JPH04217940A - 抗ウィルス性化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】抗ウィルス性化合物としてプリン誘導体の
使用は知られている。例えば米国特許第４，０２７，０
２５号は抗ウィルス性化合物として９−（２−ヒドロキ
シエトキシメチル）−８−アザグアニンおよび９−（２
−ベンゾイルオキシエトキシメチル）−８−アザグアニ
ンのような８−アザプリン誘導体を開示している。米国
特許第４，１４６，７１５号は２−アミド−９−（２−
アシロキシエトキシメチル）ヒポキサンチンを開示して
いる。米国特許第４，１９９，５７４号は特定の６−お
よび２，６−置換プリンの９−（２−ヒドロキシエトキ
シメチル）および関連誘導体が抗ウィルス作用を有する
ことを開示している。ヨーロッパ特許出願公告第００４
９０７２号は９−〔〔２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキ
シメチル）エトキシ〕メチル〕グアニンが抗ウィルス作
用を有することを開示している。

【０００２】本発明の目的は新規な抗ウィルス性化合物
を提供するものである。本発明の他の目的は公知の抗ウ
ィルス性化合物に比べて増大した抗ウィルス作用を有す
る新規な化合物を提供するものである。さらに他の目的
はヘルペスウィルスに対して有効な抗ウィルス作用を有
する化合物を提供するものである。さらにその上他の目
的は抗マイコプラズマ作用を有する化合物を提供するも
のである。さらに本発明の目的は本発明の新規な化合物
の有効な投与のための医薬処方を提供するものである。 さらに他の目的は本発明の新規な化合物の製造方法を提
供するものである。本発明のこれらのおよび他の目的は
次の説明から明白となる。

【０００３】９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニンおよび９−（２，３−ジヒドロキ
シ−１−プロポキシメチル）グアニンが有効な抗ウィル
ス作用を有することを見出した。これらの化合物、それ
らのアシル誘導体、それらのホスフェート誘導体および
それらの医薬的に使用し得る塩、これらの化合物を含有
する医薬処方、これらの化合物でのウィルス性感染の治
療、これらの化合物の製造方法およびそれらの製造に有
用な新規な中間体をすべて開示する。さらにアシル誘導
体は抗マイコプラズマ作用を有する。

【０００４】本発明の化合物は適当なアセトキシメチル
エーテルをジアセチルグアニンと反応させ、次に脱保護
することによって製造することができる。アセトキシメ
チルエーテルは触媒の存在下グリセロルホルマルを酢酸
無水物と反応させることによって得ることができる。本
発明は抗ウィルス性化合物に関するものであり、さらに
詳細には式Ｉの９−（２，３−ジヒドロキシ−１−プロ
ポキシメチル）グアニンおよび式ＩＩの９−（１，３−
ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニンに関す
るものである。

【０００５】

【化３】 式ＩおよびＩＩの化合物においてヒドロキシル基の水素
原子を式−Ｃ（Ｏ）Ｒ３　（式中Ｒ３　は飽和またはモ
ノーまたはポリ不飽和であることができる１〜２０個の
炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル基、アリー
ル，置換アリール、ヘテロシクリル、アラルキル，アル
コキシアルキルまたはアリールオキシアルキルである）
を有するアシル基に置き換えることができるかまたはヒ
ドロキシ基の水素原子を式

【化４】 （式中Ｒ４　およびＲ５　は各々Ｈ、医薬的に使用し得
るカチオン、１〜８個の炭素原子を有する直鎖または分
枝鎖アルキル、アリール、アラルキル、ホスフェートま
たはピロホスフェートである）を有するホスフェート基
に置換することができる。

【０００６】好適にはアルキル基は１〜１０個の炭素原
子であり、アリール基は所望によりハロゲンまたはＣ１
−４　を有するアルキルで置換されたフェニルであり、
ヘテロシクリル基はピリジル、ピペリジル、フリル、イ
ミダゾリル、テトラヒドロフリルまたはチェニルであり
、アラルキル基はＣ１−４　を有するアルキルで置換さ
れたフェニルであり、アルコキシアルキル基のアルコキ
シおよびアルキル基は両方とも１〜４個の炭素原子を含
有し、アリールオキシアルキル基はＣ１−４　を有する
アルキルで置換されたフェノキシであり、医薬的に使用
し得るカチオンはナトリウム、カリウム、アンモニウム
、アルキル（Ｃ１−４　）置換アンモニウム、マグネシ
ウム／２、カルシウム／２またはアルミニウム／３であ
る。

【０００７】式ＩおよびＩＩの化合物はグリセロルホル
マル、式ＩＩＩの化合物が通常優勢な化合物である式

【
化５】 （式中ＲはＨである。）を有する１，３−ジオキサン−
５−オールおよび式

【化６】 （式中ＲはＨである。）を有する１，３−ジオキソラン
−４−メタノールの混合物から出発して製造することが
できる。グリセロルホルマル中式ＩＩＩおよびＩＶの比
はＨ，チベルト、フレセニウズ　　Ｚ．Ａｎａｌ．Ｃｈ
ｅｍ第２６５巻、第３２８頁（１９７３年）によって５
７：４３であることが定量されている。しかしながらこ
の比はグリセロルホルマルの異なる製造法に対して変わ
ることができる。種々の比の式ＩＩＩおよびＩＶの化合
物を含有する混合物が本発明に従って使用することがで
きることは理解されるべきである。

【０００８】グリセロルホルマル（式ＩＩＩおよびＩＶ
の化合物の混合物）は好適には式ＩＩＩおよびＩＶの個
々の化合物を分解せずに、ピリジンの存在下酢酸無水物
のようなアシル化剤と反応させることによってアシル化
してＲがアシルである対応するアシルオキシ誘導体を生
成する。この混合物は例えば高性能液体クロマトグラフ
ィ（ＨＰＬＣ）によって分離される。触媒例えばＺｎＣ
ｌ２　の存在下ＲがＡＣ　（アセチル）である式ＩＩＩ
を有する化合物を酢酸無水物で処理して式

【化７】 を有するアセトキシメチル２，３−ジアセトキシ−１−
プロピルエーテルを生成する。この反応は発熱であり、
好適には不活性雰囲気例えばＮ２　中包囲温度で起る。

【０００９】次に式Ｖの化合物を精製しそしてニートま
たはトリグリムのような不活性溶媒中イシド等、Ｂｕｌ
ｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．日本第３７巻、第１３８９頁（
１９６４年）で記載されるように酸性触媒例えばエタン
スルホン酸の存在下、真空下上昇温度で調製した式

【化
８】 を有するジアセチルグアニンと反応させて粘性油として
式

【化９】 を有する２−アセタアミド−９−（２，３−ジアセトキ
シ−１−プロポキシメチル）ヒポキサンチンＶＩＩＩを
生成する。

【００１０】次に式ＶＩＩＩの化合物を例えば還流下好
適には不活性雰囲気例えばＮ２　中水性メチルアミンで
加熱することによって脱アセチル化し、次いで冷却して
式Ｉの化合物を含有する溶液を生成し、所望により木炭
で処理して濾過する。濾液を濃縮して固体を生成し、Ｈ
２　Ｏで再結晶して結晶性生成物を生成する。式ＩＩの
化合物はＲがＡＣ　である式ＩＶを有する化合物を触媒
例えばＺｎＣｌ２　の存在下酢酸無水物と反応させるこ
とによって同様の方法で得ることができ、式

【化１０】 を有するアセトキシメチル１，３−ジアセトキシ−２−
プロピルエーテルを生成することができる。この反応は
ＲがＡＣ　である化合物ＩＩＩから化合物Ｖを生成する
ために用いた同様の条件下で起る。

【００１１】次に式ＶＩの化合物を精製しそして式Ｖの
化合物をジアセチルグアニンと反応させるために用いた
のと同様の条件下で式ＶＩＩのジアセチルグアニンと反
応させて式ＩＸの２−アセタミド−９−（１，３−ジア
セトキシ−２−プロポキシメチル）ヒポキサンチンを粘
性油として生成し、式ＶＩＩＩ　の化合物に使用したの
と同様の操作によって結晶化する。

【化１１】 次に式ＶＩＩＩの化合物を式Ｉに転化するために使用し
たのと同様の処理によって式ＩＸの化合物を式ＩＩの結
晶性生成物に転化する。また所望によりグリセロルホル
マルを式ＩＩＩおよびＩＶ（式中各場合のＲはＨである
）を有する成分化合物に分離し、次に上記で記載したよ
うに各分離化合物を処理することが可能である。

【００１２】同様に式ＶおよびＶＩの化合物の混合物を
グリセロルホルマルから触媒例えばＺｎＣｌ２　の存在
下酢酸無水物で直接後者を処理することによって生成す
ることが可能である。生成混合物はＨＰＬＣによってク
ロマトグラフィ処理することができる。分析ＨＰＬＣに
よって式Ｖの化合物だけを示している留分を高真空下で
濃縮し、次に上記で記載したように式ＶＩＩのジアセチ
ルグアニンと反応させて式ＶＩＩＩの化合物を生成し、
順次上記で記載したように式Ｉの化合物を生成する。他
方、式ＶおよびＶＩのアセチル中間体を各別々にまたは
混合物として、非極性溶媒中ハロゲン化水素で（ジクロ
ロメタン中塩化水素が好ましい）処理してさらに反応性
のハロゲン誘導体に転化することができ、末端Ａｃ　Ｏ
ＣＨ２　Ｏ−作用性をＸＣＨ２　Ｏ−〔式中Ｘはハロゲ
ン（塩素、臭素またはヨウ素）である〕に転換すること
ができる。これらのハロゲン化合物はベンゼン、トルエ
ン、アセトニトリルまたはジメチルホルムアミドのよう
な非極性または二極性溶媒中例えば米国特許第４，１９
９，５７４号の文献に記載されているようなトリエチル
アミンまたは粉末炭酸カルシウムの存在下または不在下
で保護グアニン〔パー（トリメチルシリル）グアニンま
たはジアセチルグアニンが二つの好ましい誘導体である
〕とともにアルキル化反応で用いることができる。

【００１３】主として式ＶＩの化合物を含有するクロマ
トグラフィ留分をＨＰＬＣで再クロマトグラフィ処理し
、十分な純度の留分を混合し、高真空下で濃縮し、次に
上記で記載したように式ＶＩＩのジアセチルグアニンと
反応させて式ＩＸの化合物を生成し、順次上記で記載し
たように式ＩＩの化合物に転化する。

【００１４】前述の方法の説明はアシル基がアセチルで
ある化合物に特に好適であったが、一方アシル基が同様
に飽和またはモノーまたはポリ不飽和および所望により
アリール、置換アリール、ヘテロシクリル、アラルキル
、アルコキシアルキルまたはアリールオキシアルキル基
で置換することができる約２０個以下の炭素原子を有す
る直鎖または分枝鎖アルカノイル基であることができる
ことは理解されるべきである。

【００１５】アシル誘導体は好適には例えばピリジン−
ジメチルホルムアミドのような適当な併用溶媒の存在下
ＩまたはＩＩの化合物を適当なアシルハライド、酸無水
物または他の活性化アシル化合物と反応させることによ
って製造する。４−ジメチルアミノピリジンが有効な触
媒である。他の活性化アシル化合物は酸を例えば１，１
′−カルボニルイミダゾール、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキ
シルカルボジイミドのような適当な活性化剤と反応させ
てあるいは公知の方法によるＮ−ヒドロキシスクシンイ
ミドまたは１−ヒドロキシベンゾトリゾールのアシル化
によって製造することができる。

【００１６】アシクログアノシン、９−（２−ヒドロキ
シメチル）グアニンに比べて本発明の化合物はさらに溶
解性であり、ウィルス性酵素によってさらに容易にホス
フォリル化しそしてアシクログアノシンより生体内で実
質的に活性が高い。本発明の化合物は抗ヘルペスウィル
ス作用を与えるのに有効な用量レベルで個々にまたは組
合わせて哺乳類または鳥類に抗ウィルス性化合物として
使用することができる。典型的にはかかるレベルは約０
．０１〜２００ｍｇ／ｋｇ／日である。本発明の化合物
は経口的に、局所的にまたは注射による投与に対して受
け入れられた医薬実施に従って処方することができる。 適当な経口用量形態は錠剤、カプセル剤、エリキシル剤
または散剤であり、一方例えばリン酸緩衝食塩水または
水中の液剤または懸濁液剤が注射に適当である。適当な
局方処方の具体例はゲル、軟膏、液剤または懸濁液剤で
ある。

【００１７】本発明の化合物のアシル誘導体（Ｃ１−２
０）は抗マイコプラズマ作用を有し、豚および鶏のこの
疾病の治療または予防に有用である。次の実施例は本発
明を具体的に説明するものであるが、それらに限定され
るものではない。温度はすべて℃で表わす。

【００１８】実施例１ ９−（２，３−ジヒドロキシ−１−プロポキシメチル）
グアニンＡ．アセトキシメチル２，３−ジアセトキシ−
１−プロピルエーテル 式ＩＩＩおよび式ＩＶの化合物の混合物を含有するグリ
セロルホルマル１７．１ｍｌ（２０．８ｇ、２００ミリ
モル）の撹拌混合液に酢酸無水物６０ｍｌ、氷酢酸６．
７ｍｌおよび無水ＺｎＣｌ２　　　２．０ｇを添加した
。混合液をＮ２　雰囲気下包囲温度で撹拌した。すぐに
ＺｎＣｌ２　が溶解し、２．３分で溶液の色が薄黄色に
変化しながら強い発熱反応があった。１時間後発熱反応
が軽減し、薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）（１：１お
よび２：１ヘキサン−エチルアセテート）が明白に完全
なそしてきれいな反応を示した。４．５時間後、溶液を
高真空で濃縮した。残留油をジエチルエーテル７００ｍ
ｌに取り飽和ＮａＨＣＯ３　溶液２×１００ｍｌ次にＨ
２　Ｏ１００ｍｌで洗浄した。エーテル溶液をＭｇＳＯ
４　で乾燥し、木炭で脱色し濾過する。濾液を高真空で
濃縮して無色の残留物４５．８ｇ（９２％）を生成する
。分析ＨＰＬＣ（７：３ヘキサン−エチルアセテート）
は式ＶおよびＶＩの二つの生成物異性体だけを示した。 この生成物異性体の塊（４４．５ｇ）を各１１〜１１．
５ｇの４つのバッチでＨＰＬＣに委ねた。作業はすべて
シリカゲル（二つのＷａｔｅｒｓ　　Ｐｒｅｐ−５００
パック）、再循環（３サイクル）させながら７：３ヘキ
サン−酢酸エチル（１分当り２５０ｍｌ流動速度）およ
び再留分指数検出を用いる同一条件下で行なった。留分
を各作業に対して同一場所でカットし、種々の作業から
の留分を収集しながら混合した。ピークの澄明な分離は
再留分指数痕跡量に観察されなかった。式Ｖの純粋な化
合物として分析ＨＰＬＣによって同定された留分（さら
に短い保持時間）を集め高真空で濃縮してＮＭＲ（ＣＤ
Ｃｌ３　）がアセトキシメチル２，３−ジアセトキ−１
−プロピルエーテルに一致する無色の残留油１７．０ｇ
を生成した。

【００１９】Ｂ．２−アセタシド−９−（２，３−ジア
セトキシ−１−プロポキシメチル）ヒポキサンチンジア
セチルグアニン（ＶＩＩ）２．６１ｇ（１１．１ミリモ
ル）、上記段階Ａからのアセトキシ−１−プロピルエー
テル５．５０ｇ（２２．２ミリモル）およびエタンスル
ホン酸５５ｍｇを低真空下油浴中１５５〜１６０℃で蒸
留アダプターを備えたフラスコ中で加熱した。混合液を
漸次磁気撹拌させるのに十分に希釈して蒸留物を収集し
た。混合液は約４５分後均質になり７５分後冷却した。 粘性油を酢酸エチル約１００ｍｌに取り、ほとんど白色
の結晶の収量１．２３ｇ（２９％）、ｍ．ｐ．１６２．
５〜１６５°で結晶化するために誘導した。薄層クロマ
トグラフィ（ＴＬＣ）（９：１　　ＣＨＣｌ３　−ＣＨ
３　ＯＨ）はシングルスポットを示した。

【００２０】Ｃ．９−（２，３−ジヒドロキシ−１−プ
ロポキシメチル）グアニン 上記段階Ｂからの２−アセタミド−９−（２，３−ジア
セトキシ−１−プロポキシメチル）ヒポキサンチン（Ｖ
ＩＩＩ）１．１４ｇ（３．０ミリモル）の溶液をＮ２　
下撹拌しながら４０％水性メチルアミン中還流で１時間
加熱し次いで冷却した。ＴＬＣ（８０：２０：２ＣＨＣ
ｌ３　−ＣＨ３　ＯＨ−Ｈ２　Ｏ）はタイトルの化合物
（Ｉ）へ完全な軟化を示した。薄橙色溶液を木炭で処理
しスーパーセルで濾過した。濾液を濃縮して固体を生成
し、Ｈ２　Ｏ（２．３滴のＣＨ３　ＣＯＯＨで約ｐＨ６
に調節した）で再結晶してクリーム色の結晶、ｍｐ２４
６〜２４７°分解、６８７ｍｇを生成した。

【００２１】実施例２ ９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）
グアニンＡ．アセトキシメチル１，３−ジアセトキシ−
２−プロピルエーテル高真空下で乾燥した後、式ＶＩ（
さらに長い保持時間）の含有量の高い実施例の１の段階
Ａからの留分を混合して残留油９．７１ｇを生成し上記
で記載したのと同一条件下でＨＰＬＣに委ねた。分析Ｈ
ＰＬＣで定量された十分な純度の式ＶＩの化合物を含有
する留分を混合し高真空下で濃縮してほとんど無色の残
留油５．１０ｇを生成した。分析ＨＰＬＣは式Ｖの化合
物に対する式ＶＩの化合物の比ピークの高さに基づいて
約１５：１を示した。ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３　）はこの異
性体比と一致し、アセトキシメチル１，３−ジアセトキ
シ−２−プロピルエーテルとしてこの化合物の固定と一
致した。

【００２２】Ｂ．２−アセタミド−９−（１，３−ジア
セトキシ−２−プロポキシメチル）ヒポキサンチン蒸留
アダプターを備えたフラスコ中ジアセチルグアニン（Ｖ
ＩＩ）３．７６ｇ（１６ミリモル）、アセトキシメチル
１，３−ジアセトキシ−２−プロピルエーテル（ＶＩ）
４．９６ｇ（２０ミリモル）、エタンスルホン酸４０ｍ
ｇおよびトリグリム１５ｍｌの混合液を油浴中低真空下
１５５〜１６０°で加熱した。混合液を漸次撹拌するの
に十分希釈し、澄明な蒸留液を徐々に収集した。反応混
合液は約７５分後澄明な溶液になった。３時間後溶液を
冷却し、生成物を結晶化に誘導した。放置した後、濃厚
な混合液を少量の１，２−ジメトキシエタンで希釈した
。 固体を濾過で集め少量の１，２−ジメトキシエタンで次
に酢酸エチルで洗浄してＴＬＣ（９：１　　ＣＨＣｌ３
　−ＭｅＯＨ）で定量された９および７−アルキル化異
性体の混合物からなるクリーム色の結晶３．２７ｇを生
成した。（９−異性体はこの系で７−異性体よりさらに
緩慢に作業する。）母液はさらに０．６５ｇの物質を生
成した。混合した生成物（３．９２ｇをシリカゲルカラ
ムで２回クロマトグラフィ処理（９７：３および次に９
６：４ＣＨ２　Ｃｌ２　−ＭｅＯＨで溶離）した。ほと
んど純粋な９−アルキル化異性体を含有する留分を混合
し、濃縮した。最少量の１，２−ジメトキシエタンで残
渣を結晶化して第一生成物６６５ｍｇ（白色結晶、ｍｐ
１７１．５〜１７２．５°）および第二生成物１８９ｍ
ｇ（ｍｐ１７３〜１７３．５°）を生成した。初期のバ
ッチと比較してＴＬＣで定量される純粋な９−アルキル
化生成物からなる生成物は両方ともＮＭＲおよび元素分
析で十分に特徴付けられた。

【００２３】Ｃ．９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プ
ロポキシメチル）グアニン ４０％メチルアミン（水性）８．５ｍｌ中２−アセタミ
ド−９−（１，３−ジアセトキシ−２−プロポキシメチ
ル）ヒポキサンチン８３８ｍｇ（２．２ミリモル）溶液
をＮ２　下緩かな還流で１時間撹拌した。次いで溶液を
冷却し、濃縮乾固した。残渣の白色固体を酢酸２滴を含
有する最少量Ｈ２　Ｏで再結晶した。冷蔵庫に放置した
後、生成物を濾過器で集め少量のＨ２　Ｏ、次にアセト
ンで洗浄した。 材料を高真空下７５°で３時間乾燥して白色結晶５２９
ｍｇ（０．７５Ｈ２　Ｏとの水和に基づいて９０％）ｍ
ｐ２４９〜２５０°分解を生成した。物質はＴＬＣ（８
０：２０：２（ＣＨＣｌ３　−ＭｅＯＨ−Ｈ２　Ｏ）に
より均質であり、構造はＮＭＲによって確認された。

【００２４】実施例３ アセトキシメチル１，３−ジアセトキシ−２−プロピル
エーテル Ａ．１，３−ジオキサン−５−イルアセテートおよび１
，３−ジオキソラン−４−メチルアセテートグリセロル
ホルマル１０．０ｇ（９６ミリモル）、ピリジン８．３
５ｇ（１０５ミリモル）および酢酸無水物２０ｍｌを湿
気から保護した包囲温度で撹拌した。２，３分から５日
の後、溶液を真空下で分別蒸留した。最初の留分は主と
してピリジン、酢酸および酢酸無水物からなる。生成物
塊を５６〜５７°（１．１ｍｍ）で蒸留した。生成物留
分（１０．８ｇ）を再循環させながら３：１ヘキサン−
酢酸エチル中シリカゲルで分取用ＨＰＬＣによって５−
および６−員環異性体に分離した。留分を同定し、分析
ＨＰＬＣによって純度をチェックした。全体で１，３−
ジオキソラン−４−酢酸メチル（より短い保持時間）３
．１９ｇ（２３％）および１，３−ジオキサン−５−イ
ルアセテート（より長い保持時間）５．２３ｇ（３７％
）を得た。構造はＮＭＲで確認した。

【００２５】Ｂ．アセトキシメチル１，３−ジアセトキ
シ−２−プロピルエーテル 酢酸無水物１２ｍｌおよび氷酢酸１．４ｍｌの混合物液
中１，３−ジオキソラン−４−メチルアセテート６．０
ｇ（４１ミリモル）および塩化亜鉛０．４ｇの溶液をＮ
２　下包囲温度で撹拌した。発熱が起り、１時間後ＴＬ
Ｃ（２：１ヘキサン−酢酸エチル）は完全な反応を示し
た。溶液を高真空下濃縮した。生成した液体をエーテル
に溶解し、ＮａＨＣＯ３　飽和溶液で次にＨ２　Ｏで十
分に洗浄した。エーテル層をＭｇＳＯ４　で乾燥し、濾
過しそして濃縮して式ＶＩの化合物（多量の）および式
Ｖの化合物（少量の）の混合物からなる残留油８．６８
ｇを生成した。この物質を同一バッチからの３．５０ｇ
と混和した。粗生成物１２．１８ｇの全部を再循環しな
がらヘキサン−酢酸エチル７：３中シリカゲルで分取用
ＨＰＬＣによって精製した。留分を分析ＨＰＬＣで純度
をチェックした。良好な留分を混和し濃縮して構造ＶＩ
を有する化合物５．８４ｇ（≧９０％純度）を生成した
。構造および純度をＮＭＲで確認した。

【００２６】実施例４ ブロモメチル１，３−ジアセトキシ−２−プロピルエー
テル アセトキシメチル１，３−ジアセトキシ−２−プロピル
エーテル（２５０ｍｇ、１ミリモル）を臭化水素ガスで
前飽和させたジクロロメタンに０°で溶解させた。混合
液を湿気から防ぎ、０℃で２時間撹拌し次いで過剰の臭
化水素をへらしながら包囲温度に暖めておいた。３時間
後溶媒をアスピレーター真空下除去した。蒸発残渣をジ
クロロメタンの２×１０ｍｌ定分部で連続して処理し、
アスピレーター真空下蒸発させた。最後に残留油を臭化
水素の強い臭気がもはや明白でなくなるまで高真空下で
乾燥した。生成した物質を直接アルキル化反応に用いる
ことができた。ＣＤＣｌ３　溶液のプロトン磁気共鳴ス
ペクトルはＡｃＯＣＨ２　からＢｒＣＨ２　Ｏまでの変
化を表わす適当な低磁場（ｄｏｗｎｆｉｅｌｄ）シフト
を示した。

【００２７】実施例５ クロロメチル１，３−ジアセトキシ−２−プロピルエー
テル 塩化メチレン４５ｍｌ中アセトキシメチル１，３−ジア
セトキシ−２−プロピルエーテル４．３４ｇ（１７．５
ミリモル）溶液を室温でＨＣｌの緩かな流れが通過する
ように撹拌した。２時間後ＨＣｌ流れを除去した。フラ
スコに栓をし、室温で一晩撹拌しておいた。次にフラス
コを２５〜３０°で水浴中に置き、溶液をＮ２　の流れ
でパージし、過剰のＨＣｌのほとんどを除去した。残存
する溶液を回転蒸発によって濃縮した。ＨＣｌの痕跡量
を除去するために残留油をトルエンに取り、高真空下室
温で濃縮した。この方法を３回以上繰り返した。室温で
真空乾燥後無色の残留油の収量は３．８３ｇ（９７％）
であった。 ＮＭＲスペクトルは生成物に完全に転化したことを示し
た。

【００２８】実施例６ ２−アセタミド−９−（１，３−ジアセトキシ−２−プ
ロポキシメチル）ヒポキサンチン グアニン２．５７ｇ（１８ミリモル）、硫酸アンモニウ
ム１．８ｇおよびヘキサメチルジシラザン１２６ｍｌの
混合液をＮ２　下還流で撹拌した。固体を徐々に溶解し
た。２日後溶液を冷却し、高真空下で濃縮した。粘性の
残留油を乾燥トルエン約２８ｍｌに溶解し、Ｎ２　下で
維持して乾燥トルエン１２ｍｌ中クロロメチル−１，３
−ジアセトキシ−２−プロピルエーテル５ｇ（２２．３
ミリモル）溶液を添加した。生成溶液をＮ２　下還流で
１．５時間加熱した。 次いで冷却し、濃縮し、真空下で乾燥した。粘性の橙色
残留油を水３０ｍｌおよび重炭酸ナトリウム飽和溶液３
０ｍｌで処理した。混合液を蒸気浴上で５分間暖めなが
ら振盪し、その間に残渣が凝固した。冷却後固体をフィ
ルターで収集し、少量の水で洗浄した。このクリーム色
の固体（４．６ｇ）はＴＬＣ（８０：２０：２ＣＨＣｌ
３　−ＭｅＯＨ−Ｈ２　Ｏ）でシングルスポットを示し
たが、ＮＭＲは７−アルキル化異性体１０〜１５％さら
に所望の９−異性体を含有することを示した。物質を他
の作業からの同様の物質０．６ｇと混和し、酢酸無水物
１８４ｍｌに懸濁させた。混合液を９７°で１８時間加
熱し、その時間によって固体のほとんどすべてが溶解し
、そしてＴＬＣが完全なアセチル化を示した。反応を冷
却し、真空下で濃縮した。塩化メチレン２００ｍｌで残
渣を処理して固体を生成し、濾過によって分離し、塩化
メチレンで１回洗浄した。塩化メチレンで再結晶して純
粋な９−異性体０．５５ｇを生成した。濾液をシリカゲ
ル４０ｇを含有するカラムを通過させた。ＣＨ２　Ｃｌ
２　−ＭｅＯＨで溶離して部分精製した生成物４．５ｇ
を生成した。塩化メチレン（約４５ｍｌ）で再結晶させ
て純粋な９−異性体３．０ｇを得た。

【００２９】実施例７ ９−（１，３−ジアセトキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン グアニン５０．０ｇ（０．３３モル）、硫酸アンモニウ
ム３３ｇおよびヘキサメチルジシラザン２．２リットル
の混合液をＮ２　下還流で３日間撹拌し、その間に固体
の全部を溶解した。次いで溶媒を減圧下蒸留で除去した
。極めて粘性の橙色の残留油をＮ２　下アセトキシメチ
ル１，３−ジアセトキシ−２−プロピルエーテル８４ｇ
（０．３４モル）を添加し、フラスコの底に第二液相を
生成した。フラスコは蒸留アダプターを備えており、混
合液を低真空下油浴中で約１３５°に加熱した。数分続
く誘導期間の後沸騰が始まり、まもなくかなり激しくな
る。トリメチルシリルアセテート（あらゆる残渣のヘキ
サメチルジシラザンとともに）の蒸留は最初急速に進行
するが３０分後におそくなった。２時間後混合液を９０
％ＥｔＯＨ１．３リットルに添加した。混合液を沸騰す
るまで加熱し、分離したゴム様物質が扱いやすい固体に
変形するまで維持した。固体（ほとんど独占的にグアニ
ンからなる８．２ｇ）を熱しながら濾過によって除去し
た。濾液を一晩放置し、橙褐色ゴムを分離した。上澄を
ゴムから傾瀉し、濾過し次に少量に濃縮した。濃縮時に
分離した固体をフィルターに集め、Ｈ２　Ｏで次にＥｔ
ＯＨで洗浄してクリーム色の結晶１５．４ｇを生成した
。ＴＬＣは部分側鎖脱アセチル化を示したがＮＭＲによ
ってこの物質は単独で９−アルキル化異性体であった。 物質はさらに精製せずに脱保護に適当であった。母液お
よび傾瀉によって除去したゴムをさらに処理してさらに
９−および７−アルキル化異性体（部分的に脱アセチル
化された）の変化比からなる生成物を生成した。これら
の純度の低い生成物はクロマトグラフィ精製（シリカゲ
ル・ＣＨ２　Ｃｌ２　−ＭｅＯＨで溶離）に先立って十
分にアセチル誘導体（０，０′，Ｎ２　−トリアセチル
）に転化することが好ましい。典型的なアセチル化条件
は粗グアニン誘導体１０ｇおよび酢酸無水物４００ｍｌ
の混合液を９５〜１００°で一晩撹拌することからなり
、次に濃縮およびクロマトグラフィ処理した。

【００３０】実施例８ ９−（１，３−ジアセトキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン ９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン１水和物２０５ｍｇ（０．７５ミリモル）酢酸
無水物１．５ｍｌ、乾燥ジメチルホルムアミド６ｍｌお
よび乾燥ピリジン１．５ｍｌの混合液を室温下乾燥管で
４日間撹拌した。次に混合液をＥｔ２　Ｏ　　１５ｍｌ
で希釈した。固体をフィルターで集め、Ｅｔ２　Ｏで洗
浄した。２−メトキシエタノールで再結晶した後、無色
の結晶＝１４９ｍｇ（５９％）ｍ．ｐ．２３９〜２４０
°を生成した。物質はＴＬＣ（９：１　　ＣＨＣｌ３　
−ＭｅＯＨ）で均質であり、ＮＭＲは指定した構造を確
認した。 分析（Ｃ１３Ｈ１７Ｎ５　Ｏ６　） 計算値：Ｃ４６．０１，Ｈ５．０５，Ｎ２０．６４測定
値：Ｃ４５．７１，Ｈ５．０４，Ｎ２０．３６

【００３
１】実施例９ ９−（１，３−ジプロピオニルオキシ−２−プロポキシ
メチル）グアニン ９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）
グアニン１水和物２０５ｍｇ（０．７５ミリモル）、プ
ロピオン酸無水物１．５ｍｌ、乾燥ジメチルホルムアミ
ド６ｍｌおよび乾燥ピリジン１．５ｍｌの混合液を室温
において乾燥管で撹拌した。４日後混合液をエーテル２
５ｍｌで希釈した。固体をフィルターで集め、エーテル
で洗浄した。イソプロパノールで再結晶して白色結晶、
ｍ．ｐ．１９６〜１９７．５℃　　１３６ｍｇ（５０％
）を生成した。物質はＴＬＣ（９：１　　ＣＨＣｌ３　
−ＭｅＯＨ）でシングルスポットとして進行し構造をＮ
ＭＲによって確認した。分析（Ｃ１５Ｈ２１Ｎ５　Ｏ６
　） 計算値：Ｃ４９．０４，Ｈ５．７６，Ｎ１９．０７測定
値：Ｃ４８．９６，Ｈ５．８３，Ｎ１９．２６

【００３
２】実施例１０ ９−（１−ヒドロキシ−３−オクタノイルオキシ−２−
プロポキシメチル）グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド６ｍｌおよび乾燥ピリジン１
．５ｍｌ中９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキ
シメチル）グアニン１水和物４１０ｍｇ（１．５ミリモ
ル）の懸濁液を氷浴中で冷却しながら乾燥管で撹拌し、
ジメチルホルムアミド１．５ｍｌ中オクタノイルクロラ
イド４８９ｍｇ（３．０ミリモル）溶液を約５分にわた
って注射器で滴加した。混合液を室温に徐々に暖めてお
き、２４時間後高真空下で濃縮した。残留油を９枚の１
０００−μシリカゲルプレート（ＣＨＣｌ３　−ＭｅＯ
Ｈ５：１で展開）で分取用ＴＬＣによって精製した。生
成物バンドを分離し、混合し、ジメチルホルムアミドで
抽出した。高真空下で抽出液を濃縮し、ゴム様残渣を生
成した。イソプロパノールで結晶化して物質を生成し、
再びフィルターでゴム様にした。しかしながらエーテル
で十分研和して微薄黄色結晶１０５ｍｇ（１８％）、ｍ
．ｐ．２０１．５〜２０３．５°を生成した。

【００３３】実施例１１ ９−（１，３−ジオクタノイルオキシ−２−プロポキシ
メチル）グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド２．８ｍｌおよび乾燥ピリジ
ン０．７ｍｌ中９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロ
ポキシメチル）グアニン（水和物１３７ｍｇ（０．５モ
ル）の懸濁液を室温で撹拌し、オクタノイルクロライド
２４４ｍｇ（１．５ミリモル）を添加した。添加を緩か
な発熱によって達成し、澄明溶液を得た。オクタノイル
クロライドをさらに８２ｍｇ（０．５ミリモル）を３．
５時間後添加した。最後に２１時間後、溶液を高真空下
で濃縮した。残渣を塩化メチレン５ｍｌおよび水５ｍｌ
に分配した。塩化メチレン相を硫酸マグネシウムで乾燥
し、濾過し、濃縮して薄黄色の残留油を生成し、放置の
際凝固した。この物質を５枚の２０００−μシリカゲル
プレート（ＣＨＣｌ３　−ＭｅＯＨ　　１２：１で展開
）で分取用ＴＬＣで精製した。生成物バンドを分離し、
メタノールで抽出した。抽出液を濃縮して得た残渣をエ
ーテル中に取り濾過した。濾液を蒸発して次に高真空で
乾燥して薄黄橙色の光沢のある残渣１６２ｍｇ（６４％
）を生成した。純度および構造をＴＬＣ（ＣＨＣｌ３　
−ＭｅＯＨ　　１２：１）、ＮＭＲおよび質量スペクト
ルで確認した。この化合物は用量レベル８７５μｇ／１
羽で全身に投与した場合鶏のひなのマイコプラズマ増殖
を７５％阻害した。

【００３４】実施例１２ ナトリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキ
シメチル）グアニン環状モノホスフェート無水トリエチ
ルホスフェート６０ｍｌ中オキシ塩化リン３．６ｇ（２
．２ｍｌ、２３．６ミリモル）溶液中無水９−（１，３
−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン５．
９１ｇ（２３．２ミリモル）懸濁液を室温で５時間撹拌
した。非常に清澄化した混合液を濾過し、濾液を撹拌ヘ
キサン６００ｍｌに注入した。約５分後上澄ヘキサンを
沈殿生成物から傾瀉し、残渣をヘキサンの第二６００ｍ
ｌ部と加熱した。上澄ヘキサンを傾瀉し、残渣を真空内
で乾燥した後、固体生成物１５．９ｇを得た。固体を脱
イオン水８００ｍｌに十分に溶解し、濁った混合液を５
Ｎ水酸化カリウム、次に１Ｎ水酸化カリウムでｐＨ７に
滴定した。 中和した混合液を濾過し、濾液を凍結乾燥して生成物９
．２５ｇを生成した。凍結乾燥残渣の試料を０．０５Ｍ
　　ｐＨ６．６リン酸塩緩衝液溶離を有するホワットマ
ンパーティシルＴＭＰＸＳ　　１０／２５ＳＡＸイオン
交換カラムを用いて高性能液体クロマトグラフィによっ
て分析した。 生成物は約４分、７分および９分の保持時間で３本のピ
ークを示した。ナトリウムおよびカリウム９−（１，３
−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン環式
および非環式モノホスフェートの確実な試料を本特許出
願のこのおよび他の実施例で開示したように分離し上記
の系の高性能液体クロマトグラフィに委ねた後、環式モ
ノホスフェートを約４分の保持時間でそして非環式ホス
フェートを約７分の保持時間で結合した。カリウム塩の
凍結乾燥混合液を脱イオン水１リットルに溶解し、ひだ
付の濾紙で濾過した。濾液を重炭酸塩循環で２００〜４
００メッシュバイオラドＡＧ１−Ｘ８アニオン交換樹脂
４６０ｍｌの４〜５ｃｍ直径カラムに徐々に通過させた
。次に０．０５Ｍおよび０．５Ｍ重炭酸カリウム２リッ
トルを含有する勾配溶離容器から０．０５〜０．５Ｍ重
炭酸カリウムの勾配にカラムを通して注入し、留分約２
０ｍｌを８分間隔で収集した。留分１９リットルで溶離
剤を０．５Ｍ重炭酸カリウムに変え、試料２０〜２５ｍ
ｌを６．８分間隔で収集した。溶離パターンを２５２ｎ
ｍにおける紫外線吸収によって監視し、種々の溶離ピー
クの特定の成分留分をさらに０．０５ＭｐＨ６．６リン
酸塩溶離を用いるホワットマンパーティシルＴＭＰＸＳ
　　１０／２５ＳＡＸイオン交換カラムの高性能液体ク
ロマトグラフィによって特徴付けた。これらのデータに
基づいて特定の留分を混和し、次の通り生成した。

【００３５】上記の高性能液体クロマトグラフィ系にお
いて保持時間約５分でシングルピークによって特徴付け
られる留分４５０〜５４０（１６８０ｍｌ）を混和し、
酸循環で２００〜４００メッシュバイオラドＡＧ５０Ｗ
−Ｘ８カチオン交換樹脂６００ｍｌ（１０２０ミリ当量
）で処理した。撹拌混合液を適度の真空下保持して濾過
する前に二酸化炭素を除去した。混合液を濾過し樹脂を
少量の脱イオン水で洗浄した。混和した濾液を真空内で
約３５°で１５ｍｌに濃縮し、沈殿生成物を遊離の酸の
形で濾過によって分離し、真空内で乾燥して９−（１，
３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン環
状モノホスフェート４４５ｍｇを生成した。生成物は偏
光の顕微鏡により結晶性であり、２５２ｎｍ（　　１０
６００，０．１Ｍ　　ｐＨ７リン酸塩中）で最大紫外線
吸収を示し、放出された構造に従って十分に核磁気共鳴
スペクトルを示した。母液を濃縮して遊離酸形態の生成
物をさらに４６ｍｇを生成した。母液をｐＨ７に滴定し
次に凍結乾燥してナトリウム９−（１，３−ジヒドロキ
シ−２−プロポキシメチル）グアニン環状モノホスフェ
ート１９６ｍｇを生成した。後者の化合物は時々少量の
水溶性無機塩で汚染され、排除クロマトグラフィによっ
てまたはギ酸塩サイクルでバイオラドＡＧ１−Ｘ８アニ
オン交換樹脂のイオン交換クロマトグラフィによって精
製することができる。

【００３６】純粋なナトリウム塩もまた次の通り結晶性
遊離酸の滴定によって得ることができる。結晶性９−（
１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニ
ン環式モノホスフェート２１３ｍｇの懸濁液を１Ｎ水酸
化ナトリウムでｐＨ７に滴定し、凍結乾燥してナトリウ
ム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル
）グアニン環式モノホスフェート２２７ｍｇを生成した
。この生成物の乾燥した試料は２５２ｎｍで（０．１Ｍ
　　ｐＨ７ホスフェート中１１８００）紫外線吸収最大
を有した。Ｄ２　Ｏ中環状生成物の２００ＭＨｚ　　Ｎ
ＭＲスペクトルはモノホスフォリル化で低磁場へシフト
した２当量メチレンからのシグナルによって特徴付けら
れる。スペクトルを次のケミカルシフトによって特徴付
けられる。 δ３．９４　　Ｃ−ＨＣ（Ｏ）−Ｃ　　　　　　ｍ　　
１Ｈ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　（ＪＨ，Ｈ　　ｇｅｍ
　　　　１２．５Ｈｚ）δ４．２５　　Ｐ−Ｏ−ＣＨ　
　ｅｑ　　ｄ，ｄ，ｄ　２Ｈ（ＪＰ−ＯＣＨ　　ｅｑ　
　　　１９．５Ｈｚ）　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（Ｊ
Ｈ，Ｈ　　ｖｉｃ　　ｅｑ　　２．２Ｈｚ）　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　（ＪＨ，Ｈ　　ｇｅｍ　　　　１２．
５Ｈｚ）δ４．３９　　Ｐ−Ｏ−ＣＨａｘ　　　　ｄ，
ｄ，ｄ　２Ｈ（ＪＰ−ＯＣＨ　　ａｘ　　　　５．０Ｈ
ｚ）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　（ＪＨ，Ｈ　　ｖｉｃ
　　ｅｑ　　１．８Ｈｚ）δ５．６４　　Ｎ−ＣＨ２　
Ｏ　　　　　　　　ｓ　　２Ｈδ７．９９　　Ｃ８　−
Ｈ　　　　　　　　　　　　ｓ　　１Ｈさらに構造の確
認はシフトの予測したパターンがＣ−ＨＣ（Ｏ）−Ｃ　
　　　　　プロトンの照射でＰ−Ｏ−ＣＨ２　基に実現
する時得られる。１０〜１０００ｍＭ非緩衝ＫＨ２　Ｐ
Ｏ４　の勾配を用いるヴァリアンＡＸ−１０高性能液体
クロマトグラフィアニオン交換カラムにおいて環状生成
物は保持時間４．３分を有するが、酵素的に誘導された
非環式モノホスフェートは保持時間４．８分を有する。 二つの混合物が上記の系のＨＰＬＣに委ねられる時非環
式酵系性誘導モノホスフェートから合成環式モノホスフ
ェートをはっきりと分離することができる。

【００３７】他方、環式モノホスフェートのナトリウム
またはカリウム塩を結晶性遊離酸の分離をせずにバイオ
ライドＡＧ１−Ｘ８重炭酸塩溶出留分から分離すること
ができる。０．５Ｍ　　ＫＨＣＯ３　約８００ｍｌに達
する留分の組合わせを酸循環の２００〜４００メッシュ
ＡＧ５０Ｗ−Ｘ８カチオン交換樹脂３２５ｍｌ（５５２
ミリモル）で処理した。撹拌混合液を適度の真空下１５
分間維持して二酸化炭素を除去しそして濾過した。濾液
を約１００ｍｌ容量に濃縮し、次に１Ｎ水酸化ナトリウ
ムでｐＨ７に滴定した。生成溶液を凍結乾燥して少量の
水溶性無機塩で汚染された環状リン酸塩のナトリウム塩
５２９ｍｇを生成した。

【００３８】生成物を脱塩するためナトリウム塩２００
ｍｇを脱イオン水１．５ｍｌに溶解し、ギ酸塩循環でバ
イオラド２００〜４００メッシュＡＧ１−Ｘ８アニオン
交換樹脂６ｍｌの１．５ｃｍ直径カラム装填した。脱イ
オン水約３５ｍｌをカラムに通過させた後２Ｎギ酸アン
モニウム溶液で溶離を開始した。３．５ｍｌ容量の留分
を３分間隔で集め、各留分の２５０ｎｍにおける紫外線
吸収を測定して管番号に対してプロットした。上記のプ
ロットで得られた曲線の形に基づいて留分１３〜２８を
混和し、２００〜４００メッシュバイオライドＡＧ５０
Ｗ−Ｘ８カチオン交換樹脂１２０ｍｌ（２０４ミリ当量
）の２〜３ｃｍ直径カラムに装填した。カラムを水で溶
離し、留分１３．５ｍｌを４．５分間隔で収集した。溶
離パターンを紫外線吸収によって２５２ｎｍで監視し、
プロットに基づいて留分２２〜４０を混和し、濃縮乾固
した。残渣を脱イオン水１０ｍｌに取り、０．１Ｎ　　
ＮａＯＨでｐＨ７に滴定した。中和した溶液を凍結乾燥
してナトリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロ
ポキシメチル）グアニン環式モノホスフェート１０６ｍ
ｇを生成した。

【００３９】実施例１３ 二ナトリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニン非環式モノホスフェート製造１ 対応する環式モノホスフェートを生成するためにオキシ
塩化リンでの９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニンのホスフォリル化において粗縮合
生成物をバイオライドＡＧ１−Ｘ８（ＣＯ３　＝　）の
イオン交換クロマトグラフィによって精製した。環状モ
ノホスフェートの製造の実施例で記載したように０．５
Ｍ重炭酸カリウムで溶離する過程で留分２４５〜２４８
からなる別のピークを分離し、対応する非環式化合物二
カリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ
メチル）グアニン非環式モノホスフェートを含有するこ
とを見出した。パーティシルＴＭＰＸＳ　　１０／２５
ＳＡＸ高性能液体クロマトグラフィカラムおよび０．０
５Ｍ　　ｐＨ６．６リン酸塩緩衝液での溶離を用いてこ
のピークは保持時間約５および８分を有する物質を含有
した。確実な非環式モノホスフェートを同一系の保持時
間７〜８分と結合した。１０〜４００ｍＭ非緩衝ＫＨ２
　ＰＯ４　で勾配溶離を用いるヴァリアンＡｘ−１０高
性能液体クロマトグラフィアニオン交換カラムでのこの
混和留分の分析は物質の約４０％が二カリウム９−（１
，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン
非環式モノホスフェートであることを示した。

【００４０】製造２ ５Ｎ水酸化ナトリウム４ｍｌ中ナトリウム９−（１，３
−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニン環式
モノホスフェート４４．５ｍｇ溶液を５５〜６０℃で窒
素下で８時間加熱した。反応混合液を脱イオン水で１２
ｍｌ容量に希釈し、スルホン酸循環のパイオライドＡＧ
５０Ｗ−Ｘ８カチオン交換樹脂の３０ｍｌ（直径２ｃｍ
×長さ１２ｃｍ）カラムにゆっくりと通過させた。カラ
ムを脱イオン水で溶離し、留分５ｍｌを４分間隔で収集
した。留分６０を収集した後、留分１２ｍｌを４分毎に
集めた。種々の留分を２５２ｎｍにおける紫外線吸収に
よっておよび０．０５ＭｐＨ６．６リン酸塩緩衝溶離を
用いるパーティシャルＴＭＰＸＳ　　１０／２５ＳＡＸ
アニオン交換カラムの高性能液体クロマトグラフィによ
っても評価した。独占的に約７．５分の保持時間を有す
る物質からなる留分４５〜６４を混和し、０．１Ｎ水酸
化ナトリウムでｐＨ７に滴定し、次に凍結乾燥して二ナ
トリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ
メチル）グアニン非環式モノホスフェート３０ｍｇを生
成した。酸化デューテリウム中生成物の２００ＭＨｚ核
磁気スペクトルは非環式モノホスフェート構造と完全に
一致する。分析Ｃ９　Ｈ１２Ｎ５　Ｏ７　ＰＮａ２　（
３７９．１９）に対する計算値、Ｎ１８．４７，Ｃ２８
．５１，Ｈ３．１９，Ｐ８．１７，Ｎａ１２．１３，測
定値，Ｎ１８．０７，Ｃ２８．６７，Ｈ３．３６，Ｐ８
．５１，Ｎａ１１．９０．（原子吸収による）。λｍａ
ｘ　２５２ｎｍ，ε９６００（０．１Ｍ　　ｐＨ７リン
酸塩）

【００４１】実施例１４ ９−〔１，３−ビス（フェノキシアセトキシ）−２−プ
ロポキシメチル〕グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド４ｍｌおよび乾燥ピリジン１
．４ｍｌ中９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキ
シメチル）グアニン１水和物２７３ｍｇ（１．０ミリモ
ル）の懸濁液を氷浴で冷却しながら窒素下で撹拌し、ジ
メチルホルムアミド１．６ｍｇ中フェノキシアセチルク
ロライド５５２μｌ（６８２ｍｇ、４ミリモル）溶液を
１０分間にわたって隔膜を通して注射器で滴加した。氷
が融解した後混合液を室温に徐々に暖めておいた。薄黄
色溶液を得た。１５時間後溶液を高真空下緩かに暖めな
がら濃縮した。金色の残留油をシリカゲルカラム（勾配
溶離ＣＨ２　Ｃｌ２　−ＭｅＯＨ９８：２〜ＣＨ２　Ｃ
ｌ２　−ＭｅＯＨ９２：８）でクロマトグラフィ処理し
た。ほとんど純粋な生成物を含有する留分を混和し、濃
縮して油を生成し、エーテル−アセトンで研和した際凝
固した。少量のアセトニトリルで再結晶して白色結晶１
１４ｍｇ、ｍ．ｐ．１１４〜１１６°を生成した。構造
および純度をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ３　−Ｍｅ
ＯＨ）によって確認した。第二生成物６６ｍｇを母液か
ら得た。分析（Ｃ２５Ｈ２５Ｎ５　Ｏ８　）Ｃ２５Ｈ２
５Ｎ５　Ｏ８　・Ｈ２　Ｏ　　９３．５％＋無機　６．
　５％に対する 計算値：Ｃ５１．８４，Ｈ４．７０，Ｎ１２．０９測定
値：　　Ｃ５１．９４，　　Ｈ４．７４，　　Ｎ１１．
９９

【００４２】実施例１５ ９−（２，３−ジベンゾイルオキシ−１−プロポキシメ
チル）グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド４ｍｌおよび乾燥ピリジン１
．４ｍｌ中水化９−（２，３−ジヒドロキシ−１−プロ
ポキシメチル）グアニン（１ミリモル）の懸濁液を窒素
下氷浴で攪拌し、ジメチルホルムアミド１．６ｍｌ中塩
化ベンゾイル（４ミリモル）溶液を滴加した。混合液を
室温に徐々に暖めておいた。一晩攪拌した後溶液を高真
空で濃縮した。残渣をシリカゲル（ＣＨ２　Ｃｌ２　−
ＭｅＯＨで溶離）でクロマトグラフイ処理して生成物を
得た。構造および純度をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ
３　−ＭｅＯＨ　　９：１）で確認した。

【００４３】実施例１６ ９−（１，３−ジイソバレリルオキシ−２−プロポキシ
メチル）グアニン 乾燥ジメチルホルムアミド４ｍｌおよび乾燥ピリジン１
．４ｍｌ中水化９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロ
ポキシメチル）グアニン（１ミリモル）の懸濁液を氷浴
で窒素下攪拌し、ジメチルホルムアミド１．６ｍｌ中イ
ソバレリルクロライド（４ミリモル）溶液を滴加した。 室温に徐々に暖めた後混合液を一晩攪拌した。生成溶液
を緩かに暖めながら高真空下で蒸発させた。シリカゲル
（ＣＨ２　Ｃｌ２　−ＭｅＯＨで溶離）で残渣をクロマ
トグラフイ処理して生成物を生成した。構造および純度
をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ３　−ＭｅＯＨ　　９
：１）で確認した。

【００４４】実施例１７ ９−〔１，３−ビス（フエニルアセトキシ）−２−プロ
ポキシメチル〕グアニン ９−〔１，３−ビス（フエノキシアセトキシ）−２−プ
ロポキシメチル〕グアニン（実施例１４）に用いた操作
に従って９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ
メチル）グアニン（１ミリモル）をフエニルアセチルク
ロライド（４ミリモル）と反応させて化合物を製造した
。クロマトグラフイ処理した後ＮＭＲおよびＴＬＣ（Ｃ
ＨＣｌ３　−ＭｅＯＨ　　９：１）によって生成物を特
徴付けた。

【００４５】実施例１８ ９−〔１，３−ビス（１０−ウンデセノイルオキシ）−
２−プロポキシメチル〕グアニン ９−〔１，３−ビス（フエノキシアセトキシ）２−プロ
ポキシメチル〕グアニン（実施例１４）に用いた方法に
従って水化９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキ
シメチル）グアニン（１ミリモル）を１０−ウンデセノ
イルクロライド（４ミリモル）と反応させて化合物を製
造した。クロマトグラフイ処理後生成物を得た。構造お
よび純度をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ３　−ＭｅＯ
Ｈ９：１）によって確認した。

【００４６】実施例１９ ９−〔１，３−ビス（メトキシアセトキシ）−２−プロ
ポキシメチル〕グアニン ９−〔１，３−ビス（フエノキシアセトキシ）−２−プ
ロポキシメチル〕グアニン（実施例１４）に用いた方法
に従って水化９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニン（１ミリモル）をメトキシアセチ
ルクロライド（４ミリモル）と反応させて、クロマトグ
ラフイ処理後所望の生成物を生成した。構造および純度
の確認をＮＭＲおよびＴＬＣ（ＣＨＣｌ３　−ＭｅＯＨ
　　９：１）によって得た。

【００４７】実施例２０ ９−〔１，３−ビス（イミダゾール−１−イルカルボニ
ルオキシ）−２−プロポキシメチル〕−グアニン９−（
１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グアニ
ン１水和物５５ｍｇ（０．２ミリモル）、１，１′−カ
ルボニルジイミダゾール１３０ｍｇ（０．８ミリモル）
および乾燥ジメチルホルムアミド２ｍｌを窒素下９５〜
１００°で１．５時間攪拌し、その時に澄明溶液を得次
に生成物を沈殿させた。冷却後沈殿をフイルターで集め
、ジメチルホルムアミドで次にアセトンで洗浄して白色
結晶、ｍ．ｐ．２５２〜２５３°分解、３７ｍｇを生成
した。ＮＭＲスペクトルは指定された構造と一致した。 分析（Ｃ１７Ｈ１７Ｎ９　Ｏ６　） 計算値：　　Ｃ４６．０５，　　Ｈ３．８７，　　Ｎ２
８．４３測定値：　　Ｃ４５．６８，　　Ｈ３．９０，
　　Ｎ２８．１８

【００４８】実施例２１ ２５℃におけるｐＨ７．２緩衝液の比較溶解度約０．１
５モルリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．２）中に過剰量の化合
物を懸濁させ水浴に２５℃で一晩振盪させて飽和溶液を
生成することによって溶解度を定量した。濾過した溶液
中の化合物濃度を分光測光測定即ち飽和溶液に対するλ
ｍａｘ　における紫外線吸光度と公知の化合物濃度に対
して観察された吸光度値との比較に基づいて計算した。 結果は次の通り要約された。 　　　　　　化合物　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　溶解度（ｍ
ｇ／ｍｌ）━━━━━━━━━━　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　━━━━━━━━━
━アシクログアノシン　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．３〜１．
５式Ｉの化合物　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
３．　６式ＩＩの化合物　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　２．　８

【００４９】実施例２２ ヘルペスウイルス誘発チミジンキナーゼによる式Ｉおよ
び式ＩＩの化合物およびアシクログアノシンのホスフオ
リル化５０％ジメチルスルホキサイド（ＤＭＳＯ）３０
μｌに溶解した式Ｉの化合物３０μｇを５０ｍＭトリス
−ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ７．５，２．５ｍＭアデノシント
リホスフエート、２．５ｍＭ塩化マグネシウム、７．５
ｍＭホスフオクレアチン、クレアチンキナーゼ２単位、
２ｍＭジチオスレイトール、２．５ｍＭフツ化ナトリウ
ム、牛の血清アルブミンおよびチミジンキナーゼ０．０
０１４単位と最終容量１５０μｌで３時間培養し、ＣＨ
ＥＮＧ　＆　ＯＳＴＲＮＤＥＲの方法（ジヤーナルオブ
バイオロジカルケミストリ，１９７６年、第２５１巻、
第２６０５頁）によって感染後８時間取り入れた重複度
１０（１細胞につき１０ウイルス粒子）でウイルス感染
ＨｅＬａ細胞（ＨＳＶＩウイルス）から分離した。両方
とも５０％ＤＭＳＯ中の一つが式ＩＩの化合物３０μｇ
および他がアシクログアノシン３０μｇを含有する二つ
の類似の混合液を同様に処理した。５０％ＤＭＳＯ３０
μｌだけを含有し抗ウイルス化合物のないほかは上記と
類似の４番目の混合液もまたコントロールとして同様に
処理した。３時間の培養期間の終りに各混合液の１０μ
ｌ試料をＡｘ−１０カラムおよびリン酸カリウム（ＫＨ
２　ＰＯ４　）勾配溶離（０．０１〜１．０Ｍ）を用い
るＨＰＬＣによって分析した。各抗ウイルス化合物のモ
ノホスフエート誘導体の量を各クロマトグラフイピーク
の面積の総和によって評価した。結果はアシクログアノ
シン１６％がモノホスフエート誘導体に転化する一方式
Ｉの化合物９０％および式ＩＩの化合物９５％が同一条
件下で各モノホスフエートに転化することを示した。そ
こで培養混合液の残りにグアノシンモノホスフエートキ
ナーゼ０．０４単位およびＨＳＶ１−感染ＨｅＬａ細胞
の抽出物２０μｌ〔細胞は重複度１０でウイルスに感染
し８時間後に取り入れた。それらを０．３５Ｍ　　ＫＨ
２　ＰＯ４　，ｐＨ７．５，０．５ｍＭジチオスレイト
ール、０．２％ポリオキシエチレン（９）オクチルフエ
ノール（ノニデットＰ−４０），１４％グリセロール５
０ｍｇ／ｍｌ溶液に懸濁させ４°で３０分後１００．０
００ｇで遠心分離した。上澄液は粗生成物であった。〕
を添加した。培養を３０°で４時間以上続け、その後Ｈ
ＰＬＣで分析し、各化合物のトリホスフエート誘導体量
を各々クロマトグラフイピークの面積の総和によって定
量した。結果は式Ｉの化合物５５％および式ＩＩの化合
物９３％が各々トリホスフエート誘導体に転化するのに
比較されるようにアシクログアノシン３０％がこれらの
条件下でトリホスフエートに転化したことを示した。ホ
スフオリル化がこれらの化合物の抗ウイルス作用に対す
る前要件であると推定されることから式Ｉおよび式ＩＩ
の化合物のモノホスフエートおよびトリホスフエート誘
導体へのホスフオリル化のより高い割合がアシクログア
ノシンにまさるかなりの改良を示す。

【００５０】実施例２３ 式ＩＩの化合物の非環式モノホスフエートの酵素調製式
ＩＩの化合物（２５ｍｇ）をｐＨ６．５の５０ｍＭリン
酸カリウム緩衝液、牛の血清アルブミン、１ｍｇ／ｍｌ
、アデノシントリホスフエート、５ｍＭ、塩化マグネシ
ウム、５ｍＭ，ジチオスレイトール、１ｍＭ，ホスフオ
クレアチン、１ｍＭ，クレアチンキナーゼ、１２．５単
位／ｍｌ、フツ化ナトリウム、２．５ｍＭおよび精度Ｈ
ＳＶ１−誘導チミジンキナーゼ５００単位を全容量１０
ｍｌで含有する混合液で３７°で培養した。反応の進行
を高性能液体クロマトグラフイ（ＨＰＬＣ）によって監
視した。化合物ＩＩの３５％がモノホスフエートに転化
した時、反応を終結した。生成物を分取用アニオン交換
カラム（ＡＸ−１０，ヴアリアン）のＨＰＬＣクロマト
グラフイで精製し、溶離溶媒としてトリエチルアンモニ
ウムカーボネツトｐＨ７．６を有するジエチルアミノエ
チルセルロース（ＤＥＡＥ）のクロマトグラフイによっ
て脱塩した。生成物を含有するプールした留分から溶媒
を凍結乾燥して式ＩＩモノホスフエートの化合物８ｍｇ
を生成し、その純度を分析ＨＰＬＣによって確認した。

【００５１】実施例２４ 式ＩＩの化合物のジホスフエートの酵素調製式ＩＩの化
合物（２０ｍｇ）をｐＨ６．５の５０ｍＭリン酸塩緩衝
液、牛の血清アルブミン１ｍｇ／ｍｌ、アデノシンホス
フエート５ｍＭ，塩化マグネシウム５ｍＭ，ジチオスレ
イトール１ｍＭ，ホスフオクレアチン１ｍＭ，クレアチ
ンキナーゼ１２．５単位／ｍｌ，フツ化ナトリウム２．
５ｍＭ，精製ＨＳＶ１誘導チミジンキナーゼ５００単位
および豚の脳からのグアノシンモノホスフエートキナー
ゼ１００μｇを含有する１０ｍｌ混合液中３７°で培養
した。反応の進行を高性能液体クロマトグラフイ（ＨＰ
ＬＣ）で監視した。培養を３７°で４時間および３７°
で２０時間続けた。ピロホスフエート生成物を分取用ア
ニオン交換カラム（ＡＸ−１０ヴアリアン）のＨＰＬＣ
クロマトグラフイで精製し、溶離剤としてトリエチルア
ンモニウムカーボネットｐＨ７．６を有するジエチルア
ミノエチルセルロース（ＤＥＡＥ）のクロマトグラフイ
によって脱塩した。生成物を含有するプールした留分か
ら凍結乾燥して式ＩＩジホスフエート化合物１０ｍｇを
生成し、その純度を分析ＨＰＬＣによって確認した。

【００５２】実施例２５ 式ＩＩの化合物のジホスフエートの線状トリホスフエー
トへの酵素転化 実施例２３でのように調製した式ＩＩの化合物のジホス
フエート（５ｍｇ）をトリス−アセテート緩衝液、ｐＨ
７．６，５０ｍＭ，塩化マグネシウム，３ｍＭ，エチレ
ンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）１ｍＭ，リン酸カリウム
ｐＨ７．５，３０ｍＭ，ビルベート５ｍＭ，グリセラル
デヒドホスフエート，３０ｍＭ，乳酸脱水素酵素１５０
μｇ，グリセラルデヒドホスフエート脱水素酵素，１５
０μｇ，３−ホスフオグリセレートキナーゼ，１５０μ
ｇおよびニコチンアミドアデニンジスクレオチド（ＮＡ
Ｄ＋　）１５ｍＭを含有する５ｍｌ混合液中３７°で培
養した。反応の進行を高性能液体クロマトグラフイ（Ｈ
ＰＬＣ）によって監視した。培養を３７°で４時間およ
び３０°で２０時間続けた。生成物をアニオン交換カラ
ム（ＡＸ−１０，ヴアリアン）のＨＰＬＣクロマトグラ
フイで分離し溶離溶媒としてトリエチルアンモニウムカ
ーボネートｐＨ７．６を有するジエチルアミノエチルセ
ルロース（ＤＥＡＥ）のクロマトグラフイによって脱塩
した。生成物を含有するプールした留分を凍結乾燥して
式ＩＩの化合物のトリホスフエート４ｍｇを生成し、そ
の純度を分析ＨＰＬＣによって確認した。

【００５３】実施例２６ 式ＩＩの化合物のトリホスフエートの酵素調製式ＩＩの
化合物（２０ｍｇ）をトリス−ＨＣｌ，ｐＨ７．５，５
０ｍＭ，塩化マグネシウム２．５ｍＭ，アデノシン−５
′−トリホスフエート，２．５ｍＭ，牛の血清アルブミ
ン５００ｍｇ／ｍｌ，ジチオスレイトール２ｍＭ，ホス
フオクレアチン７ｍＭ，クレアチンキナーゼ１２．５単
位／ｍｌ，フツ化ナトリウム２．５ｍＭ，ＨＳＶ１−誘
導チミジンキナーゼ、４００単位およびグアノシンモノ
ホスフエートキナーゼ８０μｇを含有する１０ｍｌ混合
液中３７°で培養した。培養を３７°で４時間および３
０°で２０時間続けた。反応の進行を分析高性能液体ク
ロマトグラフイによって監視した。生成物を分取用アニ
オン交換カラム（ＡＸ−１０，ヴアリアン）のＨＰＬＣ
クロマトグラフイによって分離し次に分析カラム（ゾル
バツクス−ＮＨ２　）で再クロマトグラフイ処理して汚
染ＡＴＰを除去した。生成物を溶離剤としてトリエチル
アンモニウムカーボネツトｐＨ７．６を有するジエチル
アミノエチルセルロース（ＤＥＡＥ）でクロマトグラフ
イ処理することによって脱塩した。生成物を含有するプ
ールした留分を凍結乾燥して式ＩＩの化合物のトリホス
フエート誘導体１５ｍｇを生成し、その純度を分析ＨＰ
ＬＣによって確認した。

【００５４】実施例２７ ウイルス・誘発チミジンキナーゼによるホスフオリル化
に対するチミジンおよびアシクログアノシンまたは式Ｉ
Ｉの化合物間の競争 （１）　　　５０％ＤＭＳＯ２０μｌの溶解したアシク
ログアノシン２０μｇを８０ｍＭトリス−ＨＣｌ，ｐＨ
７．５，４ｍＭアデノシントリホスフエート，４ｍＭ塩
化マグネシウム，１．７ｍＭジチオスレイトール、１２
．５ｍＭホスフオクレアチン，５．０ｍＭフツ化ナトリ
ウム，１００μｇ牛の血清アルブミン、クレアチンキナ
ーゼ２．５単位およびＨＳＶ１−感染ＨｅＬａ細胞から
分離した（実施例２２のように）チミジンキナーゼ０．
００６単位を有する全量１２０μｌ（０．７５ｍＭ）で
培養した。培養を３７°で２時間実施し、次に３０°で
１８時間続けた。 （２）　　　ＮＯ．　１の混合液と同一の成分と２．５
ｍＭチミジンを含有する第２混合液を同様の方法で培養
した。 （３）　　　アシクログアノシンを式ＩＩの化合物２０
μｇで置き換えたほかはＮＯ．　１の混合液と同一の成
分を含有する第３混合液を同様の方法で培養した。 （４）　　　ＮＯ．　３の混合液と同一の成分と２．５
ｍＭチミジンを含有する第４混合液を同様の方法で培養
した。培養の終りに対応するモノホスフエート誘導体に
転化した各抗ウイルス化合物量をＨＰＬＣ分析後クロマ
トグラフイピークの面積の総和によって定量した（実施
例２２でのようなカラムおよび溶離条件）。４種の混合
液での培養の終りに存在するモノホスフエートの％は次
の通りである。 混合液ＮＯ．　　　　　　　　　　　存在する化合物　
　　　　　　　　　　　　　　　　　モノホスフエート
％━━━━━━　　━━━━━━━━━━━━━━━━
━　　━━━━━━━━━━　　　　１　　　　　　　
　アシクログアノシン　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　２７　　　　２　　　　　　　
　アシクログアノシン　　＆　　チミジン　　　　　　
　　　　　　　　０　　　　３　　　　　　　　式ＩＩ
の化合物　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　９３　　　　４　　　　　　　
　式ＩＩの化合物　　＆　　チミジン　　　　　　　　
　　　　　　　　　　２３結果は式ＩＩの化合物がかな
り過剰のチミジンの存在下でさえウイルスチミジンキナ
ーゼによってオフフオリル化されるがアシクログアノシ
ンは同一条件下で全くホスフオリル化されなかったこと
を示した。ホフフオリル化がこれらの化合物の抗ウイル
ス作用に前要件であり、チミジンが細胞の正常な成分で
あることから式ＩＩの化合物はアシクログアノシンにま
さる有効な改良を表わす。

【００５５】実施例２８ アシクログアノシンおよび式ＩＩの化合物と精製ウイル
スチミジンキナーゼとの比較 ｐＨ６．５の２２μモルＫＰＯ４　緩衝液、０．３μモ
ルＭｇＣｌ２　，アデノシントリホスフエート０．５μ
モル、牛の血清アルブミン１００μｇ，ＨＳＶ１−誘導
チミジンキナーゼ２０単位および式ＩＩの化合物または
グアニン環の８位に放射性炭素（１４Ｃ）で標示された
アシクログアノシンの変化量の全量１００μｌに含有す
る一連の混合液を３７°で１５分間培養した。この時間
の終りに各管からの８０μｌ試料をジエチルアミノエチ
ルセルロース（ホワツトマンＤＥ８１）の円形濾紙（直
径２．５ｃｍ）に塗布した。５分後水の入ったビーカー
に入れ水で１回、０．５ｍＭグアノシンを含有する５０
％エタノールで２回そして無水エタノールで１回連続的
に洗浄した。次にシンチレーシヨンヴアイアルに置き、
空気の流れで乾燥しシンチレーシヨン混合液（アクアゾ
ル２，ニユーイングランドスクレア）を添加した後シン
チレーシヨンカウンターで数えた。この操作によってホ
スフオリル化合物を洗い流し、ＤＥ８１フイルターにホ
スフオリル化誘導体だけが密着した。従ってカウントさ
れた放射能は基質、式ＩＩの化合物またはアシクログア
ノシンのウイルスチミジンキナーゼの作用によるホスフ
オリル化誘導体への転化の程度であった。背景放射能に
対する適当なコントロールは検定に包含され、結果を訂
正するために用いた。培養時間の終りに各検定管に存在
するホスフオリル化誘導体のモル数を各フイルターおよ
び検定混合液の各基質の特異活性（１モルにつき１分当
りの数）に対して測定した放射能のカウント数から計算
した。データを基質濃度に対する反応速度のグラフにプ
ロットした。第１図は実際の実験データに良好に適合す
るコンピユーター発生理論曲線のグラフである。基質と
してチミジンでの同様の実験で得た曲線を比較のため第
１図に包含する。二つの基質に対する運動パラメーター
を同一データから計算した。上記で記載したように３種
の別の実験を平均することによって得た値は次の通りで
あった。 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　式ＩＩの化合物　　　　　　アシクログアノ
シン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━Ｋ
ｍ（μＭ）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　６６　　　　　　　　　　　　　　　　４２６Ｖｍ
ａｘ　（Ｐモル／分）　　　　　　　　　　　　２８０
　　　　　　　　　　　　　　　　　　６１Ｖｍａｘ　
／Ｋｍ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　４．２５　　　　　　　　　　　　　　０．１４Ｖ
ｍａｘ　／Ｋｍ比は基質効率を比較するために最も普通
に用いられる基準であるがＨＳＶ１−誘発チミジンキナ
ーゼに対する基質として式ＩＩの化合物およびアシクロ
グアノシンの相対効率は４．２５〜０．１４または３０
〜１である。

【００５６】実施例２９ アシクログアノシンおよび式ＩＩの化合物と精製グアノ
シンモノホスフエートキナーゼとの運動パラメーターの
比較 ｐＨ７．６のトリス−アセテート緩衝液７０μモル、Ｋ
Ｃｌ　　７０μモル，ＭｇＣｌ２　７μモル、ＡＴＰ２
．８μモル、ホスフオエノールピルビート１．０５μモ
ル、牛の血清アルブミン１７５μｇ，還元ニコチンアミ
ド−アデニンジスクレオチド（ＮＡＤＨ）０．１５μモ
ル、乳酸脱水素酵素３単位、ピルべートキナーゼ１．５
単位およびアシクログアノシンモノホスフエートまたは
式ＩＩの化合物のモノホスフエートの変化量を全量で７
００μｌを含有する一連の混合液を豚の脳（ポーエリン
ガーマンハイム）からのグアノシンモノホスフエートキ
ナーゼとともに３４０ｎｍで吸光度を記録するカリイ分
光度計のセルで２５°において培養した。この結合した
分光測光検定においてモノホスフエート基質の対応する
ジホスフエートのホスフオイル化の割合をＮＡＤＨの３
４０ｎｍにおける吸光度の減少から計算した。アシクロ
グアノシンモノホスフエートと式ＩＩモノホスフエート
の化合物よりキナーゼがかなり乏しい基質であるため、
式ＩＩモノホスフエートの化合物の場合（０．００５６
単位）よりもアシクログアノシンモノホスフエートの場
合（０．２８単位）に多くの酵素を使用した。上記の実
験で得た開始速度を次の表で示される二つの基質の運動
パラメーターを計算するために用いた。デオキシグアノ
シンモノホスフエートに対して同様の実験で得たパラメ
ーターを比較のため包含した。 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　式ＩＩ
の化合物　　　　　　アシクログア　　　　　　デオキ
シグア　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
モノホスフエ　　　　　　ノシンモノホ　　　　　　ノ
シンモノホ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　ート　　　　　　　　　　　　　　スフエート　　
　　　　　　スフエート　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　━━━━━━━　　　　━━━━━━━━
　　　　━━━━━━Ｋｍ（μＭ）　　　　　　　　　
　　　　　２２　　　　　　　　　　３１６　　　　　
　　　　　　　　　１２４Ｖｍａｘ　（μｇ／分／ｍｇ
）　　　　　　７．１　　　　　　　　　　　　０．２
０　　　　　　　　　　　　１７．２Ｖｍａｘ　／Ｋｍ
　　　　　　　　　　　　　　　　０．３１　　　　　
　　　　　０．０００６５　　　　　　　　０．１４各
ジホスフエートへ転化する酵素の基質として式ＩＩモノ
ホスフエートの化合物およびアシクログアノシンモノホ
スフエートの相対効率は０．３２／０．０００６５また
は４９２〜１であった。

【００５７】実施例３０ 式Ｉの化合物の非環式モノホスフエートの酵素調製式Ｉ
の化合物（１ｍｇ）をｐＨ６．５の５０ｍＭリン酸カリ
ウム緩衝液、牛の血清アルブミン１ｍｇ／ｍｌ，アデノ
シントリホスフエート５ｍＭ、塩化マグネシウム５ｍＭ
，ジチオスレイトール１ｍＭ，ホスフオクレアチン１ｍ
Ｍ，クレアチンキナーゼ１２．５単位／ｍｌ，フツ化ナ
トリウム２．５ｍＭおよび精製ＨＳＶ１−誘発チミジン
キナーゼを含有する全量０．５ｍｌの混合液中３７°で
培養した。反応の進行を高性能液体クロマトグラフイ（
ＨＰＬＣ）で監視した。式Ｉの化合物がモノホスフエー
トに転化した時、反応が終結した。生成物を分取用アニ
オン交換カラム（ＡＸ−１０，ヴアリアン）のＨＰＬＣ
クロマトグラフイで精製し、溶離溶媒としてトリエチル
アンモニウムカーボネートｐＨ７．６を有するジエチル
アミノエチルセルロース（ＤＥＡＥ）のクロマトグラフ
イによって脱塩した。生成物を含有するプールした留分
からの溶媒を凍結乾燥して化合物Ｉモノホスフエート５
００μｇを生成し、その純度を分析ＨＰＬＣで確認した
。

【００５８】実施例３１ 試験管内細胞培養におけるウイルス感染の処理数種の異
なるウイルス感染を防御するのに有効な式Ｉ，式ＩＩの
化合物またはアシクログアニジンの最小濃度を定量する
ために種々の細胞培養系において検定を行なった。 ａ．単純ヘルペスウイルス１および２型：ウイルスの１
０組織培養感染服用量（ＴＣＩＤ５０）に感染したウサ
ギの腎臓細胞単層の５０％のウイルス細胞変性の展開を
全体に抑制するために必要とされる式Ｉ式ＩＩまたはア
シログアノシンの化合物を添付の表に示す。３種の化合
物すべてが匹敵する活性を示した。 ｂ．水痘−帯状疱疹ウイルス：式ＩＩの化合物およびア
シクログアノシンの両方ともヒトの胎児の二倍体肺細胞
，ＭＲＣ−５の単層を用いるプラク減少検定によって定
量したようにこのヘルペスウイルスに対して同様に活性
であった。結果を添付の表に示す。 ｃ．エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）：ＥＢＶ−
感染臍帯細胞（Ｂリンパ球）を感染時から式ＩＩの化合
物１〜５μｇ／ｍｌで連続処理して正常リンパ球の連続
増殖リンパ球細胞への転換阻害を生じた。反対に同様の
活性を示すためにアシクログアノシン１０〜１００μｇ
／ｍｌを必要とした。 ｄ．サイトメガロウイルス：式ＩＩの化合物は０．１〜
０．６μｇ／ｍｌを用いるＭＲＣ−５細胞単層のサイト
メガロウイルスプラク生成を抑制するのに有効であった
。アシクログアノシンを用いて等価プラク抑制（５０％
）を得るために２，２−１７．７μｇ／ｍｌを必要とし
た。アシクログアノシン（９５％（Ｉ）に対する式ＩＩ
の化合物の計算された平均相対効力は２８．６であった
。結果を添付の表に示す。組織培養においてヘルペスウ
イルスに対して活性な式Ｉ，式ＩＩまたはアシクログア
ノシンの最小濃度　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　最小有効
濃度（μｇ／ｍｌ）　　ウイルス　　　　　　　　　　
　　　　　　━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　式Ｉ　　　　　　　　式ＩＩ　　　　
　　アシクログアノシン━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━単純ヘル
ペス１型　　　　　　　　　　　　１−３ａ　　　　　
１−３ａ　　　　　　　　　１−３ａ　（スクラー菌株
） 単純ヘルペス１型　　　　　　　　　　　　ＮＤ　　　
　　　　　１−３ａ　　　　　　　　　ＮＤ（Ｓ菌株） 単純ヘルペス１型　　　　　　　　　　　　ＮＤ　　　
　　　　　　　　　３ａ　　　　　　　　　ＮＤ（マキ
ンスタイル菌株） 単純ヘルペス１型　　　　　　　　　　　　ＮＤ　　　
　　　　　１−３ａ　　　　　　　　　ＮＤ（マツクラ
エ菌株） 単純ヘルペス２型　　　　　　　　　　　　３−６ａ　
　　　　１−３ａ　　　　　　　　　１−３ａ　（カー
チス菌株） ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━水痘−帯状疱疹　　　　　　　　
　　　　　　ＮＤ　　　　　　　　１−２ｂ　　　　　
　　　　１−２ｂ　（ＫＭｃＣ菌株） ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━エプスタイン−バー　　　　　　
　　　　ＮＤ　　　　　　　　１−５ａ　　　　　　　
　　１０−１００ｃ　（Ｂａ５−８） ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━サイトメガロウイルス　　　　　
　　　ＮＤ　　　　　　　　０．１　−０．６　ｄ　　
　　　２．２　−１７．７ｄ　　 （タウン菌株） ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━ＮＤ−未実施 ａ　　−初代ウサギの腎臓細胞培養の管希釈検定ｂ　　
−ヒトのＭＲＣ−５細胞単層のプラク減少検定ｃ　　−
ヒトの臍帯リンパ球転換検定 ｄ　　−ヒトのＭＲＣ−５細胞単層のプラク減少検定

【
００５９】実施例３２ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染治療２０ｇＩ
ＣＲ／Ｈａマウスに単純ヘルペスウイルスＩ型（ＨＳＶ
−１）スクーラー菌株の保存製剤　　１０−５希釈０．
５ｍｌを腹腔内（ｉｐ）に注射した。このウイルス攻撃
を約１００ＬＤ５０で各動物に感染させた。ウイルス感
染後直ちに開始し毎日２回４日間続け各動物にアシクロ
グアノシン５００μｇ，１２５μｇまたは３１μｇ，式
Ｉの化合物５００μｇ，１２５μｇ，または３１μｇ，
式ＩＩの化合物５００μｇ，１２５μｇまたは３１μｇ
またはプラセボー（生理食塩水，ｐＨ１１．５）を１５
のグループに皮下注射した。プラセボーグループは４５
匹の動物から構成された。化合物はすべて生理食塩水ｐ
Ｈ１１．５に溶解した。マウスを１５日間毎日同じ時間
に観察し、死亡の日を各動物に対して記録した。統計的
分析（参照：リデル，Ｆ．Ｄ．Ｋ．１９７８年，Ｅｖａ
ｌｕｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｉｎ　Ｃｈａ
ｌｌｅｎｇｅ　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，　Ｍｉｃｒｏ
ｂｉｏｌ．　Ｒｅｖ．　第４２巻，第２３７〜２４９頁
）を負の指数転換によって転換される生存時間によって
行なった。 ｆ（ｔ）＝１−（０．１）ｔ／Ｔ　 式中ｔ＝動物が生存した日数　　Ｔ＝試験期間（１５日
）連続補正を毎日の観察を説明するために用いた。 ｆｃ（ｔ）＝１／２〔ｆ（ｔ）＋ｆ（ｔ−１）〕各グル
ープの中で試験期間を通じて生存するマウスを０．９お
よび１．０の数値を同様に指定して試験の停止を調節し
た。１グループ当り平均生存時間を次の通り平均補正転
換生存時間〔ｆｃ（ｔ）〕から計算した。 　　　　　　　　　　ｔ平均＝〔Ｔ／ｌｏｇ　（０．１
）〕．〔ｌｏｇ　（１−ｆｃ（ｔ）〕要約した結果を次
の表に示す。 ─────────────────────────
──────────　　化学薬剤　　　　　　　　　
　　　　　　　　　動物治療　　　　　　　　　　　　
生存％＊　　　　　平均生存　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　μｇ／服用量　　ｍｇ／ｋｇ／日
　　　　　　　　　　　　　　　　時間（日）────
─────────────────────────
──────アシクログアノシン　　　　　　５００　
　　　　　　　　　５０　　　　　　　　　　　　０　
　　　　　　　　　７．７　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　１２５　　　　　　　　　　
１２．５　　　　　　　　　　６　　　　　　　　　　
６．２　＊＊　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　３１　　　　　　　　　　　３．１　　　
　　　　　　　６　　　　　　　　　　６．４　＊＊式
Ｉの化合物　　　　　　　　　　　　５００　　　　　
　　　　　５０　　　　　　　　　　　６０　　　　　
　　　　１１．８　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　１２５　　　　　　　　　　１２．５
　　　　　　　　　２６　　　　　　　　　　９．０　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
３１　　　　　　　　　　　３．１　　　　　　　　　
　０　　　　　　　　　　６．３　＊＊式ＩＩの化合物
　　　　　　　　　　　　５００　　　　　　　　　　
５０　　　　　　　　　　１００　　　　　　　　　１
９．１　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　１２５　　　　　　　　　　１２．５　　　　　
　　　　７３　　　　　　　　　１４．１　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３１　　　
　　　　　　　　３．１　　　　　　　　　５３　　　
　　　　　　１２．５　プラセボー　　　　　　　　　
　　　　　　　０．１　ｍｌ　　　　　　−　　　　　
　　　　　　６　　　　　　　　　　６．２　────
─────────────────────────
──────＊　　　　１５日目に定量した ＊＊　　プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならな
い数値（Ｐ＜０．０５）

【００６０】実施例３３ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染の治療各動物
にアシクログアノシン１０００μｇ，５００μｇまたは
１２５μｇ，式Ｉの化合物５００μｇ，１２５μｇまた
は３１μｇ，式ＩＩの化合物５００μｇ，１２５μｇ，
３１μｇ，８μｇまたは２μｇまたはプラセボーを１５
のグループに毎日２回皮下注射した以外は実施例３２に
記載した実験を繰り返した。１０００μｇ服用量アシク
ログアノシン治療グループおよび式ＩＩの化合物の５０
０μｇ服用量治療グループは各１０匹の動物で構成され
た。要約した結果を次の表に示す。 ─────────────────────────
──────────　　化学薬剤　　　　　　　　　
　　　　　　　　　動物治療　　　　　　　　　　　　
生存　　　　　　　　平均生存　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　μｇ／服用量　　ｍｇ／ｋｇ／
日　　　　％＊　　　　　　　　　時間（日）────
─────────────────────────
──────アシクログアノシン　　　　　１０００　
　　　　　　　　１００　　　　　　　　　　　１０　
　　　　　　　　　７．８　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　５００　　　　　　　　　　
５０　　　　　　　　　　　　０　　　　　　　　　　
７．８　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　１２５　　　　　　　　　　１２．５　　　　　
　　　　　６　　　　　　　　　　７．０　＊＊式Ｉの
化合物　　　　　　　　　　　　５００　　　　　　　
　　　５０　　　　　　　　　　　３６　　　　　　　
　　１０．５　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　１２５　　　　　　　　　　１２．５　　
　　　　　　　３３　　　　　　　　　　９．８　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３１
　　　　　　　　　　　３．１　　　　　　　　　　６
　　　　　　　　　　７．２　＊＊式ＩＩの化合物　　
　　　　　　　　　　５００　　　　　　　　　　５０
　　　　　　　　　　１００　　　　　　　　　１９．
５　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　１２５　　　　　　　　　　１２．５　　　　　　　
　　９３　　　　　　　　　１７．２　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　３１　　　　　
　　　　　　３．１　　　　　　　　　４６　　　　　
　　　　１１．８　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　８　　　　　　　　　　　０．８
　　　　　　　　　４０　　　　　　　　　　９．８　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　２　　　　　　　　　　　０．２　　　　　　　　　
２６　　　　　　　　　　９．０　プラセボー　　　　
　　　　　　　　　　　　０．１　ｍｌ　　　　　　−
　　　　　　　　　　　０　　　　　　　　　　６．３
　────────────────────────
───────────＊　　　　１５日目に定量した ＊＊　　プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならな
い数値（Ｐ＜０．０５） 実施例３２および３３からの組合わせた結果を用いて式
Ｉの化合物および式ＩＩの化合物のアシクログアノシン
（９５％ＣＩ）に対する計算平均相対効力は各々９．２
および２８７．０であった。

【００６１】実施例３４ 次は単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ１）および２型
（ＨＳＶ２）に対するカリウム９−（１，３−ジヒドロ
キシ−２−プロポキシメチル）グアニン環状モノホスフ
エートの試験管内および生体内抗ウイルス作用の概要で
ある。 試験管内検定： 方法：　　　　ウサギの腎臓の初代細胞培養の融合単層
を試験化合物の系列希釈を含有する細胞維持培養液で再
供給し、３７°で一晩培養した。各希釈において４培養
を約１０　　ＴＣＩＤ５０　　ＨＳＶ１で攻撃し、４培
養を約１０　　ＴＣＩＤ５０　　ＨＳＶ２で攻撃しそし
て２培養を毒性コントロールとして残した。培養を３７
°で再培養し５日および７日目にウイルス誘発細胞変性
を観察した。 結果： 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　最小有効服用量（μｇ／ｍｌ）　　
化合物　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ＨＳＶ１　　　　　　ＨＳＶ２　　　　　　　　毒性━
━━━━━━━━━━━　　　　━━━━━━　　━━
━━━━　　　　━━━━━カリウム９−（１，３ジ ヒドロキシ−２−プロポ キシメチル）グアニン　　　　　　　　　　１２．５　
　　　　　　　　　５０　　　　　　１００で毒性環状
モノホスフエート　　　　　　　　　　２５　　　　　
　　　　　１００生体内検定： 方法：　　２０ｇＩＣＲ／Ｈａマウスに腹腔内経路でＨ
ＳＶ１（スクーラー菌株）の約１００致死量（１００Ｌ
Ｄ５０）を感染させた。１０匹の感染した動物のグルー
プにカリウム９−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポ
キシメチル）グアニン環状モノホスフエートの最終日用
量５０，１２．５，３．１，０．８，０．２，０．０５
および０．０１２５ｍｇ／ｋｇで皮下注射することによ
って感染後直ちに始めて４日間毎日２回治療した。マウ
スを１５日間同じ時間に毎日観察し、死亡の日を各動物
に対して記録した。平均生存時間（日）および１５日間
における生存％を添付の表に示す。 　　　　　　　　　　　　　　　　　　動物治療　　　
　　　　　　　生存％　　　　　　　　　　平均生存時
間（日）化合物　　　　　　　　　　　　ｍｇ／ｋｇ／
日　　　　実験１　　　　実験２　　　　実験１　　　
　実験２━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━カリウム９−（１，　　
５０　　　　　　　　　　１００　　　　　　　　ＮＤ
　　　　　　　１９．５　　　　　　　ＮＤ　３−ジヒ
ドロキシ　　　　１２．５　　　　　　　　１００　　
　　　　　　６０　　　　　　　１９．５　　　　　　
１５．０−２−プロポキシ　　　３．１　　　　　　　
　　２０　　　　　　　　５０　　　　　　　１０．７
＊　　　　　１１．５メチル）−グアニ　　　　　０．
８　　　　　　　　　４０　　　　　　　　　０　　　
　　　　１０．５＊　　　　　　７．４＊　ン環式モノ
ホスフ　　　　　０．２　　　　　　　　　７０　　　
　　　　　３０　　　　　　　１３．５　　　　　　　
８．３＊　エート　　　　　　　　　　　　　　　０．
０５　　　　　　　　ＮＤ　　　　　　　　　０　　　
　　　　　ＮＤ　　　　　　　　６．０＊　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　０．０１２５　　　
　　　ＮＤ　　　　　　　　１０　　　　　　　　ＮＤ
　　　　　　　　６．３＊　━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━プラ
セボー　　　　　　　　　　　０．１ｍｌ　　　　　　
　２０　　　　　　　　１０　　　　　　　７．８　　
　　　　　　６．４━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━＊　　プラセ
ボー治療動物のそれと統計的に異ならない数値（Ｐ＜０
．０５）生存時間に対して計算した。結論：カリウム９
−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシメチル）グ
アニン環式モノホスフエートは試験管内および生体内で
単純ヘルペスウイルスに対して有効な抗ウイルス作用を
示した。

【００６２】実施例３５ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染の治療：単純
ヘルペス１型腹腔内感染、経口治療ＩＣＲ／Ｈａマウス
を実施例３２で記載した通り感染させた。１０匹の感染
動物のグループを感染後直ちに始めるアシクログアノジ
ン１００，５０，１２，５，３，１または０．８ｍｇ／
ｋｇまたは式ＩＩの化合物５０，１２．５，３，１，０
．８または０．２ｍｇ／ｋｇの最終日用量の経口摂食に
よって７日間毎日２回治療した。さらに５匹の非感染動
物の２グループを最終日用量５０ｍｇ／ｋｇの経口摂食
によって７日間毎日２回アシクログアノシンまたは式Ｉ
Ｉの化合物で治療した。これらの動物を毒性コントロー
ルとして扱った。要約した結果を次の表に示す。マウス
の単純ヘルペスウイルスＩ型腹腔内感染の経口治療　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　動物治療　　　　　　　　　　　　　　　　生存　　
　　平均生存化学薬剤　　　　　　　　　　　　μｇ／
服用量　　ｍｇ／ｋｇ／日　　　　　　　　％＊　　　
　　時間（日）━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━アシクログアノ
シン　　　　１０００　　　　　　１００　　　　　　
　　　　６０　　　　１１．４　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　５００　　　　　　　　５
０　　　　　　　　　　２０　　　　　　８．２　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１２５　
　　　　　　　１２．５　　　　　　　　　　０　　　
　　　６．６＊＊　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　３１　　　　　　　　　　３．１　
　　　　　　　　　０　　　　　　６．３＊＊━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━式ＩＩの化合物　　　　　　　　　　　　
５００　　　　　　　　５０　　　　　　　　１００　
　　　１６．９　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　１２５　　　　　　　　１２．５　　　　
　　　　８０　　　　１３．９　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　３１　　　　　　　　
　　３．１　　　　　　　　５０　　　　１１．７　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　８　　　　　　　　　　０．８　　　　　　　　２０
　　　　　　８．５　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　２　　　　　　　　　　０．
２　　　　　　　　　　０　　　　　　６．８＊＊━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━プラセボー　　　　　　　　　　　　
　　　　　　０．１　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　１０　　　　　　６．３━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
＊　　　　１３日目に定量した。 ＊＊　　プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならな
い数値（Ｐ＜０．０５）、生存時間に対してのみ計算し
た。 式ＩＩの化合物での治療は５０，１２．５，３，１およ
び０．８ｍｇ／ｋｇ日用量でプラセボー処理動物に比較
して統計的に有効な生存時間の延長を生じる。アシクロ
グアノシン治療は１００および５０ｍｇ／ｋｇ日用量だ
けでプラセボー処理動物に比較して統計的に有効な生存
時間の延長を生じる。式ＩＩの化合物５０ｍｇ／ｋｇで
治療した動物全部が試験に残った。５０および１２．５
ｍｇ／ｋｇ治療グループの生存はプラセボー処理グルー
プより統計的に有効な長さであった。反対にアシクログ
アノシン治療グループはいずれも生存の延長を示さなか
った。アシクログアニジンに対する式ＩＩの化合物の相
対効力は５０．３であり統計的に有効であった。試験動
物の最終重量によって測定されるようにアシクログアノ
シンまたは式ＩＩ化合物治療グループに明白な毒性は見
られなかった。

【００６３】実施例３６ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染治療：単純ヘ
ルペスウイルス２型膣感染、経口治療 ３０ｇＩＣＲ／Ｈａ雌のマウスに膣内経路によって単純
ヘルペスウイルス２型（カーチス菌株）１０ＬＤ５０以
上を感染させた。１０匹の動物のグループを感染後直ち
に始めて５０，１２．５，３，１，０．８または０．２
ｍｇ／ｋｇの最終日用量のアシクログアノシンまたは式
ＩＩの化合物を用いて経口摂食で１０日間毎日２回治療
した。感染までの平均日数および生存平均日数を各グル
ープに対して定量し感染したプラセボー治療グループと
比較した。要約した結果を次の表に示す。マウスの単純
ヘルペスウイルスＩＩ型膣感染の経口的治療 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　動物治療　　　　　　　　　　　　　　　　生存
　　　　平均生存化学薬剤　　　　　　　　　　　　μ
ｇ／服用量　　ｍｇ／ｋｇ／日　　　　　　　　％＊　
　　　　時間（日）━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━アシクログ
アノシン　　　　　　７５０　　　　　　　　５０　　
　　　　　　　　６０　　　　１７．６　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　１８８　　　　　
　　　１２．５　　　　　　　　４０　　　　１４．１
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　４７　　　　　　　　　　３．１　　　　　　　　２
０　　　　１０．２＊＊　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　１２　　　　　　　　　　０
．８　　　　　　　　１０　　　　１０．１＊＊　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
３　　　　　　　　　　０．２　　　　　　　　　　０
　　　　　　８．８＊＊━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━式ＩＩの
化合物　　　　　　　　　　　　７５０　　　　　　　
　５０　　　　　　　　１００　　　　２４．７　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１８８　
　　　　　　　１２．５　　　　　　１００　　　　２
４．７　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　４７　　　　　　　　　　３．１　　　　　　
　　７５　　　　１９．１　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　１２　　　　　　　　　　
０．８　　　　　　　　４０　　　　１５．１　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３
　　　　　　　　　　０．２　　　　　　　　３０　　
　　１２．１＊＊━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━プラセボー　　
　　　　　　　　　　　　　　　　０．１ｍｌ　　　　
　　−　　　　　　　　　　　　０　　　　　　９．３
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━＊　　　　１９日目に定量した。 ＊＊　　プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならな
い数値（Ｐ＜０．０５）、生存時間に対してのみ計算し
た。 ５０ｍｇまたは１２．５ｍｇ／ｋｇの式ＩＩの化合物で
治療した全動物がテストに生き残り、５０，１２．５お
よび３．１ｍｇ／ｋｇ式ＩＩの化合物の治療グループの
生存率がプラセボー治療グループに比較して統計的に有
効に増加した。反対に５０ｍｇ／ｋｇアシクログアノシ
ン治療グループだけが統計的に有効な増加した生存を示
した。５０，１２．５，３，１および０．８ｍｇ／ｋｇ
の式ＩＩの化合物がプラセボー治療感染動物に比較して
生存時間に統計的に有効な増大を生じた。５０および１
２．５ｍｇ／ｋｇのアシクログアノシンが同様に有効で
あった。生存によって測定されるようにアシクログアノ
シンに対する式ＩＩの化合物の相対効力は２８．１であ
り、統計的に有効であった。５０ｍｇ／ｋｇの式ＩＩの
化合物で治療した動物はすべてテスト期間中疱疹性感染
の徴候がないままであった。５０ｍｇ／ｋｇおよび１２
．５ｍｇ／ｋｇ両方の式ＩＩの化合物およびアシクログ
アノシンはプラセボー治療動物に比較して感染までの（
膣病巣および／または痲痺の進行）日数に統計的に有効
な増加を生じた。感染までの時間で測定される式ＩＩの
化合物のアシクログアノシンに対する相対効力は４．１
４であり、統計的に有効であった。

【００６４】実施例３７ マウスにおける単純ヘルペスウイルスの治療：単純ヘル
ペスウイルス１型口・顔面（Ｏｒｏｆａｃｉａｌ　）感
染、経口治療 ２０ｇのＨＲＳ（無毛）マウスに単純ヘルペスウイルス
１型（Ｓ菌株）をすりむいた口・顔面範囲に感染させた
。各々１０匹の感染した動物からなるグループをアシク
ログアノシンに対して５０，１２．５，３，１および０
．８ｍｇ／ｋｇおよび式ＩＩの化合物に対して５０，１
２．５，３，１，０．８および０．２ｍｇ／ｋｇの最終
日用量を用いて感染後３時間から始めて７日間毎日２回
経口摂食によって治療した。感染開始７日後に口・顔面
範囲の病変進行の程度を０（病変なし）から４（完全な
鼻より大きい病変）の度合で測定した。病変の頻度およ
び平均病変の評点を添付の表および第２図に示す。式Ｉ
Ｉの化合物の治療は病変進行の程度によって測定される
場合、プラセボー治療感染動物に比較して使用した全濃
度において統計的に有効な防御を生じた。アシクログア
ノシン治療は５０および１２．５ｍｇ／ｋｇ服用量だけ
統計的に有効な防御を生じた。式ＩＩの化合物の治療は
病変の頻度によって測定される場合プラセボー治療感染
動物の頻度に比較して５０および１２．５ｍｇ／ｋｇで
統計的に有効な防御を生じた。反対にアシクログアノシ
ン治療は５０ｍｇ／ｋｇでだけ統計的に有効な防御を生
じた。アシクログアノシンに対する式ＩＩの化合物の相
対効力は６．９であり、統計的に有効であった。 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　動物治療　　　　　　　　　　　　病変頻度　　　　
　　　　病変化学薬剤　　　　　　　　　　　　━━━
━━━━━━━━　　━━━━━　　　　　　　　　　
　　　　　　　　μｇ／服用量　　ｍｇ／ｋｇ／日　　
　　全体（％）　　　　　　重さａ　━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━アシクログアノシン　　５００　　　　５０　　　
　　　　　　　１／７　（１４）　　　　　　　　　０
．１４　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１２
５　　　　１２．５　　　　　　　　６／６　（１００
）＊＊　　　　　　２．６７　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　３１　　　　　　３．１　　　　
　　　　６／６　（１００）＊＊　　　　　　３．２５
＊＊　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　８　　　　　　０．８　　　　　　　　７／８　（８
８）　＊＊　　　　　　３．１１＊＊━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━式ＩＩの化合物　　　　　　　　５００　　　　５
０　　　　　　　　　　１／１０　（１０）　　　　　
　　　　０．０５　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　１２５　　　　１２．５　　　　　　　　２／１
０　（２０）　　　　　　　　　０．４５　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　３１　　　　　　３
．１　　　　　　　　６／９　　（６７）　＊＊　　　
　　　１．００　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　８　　　　　　０．８　　　　　　　　７
／７　　（１００）＊＊　　　　　　２．９３　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２　　　　
　　０．２　　　　　　　　７／７　　（１００）＊＊
　　　　　　２．９３━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━プラセボー
　　　　　　　　　　　　　　０．１ｍｌ　　　　−　
　　　　　　１０／１０　（１００）　　　　　　　　
３．９５━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━ａ　　　　病変頻度を０
（病変なし）から４（完全な顔面積より大きい病変）ま
での度合いでこの表に示される平均病変評点で測定した
。 ＊＊　　治療した動物のそれと統計的に異ならない数値
（Ｐ＜０．０５）病変頻度および重さを顔面感染後７日
間定量した。

【００６５】実施例３８ マウスにおける単純ヘルペスウイルス感染の治療：単純
ヘルペスウイルス１型口・顔面感染経口治療２０ＨＲＳ
（無毛）マウスに単純ヘルペスウイルス１型（Ｓ菌株）
をすりむいた口・顔面範囲に感染させた。 ａ．１０匹の感染した動物のグループを感染後３，８，
１２，２４，４８，７２または９６時間に始めて１２．
５ｍｇ／ｋｇ／日の式ＩＩの化合物で７日までの間に経
口摂食で毎日２回治療した。 ｂ．　　第二実験ではアシクログアノシンの治療効能を
同様の方法で評価した。１０匹の感染した動物のグルー
プを感染後３，８，１２，２４，４８，７２または９６
時間で開始して１２．５ｍｇ／ｋｇ／日のアシクログア
ノシンで７日までの間に経口摂食で毎日２回治療した。 感染開始後７日において口・顔面範囲の病変進行の程度
を０（病変なし）から ４（完全な鼻より重い病変）の度合いで測定した。平均
病変評点を添付の表に示す。ＨＳＶ−１で感染後７２時
間ほど遅く始めて式ＩＩの化合物を受ける感染マウスは
プラセボーを受けるマウスよりも統計的に有効な低い病
変評点を示した。反対にアシクログアノシン治療に対し
て感染３時間後に始める治療を受けるマウスだけがプラ
セボーグループより病変評点が統計的に異なった。さら
に感染８，１２および２４時間後に始める式ＩＩの化合
物を受ける感染マウスはプラセボーを受けるマウスより
統計的に有効な低い頻度の病変進行を有した。アシクロ
グアノシン治療グループはいずれも各プラセボー治療動
物より有効な低い頻度の病変を有しなかった。 マウスの単純ヘルペスウイルスＩ型口・顔面感染の経口
的治療　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　経口
的ａ　治療　　　　　　　　病変頻度　　　　　　　　
　　病変の化学薬剤　　　　　　　　　　　　の開始（
感染　　　　　　━━━━━　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　後の時間）　　　　　　　　　　全体
（％）　　　　　　　　重さｂ　━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
アシクロアデノシン　　　　　　　　３　　　　　　　
　　　　１０／１０（１００）＊＊　　　　　　２．８
０１２．５ｍｇ／ｋｇ／日　　　　　　　　　　８　　
　　　　　　　　　１０／１０（１００）＊＊　　　　
　　２．９５＊＊　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　１２　　　　　　　　　　　　９／１０
（９０）　＊＊　　　　　　３．３０＊＊　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　２４　　　　　
　　　　　　　９／１０（９０）　＊＊　　　　　　２
．８５＊＊　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　４８　　　　　　　　　　　　８／１０　（８
０）　＊＊　　　　　　２．８５＊＊　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　７２　　　　　　　
　　　　　９／１０　（９０）　＊＊　　　　　　３．
６０＊＊　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　９６　　　　　　　　　　　　７／７　　（１０
０）＊＊　　　　　　４．００＊＊━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
プラセボー　　　　　　　　　　　　　　　　３　　　
　　　　　　　　　９／９　（１００）　　　　　　　
　　３．３５━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━式ＩＩの化合物　　　
　　　　　　　　　　　３　　　　　　　　　　　　６
／１０　（６０）　＊＊　　　　　　１．３０１２．５
ｍｇ／ｋｇ／日　　　　　　　　　　８　　　　　　　
　　　　　３／１０　（３０）　　　　　　　　　０．
５５　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　１２　　　　　　　　　　　　５／１０　（５０）　
　　　　　　　　０．５５　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　２４　　　　　　　　　　　　
４／１０　（４０）　　　　　　　　　０．４０　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４８　　
　　　　　　　　　　９／１０　（９０）　＊＊　　　
　　　１．５０　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　７２　　　　　　　　　　　　８／１０　
（８０）　＊＊　　　　　　２．５５　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　９６　　　　　　　
　　　　１０／１０　（１００）＊＊　　　　　　３．
８５＊＊━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━プラセボー　　　　　　　
　　　　　　　　　３　　　　　　　　　　　１０／１
０　（１００）　　　　　　　　４．００━━━━━━
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
━━━━ａ．　　経口的治療を感染開始後指示された時
間に始め、７日間毎日２回吸用し続けた。病変頻度およ
び重さは口・顔面感染後７日間定量した。 ｂ．　　病変の重さを０（病変なし）から４（完全な口
・顔面範囲より大きい病変）の度合いでこの表に示され
る平均病変評点で測定した。 ＊＊　　プラセボー治療動物のそれと統計的に異ならな
い数値（Ｐ＜０．０５）

【００６６】式ＩおよびＩＩの化合物のホスフエート誘
導体の製造方法 式ＩおよびＩＩの化合物のモノおよびポリホスフエート
はトリエチルホスフエートのような適当な非プロトン性
溶媒中式ＩまたはＩＩの化合物をホスフオリルクロライ
ドのようなホスフオリル化剤と反応させ、生成した中間
体を水または塩基で処理することによって化学的に製造
することができる。この反応の多量の生成物は式Ｉまた
はＩＩの環式ホスフエートであるが、非環式モノおよび
ジホスフエートもまた製造される。生成物比は作用物質
の量または治療は長さおよび温度の変化によって変える
ことができる。炭化水素非極性溶媒で沈殿し、アルコー
ルで急冷することによってホスフオリル化中間体を分離
することも都合がよい。この反応の生成物は塩基性水性
処理が使用されるかされないかに依存してアルキルホス
フオトリエステルまたはアルキルホスフオジエステルで
あることができる。式ＩおよびＩＩの化合物のホスフオ
リル化誘導体〔即ちモノ−線状ジ（ピロホスフエート）
または線状トリホスフエート〕もまた式ＩまたはＩＩの
化合物をＨＳＶ１チミジンキナーゼ（モノホスフエート
を製造するために）で、さらにグアノシンモノホスフエ
ートキナーゼ（ピロホスフエートを製造するために）で
、そしてさらに３−ホスフオグリセレートキナーゼ（ト
リホスフエートを製造するために）で処理することによ
って酸素的に製造することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は濃度に対するホスフオリル化反応速度曲
線を示すものである。

【図２】第２図はＨＳＶ−１感染マウスをアシクログア
ノシンまたは式ＩＩの化合物で治療する結果を示す棒グ
ラフである。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　式 【化１】 （式中ＲはＡｃＯ又は臭素、塩素又はヨウ素であり、Ａ
   ｃはアシル基である。）を有する化合物。
2. 【請求項２】　　式 【化２】 （式中ＲはＡｃＯ又は臭素、塩素又はヨウ素であり、Ａ
   ｃはアシル基である。）を有する化合物。