JPH0243760B2 - - Google Patents

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JPH0243760B2
JPH0243760B2 JP56022279A JP2227981A JPH0243760B2 JP H0243760 B2 JPH0243760 B2 JP H0243760B2 JP 56022279 A JP56022279 A JP 56022279A JP 2227981 A JP2227981 A JP 2227981A JP H0243760 B2 JPH0243760 B2 JP H0243760B2
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JP
Japan
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anticancer substance
producing
anticancer
veillonella
absorption
Prior art date
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JP56022279A
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English (en)
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JPS57139091A (en
Inventor
Kenzo Tamai
Isamu Saikawa
Takashi Yasuda
Shohachi Murakami
Toyoo Maeda
Maki Myahara
Hisatsugu Tsuda
Masatoshi Sugita
Yoshiko Yamamoto
Takashi Minami
Hidetada Mikami
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Toyama Chemical Co Ltd
Original Assignee
Toyama Chemical Co Ltd
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Publication date
Application filed by Toyama Chemical Co Ltd filed Critical Toyama Chemical Co Ltd
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  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】
本発明は新規な制癌性物質、更に詳細にはベイ
ロネーラ属に属する菌を培養し、この培養液から
得られる制癌性物質TV−130に関する。更にま
た、本発明はこの制癌性物質TV−130を製造す
る方法並びにこれを含有する制癌剤に関する。 近年、各種の癌患者の治療法において、宿主の
免疫機能を亢進させ、免疫機能の助けを借りなが
ら制癌効果を発現させる治療法が盛んとなつて来
た。かかる療法に使用される薬剤としては、各種
細菌の菌体、菌体培養物から得られる成分、ある
いは担子菌の子実体又はその培養菌体から得られ
る多糖体が知られている。しかし嫌気性菌を培養
し、その培養液から優れた制癌作用を有する成分
の研究は少なく、特にベイロネーラ属に属する菌
を培養し、その培養液から得られる成分並びにそ
の制癌作用については未だ知られていない。 本発明者はヒト口腔内より分離したベイロネー
ラ属に属する菌を培養し、その培養液から菌体を
除去した上清液について、その薬理作用を調べて
いたところ、この上清液から採取される特定の成
分が強い制癌作用を有すること、しかもこれは、
コロニー形成抑制法においては癌細胞の集落形成
阻止作用は極めて小さく、殺細胞による制癌作用
ではなく、宿主介在性あるいは宿主の免疫力を亢
進させ、免疫の助けを借りながら間接的に制癌作
用を発現させる作用を有するものであること、更
にこの成分は毒性が極めて弱いこと、またこの成
分の培養液を処理しても得られることを見出し、
本発明を完成した。 本発明で利用される菌としては、ベイロネーラ
属に属するTV−130生産菌であればよく、好適
なものとしては、ベイロネーラ・アルカレツセン
ス、ベイロネーラ・パルブラが挙げられる。具体
的には、例えばベイロネーラ・アルカレツセンス
TF−V、ベイロネーラ・パルブラTF−V−1お
よび微生物学の一般常識としてそれらの性質を有
する菌株、すなわち自然変異株あるいは人工的に
改良された菌株等が利用される。 次にベイロネーラ・アルカレツセンスTF−V
及びベイロネーラ・パルブラTF−V−1の菌学
的性状を記載すれば以下のとおりである。 Γ ベイロネーラ・アルカレツセンスTF−Vの
菌学的性質 (1) 形態 細胞の形:球状(第1図) 細胞の多形性の有無:なし 運動性の有無:なし 胞子の有無:なし グラム染色:グラム陰性 (2) 培地における生育状態 TF−a寒天平板 外形:円形及び非溶血性 構造:露滴状 表面:平滑 色 :乳白色 TF−a液体培地 発育の程度:普通 濁り:綿繊維状 ガス:なし (3) 生理学的性質 硫化水素の生成:− 硝酸塩の還元:− プロピオン酸の生成:+ インドールの生成:+ ウレアーゼ:− カタラーゼ:+ 乳汁:凝固しない 酸素に対する態度:嫌気性 リパーゼ:− レシチナーゼ:− 生育の範囲:至適PH7付近(中性)、至適温
度35〜40℃ 糖からのガスの生成 L−アラビノース(−)、D−キシロース
(−)、D.グルコース(−)、D−マンノース
(−)、D−フラクトース(−)、D−ガラクトー
ス(−)、麦芽糖(−)、シヨ糖(−)、トレハロ
ース(−)、ソルビツト(−)、マンニトール
(−)、イノシツト(−)、グリセリン(−)、デン
プン(−)、サリシン(−)、ゼラチン(−)、エ
スクリン(−)、セルビオース(−)、ラフイノー
ス(−)、ラムノース(−) Γ ベイロネーラ・パルブラTF−V−1の菌学
的性質 (1) 形態 細胞の形:球状(第2図) 細胞の多形性の有無:なし 運動性の有無:なし 胞子の有無:なし グラム染色:グラム陰性 (2) 培地における生育状態 TF−a寒天平板 外形:円形及び非溶血性 構造:露滴状 表面:平滑 色 :乳白色 TF−a液体培地 発育の程度:普通 濁り:綿繊維状 ガス:なし (3) 生理学的性質 硫化水素の生成:− 硝酸塩の還元:− プロピオンの生成:+ インドールの生成:+ ウレアーゼ:− カタラーゼ:− 乳汁:凝固しない 酸素に対する態度:嫌気性 リパーゼ:− レシチナーゼ:− 生育の範囲:至適PH7付近(中性)、至適温
度35〜40℃ 糖からのガスの生成 L−アラビノース(−)、D−キシロース
(−)、D−グルコース(−)、D−マンノース
(−)、D−フラクトース(−)、D−ガラクトー
ス(−)、麦芽糖(−)、シヨ糖(−)、トレハロ
ース(−)、ソルビツト(−)、マンニトール
(−)、イノシツト(−)、グリセリン(−)、デン
プン(−)、サリシン(−)、ゼラチン(−)、エ
スクリン(−)、セルビオース(−)、ラフイノー
ス(−)、ラムノース(−) 以上の諸性状をバージーズ・マニユアル・オ
ブ・デイタミネイテイブ・バクテリオロジー第8
版に照して検討すると、これらの菌株はベイロネ
ーラ・アルカレツセンス(Veillonella
alcalescens)及びベイロネーラ・パルブラ
(Veillonella parvula)に酷似するので、それぞ
れ、これに属する菌であると同定し、これらの菌
株をベイロネーラ・アルカレツセンス
(Veillonella alcalescens TF−V)及びベイロ
ネーラ・パルブラTF−1−V(Veillonella
parvula TF−V−1)と命名して、工業技術院
微生物工業技術研究所にそれぞれ受託番号微工研
菌寄第5876号(FERM−PNo.5876)及び第5877
号(FERM−PNo.5877)として寄託した。 本発明の制癌性物質TV−130は、例えば次の
ようにして製造される。 (a) 培養 ベイロネーラ・アルカレツセンス及びベイロネ
ーラ・パルブラの培養は通常の嫌気性菌の培養法
によつて行われる。すなわち、各種ペプトン、牛
の脳、心臓抽出物等の窒素源;グルコース、ラク
トース等の炭素源;イースト・エクストラクト等
のビタミン源;L−シスチン、亜硫酸ソーダ、チ
オグリコレート・ナトリウム等の還元剤;塩化ナ
トリウム等の無機塩を含む培地を水酸化ナトリウ
ムでPH7付近、特に好ましくはPH7に調整したも
のを用いて、嫌気的条件下、好ましくは35〜40℃
で1〜7日間、静置あるいは撹拌培養を行う。特
に次の成分を含む培地(以下TF培地と称する)
を使用するのが好ましい。 しかし窒素源として牛の脳、心臓抽出物のブレ
イン・ハート・インヒユージヨンは必ずしも必要
でなく、牛の心臓抽出物であるハート・インヒユ
ージヨン、牛肉エキス、魚肉エキス、トウモロコ
シより抽出されたコーンステイプリカ等を代用し
てもよく、また、各種ペプトンにおいてプロテオ
ース・ペプトン、フアイトン・ペプトンは必ずし
も必要ではなく、またトリプトケース・ペプトン
をポリペプトンで代用することもできる。なお、
寒天を使用しないときは撹拌培養を行うのが好ま
しい。
【表】 (b) 培養液から上清液の採取(菌体の除去) 上で得た培養液から菌体を除去して上清液を得
る。菌体の除去は常法、例えば遠心分離、ハイフ
ロースーパーゲル等の過助剤を用いる過法を
採用できるが、特に遠心分離法は操作、菌の除去
度合、上清液の収量の点で好ましい。 このようにして得た培養液及び上清液からTV
−130を採取する方法を図式化して示せば次のと
おりである。
【表】
【表】 乾 燥

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 ベイロネーラ属に属する制癌性物質TV−
    130生産菌を培養し、その培養液から得られる次
    の性状を有する制癌性物質TV−130。 (イ) 白灰色〜淡褐色の粉末。 (ロ) マウスのエールリツヒ腹水型癌の増殖を阻止
    し、免疫賦活作用を有する。 (ハ) 水に溶解し、メタノール、エタノール、アセ
    トン、ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチル、
    ジエチルエーテルに不溶。 (ニ) 明確な融点を示さず、約110℃より分解を始
    め、200℃以上で著しく分解する。 (ホ) KBr錠剤法による赤外線吸収スペクトルは、
    3500〜3150、2970〜2870、1690〜1620、1560〜
    1520、1490〜1320、1280〜1200、1120〜1000お
    よび980〜970cm-1の近傍に吸収帯を有する。 (ヘ) PH7の水溶液の紫外線吸収スペクトルは、吸
    収末端に強い吸収があり、また247〜270nmの
    近傍に吸収を示す。 (ト) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
    ンスロン硫酸反応、インドール塩酸反応、ロウ
    リー・フオリン反応は陽性。 (チ) 元素分析値 C:31%〜42%、H:3%〜7%、N:2%
    〜12% 2 ベイロネーラ属に属する制癌性物質TV−
    130生産菌を培養して得た培養液又は上清液に親
    水性有機溶媒を加えて生ずる沈澱物を採取し、こ
    れに水を加えて水不溶物を除去し、次いでこれを
    透析又は限外濾過し、更にこれをイオン交換体処
    理して得られたものである特許請求の範囲第1項
    記載の制癌性物質TV−130。 3 ベイロネーラ属に属する制癌性物質TV−
    130生産菌がベイロネーラ・アルカレツセンスで
    ある特許請求の範囲第1項又は第2項記載の制癌
    性物質TV−130。 4 ベイロネーラ属に属する制癌性物質TV−
    130生産菌がベイロネーラ・パルブラである特許
    請求の範囲第1項又は第2項記載の制癌性物質
    TV−130。 5 ベイロネーラ属に属する制癌性物質TV−
    130生産菌を培養して得た培養液又は上清液に親
    水性有機溶媒を加えて生ずる沈澱物を採取し、こ
    れに水を加えて水不溶物を除去し、次いでこれを
    透析又は限外濾過し、更にこれをイオン交換体で
    処理することを特徴とする次の性状、 (イ) 白灰色〜淡褐色の粉末。 (ロ) マウスのエールリツヒ腹水型癌の増殖を阻止
    し、免疫賦活作用を有する。 (ハ) 水に溶解し、メタノール、エタノール、アセ
    トン、ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチル、
    ジエチルエーテルに不溶。 (ニ) 明確な融点を示さず、約110℃より分解を始
    め、200℃以上で著しく分解する。 (ホ) KBr錠剤法による赤外線吸収スペクトルは、
    3500〜3150、2970〜2870、1690〜1620、1560〜
    1520、1490〜1320、1280〜1200、1120〜1000お
    よび980〜970cm-1の近傍に吸収帯を有する。 (ヘ) PH7の水溶液の紫外線吸収スペクトルは、吸
    収末端に強い吸収があり、また247〜270nmの
    近傍に吸収を示す。 (ト) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
    ンスロン硫酸反応、インドール塩酸反応、ロウ
    リー・フオリン反応は陽性。 (チ) 元素分析値 C:31%〜42%、H:3%〜7%、N:2%
    〜12% を有する制癌性物質TV−130の製造法。 6 親水性有機溶媒がアルコールである特許請求
    の範囲第5項記載の制癌性物質TV−130の製造
    法。 7 親水性有機溶媒をその濃度が30〜80%(容量
    比)になるように培養液又は上清液に加えること
    を特徴とする特許請求の範囲第5項又は第6項記
    載の制癌性物質TV−130の製造法。 8 イオン交換体処理において食塩含有リン酸緩
    衝液で溶出することを特徴とする特許請求の範囲
    第5〜7項いずれかの項記載の制癌性物質TV−
    130の製造法。 9 イオン交換体処理において0.1モル濃度の食
    塩含有リン酸緩衝液で平衡化したイオン交換体で
    処理し、非吸着画分採取することを特徴とする特
    許請求の範囲第5〜7項いずれかの項記載の制癌
    性物質TV−130の製造法。 10 イオン交換体処理において、0.1モル濃度
    食塩含有リン酸緩衝液で溶出せず、0.3モル濃度
    食塩含有リン酸緩衝液で溶出する画分を採取する
    ことを特徴とする特許請求の範囲第5〜8項いず
    れかの項記載の制癌性物質TV−130の製造法。 11 イオン交換体処理において、0.3モル濃度
    食塩含有リン酸緩衝液で溶出せず、0.4モル濃度
    食塩含有リン酸緩衝液で溶出する画分を採取する
    ことを特徴とする特許請求の範囲第5〜8項いず
    れかの項記載の制癌性物質TV−130製造法。 12 イオン交換体処理において、0.4モル濃度
    食塩含有リン酸緩衝液で溶出せず、0.6モル濃度
    食塩含有リン酸緩衝液で溶出する画分を採取する
    ことを特徴とする特許請求の範囲第5〜8項いず
    れかの項記載の制癌性物質TV−130の製造法。 13 ベイロネーラ属に属する制癌性物質TV−
    130生産菌がベイロネーラ・アルカレツセンスで
    ある特許請求の範囲第9項、第10項又は第12
    項記載の制癌性物質TV−130の製造法。 14 ベイロネーラ属に属する制癌性物質TV−
    130生産菌がベイロネーラ・パルブラである特許
    請求の範囲第11項記載の制癌性物質TV−130
    の製造法。 15 ベイロネーラ属に属する制癌性物質TV−
    130生産菌を培養し、この培養液から得られる次
    の性状を有する制癌性物質TV−130を含有する
    ことを特徴とする制癌剤。 (イ) 白灰色〜淡褐色の粉末。 (ロ) マウスのエールリツヒ腹水型癌の増殖を阻止
    し、免疫賦活作用を有する。 (ハ) 水に溶解し、メタノール、エタノール、アセ
    トン、ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチル、
    ジエチルエーテルに不溶。 (ニ) 明確な融点を示さず、約110℃より分解を始
    め、200℃以上で著しく分解する。 (ホ) KBr錠剤法による赤外線吸収スペクトルは、
    3500〜3150、2970〜2870、1690〜1620、1560〜
    1520、1490〜1320、1280〜1200、1120〜1000お
    よび980〜970cm-1の近傍に吸収帯を有する。 (ヘ) PH7の水溶液の紫外線吸収スペクトルは、吸
    収末端に強い吸収があり、また247〜270nmの
    近傍に吸収を示す。 (ト) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
    ンスロン硫酸反応、インドール塩酸反応、ロウ
    リー・フオリン反応は陽性。 (チ) 元素分析値 C:31%〜42%、H:3%〜7%、N:2%
    〜12%
JP56022279A 1981-02-19 1981-02-19 Carcinostatic substance tv-130, its preparation and carcinostatic agent containing the same Granted JPS57139091A (en)

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