JPH03294273A - トリスチルベン化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明はアセチルコリンエステラーゼ活性阻害作用を有
する新規なトリスチルベン化合物に関する。

（従来の技術） 従来、トリスチルベン誘導体としては、例えばコパリフ
ェロールＢ　（ｃｏｐａｌｌｉｆｅｒｏｌ　Ｂ）　　（
Ｙ、Ａ、Ｇｅｅｗａｎａｎｄａ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｐｈ
ｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　２５．１４９８−１５０
０　（１９８６））があげられるが、これはアセチルコ
リンエステラーゼ活性阻害作用については知られていな
い。また、ウキャガラ中のスチルベン誘導体としては、
例えばスシルプシンＡ、　Ｂ　（ｓｃｉｒｐｕｓｉｎ　
Ａ、Ｂ）と称する二量体（Ｋ、Ｎａｋａｊｉｍａ　ｅｔ
　ａｉ、。

Ｃｈｅｍ、Ｐｈａｒｍ、Ｂｕｌｌ、、　２６．３０５０
　（１９７８））およびその二量体（Ｋ、Ｎａｋａｊｉ
ｍａ　ｅｔ　ａｉ、、　　日本薬学会第１０３年会講演
要旨集、ＰＰ２２０　（４Ｄ２−５）、（１９８３））
などが知られている。

（発明が解決しようとする課題） 本発明者らは生薬三稜の原植物の一つとされているウキ
ャガラ（Ｓｃｉｒｐｕｓ　ｙａｇａｒａ　Ｏｈｗｉ）の
塊茎から分離された新規なトリスチルベン化合物がアセ
チルコリンエステラーゼ活性阻害作用を有することを見
出して本発明を完成した。

（課題を解決するための手段） 本発明のトリスチルベン化合物は次の構造式および性状
を有する。

１）構造式 ２）物質の性状：無色粉末 ３）分子式：Ｃ４２Ｈ３゜○１□ ４）分子量：　　７２８　（ｍ／ｚ　７２９（Ｍ＋１）
　、　ＦＡＢ−ＭＳ法により測定） ５）紫外線吸収スペクトル：λ。ｍ　　（ｌｏｇε）７
） ３３００、１６０４．１２８１ １Ｈ−核磁気共鳴スベクトル：　δ　（ｐｐｍ）重ジメ
チルスルホキシド中、内部基準にテトラメチルシランを
使用して測定した核磁気共鳴スペクトル（５００ＭＨｚ
）は次の通りである。

３．３２（ＩＨ，ｑ）、３，４５（１）１．（１）、３
．７９（ＩＨ，ｄ）、４．０９（１Ｂ、ｓ）、４．３８
（ＩＨ，ｄ）、５．８７（ＩＨ，ｓ）、５．９２　（Ｉ
Ｈ，ｄ）、５．９５（ＩＨ，ｔ）、６．０１　（２Ｈ，
ｄ）、６．１４（ＩＨ，ｄ）、　６．１６（ＩＨ，ｓ）
、６．２６（ＩＨ，ｄ）、６．３６（１）１．ｓ）、６
．３６（ＩＨ，（１）、６．５０（ＩＨ，ｑ）、６．５
６（ＩＨ，ｄ）、　６．６１（ＩＨ，ｄ）、６．６２（
ＩＨ，ｄ）、６．６２（ＩＨ，ｄ）、６．６５（ＩＨ，
ｓ）、８．３８（ＩＨ，ｓ）、８．４６（１）１．ｓ）
、８．６３（ＩＨ，ｓ）、　８．６５（ＩＨ，ｓ）、８
．８３（ＩＨ，ｓ）、８．８９（ＩＨ，ｓ）、９．０２
（２Ｈ，ｓ）、９．１０（ＩＨ，ｓ）、９．１３（ＩＨ
，ｓ）、　９．１５（ＩＨ，５）８） １３Ｃ−核磁気共鳴スベクトル：　δ　（ｐｐｍ）重ジ
メチルスルホキシド中、内部基準にテトラメチルシラン
を使用して測定した核磁気共鳴スペクトル（１２５，８
ＭＨｚ）は次の通りである。

４５．６（ＩＣ２ｄ）、　５４．０（ＩＣ，ｄ）、　　
５４．３（ＩＣ，ｄ）、５７．５（ＩＣ，ｄ）、　　５
８．２（ＩＣ，ｄ）、８７．５（ＩＣ，ｄ）、９８．２
（ＩＣ，ｄ）、　９９．４（Ｉｃ、ｓ）、　１０４．３
（ＩＣ，ｄ）、１０４．８（ＩＣ，ｄ）、１０６．３（
ＩＣ，ｄ）、１０９．２（２Ｃ，ｄ）、１０９．７（Ｉ
Ｃ，ｄ）、１１５．９（ＩＣ，ｄ）、１１６．８（ＩＣ
，ｄ）、１１８．５（Ｉｃ、ｓ）、１１９．１　（ＩＣ
，ｄ）、１１９．５（ＩＣ，ｄ）、１１９．６（ＩＣ，
ｄ）、１１９．８（ＩＣ，ｄ）、１２０．４（ＩＣ，ｄ
）、１２２、２（ＩＣ，ｄ）、１２７．０（ＩＣ，ｓ）
、１３３−１（ＩＣ，ｓ）、１３６．８（Ｉｃ、ｓ）、
　１３９．９（ＩＣ，ｓ）、１４０．７（ＩＣ，ｓ）。

１４２．９（ＩＣ，ｓ）、１４５．０（Ｉｃ、ｓ）、１
４６．９（ＩＣ，ｓ）、１４７、　Ｉ　（ＩＣ，ｓ）、
１４７．２（ＩＣ，ｓ）、１４８．９（２Ｃ，ｓ）、１
４９．１（Ｉｃ、ｓ）、１５４．２（Ｉｃ、ｓ）、１５
９．６（Ｉｃ、ｓ）、１６０．２（”Ｉｃ、ｓ）、１６
２．０（ＩＣ，ｓ）、１６２．３（２Ｃ，ｓ）。

１６２．４（ＩＣ，ｓ） 本発明の式（Ｉ）を有するトリスチルベン化合物は種々
の異性体を有する。前記式においては、これらの異性体
およびこれらの異性体の混合物がすべて単一の式で示さ
れている。従って、本発明においてはこれらの異性体お
よびこれらの異性体の混合物をもすべて含むものである
。

本発明の式（Ｉ）を有するトリスチルベン化合物は、常
法に従って塩とすることができる。そのような塩として
は例えばリチウム、ナトリウム、カリウムのようなアル
カリ金属；カルシウム、バリウムのようなアルカリ土類
金属；アルミニウム；あるいはリジン、アルギニンのよ
うな塩基性アミノ酸；などどの塩をあげることができる
。このような塩のうち、好適には薬理上許容される塩で
ある。

本発明の式（Ｉ）を有するトリスチルベン化合物は次の
方法によって得られる。すなわち、ウキャガラの塊茎を
破砕し、水、メタノール、エタノールのようなアルコー
ル類、またはこれらの混合溶剤で抽出し、得られた抽出
液を適当な量まで濃縮する。次いで、得られた残留物に
必要に応じて水を加えた後、該水溶液をｎ−ヘキサン、
石油エーテル等の該水溶液と二相に分かれる低極性有機
溶剤で抽出して有機溶剤に移行する脂溶性成分を除去し
、次いでアルコール−水層を留去する。このようにして
得られた残渣を水に溶解し、クロロホルム、エーテル、
酢酸エチルなどの水と二相に分かれる低極性有機溶剤で
抽出し、有機溶剤層を減圧下で留去すると、主に式（Ｉ
）を有するトリスチルベン化合物を含む分画が得られる
。あるいは、この分画は前記水溶液をｎ−ブタノールな
どのアルコール性有機溶剤で抽出し、得られた有機溶剤
層を減圧上留去する。次いで、得られた残渣を少量のア
ルコールに溶解し、エーテル等の低極性有機溶剤中に攪
拌下漬下し、生ずる沈澱をろ過して除き、エーテル溶液
を濃縮乾固することによっても得ることができる。　　
このようにして得られた分画は、更に分配を利用した各
種の向流分配クロマトグラフィーにより精製することが
できる。例えば遠心液液クロマトグラフィー（Ｋ　、Ｈ
ｏｓｔｅｔｔｍａｎｅｔ　ａｌ、、　ｒＰｒｅｐａｒａ
ｔｉｖｅ　　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ｔｅｃｈ
ｎｉｑｕｅｓＪ、　Ｓｐｒｉｎｇｅｒ　Ｖｅｒｌａｇ、
　Ｂｅｒｌｉｎ、　１９８６）により、二相に分かれる
溶剤系、例えば水、低級アルコールなどの極性溶剤とク
ロロホルム、酢酸エチルなどの低極性有機溶剤とを適宜
混合して得られる溶剤系、を固定相と移動相として用い
て効果的に精製することができる。あるいは、セファデ
ックスＬＨ２０（ファルマシア製）、ダイアイオンＣＰ
−２０（三菱化成■製）などを用いる分配カラムクロマ
トグラフィー、またはシリカゲル、アルミナ、マグネシ
ウム−シリカゲル系のフロリジルのような担体を用いる
吸着クロマトグラフィー等で精製することもできる。こ
のようにして得られる本発明の式（１）を有するトリス
チルベン化合物は、更にＯＤＳ等を担体として用いる逆
相クロマトグラフィーに付し、少量の酸を含む水もしく
は低級アルコール、または水もしくはアセトニトリル等
を適宜混合した溶剤を展開溶剤として用いて精製するこ
ともできる。

本発明の式（Ｉ）を有するトリスチルベン化合物は、文
献未記載の新規化合物であり、アセチルコリンエステラ
ーゼ活性阻害作用を有するので。

例えはアセチルコリン神経系の機能が低下しているアル
ツハイマー型老年痴呆の予防および治療に用いられる。

その授与形態としては常法にしたがってそれ自体または
適宜薬学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤と混合し
、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、注射剤などの形
態で経口的または非経口的に授与することができる。授
与量は対象疾患、投与経路および投与回数などにより異
なるが、例えば成人に対しては１日１　ｍｇ　−１００
０ｍｇを症状に応じて１回または数回に分けて授与する
のが好ましい。

（実施例） 次に実施例および試験例をあげて本発明を更に具体的に
説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない
。

惣 風乾したウキャガラの塊茎５００　ｇを粉砕した後、メ
タノールで３回（計約３　Ｌ）抽出し、抽出液を減圧下
で約ＩＬまで濃縮した。得られた濃縮液にｎ−ヘキサン
を加えて３回（計約１．５Ｌ）抽出した。メタノール層
を減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣を水（約３　Ｌ）
に懸濁した後。

エーテルで３回（計約１．５　Ｌ）分配抽出した。得ら
れたエーテル層より溶剤を留去して、エーテルエキス６
ｇが得られた。

一方、同様にウキャガラ塊茎３．２　ｋｇをメタノール
で同様に抽出し、濃縮後、ｎ−ヘキサンで抽出した。メ
タノール層を減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣を水に
懸濁した後、ｎ−ブタノールで３回抽出した。得られた
ｎ−ブタノール層を減圧下で濃縮乾固した。このように
して得られた残渣をメタノール　４００　ｍｌに溶解し
、マグネチックスターラーで攪拌しながらエーテル４Ｌ
中に滴下した。生じた沈澱をろ去し、次いでエーテル溶
液を濃縮乾固するとエーテルエキス４４　ｇが得られた
。

このようにして得られたエーテルエキスのうち、約２０
　ｇを、クロロホルム−メタノール−ブタノール−水（
５：４：２：４）の下層約１００　ａｘｌに溶解した。

上記溶剤の下層を充填した遠心液液クロマトグラフィー
（三鬼エンジニアリング社製）に付し、上層を展開溶剤
として溶出分離した。各フラクションは高速液体クロマ
トグラフィー（カラム：　００５、展開溶剤：水−メタ
ノール−酢酸（８０：２０：１）　）により分析し、目
的化合物を含むフラクションを集め、減圧下で濃縮乾固
した。更にクロロホルム−イソアミルアルコール−水（
５：　６　：　９）を溶剤系として用い、高速液体クロ
マトグラフィーで目的化合物を確認しながら遠心液液ク
ロマトグラフィーによる分離を繰り返した。目的化合物
を含むフラクションを減圧下で濃縮乾固すると少量の不
純物を含む目的化合物０．８ｇが得られた。この両分５
０　ｍｇを逆相クロマトグラフィー（Ｌｉｃｈｒｏｐｒ
ｅｐＲＰ−８、Ｍｅｒｃｋ社製）に付し、水−メタノー
ル−酢酸（７５：　２５　：　１）で溶出することによ
り、はぼ純粋な目的化合物４０　ｍｇが得られた。更に
、これをＯＤＳを担体とし、水−メタノール−酢酸（８
２：　１８　：　１）を展開溶剤として用いる分取液体
クロマトグラフィーにより精製すると純粋な目的化合物
２０　ｍｇが得られた。

試験例１．アセチルコリンエステラーゼ活性阻害試験 電気鰻より調製したアセチルコリンエステラーゼを用い
て、Ｅｌｌ＋＋ａｎらの方法　（Ｇ、Ｌ、Ｅｌｌｍａｎ
　ｅｔａｌ、、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｐｈａｒｍａｃｏ
ｌ、、　７．８８−９５　（１９６１））に準じてアセ
チルコリンエステラーゼ活性を測定した。すなわち、ア
セチルコリンエステラーゼの基質のアセチルチオコリン
、検体、ジチオビスニトロ安息香酸（ＤＴＮＢ）を混和
してインキュベートした後、産生じたチオコリンとＤＴ
ＮＢとの反応物を４１２　ｎｍの吸光度の変化より測定
した。検体の５０　％阻害濃度　（ＩＣ５゜）　を表１
に示す。

表 １Ｃｓｏ　（μｇ／ｍ１） ２．８８ 検体 式（Ｉ）の化合物 ９−７ミノー１．２，３．４− テトラヒト°ｒ１７グリ＞”ン　　　　　　　　　　　
　　　０．２６脳内アセチルコリン神経系が活性化され
ると体温が低下することが知られている。従って、被検
体化合物、が実際に脳内アセチルコリンエステラーゼ活
性を阻害して、脳内アセチルコリン神経系を活性化して
いるかどうかを試験するため、マウスに検体を投与して
体温を測定した。検体の投与後４時間まで直腸温度を測
定し、無処置群と較べて表２ 検体　用量（ｍｇ／ｋｇ）　　ｍ与力法　降下度（℃）
式（Ｉ）の化合物　１００　　　　腹腔内　　　２．０
９−７ミノー１．２，３．４− テトラヒト■７グリシ゛′ン　　　　３０　　　　　　
　経口　　　　　　　　２．９フイソ”スチグミン　　
　　　　　　２　　　　　　経口　　　　　　　　３．
４（実施例の効果） 表１より、トリスチルベン化合物はアセチルコリンエス
テラーゼ活性を阻害した。

また１表２より、トリスチルベン化合物は脳内アセチル
コリンエステラーゼ活性を阻害した。

（発明の効果） 本発明の式（Ｉ）を有するトリスチルベン化合物はアセ
チルコリンエステラーゼ活性阻害作用および脳内アセチ
ルコリンエステラーゼ活性阻害作用を有し、例えばアセ
チルコリン神経系の機能が低下しているアルツハイマー
型老年痴呆の予防および治療に有用である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） を有するトリスチルベン化合物およびその塩。