JPH04352785A - 新規メトトレキセート誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規なメトトレキセー
ト誘導体、更に詳しくは、抗リウマチ剤として有用な新
規なメトトレキセート誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術・発明が解決しようとする課題】メトトレ
キセートは古くより白血病の治療薬とて用いられてきた
が、１９５１年Ｇｕｂｎｅｒらが慢性関節リウマチ（Ｒ
Ａ）や乾癬に用いて有効性を報告して以来ＲＡの治療薬
として欧米で使用されてきた。比較的最近になって用法
、用量の詳細な検討が実施され、低用量メトトレキセー
ト療法が比較的副作用の少ない、しかも優れた有効性を
発揮することが明らかになってきた。しかし、メトトレ
キセート服用により生ずる肝障害や肺繊維化等の副作用
も無視できないため、さらに副作用が少なく、かつ効力
の優れた薬物の登場が望まれている。

【００３】これまでにメトトレキセートのアミノ酸部分
をオルニチンのＮδアミド体とした誘導体としては、例
えば下記式

【化３】

【００４】（ＪＭｅｄ．ｃｈｅｍ．１９８８，３１，１
３３２）等が知られている。本発明者らは、この種のメ
トトレキセート誘導体においてＮ　　をアルキル化また
はベンゼン環と環形成することにより抗リウマチ作用が
より強い化合物を見い出し、本発明をなすに至った。

【００５】

【課題を解決するための手段】本発明は、下記一般式（
Ｉ）

【化４】

【００６】（式中、Ｒ１は炭素数１乃至４の低級アルキ
ル基を示し；Ｒ２は水素原子またはＲ１と結合して炭素
数２または３のメチレン基を示し；Ｒ３及びＲ４は水素
原子または炭素数１乃至４の低級アルキル基を示す）

【
００７】および下記一般式（ＩＩ）

【化５】

【００８】（式中、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３は前記と同じ
意味を示す）で示されるメトトレキセート誘導体を提供
するものである。

【００９】本発明の化合物はいずれも文献未載の新規化
合物であり、例えば以下の様にして合成される。 １）一般式（Ｉ）におけるＣＯＯＲ４基がメタ位または
パラ位につくとき ｉ）　　一般式（Ｉ）におけるＲ２が水素原子を示すと
き

【０１０】

【化６】 ｉｉ）一般式（Ｉ）におけるＲ２がＲ１と結合して炭素
数２または３のメチレン基を示すとき

【０１１】

【化７】

【０１２】２）一般式（Ｉ）におけるＣＯＯＲ４基がオ
ルト位につくとき

【化８】 （式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３およびＲ４は前記と同じ意味
を示し、ｎは２または３の整数を示し、Ｘはブロモ、ク
ロロ等のハロゲン原子を示す）

【０１３】１）−ｉ）の場合において、一般式（１）の
化合物と一般式（２）の化合物から一般式（３）の化合
物を得る反応は、一般式（１）の化合物をクロロホルム
、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン等
の非プロトン性溶媒に溶解し、一般式（２）の化合物と
水と例えば炭酸カリウム、トリエチルアミン、炭酸水素
ナトリウム、ピリジン等を加え、室温で攪拌することに
より行う。このアミド化は、混合酸無水物法、活性エス
テル法および活性アミド法で行ってもよい。

【０１４】一般式（３）の化合物から一般式（４）の化
合物を得る反応は、一般式（３）の化合物をエタノール
、メタノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン等に溶
解し、パラジウム−炭素の共存下、水素雰囲気下室温で
攪拌することにより行う。

【０１５】一般式（４）の化合物と一般式（５）の化合
物から一般式（６）の化合物を得る反応は、一般式（４
）の化合物に塩化チオニルとジメチルホルムアミドを加
え室温で攪拌した後、ジクロロメタン等の溶媒中一般式
（５）の化合物と炭酸カリウムまたはトリエチルアミン
と水を加え、室温で攪拌することにより行うが、混合酸
無水物法、活性エステルまたは活性アミド法によりアミ
ド化を行ってもよい。

【０１６】一般式（６）の化合物から一般式（７）の化
合物を得る反応は、一般式（６）の化合物にあらかじめ
フェノールまたはアニソールを溶かしておいた臭化水素
−酢酸を加え室温で攪拌することにより行う。

【０１７】一般式（７）の化合物と一般式（８）の化合
物から一般式（９）の化合物を得る反応は、ジメチルア
セトアミドおよびジメチルホルムアミドのような非プロ
トン性極性溶媒中、２５〜１００℃好ましくは５０〜６
５℃で攪拌した後、例えばトリエチルアミン、炭酸カリ
ウムまたは炭酸水素ナトリウム等を含む水中で攪拌する
ことにより行う。

【０１８】特にＲ３が水素原子である場合は、さらにエ
タノール等の溶媒中、水酸化ナトリウム溶液を加え、室
温で攪拌して目的物を得る。

【０１９】１）−ｉｉ）の場合において一般式（１０）
の化合物と一般式（４）の化合物から一般式（１１）の
化合物を得る反応は、一般式（１０）の化合物に塩化チ
オニルとジメチルホルムアミドを加え、室温で攪拌した
後、ジクロロメタン等の溶媒中、一般式（４）の化合物
とトリエチルアミンまたは炭酸カリウムの共存下、室温
で攪拌することにより行うが、混合酸無水物法、活性エ
ステルまたは活性アミド法によりアミド化を行ってもよ
い。

【０２０】一般式（１１）の化合物から一般式（１２）
の化合物を得る反応は、一般式（１１）の化合物にあら
かじめフエノールまたはアニソールを溶かしておいた臭
化水素−酢酸を加え室温で攪拌することにより行う。

【０２１】一般式（１２）の化合物と一般式（８）の化
合物から一般式（１３）の化合物を得る反応は、ジメチ
ルアセトアミド、ジメチルホルムアミドのような非プロ
トン性極性溶媒中、２５〜１００℃好ましくは５０〜６
５℃で攪拌した後、トリエチルアミン、炭酸カリウムま
たは炭酸水素ナトリウムを含む水中室温で攪拌すること
により行う。特にＲ３が水素原子である場合はさらにエ
タノール等の溶媒中、水酸化ナトリウム水溶液の共存下
、室温で攪拌して目的物を得る。

【０２２】２）の場合において、一般式（１）の化合物
と式（１４）の化合物から一般式（１５）の化合物を得
る反応は、一般式（１）の化合物をクロロホルム、ジク
ロロメタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン等の非プ
ロトン性溶媒に溶解し、式（１４）の化合物と水と例え
ば炭酸カリウム、トリエチルアミン、炭酸水素ナトリウ
ム、ピリジン等を加え、室温で攪拌することにより行う
。　　一般式（１５）の化合物から一般式（１６）の化
合物を得る反応は、メタノール等の溶媒中、−３０℃で
攪拌し、塩化チオニルを加えた後、還流することにより
行う。

【０２３】一般式（１６）の化合物から一般式（１７）
の化合物を得る反応は、一般式（１６）の化合物をエタ
ノール、メタノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン
等に溶解し、パラジウム−炭素の共存下、水素雰囲気下
室温で攪拌することにより行う。

【０２４】一般式（１８）の化合物から一般式（１９）
の化合物を得る反応は、一般式（１８）の化合物に塩化
チオニルとジメチルホルムアミドを加え室温で攪拌して
行う。

【０２５】一般式（１７）の化合物と一般式（１９）の
化合物から一般式（２０）の化合物を得る反応は、一般
式（１９）の化合物をジクロロメタン等に溶解させ、こ
の溶液に一般式（１７）の化合物と炭酸カリウムまたは
トリエチルアミンと水を加え、室温で攪拌することによ
り行うが、混合酸無水物法、活性エステルまたは活性ア
ミド法によりアミド化を行ってもよい。

【０２６】一般式（２０）の化合物から一般式（２１）
の化合物を得る反応は、一般式（２０）の化合物にあら
かじめフェノールまたはアニソールを溶かしておいた臭
化水素−酢酸を加え、室温で攪拌することにより行う。

【０２７】一般式（８）の化合物と一般式（２１）の化
合物から一般式（２２）の化合物を得る反応は、ジメチ
ルアセトアミドおよびジメチルホルムアミドのような非
プロトン性極性溶媒中２５〜１００℃好ましくは５０〜
６５℃で攪拌した後、例えばトリエチルアミン、炭酸カ
リウムまたは炭酸水素ナトリウム等を含む水中で攪拌す
ることにより行う。

【０２８】一般式（２２）の化合物から一般式（２３）
の化合物を得る反応は、エタノール等の溶媒中、水酸化
ナトリウム溶液を加え、室温で攪拌して行う。

【０２９】

【作　　　　用】本発明により得られた一般式（Ｉ）で
示される化合物は、抗リウマチ作用を持つ。また、メト
トレキセートと比較して毒性が低いものである。この作
用は、以下に示す実験例「ヒト末梢血を用いたリンパ球
の増殖抑制作用」および「ラットを用いた腹腔内連続投
与によるメトトレキセート（ＭＴＸ）と本発明の化合物
との毒性比較」を調べることにより確認した。

【０３０】実験例１ 「ヒト末梢血を用いたリンパ球の増殖抑制作用」（方法
）ヒト末梢血よりＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ　　Ｒを用
いてリンパ球を分離し、適度に希釈した薬物とそのリン
パ球１０５個をＰＨＡとともに２日間あるいはＰＷＭと
ともに３日間９６穴ｃｙｌｔｕｅ　　Ｐｌａｔｅ中で培
養した。培養終了後の５時間前に３Ｈ−ＵｄＲ（１μｃ
ｉ／ｗｅｌｌ）を加えリンパ球への３Ｈ−ＵｄＲの取り
込みをシンチレーションカウンターにて測定した。

【０３１】（ここでＰＨＡはＰｈｙｔｏｈａｅｍａｇｇ
ｌｕｔｉｎｉｎ，ＰＷＭはｐｏｋｅｗｅｅｄ　　ｍｉｔ
ｏｇｅｎ，ＵｄＲはｄｅｏｘｙｕｒｉ　　ｄｉｎｅを示
す。）なお、用いた薬物は下記のものである。

【化９】

【０３２】（結　　　　果，考　　　　察）図１に、薬
剤非添加ＰＨＡ刺激リンパ球の３Ｈ−ＵｄＲ取り込みを
１００％とした割合を示した。図１から明らかなように
、本発明の化合物は対照化合物より優れたリンパ球の増
殖抑制作用（抗リウマチ作用）を持つことが確認された
。

【０３３】実験例２ 「ラットを用いた腹腔内連続投与によるメトトレキセー
ト（ＭＴＸ）と本発明の化合物との毒性比較」

【０３４
】（方　　法）８週齢のＳＤ系雄性ラットにＭＴＸおよ
び本発明の化合物を１日１回，週５日の割合で５週間連
続腹腔内投与した。投与量はＭＴＸおよび本発明の化合
物ともに０．２５，０．５ｍｇ／ｋｇの２用量である。 対象群には溶媒（リン酸緩衝液，ｐＨ７．４）を同様に
投与した。１群あたりの構成匹数は５匹である。

【０３５】検査項目は以下のとおりである。 １）生死および症状：毎日観察した。 ２）体重推移：週１回の割合で測定した。 ３）血液検査：最終投与週に抹消血中の白血球数（ＷＢ
Ｃ），赤血球数（ＲＢＣ）を測定した。 ４）肝臓重量および肝臓中トリグリセライド（ＴＧ）含
量：最終投与後，解剖を用い肝臓重量および肝臓中ＴＧ
含量を測定した。 なお、用いた薬物は下記のものである。

【０３６】

【化１０】

【０３７】（結　　果） １）生死および症状 ＭＴＸ投与群のうち、０．２５ｍｇ／ｋｇ群では投与期
間中を通じ、死亡例はなく、また異常な症状は認められ
なかった。しかし、０．５ｍｇ／ｋｇ群では４週目より
栄養状態の悪化，貧血，糞便量の減少，口周囲の腫脹等
がみられ、５例中１例が死亡した。

【０３８】一方、本発明の化合物投与群では、０．２５
ｍｇ／ｋｇ群および０．５ｍｇ／ｋｇ群のいずれも死亡
例は無く、また異常な症状も全く認められなかった。

【０３９】２）休重推移 図２に体重推移を示した。体重の増加抑制は、本発明の
化合物のほうがＭＴＸに比べ弱かった。

【０４０】３）血液検査 図３に血液検査結果を示した。ＷＢＣおよびＲＢＣの減
少は本発明の化合物の方がＭＴＸに比べ明らかに弱かっ
た。

【０４１】４）肝臓重量および肝臓中ＴＧ含量図４に肝
臓重量および肝臓中ＴＧ含量を示した。肝臓重量の増加
および肝臓中ＴＧ含量の増加は、いずれも本発明の化合
物の方がＭＴＸに比べ弱かった。

【０４２】（考　　察）ラットを用い、腹腔内連続投与
による毒性をＭＴＸと本発明の化合物とで比較した。そ
の結果，死亡率，症状，体重推移，血液検査，肝臓重量
および肝臓中ＴＧ含量のいずれの点からも、本発明の化
合物はＭＴＸに比べ明らかに毒性は低いと考えられた。

【０４３】

【実施例】

参考例１． Ｎ−フタロイル−Ｎ−カルボベンゾキシ−オルニチン　
　メチルエステルの合成 Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−オルニチン（２．０ｇ）の
ジクロロメタン（７０ｍｌ）溶液に無水フタル酸（２．
４５ｇ）を加え、次いで水（７０ｍｌ）、炭酸カリウム
（１．１２ｇ）を加え１５時間室温にて攪拌した。反応
液を減圧にて６０ｍｌまで濃縮し１Ｎ−塩酸でｐＨ＝３
に調製し析出した沈殿を濾取し真空乾燥をした。得られ
た白色固体を低水分メタノール（８０ｍｌ）に溶解し、
この溶液を−３０℃まで冷却し、１０分攪拌した。次に
、同温にて塩化チオニル（２ｍｌ）をゆっくりと滴下し
た。反応溶液をゆっくり室温にもどし、さらに２時間還
流を行った。溶媒を減圧にて留去し、得られた残渣をシ
リカゲルクロマトグラフィーに付し、溶出溶媒としてク
ロロホルム：メタノール＝１００：１を用い目的物（２
．１６ｇ）を得た。

【０４４】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．６−
２．０（４Ｈ，ｍ），３．６９（５Ｈ，ｍ），４．２０
（１Ｈ，ｍ），５．０６（２Ｈ，ｓ），５．７０（１Ｈ
，ｍ），７．２９（５Ｈ，ｍ），７．６６（２Ｈｍ），
７．８１（２Ｈ，ｍ）

【０４５】参考例２． Ｎ−フタロイル−オルニチン　　メチルエステルの合成
参考例１の化合物（２．１６ｇ）のメタノール溶液（１
００ｍｌ）に、１０％パラジウム−炭素（５００ｍｇ）
を加えた後、水素雰囲気下室温にて２０時間攪拌した。 セライトを用いてパラジウム−炭素を濾去し、減圧下に
て溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルクロマト
グラフィーに付し、溶出溶媒としてクロロホルム：メタ
ノール＝１００：３を用い目的物（２２３ｍｇ）を得た
。

【０４６】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．７−
２．１（４Ｈ，ｍ），３．７５（２Ｈ，ｍ），３．８３
（３Ｈ，ｓ），７．７６（２Ｈ，ｍ），７．８４（２Ｈ
，ｍ）

【０４７】参考例３． Ｎ−（１−カルボベンゾキシインドリン−５−カルボニ
ル）フタロイル−オルニチン　　メチルエステルの合成
１−カルボベンゾキシインドリン−５−カルボキシリッ
クアシッド（２９７ｍｇ）に塩化チオニル（２．５ｍｌ
）を加え、懸濁液とし、さらにこの懸濁液に触媒量のジ
メチルホルムアミドを添加し室温にて２時間攪拌した。 次に反応液を減圧にて濃縮乾固した。得られた固形物を
ジクロロメタン（７ｍｌ）に溶解させ、この溶液に参考
例２の化合物（２５０ｍｇ）、炭酸カリウム（６４０ｍ
ｇ）を加え、さらに水（７ｍｌ）を加え室温にて激しく
１２時間攪拌した。次に反応液を水にあけクロロホルム
で抽出し、さらにクロロホルム層を１Ｎ−塩酸溶液で洗
浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下にて留
去した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー
に付し、溶出溶媒としてクロロホルム：メタノール＝１
００：３を用い目的物（３３０ｍｇ）を得た。

【０４８】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１，６−
２．１（４Ｈ，ｍ），３．１２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８
Ｈｚ），３．７２（２Ｈ，ｍ），３．７６（３Ｈ，ｓ）
，４．０８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），４．８４（
１Ｈ，ｍ），５．２７（２Ｈ，Ｓ），６．８０（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．１−７．５（６Ｈ，ｍ），
７．５−７．９（６Ｈ，ｍ）

【０４９】参考例４． Ｎ−（インドリン−５−カルボニル）−Ｎ−フタロイル
−オルニチン　　メチルエステルの合成フェノール（３
００ｍｇ）の３０％臭化水素−酢酸（８ｍｌ）溶液に参
考例３の化合物（３３０ｍｇ）を加え４時間、室温にて
攪拌した。次に反応液に大量のエーテルを加えたところ
赤褐色の油状物質が沈殿した。大部分のエーテル層を除
き油状物質をクロロホルムに懸濁させ、この懸濁液を飽
和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、クロロホルムで抽
出した。クロロホルム層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減
圧下にて溶媒を留去し、目的物（１４７ｍｇ）を得た。

【０５０】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．６−
２．１（４Ｈ，ｍ），３．０４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．３
Ｈｚ），３．６２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），３．
７２（２Ｈ，ｍ），３．７５（３Ｈ，ｓ），４．８６（
１Ｈ，ｍ），６．５−６．７（２Ｈ，ｍ），７．５２（
２Ｈ，ｍ），７．６８（２Ｈ，ｍ），７．８２（２Ｈ，
ｍ）

【０５１】実施例１． Ｎ−［１−［（２，４＝ジアミノ−６−プテリジニル）
メチル］−インドリン−５−カルボニル］−Ｎ−フタロ
イル−オルニチン　　メチルエステルの合成参考例４の
化合物（１４６ｍｇ）と６−ブロモメチル−２，４−ジ
アミノプテリジン臭化水素酸塩イソプロパノール付加物
（１１５ｍｇ）をジメチルアセトアミド（１．０ｍｌ）
に懸濁し、５０〜５５℃で４時間攪拌した。冷却後、反
応液のトリエチルアミン（３０ｍｇ）を含む水（４ｍｌ
）を加え攪拌し、次にクロロホルムで抽出した。クロロ
ホルム層を硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下で留
去し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーに
付し、溶出溶媒としてクロロホルム：メタノール＝１０
：１の混合溶媒を用い目的物（１４０ｍｇ）を得た。

【０５２】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．７−
２．２（４Ｈ，ｍ），３．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．３
Ｈｚ），３．５６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），３．
７２（２Ｈ，ｍ），３．７６（３Ｈ，ｓ），４．５３（
２Ｈ，ｓ），４．８８（１Ｈ，ｍ），６．４５−６．６
２（２Ｈ，ｍ），７．５６（２Ｈ，ｍ），７．７１（２
Ｈ，ｍ），７．８４（２Ｈ，ｍ），８．８２（１Ｈ，ｓ
）

【０５３】実施例２． Ｎ−［１−［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）
メチル］−インドリン−５−カルボニル］−Ｎ−ヘミフ
タロイル−オルニチンの合成 実施例１の化合物（１４０ｍｇ）を２Ｎ−水酸化ナトリ
ウム溶液（１０ｍｌ）に懸濁させ、３０℃で１２時間攪
拌した。減圧下にてこの反応液を乾固し、得られた黄色
固形物を水（５ｍｌ）に溶解し、１Ｎ−塩酸でｐＨ＝３
．７に調製し、冷蔵庫の中で２時間放置した。析出した
沈殿物を濾取した。得られた黄色固形物をシリカゲルク
ロマトグラフィーに付し、溶出溶媒としてクロロホルム
：メタノール：２８％−アンモニア水＝５：４：１の混
合溶媒を用い目的物（２０ｍｇ）を得た。

【０５４】１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ）；１．
５−２．１（４Ｈ，ｍ），３．１４（２Ｈ，　　ｔ，Ｊ
＝８．３Ｈｚ），３．５８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ
），４．３８（１Ｈ，ｍ），４．５４（２Ｈ，ｓ），６
．７１（１Ｈ，ｍ），７．３−７．６（４Ｈ，ｍ），７
．６−７．８（３Ｈ，ｍ），８．０８（１Ｈ，ｍ），８
．７１（１Ｈ，ｓ）　　ｍｐ；１９５−１９９℃（ｄｅ
ｃ．）

【０５５】参考例５． Ｎ−（４−メトキシカルボニルベンゾイル）−Ｎ−カル
ボベンゾキシ−オルニチン　　メチルエステルの合成Ｎ
−カルボベンゾキシ−Ｌ−オルニチン（２．０ｇ）のジ
クロロメタン（６０ｍｌ）溶液にテレフタル酸モノメチ
ルエステルクロライド（３．０ｇ）を加え、次いで水（
６０ｍｌ）、炭酸カリウム（４．８ｇ）を加え１５時間
室温にて攪拌した。反応液を減圧にて５０ｍｌまで濃縮
し１Ｎ−塩酸でｐＨ＝３に調製し析出した沈澱を濾取し
真空乾燥をした。得られた白色固体を低水分メタノール
（１００ｍｌ）に溶解し、この溶液を−３０℃まで冷却
し、１０分攪拌した。次に、同温にて塩化チオニル（３
ｍｌ）をゆっくりと滴下した。反応溶液をゆっくり室温
にもどし、さらに２時間還流を行った。溶媒を減圧にて
留去し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー
に付し、溶出溶媒としてクロロホルム：メタノール＝１
００：１を用い目的物（７１０ｍｇ）を得た。

【０５６】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．６−
２．１（４Ｈ，ｍ），３．５１（２Ｈ，ｍ），３．７４
（３Ｈ，ｓ），３．９４（３Ｈ，ｓ），４．４３（１Ｈ
，ｍ），５．１１（２Ｈ，ｓ），５．５３（１Ｈ，ｍ）
，６．６３（１Ｈ，ｂｓ），７．３４（５Ｈ，ｓ），７
．８３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．０８（２Ｈ
，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）

【０５７】参考例６． Ｎ−（４−メトキシカルボニルベンゾイル）−オルニチ
ン　　メチルエステルの合成 参考例５の化合物（７１０ｍｇ）のメタノール溶液（１
００ｍｌ）に、１０％パラジウム−炭素（１００ｍｇ）
を加えた後、水素雰囲気下室温にて２０時間攪拌した。 セライトを用いてパラジウム−炭素を濾去し、減圧下に
て溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルクロマト
グラフィーに付し、溶出溶媒としてクロロホルム：メタ
ノール＝１００：３を用い目的物（４１０ｍｇ）を得た
。

【０５８】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．６−
２．１（４Ｈ，ｍ），３．４９（３Ｈ，ｍ），３．７３
（３Ｈ，ｓ），３．９４（３Ｈ，ｓ），７．２０（１Ｈ
，ｍ），７．８４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），８．
０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）

【０５９】参考例７
． Ｎ−（１−カルボベンゾキシインドリン−５−カルボニ
ル）−Ｎ−（４−メトキシカルボニルベンゾイル）−オ
ルニチン　　メチルエステルの合成 １−カルボベンゾキシインドリン−５−カルボキシリッ
クアシッド（２６０ｍｇ）に塩化チオニル（２．５ｍｌ
）を加え、懸濁液とし、さらにこの懸濁液に触媒量のジ
メチルホルムアミドを添加し室温にて２時間攪拌した。 次に反応液を減圧にて濃縮乾固した。得られた固形物を
ジクロロメタン（６ｍｌ）に溶解させ、この溶液に参考
例６の化合物（２４５ｍｇ）、炭酸カリウム（８１２ｍ
ｇ）を加え、さらに水（６ｍｌ）を加え室温にて激しく
１２時間攪拌した。次に反応液を水にあけクロロホルム
で抽出し、さらにクロロホルム層を１Ｎ−塩酸溶液で洗
浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下にて留
去した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー
に付し、溶出溶媒としてクロロホルム：メタノール１０
０：３を用い目的物（３１０ｍｇ）を得た。

【０６０】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．７−
２．２（４Ｈ，ｍ），３．１６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．３
Ｈｚ），３．６１（１Ｈ，ｍ），３．７９（３Ｈ，ｓ）
，３．９４（３Ｈ，ｓ），４．１１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８
．３Ｈｚ），４．８３（１Ｈ，ｍ），５．２９（２Ｈ，
ｓ），６．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．０
２（１Ｈ，ｍ），７．４０（５Ｈ，ｍ），７．６６（２
Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．９０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝
８．８Ｈｚ），８．０８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）

【０６１】参考例８． Ｎ−（インドリン−５−カルボニル）−Ｎ−（４−メト
キシカルボニルベンゾイル）−オルニチンメチルエステ
ルの合成 フェノール（１．０ｇ）の３０％臭化水素−酢酸（１０
ｍｌ）溶液に参考例７の化合物（４００ｍｇ）を加え４
時間、室温にて攪拌した。次に反応液に大量のエーテル
を加えたところ赤褐色の油状物質が沈澱した。大部分の
エーテル層を除き油状物質をクロロホルムに懸濁させ、
この懸濁液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、目
的物をクロロホルムで抽出した。クロロホルム層を硫酸
ナトリウムで乾燥し、減圧下にて溶媒を留去した。得ら
れた白色固体をｎ−ヘキサン−クロロホルム−メタノー
ルから再結晶し目的物（１４５ｍｇ）を得た。

【０６２】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．６−
２．１（４Ｈ，ｍ），３．０５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．３
Ｈｚ），３．４８（２Ｈ，ｍ），３．６２（２Ｈ，ｔ，
Ｊ＝８．３Ｈｚ），３．７６（３Ｈ，ｓ），３．９４（
３Ｈ，ｓ），４．７５（１Ｈ，ｍ），６．５７（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．
８Ｈｚ），７．５５（２Ｈ，ｍ），７．８９（２Ｈ，ｄ
，Ｊ＝８．３Ｈｚ），８．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３
Ｈｚ）

【０６３】実施例３． Ｎ−［１−［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）
メチル］インドリン−５−カルボニル］−Ｎ−（４−メ
トキシカルボニルベンゾイル）−オルニチン　　メチル
エステルの合成 参考例８の化合物（１４０ｍｇ）と６−ブロモメチル−
２，４−ジアミノプテリジン臭化水素酸塩（１０５ｍｇ
）をジメチルアセトアミド（２．０ｍｌ）に懸濁し、５
０〜５５℃で４時間攪拌した。冷却後、反応液のトリエ
チルアミン（３２ｍｇ）を含む水（４ｍｌ）を加え攪拌
し、次に目的物をクロロホルムで抽出した。クロロホル
ム層を硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下で留去し
、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーに付し
、溶出溶媒としてクロロホルム：メタノール＝１０：１
の混合溶媒を用い目的物（１８０ｍｇ）を得た。

【０６４】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．６−
２．１（４Ｈ，ｍ），３．０８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８
Ｈｚ），３．４−３．７（４Ｈ，ｍ），３．７９（３Ｈ
，ｓ），３．９４（３Ｈ，ｓ），４．５４（２Ｈ，ｓ）
，４．８３（１Ｈ，ｍ），６．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８
．３Ｈｚ），６．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），
７．１７（１Ｈ，ｍ），７．５９（２Ｈ，ｍ），７．９
２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），８．０９（２Ｈ，ｄ
，Ｊ＝８．３Ｈｚ），８．８１（１Ｈ，ｓ）

【０６５】
実施例４． Ｎ−［１−［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）
メチル］−インドリン−５−カルボニル］−Ｎ−テレフ
タロイル−オルニチンの合成 実施例３の化合物（１５０ｍｇ）をエタノール（２４ｍ
ｌ）に溶解し、さらに１Ｎ−水酸化ナトリウム溶液（０
．８ｍｌ）を加え、３５℃で４．５時間攪拌した。 ２５℃で２０時間攪拌した後、反応液に水（１ｍｌ）を
加え、減圧下にてこの反応液を乾固した。このとき外温
は３０℃を超えないようにした。得られた黄色固形物を
水（５ｍｌ）に溶解し、１Ｎ−塩酸でｐＨ＝３．７に調
製し、冷蔵庫の中で２時間放置した。析出した沈澱物を
濾取し、目的物（１０９ｍｇ）を得た。

【０６６】１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）；１．５−
２．０（４Ｈ，ｍ），３．００（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８
Ｈｚ），３．３０（２Ｈ，ｍ），３．５８（２Ｈ，ｔ，
Ｊ＝８．８Ｈｚ），４．３６（１Ｈ，ｍ），４．５４（
２Ｈ，ｓ），６．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），
７．６２（２Ｈ，ｍ），７．９１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．
３Ｈｚ），７．９９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），８
．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．６１（１Ｈ
，ｍ），８．７１（１Ｈ，ｓ）ｍｐ；２１５−２２０℃
（ｄｅｃ．）

【０６７】

【図面の簡単な説明】

図１は、被験薬物のそれぞれの濃度における３Ｈ−Ｕｄ
Ｒの取りこみ量（割合）を表す。図２は，ＭＴＸと本発
明の化合物を投与した時のラットの体重変化を表し，図
３は白血球数（ＷＢＣ）と赤血球数（ＲＢＣ）の変化を
表し，図４は肝臓重量および肝臓中ＴＧ含量の変化を表
す。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】下記一般式（Ｉ） 【化１】 （式中、Ｒ１は炭素数１乃至４の低級アルキル基を示し
   ；Ｒ２は水素原子またはＲ１と結合して炭素数２または
   ３のメチレン基を示し；Ｒ３およびＲ４は水素原子また
   は炭素数１乃至４の低級アルキル基を示す）で示される
   メトトレキセート誘導体。
2. 【請求項２】下記一般式（ＩＩ） 【化２】 （式中、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３は前記と同じ意味を示す
   ）で示されるメトトレキセート誘導体。