JPH0314551A - 興奮性アミノ酸神経伝達物質の拮抗物質として、および／またはカルシウムチャンネルの遮断剤として有用なポリアミン類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ａｐｇデｔａ）＜ものｌｌ液中に存在することが見出さ
れた特定のポリアミン類およびポリペプチド類に関する
。本ポリアミン類およびその薬学的に受容できる塩類は
、興奮性アミノ酸ｐＰ経伝達物寅に拮抗丁るが、こり神
経伝達物質は、無脊椎動物およびｆ椎動物を含む橿々の
生物のニューロン細胞を含む細胞に影響を及ばす。不ボ
リベブテド類および上記ポリアミン類の一つおよびその
薬学的に受容できる塩類は、無脊椎動物および脊椎動物
を含むイ１々の生物のニューロンおよび筋肉細胞を包含
する，ｋＩＩ　Ｉｔａｌ中のカルシウムチャンネル（Ｃ
αｌｃｉｓｍｃｈａｎｎａ　Ｌ　）を遮断する。本発明
は，また，＠乳動物の、興奮性アミノ酸神経伝達物質に
よって媒介された病気および状態の治療および無脊椎害
虫の制御において、それ自体で、生物の神経系の細胞の
よった細胞に影響を及ぼす興奮性アミノ酸神経伝達物質
に拮抗する際のこのようたボリアミン類およびそれらの
塩類の用法、および上記のポリアミン類およびその塩類
より成る組成物，に関する。

さらに、本発明は、補乳動物におけるカルシウムチャン
ネルによって媒介された病気および状態の治療、および
無脊椎害虫の制御、において、それ自体で，生物の神経
および筋肉系の細胞のよった細胞中のカルシウムチャン
ネルを遮断する際の，上記ポリペプチド類および上記ポ
リアミン類の一つおよびその塩類の用法、および、上記
ポリベブチド類、ポリアミンおよびその塩類より成る組
成物，に関する。

従来の技術 αｐａｒｔα）の毒液は、少ｔＸ　＜とも２橿の、カル
シウムの流れに影響を及ばすＪ［を含有していることが
，報告された。ジャクソン，エイｆ（Ｊ（Ｌｅｊｋ８０
ｎｒＨ．）外、Ｓｏｃ．Ｎａｓ．Ｓｃｔ．Ａｂｓｉｒ＊
　１　２　：　１０７８（１９８７）．こ０）著者等は
、その中でＡＧ２と呼ばれる毒素？：開示しているが、
これは．　１，０　０　０ダルトンより小さい分子量を
有し、広範囲にわたる組織においてカルシウムの流れを
止めると思われる。さらに、ジャクンン●エイチ（　Ｊ
ａｃｋｓｏｎ．Ｂ．，）外、　Ｓｏｃ．Ｎｍｓ．Ｓｃｉ
．Ａｂｓｔｒ．　　１　２　：　７　３　０（１９８６
）は、分子量約６，０００の成分より或る，アゲレノプ
シス●アペルタ（　Ａ（１ａｌａｎｏｐｓｉｓαｐａｒ
ｔα）からのもう一つの毒素を報告している。

この＃素は，伝達の前７ナツプス性遮断をもたらすと報
告され、この毒素は、神経六遅物質の放出に関連するカ
ルシウムチャンネルを遮断することが示役ざれてきた。

興奮性アミノ酸神経伝運物質拮抗物實である化合物は、
撞々の有用性を有する。興奮注アぐノ酸神経伝達物質拮
抗物質は、発作、脳卒中、大脳虚血、アルツハイマー病
のようはニューロ／退化疾患およびてんかんのような状
態の治療に，そしてなかんずく精神療法剤として、臨床
適用することカテキル。１９８８年ニューヨーク州、ニ
ューヨーク市．ジョン●ウイリー●アンド●ナンズ社（
　Ｊｏｈｎ　ｙ＝ｔｌ　ａｎｄ　Ｓｏｎｓ　Ｌｔｄ．）
，ディー●ロツジ（　Ｌ）．Ｌｏｄｇａ）　１１ｍ−　
エクシテイトリー●アミノ●Ｄｉｓａａｓｅ）を参照さ
れたい。その教示するところが，本明細書で参照されて
いる。さらに，このような化合物は、ニューロン細胞の
よった細胞の生理学の研究および無脊椎害虫の制御、に
有用である。

カルシウム拮抗物質である化合物は、橿々の有用性を有
している。カルシウム拮抗物質は，特に、アンギーナ、
高血圧症ｈ　’Ｌ？筋症，上室性不整脈、食道アカラシ
ア、早産およびレイノー病のようた状態の治療において
臨床適用することができる。

その教示するところが本明細書中で参照されてい６．１
９８８手ニューヨーク州ニューヨーク市，アカデミック
●プレス（　Ａｃａｄａｔｎｉｃ　Ｐｒｅｓｓ），　ｉ
）一コート●ブレイス・ジャヴアノヴインチ・パブリッ
シャーズ（　Ｈａｒｃｏｓｒｔ　Ｂｒｔｓｃｍ　Ｊａｖ
ａｎｏｖｉｃルＰｓｂｌｉｓｈａｒａ）、　夕゜ブリュ
ー●ジー●ネイラー（　Ｗ．Ｇ．Ｎａｙｌａデ）、カル
シウム●アンタゴニスッ（ＣαＬｃｉｘ情Ａ冗ｔαｇｏ
ｓｉｓ＊ｓ　）を参照された。　さらに，このような化
合物は，ニューロ／および筋肉細胞のような細胞σ）生
理学の研究および無脊椎害虫の制御．に有用である。

することがわかったポリアミン類およびポリペプチド類
に関係する。不発明のポリアミン類および、本発明によ
ればそれらがその中に存在する分画は、下記の通りであ
る。

分画Ａ’（ＡＧＥＬ　　，ｉ５２）： 分画Ａ，（ＡＧＥＬ　　４６Ｂ）Ｈ 分画Ａ，（ＡＧＥＬ　　４４８）： Ｈ 分画Ｂ，（ＡＧＥＬ　　５０５）： Ｈ 分画Ｈ，（ＡＧＥＬ　５０４）： ＦＡＢＭＳＳ高分解能：　ｃ，７Ｈ．，Ｎ６ｏ，に対す
る計算値５　０　５．　３　８　６　１ 分画ＥＣＡＧＥＬ　４８９）： Ｈ 本発明のポリペブチド類および、本発明によれＩよそれ
らが存在する分画は、次の通りである：分画Ｇ： アミノ末端アミノ酸配列は： Ｈ，Ｎ−σｉｓ−１ｙｓ−ｇｌν−ｇｍｓ−ｐｒｏ−ｇ
ｌｓ−ｇｌｙ−ａｌα一ｇｌｍ−ｅｙｓ−ａｓｐ−ｇｌ
ｙ−ａｓｎ−ｇｌｓ−ｓａｒ−ａｓｐ−ｃｙｍ−１ｙ８
−ｃｙｓ−ａＬａ−ｇＬｙ−ｇｉｎ−ｔｒｙ−ｉＬａ−
１νｓ−ｅｙｓ−ａｒｇ−ｃｙｓ−ｐｒｏ−ｔデｐ−ｇ
ｙｓ−ｔｒｐ−ｈｉｓ−ｉ１ａ−ｔルｒ一ｇｔ　ｙ−ｇ
ｔｓ−ｇｔｙ−ｐデａ−ｃｙｓ−ｔｈｅ−ａｙｓ−ｇｔ
＊一αｒｇ−σＬｙ−Ｌｍｓ−Ｌｙｓ−１ｙｓ−ｔｈｒ
−ｃｙｓ−ｔｌａ−ｓａｒ−Ｌｙｓ−Ｌａｓ−ｓａｒ−
αｓｐ−ｐデＯ−αｓｎ−ｃＬｒｇ−αｓｎ−ｇＬｓｂ
−ｔｒｐ−ｌａｓ−３−デー より戒り；　ＦＡＲ　ＭＳｖＣＬう全ポリベブテト゜に
対丁る分子ｉｉ：７２６７． 分画Ｈ，： アミノ末端アミノ酸配列が， ｆｌ２Ｎ−ａｔａ−Ｌｙｓ−ａＬｔｘ−１ａｕ−ｐｒｏ
−ｐｒｏ−ｇｌｙ−ｓａｒ−ｖａｎ−ａｙｓ−５ｓｐ−
ｇＬｙ−ａｓｎ−ｇａｓ−ｓａｔ一αｓｐ−ｃｙａ−ｔ
ｙｓ−ｃｙｓ−ｔｙｒ−ｇｔｙ−ｔｙｓ−ｔｒｐ−ルｉ
８−ＬｙＳ−ｃｙ８−αｒｇ−ｃｙｓ−ｐｒｏ−ｔｒｐ
−ｔｙｓ−ｔｒｐ−んｓｓ−ｐｈａ−ｔルデーＱｌｌ−
Ｑｔ％→Ｑｌｙ−ｐｔ”Ｏ−Ｃｐｌｌ−ｔ入ｒ−ｃｙｓ
−ｇＬｓ−１ｙｓ−ｇＬｙ−情ｇｔ−Ｌｙ８−ｈｉ８−
ｔｈｒ−ＣｙｌＪ−％Ｌａ−ｔｈｒ−１ｙｌｌ−ｌａｓ
−ｈｉｘ−ｃｙａ−ｐｒｏ−ａｇｎ−ｔｙｓ−α１α−
Ｑｌ％→ｔデｐ−ｇｌｙ−１ｉ％一αａｐ−ｔｒｐ− より成り；イオンースプレイ（Ｉｏ竹−ｓｐｒαｙ）Ｍ
Ｓに従う全ポリペブチドに対する分子ｉｉ：７７９３　
． 分画Ｉ： Ｈ２Ｎ−αｓｐ−ｃｙｓ−ｖａＬ−ｇｌｙ−ｇＬｓ−ｓ
ａｒ−ｇＬｎ−ｇｌｎ−ｃｙｓ−ｔｓＬａ−ｃＬｓｐ−
＜ｒｐ−ａｌａ−ｇｌｙ−ｐｒｏ−ルｓｓ−ｃｙｔｔ−
ｃｙｓ−ａｓｐ−ｇｔｙ−ｔｙｒ−ｔｙｒ−ｃｙｓ−ｔ
ｈｒ−ｃｙｓ−ａｒｇ−ｔｙｒ−ｐｋａ−ｐｒｏ−Ｌｙ
ｓ−ｃｙｓ−ｉ１ｇ−ｃｙｓ−ｖａＬ−ａｓｎ−ａｓｎ
−ａｓｎ−ＣＵＮＨ，　；　ＦＡＢ　ＭＳ　：　４　１
　５１３　，分画Ｊ： Ｈ，Ｎ−ａｓｐ−ｇｌｍ−ｐｒｏ−ｃｙｓ−ｉＬａ−ｐ
ｒｏ−１ａｓ−ｇＬｙ−ｌｙｓ−ｓａｒ−ｃｙｓ−ｓａ
ｒ−ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ｉ１ａ−ｇｌｙ−ｇｋｒ−ｐｒｏ
−ｇｒ−ｅｙｓ−ｃｙｓ−ｐｒｏ−ｈｉｓ−ｐｒｏ−ａ
ｓｐ−ａｓｐ−αｔａ−ｇａｙ−αｒｇ−ａｒｇ−ｔｈ
ｅ−ｔｒｐ−ｇｓ−１　ａｍ−ｖαｌ−（Ｌａｐ−ｔｙ
ｒ−Ｂａｒ−αｒｇ−ｐｈｍ−マαｔ　−ｔＡｒ−ｊｊ
　ａ−ｃｙｓ−ｓａｒ−ｇｌｙ−ａｒｇ−１ｙｓ−ｔｙ
ｒ　−ＣＯＮＨｚＦＡＢ　　ＭＳＩＩＣ従う全ポリペブ
チドに対する分子量：５５０６　． 分ＩｆｌＬ： アミノ末端アミノｌ！ｆ！配列が： Ｈ，Ｎ−ｉ１ａ−ｔｔａｌ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−１ｙｓ−
ｔｈｒ−ａｌａ−１ｙｓ−ｐｈｘ−ｇｌｙ−αｓｐ−ｔ
ｙｒ−ｐデ０１デｐ−ｍａｔ−ｖａＬ−８ａｒ−ｉＬａ
−ｇＬｎ−ｇＬｎ−ｔｙｓ−ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｌｙａ−
ｇＬｙ−ｇｌｙ−ｐｈａ−ａｓｐ− より成り；全ポリペプチドに対する概算分子．ｔ：約２
０，０００． 分幽Ｌ２： 災地例９にム己載したようにして得たポリベプテド。

分１ｔＩＩ，Ｍ： アミノ末端アミノ酸配列は： １１２Ｎ−　ｇＬｘ−ａＬａ−ｔんｒ−ｇＬｂ−ｃＬＬ
（Ｌ−Ｑ．Ｌ（Ｌ−Ｌｙ８−ｖαｌ一ｇｍｓ−Ｂａｒ−
（ＬｌＩｎ−ｔｍｓ−（Ｌａｐ−（ｆｉｘ−ｔルｒ−マ
αｌ一αｓｐ−ｐｒｏ− より或り；全ポリペブチドに対する概其分子量約ｇｏ，
ｏｏｏ． 本発明のポリアミン類およびその薬学的に受容できる塩
は、興奮性アミノ酸神経伝達物質に拮抗し、この神経伝
達物質は、細胞に影響を及ぼす。

従って，上記ポリアミン類は，それ自体で，上記神経伝
達物質に拮抗する際に有用である。本発明のポリアミン
類はまた，無脊椎害虫の制御および、興奮性アミノ酸神
経伝達物質によって媒介される哨乳動物の病気および状
態の治療にも有用である。

上記のポリアミン類は，また、隔乳動物に対する精神療
法剤としても有用である。

上記のポリアミンＢ１および本発明のポリペブチド類は
，ＭＢ胞中のカルシウムチャンネルを遮断丁る。従って
，上記のポリアミンＢ１およびポリペブチド類は、それ
自体で、細胞中のカルシウムチャンネルを遮断するのに
有用である。上記のポリアミンＢ，および上記ポリベブ
チド類は、また、無脊椎害虫の制御および％細胞におげ
ろカルシウムチヤンネル機能によって媒介されろ補乳動
物の病気および状態の治療にも有用である。

上述のポリペプチド類と、事実上同一のアミノ酸配列お
よび事実上同一のカルシウムチャンネル遮断活性を有す
るポリペプチド類も、本発明の範囲内である。

本発明はまた、上記ポリアミン類およびポリペプチド類
より成る薬剤組成物，および，上記ポリアミン類および
ポリペプテド類を投与する方法、にも関連する。

問題を解決するための手段 ？８液は、当技術分野に習熟した人々には周知の標準法
に従う電気刺激による搾取法によって，アゲレノブシス
ーアペルタ（　Ａｇ＃Ｌａｎｏｐｓｉｓ狸竺土）くもか
ら得られる。使用される方法は、腹部の吐きもどしまた
は血液リンパによる全毒肢の汚染に対して保護する方法
であることが好ましい。このようた方法は、当技術分野
に習熟した人々には周知である。このようにして得た全
＃Ｓ液を、以下に記載するような精製に使用するまで、
約−７８９Ｃで凍結状態にして貯蔵する。

全Ｓ液ｐ）らの成分の精製は，Ｃ−４およびＣ−１８バ
イダツク（登録商標）　（　ＶｙｄＧＣ■）カラム（０
１８０１マ？チューセツツ州、ウオバーン（　Ｆｏ６ｓ
ｒｓ　）、マツクロード（　Ｍａｃｋ　Ｒｏａｄ　）、
レイニン●インストルメント社（　Ｒａｉｎｉｎｌｎｓ
ｔｒｓ…ＭＣＯ．Ｉｎｃ．）　）のような檀々の分取お
よび半分取カラム上の逆相高性能液体クロマトグラフイ
ー（ＨＰＬＣ）によって行たう。ピークの検出は、２　
２　０　　２　３　０　ｎｎｃで単色光によって実施す
る。

これらの分画のそれ以上の分析は，例えば，ウォーター
ズ（Ｗα處ａｒｅ）９９０ダイオード●アレイ検出器（
　ｄｉｏｄ−αｒｒａｙ　ｄａｔｍｃｃｏデ）［０１７
５７７？Ｆ−ユーセツツ州、ミルフオード，メーフル・
ストリー｝　（　Ｍａｐｌｅ　Ｓｔｒｅｅｔ　）　３　
４、ミリボア社（　Ｎｉｌ　ｔｉｐｏｒｇ　Ｃｏｒｐｏ
ｒａｔｉｏｎ　）、ウオーターズ●クロマトグラフイ一
部（ｒαｔａデ８　Ｃｈｒｏｔｎα！　Ｏ　（ｉｍｐル
νυｉマｉｓｔｏ％）〕を用いて果めた多色注ＵＶデー
タを用いて行なうことができる。これらのカラムからの
分画は、ＩＳｃ０７＠ＦｏＸＹ”分画収集器お？びＩＳ
Ｃ０　　２１５９ピーク検出器（６８５０４ネブ才スカ
州（　Ｎａｂｒαｓｋａ），　リンカーン，スペリアー
（　Ｓｓｐａｒｉｏｒ　）　４　７　０　０　，　　Ｉ
ＳＣＯＩを使用丁るよラな、公知の方法によって集める
。分画は，無脳のボリエチレ７！Ｉ１！試威室用器物の
ような適当な大きさの容器に集める。欠《、分画の濃縮
は、浴離剤かもの凍結乾燥とそれに続く水からの凍結乾
燥によって行たつ。欠Ｋ％こうして得られる成分分画の
純度は、これらの分画の最終精製に使用丁る系よ９もよ
りインクラテイツク（　ｉｓｏｃｒａｇｉｃ）勾配系を
用いる分析力ラムを使用するクロマトグラフイー分析■
より決定丁ることかできる。各々の分画によって包含さ
れる構造は．質量分析法および俵磁気共鳴のような公知
の分析法に従って天定丁る。不発明のポリペプテド類は
、公知方法に従って配列決定される。例えは、研究中の
ポリベプテドのシスチン残基の５−ビリジルエチル化を
溶液中で行はい，続いてこのポリペプチドのアミノ酸配
列決定を行たつことができる。このようなＳ−ビリジル
エチル化法の一つは、欠の通りであろ。約１ないし１０
μｔのポリペブチドを、４慣Ｍ　ＥＤＴＡを含有するＩ
Ｍ｝リスｌｉｃｌ，　ｐＨ　８，．５、１部および８Ｍ
グアニジン●ＨＣｌ３部を混合することによってＩｉｌ
ｉＩ製した緩衝液５０μＥまで、中に溶解させるかまた
は希釈する。次に，１０％　２−メルカプトエタノール
２．５μｌを加えて、混合物を、アルゴン下の暗所で、
室温で２時間インキュペ−｝ｊ６。インキュペーショｙ
後に．２μｇの４−ビニルビリジン（−２０℃で、アル
ゴン下で貯蔵した新しい試薬）を加え、混合物を２アル
ゴン下の暗所で、室温でさらに２時間インキユベートす
る。矢《この混合物を、好ましくは短逆相カラム上のク
ロマトグラ７イーにより、脱塩丁る。

回収されるアルキル化ポリベブチドを％次に、公知方法
に従って配列決定する。

本発明を％施し，上に概略を示した一般法を用いる際に
は、毒液の最初の分別に適丁る力２ムは、Ｃ’　−　１
　８バイダツク（　Ｖｙｄａｃ■）２２１３Ｘ２５０ｎ
％　３００Ａ孔径、１０μ粒度のカラムであることがわ
かった。この方ラムを、９５％→８０％Ａ１５％４２　
０％Ｅｃ０４３　（１）ｍＫ８　０％→＋３　０％Ａ，
２０％→７０％Ｂ〔３０→５５分〕（ここでＡは、０。

１％トリフルオ口酢酸（ＴＦＡ）水浴液であり、セして
Ｂは，アセトニトリルである）のｉ線勾配プログラムを
用いて，流量１５紅／分で溶離する。分画を、上述のよ
うにして集める。このようにして得た、Ａ，Ｂ，Ｅ，Ｇ
，Ｈ％Ｉ，Ｊ，ｆ，ＬおよびＭの標識をつげたｌＯ分画
を選んで、さらに分析および／または精製を行なう。さ
らに、５％→１０％Ｂ、９５％→９０％，｛（Ｑ→３０
分〕（ここでＡおよびＢは、上に記載した通りである）
の直線勾配プログラムを用いてｆｆＬｉｋｘｓｒｒｔ７
分で溶離されるＣ−１８バイダツク（　Ｖｙｄａｃ■）
２２ｇｚｘ２５０ｍｍ、３００Ａ孔径，１０μ粒度カラ
ムを用いる全毒液の分別により，なかんずく、不明ｆＩ
ａ′４Ｉ″１−　，１／と標識付けされた分画が得られ
る，これらの分画の溶出時間は、下の実施例ＩＮよび２
に示されている。

分画Ａ，Ｂ，Ｇ，Ｈ．Ｉ／ＪおよびＬは、檀々のカラム
および勾配プログラムを用いて、さらに精製される。各
々の二次分別のための明細およびその結果は、下の実施
例３、４、６、７、８およびＩＯＫ示される。

下記の実施例に示す通り、分画Ａ′、Ａ．４、ＢＩ．Ｂ
，およびＥは，ポリアミン化合物より成る。これらの化
合物およびその中にそれらが見出される分画は、次の通
りである。

分画Ａ’（ＡＧＥＬ　　４５２）： 分画Ａ，（ＡＧＥＬ　　４６８）： 分画Ａ！（ＡＧＥＬ　　４４ｇ）： 分ｉＢ，（Ａｔ，ＫＬ　　ｓｏｓ）： Ｈ 分画Ｈ２（ＡＧＥＬ　　５０４）： ＦＡＢ　ＭＳ　：高分解能：　Ｃ２？Ｍ，，Ｎ，０，に
対する計算値５０５．３８６１　　． 分画Ｅ＜ＡＧＥＬ　　４８９）： Ｈ 下記の実施例に示すように，分画Ｇ，ＩＩ，、Ｉ、Ｊ，
Ｌ，，Ｌ２およびＭは、ポリペプチドより成る。

これらのポリペブチドおよびこれらが見出される分画は
，下記の通りである； 分画Ｇ： アミノ末端アミノ配列は： ＢＩＮ−　ｇｌｓ−Ｌｙｓ−ｇｌｙ−ｇａｓ−ｐｒｏ−
ｇｌｓ−ｇＬｙ−α！α−ｇｌｓ−ｃｙｌ−αＩｌ’ｌ
）−ＱｔＷ−αｓｔｓ−ｇｔｓ−ｓｇｒ−ａｓｐ−ｃｙ
ｓ−ｌｙ＆−６１８−αｌｔｘ−ｇＬｙ−ｇｌｎ−ｔｒ
ｐ−ｉｔｍ−１ｙｓ−ｃｙｓ−ａｒｇ−ｃｙｓ−ｐｒｏ
−ｉｒｐ−ｔｙｓ−ｔｒｐ−ｈｉｓ−ｉｔａ−ｔんデー
ｇＥｙ−ｇＬｓ−ｇｌｙ−ｐｒｏ−ｃｙｓ−ｔｋｒ−ｃ
ｙｔｔ−ｇｌｓ−ａｒｇ−ｇＬｙ−１ｍｓ−Ｌｙｘ−１
ｙｓ−ｃｈｒ−ｃｙｔｔ−ｉｔａ−ｓｇｒ−Ｌｙｓ−ｌ
ｍｓ−ｍａｒ−ａｓｐ−ｐｅａ−ａａｎ−ａｒｇ−αｓ
ｎ−ｇｔｓ−ｔｒｐ−ｌｍｓ−８−デー より成り’，ＦＡＢＭＳに従う全ポリペブチドに対する
分子量：７２６７． 分画Ｈ，： アミノ末端アミノ酸配列は： Ｈ２Ｎ−αＬａ−１ｙｓ−ａＥａ−Ｌａｓ−ｐｒｏ−ｐ
ｒｏ−ｇｌｙ−ｓ＊ｒ−ｖａｌ−ｃｙｓ−ｃＬｓｐ−ｇ
Ｌｙ−ａｓｎ−ｇＬｓ−ｓａｒ−ａｓｐ−ｃｙｓ−ｔｙ
ｓ−ｃｙｓ−ｔｙｒ−ｇｔｙ−ｔｙｓ−ｔｒｐ−ｈｉｓ
−ｔｙｓ−ｃｙｓ−ａｒｇ−ｃｙｓ−ｐｒｏ−ｔｒｐ−
ｔｙｓ−ｔｒｐ−ルｉｓ−ｐｈａ−ｔｈデーｇＬｙ−ｇ
Ｌｓ−ｇＬｙ−ｐｒｏ−ｃｙｓ−ｔｈｒ−ｃｙｓ−ｇＬ
ｕ−Ｌｙｓ−ｇｔｙ−ｍａｔ−ｔｙｓ−ｈｉｓ−ｔｈｒ
−ｃｙｓ−ｉｔｍ−ｔんｒ−Ｌｙ８−ｔｇｓ−ｈｉｓ−
ｃｙｓ−ｐｒｏ−ａｓｎ−ｔｙａ−ａｔａ−ｇｔｓ−ｔ
ｒｐ−ｇｔｙ−ｔ　ａｓ−ａｓｐ−ｔｒｐ− より成り；イオンースブレイ（　Ｊａｎ　−　Ｓｐｒａ
ｙ　）ＭＳに従う全ポリベプテドに対する分子ｉ：　７
７９３　．？画Ｉ： Ｈ２Ｎ−ａａｐ−ｃｙｓ−ｖａｌ−ｇＬｙ−ｇＬｓ−ｓ
ａｒ−ｇＬｎ−ｇｌｎ−ｃｙａ−ａｌａ−ａｓｐ−ｔｒ
ｐ−ａｌａ−ｇＬｙ−ｐｒｏ−ｈｉｓ−ｃｙａ−ｃｔｔ
ｓ−ａｓｐ−ｇｔｙ−ｔｙｒ−ｔｙｒ−ｃｙｓ−ｔｈｒ
−ｃｙｓ−αｒｇ−ｔｙｒ−ｐｈａ−ｐデｏ−１ｙｓ−
ｃｙｓ−ｉＬｍ−ｃｙｓ−ｖａｌ−Ｇａｎ−ａｓｎ−ａ
ｓｎ−ＣＯＮＨ，；ＦＡＢ　　ＭＥ　：　４　１　５８
　．分画Ｊ： Ｈ，Ｎ−ａｓｐ−ｇｌｕ−ｐｒｏ−ｃｙｓ−ｉＬａ−ｐ
ｒｏ−Ｌｍｓ−ｇＬｙ−ｔｙａ−ｓｅｒ−ｃｙｓ−ｓａ
ｒ−ｔｒｐ−ｔｙｓ−ｉｔ　ａ−ｇｔｙ−ｔｈｒ−ｐｒ
ｏ−ｔｙｒ−ｃｙｓ−ｃｙｓ−ｐｒｏ−ｈｉｓ−ｐｒｏ
−αｓｐ−αｓｐ−ａｒａ−ｇｔｙ−ａｒｇ−ａｒｇ−
ｔｈｒ−ｔｒｐ−ｃｙｓ−１ｍｓ−ｖａｌ−ａｓｐ−ｔ
ｙｒ−ｓｇｒ−αｒｇ−ｐｈａ−ｑαｔ−ｔｈｒ−ｉｔ
ｍ−ｃｙｓ−ｓｓｒ−ｇｔｙ−ａｒｇ−１ｙｓ−ｔｙｒ
−ＣＵＮＭ，；ＦＡＢ　　ＭＳ　：５５０６． 分画Ｌ１： アミノ末端アミノ酸配列は： Ｈ２Ｎ−ｉＬａ−ｖａｔ−ｇＬｙ−ｇｌｙ−１ｙｓ−ｔ
ｈｒ−ａｌａ−Ｌｙｓ−ｐｈａ−ｇｌ　ｙ−ａｓｐ−Ｇ
ｙｒ−ｐｒｏ−ｃｒｐ−ｎｅ　ｔ−ｖαｔ−ｍａｒ−ｉ
ｔａ−ｇｌｎ−ｇｔｎ−Ｌｙｓ−ａｓｎ−１ｙｓ−１ｙ
ｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｐｈａ−αｓｐ− より成り：全ポリペプチド■対する概算分子童約２０，
０００． 分画Ｌ，： 実施例９に記載したようにして得たポリベブチド．分画
Ｍ： アミノ末端アミノ酸配列は： Ｈ，Ｎ−ｇ　Ｌｓ−ａＬａ−　ｔｈｒ−ｇｌｓ−ａｌａ
−ａＬａ−　Ｊｙａ　−ｍｌ　−　１　ｍｓ−ｘｇｒ−
αｓｔｓ−１ｍｓ一αｓｐ−ｇＬｍ−ｔｋｒ−ｖａＬ−
ａａｐ−ｐｒｏ−より或り；全ポリベプデドに対する概
算分子量約ｓｏ，ｏｏｏ． アゲレノプシスｌｌアペルタ（　Ａｇｇｌｔｎｏｐａｉ
ｓ８ｐ−デＣα）からの毒液の分画中に存在する化合物
に関する本明細書中の記載という利点を与えられて、今
や，全毒液からの単離／精製による以外の方法によって
，上記化合物を得ることが可能である。このような方法
はすべて、本発明の範囲内である。例えば、分画Ａ’，
　ＡＩ．ＡＨ　，　Ｂ１　，　Ｂ２およびＥによって包
含されるポリアミン類は，合成法によって直接製造する
ことができる。分画Ｇ，Ｈ，，Ｉ，Ｊ．Ｌ１、Ｌ，およ
びＭによって包含され，それに対する全アミノ酸配列が
記載されているポリペブ？ド類は、周知の方法に従って
、試験管内蛋白質合成により合成して製造することがで
きる。例えは、このようなポリベプチド類は，標準的た
メリフィールド（　ｋｈｒｒｉｆｉａｌｄ　）化学また
は当技術分野に習熟した人々■は周知の他の固相化学を
使用する、ＡＨＩ　　４　３　０Ａ　Ｗ相ベプチド合成
器（９４４０４　　カリンオルニア州，フォスター●シ
テイ（　Ｆｏｓｔａｒ　Ｃｉｇｙ　）　．　　リンカー
ンーセンター〇ドライブ（　Ｌｉｎｃｏｌｎ　Ｃａｎｃ
ｅｒ　Ｄｒｉｖｅ　）、８５０、アブライド●パイオシ
ステムズ社（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｇｍｓ，Ｉ
ｎｃ．　）　］を用いて製造することができる。これら
のポリペプテドはまた、そのポリペブチドまたはその一
部をコードしている配列のクローニングによる組換えＬ
）ＮＡ技術を用いて製造することもできる。それに対す
るアミノ酸配列Ｄ一部のみが公知であるこれらのポリペ
プチドは、例えば．現在公知のアミノ酸配列悄嶽を利用
丁るハイブリッド形成プローブの使用によって、クロー
ニングすることができる。組換えＬ）ＮＡ技術および試
験管内蛋白質合成の組み合わせもまた、本発明のポリベ
プチドの生成に使用することができる。

そのポリベプチドの機能Ｃ影響を及ぼさないか，または
実質的に影響を及ぼさない一定のアミノ酸置換を、ポリ
ペプチドにおいて行なうことができることは、当技術分
野においては周知である。可能である正確な置換によっ
て，ポリペプデドからポリペブチドへ変わる。許される
置換の決定は２当技術分野に習熟した人々には周知の方
法に従って行なわれる。従って、事実上同一のアミノ酸
配列および事実上同一のカルシウムチャンネル遮断活性
を有するすべてのポリペプテドは，本発明の範囲内であ
る。

式 Ｈ （式中、ＲはＨまたはＯＨである） の本発明の特定のポリアミンの生成のための合成反応工
程を，下の反応工程ＡないしＤに示す。

反応工程Ａ Ｈ Ｈ，Ｎ／＼／ゝ”Ｎ′−／″′ＣＭ　　＋　　Ｅｒ　　
　　Ｎ−ＢＯＣＨ （Ｉ）　　　　　　　　　　　　　　　　（ＩＤＨ ＢＯＣ−Ｎ／＼／＼Ｎ′＼／ゝノＮ＼／＼ＮＣＮＨ　　
　　　　Ｈ （ＩＩＩ） ＢＯＣ ＢＯＣ （Ｖ） ＥＯＣ Ｈ （Ｘ） 反応工程Ｂ Ｈ Ｈ （ＸＩ） ＥＯＣ （Ｘ１） １ （Ｘｍ） Ｈ ＩＯＣ （ＶＩ） （■冫 １ Ｈ ＢＯＣ ＥＯＣ （■冫 １ 反応工程Ｃ Ｈ Ｈ （．ＸＸ） （ＸＩＸ） １ （ＸＸＩ［） （ＸＸＩ） 反｛６工程Ｄ Ｘ 十 ＸＩＪＩ また番裏 ＸＸ社 ［ｇ’＝Ｈ（ＸＮ）， ま Ｅ’　＝　ＯＣＲ？ＱＣＨｓ　（　ＸＸＩＩＩ）　Ｊ反
応工程Ｇ Ｘ ＋ ＸＸ糧 またをよ ＸＸＸＩ （ＸＸＸｊｌＪ） または リニたは ＯＣＩｉ２０ＣＭ， （ＸＸＸＶ） 反応工程Ｅ （ＸＸＶＩ） １ （ＸＸ％’ｌｌ） （ＸＸＶ！） 反応工程Ｆ （ＸＸＩＸ） １ （ＸＸＸＩ） （ＸＸＸ） 反厄ヱ８Ｇ （クづ券】 （ＸＸＸＩＶ） または ↓ （ＸＸＸＶ） （ＸＸＸＶＩ） またほ 反応工程Ｈ ＥＯＣ ＸＸＸ糧 〜や ｘＸ■ （　ＸＸＸＩＸ） ↓ ＜ｘＬ’ｔ 反応工程Ａに従えば、式Ｘのポリアミン中間体化合物は
、ジアミノブタンから始まる一連の段階によって製造さ
れる。反応工程Ａに従って式Ｘの中間体化合物を製造す
るのに適丁る反応条件は、実施例ｌ１、ＡＴｇいしＩに
示される。反応工程Ｂは、式Ｘ■の中間体化合物の製造
方法を具体的に説明している。反応工ｉａＢに従ってこ
の中間体を製造するのに適する反応条件は、実施例１１
，ＪないしＬに示される。式ＸＸＩの中間体化合物の製
法は、反応工程Ｃに示されている。反応工程Ｃに従う式
ＸＸＩの化合物の製造に適丁る反応条件は、実施例１２
，ＡｒｊいしＦに示される。式ＸＶＩおよびＸＸｖの本
発明のポリアミン化合物の製法は、反応工程Ｄに示され
ている。式ＸおよびＸ■またはＸおよびＸＸＩの中間体
化合物の結合およびこれに続く式Ｘ■およびＸＸｖの化
合物の製造に適する反応条件は、実施例１１％ＭＴｘい
しＯおよび実施例１２、ＧＴ，ＣいしＩ１に示される。

反応工ＩａＥおよびＦは、各々、中間体化合物ｘＸ■お
よびＸＸＸＩの製造方法を具体的に説明している。反応
工程Ｅに従ってこの中間体を製造するのに適する反応条
件は、実施例１３、ＡないしＣに示される。反応工程Ｆ
に従うこの中間体の製造に適する反応条件は、実施例１
４、ＡＹｘいしＣに示される。式ｘｘｘｖｉおよびＸｘ
Ｘ■の本発明のポリアミン化合物の製法は、反応工程Ｇ
に示されている。式ＸおよびＸＸ［　またはＸおよびＸ
ＸＸＩの中間体化合物の結合およびそれに続く式ｘｘｘ
ｖｉおよびＸＸｘ■の化合物の製造に適する反応条件は
、各々、実施例１３、ＤないしＦおよび実施例ｌ４、Ｄ
たいしＦ，に示される。

反応工程Ｈは、式ＸＬＩの本発明のポリアミン化合物の
製法を具体的に説明している。式ＸｘＸ■の中間体化合
物の製造、その、式ＸＸ■の中間体化合物への結合、お
よびこれに続く式ＸＬＩの本発明のポリアミン化合物の
製造、に適丁る反応条件は実施例１５に示される。

作用 本発明のポリアミン類は、興奮性アミノ酸神経伝達物質
に可逆的に拮抗するが、この神経伝達物質は、無脊椎動
物および脊椎動物を含む種々の生物の神経系の細胞のよ
５　Ｔｘ細胞に影響を及ぼすものである。本明細書全体
を通して使用される脊椎動物という語は、嘴乳動物を包
含丁ることを意味する。本明細書全体で使用する無脊椎
動物という語は、例えば、昆虫、外部寄生虫および内部
寄生虫、を包含丁ることを意味丁る。上述したように、
分画Ｂ，のポリアミンは、また、無脊椎動物および脊椎
動物の、心臓血管を含む神経および筋肉系の細胞のよう
は種々の細胞中に存在丁るカルシウムチャンネルを可逆
的に遮断てる。

本発明のポリアミン類が興ＩＩ性アミノ酸神経伝達ｖＪ
質に拮抗する能力は、下記の手順に従う、それらが、新
生児ラットの小脳におげるＮ−メテルーＤ−アスパラギ
ン酸に誘発される（ＮＭＤＡ）、ｃＧＭＰの上昇を遮断
丁る能力によって証明される。

１０匹の生後８−１４日のウイスタ−ＣＷｉｇｔａｒ）
ラットから小脳７ｋｊぼやく切除し、４℃のクＶブス＜
ｙｘｒａｂｓ）／’Ｘ炭酸塩緩衝液、ｐＨ７．４、中に
入れた後、マクイルウエイン（Ｍｃｌｌｖａｉｎ）組織
チョツパー〔英国サレイ（Ｓｕｒｒｅ耐ｓゴムスホール
（Ｇｏｖｓ．ａｈａｌ〜、ザ・ニクル・ラボラトリー・
エンジ二アリング社（Ｔｈ＃Ｎｉｃｋｌｅ　Ｌａｈｏｒ
ａε０１゜ｙＥ町ｉｓｍｇｒ軸ｃｐ　Ｃｏ．Ｙ〕を用い
て、０．５闇×０．５鵡の切片に切る５，こうＩ９，て
得られる小脳片を、３７℃のグレブスＣＫｒ　ａ　ｂ　
ｓ　）／　ｍ：炭酸塩緩衝？１ｆｆｉ１００ｍ７に移し
、Ｃれな連続的に９　５　：　５０，／ＣＯ，で平衡さ
せる。小脳片紮、このような方法で、緩衝液奮３回こり
かえで９０分間インキコーベートする。ぞの後、緩衝液
をデカント１、２、組織を遠心分離機６τかけ（１分，
３２０Ｏｒ．ｐ．ｍ．）、この組織な２０′！Ｒｔのタ
レブス（Ｋｒｔｒｂｓ）／鵞炭酸塩緩衝液中に再懸濁さ
せる。次Ｖｒ．、２５０μｌ，づつのアリコート（ほぼ
２岬）をたり除いて、１．５ｄｔ７）ミクロフスージ（
↑れｃｒｎ八ｃｐｓ）管内に入れる）ｃｌＪ’！−もの
管に、貯Ｒ浴液からの研究中の化合’６ｉｏμｔを加え
、次にＮＭＤ　Ａの２．５情Ｍ溶液１０μｔを加えて、
反応な開始させろ。最終的なＮＭＤＡ濃度は１００μＭ
である。対照にほＮＭＤは聖加えない。これらの管な、
Ｓｔ水浴中で３７℃でｘ分間インキュベ−１した後、５
０情ＭトリスーＣｔ、５情ＭＥＩ’ＪＴＡ溶液７５０μ
ｔを加えて反応紮停止させる。

これらの管を、直ち尼、沸とう水浴申［５分間入れる。

次に、名々の管の内容物慰、ｄ１カレベル３に化ットＬ
、たブローブ音波破砕機を用い−’［：’１５秒間膏彼
破砕丁”Ｚ）。１０マイクロリットルを除去１一で．．
違肉質を、Ａ％αｌ．　ＩＢｏｅｈａ憔、１．　０　０
　：　２　０且−２２０（１９７９ノのロウリイ（Ｌｏ
ｖｒｙ）の方法κよって決定ｆる。次に、管會、遠心分
離機にかげ（５分、１０，０００Ｘｆ入　１００μＬの
上澄液をとり分けて、供給者の方法に従クて、ニス〜・
インクランド賀クレア（ＮｓｗＥ悌ｇｉ乳ｄＮ猛ｃｌθ
品ｒ）（マナチ．Ｊ−−−−セツツ州ボストン市）のｃ
ＧＭＰ　Ｉ？ＩＡ測定法銭月１いて、環状ＧＭ．Ｐ　（
　ｃ　ＧＭ　Ｐ　）の水準を分析評価する。ｆ一夕は、
蛋白質１９当たりの発生したピＪ毛ル（Ｐ情ｏｉＯとＧ
ＭＰとＩ一て報告丁ろ。

本発明のポリベブチド類は、無脊椎動物および脊椎動物
の神経および筋肉系内の細胞のような種々ノ細胞申紀存
在するカルシウムチャンネルを不可逆的ｊＦ′．漏断゛
１′ろ。

分画Ｂ１のポリアミンおよび分画Ｇ，　１４、Ｈ，、Ｉ
、、Ｊ，Ｋ％Ｌ，，　Ｉ，ｉδよびＨのポリベブテドが
カルシウムチャンネル浅遮断する能力は、下記の手順に
よって証明されろ。分離しｌ，−ラットの新皮質のニュ
ーロンを、２淋ＭのＣａ　（１？　Ｚ２および１哄の牛
の血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有Ｊ゛るｐＨ７．４の
クレブス（Ｋｒｅｂｓ）盈炭酸塩緩衝液中Ｋ．懸濁ざせ
る。ニコー−一ロンを、遠心分離ＶＣよって沈殿さぜ、
＋ｊ加釣に１ｔｔＭフラ（ｆｏｒｔｓ）　２／　ＡＭ　
Ｃ　６　３　１　７　８ミズーリ州セントルイス私書箱
ｉ４ｓｏｓ、シグ１゛・ケｉ　ｆｊ　ル社ＣＳｉｇｍａ
　Ｃｋ．ａｍＣＯ．　）　ｌ）　’．ｙ：含有−′ｒろ
同じ緩衝液中に再懸濁させる。この細胞を、３７℃で１
５分間培養し、洗浄した後、フラ（ｆｖ．ｒａ）　２／
ＡＭｆｇ含まない同じ緩衝液中でさらに１５分間培養す
る。次ＶＣ：細胞を、今度はＪ．．　５　ｍｕ　ＣαＣ
Ａ，を含有丁る上記緩衝液中で洗浄し、約５ないし１０
分間ｄ縮細胞懸濁′疲として室温で平衡さゼる。石英キ
ュベットに、予熱１〜た（３７℃）、１．５ｍＡ／Ｃα
Ｃ　．ｃ，：ｈ）　Ｊ．び１０溝Ｍグルコ−ス聖含有１
るＢＳＡを”言−！：んＣい緩衝版１，２ｚ＄を′刈；
え、次に上で製造［〜？こ濃縮細胞懸濁液０、３ｒｌｌ
ｉＯな加えろ。このキク・ベットを、憶温（３７″Ｃ）
の、磁気かくはん機欠とり−ｒ　（ｔ４　タホルター内
だ入れて、バー４′ノ・エルマー（Ｐｅｖｋｉｎ−Ｅ１
ｔｎａｒ）Ｇ　５　０　−　４　０　（　０　６　８　
９　７、コネテイカット川、ウイル１・ン、バーキ，ン
・エルーＩ・一（Ｐｅｖハ粘Ｅｌ淋岬）〕のよ５Ｔｊ、
螢光分光光度針を用１，・で螢光を，ｆｌｌｌ定丁る。

螢光シグナルは、約１分間安定化さ−１ｔる。次に、適
当１よα度の、タレブス（ｆｒｓ６ｇ）重炭酸塩緩衝液
中の研究中のｆじ合物の貯ＮＪ［１−４μｔを、このキ
コーベットに加える。

ネメス（１’ｈｍ＠ｔ．　ｊａ　）外、．１．　Ｅｓｏ
ｌ．　Ｃｈ、ｓｍ．２６２’５１８８（’ｉ９８７）の
確立された方法ｙ用いて、螢光シグナルの較正およびフ
ラ（ｆｕｒａ．）−２漏出補正を行なう。谷々、の試験
が完了し？−時点で、最大螢ｉ儀（ｊ？’混ａＳＳ）を
、イオノマイシン（ｉ姉■ｍｙＧ仔）の添加によ−クて
決定し、最小螢光値（Ｆｍｉ幻を、、それｌＣ続いて５
１％ＭＥＧＴＡｆ加えてカルシウムをギ１ノート化させ
るこどＫ．Ｊ：．り決定１−る。先述の方法娶用いろと
、王題化合物によるカルシウムチャンネル遮断は％その
主題化合物欠添加した時の螢光の減少によって、起こる
ことが示される。

分画Ｇ，　Ｈ，、Ｉ，　Ｊ．　Ｌ，．　Ｌ，およびＭの
ポリベプチドと事実上則しアミノ酸配列を有しており、
上記のポリペプチドと事実上同じカルシウムチャンネル
遮断活性を有するポリベプチド類も本発明の範囲内であ
る。

本発明のポリアミン類は、それ自体で興奮性アミノ酸神
経伝達物質に拮抗するのに有用である。

そういうものとして、本ポリアミン類は、また、無脊椎
害虫の制御、および、発作、脳卒中、大脳虚血、アルツ
ハイマー病のようなニューロン変性疾患およびてんかん
のような浦乳動物における興奮性アミノ酸神経伝達物質
によって媒介された病気および状態の治療、にも有用で
ある。上記のポリアミン類はまた、晴乳動物における精
神療法剤としても有用である。さらに、本ポリアミン類
は、神経系の細胞を含む（但しこれに限定はされない）
細胞の生埋学の研究に有用である。

本発明の、分画Ｂ，のボリアミンおよびポリペブチド類
は、それ自体で、カルシウムチャンネル遮断剤として有
用である。こういうものとして、これらの化合物は、無
脊椎害虫の制御および、アンギーナ、高血圧症、心筋症
、正室性不整脈、食道アカラシア、早産およびレイノー
病のような、嶋乳動物の細胞中のカルシウムチャンネル
機能によって媒介される病気および状態の治療、にも有
用である。さらに、これらの化合物は、神経および筋肉
系の細胞を含む（但しこれに限定はされ１．い）細胞の
生理学の研究に有用である。

本発明のポリアミン類およびポリペプチド類の薬学的に
受容できる塩類も、本発明の範囲内である。このような
塩は、当技術分野に習熟した人々には周知の方法によっ
て形成される。例えば、本ポリアミン類の酸付加塩およ
び本ポリペプチド類の塩基塩は、常法に従って、製造す
ることができる。

本発明のポリアミンまたはポリペプチドを噛乳動物に投
与したくてはならないとき、このものは、単独で、また
は、標準製剤法に従って薬剤組底物の形で薬学的に受容
できるキャリャーまたは希釈剤と組み合わせて、投与す
ることができる。本ポリアミン類およびポリペプチド類
は、軽口的に、または、これらのポリペプチドについて
好ましい非経口投与経路で非経口的に、投与することが
できる。非経口投与には、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮
下および局所投与がある。

本発明のポリアミンまたはポリペプチドの経口使用Ｏた
めには、この化合物は、例えば、錠剤またはカプセル剤
の形で、あるいは水溶液または水性懸濁液として、投与
することができる。経口使用用錠剤の場合には、通常使
用されるキャリャーとしては、乳糖およびコーンスター
チがあり、そしてステアリン酸マグネシウムのような潤
滑剤が通常、添加される。カプセル剤の形での経口投与
用には、有用な希釈剤は乳糖および乾燥コーンスターチ
である。経口使用のために水性＠濁液が必要とされろと
きは、活性成分を、乳化剤および沈殿防止剤と結合させ
る。所望ならば、特定の甘味および／または香味料を加
えることができる。

筋肉内、腹腔内、皮下および静脈内使用のためには、本
活性成分の無菌溶液が通常製造され、これらの溶液のｐ
Ｅは、過当に調整され、緩衡化されねばなら々い。静脈
内使用のためには、溶質の総濃度は、その製剤を等張に
するように調節されねばならない。

本発明のポリアミンまたはポリペブチドまたはその塩を
、ヒトの被験者に使用するときは、日用量は、普通は処
方する医師によって決定されるであろう。さらに、用量
は、その患者の症状の重さおよび投与されろ特定化合物
の効力と同様に、個々の患者の年令、体重および反応に
従って変わるであろう。

本発明のポリアミンまたはポリペプテドまたはその塩を
；無脊椎害虫の制御に使用するときは、上記の化合物を
、上記無−Ｖａ！動物に直接投与丁るか、または上記無
脊椎動物の環境に提供する。例えば，本発明の化合物を
、上記無青推動物上に溶液と！一て噴霧するここかでき
６，上記無脊椎動物の制御に必要な化合物の量は、その
無杆椎動物および環境条件に従つ′１：変わり、その化
合物を適用する人によりで決定されるであろう。

本発明のポリアミンまたはポリペプチドまたは七の塩を
、細胞の生埋学的な研究に使用１“るεき＆，ｔ，上記
化合物な、当技術分野に習熟した人々（Ｃは周知の方法
に従って、細胞に拉与ｊ”る。例えば、上記化合物を、
過当な生埋学的緩衝液中の細胞に投辱丁ることができる
。このような研究に使用するための本発明・の化合物の
適当な磯度は、１００μＭである。しか１〜ながら、こ
のような研究における上記化合物の濃度は、１００μμ
より大きいかまたははるかに小さくてもよい。投辱され
る化合物の倉は、周知の方法に従って、当技術分釘に習
熟した人によって決定されるであろう。

実施例 ８４１０Ｂ　　−”−夕州ンルト・レイク・シティのナ
チ瓢ラル・プロダク１・ザイエ／シーズ社（＃ａｔｓｒ
ａｊ　ＰｒｏｄｓｅＬ　Ｓｔ，ｉｏｎａｏａ　Ｉｔｅ．
ｅ→から手に入れ′１：，．約へ７８℃で凍結状態にし
て貯蔵していたアゲレノプシス・アベルタ（Ａｇｅｌｍ
ｎｏｐａｉａ岬ａｒｔｅ＃）の全毒液を、融解させ、そ
の１０ないＬ６０μｌの量を２００μｌに希釈して、Ｃ
一１８バイグック（Ｖｙｄａａ■）（２２ｍＸ２５０ｍ
、３ｏｏｉ孔径、１０μ粒度）カラム上にのせ、流量ｌ
ら岬／分および、５％→２０％Ｂ，９５％一８０％ＡＣ
−０−４３０分〕次［２０％→７０％Ｂ，８０％→１−
３０％Ａ　Ｃ　３　０−＋５　５分コ（　：　コ″Ｃ？
　Ａ．　＆’！．、０．１％ＴＦＡ水溶液であり、そし
てＢは７セトニトリルである）の直線勾配プログラムを
用いる浴媒系、を使用して溶離した。ピークの検出は、
２２０　　２３０ｓｉｍの単色光により実施し、分画は
、ＪＳＣＯ／”″ＦＯＸＹ″分画収集器およびＩＳＣＯ
２１５９ビーク検出器を用い−Ｃ集めた。分画な、２０
分から６０分まで集めた。ピーク検出に基づいて次の分
画な集めた： 約２１分 約２２．７５分 約２７．５分 約３８分 約３９分 約４０分 約４０分 ｆノ４３分 約４８．３分 Φｐｅｒｌｃｈ　）の全毒液な・、実施例１に記載し７
たようにし℃得工、Ｃ−１８バイグツク（Ｖｙｄａａ［
Ｆ］）力〉ム上にの娃た。このカラムを、流量１５μ／
分および、５％→＋１０％Ｂ，９５％→９０％Ａ〔〇一
４３０分〕（ここ’ＱＡは、０．１％Ｔ　ＥＡ水溶液で
あり、そし′″ＣＢは、ア叱ト二トリルである）の直線
勿配プログラムを用いる溶媒系、な用い℃溶離した。ピ
ーク検出および分画収集は実施例１に記載したようにし
て行な・つた。約１２．５分で溶出する分画Ａ′を得た
。次に分画Ａ′を、標準法に従って、溶離剤からの凍結
乾燥εそれに続く蒸留水からの凍結乾燥によって、スペ
クトル分析用に調製した。

分画Ａ′によつで包含される化合物の構造を、次に、Ｆ
ＡＥ　　ＭＳの使用によって決定した。このようにして
得たデータおよびそれから推論された構造は、次の通り
である： Ａ’　：　ＦＡＢ　Ｍ．Ｓ　：Ｍ／Ｚ４　５　３　ＣＭ
＋１　）構造：ベンズアギド，Ｎ−Ｃ２０−アミノー４
−ヒドロキシ−４．８，　１２． １７−テトラアズアイコス−１−イ ル）−４−ヒドロキシ ？施例１に記載したようにして得た分画Ａを、Ｃ−４バ
イダツク（　Ｖｙｄａａ”）　（　１　０　ｗｘ　Ｘ　
２　５　０　Ｓｏｌ、３００Ａ孔径、５μ粒度）カラム
上にのせ、そこから、流量４，■ｉｕ／分、および、０
％→１０％Ｂ、１００％→９０％，４（Ｑ→３０分〕（
ここでＡは、０．１％ＴＦＡ水溶液であり、セしてＢは
、アセトニトリルである）の直線勾配プログラムを用い
る溶媒系、を使用して溶離した。ピーク検出は、クオー
ターズ（ｋＶａｔａｒａ　）　９　９　０ダイオードプ
レイ検出器を用いて行ない、分画収集は、実施例１に記
載したようにして行なった。２つの分画を、次のように
して得た： 分画　　　　　　溶出時間 Ａ，　　　　　　約７分 Ａ，　　　　　　約９分 分画Ａ１およびＡｔを次に、標準法に従って溶離剤から
凍結乾燥させ、続いて水から凍結乾燥させることにより
、スペクトル分析用に調製した。

次に、分画Ａ，およびＡ，により包含される化合物の構
造を、ＦＡＢ　ＭＳの使用によって決定した。

このようにして得たデータおよびそれから推論した構造
は次の通りである： Ａ１： ？ＡＢ　ＭＳ　：Ｍ／２　４　６　９　ＣＭ＋　１　）
、高分解能：２．Ｏｍμの誤差をともなうＧ’，ｓＥ，
，Ｎ６ｏに対する計算値４６９，３８６３ 構造：ヘンズア■ド，＃−（２０−アミノー４−ヒドロ
キシ−４．８，１２．１７テトラアズエイコス−１−イ
ル）−２．５一ジヒドロキシ ＯＢ Ａ，二 ＦＡＢ　　ＭＳ：Ｍ／Ｚ４４９ＣＭ＋１）．４３３、３
７６、２６０、２０３ 構造：１Ｂ−インドール−３−アセトアミド，＃−（１
６−アミノー４−ヒドロキシ−４．８．１３−｝リアザ
ヘキサデス−１一イル）−４−ヒドロキシ １００％Ａ〔Ｑ→５分〕、次に０％→＋１０％Ｂ１Ｚｏ
ｏ％→９０％，４（５→２０分］〔ウォーターズ（Ｆａ
ｔｇｒ＃）曲線１〕次に１０％→２０％Ｂ１９０％→８
０％Ａ〔２０→３０分〕〔ウォーターズ（Ｗａｔａｒａ
）曲線６〕次に２０％→５０％Ｂ、８０％→５０％Ａ〔
３０→４０分〕〔ウォーターズ（ｆａｔ＊ｒｇ）曲線１
１〕（ここでＡは、０．１％ＴＦＡ水溶液であり、そし
てＢは、アセトニトリルである）の非直線勾配プログラ
ムを用いる溶媒系、を使用して、溶離して分けとった。

ピークの検出は、ウォーターズ（Ｌｌ’ａｔ−デｓ）９
　９　０ダイオード・アレイ検出器を用いて行ない、分
画収集は、実施例１に記載したようにして行なった。２
つの分画な次のようにして得た： 実施例１に記載したようにして得た分画Ｂを、ｔ’　−
　４バイダツク（Ｖｙｄａａ■）（２２１富Ｘ２５０ｍ
、３００，Ｊ孔径、１０μ粒度）カラム上にのせ、流量
１５紅／分および、Ｏ％→０％Ｂ，１００％→Ｂ，　　
　　　約１８．５分 Ｂ，　　　　約２１．５分 次に、これらの分画を、標準法に従って、浴離剤から凍
結乾燥させ、続いて水から凍結乾燥させることによって
、スペクトル分析用に調製した。

分画Ｂ，により包含される化合物の構造｛佳、ＦＡＢ　
ＭＳの使用によって決定′され、その結果は、次の通り
である二 ノ”ＡＢ　　Ｍ．Ｓ：Ｍ／；ｌ５０６　　（＃＋１　）
　　．　　４８９　，４６１、４３３、３７８、３３３
、２６０，２３１，２１５、２０３、）５５，１１９高
分解能’．　Ｃ２４Ｈ　４＠Ｎ−ｇ　（Ｊ　Ｂに対する
．ｉ＋鉤．俯５０６。３８１０ 檜造：ＩＢ−インドール−３・−ア七トアミド，＃−（
２０一アぱノー４−ヒドロキシ−４．８．１２．１７−
テトラアズエイコス−１〜イル）一・４−ヒドロキシ Ｄ 分画Ｂ，によつ工包含される化合物の分子弱は、ＦＡＢ
　ＩｄＳの使用によって決定され、その結果は次の通り
である： ＦＡＢ　ＭＳ： 高分解能：　Ｃ，Ｅ４ａＩ％ｉ，（八に対する計算値５
０５．３８６１ 実施例１１Ｃ記載しブ，二ようにし′ｆ：得た分画Ｅを
，，標準法に従つ−〔、溶離剤から凍結乾燥きせ続いて
水から凍結乾燥さ峻ることによって、スペクトル分析用
に調製ｔ７た。分画Ｅによって包含される化合物の構造
は、ＦＡＢ　ＭＳ３−ＮＩｄＲおよび″”Ｃ＝ＮＭＲを
用いて決定した。このようにして得たデータおよびそれ
から推論される構造は、次の通りである二 ＦＡＢ　ＭＳ：Ｍ／Ｚ４９０＜Ｍ＋ｌ）４７２、４３３
、３６２、３３３、２６０、２１５、２０３、１７７、
１５５、１１９ 高分解能：Ｏ．６ｕμの誤羞を伴な５　Ｃ，，Ｅ４，−
Ｎ，０，　Ｋ対″ｔる創算値４９０．３８６０１Ｅ−Ｎ
ＭＲ（５００Ｍ糾ｐ　ｄ６　−　１）駐ＳＯ）：１０．
８９（ａ，１．＆）、８．９　０−７．８　５　（ｍ，
　６Ｂ）、７．５５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｅｓ，ＩＢ）、７
．３４Ｃｄ，Ｊ　＝８．０Ｈｓ　．　ＩＥ　）、７．１
９（＃．１ｆｆ）、７．０８（　ｄｄ，　ノー８．０Ｅ
ｇ　．　！＝８．０１１ｍ．　１Ｈ　）、６。９８（ｄ
ｄ，　！＝８．ＱＢが，Ｊ＝８．ＯＩｌ隼，ＩＢ）、３
．５００＊．２１１）、３．１３（ｓ，２Ｅ）．．３．
０：３−２．８２（ｍ，１８Ｅ）、１．．８８（情，６
Ｂ）、１．７　８　（惇，２Ｂ）、１，ら２（情，４Ｂ
） ”Ｃ−ＮＭＲ　（　１　２　５．７　６１ｄｈ〜，１，
．−ｎＭｓｏ）：１７　０．９　４、１３６．１０、１
２７．１７，１２３。７５、１　２　０．９　２、１１
８．６７、ｉ１８、２６、１１１．３３、１０８．９７
，５７．３９、５７．０？、４６．１２、４６１２、４
４。０６、４　３．８　９、４　３．８　９．、３６５
２、３６．２２、３之６７８、２６．７１、２　３−７
　９．．２　３．０　６、２２．６５、２２．６５、２
２−４５ 林逍；ＩＨ−インドール−３−ア→二１・アミト゛，Ａ
／−（２０−アミノー福一ヒドロキ’：’　＝　４　＋
８．１２．１７−テトラアズエイコス−１−イル） 別法Ｌ１−で、Ｌ７かも好ましくは、使用した溶媒系お
よび直線勿配プログラムが、０％→＋２０％Ｂ，１００
％・＋８　０　％　Ａ　（　０−４＝３　０分〕テアリ
、２２０ｓｍでピーク検出を行なったことを除き、全＝
ｍを、実施例１＆Ｃ記載したよう１（シで分別した。約
２６６０分で溶出した分南な、ダイナツンクス・フｚ＝
ル（１）ｙ＊５ｍａｘ　Ｐｈａｎｙｌ　）カラム（４、
６關×２５０隨、６０，４孔径、８μ粒度）上にのせて
、流量１ｄ／分および．１０％Ｂ、９０％Ａ（ここでＡ
およびＢは実施例１に記載した通りである）εい５イン
クラテイツク（　ｉａｏｅｒａｔｉｅ．　）条件を用い
′″Ｉｌ：溶離した。ピーク検出は、ウォーターズ（〃
′αｔａｒｓ）９９０ダイオード・アレイ検出器（　２
　＝　２　２　０　ｓ　ｍ＝　）を用いて石ない、分画
は実施例１１Ｃ記載したようにして集めた。約５５．２
７分℃溶出１”る分画を、標準法に従つ−Ｃ溶離剤から
凍結乾燥させ、続いて水から凍結乾燥さ姑て、この実施
例の化合物な得た。

実施例１に記載したようにして得た分画Ｇを、Ｃ−１８
バイダツク（Ｖｙｄａａ■）（２２ｇＸ２５０ｔＭ１　
３００Ａ孔径、１０μ粒度）カラム上にのせ、流量１０
ｄ／分および、２０％→３　０％Ｂ，　８　０％→７０
％，［Ｑ→４０分］〔ウォーターズ（Ｗｓｔａｒａ）曲
線６〕の非直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用
して溶離してとり、実施例ｌに記載したようにして集め
られる分画についてウォーターズ（ｒａｌｇデｇ）９９
０ダイオード・プレイ検出器を使用した。上述したよう
な二次分別の後、分画Ｇは約２２分でカラムから溶出し
た。ポリペプチドを包含するこの分画を、次に周知の手
順に従って、浴離剤から凍結乾燥させ、続いて水から凍
結乾燥させることによって、配列決定用に調製した。

この分画のアルキル化ポリペプテドのアミノ酸分析を、
製造業者の仕様書に従って、ウォーターズ・ピコータグ
（ｉｌ’ａｔａｒａ　Ｐｉｃｏ−Ｔａｇ　）法を用いて
得た。配列データは、ＴＦＡ水溶液変換を伴なう、アプ
ライド・バイオシステムズ（ＡｐｐｌｉｅｄＢ４ｏａｙ
ａｔａｔｎｓ　）　４　７　０　Ａ型蛋白質／ペプチド
配列決定装置Ｃ　９４４０４　　カリフォルニア州、フ
ォスター・シティ，リンカーン・センター・ドライブ（
ＩＡｓａｏｌｓ　Ｃａｎｔａｒ　Ｄｒｉｖｅ）８　５　
０、アプライド畢バイオシステムズ社（ＡｐｐＬｔａｄ
　ＢｉｏＢ１ｍｔａｍａ＊Ｉｓａ．））から集めた。こ
うして得られるフェニルチオヒダントインアミノ酸の分
析は、アブライド・バイオシステムズ（Ａｐｐｌｉｅｄ
　Ｂｉｏｘｙｘｔｍｍａ　）　１２０Ａ型ＰＴＨ分析器
を用いてオンラインで、またはデュポン・ゾルバックス
ＣＤｓＰｏｓｔ　；ｌｏｒｂａｚ　）ＰＴＩｉカラム［
１９８９８　　デラウエア州，ウイルミントン，マーケ
ット・ストリー｝　（Ｍａｒｋｅｔ　Ｓｔｒｅｅｔ）１
００７、イー・アイ・デュポン・ド・ネモアース社（　
Ｅ．Ｉ．　ｄｓＰｏｎｔ　ｄａ　Ｎａｍｏｓｒａ　ａｎ
ｄ　Ｃｏ．＋Ｉ％Ｃ．）、バイオメディカル・プロダク
ト部（Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ｐｒｏｄｓａｔ　Ｄｅｐ
ａｒｔｍｅｎｔ）、クロオフラインで行紅われる。

本全ペプチドのアミノ酸分析およびＦＡＢ　ＭＳの結果
として、分画Ｇに包含されるポリペプチドの一部の７ミ
ノ末端アミノ酸配列は： Ｈ，Ｎ−ｇｌｗ−１ｙｅ−ｇｌｙ−！ａｘ−ｐｒｏ−ｇ
ｌｓ−ＩＮＩ−ａＬａ−ｇｌｕ−ｅｙｅ−ａｓｐ−ｇｌ
ｙ−ａｓｓ−ｇｌｕ−ａａｒ−ａｓｐ−ａｙｓ−！ｙａ
−Ｃｙｓ−ａｌａ−ｇｌｙ−ｇｉｎ−ｔｒｐ−ｉＬａ−
ｌｙｅ−ａｙｓ−ａｒｇ−ａｙｓ−ｐｒｏ−ｔｒｐ−１
ｙａ−ｔｒｐ−ｈｉｓ−４１ａ−ｔｈｒ−ｇｌｙ−ｇｊ
ｓ−ｇｌｙ−ｐｒｏ−ａｙａ−ｔｈｒ−ａｙｓ−ｇａｓ
−ａｒｇ−ｇｌｙ−！ｍｓ−Ｌｙｅ−ｌｙａ−ｔｈｒ−
ｃｙｓ−ｉ　Ｌ　ｅ−ｍａｒ−ｌｙｅ−１　ｍｓ−ｓａ
ｒ−ａａｐ−ｐｒｏ−ａｓｎ−ａｒｇ−ａｓｓ−ｇｌｘ
−ｔｒｐ−１　ａｘ−８＃デー， そしてＦＡＢ　ＭＳ：７２６７：　と決定された。

実施例７． 実施例１に記載したようにして得た分画Ｂを、Ｃ−１８
バイダツク＜Ｖｙｄａ６”）　（　２　２ｍＸ　２　５
　０關、３ｏｏＪ孔径、１０μ粒度）カラム上にのせ、
流量１０一／分および、２０％→２５％Ｂ、８０％→７
５％Ａ〔Ｑ→３０分］〔ウォーターズ（ＪＦａｔｇｒｓ
）曲Ｍ６３次に２５％→５０％Ｂ，７５％→４５０％Ａ
〔３０→４５分〕〔ウオーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）曲！
！１　１　：］　（ここでＡは、０．１％ＴＦＡ水溶液
であり、そしてＢは、アセトニトリルである）の非直線
勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、溶離して
分けとり、実施例１に記載したように集められる分画に
ついてウォーターズ（ｒ．ｔ−デｇ）９９０ダイオード
・アレイ検出器を用いた。集められた分画のうち、興味
ある分画は次のものである： Ｈ！　　　　　約３６分 Ｈ，　　　　　約４１分 ポリベプデド類を包含する分画Ｈ，およびＢ，を、次に
、配列決定用に調製し、実施例６に記載の手順に従って
配列決定した。

分画Ｈ，によって包含されるポリペプチドの一部分のア
ミノ末端アミノ酸配列は： Ｅ，Ｎ−ａｈ８−ｊｙａ−ａｌａ−１　ｍｓ−ｐｒｏ−
ｐｒｏ−ｇｌｙ−ｍａｒ−ｗａｊ−ａｙｓ−ａｓｐ−ｇ
ｌｙ−ａｓｓ−ｇａｓ−ｍａｒ−ａａｐ−ａｙｓ−Ｌｙ
ｅ−ａｙｓ−ｔｙｒ−ｇａｙ−！ｙａ−ｔｒｐ　−κｉ
ａ−ｌｙｅ−ａｙｓ−ａｒｇ−ａｙｓ−ｐｒｏ−ｔｒｐ
−１ｙｅ−＜ｒｐ−ｈｉｓ−ｐｈａ−ｔｈｒ−ｇｌｙ−
ｇｌｓ−ｇｌｙ−ｐｒｏ−ａｙｓ−ｔｈｒ−ａｙｓ−ｇ
ｌｍ−−Ａｙｓ−ｇｌｙ−ｓｎａｔ＝ｉｙｔａ−一Ａｓ
ｇ−ｉ！ｈｒ−６ｙａ−ｉ１ａ−ｔｈｒ−Ａｙｓ−Ｘａ
ｔｔ−＋Ａ＜ａ−Ｃｙｍ−ｐｒｏ−ａｇｎ−１ｙｓ−ａ
ｌａ．−ｇｔｗ、−ｔｒｐ−ｇＬｙ−ｌｅｖ．−ｏ．ａ
ｐ−ｔ旬『 と１−て決定され二七してポリベプチド全体の分子董は
イオン・−スブレイ（Ｉｏｓ−．５ｐｒａｙ）Ｍ　Ｓ　
Ｋよって、７７９３に等しいこεが決定された。

実施例感． 決定 実施例ＩＶ：．記載したようにｔ，’−ｃ得たが、実施
例１に示したε同様の溶出時間のため十分には分離され
ｌフかった分画Ｉ』ｄよびＪを、ｃ−４バイタ゛ツク（
Ｊ’ｙｄａｃ”）（　２　２＋ａｉＸ　２　５　Ｑｍ，
　３　０　０　Ａ孔径、１０μ粒度）カラム上に一緒に
のせ、流竃ＩＱｙ／分および、２０％→３０％Ｂ，８０
％４７０％，４（：０４３０分〕〔ウォーターズ（＃／
＠ｔａｒａ　）曲線６〕、次に３０％→＋５０％Ｂ、７
０％→５０％Ａ［：３０−４４５分〕〔ウォーターズＣ
Ｉｔ’ａｔ＃ｖａ）曲線１エ］（ここでＡは、０．ｉ％
ＴＦＡ７ｊＣ浴液であり、そしてＢは、ア七トニ１リル
′である）の非直線匈配プログラムを用いる溶媒系、を
使用して、溶離して分け取った。ピークの検出および分
画の収集は、実施例６に記載の手順に従つ℃行なった。

集めた分画のうち、、興味ある分画は、次のものであっ
た； 分画　　　　　　　溶出時間 Ｉ　　　　　　約２２分 ！　　　　　　約２７．５分 ポリベブチド類を包含する分画ＩおよびＪを、配列決定
用に調製し，実施例６に記載の手順に従って配列決定し
た。

分画ＩＫ．より包含されるポリベプチドのアタノ酸配列
れよびＦＡＲ　ＭＳは二 Ｈ！７ｖ−ａｍｐ−ｅｙｅ−ｖａトッｌｙ−ｇＡｘ−ｍ
ａｒ−ｇｉｎ．−ｇ！ｓ−ｇｙｇ−ａｒｍ−ａｓｐ−ｔ
ｒｐ−ａｌａ−ｇｌｙ−ｐｒｏ−ｈｉｓ−ａｙｓ−ａｙ
ｓ−ａｍｐ−ｇｌ　ｙ−ｔ　ｙｒ−ｔｙｒ−ａｙｓ　−
ｔｈｒ−ａｙａ−ａｒｇ−ｇｙｒ−ｐｈａ−ｐｒｎ−Ｘ
　ｙａ−ｏｙａ　−ｉ！ｓ＝ｇｙａ−ｖａｔ−ａｓｓ−
ａａ＊−ａｓｓ−ＣＯＮＥ，およびＦＡＢ　ｍ５：４１
５８ として決定された。

分画Ｊにより包含される、ポリペプチドの一部のアミノ
末端アミノ酸配列およびこのポリベプチド全体のＦＡＢ
　ＭＳぱ： Ｈ，Ｎ−ａｓｐ−ｇｌ＊−ｐｒｏ−ａｙａ−・ｉｌｅ−
ｐｒｏ−１ｍｓ　一ｇｌｙ−Ａｙｓ−ｓａｙ−ａｙｓ−
ｍａｒ−ｔｒｐ−１ｙａ−ｉ１　ａ　−ｙＬｙ−ｔｈｒ
−ｐｒｏ−ｔｙｒ−ａｙｓ−Ｃｙｓ−ｐｒｏ−Ａｉｍ　
−ｐｒｏ　一ａｓｐ−ａｓｐ−ａｌｖ１１ｙ−ａｒｇ−
ａｒｇ−ｔｈｒ−ｔｒｐ−ｃｙｓ　一篩ｓ−ｖａｌ−ａ
Ｏドｔｙｒ−ｍａｒ−ａｒｇ　一ｐｈ＃−ｖａｌ−ｔｈ
ｒ−ｉ１ｇ−ａｙｅ−ｓｉｒ−ｇｌｙ−ａｒｇ−ｌｙａ
−ｔｙｒ−ＣＯＮＥ，； およびＩ”ＡＢ　ＭＳ：５５０６ として決定された。

実施例１に記載１−たよ５にして得た分画Ｌを、Ｃ−１
８バイダツク（Ｖｙｃｔα６■）（１０隨×２５０１１
，３００Ａ孔径、５μ粒度）カラム上にのせ、流檻３、
５鮮／分および、２５％→１０％Ｂ，７　５％→＋６　
０％Ｊ（　０−＋３　０分〕（ココテ、Ａ６１、０．　
１　％　ＴＦＡ　７１ＣＪ液であり．そしてＢは、アセ
ト諜ト９ルである）の直線勾配プログラムを用いゐ饅媒
糸、を使用して、解離してこり分けた。

ピーク検出および分幽収果は，実施例６に記載の手順ｉ
Ｃ従って行なった。集められた分画のうち、興味ある分
幽は、次のものである。

ＬＬ　　　約２　０．　２　５分 Ｌ２　　　約２２５　分 ポリベブテドを包含する分ｍＬ＋およびＬ２を、配列決
定用１ｃ調製して．．実施例６に記載（一た手１１１に
従って配列決定した。

分画ゑ，によって包含されるポリベプナドの一部のアミ
ノ末端アミノ酸配列は： Ｈ，Ｎ−　ｉＬｍ−ｖａｔ−ｇＬｙ−ｇＬｙ−１ｙｓ−
ｔｈｒ−ａＬａ−Ｌｙａ−ｐｈａ−ｇｔｙ−ａｓｐ−ｔ
ｙｒ−ｐｒｏ−ｔｒｐ−ｍｇ　ｔ−ｔｌａｔ−ｓｅｔ−
ｓｌｇ−ｇｌｎ−ｇｉｎ．−１ｙｓ−ａｓｎ−１ｙｓ−
ｊｙｓ−ｇｔｙ−ｇｌｙ−ｐｈｍ−αｓｐ− こ決定され、ポリベプチド全体の分子鼠は、公知方法に
従うゲル電気泳動により約２０，０００であると決定さ
れた。

実施例ｌに記載したようにして得られ．ポリペプチドを
包含する分画Ｍを、実施例６に記載した手順に従って、
配列決定用にｇｌ４製し，配列決定した。

分画Ｍにより包含されるポリペプテドの一部のアミノ末
端アミノ酸配列は： Ｍ！Ｎ−　Ｑｌ％→ｔｘｌａ−ｔｈｒ−ＱＬ％→ＧＬｃ
Ｌ−ａＬＧ−Ｅｌｓ−ｖａｔ　−Ｌａｕ−８ａｒ−α８
ｎ−Ｌｍｓ−αａｐ−ｇＬｘ−ｔｈｒ−ｖａＬ−ａｓｐ
−ｐｒｏ− と決定され、ポリベグチド全体の分子虚は，公知方法に
従ってゲル電気泳動により、約ｇｏ．ｏｏｏであると決
定された。

実施例４に記載したように分画Ｅにより包含されること
か確められた標題化合物の合成は，下記のようにして行
なわれた。

Ａ．　Ｈ，Ｎ八〜堝十ＮＣへ→ ？ Ｈ，７ｙ■Ｎ９ゝＣＭ （ＩＪ Ｓ１素雰囲気下、１　３．２　２　ｆ　（　（Ｊ．１　
５モル）ｆ））アミノブタンおよび３．　５　ｄのメタ
ノールをかくはんし．Ｏ−５℃に冷却しながら％　２時
間かけてシリンジボンプを通して９．９１！ｊ（０．１
５モル）のアクリロニトリルなｌΣ加した。約１８時間
後にこの混合物を、３　”　Ｉ　Ｃ’Ｈ＊Ｃｌｚ／　Ｍ
ｅ　Ｏｉｌ　（　２　’）　７　｝　ル）、次いで、５
容ｆ％のインブロビルアミンを含有−ｆ”る３　：　ｌ
　ＣＨ，Ｃｌ，／Ｍ−υＩｆ（２リットル）、の溶媒系
を用いて、６００ｆのシリカゲル上のクロマトグラフに
かげた。結合生成物を含有する分画を５真空での蒸発に
より濃縮して、黄色の粘稠な油を得た。ＮＭＲ分析は．
生成物が、上に示した式ＩＩ）の結合生成物であること
を証明した。

Ｕ ｔｌＪ （■Ｊ Ｈ ０ 窒素雰囲気下、上記Ａに記載したようにして製造した式
工の化合物５．　７　８　ｒ　（　ｕ．　０　４　１モ
ル〕を、ＣＩＩｓＣＮ　７　５　ｒｎｔおよびＫＦセラ
イト１１．４８ｆに加えて、かくはんした。このＤ）ク
はんしている混合物に、（．’ｔｌ，ＣＭ　２　５μ中
の，製造例Ａに記載した手順に従って製造した式■の化
合物９．　７　５　ｆ（０．０４１モル）の溶液を加え
た。反応物を加熱して還流さ’ｔｔ　，　７”　ＬＣ　
（　３　：　ｌ　ＣＩｆｔＣＩ！，／Ｍ　ａ　０１１　
）　Ｋ　ヨ’）　”Ｃ監視した。３時間後Ｋ，反応物を
放置して冷却させ，室温に放置した。欠に、セライトを
、Ｐ遇して除き，フィルターケーキなジクロロメタンで
十分に洗浄した。Ｐ液を真空鏝縮した。この濃縮Ｆ液中
に含まれる粗生成物を，　３　：　Ｉ　Ｃ７７！ＣＩＱ
／Ｍａ０１１　　２リットル、欠イで３　’　ｌ　　Ｃ
嶋Ｃｌｘ／’ａＯＭ　　２　リ７トルおよびイノブロビ
ルアミンｌＱａｔｊ，次いで３　：　Ｉ　　ＣＨ，ＣＩ
，／ＭａＯＨ　２リットルおよびイソプロビルアミン３
０１７、を用いるシリカゲル上のクロマトグラフにかげ
た。生成物は，カラムがイソプロビルアミンで飽和され
た後、カラムから溶出したが，まだ不純であった。すべ
ての生成物分画を合わせて．ａＪ１１た。シリカゲルは
，７リヵゲル５　０　０　ｅヲ．Ｃ’ｆｌ，Ｃｅ，オヨ
ヒ１　２　５！ｔｊイ７　７”ａ　ヒｋアミン中でスラ
リー化させろことにより製造した後，４１Ｉ準方法でカ
ラムに詰めるのに使用した。粗生成物を．ジクロ口メタ
ンを用いてカラム上にのせた。次に，ジクロロメタン５
　０　０＋ｊを、このカラムに通し，続いて３：１　ｃ
偽Ｃｌ，／Ｍ●ｏｎ　１リットルを通した。生放物分画
を合わせ，真空濃縮して、上記弐■の生成物１．５２を
得た。さらに別の，２？の式ｉｎノ生成物を，　３　：
　Ｉ　Ｃｌｌ，Ｃｌ，／ｋｆｍ０１１　１リットルおよ
びイソブロビルアミン３ｏＩＬｔを用いて，このカラム
から溶離して分けとった。

Ｃ。

■ ＋ （ＢＯＣ），０　　−ｎ ＢＯＣ ＢＯＣ 直 憲素雰囲気下で，上のＢに記載したようにしで製造した
式ＩＩ　ｉ７）化合物３．５　Ｆ　（　１　１．８ミＩ
）　％ル）、およびジクロロメタン１　５０ｄｔ％かく
はんし，重炭酸ジーＣ−ブチル５．２″？（２３．６ミ
リ毛ル）を加えた。混会物を、室温でほぼ６８時間かく
はんした。次にこの混合物を真空＠縮し　７υヵゲル４
００ｔおよぴ＋５０　：　４０ヘギダ″ン／酢酸エチル
溶媒を用いるクロットグラフにかけ、弐■の化合物５．
　６　２　ｔを油として得た。

Ｄ−　　　　　ＢＯＣ １ （Ｖ） 室素雰囲気下で。上のＣに記載したようにして製造した
式ｙｃｒｉ化合物３．Ｏｆを、２５０ｍのバール（　Ｐ
ａｒｔ■）びん中で酢酸３Ｑ＋ｔ／！ｉＣ溶解させた。

この溶液１ｃ，　Ｐｄ（ＯＨ），／炭累３．Ｏｆを加エ
テ，混會物を，　５　０　ｐ．ｓ．ｉ．　Ｈ＠圧で２時
間水素化した。

触媒な酊過によって除去し，ケーキを酢酸で十分κ洗浄
した。Ｐ液を濃縮し、ジクロロメタン７５１ＩＺに溶解
させ、ＩＡ’　ＮａＯＭ　　７５−て２圓洗浄し，Ｋよ
ＣＯｓ上で乾燥させた。こσ）饅液な、真空濃縮Ｌて，
上記式■の生成物２．８６Ｆを得た。

Ｅ． Ｖ　＋　ＮＣヘ　ー→ ＢＯＣ Ｅ （ＫＶ） （Ｖ１） 望素雰囲気下で、上のＤＫ記載したようにしで製造した
式■の化合物２．８６ＳＦ（５．７ミリ七ル）を、メタ
ノール７５−に溶解させた。かくはんしながら，この混
合物ＶＣ．．アクリロニトリル０．４１ｄ（５．３ｓ：
リ七ル）を加えて，反応物を一晩かくはんした。次に、
この反応混合物を濃縮し、ジクｏｏメタン３０−から３
同再濃縮し，溶媒を真空放散させて、式■の化合物３．
１８ｆを油として得た。

Ｆ． ■　　一−→ （Ｖ１ｌ） 室素雰囲気１下で，上のＥＶｒ：．記載したようにして
製造した式■の化合物３．１８ｆ（Ｓ、７ミリモル）ジ
ク０ロメタン１００就と合わせて，かくはんして溶液と
した。こり溶液に，璽炭醒ジーｔ〜ブチル１．３　７　
９　（　６．３ミリモル）を加えて，反応物を、室温で
９０分間ｆＪ）クはんした。次に，この反応混合物′％
：濃縮し．溶離削として６０　：　４Ｑヘキサン／酢酸
エチルを用いて、シリカゲル３００ｒ上のク０−４１ト
グラフにかげた。生成物分画を合わせて濃縮し，ジクｒ
ｙ口メタン３Ｘ２０ｍＡで抽出Ｌ、溶媒を真空放散させ
て，上記式■の生成物３．　Ｌ　２　ｒを得た。

Ｇ６　　　■　・一−リ （Ｖ一） 上のＤに記載した手順に従って，上のＦに記載したよう
にして製造した式■の化合物３．　１　２　ｆ（４．７
６ミリ七ル）を、酢酸３０＋＋＋Ｊに溶解させ，Ｐｄ　
（ＯＨ）２／炭索３．ＯｒｌｌＯ存在で２時間、５　５
　ｐ．ｓ．ｉ．で水素化して、上記式νｉｉの生成物３
．　０　２　ｆ　ｔ油として得た。

Ｈ． ■＋ＮＣヘー→ ５　０　ｐ．ａ．ｔ．で水累化して．上記式Ｘの生成物
０．８５２を得た。

Ｊ． 窒素雰囲気下で、Ｇに記載したようにして製造した式■
の化合物１．Ｏｆ（１．５ミ！７モル）を，メタノール
ｌＯ紅に溶解させた。この溶液に、アクＩＪ　Ｏニトリ
ル０．１ｌＩＪ（１．６７ミリモル）を加えて，反応物
を一晩かくはんした。次に，この反応混合物を＃ｋｍＬ
，、ジクロロメタン２０ＩＩＬｔから３回再濃縮し，溶
媒を真空放散させて，上記式仄の生成物１．０２を得た
。

１．ＩＸ一〉 （Ｘ） 上のＤに記載した手順に従って、上のＨに記載したよう
にして製造した式■の化合物１．　０　ＰＣ　１．４ミ
リモル）を，酢酸３０−に溶解させ．２．５時間．硫酸
水素テトラブチルアンモニウム６．７８？（２０ミリモ
ル）およびｌ：Ｉ，０７５１１Ｌｌを含有する溶液をか
くはんによって製造し、ＮａＨＣＯ，　　３．　３　６
　ｆ（４０ミリモル）を加えてそのまま発泡させた。

次に，インドール酢酸３．５Ｆ（２０ミリモル）を加え
、混合物を、５分間かくはんし，　ＣｆｌＣｌ３７５−
を加えた。混合物を、さらに５分間かくはんし、底部の
２層を分離した。水性層にＮａ，５ｏ．を加えＣＨＣＩ
，で抽出した。すべてのｃ．’ｒｔｇ３，抽出物を合わ
せて，　Ｎａ，５０，上で乾燥させた。こうして得られ
る透明なこはく色の溶液を濃縮し、アセトン３Ｘ７５一
で追い出し、最後にアセトン７５紅に溶解させた。次に
、臭化アリルｌ．９ｍｇ（２２ミリモル）を加え、混合
物を５３０分間放置した。次にこの混合物を濃縮し．３
：１ヘキサン／酢酸エチルヲ用いる７リ力ゲル上のクロ
マトグラフにかげ，上記式Ｍの生成物３．５７ｆ？：、
淡黄色油として得た。

Ｋ． 溶離剤として１４．５：１ヘキサン／酢酸エチルを用い
るシリカゲル上のクロマトグラ７イーにより精製して、
上記式ｘｆｆ　の化合物２．８７ｆを、無色の油として
得た。

Ｌ． ｔ ＢＯＣ （Ｘｌｌ） Ａｎｇａｗ．Ｃ’ｈａｒｎ．Ｉｔｕ．Ｅｄ．ＥｎｇＬ．
　　２　３　：　２　９　８（１９８４）の方法に従っ
て、上の１に記載したようにして製造した弐Ｍの化合物
２．１４Ｍ（１０ミリモル）？：、アセトニトリル２０
一と合わせ，この混合物に重炭酸ジーｔ−ブチル２．６
１ｆＩ（１２ミリモル）を加えた。沢に，４−（Ｎ，Ｎ
−ジメチルアミノ）ピリジン（Ｊ．１２２Ｓ’（１ミリ
モル）を加えて、反応を１５分間進行させた。次に，こ
の混合物を，σ「酸エテルで希釈して１２５ｔとｉ，，
２ｘ希１１ｃ’ｌ，　　３　ｘ　２　５　ｒｎｌ　１１
，０，　１　ｘブライン、で洗浄し，乾燥させ瀬縮した
。生成物を．Ｉ ＢＯＣ （ＸＩ！） ジクロロメタン２０１１１ｊ中の、上記Ｋに従って製造
した式Ｘ１［の化合物３．２７ｙ′（１０．４ミリモル
）に，酢酸エチル中の２−エチルヘキサン酸ナトリウム
（０．２３１Ｐ／ｆｌｕ）７．４−を加えた。次に，Ｌ
Ｉｋｓｐｏ．ｓｔおよび（φ，Ｐ），Ｐｄ　０．　５　
ｆを加え，混合物を、６０分間かくはんした。欠く、こ
の混合物を濃縮し、酢酸エチル１５０−に溶解させ，　
５Ｘ２５ｔｅＨ，０で洗浄した。水性抽出物を合わせ、
ＩＸ２５一酢酸エチルおよびＩ　Ｘ　２　５１Ｌ！ジエ
デルエーテルで逆抽出した。水性層に，ｉＦｒシい酢酸
エチル７５就を加え．てから，　ｐＩＩ　３まで酸性化
ｊ〜た１、酢酸エチル層を分離し、水性層を、ＩＸ５９
ｍｉの新しい酢酸エチルで抽出した。２つの酢酸ヱチル
抽出物會合わぜて，２Ｘ２０縦Ｈ，Ｏ、次にＩＸ２０Ｍ
ブ〉イン、で洗＃Ｌ７、乾燥させ，濃縮し、３ｘ３０＋
ｍのへキザンで追い出しを行なうと，２（自）目の追い
出１，中Ｃ１結顔が形成された。混合物を，ヘキザンで
７５鱈まで希釈した。固体をＰ過１，．−％，キサンで
十分に洗浄し，自然乾燥させて，１．３７１７の白色固
体を得た。ＮＭＲは，標題の式Ｘｍｌ７）構造を確認し
た。

ｍ．　　ｘｍ　　＋　　　ｘ　　−０ ＢＯＣ （ＸＮ） 窒Ｘ雰囲気下で、式ＸＩｌ１の化合物２００＃ワ（、７
３ミリモル）ｆｆ：．ジクロロメタン２５ｍ！−、Ｎ−
ヒドロギシーこはく醒イミド８４■（　０．　７　３ミ
リモル）およびジンクロへキンルカルボジイミド１５０
■（０、７３ξリモル）と合わせると、ほとんど直ちに
沈殿が形或された。混合物を６　３時間かくはんした。

次に，ジシクロへキシル尿素をＰ過１７でとり，Ｐ液に
、ジンクロメタン中の２実施例１１．Ａ−４に記載した
ようセして製造した式Ｘの化合物ｌｙ３溶液桑０鱈を滴
加した。との混会物な、１２時間かくはんした後．　０
．Ｉ　ＮａＯＨで洗浄し、Ｋ，ＣＯｓ上で乾燥させ、濃
縮し，セして、／リカゲル１５０１Ｆを用い、９：１ジ
ク口口メタ／／メタノール（　０．　５　１Ｊットル）
で清離して不純物分除去した後９８１：０．１ジクロロ
メタン／メタノール／インプロビルアミン（２リットル
）で溶離するク０マトグラフにかけた。次汚、生或物を
、濃縮し，ジク『：ｌｒ２メタンで追い出し、さらに濃
縮しで．式Ｘ■の化合物４００■を得たが、この化合物
は、３００読ｋＮＭＲでｉ認された。

Ｎ．　　ｘ■　　＋ ＥＯＣ （ＸＶ） 室素雰開気下で，Ｊ二記りようにして製造した式ＸＩＶ
の化合物０．３４　ｆ　（　０．３　５ミリ七ル）な，
アセ｝／３０＋ｌＪと合わせ、かくはんして溶液として
、氷／アセｌ・ン浴中て約０℃に帝却した。次に，アセ
トンｚＯａ中の８５優　３−クロロペルオキシ安層、香
酸（１．２　１　２１ｉ’　（　１．０　５ミリモｂ）
な、８一ｌＯ分かけて滴加した。反応物を、３０分間か
くはん｛〜だ後５ジエチルエーテルで１５０−まで希釈
し，２Ｘ２５虹　１０％Ｋ，（．’　ｏ，、２Ｘ２５創
ｉ４ｏ、２Ｘ２５紅１０％Ｋ，ＣＯ，、２Ｘ２５Ｍ１１
，０で洗浄し、Ｋ，ＣＯ，上で乾燥させた。混合物を瀝
縮し、２Ｘ３０ｗｒＡジクロロメタンて退いｄ刊．／，
真空濃縮しで、定常重ｉ１０３３９εした。ＮＭＲ分析
に，よれば、生成物は、所望の式Ｘｖの生成物，出発物
質および副生成物の混合物であることが示された。この
生成物混合物を、２０即のＮαＣＭ１３Ｈ，を加えた酢
酸３　ｖｔｔに加えた。混合物を一晩かくはんし、酢酸
を真空放散させ．５０μのジクロ口メタンに溶解させて
、，Ｈ　７の水性緩衝液１Ｘ７５−で洗浄しｆ．：．．
必曹があわ”ｌｆｂ　ｐＨを、ｌ＃　Ｎａ０１１　”Ｃ
’　ｐＨ　７　Ｉ’ｍ調整し、ジクａｏメタン層を分離
して、ｐＨ　７の水性緩衝＆ｌＸ５０戯およびブライン
Ｌ×２５鮎で洗浄１−、Ｎａ，．５０，上で乾燥さ＋！
：、真空濃縮し゛〔，定常乗貸０．３１ｆ．！：Ｌた。

こうして得られろ生成物を、シリカゲル１００ｔ上のク
ｏ＝ｚトグラフにかけ，９５：５酢醒エチル／メタノー
ルを用いて溶離して、２５鱈づつの分画を集めた。精製
された弐ＸＶｏ生或物は、カット１８−２５中に出てぎ
た。これらのカットを合わせて濃縮し，２ｘ５ｄσ）ジ
クロロメタンで追い出し、真空濃縮して、６８Ｕｌ９０
８色泡沫を得た。このものを−８０℃で貯賦レた。

カット２６−４０も，所望の生成物を含有しているが、
これらは多少の不純物をも含有していた。

カット２６−４０を合わセで濃縮し、ジクロロメタンで
追い出し，真空強縮して，定常重１＃６６ＩｎＩｊとじ
よ。後の生成物を，ＮｂｌＲ研究に使った前の生戒物６
ｍ４／および上記手順に従って製造した混合物と合わせ
た。こうして得られた浪合物を．シリカゲル７５７上の
クロマトグラフにかげ、９：５酢酸エチル／メタノール
を用いて饅離し％　２５−づつの分画を集めた。精製さ
れた式ＸＶの生成物は、カット１６−２１Ｋ存在した。

これらのカットを合わせて．濃縮し、ジクロロメメン２
Ｘ５ｒＩＬｔで追い出し、定常嵐ｉｉ４６ηまで真空濃
縮した。こりものを，−８０℃で貯蔵した。

Ｕ．　　　　ＸＶ　　−一→ Ｈ （Ｘｖ１） 窒素雰囲気下で，上記したようにして製造した式ＸＶの
化合物１０８η（　０．　１　０　９ミリモル）を、１
．５μのジクロロメタンに溶解させた。＆Ｋ．　　トリ
フルオロ酢酸２ｍｔを加え，混合物を，室温でｌ時間か
くはんした。この反応混合物を、次に、濃縮してフイル
ムとし，ジエチルエーテル１５Ｎを加えた。こりフイル
ムが固体に変わ９，３０分かくはんした後、白色粉末を
得た。こり粉末を戸過し、ジエデルエーテルで十分に洗
浄し＆窒素下で乾燥させた後、この実施例の標題化合物
が１０９■の定常憲量になるまで排気した。

１Ｈ−インドール−３−アセトアミド，　Ｎ　−　（２
０一アミノー４−ヒドロキン−４．８，１２．１７−テ
トラアズアイコス−１−イル）−４−ヒドロキシ 実施例３に記載したように分画ＢｌｖＣより包含される
ことが確β）められた標題化合物の合成は、下に記載す
るようにして行はわれた。

Ａ． （ＸｖＩＩ） 火炎乾燥させたガジス器を用いてアルゴン雰囲気下で、
４−ヒドμキシインドール４．Ｏｒ（３０ミリモル）を
，アルドリツテ（　Ａｔａｒｉｃｈ）乾燥ＤＭＦ２５ｔ
ｎｌと合わせてかくはんして溶液にした。

次に、５０肇油分散液としての八αＨｌ．４４冫（３０
ミリモル）を加えた。発泡が静まった後、クロロメテル
メチルエーテル〔アルドリッチ（Ａｔｔｒｉｃｈ）〕２
．５ｍδを加え、得られる暗緑色の溶液を一晩ｎ）クは
んした。その後，このｍ液を，酢酸エチルで希釈して１
２５財とし，　　５　ｘ　２　５ａ６　Ｈ，Ｏオヨびｌ
Ｘ２５就ブラインで洗浄し，　Ｎ央５０，　　上で乾燥
させ、４：ｌヘキサン／酢阪エチルを用いろクロマトグ
ラフにＤ・げた。生或物を含有する分幽を合わせ、纜縮
して、２７０ｖの化合物ｘｖｉｔを、油として得た。

Ｂ． 機械的かくはん器をとりつげた５０ｊｄの三つ首丸底フ
ラスコ中，窒素雰囲気中で、ホルムアルデヒド水溶液（
３７％）ｌ．３ｆおよび酢＃２．２８Ｆを冷却した。次
に、冷却したジメチルアミン（Ｈ，Ｕ中２５％）３．２
３−を加えた。こうして得られる冷却溶液に、移動浴媒
として約１、５〜２．０一のテトラヒドロフランを用い
て、式ＸＶ１１の化合物２７ｆ（１５．２ミ！Ｊモル）
を加えた。反応物を，室温まであたためて．一晩かくは
んした。次に，１０％ＮａＯＨ　４　０−を加えると，
そのときｔＪ：．殿が形成された。かくはん後に、沈殿
を戸過し、１１．０で洗浄し、自然乾燥させて、３．２
６ｆの式ＸＶＩの化合物を得た。

Ｃ．　　　ＸＶ１ ↓ Ｈ （ＸＶ鑓ノ （ＸＩＩ） ＣＸＸ） ？素雰囲気下で、ＫＣ’Ｎ４．６２？を、ＩＩ，ＯＨ■
戯と合わ−＋！：、ｖ■＜はんして醒液とし１こ。次、
にエタノール３０１Ｊｆ’ｔｉＪび化会物ＸＶＩ３．２
６ｒ（１４？り七ル）を加え。て、混合物４・かく（．
ｔんし、約６５時間加熱して還流させた。反応物な？′
６却し、虚縮した。こうして得られる化合物ＸＸ　より
成ゐ沈殿なＦＡし、Ｈ，Ｑで洗浄１−、崗然乾燥させた
。水性層を５ジク口口メタン４×１５ｄで抽出し、有機
抽出物を貯えた。次に、この水性層Ｋ．酢酸工ブ・ル５
Ｑｉ．６をかぶ−＋！：，ｐＨ　２まで酸性化した。酢
酸エチル層を分離し，この酢酸エチル層中ｖｒ−室累を
泡立たゼて通すことによって脱泡し，乾燥させ，瀝縮し
で１遍体とした。この固体を６シインプロビルエーテル
で研和して、１．０３？の１し合物Ｘ医を、オフホワイ
トの固体として得た。次Ｋ．塩基性水性鳩からのすべて
Ｏ仙出物を合わ−＋！：１乾燥さゼ，上記のものからの
Ｐ液と合わせで、濃縮しで，０．４ＳＰＱ化合物ＫＸを
、固体としで得た。

愈素雰囲気下で、化合物ＸＸ１．６ダを５エタノ〜ル７
，５Ｍ／！、１１，Ｑ　３　０胛ｌおよびＫＯＨＬ３ｔ
と合わせた，３混合物を、加熱１一で還流さセ゛，一晩
かくはんした。次Ｋ反応物な冷却（〜、酢酸玉チル２×
１５１７”Ｃ＝抽田し、新しい酢酸Ｉチル馨かぶせ、ｐ
Ｈ　２まで酸性化１−た。合わせた酢酸エチル層を、乾
燥させ、Ｓ縮（２た．．，ら５Ｉ一で得られ４）闇体な
、ＩＰＥ’Ｙ：研和し１１．１♂の化分物Ｘ改を得た。

Ｅ６ ＥＯＣ （ＸＸＩ，） 馬ｏｘｏＰｌ中疋、ＴＢＡＨＳ０，１．４峨＋ｉ’（４
．２５ξリモル）を洛解させた。次ＶＣ，　ＮａＨＣＯ
，　７　１　４岬（８．５ミリ毛ル）を加えた。発泡が
靜まクた後、１、ＯｔＣ４．２５ζり毛ル）の式ＸｔＸ
の化合物を加え、混合物をグロ口ホルム４ｏｙ＋加える
前に、１分間かくはんした。反応物聖、５分間かくはん
し、クロ曙ホル広層留分離した後、水性混合物令′、ｌ
Ｘ１５Ｎのク０ロホルムで抽出した。合わ・ぜたクロロ
ホルム抽出物を乾燥させ、艙紬Ｌ．２Ｘ３０ｉｉｇのア
セトンで退い出Ｌ　ｆ．：−。次に、この生成物を，聳
素雰曲気１・で、３０鮮Ｉ７）アセトンに間浴解させ、
０．３７ｍＡ（４、２５ミリモル）の臭化アリルを加え
て，反応物を２時間かく（ｉんした。混合物を譲縮し，
溶離剤として酢酸エチルを用いろクロマトグラフにかけ
た。生放物を鏝縮して、１４１Ｖの油を得た。生成物の
すべてを、２５酩のジクｑｏ：Ｉ：タンと合わ？．Ｎ炭
酸ジーｔ−フチル０９８１’　（　４．　５　ミ’Ｊ　
モル）　ｈ−Ｋび４　−　（　ＩＮ　，　Ａ’　−　２
　メチルアミン）ビリジン５１■（（Ｊ．４２５ミリモ
ル）を加えた。ＩＸｇ５物を、一晩カ・くはんした。次
に，この反応混合物？：痕縮して、９：１へキサン／σ
Ｆ酸エチルを用いろクロマトグラフにＤ＞け、な縮｛及
に、１．３３ｙの式ＸＸＩの化ａ物を、粘稠は油として
得た。

言 ＢＯＣ （ＸＸＩＩ） メタノール２就中ｌＩＣ，ｉ５４■（０．Ｘ７ミリモル
）の弐ＸＸＩの化合物を溶解させた。この清液に、ｏ，
ｘＮａυ＃ｌ，７ｄを加えて、得られる反応混合物を６
一晩かくはんしｙ：：．次に、反応物を酸性化し、乾燥
させ，＃酸エテルで袖膓し、濃縮した。ＮＭＲ分析は、
化合物ＸＸＩのアリルエステルのすべてが除去されたが
、多少のトランスエス戸ル化が起こり、多少のメチルヱ
スデルが存在１″′るこ乙を示した。そのため、生成物
を残Ｎ量の化合物ＸＸｔ（＃！：ば１．２６ｒ）と合わ
せて，５−のテトラヒド口フランに溶解させ，０℃に酎
却した。択＆Ｃ，３．８＋１ｉＪのＩＮＮａ０１ｉを加
え、反応物を、Ｏ℃で５分間かくはんしてから，放置し
て室諷まであたためた。

反応の結果２相が生じ，これらの相を除去するには５Ｉ
Ｌｔのメタノールの添加が必要であった。反応物を，一
晩かくはんした。次に，テトラヒドロフランおよびメタ
ノールを放散させて除き、残留する水浴歇を、酢酸エチ
ル５０−でおおって、酸性化してｐＨ　２とした。酢酸
エチル層を分離し、Ｈ，０　　１Ｘ２０１Ｌｔで洗浄し
，ブラインで１回洗浄し，ｓａ，ｓｏ，で乾燥させ．Ｐ
過し，ＩＩＪＩＬてゴムとした。

このゴムは、ヘキサンで研和すると結晶化し、１．０８
ｆの白色固体を得た。この固体を７０　：　３０ｉ！！
￥酸エチル：ヘキサンを用いるクロマトグラフにかけ、
透明な生成物のカットを合わせて濃縮し，酢酸エテル／
ヘキサンから結晶化させて，０、８８４Ｖの式ｘｘｎの
化合物を得た。

Ｇ． ｘｘｎ＋ ＢＯＣ Ｉ （Ｘ） ↓ 窒素雰囲気下で、弐ｍの化合物２７１１ｎ９（０．８１
ミリモル）を、かくはんしながら、無水テトラヒドロン
ラン４−に溶解させた。次に、９３η（０．８１ミリモ
ル）のＮ−ヒドロキシこはく酸イミドおよび１６７ＷＩ
９（０．８１ミリモル）のジシクロへキシルカルボジイ
ミドを加えて混合物をかくはんした。１時間５０分後に
、ジクロロメタン３０１Ｌｔ中の、実施例１ｌに記載し
た手順に従って製造した式Ｘの化合物０．５８ｆ（０．
８ミリモル）を加え、混合物を週末じゆうかくはんした
〇次に、ジシクロヘキシル尿素を戸過して分けとり、混
合物をｌ　Ｎ　ＮａＯＥ　２　Ｘ　３−で抽出し、Ｘ！
ＣＯ，上で乾燥させ、濃縮した。生成物を、次に９＝１
ジクロロメタン／メタノールを用いるシリカゲル１００
ｔ上のクロマトグラフにかげて、所望の生成物以外のす
べてのものを溶離し、次に９０：１０：１ジクロロメタ
ン／メタノール／イソプロビルアミンを用いて生成物を
溶離した。生成物を含有する分画を濃縮し、ジクロロメ
タンで数回追い出しを行ない、溶媒を放散させて、３４
９ηの式℃０の化合物を、白色泡沫として得た。

別法として、しかも好ましくは、ジクロロメタン中の式
刀鄭の化合物０．４８０？（１．４３ミ！７モル）を含
有する溶液５０−を、Ｎ−ヒドロキシこはく酸イミド０
．１６５ｆ（１．４３ミリモル）、次いでジシクロへキ
シルカルボジイミド０．２９４ｔ（１．４３ミ！Ｊモル
）で処理し、５時間かくはんした。反応混合物を、戸過
し、粗製のヒドロキシこはく酸イミドを含有するＰ液を
、２０分にわたり、ジクロロメタン中の、実施例１ｌに
記載した手順に従って製造した式Ｘの化合物ｘ．ｏａｒ
（１．４３ミリモル）の溶液１００ｉｆＬｌＫ滴加した
。反応物を、７２時間かくはんした。その後、粗製の反
応混合物を、Ｉ　Ｎ　ＮａＯＨ　２　０−で２回洗浄し
、Ｘ，ＣＯ，上で乾燥させ、Ｐ遇し、濃縮した。次にこ
の生成物を、４：１ジクロロメタン／メタノール、続い
て９：１：１ジクロロメタン／メタノール／ジイソプロ
ビルアミンを用いるシリカゲル上のクロマトグラフにか
げて、９　１　２Ｗｋｉの式ＭＯの化合物を得た。

Ｅ．　　　ＸＸｍ　　　　　　　　　−−ナ窒素雰囲気
下で、インドールアセトアミドＤ皿（９００■．０．８
７ミリモル）を、４０一のジクロロメタン中に溶解させ
た。この溶液に、２一（フエ二ルスルホニル）−３−７
ヱニルオキサシリジン（　５　０　０１１％？．　１．
９　２ミリモル）を加えた。

反応の進展を、薄層クロマトグラフイーによって監視１
−だ。１時間後に、反応混合物を、真空濃縮して、主に
粗製のニトロン（％ｓ＃ｒｏｙｓｍ　）を得た。

これを３５威の酢［ＩＣ溶解させた。大過剰の水素化シ
アノホウ素ナトリウム（１．００？，１５．９ミリモル
）を加えて、反応物を約２時間かくはんした。反応物を
真空濃縮し、ジクｉスｉｘメタン（５０Ｍ）に溶解させ
、Ｉ　Ｎ　ＮａＯＨでｐＥを７に調整ｌ一７，Ｈから、
，Ｅ　７緩衝液（ＩＸ５０ｙ）で洗浄した。

有機層を、再びｐＥ　７緩衝液（　ＩＸ５０酩）で洗浄
し、炭酸カリウム上で乾燥させ、真空ｉｉ１ｉ１−て、
粗生成物を発生させた。これを、９５二５酢酸エチル：
メタノールを用いるシリカゲル上のクロマｌ・グラフに
かけ℃、ｓｌ２ｑ（６７％）のＸＸＩＶを、白色泡沫こ
して得た。

１．　　　ＸＸＩＶ ．Ｕ （ＸＸＶ） 別法とし℃、真空をひき、アルゴンで３回ブリード１゛
るこ＆により、３ｍＪのトリフルオロ酢酸な脱泡キ姑た
。次に５フラスコをアルミホイル中に侃ｈ、移動剤とし
て約２．　５　ｄのジクロロメタンを使用Ｌ−Ｃ、９８
即の化合物）ＯＱＶを加えた。４５分後に、混合物を濃
縮して、油を得た。この油を、ジ五チルエ・−テルで研
和するＬ、８８■の化合物幻■が白色園体として得られ
、これを−８０℃で貯蔵１−だ。

別法としで、しかも好ましくは、アルゴンでパージした
飽和ジオキサンーＥＣＩ！溶液１００−に、１．５分か
げで、ジオ命サンＩＱｄ中の、上のＨに記載した手順に
従って製遺した式ＸＸＩＶの化合物Ｏ．５２０ｆ’（０
．４９５ミリ毛．−）を加えた。直ちに沈殿が形成され
反応物を、１時間かくはんした。

次に，ジエチルエーテルを加え゛（、５分後に、溶液を
戸過した。その結果得られる固体を、ジエチルエーテル
で洗浄し、室素雰囲気下９、そして次に減圧下で、乾燥
させて式ＸＸｒＶ’の酸３４５即を得た。これは、−７
８℃で貯蔵するここができ゛た。

次に、アルゴンでパージした水溶液Ｋ　Ｘ　５　０　Ｔ
’ｒ９（０．２０５ミ！ｊモル）の式ＸＸＩＶ’の酸を
加えた。

反応を、ＨＰＬＣにより監視した。約７時間後に反応が
完了すると、反応混合物を凍結乾燥させ℃式Ｄ■の化合
物１０３叩を、その塩酸塩どＬ−？：得た。

実施例１３． ペンズアミド，＃−（２０−アミノー４−ヒドロキシー
福，８，１２．１７−テトラアズアイブス−１−イル）
−４−ヒドロキシ 実施例２に記載したように、分画Ａ′により包含される
ことが確かめられた標題化合物の合成は、下に記載する
ように（一て行なわれた。

４００鱈のビーカー中で、硫酸水素テトラブチルアン七
ニウＡ６．７８ｆ（２０ζり毛ル）な、６０一のｌ！２
０ε合わゼ，かくはん１−で溶液とした。

次に、３．３６ｔＣ４０ミリ％　ル）　ｔｌ）　Ｎｅ＃
ＥＣＵ，を加えて七のまま発泡させ、続いてｐ−ヒド隨
キシ〜安息香醗２．７６１Ｆ（２０ミリ七ル）、Ｎａ０
１１　０．８ｔおよびＢ！’４０Ｊ！Ｉ７を含有する溶
液４９ｄを添加し、た。反応混合物を、５分間かくはん
した後、２　０　ＱｍＪのジクｌ：′ｌｌＩＪメタンを
加えた６混合物を、さらに５分間かくほんし、各層を分
離させた。水性層を５０−のジクロロメタンで２回抽出
した。

合わせたジク１２ｌ７．メタン抽出物をＨａ，５０，上
℃乾燥させ、濃縮１，、７５罠ｌのアセトンで２囲追い
出Ｉ一を行ない、５０−のア七トンに拵溶解させた。

次に、ｌ，９ｍ　（　２　２　’Ｊ　９モル）の臭化ア
リルを加え゛（、混合物をかくはんした。次に、この反
応混合物を濃縮し，、酢酸エチル１００ｒｉＪ中に溶解
さセ、３ＱｄＨ，０で２回、５０耐飽和重炭酸塩で１回
、３Ｑｙｄ：Ｈ，Ｏで１回、ブラインで１問、Ｅ，０で
１囲モしてブラインそ１同、洗浄した。こうして得られ
る生戒物を乾燥させ、濃縮して、油を得た。この油を、
５０ｍの石油エーテルで１時間研和した。

次に、混合物を戸過し、石油エーテルで十分洗浄し、自
然乾燥させて、１．７２の上記式ＸＸＶＩの化合物を得
た。

０α■） ？素雰囲気下で、上のＡに記載したようにして製造した
弐℃閏の化合物１．７？　（　９．５　５１モル）を、
５０一の７ルドリツテ（Ａｌｄｒｉｅｈ）乾燥ＤＭＦと
合わせ、かくはんして溶液とした。次に、６０％油分散
液としてのＮαＨ０．３８？　（　９．５　５■リモル
）を加えて、反応物を一晩かくはんした。次にクロロメ
チルメチルエーテル〔アルドリツチ（Ａｌｄｒｉａｋ　
）　）　　０．　７　６　Ｍを加えると、直ちに沈殿が
形成された。反応混合物を、１８時間かくはんした。反
応を，２０〇一酢酸エチル／１　０　ＱｓｌＨ，０中で
停止させた。酢酸エチル層を分離し、５０一〇Ｈ，０で
３回、５０−のＩ　ＮＮＩＳＯＥで１回、５０−のＩＩ
，０で１回そしてブラインで１回、洗浄した。こうして
得られる溶液を乾燥させ、濃縮し、４：ｌヘキサン／酢
酸エチルを用いるシリカゲル上のクロマトグラ７にかげ
て、１．６３ｔの、上記式Ｄ河の化合物を得た。

Ｃ． ｎ ７５ｗＬｔのテトラヒドロフラン中に、上のＢに記載し
たようにして製造した式棟閑の化合物１．６２ｔｃ７．
３ミリモル）を溶解させた。次に、Ｂｔ０１５一中にＮ
ａＯＩｉ　０．　４　ｔ　（　１　０ミリモル）を含有
する溶液を加えると２鳩が形成された。均ＪＸた汎合物
が得られるまで、メタノールを添加した。次に、反応物
を一晩かくはんした。テトラヒドロフランおよびメタノ
ールを真空放赦させて除き、残留する水溶液を、工５−
の酢酸エチルで２回抽出した。次に、水性層を新しい酢
酸エチル５０−でおおって、６　Ｎ　ＥＣＩでｐＨ　２
．　５まで酸性化した。

次に、酢酸エチル眉を分離して、１０−のＨ，Ｏで１回
、そして２５１１１ｔのブラインで１回、洗浄した。

得られる溶液を濃縮して固体を得た。この固体なヘキサ
ンで研和し、Ｆ過し、自然乾燥させて、１．２ｆの上記
式ＸＸ［の化合物を得た。

（　ＸＸＸＩＩ　） 上のＣに記載したようにして製造した式℃０の化合物０
．１２７ｆ（０．７＜リモル）を含有するジクロロメタ
ン溶液２０１Ｌｌを、Ｎ−ヒドロキシこはく酸イミド０
．０８１Ｐ（０．７ミリモルノ、続いてジシクロへキシ
ルカルボジイミド０．１４４ｆ（０．７ミリモル）で処
理し、４時間かくはんした。

次に、反応混合物を戸過し、粗製のヒドロキシこはく酸
イミドを含有するＦ液を、２０分かげて、上の実施例１
１，Ａ−７に記載した手順に従って製造した式Ｘの化合
物０．５０？（０．７ｆリモル）を含有するジクロロメ
タン溶液８０ｍ１ｊに滴加した。

次に、反応物を何時間か攪拌した。次に、反応混合物を
Ｉ　Ｎ　ＮａＯＥ　（　２　Ｘ　２　０　１１ＬＩ　）
　テ洗浄し、炭酸カリウム上で乾燥させ、Ｆ遇し、濃縮
した。濃縮物を９：１ジクロロメタン／メタノール、続
いて９：１：０．２５ジクロロメタン／メタノール／ジ
イソプロビルアミンを用いるシリカゲル上のクロマトグ
ラフにかげて、３７０ηの上記式ＸＸＸＩＩの化合物を
得た。

（　ＸＸＸＩＶ　） 窒素雰囲気下で、上のＤに記載した手順に従って製造し
た式ｘｘｘｎの化合物０．３３５ｆ（０．３８ミリモル
）を、ジクロロメタン３０１Ｌｔ中に溶解させた。この
溶液に、２−（スＡ刊、ニルフ工ニル）一３−フエニル
ーオキサジリジン０．２３Ｏｒ（０．８８ミリ七ル）ナ
加えた。０．５蒔間後１ｃ．、反応物を真空濃縮し、こ
の濃縮物を酢酸１５−に溶解させた。大過劇の水素化シ
アノホウ素（．１　０　０♂＊　ｉ．ｓ　ｉ　！７　％
ル）を加え゛（反応物な、２時間かくはんした。次に、
反応物な真空濃縮し、ジクロｌ：！メタン５　ｏｌ１７
ＶＣ．ｍ解させ．　　Ｉ　Ｎ　Ｎｏ．ＯＥでｐＨを７に
調整しなからｐＢ７緩衝液５０鄭で１回洗浄１−た。有
機渣な再度ｐＨ　７炭価液５０−で洗浄し、炭酸カリウ
ム上で乾燥させ、真空濃縮した。疾縮物を５０：５０ア
セトン／ヘキザンを用いろシリカゲル上のクロ１トグラ
フにかけて、上記式ｘ．ｘｘｒｖの化合物２５３■を得
た。

Ｆ．　　　　（ＸＸＸＩＶ．） 手馳に従って製造した式ｘｘｘｒｖの化合物０−２０１
ｉ’（０．２２３ミリモル）およびトリフルオロ酢酸Ｓ
−を、合わ娃だ。反応物を１．５時間かくは、んした。

追加の１・リフルオロＩｖｌ：酸２−を加えて、プラス
；の羨を洗浄した。反応を、さも！Ｃ１．５時間進行き
せた。セれから、反ｌ６物を真空濃縮し。、エブ・ルス
ーテルで研和し、評過し、窺米雰囲気下で乾燥させ゛′
Ｃ．．この実施例の標題化合物であゐ式ＸＸＸ亘［相］
化合物ｋ，２１８ｑ得ブこ。

キシー柔，８．１２．１７−テトラアＸアイコス寮施例
３に記載したようκ、分爾Ａ，Ｋよって包含されること
が確かめられた標題化会物の合成は、下に記載゜するよ
うにして行なわれた。

（ＸＸＸＭ） アルク゜ン雰囲気下、室温そ、上のＥに記載したＣＸＸ
ＩＸ） 実施例１２、ＡＩｆＣ記載１−た手順を使用−ｒ心が、
３．０８ｒ（２０ミリモル）の２．５−ジヒドロキシ安
息香酸かも出発して、３．０♂の上記式ＸＸＩＸの化合
物を得た。

てブラｄンで１団洗浄した。こうし゛（得られる溶液を
、乾燥させ、濃縮して、２．９２の油を得た。

この油を、福＝１ヘキサン／′酢酸エチルを用いるシリ
カゲル上のクロットグラフにかけて、２つの分画を得た
が５セの第二の分画は、上記弐ＸＸＸの化合物な１．１
６′ｉ′含有していた。

（ＸＸＸ） 窒素雰囲気下で、式Ｘ）ＧＸの化合物３．Ｏｒ（１５．
５ミリ七ル）を、アルドリツチ（Ａｌｔｒｉｃｋ）乾燥
ＤＭＦ５ＱｍＡε合わせ、かくはんして溶液と｛一た。

次に、６０％油分散液としてのＮａＨ　Ｘ、２４ｒ（３
１ミ！）七ル）を加え、混合物をかくはん１−た１，３
時間後に、クｒＪαメチルメチル五一テル２。５ｎ（　
３　３　ミＩＪモル）を加えて、反応物を１８時間かく
はんした．次ｉＣ．，この反応混合物を、酢酸エテル３
００鮮およびＥ，０１００１１ｌに加えた。次に、酢酸
エチル層を分離し℃、７５ｍｌＭ，０で３目、７　５　
ｄ　ｌ　Ｎ　Ｎｅｓ（ＪＥで２団、５０嶋Ｍ，０で２圓
七しＯＣＡ，ＯＣＪＩ， （ＸＸＸＩ） テｌ−ヲ・ヒドロフラン１０−に、上記式ｍの化合物１
．１．　６　ｔ　（　４．１ミリ％ル）を加えた。次に
、ｎ，ｏＩｇｉ中のＮａＯＥ　０．　２　４　ｔ　（　
６ミリ−ｅル）％７加えるＬ、二相が形成された。この
混合物に、・一・一つの相が得られるまでメタノールを
加えた後、混合物な、１８時間か（はんした。七の後，
浴媒を除去し、残劉ｉ′会水浴液を、１５Ｈの酢酸ヱチ
ルで２回抽めした。次に水性層な、３５耐の新しい酢酸
：’−　５’　／’　テＪ＝；　：ｔｄ　イ，，６　Ｍ
　ＢＣＩ″′Ｃ？　ｐＥを２．５に調酢酸エチル層を分
離して、１０１ＩＬｌそしてブラインで１回、洗浄し、
乾 上記式ＸＸＸＩの化合物１．０ｆ ？した。次に、 １１．０で１回、 燥させ、盪縮して、 を、油として得た。

Ｄ．　　Ｘ十■ （　ＸｘｘＩＩ１） 実施例ｌ３、Ｄに記載した手順を使用し、上のＣに記載
したようにして製造した式ＸＸＸ　Ｉの化合物０．１　
７　’？　（　０．７ミリモル）、Ｎ−ヒドロキシこは
く酸イミド０．０８１１（０．７ミリモル）、ジシクロ
へキシルカルボジイミド０．１４４ｒ（０．７ミリモル
）および実施例ｌ１、Ａ−１に記載した手順に従って製
造した式Ｘの化合物０．５　０　？　（　０．７ミリモ
ル）を用いて、クロマトグラフイー後に、上記式幻α皿
の化合物を３７０η得た。

Ｅ． ｘｘｘｍ （ＸＸＸＶ） 実施例１３、Ｅに記載した手順を使用し、上のＤに記載
した手順に従って製造した式ｘｘｘｍの化合物０．３０
８ｆ（０．３３ミリモル）および２一（スルホニルフエ
ニル）−３−７ェニルーオキサジリジン０．２５０ｆ（
０．９６ミリモル）を用いると、酢酸エチル、続いて５
０：５０アセトン／ヘキサンを用いるシリカゲルクロマ
トグ２フィー後に、上記式ｘｘｘｖの化合物が２１０■
得られた。

実施例１３、Ｆに記載した手順を使用し、上のＥに記載
した手順に従って製造した式ｘｘｘｖの化合物０．１０
０ｒ（０．１０４ミリモル）を用いて、この実施例の標
題化合物である式ＸＸＸ■の化合物を１０８η得た。

実施例１５． １Ｂ−インドール−３−アセトアミド，Ｎ−（１６−ア
ミノー４−ヒドロキシ−４．８．１３−トリアザへキサ
デスー１−イル）−４−ヒドロキシ 実施例３に記載したように、分画Ａ２により包含される
ことが確かめられた標題化合物の合成は、下に記載する
ようにして行なわれた。

Ａ． 実施例ｌｌ，Ｄに記載した手順を用い、実施例ｌ１、Ａ
−Ｈに記載したようにして製造した式■の化合物１．１
５ｔ（２．０７ミ！ｊモル）を使用して、粗製の上記式
ｘｘＸ■の化合物１．１Ｏｒを得た。

（　ＸＸＸＩＸ　） 実施例１２、Ｇに記載した別法を用い、上の実施例１２
、ＡないしＦに記載したようにして製造した式ＸＸＩＩ
の化合物０．２　２　８　？　（　６．８　ミリｒ：ル
）、上のＡに記載したようにして製造した式ＸＸＸ■の
化合物０．３８Ｃｌ（６．８ミリモル）、Ｎ−ヒドロキ
シこはく酸イミド０．０７８ｆ（６．８ミリモル）およ
びジシクロへキシルカルボジイミド０．１４０ｆ（６．
８ミリモル）、を含有するジクロロメタン溶液（１５１
Ｌｔ）を使用すると、９：１ジクロロメタン／メタノー
ル、続いて９：１：０．５ジクロロメタン／メタノール
／ジイソプロビルアミン、を用いるシリカゲルクロマト
グラフイー後に、式ｘｘｘｔｘの化合物カ０．　４　０
　７　ｆ　得ラレタ。

ＢＯＣ ＣＸＬ） 実施例ｌ２、Ｈに記載した手順を用い、式ＸＸＸＩＸの
化合物０．３５０ｆ（０．４ミリモル）およぴ２一（ス
ルホニルフエニル）−３−７エニルオキサジリジン０．
２３０ｆ（０．８８ミリモル）を使用丁ると、ｓｏ：ｓ
ｏアセトン／ヘキサンを用いるシリカゲルクロマトグラ
フイー後に、上記式ＸＬの化合物が０．２７４ｆ得られ
た。この生成物は，少量のフエニルスルホンアミドを含
有しており、そのため、酢酸エチル、続いて５０：５０
アセトン／ヘキサン、を用いてシリカゲル上でさらにＳ
製した。

Ｄ．　　　ＸＬ Ｂ （ＸＬＩ） ？施例１２、Ｉの別法を用い、上のＣＫ記載した手順に
従って製造した弐ＸＬの化合物０．１６６ｔ（０．１８
６■リモル）を使用すると、ジオキサン／ＥＣｌ処理後
に、粗製の酸が得られた。式ＸＬ’の酸を、８時間水に
溶解させ、続いて凍結乾燥させると、式ＸＬｌの化合物
が８８ＪＩ９得られた。

Ｂ・／へＮ−　ＢＯＣ Ｂ 窒素雰囲気下で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６０〇
一中の３−ブロモプロピルアミン・Ｅ　Ｂ　ｒ３４。！
ＭＦ（１５７．６ミリモル）をかくはんした。

この溶液に、重炭酸ジーｔ−ブデル３４．４ｔ（１５７
．６ミリモル）、続いてトリエチルアミン３２．３１Ｌ
ｔ（２３６ミｌＪモル）を加えた。沈殿が直ちに形成さ
れた。反応物を、一晩かくはんした。

次に、反応混合物を酢酸エチルで希釈して１．５リット
ルとし、ＩＮＩＩｃｌ５００ｍｌで１回、水５００紅で
３回、ブラインで１＠、洗浄し、Ｎａ，Ｓｏ４上で乾燥
させた。濃縮後に生成物を、４：ｌヘキサン／酢酸エチ
ルを用いるシリカゲルクロマトグラフィー（ＫＭＮＯ，
／Ｉ，）によって監視した。生成物を含有する分画を合
わせて真空濃縮し、５０＋１４のジクｎｏメタンで２回
追い出しを行ない、ＡＡ空でパージしてこの製造例の生
底物２５．８ｆを得た。

（外４名）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分および、５％→２０％Ｂ、９５
   ％→８０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８
   ０％→３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここでＡは、０．１
   ％ＴＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルで
   ある）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用し
   て、Ｃ−１８バイダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））−登録商
   標）２２ｍｍ×２５０ｍｍ、孔径３００Å、粒度１０μ
   のカラムから約２２．７５分で溶出してくる、￥アゲレ
   ノプシス￥・￥アペルタ￥（￥Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ
   ￥￥ａｐｅｒｔａ￥）ぐもの粗製毒液からの分画中に存
   在する； （ｂ）流量１５ｍｌ／分および、０％→０％Ｂ、１００
   ％→１００％Ａ〔０→５分〕、次に０％→１０％Ｂ、１
   ００％→３０％Ａ〔５→２０分〕〔ウオーターズ（Ｗａ
   ｔｅｒｓ）曲線１〕次に１０％→２０％Ｂ、９０％→８
   ０％Ａ〔２０→３０分〕〔ウオーターズ（Ｗａｔｅｒｓ
   ）曲線６〕次に２０％→５０％Ｂ、８０％→５０％Ａ〔
   ３０→４０分〕〔ウオーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）曲線１
   １〕（ここでＡは、０．１％ＴＦＡ水溶液であり、そし
   てＢは、アセトニトリルである）の非直線勾配プログラ
   ムを用いる溶媒系、を使用して、Ｃ−１８バイダツク（
   Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２５０ｍｍ、３００Å孔
   径１０μ粒度のカラムから、約２１．５分で溶出してく
   る、上記（ａ）に記載の分画の分画中に存在する；およ
   び （ｃ）ＦＡＢＭＳ：高分解能：５０５．３８６１、を有
   する、▲数式、化学式、表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、 より成る群から選択される実質上純粋な化合物、および
   その薬学的に受容できる塩。 ２、下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分および、５％→２０％Ｂ、９５
   ％→８０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％−７０％Ｂ、８
   ０％→３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここでＡは、０．１
   ％ＴＦＡ水溶液であり、Ｂは、アセトニトリルである）
   の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、Ｃ
   −１８バイダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２５
   ０ｍｍ、孔径３００Å、粒度１０μカラムから約３８分
   で溶出してくるアゲレノプシス・アペルタ（Ａｇｅｌｅ
   ｎｏｐ−ｓｉｓａｐｅｒｔａ）ぐもの粗製毒液からの分
   画中に存在する；（ｂ）流量１０ｍｌ／分および、２０
   ％−３０％Ｂ、８０％→７０％Ａ〔０→４０分〕〔ウオ
   ーターズ（Ｗａ−ｔｅｒｓ）曲線６〕（ここで、Ａは、
   ０．１％ＴＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニト
   リルである）の非直線勾配プログラムを用いる溶媒系、
   を使用して、Ｃ−１８バイダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））
   ２２ｍｍ×２５０ｍｍ、孔径３００Å、粒度１０μのカ
   ラムから約２２分で溶出してくる、上記（ａ）に記載の
   分画の分画中に存在する；（ｃ）アミノ末端アミノ酸配
   列が： ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ より成る；および （ｄ）ＦＡＢＭＳ：７２６７； を有するポリペプチド および上記ポリペプチドと事実上同一のアミノ酸配列お
   よび事実上同一のカルシウム遮断活性を有するポリペプ
   チド、 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼−ＣＯＮＨ＿２ のポリペプチド および上記ポリペプチドと事実上同一のアミノ酸配列お
   よび事実上同一のカルシウムチャンネル遮断活性を有す
   るポリペプチド、 下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分、５％→２０％Ｂ、９５％→８
   ０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８０％→
   ３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここで、Ａは、０．１％Ｔ
   ＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルである
   ）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、
   Ｃ−１８バイダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ）２２ｍｍ×２５
   ０ｍｍ、孔径３００Å、粒度１０μのカラムから約３９
   分で溶出してくる￥アゲレノプシス￥・￥アペルタ￥（
   ￥Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ￥￥ａｐｅｒｔａ￥）くもの
   粗製毒液からの分画中に存在する； （ｂ）流量１０ｍｌ／分および、２０％→２５％Ｂ、８
   ０％→７５％Ａ〔０→３０分〕〔ウオーターズ（Ｗａｔ
   ｅｒｓ）曲線６〕次に２５％→５０％Ｂ、７５％→５０
   ％Ａ〔３０→４５分〕〔ウォーターズ（Ｗαｔｅｒｓ）
   曲線１１〕（ここで、Ａは、０．１％ＴＦＡ水溶液であ
   り、そしてＢは、アセトニトリルである）の非直線勾配
   プログラムを用いる溶媒系、を使用して、Ｃ−１８バイ
   ダック（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２５０ｍｍ、孔
   径３００Å、粒度１０μのカラムから約３６分で溶出し
   てくる、上の（ａ）に記載の分画の分画中に存在する；
   および （ｃ）アミノ末端アミノ酸配列が： ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ より成る；および （ｄ）イオン−スプレイ（Ｉｏｎ−Ｓｐｒａｙ）ＭＳ：
   ７７９３； を有するポリペプチド および上記ポリペプチドと事実上同一のアミノ酸配列お
   よび事実上同一のカルシウムチャンネル遮断活性を有す
   るポリペプチド、 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼−ＣＯＮＨ＿２ のポリペプチド および上記ポリペプチドと事実上同一のアミノ酸配列お
   よび事実上同一のカルシウムチャンネル遮断活性を有す
   るポリペプチド、 下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分、５％→２０％Ｂ、９５％→８
   ０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８０％→
   ３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここで、Ａは、０．１％Ｔ
   ＦＡ水浴液であり、そしてＢは、アセトニトリルである
   ）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、
   Ｃ−１８バイダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２
   ５０ｍｍ、孔径３００Å、粒度１０μのカラムから約４
   ３分で溶出してくる、￥アゲレノプシス￥・￥アペルタ
   ￥（￥Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ￥￥ａｐｅｒｔａ￥）く
   もの粗製毒液からの分画中に存在する； （ｂ）流量３．５ｍｌ／分および、２５％→４０％Ｂ、
   ７５％→６０％Ａ〔０→３０分〕（ここでＡは、０．１
   ％ＴＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルで
   ある）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用し
   て、Ｃ−１８バイダツク （Ｖｙｄａｃ（Ｒ））１０ｍｍ×２５０ｍｍ、孔径３０
   ０Å、粒度５μのカラムから約２０．２５分で溶出して
   くる、上の（ａ）に記載の分画の分画中に存在する；（
   ｃ）アミノ末端アミノ酸配列が： ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ より成る；および （ｄ）分子量約２０，０００； を有するポリペプチド および上記ポリペプチドと事実上同一のアミノ酸配列お
   よび事実上同一のカルシウムチャンネル遮断活性を有す
   るポリペプチド、 下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分、５％→２０％Ｂ、９５％→８
   ０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８０％→
   ３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここで、Ａは、０．１％Ｔ
   ＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルである
   ）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、
   Ｃ−１８バイダック（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２
   ５０、孔径３００Å、粒度１０μのカラムから約４３分
   で溶出してくる、￥アゲレノプシス￥・￥アペルタ￥（
   ￥Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ￥￥αｐｅｒｔａ￥）ぐもの
   粗製毒液からの分画中に存在する；および （ｂ）流量３．５ｍｌ／分および、２５％→４０％Ｂ、
   ７５％→６０％Ａ〔０→３０分〕（ここで、Ａは、０．
   １％ＴＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリル
   である）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用
   して、Ｃ−１８バイダツク （Ｖｙｄαｃ（Ｒ））１０ｍｍ×２５０ｍｍ、孔径３０
   ０Å、粒度５μのカラムから約２２．５分で溶出してく
   る、上記（ａ）に記載の分画の分画中に存在する；を有
   するポリペプチド および上記ポリペプチドと事実上同一のアミノ酸配列お
   よび事実上同一のカルシウムチャンネル遮断活性を有す
   るポリペプチド、 下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分、５％→２０％Ｂ、９５％→８
   ０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８０％→
   ３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここで、Ａは、０．１％Ｔ
   ＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルである
   ）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、
   Ｃ−１８バイダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２
   ５０ｍｍ、孔径３００Å、粒度１０μのカラムから約４
   ８．３分で溶出してくる、￥アゲレノプシス￥・￥アペ
   ルタ￥（￥Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ￥￥ａｐｅｒｔａ￥
   ）くもの粗製毒液からの分画中に存在する； （ｂ）アミノ末端アミノ酸配列が： ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ より成る；および （ｃ）分子量約８０，０００ を有するポリペプチド および上記のポリペプチドと事実上同一のアミノ酸配列
   および事実上同一のカルシウムチャンネル遮断活性を有
   するポリペプチド、 より成る群から選択される事実上純粋なポリペプチド、
   およびその薬学的に受容できる塩。 ３、下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分および、５％→２０％Ｂ、９５
   ％→８０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８
   ０％→３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここで、Ａは、０．
   １％ＴＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリル
   である）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用
   して、Ｃ−１８バイダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍ
   ｍ×２５０ｍｍ、孔径３００Å、粒度１０μのカラムか
   ら約３８分で溶出してくる、￥アゲレノプシス￥・￥ア
   ペルタ￥（￥Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ￥￥ａｐｅｒｔａ
   ￥）くもの粗製毒液からの分画中に存在する； （ｂ）流量１０ｍｌ／分および、２０％→３０％Ｂ、８
   ０％→７０％Ａ〔０→４０分〕〔ウオーターズ（Ｗａｔ
   ｅｒｓ）曲線６〕（ここで、Ａは、０．１％ＴＦＡ水溶
   液であり、そしてＢは、アセトニトリルである）の非直
   線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、Ｃ−１
   ８バイダック（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２５０ｍ
   ｍ、孔径３００Å、粒度１０μのカラムから約２２分で
   溶出してくる、上の（ａ）に記載の分画の分画中に存在
   する； （ｃ）アミノ末端アミノ酸配列が： ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ より成る；および （ｄ）ＦＡＢＭＳ：７２６７ を有するポリペプチド、 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼、 のポリペプチド、 下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分、５％→２０％Ｂ、９５％→８
   ０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８０％→
   ３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここで、Ａは、０．１％Ｔ
   ＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルである
   ）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、
   Ｃ−１８バイダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２
   ５０ｍｍ、孔径３００Å、粒度１０μのカラムから約３
   ９分で溶出する、￥アゲレノプシス￥・￥アペルタ￥（
   ￥Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ￥￥ａｐｅｒｔａ￥）くもの
   粗製毒液からの分画中に存在する； （ｂ）流量１０ｍｌ／分および、２０％→２５％Ｂ、８
   ０％→７５％Ａ〔０→３０分〕〔ウオーターズ（Ｗａｔ
   ｅｒｓ）曲線６〕次に２５％→５０％Ｂ、７５％→５０
   ％Ａ〔３０→４５分〕〔ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）
   曲線１１〕（ここで、Ａは、０．１％ＴＦＡ水溶液であ
   り、そしてＢは、アセトニトリルである）の非直線勾配
   プログラムを用いる溶媒系、を使用して、Ｃ−１８バイ
   ダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２５０ｍｍ、孔
   径３００Å、粒度１０μのカラムから約３６分で溶出し
   てくる、上記（ａ）に記載の分画からの分画中に存在す
   る；および （ｃ）アミノ末端アミノ酸配列が： ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ より成る；および （ｄ）イオン−スプレイ（Ｉｏｎ−Ｓｐｒａｙ）ＭＳ：
   を有するポリペプチド、 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼、 のポリペプチド、 下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分、５％→２０％Ｂ、９５％→８
   ０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８０％→
   ３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここで、Ａは、０．１％Ｔ
   ＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルである
   ）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、
   Ｃ−１８バイダツク（Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２
   ５０ｍｍ、孔径３００Å、粒度１０μのカラムから約４
   ３分で溶出してくる、￥アゲレノプシス￥・￥アペルタ
   ￥（￥Ａｇｅｌｅｎｏｐｓｉｓ￥￥ａｐｅｒｔａ￥）く
   もの粗製毒液からの分画中に存在する； （ｂ）流量３．５ｍｌ／分および、２５％→４０％Ｂ、
   ７５％→６０％Ａ〔０→３０分〕（ここでＡは、０．１
   ％ＴＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルで
   ある）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用し
   て、Ｃ−１８バイダック （Ｖｙｄａｃ（Ｒ））１０ｍｍ×２５０ｍｍ、孔径３０
   ０Å、粒度５μのカラムから約２０．２５分で溶出して
   くる、上の（ａ）に記載の分画の分画中に存在する；（
   ｃ）アミノ末端アミノ酸配列が： ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ より成る；および （ｄ）分子量約２０，０００ を有するポリペプチド、 下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分、５％→２０％Ｂ、９５％→８
   ０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８０％→
   ３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここでＡは、０．１％ＴＦ
   Ａ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルである）
   の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、Ｃ
   −１８バイダツク （Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２５０ｍｍ、孔径３０
   ０Å、粒度１０μのカラムから約４３分で溶出してくる
   、￥アゲレノプシス￥・￥アペルタ￥（￥Ａｇｅｌｅｎ
   ｏｐｓｉｓ￥￥ａｐｅｒｔａ￥）くもの粗製毒液からの
   分画中に存在する；および （ｂ）流量３．５ｍｌ／分および、２５％→４０％Ｂ、
   ７５％→６０％Ａ〔０→３０分〕（ここでＡは、０．１
   ％ＴＦＡ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルで
   ある）の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用し
   て、Ｃ−１８バイダツク （Ｖｙｄａｃ（Ｒ））１０ｍｍ×２５０ｍｍ、孔径３０
   ０Å、粒度５μのカラムから約２２．５分で溶出してく
   る、上記（ａ）に記載の分画の分画中に存在する；を有
   するポリペプチド、 下記の識別特性： （ａ）流量１５ｍｌ／分、５％→２０％Ｂ、９５％→８
   ０％Ａ〔０→３０分〕次に２０％→７０％Ｂ、８０％→
   ３０％Ａ〔３０→５５分〕（ここでＡは、０．１、ＴＦ
   Ａ水溶液であり、そしてＢは、アセトニトリルである）
   の直線勾配プログラムを用いる溶媒系、を使用して、Ｃ
   −１８バイダツク （Ｖｙｄａｃ（Ｒ））２２ｍｍ×２５０ｍｍ、孔径３０
   ０Å、粒度１０μのカラムから約４８．３分で溶出して
   くる、￥アゲレノプシス￥・￥アペルタ￥（￥Ａｇｅｌ
   ｅｎｏｐｓｉｓ￥￥ａｐｅｒｔａ￥）くもの粗製毒液か
   らの分画中に存在する； （ｂ）アミノ末端アミノ酸配列が： ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ より成る；および （ｃ）分子量約８０，０００、 を有するポリペプチド より成る詳から選択される、特許請求の範囲第２項に記
   載の実質的に純粋なポリペプチドおよびその薬学的に受
   容できる塩。 ４、興奮性アミノ酸神経伝達物質拮抗量の特許請求の範
   囲第１項に記載の化合物またはその薬学的に受容できる
   塩、および薬学的に受容できる希釈剤またはキャリヤー
   より成る、哺乳動物の神経系における細胞に作用を及ぼ
   す興奮性アミノ酸神経伝達物質に拮抗するための薬剤組
   成物。 ５、カルシウムチャンネル遮断量の、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ の特許請求の範囲第１項に記載の化合物またはその薬学
   的に受容できる塩、および薬学的に受容できる希釈剤ま
   たはキャリヤーより成る、哺乳動物の神経系における細
   胞中のカルシウムチャンネルを遮断するための薬剤組成
   物。 ６、興奮性アミノ酸神経伝達物質に拮抗し、カルシウム
   チャンネルを遮断する量の、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ の特許請求の範囲第１項に記載の化合物またはその薬学
   的に受容できる塩、および薬学的に受容できる希釈剤ま
   たはキャリヤーより成る、哺乳動物の神経系の細胞に作
   用を及ぼす興奮性アミノ酸神経伝達物質に拮抗し、哺乳
   動物の神経系の細胞中のカルシウムチャンネルを遮断す
   るための薬剤組成物。 ７、カルシウムチャンネル遮断量の、特許請求の範囲第
   ２項に記載のポリペプチドまたはその薬学的に受容でき
   る塩、および薬学的に受容できる希釈剤またはキャリヤ
   ー、より成る、哺乳動物の細胞中のカルシウムチャンネ
   ルを遮断するための薬剤組成物。 ８、カルシウムチャンネル遮断量の、特許請求の範囲第
   ３項に記載のポリペプチドまたはその薬学的に受容でき
   る塩、および薬学的に受容できる希釈剤またはキャリヤ
   ー、より成る、哺乳動物の細胞中のカルシウムチャンネ
   ルを遮断するための薬剤組成物。