JPH0368552A - 水溶性ジニトロフェニル化合物 - Google Patents
水溶性ジニトロフェニル化合物Info
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- JPH0368552A JPH0368552A JP20625389A JP20625389A JPH0368552A JP H0368552 A JPH0368552 A JP H0368552A JP 20625389 A JP20625389 A JP 20625389A JP 20625389 A JP20625389 A JP 20625389A JP H0368552 A JPH0368552 A JP H0368552A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はｔＩｒ現な水溶性ジニトロフェニル化合物に関
する。本発明による新規な化合物は、２，４−ジニトロ
フェニル修飾剤として特に有効である。
する。本発明による新規な化合物は、２，４−ジニトロ
フェニル修飾剤として特に有効である。
２．４−ジニトロフェニル基は免疫学の実験でよく用い
られる最も一般的なハブテンである。ジニトロフェニル
基を修飾した物質ではさらに抗ジニトロフェニル抗体を
介して、標識物を導入することが可能である。通常よく
知られたジニトロフェニル修飾剤は、２．４−ジニトロ
ベンズアルデヒド〔シロヤー、 Ｋ、 Ｒ，、ナカネ、
Ｐ、に、： ジャーナル 才ブ セルバイｔＩＩＩジー
、第９７巻。
られる最も一般的なハブテンである。ジニトロフェニル
基を修飾した物質ではさらに抗ジニトロフェニル抗体を
介して、標識物を導入することが可能である。通常よく
知られたジニトロフェニル修飾剤は、２．４−ジニトロ
ベンズアルデヒド〔シロヤー、 Ｋ、 Ｒ，、ナカネ、
Ｐ、に、： ジャーナル 才ブ セルバイｔＩＩＩジー
、第９７巻。
第３７７頁ａ、 １９８３年（Ｓｈｒｏｙｅｒ、
Ｋ、Ｒ，、Ｎａｋａｎｅ、 ＰＫ、 ： Ｊｏｕｒ
ｎａＩ ｏｆ Ｃｅ１ｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ、
９７． ３７７ ａ（１９８３）］や］２．４−ジニ
トロフェニルし一リジン〔ハンダ、 Ｓ、：アナリティ
カル レターズ、 第２１巻第 ７号、 第１１４１−
第１１５４頁、 １９８８年（Ｈａｓｈｉｄａ、 Ｓ
、：＾ｎａｌｙｔｉｃａｌＬｅｔｔｅｒｓ、 ２１ （
７） １１４１−１１５４（１９８８）））であり、こ
れらのアルデヒド基やアミノ基が目的とする物質のアミ
ノ基と反応して、ジニトロフェニル基で修飾される。
Ｋ、Ｒ，、Ｎａｋａｎｅ、 ＰＫ、 ： Ｊｏｕｒ
ｎａＩ ｏｆ Ｃｅ１ｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ、
９７． ３７７ ａ（１９８３）］や］２．４−ジニ
トロフェニルし一リジン〔ハンダ、 Ｓ、：アナリティ
カル レターズ、 第２１巻第 ７号、 第１１４１−
第１１５４頁、 １９８８年（Ｈａｓｈｉｄａ、 Ｓ
、：＾ｎａｌｙｔｉｃａｌＬｅｔｔｅｒｓ、 ２１ （
７） １１４１−１１５４（１９８８）））であり、こ
れらのアルデヒド基やアミノ基が目的とする物質のアミ
ノ基と反応して、ジニトロフェニル基で修飾される。
〔発明が解決しようとする課題］
しかしながら、２．４−ジニトロベンズアルデヒドは水
に対して難溶性を示し、免疫学的実験で目的とされる多
くの水溶性物質と反応させる場合、有機溶媒と水の混合
溶媒中で行うため反応率は低く、しばしば目的物質の変
性を招いている。しかも、修飾されたジニトロフェニル
基が目的物質の近傍にあるため抗ジニトロフェニル抗体
との反応が阻害されるという問題がある。
に対して難溶性を示し、免疫学的実験で目的とされる多
くの水溶性物質と反応させる場合、有機溶媒と水の混合
溶媒中で行うため反応率は低く、しばしば目的物質の変
性を招いている。しかも、修飾されたジニトロフェニル
基が目的物質の近傍にあるため抗ジニトロフェニル抗体
との反応が阻害されるという問題がある。
ｔり２．４−ジニトロフヱニルーＬ−リジンは水溶性で
はあるが、アミノ基どうしの反応となるため、工程が複
雑になり収率、再現性が低下しがちである（へシダ、Ｓ
、の報告：前記と同じ）。
はあるが、アミノ基どうしの反応となるため、工程が複
雑になり収率、再現性が低下しがちである（へシダ、Ｓ
、の報告：前記と同じ）。
現在のところ、水溶性であって、ジニトロフェニル基と
抗ジニトロフェニル抗体との反応を阻害しないような、
しかも目的物質との反応の工程数が少なくかつ収率の高
いジニトロフェニル化合物は見出されておらず、その出
現が期待されている。
抗ジニトロフェニル抗体との反応を阻害しないような、
しかも目的物質との反応の工程数が少なくかつ収率の高
いジニトロフェニル化合物は見出されておらず、その出
現が期待されている。
本発明の目的は、まさにこの点にあり、ジニトロフェニ
ル修飾剤として有用な新規な水溶性ジニトロフェニル化
合物を提供することにある。
ル修飾剤として有用な新規な水溶性ジニトロフェニル化
合物を提供することにある。
本発明者は、新規な水溶性ジニトロフェニル化合物を開
発することを目的として種々研究を重ねてきたところ、
後記一般式（１）で示される化合物を創製することに成
功し、さらに研究を重ねて本発明を完成した。
発することを目的として種々研究を重ねてきたところ、
後記一般式（１）で示される化合物を創製することに成
功し、さらに研究を重ねて本発明を完成した。
即ち、本発明における新規化合物は水溶性であるので、
既知の修飾剤の場合のような有機溶媒の使用を必要とせ
ず、水中で均一な反応を起こさせることができ、反応の
コントロールが容易である。
既知の修飾剤の場合のような有機溶媒の使用を必要とせ
ず、水中で均一な反応を起こさせることができ、反応の
コントロールが容易である。
また、ジニトロフェニル基と目的物質との間の架橋部を
長くすることが可能であるので、ジニトロフェニル基と
抗ジニトロフェニル抗体との反応性に関与する目的物質
自体の立体障害を緩和することができる。
長くすることが可能であるので、ジニトロフェニル基と
抗ジニトロフェニル抗体との反応性に関与する目的物質
自体の立体障害を緩和することができる。
更に、目的物質と１段階での反応が可能である。
本発明による化合物は一般式（１）
アルカリ金属イオンとしては、好ましくはナトリウムイ
オン、カリウムイオンが挙げられる。
オン、カリウムイオンが挙げられる。
一般式（１）で表わされる化合物のうち、２゛がアルカ
リ金属イオンのものは、一般式（ｆｆ）Ｘ、はアルキレ
ン基を示す）、Ｚｏは水素イオン又はアルカリ金属イオ
ンを示す。〕で表わされるジニトロフェニル化合物。で
あり、ジニトロフェニル基とスルホサクシニミド基を有
する点に特徴がある。
リ金属イオンのものは、一般式（ｆｆ）Ｘ、はアルキレ
ン基を示す）、Ｚｏは水素イオン又はアルカリ金属イオ
ンを示す。〕で表わされるジニトロフェニル化合物。で
あり、ジニトロフェニル基とスルホサクシニミド基を有
する点に特徴がある。
一般式（Ｉ）で表わされる化合物において、Ａ１！Ｘ、
又ハＸ２−Ｃ−Ｎ１１−Ｘｓを示し、ココテ×１゜Ｌ、
ＬＩｔ７１ ルキレン基を示す。
又ハＸ２−Ｃ−Ｎ１１−Ｘｓを示し、ココテ×１゜Ｌ、
ＬＩｔ７１ ルキレン基を示す。
アルキレン基としては、いずれも好ましくはＣ１〜１゜
の直鎮もしくは分枝した低級アルキレン基が挙げられる
。
の直鎮もしくは分枝した低級アルキレン基が挙げられる
。
Ｚ゛は水素イオン又はアルカリ金属イオンを示す。
で表わされる出発化合物を縮合剤の存在下で、Ｎ−ヒド
ロキシスルホサクシニミドのアルカリ金属塩と反応させ
ることにより製造される。この反応は１０〜３０℃の温
度で極性有機溶媒中において行われる。
ロキシスルホサクシニミドのアルカリ金属塩と反応させ
ることにより製造される。この反応は１０〜３０℃の温
度で極性有機溶媒中において行われる。
適当な溶媒の例としてはジメチルホルムアミド、ジメチ
ルスルホキシドが挙げられる。反応成分及び反応温度は
、適宜選択でき、反応時間はそれによって変わる。
ルスルホキシドが挙げられる。反応成分及び反応温度は
、適宜選択でき、反応時間はそれによって変わる。
使用される縮合剤はエステル化反応で一般的に使用され
る縮合剤たとえばＮ、 Ｎ−ジシクロへキシルカルボジ
イミドが挙げられる。
る縮合剤たとえばＮ、 Ｎ−ジシクロへキシルカルボジ
イミドが挙げられる。
一般式（ＩＩ）で表わされる出発化合物のうちＡが×１
である化合物は公知の方法により容易に合成することが
できる 〔サンｆ−１Ｆ５：パイｔケミカル ジャーナ
ル、 第３９巻、第５０７頁、１９４５年（Ｓａｎｇｅ
ｒ、 Ｆ、：Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａ
ｌ、 ３９． ５０７（１９４５））］ 。
である化合物は公知の方法により容易に合成することが
できる 〔サンｆ−１Ｆ５：パイｔケミカル ジャーナ
ル、 第３９巻、第５０７頁、１９４５年（Ｓａｎｇｅ
ｒ、 Ｆ、：Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａ
ｌ、 ３９． ５０７（１９４５））］ 。
ＡがＬ−Ｃ−ＮＨ−Ｘ３である出発化合物は、一般式（
１）で表わされる化合物（但し、ＡがＸ、である）と１
−Ｘ３−Ｃ０ＯＨと反応させることにより、容易に製造
されうる（この場合、ｘ２はｘＩと同じアルキレン基を
示す）。
１）で表わされる化合物（但し、ＡがＸ、である）と１
−Ｘ３−Ｃ０ＯＨと反応させることにより、容易に製造
されうる（この場合、ｘ２はｘＩと同じアルキレン基を
示す）。
この反応は１０〜３０℃の温度でｐＨ７〜ｌＯの水中に
おいて行われる。反応成分及び反応温度は、適宜選択で
き、反応時間はそれによって変わる。
おいて行われる。反応成分及び反応温度は、適宜選択で
き、反応時間はそれによって変わる。
この方法では、一般式（１）で表わされる化合物（Ａカ
Ｘ、）場合）と）１．Ｎ−Ｘ、−ＣＯＤ）Ｉを任意に組
み合わせることによって、一般式（１）で表わされる化
合物のジニトロフェニル基とスルホサクシニミド基の間
の架橋部を任意に伸長することが可能である。
Ｘ、）場合）と）１．Ｎ−Ｘ、−ＣＯＤ）Ｉを任意に組
み合わせることによって、一般式（１）で表わされる化
合物のジニトロフェニル基とスルホサクシニミド基の間
の架橋部を任意に伸長することが可能である。
Ｎ−ヒドロキシスルホサクシニミドのアルカリ金属塩は
公知の化合物であるＮ−ヒドロキシマレイミド（Ｍｅｔ
ｏｄｙ Ｐｏ１ｕｃｈ、 Ｋｈｉｍ、 Ｒｅａｋｔｉｖ
ａｖ Ｐｒｅｐ。
公知の化合物であるＮ−ヒドロキシマレイミド（Ｍｅｔ
ｏｄｙ Ｐｏ１ｕｃｈ、 Ｋｈｉｍ、 Ｒｅａｋｔｉｖ
ａｖ Ｐｒｅｐ。
１９６７、 Ｎｏ、１７．１１３−１５）をピロ亜硫酸
塩（Ｎａ又はＫ）と反応させることにより容易に得るこ
とができる。
塩（Ｎａ又はＫ）と反応させることにより容易に得るこ
とができる。
また、一般式（Ｉ）で表わされる化合物のうち、Ｚｌが
水素イオンの化合物は、最終生成物のｐＨを調整（ｐＨ
５〜７）することによって容易に得ることができる。
水素イオンの化合物は、最終生成物のｐＨを調整（ｐＨ
５〜７）することによって容易に得ることができる。
本発明による化合物をジニトロフェニル修飾剤として使
用する場合には次の方法が適用される。
用する場合には次の方法が適用される。
一般式（１）で表わされる化合物は修飾される物質（少
なくとも１個のアミン基を反応に提供しつる蛋白質、核
酸等であり、以下、Ｂ−ＮＬとして示す）と以下のよう
に反応する。
なくとも１個のアミン基を反応に提供しつる蛋白質、核
酸等であり、以下、Ｂ−ＮＬとして示す）と以下のよう
に反応する。
実施例１．８−ヒドロキシスルホサクシニミジル−６−
Ｃ（２，４−ジニトロフェニル）アミノコ−ヘキサノエ
ート ナトリウム塩 この反応は通常１０〜３０℃の温度でｐＨ７〜１０の水
中において行われる。反応成分及び反応温度は、適宜選
択でき、反応時間はそれによって変わる。
Ｃ（２，４−ジニトロフェニル）アミノコ−ヘキサノエ
ート ナトリウム塩 この反応は通常１０〜３０℃の温度でｐＨ７〜１０の水
中において行われる。反応成分及び反応温度は、適宜選
択でき、反応時間はそれによって変わる。
反応溶媒は反応成分の性質により親水性有８５！溶媒を
使用できる。またこれらの反応条件を変えることにより
、修飾率を調節することが比較的容易である。
使用できる。またこれらの反応条件を変えることにより
、修飾率を調節することが比較的容易である。
次に実施例でさらに本発明を説明する。
ｃ以下余白〕
（１） Ｎ−ヒドロキシスルホサクシニミドナトリウム
塩の合成 ２６０ｍｇ （２，３ミリモル）のＮ−ヒドロキシマレ
イミド（シグマケミカルＣＤ、ＳＴ、 Ｌｏｕｉｓ）を
９９．５％エタノール４ｄに溶解させた。２４４ｔｎｇ
（１，３ミリモル）のピロ亜硫酸ナトリウムをＭ製水
４ｄに溶解させ、窒素気流下で撹拌しなからＮ−ヒドロ
キシマレイミドのエタノール溶液に５分間で滴下した。
塩の合成 ２６０ｍｇ （２，３ミリモル）のＮ−ヒドロキシマレ
イミド（シグマケミカルＣＤ、ＳＴ、 Ｌｏｕｉｓ）を
９９．５％エタノール４ｄに溶解させた。２４４ｔｎｇ
（１，３ミリモル）のピロ亜硫酸ナトリウムをＭ製水
４ｄに溶解させ、窒素気流下で撹拌しなからＮ−ヒドロ
キシマレイミドのエタノール溶液に５分間で滴下した。
ついで撹拌しながら、室温で２時間保持し、その後さら
に空気中で１５分間保持した。４０℃以下で、反応溶媒
を減圧下留去し、残渣を１０ｍ１’の精製水に溶解した
。水溶液を濾過し、濾液を凍結乾燥した。凍結乾燥後得
られた淡黄色固体にエーテル２０−を加えて、撹拌しな
がら室温で３０分間保持した。
に空気中で１５分間保持した。４０℃以下で、反応溶媒
を減圧下留去し、残渣を１０ｍ１’の精製水に溶解した
。水溶液を濾過し、濾液を凍結乾燥した。凍結乾燥後得
られた淡黄色固体にエーテル２０−を加えて、撹拌しな
がら室温で３０分間保持した。
濾過をして、乳白色粉末を濾取し、減圧下乾燥した。こ
うして４８０ｍｇ （２，２ミリモル）のＮ−ヒドロキ
シスルホサクシニミドナトリウム塩が得られた。収率は
９６％であった。生成物は質量分析及び’ ）ｌ−１ｉ
ＭＲで分析された。
うして４８０ｍｇ （２，２ミリモル）のＮ−ヒドロキ
シスルホサクシニミドナトリウム塩が得られた。収率は
９６％であった。生成物は質量分析及び’ ）ｌ−１ｉ
ＭＲで分析された。
質量分析 分子量計算値（！” ）２１７分析測定値
２１８（Ｍ ＋ ）Ｉ）２４０（Ｍ ” ＋ Ｎａ
） ’ Ｈ−１１１ＪＲδ（ＤＭＳＯ−ｄ、）１０、４−１
０．８ （１）１．広い、、Ｈｏ４＞（２）Ｎ−ヒドロ
キシスルホサクシニミジル−６−（（２，４−ジニトロ
フェニル）アミノコヘキサノニート ナトリウム塩の台
底 ２９７ｍｇ （１，０ミリモル）の６−［２，４−ジニ
トロフェニル）アミノ〕へ牛サン酸と２１７ａ＋ｇ （
１゜０ミリモル）のＮ−ヒドロキシスルホサクシニミド
ナトリウム塩を無水ジメチルホルムアミド２．５−に溶
解した。この溶液に２２７ｍｇ （１，１ミリモル）の
ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ，和光純薬工
業・大阪）を撹拌しながら添加した。その後、撹拌しな
がら室温で２０時間、ついで４℃に冷却し１時間保持し
た。沈澱したジシクロへキシルウレアを濾過した。濾液
を４０℃以下で減圧によって２ｒｎｆ！以下にａ縮した
。エーテルを５〇−加えてＮ−ヒドロキシスルホサクシ
ニミジル−６−Ｃ（２，４−ジニトロフェニル）アミノ
コヘキサノエートナトリウム塩を析出させた。
２１８（Ｍ ＋ ）Ｉ）２４０（Ｍ ” ＋ Ｎａ
） ’ Ｈ−１１１ＪＲδ（ＤＭＳＯ−ｄ、）１０、４−１
０．８ （１）１．広い、、Ｈｏ４＞（２）Ｎ−ヒドロ
キシスルホサクシニミジル−６−（（２，４−ジニトロ
フェニル）アミノコヘキサノニート ナトリウム塩の台
底 ２９７ｍｇ （１，０ミリモル）の６−［２，４−ジニ
トロフェニル）アミノ〕へ牛サン酸と２１７ａ＋ｇ （
１゜０ミリモル）のＮ−ヒドロキシスルホサクシニミド
ナトリウム塩を無水ジメチルホルムアミド２．５−に溶
解した。この溶液に２２７ｍｇ （１，１ミリモル）の
ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ，和光純薬工
業・大阪）を撹拌しながら添加した。その後、撹拌しな
がら室温で２０時間、ついで４℃に冷却し１時間保持し
た。沈澱したジシクロへキシルウレアを濾過した。濾液
を４０℃以下で減圧によって２ｒｎｆ！以下にａ縮した
。エーテルを５〇−加えてＮ−ヒドロキシスルホサクシ
ニミジル−６−Ｃ（２，４−ジニトロフェニル）アミノ
コヘキサノエートナトリウム塩を析出させた。
３０００ｒｐｍで１０分間遠心してナトリウム塩を沈澱
させて上清と分離した。沈澱に精製水を１０−加えて溶
解し凍結乾燥した。こうして４００ｍｇ（０，８ミリモ
ル）の黄色粉末であるＮ−ヒドロキシスルホサクシニミ
ジル−６−Ｃ（２，４−ジニトロフェニル）アミノコヘ
キサノエート ナトリウム塩が得られた。収率は８０％
であった。
させて上清と分離した。沈澱に精製水を１０−加えて溶
解し凍結乾燥した。こうして４００ｍｇ（０，８ミリモ
ル）の黄色粉末であるＮ−ヒドロキシスルホサクシニミ
ジル−６−Ｃ（２，４−ジニトロフェニル）アミノコヘ
キサノエート ナトリウム塩が得られた。収率は８０％
であった。
生成物は質量分析及び’ ）Ｉ−Ｎ！ＪＲで分析された
。
。
質量分析 分子量計算値（Ｍ” ＞４９６分析測定値
’ Ｈ−ＮＭＲδ（ＤＭＳＯ−６６）
ｃＨ，−ｅ ＞
４９７（Ｍ” ＋ Ｈ）
５２０（、’Ｊ” ＋ Ｎａ）
１、３−１．８ （６）１． ｍ、 Ｎ−ＣＨ２−（Ｃ
Ｌ） ！−実施例２．Ｎ−ヒドロキシスルホサクシニミ
ジル−６−（６−（（２，４−ジニトロフェニル）アミ
ノ）ヘキサノイルアミノコヘキサノエート ナトリウム
塩 Ｕ （１）６−１：６− （（２，４−ジニトロフェニル）
アミノ）ヘキサノイルアミノコヘキサン酸の合成＋ Ｌ
Ｎ−Ｃ）１． （ＣＬ） ３Ｃ）Ｉ、Ｃ００Ｈ１”）１
．Ｃ０Ｄ）１ ２３８ｍｇ （１，８ミリモル）の６−アミノへキサン
酸（ナカライテスク、京都）を０．０５Ｍ炭酸ナトリウ
ム緩衝液（ｐ）Ｉ ９．２） １０ｍｌに溶解した。
Ｌ） ！−実施例２．Ｎ−ヒドロキシスルホサクシニミ
ジル−６−（６−（（２，４−ジニトロフェニル）アミ
ノ）ヘキサノイルアミノコヘキサノエート ナトリウム
塩 Ｕ （１）６−１：６− （（２，４−ジニトロフェニル）
アミノ）ヘキサノイルアミノコヘキサン酸の合成＋ Ｌ
Ｎ−Ｃ）１． （ＣＬ） ３Ｃ）Ｉ、Ｃ００Ｈ１”）１
．Ｃ０Ｄ）１ ２３８ｍｇ （１，８ミリモル）の６−アミノへキサン
酸（ナカライテスク、京都）を０．０５Ｍ炭酸ナトリウ
ム緩衝液（ｐ）Ｉ ９．２） １０ｍｌに溶解した。
１５０■（０，３ミリモル）のＮ−ヒドロキシスルホサ
クシニミジル−６−Ｃ（２゜４−ジニトロフェニル）ア
ミノコヘキサノエート ナトリウム塩を精製水５−に溶
解し、６−アミノヘキサン酸溶液に撹拌しながら１５分
間で滴下した。
クシニミジル−６−Ｃ（２゜４−ジニトロフェニル）ア
ミノコヘキサノエート ナトリウム塩を精製水５−に溶
解し、６−アミノヘキサン酸溶液に撹拌しながら１５分
間で滴下した。
ついで撹拌しながら、室温で１．５時間保持した後、ｌ
Ｎ−ＨＣｌを約０．３−徐々に加えて反応液のｐＨを６
〜６．５にし、生成物を析出させた。
Ｎ−ＨＣｌを約０．３−徐々に加えて反応液のｐＨを６
〜６．５にし、生成物を析出させた。
精製水２０−を加えた後、酢酸二チル１００ｄに抽出し
た。酢酸エチルを４０℃以下で減圧下留去し１０４ ｍ
ｇ （０，２５ミ’Ｊモル）の黄色油状生成物が得られ
た。収率は８３％であった。生成物は’Ｈ−ＮＭＲで分
析された。
た。酢酸エチルを４０℃以下で減圧下留去し１０４ ｍ
ｇ （０，２５ミ’Ｊモル）の黄色油状生成物が得られ
た。収率は８３％であった。生成物は’Ｈ−ＮＭＲで分
析された。
）１−ＮＭＲδ（ＤＭＳＯ−ｄ−） １．２−１．７
（１２Ｂ、ｍ。
（１２Ｂ、ｍ。
ＣＨｚ−Ｃ［１０）１）、２．０−２．３（４Ｈ，ｍ、
−Ｃ，Ｈ−Ｃ−Ｎ−Ｃ）１２−ｆＯ）１）。
−Ｃ，Ｈ−Ｃ−Ｎ−Ｃ）１２−ｆＯ）１）。
■
（２）Ｎ−ヒドロキシスルホサクシニミジル−６−［６
−（（２，４−ジニトロフェニル）アミノ）ヘキサノイ
ルアミノコヘキサノエート ナトリウム塩の合成 １７４■（０，４２４ミリモル）の６− ［：６−（（
２，４−ジニトロフェニル）アミノ）ヘキサノイルアミ
ノ〕へ手サン酸と９２■（０，４２４ミリモルンのＮ−
ヒドロキシスルホサクシニミジルリウム塩を無水ジメチ
ルホルムアミドｌ−に溶解した。この溶液に９７ ｍｇ
（０，４６６ミ＋Ｊモル）のジシクロへ手ジルカルボ
ジイミド（和光紬薬工業）を撹拌しながら添加した。そ
の後撹拌しながら、室温で２０時間保持後、４℃に冷却
し、１時間保持した。
−（（２，４−ジニトロフェニル）アミノ）ヘキサノイ
ルアミノコヘキサノエート ナトリウム塩の合成 １７４■（０，４２４ミリモル）の６− ［：６−（（
２，４−ジニトロフェニル）アミノ）ヘキサノイルアミ
ノ〕へ手サン酸と９２■（０，４２４ミリモルンのＮ−
ヒドロキシスルホサクシニミジルリウム塩を無水ジメチ
ルホルムアミドｌ−に溶解した。この溶液に９７ ｍｇ
（０，４６６ミ＋Ｊモル）のジシクロへ手ジルカルボ
ジイミド（和光紬薬工業）を撹拌しながら添加した。そ
の後撹拌しながら、室温で２０時間保持後、４℃に冷却
し、１時間保持した。
沈澱したジシクロへキシルウレアを濾過除去後減圧によ
って０．５−にａ縮した。酢酸エチル３０−を加えてＮ
−ヒドロキシスルホサクシニミジル−６−Ｃ６−（（２
，４−ジニトロフェニル）アミノ）ヘキサノイルアミノ
コヘキサノエート ナトリウム塩を析出させた。３００
０ｒｐｍで１０分間遠心しナトリウム塩を沈澱させて、
上滑と分離した。
って０．５−にａ縮した。酢酸エチル３０−を加えてＮ
−ヒドロキシスルホサクシニミジル−６−Ｃ６−（（２
，４−ジニトロフェニル）アミノ）ヘキサノイルアミノ
コヘキサノエート ナトリウム塩を析出させた。３００
０ｒｐｍで１０分間遠心しナトリウム塩を沈澱させて、
上滑と分離した。
沈澱に精製水を１０ｍ１加えて溶解し、凍結乾燥した。
こうして １８２ ｍｇ （０，２９９ミリモル、）の
黄色粉末であるＮ−ヒドロキシスルホサクシニミジル−
６−（６−（（２，４−ジニトロフェニル）アミノ）ヘ
キサノイルアミノコヘキサノエート ナトリウム塩が得
られた。収率は７０％であった。
黄色粉末であるＮ−ヒドロキシスルホサクシニミジル−
６−（６−（（２，４−ジニトロフェニル）アミノ）ヘ
キサノイルアミノコヘキサノエート ナトリウム塩が得
られた。収率は７０％であった。
生成物は質量分析及び’Ｉｔ−ＮＭＲで分析された。質
量分析 分子量計算値（Ｍ” ）６０９分析測定値
６１０（Ｍ” ＋ ＩＩ）６３２ （Ｍ” ＋ Ｎａ
） ’Ｈ−Ｎ！ＡＲ ６（０！Ｊ Ｓ Ｃｌ −ｄ ｓ ） １、３−１．８ （１２Ｎ、 ｍ。
量分析 分子量計算値（Ｍ” ）６０９分析測定値
６１０（Ｍ” ＋ ＩＩ）６３２ （Ｍ” ＋ Ｎａ
） ’Ｈ−Ｎ！ＡＲ ６（０！Ｊ Ｓ Ｃｌ −ｄ ｓ ） １、３−１．８ （１２Ｎ、 ｍ。
本発明により、蛋白質の修飾剤として新規かつ有用な水
溶性ジニトロフェニル化合物が提供される。本化合物に
よって、従来不可能であった水系溶媒での蛋白質のジニ
トロフェニル化ができるようになった。これは、免疫学
的測定の分野のみならず、生化学の技術一般に応用しう
るちのであり、当該分野に広く貢献するものである。
溶性ジニトロフェニル化合物が提供される。本化合物に
よって、従来不可能であった水系溶媒での蛋白質のジニ
トロフェニル化ができるようになった。これは、免疫学
的測定の分野のみならず、生化学の技術一般に応用しう
るちのであり、当該分野に広く貢献するものである。
Claims (3)
- （１）一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、ＡはＸ＿１又は▲数式、化学式、表等がありま
す▼を示し（Ｘ＿１、Ｘ＿２、Ｘ＿３はアルキレン基を
示す）、Ｚ＾＋は水素イオン又はアルカリ金属イオンを
示す。〕で表わされるジニトロフェニル化合物。 - （２）ＡがＸ＿１であり、かつＸ＿１が低級アルキレン
基である請求項（１）記載のジニトロフェニル化合物。 - （３）Ａが▲数式、化学式、表等があります▼であり、
かつＸ＿２、Ｘ＿３が低級アルキレン基である請求項（
１）記載のジニトロフェニル化合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20625389A JP2918912B2 (ja) | 1989-08-08 | 1989-08-08 | 水溶性ジニトロフェニル化合物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20625389A JP2918912B2 (ja) | 1989-08-08 | 1989-08-08 | 水溶性ジニトロフェニル化合物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0368552A true JPH0368552A (ja) | 1991-03-25 |
| JP2918912B2 JP2918912B2 (ja) | 1999-07-12 |
Family
ID=16520272
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20625389A Expired - Lifetime JP2918912B2 (ja) | 1989-08-08 | 1989-08-08 | 水溶性ジニトロフェニル化合物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2918912B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5892057A (en) * | 1997-09-18 | 1999-04-06 | Pierce Chemical Company | Preparation of sulfo-N-hydroxysuccinimide salts |
-
1989
- 1989-08-08 JP JP20625389A patent/JP2918912B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5892057A (en) * | 1997-09-18 | 1999-04-06 | Pierce Chemical Company | Preparation of sulfo-N-hydroxysuccinimide salts |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2918912B2 (ja) | 1999-07-12 |
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