JPH03878B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は毒性の少ない新規なアミドＮ置換ブレ
オマイシン類に関するものである。 ブレオマイシンは1966年本発明者の一人である
梅沢らにより発見された制癌性抗生物質で（梅沢
らジヤーナル・オブ・アンチビオチクス、19A、
200頁、1966年）放線菌ストレプトミセス・バー
チシラスにより生産される１原子の２価の銅を容
易にキレートする塩基性水溶性糖ペプチドで、通
常の培養法では16種が生産され、単離されてい
る。（例えば、梅沢ら：ジヤーナル・オブ・アン
チビオチクス19A，210頁、1966年）。これらブレ
オマイシンのうち、A1、A2、A5、B2、デメチ
ルA2等は、その混合物の脱銅体（以下「ブレオ
マイシン・コンプレツクス」という。）が現在す
でに癌治療の臨床面で広く使用されており、とく
に偏平上皮癌を中心に、皮膚癌、頭頚部癌、肺
癌、悪性リンパ腫などで優れた成績をあげてい
る。 また、米国特許第3922262号及び米国特許第
Re30451号には種々のブレオマイシン類が開示さ
れている。 これらのブレオマイシン類は通常発酵法におい
て、含銅体の形で得られるが、それを脱銅するこ
とにより脱銅体とされる。本発明においては特に
断わらない限り、「ブレオマイシン」という語は
含銅体及び脱銅体の両者を含むものとする。そし
てこれらのブレオマイシン類は下記一般式〔〕 （式中Ｒはブレオマイシン類の末端アミン残
基）で表わされる（但し含銅体の場合のキレート
銅は省略）。 しかしながら、これらのブレオマイシン類は優
れた効果を示す一方副作用もあるため、より副作
用が少ないブレオマイシン類の開発が要望されて
いる。本発明者らは種々研究の結果、下記一般式
〔〕 （式中BMはブレオマイシン骨格の残基、R′は
３―｛Ｎ−メチルＮ−〔ビス（ｍ，ｐ−ジベンジ
ルオキシベンジルアミノ）プロピル〕アミノ｝プ
ロピルアミノ基、X′は３−（（Ｓ）−1′−フエニル
エチルアミノ）プロピルアミノ基またはｎ−オク
チルアミノ基を示す。）で表わされる新規なアミ
ドＮ置換ブレオマイシンが肺毒性を示さず、かつ
急性毒性も比較的少なく、かつ優れた制癌効果を
示すことを見い出し本発明を完成した。 なお本発明の一般式における「BM」で表わさ
れるブレオマイシン骨格の残基は前記ブレオマイ
シン類の一般式において……線で囲われている部
分を意味し、特に断わらない限り、含銅体及び脱
銅体のいずれおも含むものとする。 上記本発明の化合物は例えば次のようにして合
成することができる。 まず、前記一般式〔〕で表わされるブレオマ
イシンのＲがアグマチンであるブレオマイシン
B₂の脱銅体をブレオマイシン不活化酵素（以下
「不活化酵素」という。：梅沢ら、：ジヤーナル・
オブ・アンチビオチクス27巻、419頁、1974）例
えばラツトの不活化酵素又は、それと同様にして
牛又は豚の肝臓から調製した不活化酵素を用いて
加水分解して下記一般式〔〕 〔式中BMは前記と同じ。〕 で表わされるデアミドブレオマイシンB₂とする。
より具体的にはたとえば、牛肝臓を燐酸緩衝液と
ホモジエネエイトとて、8000RPMで遠心分離し、
その上清を燐酸緩衝液に対し透析し粗酸素液と
し、それにブレオマイシンB₂を燐酸緩衝液に溶
解したものを加え、37℃、５〜48時間反応させ
る。反応液から適当な方法で蛋白質を除き、（た
とえば５％となるように、トリクロロ酢酸（以下
TCAと略す）を加え蛋白質を沈澱させ、遠心分
離で沈澱を除き、沈澱を３回５％TCAで洗浄し
洗液をあつめる）中和後、ブレオマイシンに対し
て過剰の酢酸銅を加え目的物を銅キレートとす
る。これを脱塩するため蒸留水で充填した吸着樹
脂ダイアイオン HP40、のカラムに注ぎ目的物
を吸着する。蒸留水で塩類をあらい流した後、
１／50規定塩酸水溶液−メタノール（１：4v／
ｖ）で溶出し、波長290ミリミクロン付近に吸収
極大を示す分画をあつめる。陰イオン交換樹脂、
ダウエツクス 44（OH型；ザ・ダウ・ケミカル
社製）で中和したのち、減圧下で濃縮して凍結乾
燥する。 上記の粉末を蒸留水に溶解し、あらかじめPH
4.5，１／20モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で
平衡化したCMセフアデツクス Ｃ−25（Na＋
型：フアルマシア、フアインケミカル社製）を充
填したカラムに注入し吸着し、上記の緩衝液に連
続的に塩化ナトリウムを加えることによりナトリ
ウム濃度を1.0モルまで徐々に上昇させる直線濃
度勾配法により溶出し、目的物の青紫色の分画を
集める。先に用いたダイアイオン HP40脱塩法
で脱塩したのち、凍結乾燥すると、デアミドブレ
オマイシンB₂の含銅体が青色の無定形粉末で得
られる。 次にこのデアミドブレオマイシンB₂に３−
（（Ｓ）−1′−フエニルエチルアミノ）プロピルア
ミンまたはｎ−オクチルアミンを常法により縮合
することにより、アミドＮ置換ブレオマイシン
B₂を得ることができる。 縮合は酸アミド結合を形成するための公知方
法、たとえば特公昭54−63089号記載の方法等を
用いることができる。 反応は溶媒として水、ジメチルフオルムアミ
ド、アセトニトリル、それらの混合液が用いられ
る。温度は−10〜30℃、反応温度は１〜70時間が
よい。 以上のようにして得られた誘導体を単離するに
は、アセトンまたはエーテル等の有機溶媒を反応
液に加え目的物を沈澱させ、次いで蒸留水に溶解
しPHを６に合わせ、脱塩するため吸着樹脂たとえ
ばアンバーライト XAD−２（ローム・アンド・
ハース社製）を蒸留水を用いて充填したカラムに
注入して、目的物を吸着する。蒸留水で塩類をあ
らい流した後、酸性の含水メタノール、たとえば
１／50規定塩酸水溶液−メタノール（１：4v／
ｖ）で溶出し、波長290ミリミクロン付近に吸収
極大を示す分画をあつめる。陰イオン交換樹脂、
ダウエツクス 44（OH型；ザ・ダウ・ケミカル
社製）で中和したのち減圧下で濃縮して凍結乾燥
すると、誘導体の粗粉末がえられる。上記脱塩操
作は省略できる場合もあり、そのときは上記沈澱
を蒸留水に溶解しつぎの操作にうつることもでき
る。 上記の粉末を蒸留水に溶解し、あらかじめPH
4.5，１／20モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で
平衡化したCMセフアデツクス Ｃ−25（Na＋
型：フアルマシア、フアインケミカル社製）を充
填したカラムに注入し吸着する。上記の緩衝液に
連続的に塩化ナトリウムを加えることによりナト
リウム濃度を1.0モルまで徐々に上昇させる直線
濃度勾配法により溶出する。この時未反応の原料
と副生物はより早く溶出する性質があるので、紫
外線吸収モニターを用いることにより分離除去す
ることが可能である。もし目的物の分画に不純物
の混入が認められれば、上記のクロマトグラフイ
ーを再度行い完全除去をはかればよい。 上記のクロマトグラフイーを行うかわりに吸着
樹脂たとえばアンバーライト XAD−２を用い
るクロマトグラフイーをおこなつてもよい。樹脂
を緩衝液、たとえば１％酢酸アンモニウム水溶
液、を用いて充填したカラムに粗物質の水溶液を
注入して、目的物を吸着する。緩衝液に連続的に
メタノールを加えることによりメタノール濃度を
徐々に上昇させる直線濃度勾配法により溶出す
る。この時未反応の原料はより早く主な副生物は
より遅く溶出する性質があるので紫外線吸収モニ
ターを用いることにより分離除去することが可能
である。もし目的物の分画に不純物の混入が認め
られれば、上記のクロマトグラフイーを再度行い
完全除去をはかればよい。 上記２種の精製操作は単独でも、又組合せて行
つてもよい。 このようにして得られる目的物の分画を上述し
た吸着樹脂、例えばアンバーライト XAD−２
を用いた脱塩法で脱塩したのち、凍結乾燥する
と、アミドＮ置換ブレオマイシン類の含銅体が青
色の無定形粉末で得られる。 このようにして得られる上記アミドＮ置換ブレ
オマイシン類の含銅体を公知の方法、たとえば
EDTAを用いる方法（特公昭52−31875）で脱銅
すれば脱銅体が得られる。 その一例を説明すると、含銅体を蒸留水に溶解
し、これを蒸留水で充填したアンバーライト
XAD−２のカラムに注入し吸着する。樹脂を塩
化ナトリウムと５％のエチレンジアミン四酢酸・
２ナトリウム（以下「EDTA・2Na」という）
からなる水溶液でカラムを洗うと、銅イオンは
EDTA・2Naにより運び去られ、上記アミドＮ
置換ブレオマイシンB₂（脱銅体）が樹脂上に残
る。塩化ナトリウムで洗いEDTA・2Naを除去
し、さらに蒸留水で洗浄する。最後に酸性含水メ
タノール、たとえば１／50規定塩酸水溶液−メタ
ノール（１：4v／ｖ）で溶出し波長290ミリミク
ロン付近に吸収極大を示す分画を集める。ダウエ
ツクス 44（OH型；ザ・ダウ・ケミカル社製）
でPH6.0に合わせた後、減圧下で濃縮し、凍結乾
燥すると上記アミドＮ置換ブレオマイシンB₂の
脱銅体・塩酸塩が白色の無定型粉末で得られる。 もし、上記の塩化ナトリウム及び塩酸水溶液の
かわりに、硫酸ナトリウムおよび硫酸水溶液を用
いれば硫酸塩が得られる。このように、上記溶出
工程で用いられる塩及び酸の種類を選択すること
により、任意の酸との間の塩がえられる。このよ
うにして得られる塩の例として塩酸塩、硫酸塩の
他、酢酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸
塩、乳酸塩などがあげられる。 次にこのアミドＮ置換ブレオマイシンB₂を公
知のブレオマイシンの末端アミノ基の部分を加水
分解する菌体（例えばIFO7189：ATCC20352ま
たはIFO8502：ATCC20355）等を用いる方法
（例えば特開昭53−19677）によつて加水分解し
て、対応するアミドＮ置換ブレオマイシン酸を得
ることができる。 このアミドＮ置換ブレオマイシン酸と下記
〔〕 で示される３−｛Ｎ−メチルＮ−〔ビス（ｍ，ｐ−
ジベンジルオキシベンジル）アミノプロピル〕ア
ミノ｝プロピルアミンを縮合することにより、前
記一般式〔〕の化合物を得ることができる。こ
の縮合は例えば特公昭54−63089号記載の方法に
準じて行うことができる。 目的物の単離は、CM−セフアローズ CL−
6B（Na⁺型：フアルマシアフアインケミカル社
製）を充填したカラムを用いてクロマトグラフイ
ーにより、直線濃度勾配法により溶出し、目的物
質の溶出する分画を集めることにより行うことが
できる。 本発明化合物を下記に示す。なお化合物名にお
いて、「BLM」はブレオマイシンの語を示し一般
式〔〕で示される化合物は、R′の名称−アミ
ド−Ｎ−〔X′の名称〕−BLMと呼ぶものとする。 (1) ３−｛Ｎ−メチル−Ｎ−〔3′−ビス（ｍ，ｐ−
ジベンジルオキシベンジル）アミノプロピル〕
アミノ｝プロピルアミノ−アミド−Ｎ−〔３−
（（Ｓ）−1′−フエニルエチル）アミノプロピル〕
−BLM（以下dMDDBZOBZ−PEPという。） (2) ３−｛Ｎ−メチル−Ｎ−〔3′−ビス（ｍ，ｐ−
ジベンジルオキシベンジル）アミノプロピル〕
アミノ｝プロピルアミノ−アミド−Ｎ−〔オク
チル〕−BLM（以下dMDDBZOBZ−OCTとい
う。） 次にこの化合物の物性値を下記に示す。

【表】 １ ミコバクテリウム・スメグマチス・
ATCC607、及びバチルス・ズブチリスに対す
る抗菌活性 上記の検定菌を用いて、寒天平板円筒法によ
り測定した。ただし、標準物質ブレオマイシン
A2（脱銅体）を1000mcg力価／mgとした。その
結果を第３表に示した。 ２ 培養HeLaS3細胞に対する増殖阻害効果プラ
スチツク・シヤーレの培養基（10％仔牛血清添
加MEM）にHeLaS3細胞を接種し２日後にブ
レオマイシン類を添加した。さらに３日間培養
を続けた後、細胞数を測定した。 増殖阻害率は次式 阻害率（％）＝100×（Ｂ−Ａ）／（Ｂ−Ｃ） 〔式中、Ａは被験試料添加後３日目の最終細
胞数、Ｂは被験試料を添加しない対照における
最終細胞数、Ｃは被験試料添加時の細胞数を表
わす。〕を用いて算出した。試料濃度と阻止率
のグラフから、ID₅₀値（50％阻害のための濃
度）を求めた。その結果を次に示した。

【表】 ン・スメ チルス・ 害濃度
グマチス ズブチリ (ID_５０５)
ATCC607 ス mcg／ml
dMDDBZOBZ−PEP 115 23 0.0
58
dMDDBZOBZ−OCT 113 13 0.0
3
３ マウスの肺毒性（肺線維化）ICR系マウス
（雄性15週令）を一群９匹として用いた。各薬
剤の投与量は、５mg／Kgとし、１日１回連続10
日間、腹腔内注射し、投与終了後、５週間飼育
し、観察後、屠殺剖検し、肺の線維化の頻度、
及び程度を調べた。 成績は、投与群の肺線維化をもつマウス数の
頻度（Incidence）及び、その強弱の程度
（Grade）について比較した。その結果を第４
表に示す。表中の点数は下記のとおりである。 ０点：線維化を認めない。 １点：肺胞に浸出液の著積がみられ、肺胞中隔
に線維化様変化が見られる。 ２点：数か所にみられる線維化 ４点：散在性にみられる線維化 ６点：２／３以上の広範囲にみられる線維化 また、表中の比は、ブレオマイシンコンプレツ
クスとの比率を示す。

【表】 ４ マウスの10日間連続投与におけるLD₅₀，
CDF₁／SLC系雄性マウス（６週令）に各種投
与量のBLM誘導体を１日１回10日間皮下投与
した。一群は７匹のマウスで構成した。投与期
間中のマウスの死亡数からBehrens−Ｋａ‥rber
法によりLD₅₀値（１日投与量）を求めた。 その結果を下記に示す。 略 号 10日間連投におけるLD₅₀ （mg／Kg／日） dMDDBZOBZ−PEP ＞81.4 dMDDBZOBZ−OCT ＞75.7 以上の結果から明らかなように、本発明化合物
は、培養HeLaS3細胞に対する増殖阻害活性が強
く、優れた抗菌活性をも有しており、肺毒性を著
しく減じており、連投における急性毒性も少ない
ものであることがわかり、臨床面での有用性を強
く示唆している。 次に本発明の実施例により具体的に説明する。 実施例 １ Ａステツプ 新鮮な牛肝臓200ｇを400mlの0.05モル燐酸緩衝
液（PH：7.2）とホモジエネエイトして8000RPM
で30分遠心分離し、その上清を0.05モル燐酸緩衝
液に対し透析し粗酵素液とする。ブレオマイシン
B₂、10ｇに上記粗酵素液400mlを加え、37℃、24
時間反応させる。反応液に55％トリクロロ酢酸
（以下TCAと略す）40mlを加え蛋白質を沈澱さ
せ、遠心分離で沈澱を除き、沈澱を３回５％
TCAで洗浄し瀘液と洗液をあつめ4MNaOHで中
和後、3.2ｇの酢酸銅（ブレオマイシンに対して
2.4等量）を加え目的物を銅キレートとする。こ
れを脱塩するため蒸留水で充填した吸着樹脂ダイ
アイオン HP40、（三菱化成社製）のカラム
（1L容）に注ぎ目的物を吸着した。1.5の蒸留水
で塩類をあらい流した後、１／50規定塩酸水溶液
−メタノール（１：4v／ｖ）で溶出し、波長290
ミリミクロン付近に吸収極大を示す分画をあつめ
た。ダウエツクス 44（OH型、ザ・ダウ・ケミ
カル社製）で中和したのち減圧下で濃縮した。 上記の濃縮液を、あらかじめPH4.5，１／20モ
ル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化したCM
セフアデツクスＣ−25（Na⁺型：フアルマシア、
フアインケミカル社製）を充填したカラム（1L
容）に注入し吸着した。上記の緩衝液に連続的に
塩化ナトリウムを加えることによりナトリウム濃
度を1.0モルまで徐々に上昇させる直線濃度勾配
法により溶出した。0.3M前後で溶出する青色の
分画を集め、先に用いたダイアイオン HP40脱
塩法で脱塩したのち、凍結乾燥すると、デアミド
ブレオマイシンB₂の含銅体が8.5ｇ青色の無定形
粉末で得られた。（収率83％） 本品の蒸留水で測定した紫外吸収極大および
（E1％／１cm）は242mμ（138），291mμ（115）で
あつた。臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大
波数（cm^-1）は 3425，2975，2940，1720，
1640，1575，1460，1420，1400，1375，1280，
1260，1240，1190，1140，1100，1060，1020，
760 であつた。その他の理化学的性状は下記に示す。 含銅体の紫外部吸収極大mμ 242（138） （E1％／１cm） 292（115） 含銅体の薄層クロマトグラフイーRf値 0.95 （註１） 0.64＊ 含銅体の電気泳動、Rm値 0.72 （アラニンを1.0とする） 註１：シリカゲル60F254シラナイズド （メル
ク社）・メタノール６％酢酸アンモン（60：
40v／ｖ）但し＊印をつけたものは（65：
34v／ｖ）で測定した。 註２：アビセルSF （FMC社）・ギ酸−酢酸−
水（27：75：900v／ｖ）800V，15分 Ｂステツプ Ａステツプで得たデアミドブレオマイシンB₂
の含銅体１ｇと1.77ｇの１−ヒドロキシベンズト
リアゾール（以下HOBTと略す）を10mlのジメ
チルフオルムアミドに溶解し、０℃に冷却撹拌し
1.35ｇのジシクロヘキシルカルボジイミド（以下
DCCと略す）（ブレオマイシンに対して10倍量）
を加える。５分後３−（（Ｓ）−1′−フエニルエチ
ル）アミノプロピルアミン塩酸塩840mg（ブレオ
マイシンに対して５倍量）とＮ−メチルモルフオ
リン0.72mlを加える。室温で16時間撹拌し反応さ
せる。 反応液に10倍容のアセトンを加え、目的物を沈
澱させ、アセトンでよく洗つた後この沈澱を蒸留
水に溶解し、あらかじめPH4.5，１／20モル酢酸
−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化したCMセフア
デツクスＣ−25（Na⁺型：フアルマシア、フアイ
ンケミカル社製）を充填したカラム（100ml容）
に注入し吸着した。上記の緩衝液に連続的に塩化
ナトリウムを加えることによりナトリウム濃度を
1.0モルまで徐々に上昇させる直線濃度勾配法に
より溶出した。0.6モル前後で溶出する青色の分
画を集め、先に用いたダイアイオン HP−40
（100ml使用）の脱塩法で脱塩したのち、凍結乾燥
するとアミドＮ−〔３−（（Ｓ）−1′−フエニルエチ
ル）アミノプロピル〕−ブレオマイシンB₂の含銅
体880mgが青色の無定形粉末で得られた。（収率76
％）本品の蒸留水で測定した紫外吸収極大および
（E1％／１cm）は243mμ（125）、292mμ（96）であ
つた。臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波
数（cm^-1）は、 3425，2975，2930，1720，1640，1580，1575，
1550，1455，1430，1400，1370，1290，1240，
1190，1130，1095，1060，1005，980，875，
760 であつた。 アミンとしてｎ−オクチルアミンを用いること
により、アミドＮ−ｎ−オクチル−ブレオマイシ
ンB₂が合成された。 Ｃステツプ フザリウム・ロゼウム財団法人発酵研究所保存
番号IEO7189を培養して得られる菌体400ｇを4L
の１／20モル燐酸緩衝液（PH：7.5）とホモジエ
ネエイトする。これにアミドＮ−〔３−（（Ｓ）−
1′−フエニルエチル）アミノプロピル〕−ブレオ
マイシンB₂の含銅体10ｇを1Lの上記燐酸緩衝液
に溶解したものを加え、37℃20時間反応させる。
反応液に瀘過助剤を加え吸引濾過し残渣を上記燐
酸緩衝液で洗浄し、渣液を集めた。これを蒸留水
で充填した吸着樹脂アンバーライト XAD−２
（1L容）のカラムに注ぎ目的物を吸着した。2Lの
蒸留水で塩類をあらい流した後、50％メタノール
で溶出し、青〜青緑色を示す分画5Lをあつめた。
減圧下濃縮した後、これを80％メタノール350ml
に溶解し、80％メタノールで充填した70mlのアル
ミナのカラムに注いだ。100mlの80％メタノール
で洗つた後40％のメタノールで展開し、溶出され
る青色の分画350mlを集め減圧下で濃縮した。こ
れを蒸留水に溶解し、あらかじめPH4.5，１／20
モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化した
CMセフアデツクス Ｃ−25（Na⁺型：フアルマ
シア・フアインケミカル社製）を充填したカラム
（600ml容）に注入し吸着した。上記の緩衝液に連
続的に塩化ナトリウムを加えることによりナトリ
ウム濃度を1.0モルまで徐々に上昇させる直線濃
度勾配法により溶出した。0.2モル前後で溶出す
る青色の分画を集め、ダイアイオン HP40脱塩
法で脱塩したのち、凍結乾燥するとアミドＮ−
〔３−（（Ｓ）−1′−フエニルエチル）アミノプロピ
ル〕ブレオマイシン酸の含銅体7.1ｇが青色の無
定形粉末で得られた。（収率79％） 本品の蒸留水で測定した紫外吸収極大および
（E1％／１cm）は245mμ（121），293mμ（119）で
あつた。臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大
波数（cm^-1）は、 3450，2975，2940，1720，1645，1580，1555，
1460，1370，1300，1190，1140，1095，1060，
1005，980，880，765，700 であつた。 その他の理化学的性状は次表に示した通りであ
る。 本実施例と同様にアミドＮ−ｎ−オクチル−ブ
レオマイシンB₂から、アミドＮ−ｎ−オクチル
−ブレオマイシン酸が得られた。これらの理化学
的性質を次表にしめす。

【表】 Ｄステツプ Ｃステツプで得たアミド−Ｎ−〔３−（（Ｓ）−
1′−フエニルエチル）アミノプロピル〕−ブレオ
マイシン酸含銅体1.09ｇと、1.81ｇのHOBTとを
８mlのジメチルフオルムアミドに溶解し、以下ス
テツプＢと同様にして、1.37ｇのDCCを用い930
mgの３−｛Ｎ−メチル−Ｎ−〔3′−（ビス（ｍ，ｐ
−ジベンジルオキシベンジル）アミノ）プロピ
ル〕｝アミノプロピルアミンと16時間反応させた。
反応液を、ステツプＢと同様にアセトン処理した
のち、あらかじめPH4.5の酢酸緩衝液で平衡化後
メタノール−水（７：３）で洗つておいたCM−
セフアローズ CL−6B（Na⁺型：フアルマシア
フアインケミカル社製）を充填したカラム（280
ml容）に注入し吸着した。メタノール−水（７：
３）に連続的に塩化ナトリウムを加えることによ
り、ナトリウム濃度を0.2モルまで徐々に上昇さ
せる直線濃度勾配法により溶出した。0.12モル前
後で溶出する青色の分画を集め、アンバーライト
XAD−２のカラム（270ml容）に吸着させた。
1.5のPH4.5酢酸緩衝液と1.5のメタノールを用
いた直線濃度勾配法により、メタノール濃度を直
線的に上昇させて溶出を行つた。目的物はメタノ
ール濃度90％付近で溶出された。溶出液をアンバ
ーライト XAD−２のカラム（100ml容）に吸着
させ、次に樹脂を５％EDTA・2Na水溶液300
ml、２％塩化ナトリウム溶液100ml、蒸留水250ml
の順序で洗浄したのち、最後に１／50規定塩酸水
溶液−メタノール（１：4v／ｖ）で溶出した。
波長290nm付近に吸収極大を示す分画を集め、ダ
ウエツクス 44（OH型：ザ・ダウ・ケミカル社
製）でPH6.0に合せたのち凍結乾燥し、
dMDDBZOBZ−PEPの脱銅体塩酸塩1.206ｇを白
色無定形粉末として得た（収率71％）。 本品の蒸留水で測定した紫外吸収極大および
（Ｅ１％ １cm）は、285nm（74.4）であつた。臭化カリ
錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（cm^-1）は、 3400，2940，1710，1650，1545，1505，1450，
1380，1260，1135，1060，1010，800，730，
690 であつた。 その他の物性は前記した通りである。 本ステツプにおいて、アミド−Ｎ−オクチルブ
レオマイシン酸を原料として用いることにより、
dMDDBZOBZ−OCTが得られた。このものの蒸
留水で測定した紫外吸収極大および（Ｅ１％ １cm）
は、285nm（76.3）であつた。臭化カリ錠剤法で
測定した赤外吸収極大波数（cm^-1）は、 3400，2940，1720，1650，1550，1505，1450，
1425，1380，1320，1265，1135，1060，1020，
905，805，730，690 であつた。 その他の理化学的性状は前記した通りである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 〔〕 一般式 〔式中BMはブレオマイシン骨格の残基〕 （式中R′は３−｛Ｎ−メチルＮ−〔ビス（ｍ，
   ｐ−ジベンジルオキシベンジルアミノ）プロピ
   ル〕アミノ｝プロピルアミノ基、X′は３−（（Ｓ）
   −1′−フエニルエチルアミノ）プロピルアミノ基
   またはｎ−オクチルアミノ基を示す。）で示され
   る新規アミドＮ置換ブレオマイシン類。