JPH0336515B2 - - Google Patents
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- JPH0336515B2 JPH0336515B2 JP60124555A JP12455585A JPH0336515B2 JP H0336515 B2 JPH0336515 B2 JP H0336515B2 JP 60124555 A JP60124555 A JP 60124555A JP 12455585 A JP12455585 A JP 12455585A JP H0336515 B2 JPH0336515 B2 JP H0336515B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- biphenyl
- strain
- pseudomonas
- gene
- pmfb1
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
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- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
(イ) 本発明はビフエニル代謝機能を有するシユ
ウドモナス・シユウドアルカリゲネス
（Pseudomonas Pseudoalcaligenes）由来の新規
な外来遺伝子pph Ａ−Ｃ及びこれを保有する新
規な微生物シユウドモナス・シユウドアルカリゲ
ネスKF707株に関するものである。 本遺伝子は、例えば増殖能の高いシユウドモナ
ス・プチダ（Pseudomonas putida）やシユウド
モナス・エルギノーサ（Pseudomonas
aeruginosa）等に組換え形質転換させた微生物
を用いて化合物２−ハイドロキシ−６−オキソ
−６−フエニルヘキサ−２，４−ジエノイツクア
シツド及びその誘導体を製造せしめ、病源菌とし
て知られている例えばスタフイロコツカス属など
のグラム陽性菌及び大腸菌などのグラム陰菌に対
する殺菌剤や生理活性物質の中間体としての生産
に寄与できることが期待されるものである。 (ロ) 従来の技術 従来、ビフエニルを資化する細菌については数
種類分離され、その代謝様式も検討されている
が、遺伝子単位で検討された例は知られていな
い。 また、ビフエニルの特定の中間代謝物について
は代謝様式を含めて遺伝子単位で検討された例は
ない。 そこで、本発明者らはビフエニル代謝機構に関
連する遺伝子について研究を進めた結果、シユウ
ドモナス・シユウドアルカリゲネス由来の遺伝子
bph Ａ−Ｃをとり出すことに成功し、本発明を
完成するに至つた。 (ハ) 発明の構成 外来遺伝子bph Ａ−Ｃの給源としては、ビフ
エニル代謝に関与する遺伝子を体内に保有する微
生物で、本発明者が自然界より分離したシユウド
モナス・シユウドアルカリゲネスKF707
（Pseudomonas PseudoalcaligenesKF707）
（FERM Ｐ−8297）を例示できる。 なお、本菌株の菌学的性質は以下のとおりであ
る。 〔菌学的性質〕 グラム 陰性 桿菌 0.7×1.5〜2.0μ 極鞭毛 １本 色素産生 なし オキシダーゼ 陽性 スターチ加水分解 陰性 41℃での生育 陽性 最適生育温度 35℃ 資化性 グルコース、こはく酸、乳酸、ピルビン
酸 以上の菌学的性質からバージイーズ、マニユア
ル オブ システイマテイク オブ バクテリオ
ロジー第９版に基づき検索した結果、シユウドモ
ナス・シユウドアルカリゲネス（Pseudomonas
pseudoalcaligenes）と認められた。 なお、本菌株は、新規な外来遺伝子bph Ａ−
Ｃを保有する点で新規な微生物である。 本菌株からの該遺伝子の切出しは、前記菌株を
例えばＬ倍地（バクトリプトン10ｇ、イーストエ
キス５ｇ、食塩５ｇ、蒸溜水１）に一晩増殖さ
せ、リゾチーム−SDS法により溶菌した染色体
DNAを調製し、次いで、染色体DNA（1μｇ）を
制限酵素Xhoで切断することにより、本遺伝子
を得ることができる。 本遺伝子の各種制限酵素による切断数は第１表
に示すとおりである。
ウドモナス・シユウドアルカリゲネス
（Pseudomonas Pseudoalcaligenes）由来の新規
な外来遺伝子pph Ａ−Ｃ及びこれを保有する新
規な微生物シユウドモナス・シユウドアルカリゲ
ネスKF707株に関するものである。 本遺伝子は、例えば増殖能の高いシユウドモナ
ス・プチダ（Pseudomonas putida）やシユウド
モナス・エルギノーサ（Pseudomonas
aeruginosa）等に組換え形質転換させた微生物
を用いて化合物２−ハイドロキシ−６−オキソ
−６−フエニルヘキサ−２，４−ジエノイツクア
シツド及びその誘導体を製造せしめ、病源菌とし
て知られている例えばスタフイロコツカス属など
のグラム陽性菌及び大腸菌などのグラム陰菌に対
する殺菌剤や生理活性物質の中間体としての生産
に寄与できることが期待されるものである。 (ロ) 従来の技術 従来、ビフエニルを資化する細菌については数
種類分離され、その代謝様式も検討されている
が、遺伝子単位で検討された例は知られていな
い。 また、ビフエニルの特定の中間代謝物について
は代謝様式を含めて遺伝子単位で検討された例は
ない。 そこで、本発明者らはビフエニル代謝機構に関
連する遺伝子について研究を進めた結果、シユウ
ドモナス・シユウドアルカリゲネス由来の遺伝子
bph Ａ−Ｃをとり出すことに成功し、本発明を
完成するに至つた。 (ハ) 発明の構成 外来遺伝子bph Ａ−Ｃの給源としては、ビフ
エニル代謝に関与する遺伝子を体内に保有する微
生物で、本発明者が自然界より分離したシユウド
モナス・シユウドアルカリゲネスKF707
（Pseudomonas PseudoalcaligenesKF707）
（FERM Ｐ−8297）を例示できる。 なお、本菌株の菌学的性質は以下のとおりであ
る。 〔菌学的性質〕 グラム 陰性 桿菌 0.7×1.5〜2.0μ 極鞭毛 １本 色素産生 なし オキシダーゼ 陽性 スターチ加水分解 陰性 41℃での生育 陽性 最適生育温度 35℃ 資化性 グルコース、こはく酸、乳酸、ピルビン
酸 以上の菌学的性質からバージイーズ、マニユア
ル オブ システイマテイク オブ バクテリオ
ロジー第９版に基づき検索した結果、シユウドモ
ナス・シユウドアルカリゲネス（Pseudomonas
pseudoalcaligenes）と認められた。 なお、本菌株は、新規な外来遺伝子bph Ａ−
Ｃを保有する点で新規な微生物である。 本菌株からの該遺伝子の切出しは、前記菌株を
例えばＬ倍地（バクトリプトン10ｇ、イーストエ
キス５ｇ、食塩５ｇ、蒸溜水１）に一晩増殖さ
せ、リゾチーム−SDS法により溶菌した染色体
DNAを調製し、次いで、染色体DNA（1μｇ）を
制限酵素Xhoで切断することにより、本遺伝子
を得ることができる。 本遺伝子の各種制限酵素による切断数は第１表
に示すとおりである。
【表】
また、本遺伝子の断片の制限酵素地図は第１図
に示されるとおりである。 次に、本遺伝子のビフエニル代謝様式と遺伝子
群との関係は次に示すとおりである。 上記反応式において、Ａ、Ｂ、Ｃは反応を司る
酵素を示し、Ａはビフエニル オキシゲナーゼ、
Ｂはジヒドロキシジオール デヒドロゲナーゼ、
Ｃはフエニルカテコール オキシゲナーゼを各々
示している。 また、これらの酵素に対応する遺伝子として、
bphA、bphB、bphCが存在しこれらの遺伝子は
オペロンを形成している。またＰはプロモーター
を示す。 本遺伝子の利用にあたつては、例えば、大腸菌
エシエリヒア・コリKF637（Escherichia coli
KF637）（FERM Ｐ−8296）由来のpKF330を常
法により該菌株より取り出した後、制限酵素Xho
で切断後T4リガーゼで結合させ組換えプラス
ミドpMFB1を構築する（第３図）。 なお、pKF330は第２図に示すようにカナマイ
シン耐性とストレプトマイシン耐性を有する
12.6kbのプラスミドである。カナマイシン耐性遺
伝子部位にはXhoなどの挿入失活部位を有して
おり、またカナマイシンのプロモーターを利用で
きる。 次に宿主株として増殖能の高いシユウドモナ
ス・プチダKF107（Pseudomonasputida KF107）
（FERM Ｐ−8294）やシユウドモナス・エネギ
ノーサKF204（Pseudomonas aeruginosa
KF204）などを例示できる。形質転換方法及び形
質転換体の選択にあたつては、該菌株等を対数増
殖期（５×108 細胞／ml）まで培養し、集菌、
洗浄後、冷バツフアー（10ｍＭ MOPS−10ｍ
Ｍ RbCl−100ｍＭ MgCl2、PH7.0）に懸濁し、
次いで遠心後、冷バツフアー（100ｍＭ
MOPS−10ｍＭ RbCl−100ｍＭ CaCl2、PH
6.5）に再懸濁し０℃、30分インキユベートする。
次に遠心後、菌株を1/10量の冷バツフアーに懸
濁する。この0.2mlコンピテントセルに組換えプ
ラスミド（0.5μｇ）を加え０℃にて１時間インキ
ユベート後42℃で２分間ヒートシヨンクする。３
mlのＬ倍地を加え、30℃で３時間インキユベート
した後ストレプトマイシン（200μｇ／ml）を含
むＬ−寒天培地上でpKF330及び組換えプラスミ
ドを保有する形質転換体を一次スクリーニングす
る。ビフエニル遺伝子を保有する目的とする形質
転換体（組換え微生物）は２，３−ジヒドロキシ
ビフエニル溶液（１mg／ml）を一次スクリーニン
グで生じたコロニーに噴霧することにより黄変す
るコロニーを選択する。ビフエニル代謝遺伝子を
含むクローンはビフエニル及びビフエニル関連化
合物より黄色物質を蓄積させ、黄色物質を酸性下
（PH１〜２）で酢酸エチルで抽出後、トリチルシ
リル化してGC−MSによる分析を行いこれが化
合物（図４）及びその誘導体であることを確認
する。 (ニ) 実施例 実施例 １ ビフエニル資化性菌シユウドモナス・シユウド
アルカリゲネスKF707株（FERM Ｐ−8297）を
Ｌ培地で一晩培養し、集菌、洗浄後、0.1Mトリ
ス（PH7.9）、１ｍＭ EDTA バツフアーに懸濁
する。次にリゾチームを最終濃度2μｇ／mlにな
るように加え、室温で５分間インキユベートし、
10％SDSを50μ／mlになるように加え溶菌し
た。 次いでプロナーゼ、RNase処理をしたのちフ
エノール抽出を行い、エーテルでフエノールを除
去した。このようにして調製したDNAは10ｍＭ
トリス、１ｍＭ EDTA バツフアーに透析し
た。 一方、プラスミドpKF330を有するエシエリヒ
ア・コリKF637（FERM Ｐ−8296）をＬ培地で
一晩培養し、アルカリ−SDS法によりpKF330を
調製した。染色体DNA及びプラスミドpKF330
を制限酵素XhoIで切断後、T4−リガーゼで連結
した。次いで組換えプラスミドを宿主株であるシ
ユウドモナス・エルギノーサKF204（FERM Ｐ
−8295）に導入した。すなわち、対数増殖期（約
４×108セル／ml）のKF204株を集菌し、等量の
冷バツフアー（10ｍＭ MOPS、10ｍＭ RbCl、
100ｍＭ MgCl2、PH7.0）で洗浄後、冷バツフア
ー（100ｍＭ MOPS、10ｍＭ RbCl、100ｍ
Ｍ CaCl2、PH6.5）に再懸濁し、０℃にて30分間
放置した。次に遠心後、1/10量の冷バツフアー
に再懸濁し、その0.2ml細胞懸濁液と精製した
pMFB1（0.5μｇ）と０℃、１時間インキユベート
した。42℃で２分間、ヒートシヨツクした後、３
mlのＬ培地を加え30℃で３時間培養した。ビフエ
ニル代謝遺伝子群（bph Ａ−Ｃ）の組込まれた
pMFB1を保有する形質転換体はストレプトマイ
シン（200μｇ／ml）を含むＬ−寒天培地で２，
３−ジヒドロキシビフエニル溶液（１mg／ml）を
噴霧して黄色となるコロニーとして選択した。次
いで形質転換体をストレプトマイシン200μｇ／
mlを含むＬ培地で一晩培養後、常法によりプラス
ミドを調製した。次いで調製したパラスミド
pMFB1をXhoで切断すると7.9kbのbph Ａ−
Ｃ遺伝子が切り出された。本遺伝子は第１図に示
す制限酵素切断点を有していた。 実施例 ２ 実施例１で調製した組換えプラスミドpMFB１
を用いて、シユウドモナス・プチダKF107
（FERM Ｐ−8294）を実施例１の方法によつて
形質転換した。その結果、１×103セル／μｇ
DNAの頻度でpMFB1を保有する形質転換体シユ
ウドモナス・プチダKF138が得られた。 実施例 ３ 実施例１により調製したpMFB1を保有するシ
ユウドモナス・エルギノーサKF257を炭素源とし
てこはく酸（１mg／ml）を含むBSM寒天培地に
塗布（摂取）しビフエニル粉末をペトリ皿のふた
においてビニールテープでシールした。KF257株
の増殖とともにビフエニル蒸気をとり込んだ菌体
は、ビフエニルを化合物に変化せしめ、培地は
鮮やかに黄変した。 上記の反応はpMFB1を保有しない宿主株シユ
ウドモナス・エルギノーサKF204（FERM Ｐ−
8295）では全く認められなかつた。以上の反応は
pMFB1を保有するシユウドモナス・プチダ
KF138においても同様に認められた。 なお、宿主株及びpMFB1を保有するKF257株
について グラム染色 陰性 鞭毛 １本 細胞の大きさ 0.5−0.7×2.0 最適生育温度 37℃ 青色色素（ピオシアニン） 生成 オキシダーゼ ＋ GC含量 67％ 以上の性質等によりKF257株はシユウドモナ
ス・エルギノーサであることを確認した。 また、宿主株及びpMFBIを保有するKF138株
について グラム染色 陰性 鞭毛 ＞１ ピオシアニン 生成せず 蛍光色素 生成 至適生育温度 25−30℃ オキシダーゼ ＋ GC含量 60％ でんぷん加水分解 ＋ 以上の性質等によりKF138株はシユウドモナ
ス・プチダであることを確認した。 (ホ) 発明の効果 ビフエニル代謝機能を有する外来遺伝子bph
Ａ−Ｃを増殖効率の優れた微生物に組換え、形質
転換微生物を用いて、化合物 ２−ハイドロキ
シ−６−オキソ−６−フエニルヘキサ−２，４−
ジエノイツクアシツド及びその誘導体を安価に製
造することが可能となる。
に示されるとおりである。 次に、本遺伝子のビフエニル代謝様式と遺伝子
群との関係は次に示すとおりである。 上記反応式において、Ａ、Ｂ、Ｃは反応を司る
酵素を示し、Ａはビフエニル オキシゲナーゼ、
Ｂはジヒドロキシジオール デヒドロゲナーゼ、
Ｃはフエニルカテコール オキシゲナーゼを各々
示している。 また、これらの酵素に対応する遺伝子として、
bphA、bphB、bphCが存在しこれらの遺伝子は
オペロンを形成している。またＰはプロモーター
を示す。 本遺伝子の利用にあたつては、例えば、大腸菌
エシエリヒア・コリKF637（Escherichia coli
KF637）（FERM Ｐ−8296）由来のpKF330を常
法により該菌株より取り出した後、制限酵素Xho
で切断後T4リガーゼで結合させ組換えプラス
ミドpMFB1を構築する（第３図）。 なお、pKF330は第２図に示すようにカナマイ
シン耐性とストレプトマイシン耐性を有する
12.6kbのプラスミドである。カナマイシン耐性遺
伝子部位にはXhoなどの挿入失活部位を有して
おり、またカナマイシンのプロモーターを利用で
きる。 次に宿主株として増殖能の高いシユウドモナ
ス・プチダKF107（Pseudomonasputida KF107）
（FERM Ｐ−8294）やシユウドモナス・エネギ
ノーサKF204（Pseudomonas aeruginosa
KF204）などを例示できる。形質転換方法及び形
質転換体の選択にあたつては、該菌株等を対数増
殖期（５×108 細胞／ml）まで培養し、集菌、
洗浄後、冷バツフアー（10ｍＭ MOPS−10ｍ
Ｍ RbCl−100ｍＭ MgCl2、PH7.0）に懸濁し、
次いで遠心後、冷バツフアー（100ｍＭ
MOPS−10ｍＭ RbCl−100ｍＭ CaCl2、PH
6.5）に再懸濁し０℃、30分インキユベートする。
次に遠心後、菌株を1/10量の冷バツフアーに懸
濁する。この0.2mlコンピテントセルに組換えプ
ラスミド（0.5μｇ）を加え０℃にて１時間インキ
ユベート後42℃で２分間ヒートシヨンクする。３
mlのＬ倍地を加え、30℃で３時間インキユベート
した後ストレプトマイシン（200μｇ／ml）を含
むＬ−寒天培地上でpKF330及び組換えプラスミ
ドを保有する形質転換体を一次スクリーニングす
る。ビフエニル遺伝子を保有する目的とする形質
転換体（組換え微生物）は２，３−ジヒドロキシ
ビフエニル溶液（１mg／ml）を一次スクリーニン
グで生じたコロニーに噴霧することにより黄変す
るコロニーを選択する。ビフエニル代謝遺伝子を
含むクローンはビフエニル及びビフエニル関連化
合物より黄色物質を蓄積させ、黄色物質を酸性下
（PH１〜２）で酢酸エチルで抽出後、トリチルシ
リル化してGC−MSによる分析を行いこれが化
合物（図４）及びその誘導体であることを確認
する。 (ニ) 実施例 実施例 １ ビフエニル資化性菌シユウドモナス・シユウド
アルカリゲネスKF707株（FERM Ｐ−8297）を
Ｌ培地で一晩培養し、集菌、洗浄後、0.1Mトリ
ス（PH7.9）、１ｍＭ EDTA バツフアーに懸濁
する。次にリゾチームを最終濃度2μｇ／mlにな
るように加え、室温で５分間インキユベートし、
10％SDSを50μ／mlになるように加え溶菌し
た。 次いでプロナーゼ、RNase処理をしたのちフ
エノール抽出を行い、エーテルでフエノールを除
去した。このようにして調製したDNAは10ｍＭ
トリス、１ｍＭ EDTA バツフアーに透析し
た。 一方、プラスミドpKF330を有するエシエリヒ
ア・コリKF637（FERM Ｐ−8296）をＬ培地で
一晩培養し、アルカリ−SDS法によりpKF330を
調製した。染色体DNA及びプラスミドpKF330
を制限酵素XhoIで切断後、T4−リガーゼで連結
した。次いで組換えプラスミドを宿主株であるシ
ユウドモナス・エルギノーサKF204（FERM Ｐ
−8295）に導入した。すなわち、対数増殖期（約
４×108セル／ml）のKF204株を集菌し、等量の
冷バツフアー（10ｍＭ MOPS、10ｍＭ RbCl、
100ｍＭ MgCl2、PH7.0）で洗浄後、冷バツフア
ー（100ｍＭ MOPS、10ｍＭ RbCl、100ｍ
Ｍ CaCl2、PH6.5）に再懸濁し、０℃にて30分間
放置した。次に遠心後、1/10量の冷バツフアー
に再懸濁し、その0.2ml細胞懸濁液と精製した
pMFB1（0.5μｇ）と０℃、１時間インキユベート
した。42℃で２分間、ヒートシヨツクした後、３
mlのＬ培地を加え30℃で３時間培養した。ビフエ
ニル代謝遺伝子群（bph Ａ−Ｃ）の組込まれた
pMFB1を保有する形質転換体はストレプトマイ
シン（200μｇ／ml）を含むＬ−寒天培地で２，
３−ジヒドロキシビフエニル溶液（１mg／ml）を
噴霧して黄色となるコロニーとして選択した。次
いで形質転換体をストレプトマイシン200μｇ／
mlを含むＬ培地で一晩培養後、常法によりプラス
ミドを調製した。次いで調製したパラスミド
pMFB1をXhoで切断すると7.9kbのbph Ａ−
Ｃ遺伝子が切り出された。本遺伝子は第１図に示
す制限酵素切断点を有していた。 実施例 ２ 実施例１で調製した組換えプラスミドpMFB１
を用いて、シユウドモナス・プチダKF107
（FERM Ｐ−8294）を実施例１の方法によつて
形質転換した。その結果、１×103セル／μｇ
DNAの頻度でpMFB1を保有する形質転換体シユ
ウドモナス・プチダKF138が得られた。 実施例 ３ 実施例１により調製したpMFB1を保有するシ
ユウドモナス・エルギノーサKF257を炭素源とし
てこはく酸（１mg／ml）を含むBSM寒天培地に
塗布（摂取）しビフエニル粉末をペトリ皿のふた
においてビニールテープでシールした。KF257株
の増殖とともにビフエニル蒸気をとり込んだ菌体
は、ビフエニルを化合物に変化せしめ、培地は
鮮やかに黄変した。 上記の反応はpMFB1を保有しない宿主株シユ
ウドモナス・エルギノーサKF204（FERM Ｐ−
8295）では全く認められなかつた。以上の反応は
pMFB1を保有するシユウドモナス・プチダ
KF138においても同様に認められた。 なお、宿主株及びpMFB1を保有するKF257株
について グラム染色 陰性 鞭毛 １本 細胞の大きさ 0.5−0.7×2.0 最適生育温度 37℃ 青色色素（ピオシアニン） 生成 オキシダーゼ ＋ GC含量 67％ 以上の性質等によりKF257株はシユウドモナ
ス・エルギノーサであることを確認した。 また、宿主株及びpMFBIを保有するKF138株
について グラム染色 陰性 鞭毛 ＞１ ピオシアニン 生成せず 蛍光色素 生成 至適生育温度 25−30℃ オキシダーゼ ＋ GC含量 60％ でんぷん加水分解 ＋ 以上の性質等によりKF138株はシユウドモナ
ス・プチダであることを確認した。 (ホ) 発明の効果 ビフエニル代謝機能を有する外来遺伝子bph
Ａ−Ｃを増殖効率の優れた微生物に組換え、形質
転換微生物を用いて、化合物 ２−ハイドロキ
シ−６−オキソ−６−フエニルヘキサ−２，４−
ジエノイツクアシツド及びその誘導体を安価に製
造することが可能となる。
第１図は外来遺伝子bph Ａ−Ｃの制限酵素切
断地図を示す。第２図はエシエリヒヤ・コリ由来
のプラスミドpKF330の構造を示す。第３図は組
換えプラスミドpMFB1の作製手順とその構造を
示す。
断地図を示す。第２図はエシエリヒヤ・コリ由来
のプラスミドpKF330の構造を示す。第３図は組
換えプラスミドpMFB1の作製手順とその構造を
示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ シユウドモナス・シユウドアルカリゲネス由
来のビフエニル代謝機能を有する外来遺伝子であ
つて、分子量が7.9キロベースであり、次の制限
酵素において塩基の切断数が特徴づけられる外来
遺伝子 ２ シユウドモナス・シユウドアルカリゲネス由
来のビフエニル代謝機能を有する外来遺伝子であ
つて、分子量が7.9キロベースであり、次の制限
酵素において塩基の切断数が特徴づけられる外来
遺伝子 を保有する新規な微生物シユウドモナス・シユウ
ドアルカリゲネスKF707株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60124555A JPS61282085A (ja) | 1985-06-08 | 1985-06-08 | ビフエニル代謝機能を備えた外来遺伝子ｂｐｈ Ａ−Ｃ及びこれを保有する新規な微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60124555A JPS61282085A (ja) | 1985-06-08 | 1985-06-08 | ビフエニル代謝機能を備えた外来遺伝子ｂｐｈ Ａ−Ｃ及びこれを保有する新規な微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61282085A JPS61282085A (ja) | 1986-12-12 |
| JPH0336515B2 true JPH0336515B2 (ja) | 1991-05-31 |
Family
ID=14888376
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60124555A Granted JPS61282085A (ja) | 1985-06-08 | 1985-06-08 | ビフエニル代謝機能を備えた外来遺伝子ｂｐｈ Ａ−Ｃ及びこれを保有する新規な微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61282085A (ja) |
-
1985
- 1985-06-08 JP JP60124555A patent/JPS61282085A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS61282085A (ja) | 1986-12-12 |
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