを示す。
つぎのような吸収極大を認める。３７００３１００，２
９６０−２８５０ （ヌジョール）：１６４５、１５９
０１１５１０、１４６０（ヌジョール）、１３７５（ヌ
ジョール）：１３００，１ ２３０，１ １ ８０、１
１５０１１１２０，１０６０、１０３０、９７０、８９
０、８４５、８２０，８００、７２０〈ヌジョール》。
９６０−２８５０ （ヌジョール）：１６４５、１５９
０１１５１０、１４６０（ヌジョール）、１３７５（ヌ
ジョール）：１３００，１ ２３０，１ １ ８０、１
１５０１１１２０，１０６０、１０３０、９７０、８９
０、８４５、８２０，８００、７２０〈ヌジョール》。
ｄ）元素分析値、不活性気体中であらかじめ約１４０℃
に加熱した試料（％ΔＷ＝１２．０）は、つぎの大体の
組成バーセント《平均》を示す：炭素、５６．２６％；
水素、５．２０％；窒素、６．６９％；塩素、３．９５
％；酸素（差）、２７． ９０％。
に加熱した試料（％ΔＷ＝１２．０）は、つぎの大体の
組成バーセント《平均》を示す：炭素、５６．２６％；
水素、５．２０％；窒素、６．６９％；塩素、３．９５
％；酸素（差）、２７． ９０％。
ｅ） ５μ ｌＯｒｂａｘＯＯＤＳ力ラムヲ用イ、ｌ
液Ａ中、溶液Ｂを、４０分のうちにＯ％から５０％とす
る直線状グラジエント（溶液Ａ：２５＋１１ＨのＮａＨ
２Ｐｏ４／アセトニトリル（９／１）、０．ＩＮのＮａ
Ｏｌ−１でｐｌ＋６．０に緩衝、溶液Ｂ：２５＋ｎＨの
ＮａＨ ＰＯ４／アセトニトリル（ ３／７ ）、０
．１ＮのＮａＯＨでｐＨ６．０に緩ＷＥ）どし、２ｄ／
分の流速での逆相ＨＰＬＧで分析して、保持時間（ｔＲ
）は２３．３分（内部標準：３．５−ジヒドロキシトル
エンｉＲ８．８４分）。
液Ａ中、溶液Ｂを、４０分のうちにＯ％から５０％とす
る直線状グラジエント（溶液Ａ：２５＋１１ＨのＮａＨ
２Ｐｏ４／アセトニトリル（９／１）、０．ＩＮのＮａ
Ｏｌ−１でｐｌ＋６．０に緩衝、溶液Ｂ：２５＋ｎＨの
ＮａＨ ＰＯ４／アセトニトリル（ ３／７ ）、０
．１ＮのＮａＯＨでｐＨ６．０に緩ＷＥ）どし、２ｄ／
分の流速での逆相ＨＰＬＧで分析して、保持時間（ｔＲ
）は２３．３分（内部標準：３．５−ジヒドロキシトル
エンｉＲ８．８４分）。
ｆ）数滴のＤ２０を加えたＤＭＳＯ−ｄ６中（濃度２５
ＪＩ？Ｊ／０．５１ｄ）で測定した２７０ＭＨｚ’Ｈ
Ｎ Ｍ Ｒスペクトルを第９図に示す。つぎのシグナル
を示す（内部標準ＴＭＳ，δ−０．００ｐｐｍ ） ：
０． ７−１． ５ （ｍ） ： １． ８−２． ０
（ｍ）；２．７−４．５ （ｍ）：４．６−５．７（ｍ
）；６．２−８．０ （ｍ）。
ＪＩ？Ｊ／０．５１ｄ）で測定した２７０ＭＨｚ’Ｈ
Ｎ Ｍ Ｒスペクトルを第９図に示す。つぎのシグナル
を示す（内部標準ＴＭＳ，δ−０．００ｐｐｍ ） ：
０． ７−１． ５ （ｍ） ： １． ８−２． ０
（ｍ）；２．７−４．５ （ｍ）：４．６−５．７（ｍ
）；６．２−８．０ （ｍ）。
ｇ）塩を形成しうる酸性基を有する。
ｈ）塩を形成しうる塩基性基を有Ｊ゛る。
） ＦＡＢ１ｔＭスペクトルで測定して、分子渚約１
８７７ｏ テイコマイシンＡ２ファクター４は白色無定型粉末で、
加熱すると約２１０℃で暗化し始め、２５０℃で完全に
分解し、つぎの特性を示１。
８７７ｏ テイコマイシンＡ２ファクター４は白色無定型粉末で、
加熱すると約２１０℃で暗化し始め、２５０℃で完全に
分解し、つぎの特性を示１。
ａ） ｐＨ＞７． ０またはｐｔ｛＜２．０の水、ジ
メチルホルムアミド、ジメチルスルホキサイドおよびプ
ロピレングリコール中に自由に溶解する：メチルセロソ
ルブおよびグリセロールに僅溶である；メタノールおよ
びエタノールに難溶である、クロロホルム、ベンゼン、
ｎ−ヘキサン、アセトニトリル、エチルエーテル、アヒ
トン、酢酸エチル、四塩化炭素にほとんど不溶である。
メチルホルムアミド、ジメチルスルホキサイドおよびプ
ロピレングリコール中に自由に溶解する：メチルセロソ
ルブおよびグリセロールに僅溶である；メタノールおよ
びエタノールに難溶である、クロロホルム、ベンゼン、
ｎ−ヘキサン、アセトニトリル、エチルエーテル、アヒ
トン、酢酸エチル、四塩化炭素にほとんど不溶である。
ｂ）第１０図に紫外部吸収スペクトルを示づ。吸収極大
はつぎのようである。
はつぎのようである。
１％
０．１Ｎ１！酸中：λ ２７８ｎｌｌｌ（Ｅ １，
，＝ｍａｘ ５２．５） ｐＨ７．４リンＭ緩衝液中： Ｃ）ヌジョール中の赤外部スペクトルを第１１図に示す
。吸収極大はつぎのようである： ３ ７００−３１０
０１２９６０−２８４０ （ヌジョール）、１６４５、
１５９０、１５１０、１４６０（ヌジョール＞、１３７
５（ヌジョール），１３００、１２８０、１１７５、１
１４０、１０６０，１０２５、９７０、８９０、８４０
，８１５，７２０（ヌジョール）。
，＝ｍａｘ ５２．５） ｐＨ７．４リンＭ緩衝液中： Ｃ）ヌジョール中の赤外部スペクトルを第１１図に示す
。吸収極大はつぎのようである： ３ ７００−３１０
０１２９６０−２８４０ （ヌジョール）、１６４５、
１５９０、１５１０、１４６０（ヌジョール＞、１３７
５（ヌジョール），１３００、１２８０、１１７５、１
１４０、１０６０，１０２５、９７０、８９０、８４０
，８１５，７２０（ヌジョール）。
ｄ》 元素分析値。不活性気体中で約１４０℃に予備乾
燥した試料（％ΔＷ＝９．８）の大体の組成バーセント
をつぎに示す（平均）：炭素５６．５０％；水素、５．
１０％；窒素、６．５０％；塩素、３．８０％：ｍ素《
差）２８．１０％。
燥した試料（％ΔＷ＝９．８）の大体の組成バーセント
をつぎに示す（平均）：炭素５６．５０％；水素、５．
１０％；窒素、６．５０％；塩素、３．８０％：ｍ素《
差）２８．１０％。
ｅ） ５ μＺｏｒｂａｘ■ＯＤＳ力ラムを用い、溶
液Ａ中溶液Ｂを、４０分のうちに０％から５０％とする
直線状グラジエント（溶液Ａ：２５ｍＨのＮａＨ ＰＯ
４／アセトニｌ−１，１／Ｌ， （ ９／１ ）、０
．ＩＮのＮａＯＨでｐｌｌ６．０に！！衝、溶液Ｂ：２
５１１１８のＮａＨ２ＰＯ４／アセトニトリル（ ３／
７ ＞、ｏ．ＩＮのＮ ａ Ｏ ｌ−１でｐｌｌ６．ｏ
に緩衝》とし、２７！／分の流速での逆相トＩＰＬＣで
分析して、保持時間（ｔＲ）は２５．８分（内部標準：
３．５−ジヒドロキシトルエンｔＲａ．８４分）。
液Ａ中溶液Ｂを、４０分のうちに０％から５０％とする
直線状グラジエント（溶液Ａ：２５ｍＨのＮａＨ ＰＯ
４／アセトニｌ−１，１／Ｌ， （ ９／１ ）、０
．ＩＮのＮａＯＨでｐｌｌ６．０に！！衝、溶液Ｂ：２
５１１１８のＮａＨ２ＰＯ４／アセトニトリル（ ３／
７ ＞、ｏ．ＩＮのＮ ａ Ｏ ｌ−１でｐｌｌ６．ｏ
に緩衝》とし、２７！／分の流速での逆相トＩＰＬＣで
分析して、保持時間（ｔＲ）は２５．８分（内部標準：
３．５−ジヒドロキシトルエンｔＲａ．８４分）。
［）塩を形成しつる酸性官能基を有ずる。
ｏ） ＰＡを形成しつる塩基性官能基を有する。
ｈ） ＦＡＢ質伍スペクトルで測定して分子缶約１８
９１。
９１。
テイコマイシンＡ２ファクター５は白色無定型粉末で２
１０℃に加熱すると暗化しはじめ、２５０℃で完全に分
解し、つぎの特性を有する。
１０℃に加熱すると暗化しはじめ、２５０℃で完全に分
解し、つぎの特性を有する。
ａ） ｐｉｔ＞７， Ｏまたはｐｉｔ＜２．０の水、
ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキサイド、およ
びプロピレングリコールに自由に溶解し：メチルセロソ
ルブおよびグリセロールに僅溶で；メタノールおよびエ
タノールに難溶で、クロロホルム、ベンゼン、ｎ−ヘキ
サン、アセトニトリル、エチルエーテル、アセトン、酢
酸エチル、四塩化炭素にほとんど不溶である。
ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキサイド、およ
びプロピレングリコールに自由に溶解し：メチルセロソ
ルブおよびグリセロールに僅溶で；メタノールおよびエ
タノールに難溶で、クロロホルム、ベンゼン、ｎ−ヘキ
サン、アセトニトリル、エチルエーテル、アセトン、酢
酸エチル、四塩化炭素にほとんど不溶である。
ｂ）紫外部吸収スペクトルを第１２図に示すが、吸収極
大はつぎのようである。
大はつぎのようである。
一４９、 ６》
ＤＨ７．４のリン酸緩衝液中；
０．１Ｎの水酸化ナトリウム中；
Ｃ）第１３図にヌジョール中の赤外部吸収スペクトルを
示す。つぎの吸収極大を認める：３７００３１００，２
９６０−２８４０ （ヌジョール》、１６４５、１５９
０、１５１０，１４６０ （ヌジョール）、１３７５（
ヌジョール）、１３００、１２３０、１１７５、１１４
５、１０６０，１０２５、９７０，８９０、８４０、８
１５、７２０（ヌジョール）。
示す。つぎの吸収極大を認める：３７００３１００，２
９６０−２８４０ （ヌジョール》、１６４５、１５９
０、１５１０，１４６０ （ヌジョール）、１３７５（
ヌジョール）、１３００、１２３０、１１７５、１１４
５、１０６０，１０２５、９７０，８９０、８４０、８
１５、７２０（ヌジョール）。
ｄ）元素分析値、不活性気体中であらかじめ約１４０℃
に加熱した試料（％ΔＷ＝１０．１）は、つぎの大体の
組成バーセント（平均）を示す：炭素、５６．６０％；
水素、５．０５％：窒素、６．６３％；塩素、３．８５
％；酸素（差）、２７．８７％。
に加熱した試料（％ΔＷ＝１０．１）は、つぎの大体の
組成バーセント（平均）を示す：炭素、５６．６０％；
水素、５．０５％：窒素、６．６３％；塩素、３．８５
％；酸素（差）、２７．８７％。
ｅ） ５ ｕ ＺｏｒｂａｘＯＯ Ｄ Ｓカラムを
用い、溶液Ａ中溶液Ｂを４０分のうちに、０％から５０
％とする直線状グラジエント（溶液Ａ：２５＋１１１４
のＮａｌ−Ｉ ＰＯ４／アセトニトリル（９／１）、
０．１ＮのＮ ａ Ｏ Ｈｒｌｌｌ＋６ ． ０にＭ衝
、溶液Ｂ：２５ｍＨのＮａｌ−Ｉ ＰＯ４／アセトニ
トリル（ ３／７ ）、０．ＩＮのＮ ａ Ｏ ｌ｛で
ｐｔ｛６，０に緩衝）とし、２威／分の流速での逆相Ｈ
ＰＬＣで分析して、保持時間（ｔＲ）２６．４分（内部
標準：３，５−ジヒドロキシトルエンｔ，ｓ．８４分）
。
用い、溶液Ａ中溶液Ｂを４０分のうちに、０％から５０
％とする直線状グラジエント（溶液Ａ：２５＋１１１４
のＮａｌ−Ｉ ＰＯ４／アセトニトリル（９／１）、
０．１ＮのＮ ａ Ｏ Ｈｒｌｌｌ＋６ ． ０にＭ衝
、溶液Ｂ：２５ｍＨのＮａｌ−Ｉ ＰＯ４／アセトニ
トリル（ ３／７ ）、０．ＩＮのＮ ａ Ｏ ｌ｛で
ｐｔ｛６，０に緩衝）とし、２威／分の流速での逆相Ｈ
ＰＬＣで分析して、保持時間（ｔＲ）２６．４分（内部
標準：３，５−ジヒドロキシトルエンｔ，ｓ．８４分）
。
『）塩を形成しうる酸性基を有する。
ｇ）塩を形成しつる塩基性基を有する。
ｈ） ＦＡＢ質吊スペクトルで測定して分子耐約１８
９１。
９１。
テイコマイシンＡ２ファクター１、２、３、４および５
のそれぞれは塩を形成しうる酸性基を有する。テイコマ
イシンＡ２ファクター１、２、３、４および５のアルカ
リ金属、アルカリ土金属および桑剤として許容されうる
アンモニウム塩は、本発明のさらに別の目的である。
のそれぞれは塩を形成しうる酸性基を有する。テイコマ
イシンＡ２ファクター１、２、３、４および５のアルカ
リ金属、アルカリ土金属および桑剤として許容されうる
アンモニウム塩は、本発明のさらに別の目的である。
代表的なアルカリ金属およびアルカリ土金ｆａｊ：Ａに
は、ナトリウム、カリウム、リチウム、カノレシウムお
よびマグネシウム塩がある。アンモニウム塩にはアンモ
ニウムおよび１級、２級または３級（Ｃ −０４）ア
ルキルアンモニウムおよびヒド口キシ−《Ｃ −０４》
アルキルアンモニウム塩がある。アルカリおよびアルカ
リ土金属塩は、金属塩を製造するためのふつうの方法で
製造しうる。
は、ナトリウム、カリウム、リチウム、カノレシウムお
よびマグネシウム塩がある。アンモニウム塩にはアンモ
ニウムおよび１級、２級または３級（Ｃ −０４）ア
ルキルアンモニウムおよびヒド口キシ−《Ｃ −０４》
アルキルアンモニウム塩がある。アルカリおよびアルカ
リ土金属塩は、金属塩を製造するためのふつうの方法で
製造しうる。
たとえば遊１１１酸形のティコマイシンＡ２ファクタ−
１、２、３、４または５を、プロピレングリコールのよ
うな適当な溶媒に溶解し、適当な選択した無機塩基の化
学ｍ論的吊を、得られた溶液に加える。
１、２、３、４または５を、プロピレングリコールのよ
うな適当な溶媒に溶解し、適当な選択した無機塩基の化
学ｍ論的吊を、得られた溶液に加える。
生成するアルカリまたはアルカリ土金屈塩は、非溶媒で
沈殿させ、濾過して採取する。
沈殿させ、濾過して採取する。
別様には、これらの塩を凍結乾燥で実質的に無水の形に
調製しうる。その場合、適当に選択したアルカリまたは
アルカリ上金属の炭酸塩または水酸化物をｐ］｛７から
８にするように加えて遊離酎形を塩にして得られた、望
む塩を含有する水溶液より不溶物を濾去し、凍結乾燥す
る。
調製しうる。その場合、適当に選択したアルカリまたは
アルカリ上金属の炭酸塩または水酸化物をｐ］｛７から
８にするように加えて遊離酎形を塩にして得られた、望
む塩を含有する水溶液より不溶物を濾去し、凍結乾燥す
る。
有機アンモニウム塩はテイコマイシンＡ２ファクター１
、２、３、４および５の遊離酸型を適当な溶媒たとえば
プロピレングリコールに含右ずる溶液に適当に選択した
アミンを加え溶媒および過剰のアミンを蒸発さずか、ま
たは、できるだけ少量の水中で上記の試剤を接触させ非
溶媒を加えて得られた塩を沈殿さすことによりＩ製しつ
る。
、２、３、４および５の遊離酸型を適当な溶媒たとえば
プロピレングリコールに含右ずる溶液に適当に選択した
アミンを加え溶媒および過剰のアミンを蒸発さずか、ま
たは、できるだけ少量の水中で上記の試剤を接触させ非
溶媒を加えて得られた塩を沈殿さすことによりＩ製しつ
る。
前記したように、テイコマイシンＡ２ファクター１、２
、３、４、および５のそれぞれは、塩となしつる塩基性
官能基を有する。純粋な単一ファクターと、むしろ強い
酸、なるべくは鉱酸とを接触さす、この方面の技術で知
られる方法で製造した、薬剤として許容されつる酸付加
塩は、本発明の別の目的となる。ティコマイシンＡ２フ
７クタ−２ナトリウム塩の製造 テイコマイシンＡ２ファクター２（１５０＃、１ ５ｄ
）の水溶液を、０．１ＮのＮ ａ ０ １−１を滴下し
て、ｆ）Ｈ８．０とする。得られた溶液を濾過し、凍結
乾燥システムの室に移し、凍結させる。完全に凍結した
ら、室を０．１トールの輿空とし、プレートをＯ℃に加
熱して氷を昇華させる。操作は生成物がほとんど乾燥す
るまで続ける。約１％含水冷まで。このように得られた
テイコマイシンＡ２ファクター２ナトリウム塩を２５ｍ
のメチルセロソルブ／Ｈ２ ０ ３／１に溶解し、０．
１ＮＨＣ，！で滴定すると、ｐκ：７．０３および４．
７８を特徴とする２つの滴定可能の官能基の存在を示す
。
、３、４、および５のそれぞれは、塩となしつる塩基性
官能基を有する。純粋な単一ファクターと、むしろ強い
酸、なるべくは鉱酸とを接触さす、この方面の技術で知
られる方法で製造した、薬剤として許容されつる酸付加
塩は、本発明の別の目的となる。ティコマイシンＡ２フ
７クタ−２ナトリウム塩の製造 テイコマイシンＡ２ファクター２（１５０＃、１ ５ｄ
）の水溶液を、０．１ＮのＮ ａ ０ １−１を滴下し
て、ｆ）Ｈ８．０とする。得られた溶液を濾過し、凍結
乾燥システムの室に移し、凍結させる。完全に凍結した
ら、室を０．１トールの輿空とし、プレートをＯ℃に加
熱して氷を昇華させる。操作は生成物がほとんど乾燥す
るまで続ける。約１％含水冷まで。このように得られた
テイコマイシンＡ２ファクター２ナトリウム塩を２５ｍ
のメチルセロソルブ／Ｈ２ ０ ３／１に溶解し、０．
１ＮＨＣ，！で滴定すると、ｐκ：７．０３および４．
７８を特徴とする２つの滴定可能の官能基の存在を示す
。
上記の方払を行なうが、テイコマイシンＡ２ファクター
１、３、４および５より出発して、相当するナトリウム
塩をうる。得られた塩中のナトリウムを定酊すると、モ
ノナトリウム塩である。
１、３、４および５より出発して、相当するナトリウム
塩をうる。得られた塩中のナトリウムを定酊すると、モ
ノナトリウム塩である。
ダラム陽性細菌に主に活性を示すテイコマイシンＡ２フ
ァクター１、２、３、４および５のインビ１・ロー抗菌
活性を、ミクロタイターシステム中で２倍希釈法を用い
て、ぶどう球菌および連鎖球菌の臨床分離株に対して調
べた。ｐｅｎａｓｓａｙブロス（Ｄｉｒｃｏ ）を前者
に、Ｔｏｄｄ−１１ｅｗｉｔｔブロス（Ｄｉｌ’ＣＯ
）を後者に用いた。ブａス１夜培養物を、最終接種体が
約１０３コロニー形成単位／ｄになるように希釈した。
ァクター１、２、３、４および５のインビ１・ロー抗菌
活性を、ミクロタイターシステム中で２倍希釈法を用い
て、ぶどう球菌および連鎖球菌の臨床分離株に対して調
べた。ｐｅｎａｓｓａｙブロス（Ｄｉｒｃｏ ）を前者
に、Ｔｏｄｄ−１１ｅｗｉｔｔブロス（Ｄｉｌ’ＣＯ
）を後者に用いた。ブａス１夜培養物を、最終接種体が
約１０３コロニー形成単位／ｄになるように希釈した。
３７℃で１８−２４時間インキユベーションしたあと、
肉眼に見える発育を示さない最低澗度を最小阻止？１！
瓜（ＩＶＮｃ）とした。
肉眼に見える発育を示さない最低澗度を最小阻止？１！
瓜（ＩＶＮｃ）とした。
ファクター１，２．３．４および５の微生物活性の相対
的な比較を、Ｓ． ａｕｒｅｕｓ ＡＴＣＣ６５３８を
試験菌、テイコマイシンＡ２複合物を標準にして寒天拡
散法で実施した。デイコマイシンＡ２ファクター１、テ
イコマイシンＡ２ファクター２、テイコマイシンＡ２フ
ァクター３、テイコマイシンＡ２ファクター４、ティコ
マイシンＡ２ファクター５およびＩ！！準に用いるテイ
コマイシン複合物の適当聞を２０００μ９／ＩＩＩｉ！
にジメチルホルムアミドに溶解する。溶液は、１％生血
清を加えた、ｐｌｌ７．４、０．０６７ＭのリンＭ緩衝
液でさらに希釈し、２．５，５．１０および２０μ９／
ｒｓｆｌの１１！度とした。
的な比較を、Ｓ． ａｕｒｅｕｓ ＡＴＣＣ６５３８を
試験菌、テイコマイシンＡ２複合物を標準にして寒天拡
散法で実施した。デイコマイシンＡ２ファクター１、テ
イコマイシンＡ２ファクター２、テイコマイシンＡ２フ
ァクター３、テイコマイシンＡ２ファクター４、ティコ
マイシンＡ２ファクター５およびＩ！！準に用いるテイ
コマイシン複合物の適当聞を２０００μ９／ＩＩＩｉ！
にジメチルホルムアミドに溶解する。溶液は、１％生血
清を加えた、ｐｌｌ７．４、０．０６７ＭのリンＭ緩衝
液でさらに希釈し、２．５，５．１０および２０μ９／
ｒｓｆｌの１１！度とした。
濾紙ディスクを試料溶液で浸し、試験菌の懸濁液を接種
してある寒天プレートの表面上に規則的に間隔をあけて
おいた。プレートは３７℃で１８時間インキユベートし
、阻止帯の直径を測定した。
してある寒天プレートの表面上に規則的に間隔をあけて
おいた。プレートは３７℃で１８時間インキユベートし
、阻止帯の直径を測定した。
得られたデーターをコンピューターに入れ、複合物を基
準として、個々のフ？クターの力価を計算した。結果を
下に示す。
準として、個々のフ？クターの力価を計算した。結果を
下に示す。
テイコマイシンＡ２ファクター１
８４１ＬＪ／ＩＰｌ
テイコマイシンＡ２フ？クター２
１０８６Ｕ ／η
テイコマイシンＡ２ファクター３
１１３１Ｕ／ＩＩｆＪ
テイコマイシンＡ２ファクター４
１０６６Ｕ／ｌＲｇ
テイコマイシンＡ２ファクター５
９５４Ｕ／Ｉ！ｇ
テイコマイシンＡ２複合物
１０００Ｌｌ／ｉｆ！ｊ
テイコマイシンＡ２フ？クター２．３．４および５をざ
らにＳ． ｎｅｕｍｏｎｉａｅおよびＳ． ｐｙｏｇ
ｃｎｅｓでマウスにおこした感染症について調べてみた
。
らにＳ． ｎｅｕｍｏｎｉａｅおよびＳ． ｐｙｏｇ
ｃｎｅｓでマウスにおこした感染症について調べてみた
。
テイコマイシンＡ２複合物と比較して実験した。
結果を次表３に示す。
表３
インビボー 抗菌活性
表 ４
マウス急性毒性（腹腔）
テイ］マイシンＡ２フ？クター１．２．３．４および５
についてのマウス腹腔急性毒性を次表４に示す。
についてのマウス腹腔急性毒性を次表４に示す。
上記から、テイコマイシンＡ２ファクター１、テイコマ
イシンＡ２ファクター２、テイコマイシンＡ ファクタ
ー３、テイコマイシンＡ２ファクタ−４およびテイコマ
イシンＡ２ファクター５は、活性成分に感受性の病原性
細菌でおこる感染症の予防および治療に、ヒトおよび獣
医用の薬に用いる抗菌性調製物の活性成分として効果的
に用いうることが分った。そのような治療で、これらの
化合物はそのままかまたは単一の個々のファクターとし
て、または、それらの活性パターンの類似性から、５つ
のファクターの２つまたはそれ以上の任意の割合の混合
物の形状で用いうる。本発明の化合物は、経口、局所ま
たは注射投与しうる。しかし注射投与がもっとも有利で
ある。投与のルー｛・に応じて、経口、局所または注射
投与しうる。
イシンＡ２ファクター２、テイコマイシンＡ ファクタ
ー３、テイコマイシンＡ２ファクタ−４およびテイコマ
イシンＡ２ファクター５は、活性成分に感受性の病原性
細菌でおこる感染症の予防および治療に、ヒトおよび獣
医用の薬に用いる抗菌性調製物の活性成分として効果的
に用いうることが分った。そのような治療で、これらの
化合物はそのままかまたは単一の個々のファクターとし
て、または、それらの活性パターンの類似性から、５つ
のファクターの２つまたはそれ以上の任意の割合の混合
物の形状で用いうる。本発明の化合物は、経口、局所ま
たは注射投与しうる。しかし注射投与がもっとも有利で
ある。投与のルー｛・に応じて、経口、局所または注射
投与しうる。
しかし注射投与がもっとも有利である。投与ルートに応
じて、これらの化合物は種々の投与形態に処方しうる。
じて、これらの化合物は種々の投与形態に処方しうる。
経口投与用のＢｉ製物はカプセル、錠剤、液状溶液また
は懸濁液となしつる。この方面の技術で知られているよ
うに、カプセルおよび錠剤は、活性成分に加えて、従来
から用いられている助剤、乳糖、リン酸カルシウム、ソ
ルビトールおよび類似の希釈剤、ステアリン酸マグネシ
ウム、タルク、ポリエチレングリコールのような滑剤、
ポリビニルビロリドン、ゲラチン、ソルビトール、トラ
ガカント、アカシア、風味剤のような結合剤および許容
されうる崩壊剤、湿展剤を含有しうる。
は懸濁液となしつる。この方面の技術で知られているよ
うに、カプセルおよび錠剤は、活性成分に加えて、従来
から用いられている助剤、乳糖、リン酸カルシウム、ソ
ルビトールおよび類似の希釈剤、ステアリン酸マグネシ
ウム、タルク、ポリエチレングリコールのような滑剤、
ポリビニルビロリドン、ゲラチン、ソルビトール、トラ
ガカント、アカシア、風味剤のような結合剤および許容
されうる崩壊剤、湿展剤を含有しうる。
一般的に水性または油性の溶液または懸濁液の形の液体
調製物は、懸濁剤のような従来から用いられている添加
物を含有しつる。局所的使用には、本発明の化合物は、
皮膚を鼻およびのどの粘膜または気管の組織を通しての
吸収に適当な形にも調製でき、便宜とあれば、液状スプ
レーまたは吸入剤、ロゼンジまたはのどに塗布する形状
ともなしつる。眼や耳に施すには、調製物は液体または
半固体となしつる。軟膏、クリーム、ローション、ペイ
ントまたは粉末のように疎水性または親水性のベースに
処方して、局所施用しうる。注射用の組成物は、油状ま
たは水性のビヒクル中に懸濁液、溶液またはエマルジョ
ンとすることができ懸濁剤、安定化剤および（または）
分散剤のような処方用薬剤を含有しうる。別様には、活
性成分を粉末にしておいて、使用時に、無菌水のような
適当ｔ１ビヒクルで再構成しうる。投与すべき活性成分
の串は、治療しようとする対象の大きさおよび状態、投
与のルートおよび瀕度および感染原といった種々の要因
で変化する。
調製物は、懸濁剤のような従来から用いられている添加
物を含有しつる。局所的使用には、本発明の化合物は、
皮膚を鼻およびのどの粘膜または気管の組織を通しての
吸収に適当な形にも調製でき、便宜とあれば、液状スプ
レーまたは吸入剤、ロゼンジまたはのどに塗布する形状
ともなしつる。眼や耳に施すには、調製物は液体または
半固体となしつる。軟膏、クリーム、ローション、ペイ
ントまたは粉末のように疎水性または親水性のベースに
処方して、局所施用しうる。注射用の組成物は、油状ま
たは水性のビヒクル中に懸濁液、溶液またはエマルジョ
ンとすることができ懸濁剤、安定化剤および（または）
分散剤のような処方用薬剤を含有しうる。別様には、活
性成分を粉末にしておいて、使用時に、無菌水のような
適当ｔ１ビヒクルで再構成しうる。投与すべき活性成分
の串は、治療しようとする対象の大きさおよび状態、投
与のルートおよび瀕度および感染原といった種々の要因
で変化する。
テイコマイシンＡ２ファクター１．２．３．４および５
は、体ｍ Ｋ９について約０．１から約２０■の１日量
が一般的に有効で、ふつう、１日に２回に分けて投与す
る。特に望ましい組成物は、約５０から約２５０！１ｇ
／単位を含有する単位投与形態である。
は、体ｍ Ｋ９について約０．１から約２０■の１日量
が一般的に有効で、ふつう、１日に２回に分けて投与す
る。特に望ましい組成物は、約５０から約２５０！１ｇ
／単位を含有する単位投与形態である。
薬剤組成物を調製する代表的例をつぎに示す。
注射用の無菌水２ｄ中にティコマイシンＡ２ファクター
２のナトリウム塩の１００１ｒｌｇを溶解して注射用溶
液とする。
２のナトリウム塩の１００１ｒｌｇを溶解して注射用溶
液とする。
２５０ＩＩｔｇのテイコマイシンＡ２ファクター３のナ
トリウム塩を３−の注射用無菌水に溶解して注射用溶液
とする。
トリウム塩を３−の注射用無菌水に溶解して注射用溶液
とする。
２００ＩｌｒｇのティコマイシンＡ２ファクター２６０
０■のポリエチレングリコール４０００ｕ． ｓ． ｐ
． １．２ｇのポリエチレングリコール４００ｕ．ｓ．ｐ． を用いて局所用軟膏とする。
０■のポリエチレングリコール４０００ｕ． ｓ． ｐ
． １．２ｇのポリエチレングリコール４００ｕ．ｓ．ｐ． を用いて局所用軟膏とする。
医薬としての用途の他に、本発明の化合物は動物生長促
進剤に用いられる。
進剤に用いられる。
その目的では、本発明の化合物のひとつまたはひとつよ
り多くを適当な飼料に加えて経口投与する。用いる正確
な濃度は、正常看の餌が消費された時に、生長促進に有
効なｍの活性剤が摂取されるようにする。
り多くを適当な飼料に加えて経口投与する。用いる正確
な濃度は、正常看の餌が消費された時に、生長促進に有
効なｍの活性剤が摂取されるようにする。
本発明の活性化合物を動物飼料に加えるには、有効間の
活性化合物を含有する適当な飼料プレミックスを調製し
、そのプレミックを完成された飼料に添加するのが有利
である。
活性化合物を含有する適当な飼料プレミックスを調製し
、そのプレミックを完成された飼料に添加するのが有利
である。
別様には、活性成分を中程度の漠さに含右づるような飼
料添加物を、飼料にｄＲ人しうる。
料添加物を、飼料にｄＲ人しうる。
そのような飼料プレミックスおよび完成飼利を調製し投
与する方法は、参照刊行物（たとえば、″′＾ｐｐｌｉ
ｅｄ Ａｎｉｍａｌ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ” 、Ｗ．ｌ
ｌ． Ｆｒｅｅｄｍａｎａｎｄ Ｃｏ．， Ｓ． Ｆｒ
ａｎｃｉｓｃｏ， ＵＳＡ， １ ９ ６ ９または
“Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ Ｆｅｅｄｓ ａｎｄ Ｆｅｅｄ
ｉｎｇ ” ， Ｑ ａｎｄ ＢＢｏｏｋｓ， Ｃ
ｏｒｖａｌｌｉｓ， Ｏｒｅｇｏｎ， ＵＳＡ
，１ ９ ７ ７ ） に記載されている
ので、これらを本明ｍ＊の参照文献として引用する。
与する方法は、参照刊行物（たとえば、″′＾ｐｐｌｉ
ｅｄ Ａｎｉｍａｌ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ” 、Ｗ．ｌ
ｌ． Ｆｒｅｅｄｍａｎａｎｄ Ｃｏ．， Ｓ． Ｆｒ
ａｎｃｉｓｃｏ， ＵＳＡ， １ ９ ６ ９または
“Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ Ｆｅｅｄｓ ａｎｄ Ｆｅｅｄ
ｉｎｇ ” ， Ｑ ａｎｄ ＢＢｏｏｋｓ， Ｃ
ｏｒｖａｌｌｉｓ， Ｏｒｅｇｏｎ， ＵＳＡ
，１ ９ ７ ７ ） に記載されている
ので、これらを本明ｍ＊の参照文献として引用する。
第１図はティコマイシンＡ２ファクター１の紫外線吸収
スペクトルを示す。 第２図はテイコマイシンＡ２ファクター１の赤外線スペ
クトルを示す。 第３図はテイ口マイシンＡ２ファクター１の’ＨＮＭＲ
スペクトルを示す。 第４図はテイコマイシンＡ２ファクター２の紫外線吸収
スペクトルをボす。 第５図はテイコマイシンＡ２ファクター２の赤外線スペ
ク１−ルをボす。 第６図はテイコマイシンＡ２ファクター２の１ＨＮＭＲ
スペクトルを示す。 第７図はテイコマイシンＡ２ファクター３の紫外線吸収
スペクトルを示す。 第８図はテイコマイシンＡ２ファクター３の赤外線吸収
スペクトルを示す。 第９図はテイコマイシンＡ２ファクター３の１１−Ｉ
Ｎ Ｍ Ｒスペクトルを示す。 第１０図はテイコマイシンＡ２ファクター４の紫外線吸
収スペクトルを示す。 第１１図はテイコマイシンＡ２ファクター４の赤外線吸
収スペクトルを示す。 第１２図はテイコマイシンＡ２ファクター５の紫外線吸
収スペクトルを示す。 第１３図はテイコマイシンＡ２ファクター５の赤外線吸
収スペクトルを示す。
スペクトルを示す。 第２図はテイコマイシンＡ２ファクター１の赤外線スペ
クトルを示す。 第３図はテイ口マイシンＡ２ファクター１の’ＨＮＭＲ
スペクトルを示す。 第４図はテイコマイシンＡ２ファクター２の紫外線吸収
スペクトルをボす。 第５図はテイコマイシンＡ２ファクター２の赤外線スペ
ク１−ルをボす。 第６図はテイコマイシンＡ２ファクター２の１ＨＮＭＲ
スペクトルを示す。 第７図はテイコマイシンＡ２ファクター３の紫外線吸収
スペクトルを示す。 第８図はテイコマイシンＡ２ファクター３の赤外線吸収
スペクトルを示す。 第９図はテイコマイシンＡ２ファクター３の１１−Ｉ
Ｎ Ｍ Ｒスペクトルを示す。 第１０図はテイコマイシンＡ２ファクター４の紫外線吸
収スペクトルを示す。 第１１図はテイコマイシンＡ２ファクター４の赤外線吸
収スペクトルを示す。 第１２図はテイコマイシンＡ２ファクター５の紫外線吸
収スペクトルを示す。 第１３図はテイコマイシンＡ２ファクター５の赤外線吸
収スペクトルを示す。
Claims (9)
- （１）化学的物理的性質として、無定型の白色粉末であ
り、加熱すると２１０℃で暗化し始め２５０℃で完全に
分解し、 ａ）ｐＨ＞７．０またはｐＨ＜２の水、ジメチルホルム
アミド、ジメチルスルホキサイドおよびプロピレングリ
コールに自由に溶解し；メチルセロソルブおよびグリセ
ロールに僅溶で；メタノールおよびエタノールに難溶で
、クロロホルム、ベンゼン、ｎ−ヘキサン、アセトニト
リル、エチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、四塩化
炭素にほとんど不溶であり、 ｂ）０．１Ｎ塩酸中λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２７８ｎｍ（Ｅ＾１
＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝４８）ｐＨ７．４リン酸塩緩衝液中
λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２７８ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝
４９．０）０．１Ｎ水酸化ナトリウム中λ＿ｍ＿ａ＿ｘ
２９７ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝７０．０）の吸
収極大を有する紫外線吸収スペクトルを有し、 ｃ）ヌジョール中３７００−３１００、２９６０−２８
６０（ヌジヨール）、１６４５、１５９０、１５１０、
１４６０（ヌジヨール）、１３７５（ヌジヨール）、１
３００、１２６０、１２３０、１１８０、１１５０、１
０６０、１０２５、９７０、８９０、８４５、８１５、
７２０（ヌジヨール）に吸収極大を有する赤外線吸収ス
ペクトルを有し、 ｄ）不活性気体中約１４０℃であらかじめ試料を乾燥し
て（％ΔＷ＝９．８）、おおよそのパーセント組成（平
均）として、炭素５６．１５％；水素５．１５％；窒素
６．３０％；塩素３．９０％；酸素（差）２８．５０％
を与える元素分析値を有し、 ｅ）５μ Ｚｏｒｂａｘ＾［＾Ｒ＾］ＯＤＳカラムを用
い、溶液Ａ中溶液Ｂを４０分のうちに０％から５０％ま
での直線状グラジエント（溶液Ａ：０．１ＮのＮａＯＨ
でｐＨ６．０に緩衝した２５ｍＭのＮａＨ＿２ＰＯ＿４
／アセトニトリル（９／１）、溶液Ｂ：０．１ＮのＮａ
ＯＨでｐＨ６．０に緩衝した２５ｍＭのＮａＨ＿２ＰＯ
＿４／アセトニトリル（３／７））とし、２ｍｌ／分の
流速で溶出する逆相ＨＰＬＣで分析して保持時間（ｔ＿
Ｒ）が２２．６分（内部標準：３，５−ジヒドロキシト
ルエンｔ＿Ｒ８．８４分）であり、 ｆ）数滴のＤ＿２Ｏを加えたＤＭＳＯ−ｄ＿６中で（濃
度２５ｍｇ／０．５ｍｌ）で測定した２７０ＨＨｚ ＾
１ＨＮＭＲで、０．７−１．５（ｍ）：１．８−２．２
（ｍ）；２．７−４．５（ｍ）：４．６−５．７（ｍ）
：６．２−８．１（ｍ）（内部標準としてのＴＭＳ：δ
＝０．００ｐｐｍ）のシグナルを与え、 ｇ）塩を形成しうる酸性官能基と、 ｈ）塩を形成しうる塩基性官能基と、 ｉ）ＦＡＢ質量スペクトルで測定して約１８７７の分子
量を有するテイコマイシンＡ＿２ファクター２及び薬剤
として許容されうるその塩。 - （２）薬剤として許容されうる塩がアルカリ金属塩、ア
ルカリ土金属塩またはアンモニウム塩である特許請求の
範囲（１）項記載のテイコマイシンＡ＿２ファクター２
及びその薬剤として許容されうる塩。 - （３）逆相分配またはイオン交換クロマトグラフィーに
よりテイコマイシンＡ＿２複合物より、化学的物理的性
質として、無定型の白色粉末であり、加熱すると２１０
℃で暗化し始め２５０℃で完全に分解し、 ａ）ｐＨ＞７．０またはｐＨ＜２の水、ジメチルホルム
アミド、ジメチルスルホキサイドおよびプロピレングリ
コールに自由に溶解し；メチルセロソルブおよびグリセ
ロールに僅溶で；メタノールおよびエタノールに難溶で
、クロロホルム、ベンゼン、ｎ−ヘキサン、アセトニト
リル、エチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、四塩化
炭素にほとんど不溶であり、 ｂ）０．１Ｎ塩酸中λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２７８ｎｍ（Ｅ＾１
＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝４８）ｐＨ７．４リン酸塩緩衝液中
λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２７８ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝
４９．０）０．１Ｎ水酸化ナトリウム中λ＿ｍ＿ａ＿ｘ
２９７ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝７０．０）の吸
収極大を有する紫外線吸収スペクトルを有し、 ｃ）ヌジヨール中３７００−３１００、２９６０−２８
６０（ヌジヨール）、１６４５、１５９０、１５１０、
１４６０（ヌジヨール）、１３７５（ヌジヨール）、１
３００、１２６０、１２３０、１１８０、１１５０、１
０６０、１０２５、９７０、８９０、８４５、８１５、
７２０（ヌジヨール）に吸収極大を有する赤外線吸収ス
ペクトルを有し、 ｄ）不活性気体中約１４０℃であらかじめ試料を乾燥し
て（％ΔＷ＝９．８）、おおよそのパーセント組成（平
均）として、炭素５６．１５％；水素５．１５％：窒素
６．３０％；塩素３．９０％；酸素（差）２８．５０％
を与える元素分析値を有し、 ｅ）５μ Ｚｏｒｂａｘ＾＾［＾Ｒ＾］ＯＤＳカラムを
用い、溶液Ａ中溶液Ｂを４０分のうちに０％から５０％
までの直線状グラジエント（溶液Ａ：０．１ＮのＮａＯ
ＨでｐＨ６．０に緩衝した２５ｍＭのＮａＨ＿２ＰＯ＿
４／アセトニトリル（９／１）、溶液Ｂ：０．１ＮのＮ
ａＯＨでｐＨ６．０に緩衝した２５ｍＭのＮａＨ＿２Ｐ
Ｏ＿４／アセトニトリル（３／７））とし、２ｍｌ／分
の流速で溶出する逆相ＨＰＬＣで分析して保持時間（ｔ
＿Ｒ）が２２．６分（内部標準：３，５−ジヒドロキシ
トルエンｔ＿Ｒ８．８４分）であり、 ｆ）数滴のＤ＿２Ｏを加えたＤＭＳＯ−ｄ＿６中で（濃
度２５ｍｇ／０．５ｍｌ）で測定した２７０ＭＨｚ ＾
１ＨＮＭＲで、０．７−１．５（ｍ）；１．８−２．２
（ｍ）；２．７−４．５（ｍ）；４．６−５．７（ｍ）
：６．２−８．１（ｍ）（内部標準としてのＴＭＳ：δ
＝０．００ｐｐｍ）のシグナルを与え、 ｇ）塩を形成しうる酸性官能基と、 ｈ）塩を形成しうる塩基性官能基と、 ｉ）ＦＡＢ質量スペクトルで測定して約１８７７の分子
量を有するテイコマイシンＡ＿２ファクター２を分け、
そして、望むならば、既知の方法により得られたテイコ
マイシンＡ＿２ファクター２を相当する薬剤として許容
される塩に変えることからなるテイコマイシンＡ＿２フ
ァクター２の製造方法。 - （４）シラン化シリカゲルカラムおよび、展開に、希水
性ギ酸アンモニウム中アセトニトリルによるグラジエン
ト溶出を用いるカラムクロマトグラフィーで分離を行な
う、特許請求の範囲（３）項記載の方法。 - （５）０．２％ギ酸アンモニウム溶液中１０から２０％
までのアセトニトリルの直線状グラジエントでカラムを
展開する特許請求の範囲（４）項記載の方法。 - （６）カラムより２つのファクターの混合物を採取した
時に、オクタデシルシランカラムおよびアセトニトリル
：０．２％水性ギ酸アンモニウムの２４：７６の混合物
展開剤を用いる逆相クロマトグラフィーにより単一のフ
ァクターに分けることを特徴とする、特許請求の範囲（
５）項記載の方法。 - （７）０．２％ギ酸アンモニウム／アセトニトリル９／
１混合物中にテイコマイシンＡ＿２複合物を溶解し、Ｎ
ａＯＨを加えてｐＨを７．５に調整し、得られた溶液を
シラン化シリカゲルカラムに通し、０．２％ギ酸アンモ
ニウム溶液中１０から２０％までのアセトニトリルの直
線状グラジエントでカラムを展開し、テイコマイシンＡ
＿２ファクター２と同じＨＰＬＣプロフィールの特徴を
有する分画を集め、減圧で有機溶媒を蒸発させ、残存水
溶液をシラン化シリカゲルカラムを通し、カラムを水で
洗い５０％アセトニトリル水溶液で溶出することにより
脱塩し、溶出液を小容量に濃縮し、それより、テイコマ
イシンを溶解しない溶媒を添加することにより純粋なテ
イコマイシンＡ＿２ファクター２を沈殿さすことを包含
する、テイコマイシンＡ＿２ファクター２を製造する、
特許請求の範囲（５）項記載の方法。 - （８）アガロースのジエチルアミノエチル誘導体を静止
相に、そして、緩衝溶液、または、緩衝溶液と非水性水
混和性の溶媒との混合物を溶出液に用いるカラムクロマ
トグラフィーで分離を行なう、特許請求の範囲（３）項
記載の方法。 - （９）化学的物理的性質として、無定型の白色粉末であ
り、加熱すると２１０℃で暗化し始め２５０℃で完全に
分解し、 ａ）ｐＨ＞７．０またはｐＨ＜２の水、ジメチルホルム
アミド、ジメチルスルホキサイドおよびプロピレングリ
コールに自由に溶解し；メチルセロソルブおよびグリヒ
ロールに僅溶で；メタノールおよびエタノールに難溶で
、クロロホルム、ベンゼン、ｎ−ヘキサン、アセトニト
リル、エチルエーテル、アセトン、酢酸エチル、四塩化
炭素にほとんど不溶であり、ｂ）０．１Ｎ塩酸中λ＿ｍ
＿ａ＿ｘ２７８ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝４８）
ｐＨ７．４リン酸塩緩衝液中λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２７８ｎｍ
（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝４９．０）０．１Ｎ水酸化
ナトリウム中λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２９７ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿
１＿ｃ＿ｍ＝７０．０）の吸収極大を有する紫外線吸収
スペクトルを有し、 ｃ）ヌジヨール中３７００−３１００、２９６０−２８
６０（ヌジヨール）、１６４５、１５９０、１５１０、
１４６０（ヌジヨール）、１３７５（ヌジヨール）、１
３００、１２６０、１２３０、１１８０、１１５０、１
０６０、１０２５、９７０、８９０、８４５、８１５、
７２０（ヌジヨール）に吸収極大を有する赤外線吸収ス
ペクトルを有し、 ｄ）不活性気体中約１４０℃であらかじめ試料を乾燥し
て（％ΔＷ＝９．８）、おおよそのパーセント組成（平
均）として、炭素５６．１５％；水素５．１５％；窒素
６．３０％：塩素３．９０％；酸素（差）２８．５０％
を与える元素分析値を有し、 ｅ）５μ Ｚｏｒｂａｘ＾［＾Ｒ＾］ＯＤＳカラムを用
い、溶液Ａ中溶液Ｂを４０分のうちに０％から５０％ま
での直線状グラジエント（溶液Ａ：０．１ＮのＮａＯＨ
でｐＨ６．０に緩衝した２５ｍＭのＮａＨ＿２ＰＯ＿４
／アセトニトリル（９／１）、溶液Ｂ：０．１ＮのＮａ
ＯＨでｐＨ６．０に緩衝した２５ｍＭのＮａＨ＿２ＰＯ
＿４／アセトニトリル（３／７））とし、２ｍｌ／分の
流速で溶出する逆相ＨＰＬＣで分析して保持時間（ｔ＿
Ｒ）が２２．６分（内部標準：３，５−ジヒドロキシト
ルエンｔ＿Ｒ８．８４分）であり、 ｆ）数滴のＤ＿２Ｏを加えたＤＭＳＯ−ｄ＿６中で（濃
度２５ｍｇ／０．５ｍｌ）で測定した２７０ＭＨｚ ＾
１ＨＮＭＲで、０．７−１．５（ｍ）；１．８−２．２
（ｍ）；２．７−４．５（ｍ）；４．６−５．７（ｍ）
；６．２−８．１（ｍ）（内部標準としてのＴＭＳ：δ
＝０．００ｐｐｍ）のシグナルを与え、 ｇ）塩を形成しうる酸性官能基と、 ｈ）塩を形成しうる塩基性官能基と、 ｉ）ＦＡＢ質量スペクトルで測定して約１８７７の分子
量を有するテイコマシインＡ＿２ファクター２または薬
剤として許容されうるその塩を活性成分として含有する
抗細菌薬剤組成物。
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