JPH03501686A - 油を含んで成る自由流動性噴霧乾燥食用粉末の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 油を含んで成る自由流動性噴霧乾燥食用粉末の製造法発明の背景 本発明は、栄養製品の噴霧乾燥に関する。更に詳細には、本発明は油含有栄養製 品、特に油溶性ビタミンの噴霧乾燥に関する。本発明は、ゼラチンを含んで成る 噴霧乾燥した栄養製品にも関する。

本出願人らに知られている最も密接に関連した技術は、ビタミンＥとゼラチンを 含んで成る粉末であり、この粉末はホフマンーラ・ロシュ、インゴーボシーテド （Ｈｏｆ’ｆ’−ｍａｎ−Ｌａ　Ｒｏｃｈｅ、　Ｉｎｃ、）より発売されている 。この製品は１９８７年７月１日より以前に発売されている。更に、本出願人ら はビタミンＥアセテート５０％ＳＤとして知られるこの製品を分析して、その中 のゼラチンの重量平均分子量が１５．０００〜２５．０００であることを見出し たが、本出願人らはこの製品の製造においてホフマンーラ・ロシュが用いている 方法については何んら知見を得ていない。

ホフマンーラ・ロシニによって発売されているビタミンＥ製品に加えて、同様な 製品がロータ・ブロック（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕ　ｌ　ｅｎｃ）からも発売されて いる。ロータ・ブロック製品は、はぼ５０重量％のビタミンＥと５０重量％のゼ ラチンとから成っている。しかしながら、ロータ・プロンク製品は、水に再分散 すると、不安定なエマルジョンを形成し、またロータ・ブロックの粉末は、錠剤 成形すると、比較的柔らかな錠剤を形成する。更に、ロータ・プロンク製品に用 いられるゼラチンの重量平均分子量は５８９０であり、この分子量は本出願人ら がクレームする分子量範囲よりも遥かに小さいことを見出した。

本発明に関連しているものには、ホフマンーラ・ロシュ、インゴーポシーテド（ ｌＩｏｆＴｍａｎ−Ｌａ　Ｒｏｃｈｅ、　Ｉｎｃ、）に譲渡された３つの米国特 許があり、これらの特許は米国特許第３，６０８．０８３号、米国特許第３．９ １４，４３０号および米国特許第３．９６２，３８４号である。これらの特許の それぞれについて、以下に簡単に説明する。

米国特許第３．８０８．０８３号は、加水分解したゼラチンを含んで成るビタミ ンＥ粉末に関する。加水分解したゼラチンは「ブルームが極めて低く」、［分子 量が約９．０００から約Ｎ、０００Ｊである。この米国特許第３，８０８，０８ ３号明細書には、９．０００〜１１，０００のゼラチンの分子量を測定する方法 は記載されていない。米国特許第゛０８３号明細書には、ブルームが極めて低い 加水分解したゼラチンは比較的熱に安定であり悪臭を発生することがないので粉 末で使用するのに有利であるが、他の加水分解したゼラチンは造粒または錠剤成 形に用いると不快な悪臭を発生することも記載されている。米国特許第°０８３ 号明細書には、ブルームが低い加水分解したゼラチンは、これらのゼラチンを含 んで成る組成物に良好な錠剤成形特性を付与するので好ましいことも記載されて いる。米国特許第°ｏ８３号明細書の加水分解したゼラチンは、ゼラチンを制御 して加水分解することによって製造されることが開示されている。この米国特許 第゛０８３号明細書とは異なり、本発明の方法はゲル透過クロマトグラフィによ って測定した重量平均分子量が約１５．０００〜約３５．０００である部分的に 加水分解したゼラチンを用いる。

米国特許第８．９１４．４３０号および米国特許第Ｌ９Ｂ２．Ｈ４号は、それぞ れ放棄された特許出願の分割出願および継続出願に基づいている。これらの米国 特許第°４３０号明細書および第°３８４号明細書は同一であるが、米国特許第 °４３０号明細書はビタミンＥ粉末に関するものであり、米国特許第゛３８４号 明細書はこの粉末の製造法に関するものである。これらの特許明細書には、ビタ ミンＥ油と組合せた加水分解したゼラチンの併用物であってゼラチンと油とを他 の少量の賦形剤と共に噴霧乾燥したものが開示されている。これらの米国特許第 ゛４３０号明細書および第°３８４号明細書に記載のゼラチンはＯ−ブルームま たは「低ブルーム」の加水分解ゼラチンであってこのゼラチンの分子量が約９． ０００〜１１．０００であるものである。米国特許第°０８３号明細書の場合と 同様に、米国特許第゛４８ｏ号明細書および第゛３８４号明細書には、分子量の 測定法は記載されていない。これらの特許明細書の実施例には、ビタミンＥとビ タミンＡおよびフレーバ油の噴霧乾燥であって、これらの油のそれぞれは噴霧乾 燥中に０−ブルームゼラチンと混合されることが記載されている。これらの両特 許明細書には、ブルームが０であり且つ分子量が９、［）Ｄｏ〜ＩＩ、０００で ある加水分解したゼラチンとしてのゼラチンが記載されており、これらの特許明 細書はこの発明が何んらかの特定の加水分解ゼラチンの使用に限定されるもので はないことを述べている。

ホフマンーラ・ロシニの特許明細書のいずれとも異なり、本発明の方法はゲル透 過クロマトグラフィによって測定した重量平均分子量が約１５．０００〜約３５ ，０００であるゼラチンを用いる。

本発明は、食用油とゼラチンとを含んで成るエマルジョンの噴霧乾燥に関する。

ゼラチンの分子量が、ゼラチンを含んで成るエマルジョンまたは溶液の噴霧乾燥 法にとって重要であることを意外にも見出した。ゼラチンの分子量が高すぎると 、ゼラチンはフィルムを形成して通常の噴霧乾燥法で液滴の形成を妨げるスキン となる。その結果、噴霧乾燥ノズルから出てくる物質の大半は噴霧乾燥機の壁に 張り付いてしまうことになる。噴霧乾燥機の壁に粘着しない残りの僅かの部分は 、非自由流動性で非粒状のふわふわした粉末である。一方、ゼラチンの分子量が 低すぎると、部分的に加水分解したゼラチンと食用油との安定なエマルジョンを 形成することができない。

更に、ゼラチンの分子量が低すぎると、低分子量のゼラチン加水分解生成物がか なりの量で存在するため悪臭が発生する。アミン型の悪臭は、この低分子量の物 質の結果である。したがって、特定の分子量範囲のゼラチンが、前記のような問 題のいずれをも生じることなく噴霧乾燥によって自由流動性の食用粉末の製造に 特に好適であることを見出した。

ラスター（Ｌａｓｔｅｒ）の米国特許第２．８２４．２０７号明細書には、噴霧 ノズルの直下に冷却ゾーンを有することによるゼラチン含有配合物の噴霧乾燥法 が記載されている。この米国特許第゛２０７号明細書には、冷却ゾーンが液滴を 形成させるために必要であることが述べられている。この米国特許第°２０７号 明細書に記載の方法は本発明の別法であり、この米国特許第°２０７号明細書に 記載の方法は前記の（ゼラチン配合物の噴霧乾燥における）問題点を認めている 。本発明の出願人は、米国特許第”２０７号明細書に記載の問題点を回避するま ったく異なった方法を見出した。

発明の詳細な説明 本発明は自由流動性の食用粉末の製造法に関する。この方法は、 Ａ、　生成する部分加水分解ゼラチンの重量平均分子量（ＷＡＭＷ）がゲル透過 クロマトグラフィによって測ゼラチンを加水分解し、 Ｂ、　部分加水分解したゼラチンと食用油との実質的に完全で且つ実質的に安定 なエマルジョンを作成し、Ｃ０このエマルジョンを噴霧乾燥する工程、を含んで 成る。前記の方法において、部分加水分解したゼラチンと食用油との実質的に安 定なエマルジョンはゼラチンの部分加水分解を行う前に作成することもできる。

しかしながら、ゼラチンを部分加水分解するのが好ましい。エマルジョンが安定 であり、且つ生成する製品が悪臭を持たず且つエマルジョンを噴霧乾燥して、か なりの量の製品が噴霧乾燥室の壁に粘着することなく、自由流動性粉末を生成す ることができるようにするためには、このゼラチンの重量平均分子量は約１５． ０００〜約３５．０００となるべきであることを見出した。

好ましい態様の詳細な説明 本発明の方法は、自由流動性の食用粉末の製造に関する。この食用粉末は、１種 類以上の床机な最終用途に用いることができる。例えば、自由流動性粉末は単独 またまたは動物飼料製品への添加剤として或いはヒトが消費するのに好適な食品 に用いることができる。更に、この食用粉末は単独でまたは他の成分および賦形 剤と組合せて用いて、直接圧縮して錠剤、特に製薬錠剤とすることができる。

この食用粉末は部分加水分解したゼラチンと食用油とを含んで成る。食用油は、 栄養特性を存する任意の油であってよい。好ましい食用油は脂溶性ビタミンおよ びフレーバ油である。本発明の方法に用いるのに最も好ましい食用油は、ビタミ ンＥアセテート（すなわち、ｄΩ−α−トコフエリルアセテート）である。この 脂溶性ビタミンは約５０重量％の量で含まれ、ゼラチンは約５０重量％の量で含 まれるのが好ましい。

本発明の方法は、ゼラチンを部分加水分解する工程を用いる。ゼラチンは、その 「ブルーム強度」を最も典型的な特徴とする。ブルーム強度は、ゼラチンゲルの 強度を評価するための任意尺度である。ゼラチンの最大ブルーム値は約３００で ある。ブルーム値が３００のゼラチンは市販されている。「ブルーム値が０」で あるゼラチンであって「加水分解した」ゼラチンとしても知られているものも入 手できる。ブルーム値が３００〜０のゼラチンも市販されており、例えば８５ブ ルームゼラチンは数社の製造業者によって一般に提供されている。更に、各種の ゼラチン加水分解法の一種類以上によって、任意のゼラチンの加水分解度（すな わち、任意の所望なブルーム数）を得ることができる。

ゼラチンは、一般的には３種類の異なる試薬である酸、塩基および酵素によって 加水分解される。酸、塩基および酵素は、それぞれ幾分異なった加水分解ゼラチ ンを生成するが、酸、塩基または酵素加水分解のいずれによっても任意の所望な ブルーム値を有するゼラチンを製造することが可能である。酸処理によって生成 したゼラチンは一般的にはＡ型ゼラチンと呼ばれ、塩基処理によって生成したゼ ラチンはＢ型ゼラチンと呼ばれる。ゼラチンの製造はコラーゲンの加水分解によ って行う。Ｂ型のゼラチンは、例えば骨に強塩基を作用させた後、塩基を洗い落 とし、次いで処理した骨を沸騰水中で「加熱」してゼラチンを抽出することによ って製造される。Ｂ型のゼラチンは、本発明の方法における好ましい出発物質で ある。

ゼラチンは、皮膚、靭帯、脚などを煮沸することによるコラーゲンの加水分解に よって得られるタン白質の混合物である。したがって、ゼラチンを構成する個々 のタン白質分子はかなり多種多様である。更に、酸、塩基または酵素加水分解剤 は、タン白質分子の長さに沿った各種の点においてタン白質分子を攻撃すること ができる。

したがって、ゼラチンが（加水分解したものおよび加水分解していないもの共に ）広範囲に亙る分子量の分子を含んでなることは驚くべきことではない。したが って、ゼラチンは加水分解生成物を特性決定する単一の分子量を持たない。むし ろ、加水分解ゼラチンを特性決定するには、分子量の平均値を用いなければなら ない。加水分解ゼラチンを特性決定するのに用いることができる２つの平均値は 、「重量平均分子ｆｆ１Ｊ　（ＷＡＭＷ）および数平均分子量Ｊ　（ＮＡＭＷ） である。ゼラチンの数平均分子量と重量平均分子量は、ゼラチンをゲル透過クロ マトグラフィにかけた後、結果を分析することによって算出することができる。

下記の方程式を用いて、数平均分子量および重量平均分子量を算出することがで きる。

Σ（面積、） 面積、はＧＰＣ分析曲線中のｉ番目の部分または区分の面積である。Ｍ、は分子 量検量線から計測したｉ番目の分子量である。典型的には、分析曲線は１００個 の等しい部分または区分に分割される。

ＮＡＭＷは分布曲線の低分子量部分における変化によって一層影響され、一方Ｗ ＡＭＷは分布曲線の高分子量部分における変化によって一層大きな影響を受ける 。本発明の方法の発明者らは、ゲル透過クロマトグラフィは以下に記載する他の 方法とは異なり、ゼラチンの分子量を特性決定するための極めて精確な方法であ ることを見出した。

以前は、加水分解されていないゼラチンの分子量範囲は、光散乱および遠心沈降 法のような測定法が難解で複雑なものであったため、またクロマトグラフィ法が なかったため、通常評価されていなかった。しかしながら、加水分解ゼラチンは 正式の滴定法によって評価された。

この後者の方法は、ホルムアルデヒドとゼラチン中のアミノ基との反応に基づい ている。ゼラチンは、平均して１００．０００の分子量光たり分子内に埋設され た３７個のβ−アミノおよびイミダゾール基と１個の末端ａ−アミン基を含む。

これは、分子量が１００，０００のゼラチン１ｇ当たり滴定可能な埋設基０．４ ２　ミリモルおよび末端基０．０１　ミリモルに等しい。したがって、分子量が 減少すると、末端基の数は埋設基の数に対して増加する。しかしながら、分子量 が増加すると、末端基によって与えられる滴定における差を測定することは著し く困難になる。したがって、１０，０００を上回る分子量ではゼラチンの分子量 測定のための上記滴定法は不正確になり、正確にまたは精確に用いることができ ない。

本発明の方法は、ゼラチンを部分加水分解して、生成する部分加水分解ゼラチン のゲル透過クロマトグラフィ（ＧＰＣ）によって測定した重量平均分子量（ＷＡ ＭＷ）が約１５．０００〜約３５．０００となるようにする工程を含んで成る。

ゲル透過クロマトグラフィ分析の方法を以下に示す。

くゲル透過クロマトグラフィ　（ＧＰＣ）＞クロマトグラフィ用のゼラチンの試 料は、０．１　Ｍリン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ７，０ｉ：０．１〜１重量％の 水準まで溶解することによって調製した。ゼラチン溶液４０μ！をウォータース ・ウルトラヒドロゲル （ＷＡＴＥＲ３ｔ！ＬＴＲＡＨＹＤＲＯＧＥＬ）ｏｌｏｏｏ、　５００　オヨヒ ２５０　カラムであって数字の減少する順序に接続したものの上でクロマトグラ フィを行った。ウォータース（Ｗａｔｅｒｓ）はミリボア争ゴーポレーション（ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）　５３４Ｓメイブル・ストリー ト、ミルフォード、マサチューセッツ０１７５７の一部門である。溶媒は溶解用 緩衝液と同じであり、流速は１．０ｍｌ／分であった。それぞれの試料について の操作時間は４０分であった。検出は、２３０　ｎｍまたは屈折率によって行っ た。

前記のクロマトグラフィ系に対する分子量検量線は、既知の分子量、１８０．３ ４２．５０５．８８７．８２９．９９１．１１５３．５８００．１３３００．２ ３７００．４８０００．１０００００．１８６０００．３８００００および８５ ３０００を有する１５種類の多糖類標準品を用いて測定した。相関係数は、三次 −適合方程式について０．９９９５４であった。

この検量線により、分子量をウォータース・クロマトグラフィ・ソフトウェアν ＾ＴＥＲ８ＥＸＰＥＲＴ　ｏ、６．０版で１００区分を用いて算出した。ベース ラインと積分開始および停止時間は、手動で設定した。

前記のように、本発明の方法はゼラチンの部分加水分解を含む。この部分加水分 解は、酸加水分解、塩基加水分解または酵素加水分解のいずれによって行っても よい。

加水分解は、ゼラチンが完全に加水分解されてしまう前に停止するので、「部分 的」である。酵素加水分解は、本発明の方法において酸加水分解または塩基加水 分解よりも好ましい。本発明の方法に用いられる酵素は、タン白質分解酵素でな ければならない。更に、タン白質分解酵素はエンドペプチダーゼであるのが好ま しい。また、用いられるタン白質分解酵素は、バチルス・サブチリス（Ｂ、　５ ｕｂｔｆｌｉｓ）株からのプロテアーゼとアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉ　Ｉ 　１ｕｓ）培養物からの中性のカビプロテアーゼから成る群から選択される一員 であることが好ましい。酵素がサブチリスであるのが最も好ましい。酵素加水分 解を用いるときには、加水分解は酵素を失活させる数種類の方法の任意の１種類 以上によって調節される。酵素の失活の具体的方法には、下記の方法が挙げられ る。

（１）酸を添加して、酵素を不活性にするのに十分なほどまでｐＨを低下させる 、 （２）有効なキレート化剤を酵素を失活させるのに十分な量添加する、 （３）酵素を失活させるのに十分なほど加熱する、（４）実質的に一定の温度で 部分加水分解を行い、温度の効果によって酵素がゼラチンの所望な程度の部分加 水分解を行う時間経過時に酵素を失活させる。

本発明の方法では、後者の方法が酵素を失活させるのに最も好ましい方法である 。この方法（すなわち、前記の方法（４））を用いるときには、加水分解中の温 度は約７０℃であるのが好ましい。

本発明の方法におけるもう一つの段階は、部分加水分解ゼラチンエマルジョンと 食用油との実質的に完全で且つ実質的に安定なエマルジョンの製造から成る。本 発明の方法では、実質的に完全で且つ実質的に安定なエマルジョンを形成させる 必要がある。「実質的に完全な」エマルジョンという表現は、乳化した（すなわ ち液滴）の形態での油が実質的に１００％であるエマルジョンをいう。

「実質的に安定な」エマルジョンという表現は、数時間放置しても（任意の実質 的な程度にまで）脱乳化しないエマルジョンを意味する。

ゼラチンと食用油とのエマルジョンを製造した後、ゼラチンを部分加水分解する ことは可能であるが、ゼラチンと食用油のエマルジョンを作成する前にゼラチン を部分加水分解するのが好ましい。このエマルジョンは、水性ゼラチン溶液内に 油滴を含んで成っている。エマルジョンの安定化の機構は完全には解明されてい ないが、ゼラチンが乳化している油滴の表面に結合することによって脱乳化を防 止することによるものと思われる。重量平均分子量が１５．０００以上であれば 、ゼラチンが乳化している油滴の表面に結合して実質的に完全で且つ実質的に安 定なエマルジョンを形成することができると思われる。

対照的に、ゼラチンの重量平均分子量が１５，０００より実質的に小さければ、 十分な量のゼラチンが乳化した油層の表面に結合しないものと思われる。

部分的に加水分解したゼラチンと食用油の安定なエマルジョンが製造されたなら ば、このエマルジョンを次に噴霧乾燥することによって、生成物は自由流動性の 食用粉末となる。本明細書中で用いている噴霧乾燥という用語は、エマルジョン を熱乾燥媒体中に噴霧することによってエマルジョンを流動状態から乾燥した顆 粒状にすることをいう。生成物は、一般的且つ最も好ましくは、粉末であるが、 この粉末はある条件下では比較的小さな程度の粒状化および／または凝集を示す ことがある。

本発明の方法においては、更に粉末に安定剤を添加するのが好ましい。本明細書 において用いられる「安定剤」という用語は、エマルジョン中における微生物の 生育を抑制する化合物をいう。この安定剤は、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸 カリウム、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルおよびプロピオン酸から成る群か ら選択することができる。この安定剤は、０．１重量％から０．５重量％の量で 含まれるのが好ましい。

本発明の方法においては、粉末の製造過程においてシリカを用いることもできる 。このシリカは、別個なノズルから噴霧室へ導入するのが好ましい。このシリカ によって液滴をコーティングして、液滴が室の壁に粘着するのを防止すると同時 に液層が互に粘着するのを防止する。

シリカは、約０．５重量％〜約２重量％の量で粉末に含まれるのが好ましい。シ リカは、約１重量％の量で含まれるのか最も好ましい。本発明の方法に用いるの に最も好ましいシリカは、エーロジル（Ａｃｒｏｓｉｌ）［相］２００である。

エーロジル■２００の特性は下記の通りである。

ＢＥＴ表面積（イ／　ｇ　）２００＋２５平均−次粒子の粒度（ｒｖ＋）　１２ タップ密度（ｇ／ｌ）　約５０ 水分含量（１０５℃、２時間）　最大１．５＊ 強熱減量　ｃｉｏｏｏ℃、２時間）　最大１％ｐＨ（４％水性分散液）３．６〜 ４．３Ａ１２０３　最大０．０５％ Ｆｅ２Ｏ３最大０．００３％ Ｔ　Ｉ　Ｏ２最大０．０３％ ＭＣＩ　最大０．０２５％。

＊１０５℃で２時間乾燥した材料について水分が存在すると、一層堅い錠剤が思 いかけず生成するので、錠剤成形の前の粉末中の水分を少量にすることが有利で あることを見出した。粉末の水分含量は、約０．５重量％〜約４重量％であるの が好ましい。

下記の実施例によって本発明を説明する。実施例１および２は、それぞれ酸およ び塩基を用いる部分ゼラチン加水分解を示す。実施例３および４は、酵素による 部分ゼラチン加水分解を示す。実施例１〜４は、本発明の第一段階、すなわちゼ ラチン加水分解に限定されている。

実施例５は比較例であり、８５ブルームのゼラチンを噴霧乾燥することの困難さ を示す。実施例６では、本発明の方法による全工程、すなわち部分加水分解、エ マルジョンの生成および噴霧乾燥工程が例示される。実施例７〜１７では、酵素 加水分解法の再現性の程度が示される。実施例１８〜２０では、各種の酵素のう ちの任意のものを本発明の方法に用いることができることが示される。実施例２ １は、ＷＡＭＷが約１０，０００のゼラチンでは実質的に完全で実質的に安定な エマルジョンを製造することができないことを示す比較例である。

実施例１：　酸によるゼラチンの加水分解水１００．に、８５ブルーム（Ｂ型） ゼラチンｉｏｏ、を加え、ジャケット付きビーカー中で温度を８０℃に上げて溶 解した。濃硫酸１０ｇを加えると温度は８５℃まで上昇したが、徐々に８０℃ま で降下した。試料を加水分解反応が開始してから０　、５．１０および３０分後 に採取した。試料（１ｇ）を０．１Ｍｐ　Ｈリン酸緩衝液４９ｇで希釈した。こ の操作は加水分解反応を停止させた。試料の分子量を分析した。表−Ｉにこれら の分析の結果を示す。

表−Ｉ 硫酸で加水分解した８５ブルームのゼラチンの分子量の平均値 時間（分）　ＮＡＭＷ　ＷＡＭＷ ｏ　５７７０　５１５００ 実施例２：　塩基によるゼラチンの加水分解水９０ｇに８５ブルーム（Ｂ型）ゼ ラチン１００　ｇを加え、ジャケット付きビーカー中で温度を６０℃に上げて溶 解した。次いで、５０％水酸化ナトリウム水性液１０．４ｇを加えた。試料の分 子量を実施例１と同様に分析した。表−１１に、塩基性部分加水分解の結果を示 す。

表−１１ 水酸化ナトリウムで加水分解した８５ブルームのゼラチンの分子量の平均値 時間（分）　ＮＡＭＷ　ＷＡＭＷ ｏ　５９９０　［１９５００ 実施例３：　酵素によるゼラチンの加水分解（８５ブルームゼラチン） 水２０１　ｇ−をジャケット付きビーカー中で７０℃まで加熱したとき、この水 に対して８５ブルーム（Ｂ型）ゼラチン９９ｇを加えた。この時点で、この溶液 ３．２ｇを、少なくとも９０℃のｏ、ｉＭｐ　ＨＴ、Ｏ緩衝液９６．８ｇ中で希 釈し、１５分間熱を維持した。この操作によりＧＰＣ分析用のゼラチンを調製し 、温度変性および希釈によって酵素（存在するならば）による加水分解を停止し た。マイルズ・ラボラトリーズ・エイチ拳ティー・プロテオリーティ・ツク（Ｍ ｉｌｅｓ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ’　ＨＴ−Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ）　２ ００の０．０６２　ｇを水１０ｇに溶解したものを加え、酵素を添加してから５ ．１０、２０．３０および６０分後に更に３，２ｇの分量を採取し、前記と同様 にして反応を停止した。ＧＰＣ分析は、前記と同様に行った。表−ＩＩ＋に、前 記の分量について行ったＧＰＣ分析の結果を示す。

表−ＩＩ＋ ７０℃における０、０Ｂ２％ＨＴ−プロテオリーチイック２００による８５ブル ームのゼラチンの加水分解時間（分）　ＮＡＭＷ　ＷＡＭＷ ｏ　５１２０　５１７００ 実施例４：　酵素によるゼラチンの加水分解（２００ブルームゼラチン） 水１８３ｇをジャケット付きビーカー中で７０℃まで加熱したとき、この水に２ ００ブルーム（Ｂ型）ゼラチン１００ｇを加えた。この時点で、この溶液３．２ ｇを、実施例１と同様に希釈して、０時間の時点での分子量を測定した。

マイルズ・ラボラトリーズ・エイチ・ティー・プロテオリーチイック（Ｍｉｌｅ ｓ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ’　ＨＴ−Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ）２００００ ．２ｇを水２３ｇに溶解したものを加え、酵素を添加してから５．１０．２０． ８０および６０分後に更に３．２ｇの分量を採取し、前記と同様にして反応を停 止した。

ＧＰＣ分析は、実施例３と同様に行った。表−ＩＶに、前記の分量について行っ たＧＰＣ分析の結果を示す。

表−ＩＶ ７０℃における０、２％ＨＴ−プロテオリーチイック２００による２００ブルー ムのゼラチンの加水分解時間（分）　ＮＡＭＷ　ＷＡＭＷ ｏ　９４２０　１９５０００ 実ａ例５：　比較例：８５ブルームのゼラチンの噴霧乾燥 １０％の水分を含む８５ブルーム（Ｂ型）のゼラチン３８０ボンドを、６０℃で 水６２４ポンドに溶解した。次いで、ビタミンＥアセテート８８８ポンドをゼラ チン溶液中に均質に分散した。均質化の後の粘度は、５９℃で８５０　ｃｐｓで あった。エマルジョンを、１７５℃の入り口空気温度および９９℃の出口温度で 噴霧乾燥した。シリカを、約０．０８ポンド／分の速度で塔の最上部に充填した 。９５分後に、エマルジョン約７１２ボンドを噴霧してしまったならば、生成物 の収集量は余り多くないめで、噴霧乾燥を停止した。

噴霧ノズルにも、エマルジョンが多量に付着していた。

これは、エマルジョンが噴霧塔壁に堆積していることを示していた。塔を開いた ところ、壁面には擦り落とさなければならない１ノ２〜２インチの堆積物が付着 していた。

噴霧乾燥をやり直し、更に１１０分後に終了した。２３０ポンド（水分補正）し か収集されず、水分補正を行った収率は３３％であった。表−Ｖに、ゲル透過ク ロマトグラフィ分析による８５ブルームゼラチン（同上）の分析を示す。

安息香酸ナトリウム３ポンドと、ソルビン酸カリウム１．５ボンドを、６０℃で 水７５０ボンドに加えた。ゼラチンの加水分解溶液は微生物の生育を補助するこ とがあるので、安息香酸塩とソルビン酸塩を加えてエマルジョン製造中の生育を 抑制し、噴霧乾燥中も保持する。次いで、８５ブルーム（Ｂ型）のゼラチン３６ ９ボンドを水に溶解した。温度を６６℃に上昇した後、マイルズ・ラボラトリー ズ争エイチゆティー・プロテオリーチイック２００の０．２３１ボンドを本釣２ ポンドに室温で溶解したものをゼラチン溶液に加えた。２０分後に、ビタミンＥ アセテート（純度９７％、８０℃）３８８ポンドを溶液に加えて、均質にした。

３１分後に油を加え終わった時、温度は７３℃であり、粘度は３７５　ｃｐｓで あった。噴霧器に達する前に、エマルジョンを熱交換器を通過させて、エマルジ ョンの温度を約９０℃に上昇させた。この処理は主としてエマルジョンを軟菌す るためのものであったが、これによって酵素の完全な不活性化を確実にした。エ マルジョンを約２０００ｐｓ１の圧でノズル噴霧器を通して入り口温度が約１８ ５℃で出口温度が９９℃の塔に１４１分間圧送し、その間にシリカを噴霧塔の最 上部に約０．０８５ボンド／分の速度で充填した。生成物６９３ボンドが収集さ れ、生成物の水分補正した収率は９７％であった。生成物の組成は下記の通りで あった。

噴霧乾燥粉末中の乾燥成分比率（％） １、　ビタミンＥアセテート（９７％’）　５１．８２、ゼラチン　４４．４ ３、水分　２．０ ４、二酸化ケイ素　１．５ ５、安息香酸ナトリウム　０．２ ６、　ソルビン酸カリウム　０．１ この粉末は、良好な流動特性を有し、嵩密度は約５０ｇ／１００ｍ１であった。

粉末粒子の約７５％は７４〜２５０　であった。次に、この粉末を下記のように して錠剤成形した。

前記の方法から生じる粉末を、噛むことができる配合物における一成分として用 いた。この錠剤配合物を圧縮して、錠剤とした。この配合物の成分は、下記の通 りであった。

ｇ／錠剤 １、　ビタミンＥ粉末　０．４１２ ２、カブ−オー−シル（Ｃａｂ−０−３ｉ　ｌ　）■Ｈ８−５０，０３５ ３、シロイド（Ｓｙｌｏｉｄ）ｏ７４　０．０１５４、錠剤成形特性　０．２９ ５ ５、フレーバ　０．００５ ６、　ステアリン酸マグネシウムＮ、Ｆ、　０．００２錠剤当たり０．７８ｇの 所望な錠剤の重量が得られた。これらの錠剤は良好な脆砕度（０，０２％）と同 時に受容可能な錠剤硬度（１２〜１６５ＣＵ）を有していた。［錠剤の硬度は、 シュロイニガー（Ｓｃｈｌｅｕｎｉｇｅｒ）　−２Ｅ硬度試験機で試験した。７ 〜２０８ＣＵ　（ストロング・コブ・ユニッツ（Ｓｔｒｏｎｇ　Ｃｏｂｂ　Ｕｎ ｉｔｓ）　）の錠剤の硬度は、この配合物で受容可能であると考えられる。〕前 記の錠剤成形配合物は高ビタミンＥの噛むことができる錠剤の代表的なものであ り、粉末の錠剤成形特性を幾分示すが、更に厳密な錠剤成形配合物（この配合物 は錠剤を互いに結合するには、完全にビタミンＥ粉末によっている）を下記に示 す。

ｇ／錠剤 １、　ビタミンＥ粉末　０．４０００ ２、　シロイド■２４４ＦＰ　Ｏ，０１５０３、カブ−オー−シル＠ｌｌ５−５ 　０．０１００４、マイクロセル（Ｍｉｅｒｏｃｅｌｌ）　ＣＯ，ロロ８２この 錠剤成形配合物はビタミンＥ浦がどのように良好に封入されているかを示す点で 極めて良好である。油が封入されていなければ、錠剤は斑になり易く、且つ錠剤 は軟質になる。軟度はまた賦形剤の圧縮特性によって変わる。この実施例から得 られる錠剤は斑を持たず、硬度は２０〜２１　ＳＣＵである。この配合では、１ ５３ＣＩＪを上回る硬度が勝れていると思われる。粉末の水分含量が高くなれば 、硬度が高くなることも見出された。この実施例の粉末の最初の水分含量は、２ ．００％であった。高湿度箱に短時間保管することによって水分を２．６９％ま で上昇させると、この試験において生成する錠剤の硬度は２８　ＳＣＵとなった 。この水分は、ゼラチンの一般的な圧縮特性に影響するはずである。この水分は 可塑剤として働くことができる。

酵素改質したゼラチンを、ＧＰＣ分析によって分析した。この分析の結果を、下 記の表−■に示す。

実施例７〜１７二　酵素加水分解ゼラチンの他の同案流側４と同様に行った実施 例７〜１７についての分子量を、表−■に示す。これらの実施例では、バッチの 大きさが幾分変動した。実施例７および８では、それらのバッチにおいてゼラチ ンに対して０．０５０％のＨＴ−プロテオリーチイック２００を用（゛また。残 りのバッチでは、０．０８２％のＨＴ−プロテオリーチイック２００を用いた。

表−■ 分子量平均値 ビタミンＥ粉末中の酵素改質したゼラチン実施例　ＮＡＭＷ　ＷＡＭＷ 実施例１８〜２０：　各種の酵素によるゼラチンの加水分解水８００ｇをジャケ ット付きビーカー中で７０℃まで加熱したとき、この水に対して８５ブル一ムゼ ラチン３６９ｇを加えた。水１００　ｇにロチーム（Ｒｈｏｚｙｍｅ）■ｐ５３ （実施例１８）、コロラーゼ（Ｃｏｒｏｌａｓｅ）■ＰＮ（実施例１９）または エンゼコ（Ｅｎｚｅｃｏ）ｏプロメライン（Ｂｒｏｍｃｌａｉｎ）　（実施例２ ０）０．１８５７ｇを溶解したものを加えた。実施例３と同様に試料を採取して 、ＧＰＣ分析を行った。実施例１８．１９および２０についてのＧＰＣ分析の結 果を、それぞれ表−ｖｌ、Ｖｌ＋および■１１１に示す。

表−■１ ７０℃における０、０５％ロチームｏＰ５Ｂによる８５ブルームゼラチンの加水 分解 時間（分）　ＮＡＭＷ　ＷＡＭＷ ｏ　５５２０　５Ｂ４００ 表−Ｖｌ＋ ７０℃における０、０５％コロラーゼｏＰＮによる８５ブルームゼラチンの加水 分解 時間（分）　ＮＡＭＷ　ＷＡＭＷ ｏ　５２８０　５０９００ 表−Ｖｌｌ＋ ７０℃における０、０５％エンゼコ■ブロメラインによる８５ブルームゼラチン の加水分解 時間（分）　ＮＡＭＷ　ＷＡＭＷ ｏ　５９４０　６１２００ ３０　３０８０　１ｇ２００ ７０℃の水８８７．４　ｇに８０ブルームのゼラチン（Ｂ型）９７４．５　ｇを 溶解した溶液に、マイルズ・ラボラトリーズ・エイチ・ティー・プロテオリーチ イック（ＭｉｌｅｓＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ　ＨＴ−Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ）　２００　（ゼラチンに対して０．０８２重量％）を加えた。この温度で１時 間後に、試料をＧＰＣによって分析したところ、重量平均分子量は１０．２９２ であった。部分加水分解したゼラチンのこの濃縮溶液に、８０℃の水１３３２． ６ｇを加えた。次に、ビタミンＥアセテ−）１０００．を均一に分散した。ビタ ミンＥの幾分かは乳化したが、この油のかなりの部分は完全には均質化すること ができず、油の層が最上部に形成した。二のエマルジョンは、ビタミンＥ油が実 質的に完全には乳化しないので、噴霧乾燥には不適当であると思われた。

国際調査報告

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. １．　自由流動性の噴霧乾燥食用粉末の製造法であって、 （Ａ）生成する部分加水分解したゼラチンの重量平均分子量がゲル透過クロマト グラフィによって測定したところ約１５，０００〜約３５，０００となるような 条件下にてゼラチンを部分加水分解し、 （Ｂ）部分加水分解したゼラチンと食用油との実質的に完全で且つ実質的に安定 なエマルジョンを作成し、（Ｃ）このエマルジョンを噴霧乾燥する工程を含んで 成る方法。
2. ２．　食用油が脂溶性ビタミンである、請求項１に記載の方法。
3. ３．　ゼラチンをタン白質分解酵素によって加水分解する、請求項１に記載の方 法。
4. ４．　ゼラチンがＢ型ゼラチンである、請求項１に記載の方法。
5. ５．　部分加水分解を実質的に一定の温度で行い、所望な程度の部分加水分解に 達した時に、酵素を温度によって失活させる、請求項１に記載の方法。
6. ６．　脂溶性ビタミンがビタミンＥアセテートである、請求項２に記載の方法。
7. ７．　ゼラチンをエンドペプチダーゼによって加水分解する、請求項３に記載の 方法。
8. ８．　　酵素が、バチルス・サブチリス（Ｂ．Ｓｕｂｔｉｌｉｓ）株からのプロ テアーゼおよびアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌ−ｌｕｓ）培養物からの中性 のカビプロテアーゼから成る群がら選択される、請求項３に記載の方法。
9. ９．　実質的に一定の温度が約７０℃である、請求項７に記載の方法。
10. １０．生成する粉末が、重量で （ａ）約５０％の量の脂溶性ビタミンと、（ｂ）約５０％の量のゼラチンとを含 んで成る、請求項６に記載の方法。
11. １１．安定剤を約０．１重量％〜約０．５重量％の量で加え、この安定剤は微生 物の生育を抑制するために添加され、この安定剤は安息香酸ナトリウム、ソルビ ン酸カリウム、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステル、およびプロピオン酸から成 る群から選択される、請求項６に記載の方法。
12. １２．生成する粉末が更にシリカを０．５重量％〜約２重量％の量で含む、請求 項６に記載の方法。
13. １３．粉末が更に約０．５重量％〜約４重量％の量の水を含む、請求項６に記載 の方法。
14. １４．生成する粉末が更に約１重量％の量のシリカを含む、請求項１１に記載の 方法。