JPH03236796A

JPH03236796A - 酵素による光学分割法

Info

Publication number: JPH03236796A
Application number: JP29499589A
Authority: JP
Inventors: Hiromichi Ota; 博道太田
Original assignee: SEKIYU SANGYO KATSUSEIKA CENTER; Petroleum Energy Center PEC
Current assignee: SEKIYU SANGYO KATSUSEIKA CENTER; Japan Petroleum Energy Center JPEC
Priority date: 1989-11-15
Filing date: 1989-11-15
Publication date: 1991-10-22
Anticipated expiration: 2014-06-02
Also published as: JP2900047B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は酵素によるエステル誘導体の光学分割法に関す
るものである。さらに詳しく述べれば、本発明は農薬等
として利用可能な生理活性物質の製造中間体として有用
な、一般社ｃ式中Ｒは炭素数２〜１２の飽和及び不飽和
アルキル基であリ、Ｒ′は水素またはメチル基である。

また本を付した炭素原子は光学活性な炭素原子である）で表わされる化合物を、式）で表わされるエステル誘導体に酵素を作用させて不斉加
水分解することにより光学分割して単離する方法に関す
るものである。

（従来の技術）一般式（式中Ｒは飽和及び不飽和アルキル基である）を有する
化合物の光学活性体は、例えばフロンタリンやその他の
生理活性物質に誘導可能な重要な中間体である。この様
な３級アルコールの誘導体は還元反応で合成することは
できない。また後の変換反応を考直すると、水酸基は酸
や塩基に強いベンジル基等で保護されていることが留ま
しい。このようなことから、■のタイプの光学活性体を
生物化学的方法で得ようとすると、カルボン酸エステル
の加水分解による方法が考えられろ。

しかし従来０位が２置換の誘導体については成功例があ
るカ［テトラヘドロンレターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏ
ｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ）　、第２８巻、１３０３頁、（１
９８７）　］　、立体的に混んでいる３Ｍ換カルボン酸
の誘導体の不斉加水分解による光学分割の有効な方法は
知られていない。

（発明が解決しようとする１２１１）本発明の目的は、種々の生理活性物質、農薬等の光学活
性体製造の上で有用な出発物質となり得る光学活性な一
般式［１］で表わされる０位に保護された水酸基の他に
２個の炭素官能基を有するカルボン酸誘導体の製造方法
、すなわちエステル誘導体［Ｉ］を不斉加水分解するこ
とにより光学分割し、光学活性な一般式［１］の化合物
を効率的且っ高収率にて取得する方法を提供することに
ある。

（課題を解決するための手段）本発明者は、種々の生理活性物質の製造中間体である光
学活性な一般式［Ｉ］で表わされる化合物を容易に効率
良く製造する方法を見出すべく検討した結果、式［Ｉ］
で表わされるエステル誘導体に、ある種の酵素を作用さ
せて不斉加水分解することにより、容易に光学活性体の
［Ｉ［］を分離できることを見出し、本発明を完成する
に至った。

すなわち本発明の式）で表わされる２−ベンジルオキシ−２−メチルカルボン
酸メチルに加水分解酵素またはそれらを含む酵素混合物
を作用させて不斉加水分解し、式ｃ式中Ｒは炭素数２〜１２の飽和及び不飽和アルキル基
であり、本を付した炭素原子は光学活性な炭素原子であ
る）で表わされる光学活性なカルボン酸および／または
、式（式中Ｒは炭素数２〜１２の飽和及び不飽和アルキ
ル基であり、本を付した炭素原子は光学活性な炭素原子
である）で表わされる光学活性なエステル【１１］を採
取する方法に関するものである。

本発明の方法に用いられる酵素の例はカンジダ属に属す
る菌Ｃａｎｄｉｄａ　ｅｙｌｉｎｄｒａｃｅａが生産す
る酵素で、前記式［１１で表わされるエステル誘導体を
不斉加水分解できるものであるが、その具体例としてリ
パーゼＯＦが最も好ましい。

酵素による加水分解はｐＨ５から８付近で行うことが望
ましく、特にｐＨ７付近で行うことが好ましい。そのた
めには、適当な緩衝液例えばリン酸２ナトリウム、リン
酸１ナトリウム水溶液から調製したリン酸緩衝液等を用
いることが好ましい。このような緩衝液に基質の前記式
［Ｉ］で表わされるエステルおよびリパーゼを加え、３
０℃で２日〜３日往復振盪培養を行う。反応後飽和炭酸
水素ナトリウム水溶液を加えてｐＨ９とし、適当な有機
溶媒、例えばジエチルエーテルで抽出し、常法により処
理、精製して光学活性なエステル［１１１を得ろ。

逆の立体配置をもつカルボンＭ［Ｉ］は上記の方法でエ
ステル［１１］を分離した後、反応混合物を酸性とし、
適当な有機溶媒、例えば酢酸エチル等で抽出し、常法に
従い処理、精製することにより単離することができろ。

本発明の方法によって分離、精製される光学活性な前記
式［Ｉ］の化合物は参考例に上げた方法に従い反応させ
ることにより、農薬として有効に使用しうる昆虫フェロ
モンの一種であるフロンタリンに導くことができる。

（実施例）本発明を以下の実施例によってさらに詳細に説明するが
、本発明はこれに限られるものではない。

実施例１５０００ｍｊの突起付き３角フラスコ内の０．１Ｍのリ
ン酸緩衝液（ｐＨ７，０，１０００曽ｌ）に化合物［Ｉ
］　（Ｒ＝−ＣＨＣＨ＝ＣＨ２，１０ｇ）とリパーゼＯ
Ｆ（１０ｇ）を加え、３０℃にて９６時時間開した。反
応後飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてｐＨ９とし
、塩化ナトリウムを加えて塩析した。このものを、ジエ
チルエーテルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した
。溶媒を減圧で留去し、残渣を減圧蒸留することにより
化合物（＋）−［Ｊ”１（Ｒ＝−ＣＨ，、ＣＨ＝ＣＨ２
）を４０ｇ（収率４０％）＃４Ｊな。抽出後の水層に濃
塩酸を加えてｐＨ２とし、水層を酢酸エチルで２回抽出
した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を
減圧で留去することにより化合物［旧（Ｒ＝−ＣＨ，Ｃ
Ｈ＝ＣＨ，）を４．７ｇ（収率５２％）得た。

化合物（＋）−［Ｉ”］（Ｒ＝−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）
の物性値及びスペクトルデータ：ｂ、ｐ、　　１６０〜１７０℃１０．９膿。

［ａ　］。＋　３．８０°　（ｃ＝１．６３．クロロホ
ルム）。

ｖ、、、ｅｒｌｌ−’　　３０００．２９５０．１７４
０．１４５０．１２１５．１１５５．１１１０゜１０２
０、９２０．７３５．７００゜ ’ＨＮＭＲδ（４００ＭＨｚ、重りｏロホルム）１．４
９（３［（。

ｓ）、　２．６０（２Ｈ，ｄ、　Ｊ＝７．０Ｈｚｌ、　
３．７５（３Ｈ，ｓ）、　４．４９（２Ｈ，ｓ）、５０
１〜５．２１（２Ｈ，ｍ）、　５．６３〜６．１０（Ｉ
　Ｈ，ｍ）　、　７．２７〜７４３（５ＥＩ、ｍ）。

元素分析計算値：　Ｃ，４Ｈ１，０３：　Ｃ，７１，７７；　Ｈ
，７，６９％実測値：　Ｃ，７１，８８，Ｈ，７，５０
％このものは、光学活性シフト試薬であるトリス［３−
トリフルオロメチルヒドロキシメチレン−（−）−カン
ホラトコユーロピウム（ＩＮ）　［Ｅｕ（ｔｆｃ）　］
存在下４００ＭＨｚ　ＮＭＲＸベクトルを測定すること
により、機器の測定誤差範囲内で光学的に純粋であるこ
とが確認された。

化合物［ＩＩ］（Ｒ＝−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）のＩＲス
ペクトルは、構造を支持した。

ｖ、、、ａｍ−”　　３１００．３０５０．３０００．
２９５０．１７１０．１Ｂ４０．１５００゜１４５５、
１３９０．１２８０．１１６０．１１２０．１０３０．
９２０．７４５．７０００このものは、酸性触媒存在下
メタノール中で攪拌することにより化合物（−）−［Ｉ
”１（Ｒ＝−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）に変換し、物性値及
びスペクトルデータを測定した：ｂ、ｐ、　　１６０〜
１７０℃１０．９Ｍ０［ａ　］。−２，６５°　（ｃ　
＝０．９８．クロロホルム）。

そのもののＩＲおよびＮＭＲスペクトルは、加水分解さ
れずに残った（＋）−［Ｉ”１（Ｒ＝−ＣＨ２ＣＨ＝Ｃ
Ｈ２）のそれらと一致した。

元素分析計算値：　Ｃ，４Ｈ，，０３：　Ｃ，７１，７７；　Ｈ
，７，６９％実測値：　Ｃ，７２，１０，Ｈ，７，４１
％このものは、Ｅｕ（ｔｆｅ）３存在下４００ＭＨｚ　
ＮＭＲＸベクトルを測定することにより、光学純度８２
％であることが確認された。

実施例２〜５実施例１と同様にして、以下第１表に示す結果を得た。

第１表 ■ 実施例　Ｒ化合物［Ｉ”１化合物［ｎｌ２Ｈ５Ｃ０Ｈ７ＣＨ６２２１０８１５〉９９４８５参考例実施例１により得られた化合物（−）−［Ｉ“］（Ｒ＝
−ＣＨ２ＣＨ＝　ＣＨ２）をさらにリパーゼＯＦを用い
た不斉加水分解に付し、〉９９％ｅ、　ｅ、の［ＩＩ］
（Ｒ＝−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）を得た。

このものを出発物質として、農薬として有効に使用し得
る昆虫フェロモンの一種であるフロンタリンを通算収率
３８２％で合成した。

パン／゛アセトン（９３，９％Ｌ！ｄｌｐ−トルエンス
ルホニルクロリ１：／ピリジン（９３，８％）、（ｅ１
臭化リチウム、炭酸水ズ：ナトリソム／アセトン（９４
，２％Ｌ（ｆｌマグネシウム／テトラヒドロフジン；　
アセトアルデヒド：りｎｎりｎ／−酸ピリンニウム／チ
ク１１”　ｌ　クン（６５，５％）、（ｇ）２規定ｔｒ
Ａａ／　’）　エチ／Ｌ、　ｘ　−テ／Ｌ、　（８２２
％）。

尚上記においてリパーゼ（Ｌｉｐａｓｅ）　ＯＦば明糖
産業（慟の製品名である。

（−）　−Ｆｒｏｎｔａ　ｌ　ｉ　ｎ

Claims

【特許請求の範囲】

（１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼［ I ］（式中Ｒは炭素数２〜１２の飽和及び不飽和アルキル基
である）で表わされる２−ベンジルオキシ−２−メチルカルボン
酸メチルを光学分割するにあたり、加水分解酵素または
少なくとも一種の加水分解酵素を含む酵素混合物を上記
化合物に作用させ、式 ▲数式、化学式、表等があります▼［ I ＾＊］（式中Ｒは炭素数２〜１２の飽和及び不飽和アルキル基
であり、＊を付した炭素原子は光学活性な炭素原子であ
る）で表わされる光学活性なエステル及び／または式▲
数式、化学式、表等があります▼［II］（式中Ｒは炭素数２〜１２の飽和及び不飽和アルキル基
であり、＊を付した炭素原子は光学活性な炭素原子であ
る）で表わされる光学活性なカルボン酸を採取すること
を特徴とする光学分割法。
（２）酵素がカンジダ属に属する微生物が生産する式［
I ］で表わされる化合物不斉加水分解性酵素である請
求項１記載の光学分割法。
（３）酵素がリパーゼＯＦである請求項１又は２記載の
光学分割法。