JPH0229183B2 - Ketsukyunotokuseiosokuteisurusochi - Google Patents

Ketsukyunotokuseiosokuteisurusochi

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JPH0229183B2
JPH0229183B2 JP1421982A JP1421982A JPH0229183B2 JP H0229183 B2 JPH0229183 B2 JP H0229183B2 JP 1421982 A JP1421982 A JP 1421982A JP 1421982 A JP1421982 A JP 1421982A JP H0229183 B2 JPH0229183 B2 JP H0229183B2
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JP
Japan
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blood cells
circuit
memory
read
particle
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JP1421982A
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English (en)
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JPS58131537A (ja
Inventor
Masayoshi Hayashi
Atsuo Tomioka
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Sysmex Corp
Original Assignee
Sysmex Corp
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Publication date
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Expired - Lifetime legal-status Critical Current

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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/1031Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects
    • G01N15/12Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects by observing changes in resistance or impedance across apertures when traversed by individual particles, e.g. by using the Coulter principle

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  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
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  • Health & Medical Sciences (AREA)
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  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、血球の特性を測定する装置、とくに
赤血球膜機能を測定する装置に関するものであ
る。
従来、赤血球膜機能を測定する方法として、赤
血球浸透圧脆弱性試験があり、赤血球の溶血亢進
の有無に関する検査の1つとして一般に行なわれ
ている。この方法は、赤血球を低張塩化ナトリウ
ム液中に浮遊させると、赤血球内は外部より高張
なので水分を内部に取り入れ膨脹して球形とな
り、さらに水分を取り入れるとついに膜が破れて
溶血を生ずることを利用するものである。正常赤
血球が溶血を生ずるよりは高張の溶接中で溶血を
生じる場合は、赤血球浸透圧脆弱性が亢進してい
ると言い、また正常赤血球が溶血を生ずるよりは
低張の溶液中で溶血を生じる場合は、赤血球浸透
圧脆弱性が増強していると言う。いずれの場合も
正常値よりはずれている場合は異常と判定され
る。
検査法としては何種類かあるが、一般に用いら
れている方法としてパーパート(PAR PART)
法がある。この方法は、PH7.4の緩衝液加NaCl液
系列をつくり(たとえば試験管を20本準備し、
NaCl濃度を0.50%、0.48%、0.46%…0.30%、
0.28%と準備する)、これに被検血球を一定量ず
つ加えて生ずる溶血度を分光光度計を用いて比色
測定する方法である。しかしこのパーパート法で
は、定量的に測定する場合、多くの種類のNaCl
濃度の液をつくる必要があり、かつ試験管および
試薬を多量に必要とし、大くの検体の測定ができ
ず、非常に手間がかかり誤差が大きいという欠点
がある。
最近では、自動化された方法が提案されてお
り、その代表的な方法としてコイルプラネツト型
遠沈器(CPC)による方法がある。コイルプラ
ネツト型遠沈器は、コイル(遠沈管に相当する)
が遠沈器の中心軸のまわりを高速公転しながら、
コイル自身の軸まわりを低速自転する二重回転装
置で、数mの長さの遠沈管を使用した場合に匹適
する遠沈効果をあげ得る器械である。赤血球浸透
圧脆弱性測定には、細長いポリエチレンチユーブ
をガラス棒に巻き付けてコイル状にしたものを遠
沈管に相当するものとし、このコイルの上端から
下端に向かつて300mOsMから0mOsMの浸透圧
濃度勾配のNaCl液をつめ、上端のチユーブに血
液少量を注入し、CPCで遠沈する。そうすると
赤血球は下端の低浸透圧側に向かつて沈降してゆ
き、自己より浸透圧がだんだん低くなつて行くメ
ジウムのなかを進む。そして浸透圧低下に耐えき
れなくなつた位置まで来て崩壊溶血しヘモグロビ
ン溶液をつくる。ヘモグロビンは赤血球に比しは
るかに小さい粒子なので、CPCの遠心力によつ
て沈降せず、いつまでもそれが生じたコイル部位
にとどまり、溶血帯をつくる。この溶血帯の位置
やでき方を観察することによつて赤血球浸透圧脆
弱性の大小を知ることができる。このように
CPCによる方法は、試験管を何本も準備する必
要はなく自動的に測定する方法であるが、コイル
に血液を注入する作業に手間がかかつたり、セツ
トするまで長い時間を必要としたりして精度が低
下するという欠点があつた。また溶血開始、最大
溶血、溶血終了点などを読み取る方法が簡易でな
く、スケールなどを使用し計測しなくてはならな
かつた。さらにコイルには予め浸透圧濃度勾配を
有するNaCl液を注入しておかなければならず、
異なつた濃度勾配のNaCl液および薬物に対する
溶血などの研究などを行なう場合、それぞれのコ
イルを作成しなければならず実用的でない。
また本出願人は既に、血球の浮懸する液体に水
または試薬を一定速度で添加せしめ、浸透圧の変
化を生じさせ、このときの血球の平均体積
(MCV)の変化を求める装置について特許出願し
ている(特開昭54−143692号)。しかしこの方法
は、MCV=全血球体積/赤血球数で求め、所定
時間後に赤血球パルス高さ情報を赤血球で割算す
る方法であり、赤血球数の減少に伴い分母が小さ
くなり、検出赤血球の誤差の大きさが徐々に増加
し、したがつてMCV値にばらつきを生じ正確な
測定が行なえなくなることを本発明者らは知見し
た。さらに従来のCPC法における最大溶血点は、
上記MCVの連続測定によつて得られる結果とは
必ずしも一致しないことを本発明者らは知見し
た。
本発明は上記の諸点に鑑みなされたもので、濃
度勾配を持つた生理食塩水のパイプなどを必要と
せず、簡単に血球の特性を測定することができる
装置を提供せんとするものである。
以下、本発明の構成を図面に基づいて説明す
る。第1図は粒子検出装置まわりの一例を示し、
第2図は本発明の装置の一実施態様を示してい
る。本発明の装置は、温度制御可能な試料容器1
と、この試料容器1内の血液希釈液(血球浮懸
液)2を検出器3下端に設けられた細孔4に通過
させ血球と希釈液との電気的差異に基づいて血球
を検出し血球の大きさに比例した電気信号を発生
する粒子検出装置5と、この粒子検出装置5から
の粒子の大きさに比例した電気信号を検出しパル
ス信号に変換する検出回路6と、この検出回路6
からのパルス信号を演算し読出書込メモリ10に
記憶させる演算回路7と、この演算回路7に接続
され演算の順序が記憶される読出専用メモリ8
と、演算回路7に接続された表示装置11および
記録装置12と、演算回路7、読出専用メモリ
8、読出書込メモリ10、表示装置11および記
録装置12に接続された表示・記録指令回路13
とからなり、演算により溶血曲線を求めることが
できるように構成されている。
第1図において、恒温装置14により温度制御
されるサーモバス15内に、血液希釈液2を収納
する試料容器1を配設し、さらに血液希釈液2の
液面下に検出用の細孔4を有する検出器3を浸漬
させ、一方、外部から水または薬液を所定量ずつ
滴下させ混合させる滴下混合手段16を設け、細
孔4から連続的に血球の浮懸液を吸引させ血球の
検出を行なう。第1図では、適下混合手段16の
一例として、水または薬液の入つたタンク17か
らポンプ18により所定量ずつ試料容器内に滴下
し、撹拌機20で撹拌する場合を示している。水
を滴下させると、塩濃度など液のインピーダンス
が変化するので、必要に応じて補助電極21を設
け、補正回路22により感度の補正を行なうよう
にする。通常は決められたプログラムにより、塩
濃度の変化率はわかつているので、時間に対する
感度変化を与えるだけでよい。塩濃度が下がると
血球を浮懸している液体のインピーダンスが上昇
し、血球による出力パルスが見掛上大きくなつた
りして感度の変化が生ずる。したがつて見掛上の
感度変化を補正回路22により補正し、常に所定
の粒子感度を保持するようにする。なお液のイン
ピーダンスは液温によつても変化するので、サー
モバス15を用い常に一定温度と保持するように
する。23は増幅回路である。
上記の粒子検出装置5に第2図に示すような回
路構成を付加して本発明の装置を構成する。なお
第2図においては、水または薬液を滴下する手
段、補助電極、補正回路、増幅回路の図示を省略
している。検出回路6の出力信号は、演算回路
7、読出専用メモリ8、読出書込メモリ10、表
示・記録指令回路13からなるデータ処理装置2
4に直接送られ、内蔵の基準パルスによつて、各
時間ごとの検出パルス読出専用メモリ8に記憶さ
れる。所定の時間後、あるいはもはや検出パルス
が所定の個数以下となつた時点で、各時間インタ
ーパルの隣接する時間の個数の差が演算され、読
出書込メモリ10に再記憶される。本発明の装置
により得られた溶血曲線は第3図の実線で示すよ
うなもので、従来のコイルプラネツト型の遠心分
離法で求めた溶血曲線と良く一致する。なお第3
図の破線は血球数を示し、時間とともに浸透圧濃
度が変化し、血球は浸透圧抵抗の低いものから
次々と溶血し、検出される粒子数が減少する。第
3図において、a点は溶血開始点、b点は最大溶
血点、c点は溶血終了点である。なお時間は浸透
圧に対応する。
以上説明したように、本発明の装置によれば、
濃度勾配を持つた生理食塩水のパイプなどを必要
とすることなく、手間をかけずに簡単に血球の特
性を測定することができ、またヘモグロビンの溶
出を光学的に検出する方法を用いないために、赤
血球に限らず血小板などほかの粒子には適用する
ことができるという効果がある。
【図面の簡単な説明】
第1図は本発明の装置における粒子検出装置ま
わりの一例を示す説明図、第2図は本発明の装置
の一実施態様を示す説明図、第3図は本発明の装
置を用いて得られた溶血曲線の一例を示す曲線図
である。 1……試料容器、2……血液希釈液、3……検
出器、4……細孔、5……粒子検出装置、6……
検出回路、7……演算回路、8……読出専用メモ
リ、10……読出書込メモリ、11……表示装
置、12……記録装置、13……表示・記録指令
回路、14……恒温装置、15……サーモバス、
16……滴下混合手段、17……タンク、18…
…ポンプ、20……撹拌機、21……補助電極、
22……補正回路、23……増幅回路、24……
データ処理装置。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 1 温度制御可能な試料容器と、この試料容器内
    の血液希釈液を検出器下端に設けられた細孔に通
    過させ血球と希釈液との電気的差異に基づいて血
    球を検出し血球の大きさに比例した電気信号を発
    生する粒子検出装置と、この粒子検出装置からの
    粒子の大きさに比例した電気信号を検出しパルス
    信号に変換する検出回路と、この検出回路からの
    パルス信号を演算し読出書込メモリに記憶させる
    演算回路と、この演算回路に接続され演算の順序
    が記憶される読出専用メモリと、演算回路に接続
    された表示装置および記録装置と、演算回路、読
    出専用メモリ、読出書込メモリ、表示装置および
    記録装置に接続された表示・記録指令回路とから
    なり、演算により溶血曲線を求めるようにしてな
    ることを特徴とする血球の特性を測定する装置。
JP1421982A 1982-01-30 1982-01-30 Ketsukyunotokuseiosokuteisurusochi Expired - Lifetime JPH0229183B2 (ja)

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