JPH04360894A - Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法 - Google Patents
Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法Info
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- JPH04360894A JPH04360894A JP3162182A JP16218291A JPH04360894A JP H04360894 A JPH04360894 A JP H04360894A JP 3162182 A JP3162182 A JP 3162182A JP 16218291 A JP16218291 A JP 16218291A JP H04360894 A JPH04360894 A JP H04360894A
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- Japan
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- substance
- culture
- gliocladium
- producing
- microorganism
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- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、アシルコエンザイムＡ
コレステロールアシル転位酵素阻害を有する新規物質Ｆ
Ｏ−１５１３Ａ物質およびその製造法に関する。
コレステロールアシル転位酵素阻害を有する新規物質Ｆ
Ｏ−１５１３Ａ物質およびその製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、いくつかの高脂血症薬物が知られ
ていたが、未だに有効な物質は得られていない。
ていたが、未だに有効な物質は得られていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】近年、食生活の向上に
伴い成人の高脂血症や動脈硬化などコレステロール蓄積
に起因する症状が現代病として問題視されている。コレ
ステロールはアシルコエンザイムＡからアシル基転位に
よりコレステロールとなり、細胞内および血中リポ蛋白
に蓄積される。このアシル基転位反応を触媒する酵素が
アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素で
あり、コレステロールの腸管からの吸収および冠動脈に
おける泡沫細胞の形成に深く係わつている。したがつて
、アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素
を阻害する物質は、かかる疾病に有効であることが推察
される。
伴い成人の高脂血症や動脈硬化などコレステロール蓄積
に起因する症状が現代病として問題視されている。コレ
ステロールはアシルコエンザイムＡからアシル基転位に
よりコレステロールとなり、細胞内および血中リポ蛋白
に蓄積される。このアシル基転位反応を触媒する酵素が
アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素で
あり、コレステロールの腸管からの吸収および冠動脈に
おける泡沫細胞の形成に深く係わつている。したがつて
、アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素
を阻害する物質は、かかる疾病に有効であることが推察
される。
【０００４】かかる実情において、アシルコエンザイム
Ａコレステロールアシル転位酵素阻害活性を有する物質
を提供することは、高脂血症やそれに基く動脈硬化など
の成人病の治療上有用なことである。
Ａコレステロールアシル転位酵素阻害活性を有する物質
を提供することは、高脂血症やそれに基く動脈硬化など
の成人病の治療上有用なことである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、微生物の
生産する代謝産物について研究を続けた結果、新たな土
壌から分離したＦＯ−１５１３菌株の培養物中にアシル
コエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素阻害活性
を有する物質が産生されることを見出した。次いで、該
培養物からアシルコエンザイムＡコレステロールアシル
転位酵素阻害活性物質を分離、精製した結果、後記の理
化学的性質を有する物質は従来全く知られていないこと
から、本物質をＦＯ−１５１３Ａ物質と称することにし
た。本発明は、かかる知見に基いて完成されたものであ
って、分子式Ｃ４５Ｈ８２Ｏ５ で表されるＦＯ−１５
１３Ａ物質を提供するものである。
生産する代謝産物について研究を続けた結果、新たな土
壌から分離したＦＯ−１５１３菌株の培養物中にアシル
コエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素阻害活性
を有する物質が産生されることを見出した。次いで、該
培養物からアシルコエンザイムＡコレステロールアシル
転位酵素阻害活性物質を分離、精製した結果、後記の理
化学的性質を有する物質は従来全く知られていないこと
から、本物質をＦＯ−１５１３Ａ物質と称することにし
た。本発明は、かかる知見に基いて完成されたものであ
って、分子式Ｃ４５Ｈ８２Ｏ５ で表されるＦＯ−１５
１３Ａ物質を提供するものである。
【０００６】更に、本発明は、グリオクラジウム属に属
し、ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有する微生
物を培地に培養し、該培養物にＦＯ−１５１３Ａ物質を
蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取
することを特徴とするＦＯ−１５１３Ａ物質の製造法を
提供するものである。
し、ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有する微生
物を培地に培養し、該培養物にＦＯ−１５１３Ａ物質を
蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取
することを特徴とするＦＯ−１５１３Ａ物質の製造法を
提供するものである。
【０００７】ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有
する微生物（以下、ＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌と称す
る）は、グリオクラジウム属に属するが、例えば、本発
明者らが分離したグリオクラジム属に属するＦＯ−１５
１３菌株は、本発明の最も有効に使用される菌株の一例
であって、本菌株の菌学的性状を示すと次の通りである
。
する微生物（以下、ＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌と称す
る）は、グリオクラジウム属に属するが、例えば、本発
明者らが分離したグリオクラジム属に属するＦＯ−１５
１３菌株は、本発明の最も有効に使用される菌株の一例
であって、本菌株の菌学的性状を示すと次の通りである
。
【０００８】本発明のＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する
ために使用される菌株としては、例えば、本発明者らに
よつて土壌から分離されたグリオクラジウム エスピ
ー．（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｓｐ．）ＦＯ−１５
１３株が挙げられる。本菌株は表１に示すような培養所
見を示す。本所見は各種培地上２５℃、１４日間培養し
、観察した結果である。
ために使用される菌株としては、例えば、本発明者らに
よつて土壌から分離されたグリオクラジウム エスピ
ー．（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｓｐ．）ＦＯ−１５
１３株が挙げられる。本菌株は表１に示すような培養所
見を示す。本所見は各種培地上２５℃、１４日間培養し
、観察した結果である。
【０００９】
【表１】
【００１０】ＦＯ−１５１３株の生育温度範囲は１０℃
〜３２℃、至適温度範囲は１６．５℃〜２７℃である。 また、生育ｐＨ範囲はｐＨ３〜９、至適ｐＨの範囲はｐ
Ｈ５〜７である。前記すべての培地には菌の生育に伴う
菌核の形成や厚膜胞子は観察されなかった。
〜３２℃、至適温度範囲は１６．５℃〜２７℃である。 また、生育ｐＨ範囲はｐＨ３〜９、至適ｐＨの範囲はｐ
Ｈ５〜７である。前記すべての培地には菌の生育に伴う
菌核の形成や厚膜胞子は観察されなかった。
【００１１】分生子柄は、ほとんど平滑でその大きさは
８０〜２００×４〜６ミクロンであり、その先端にペニ
シリを形成する。ペニシリは対称体ないし非対称体を呈
し、メトレは通常２〜４本、その大きさは１５〜２５×
２〜３ミクロンである。フイアライドの形状は細長いペ
ン先型である。分生子の形状は、だ円形を呈し、その大
きさは３〜７×３ミクロンであり、分生子が互いに密着
し、直径２０〜４０ミクロンの粘球となつて、メトレの
先端にかたまりを形成する。
８０〜２００×４〜６ミクロンであり、その先端にペニ
シリを形成する。ペニシリは対称体ないし非対称体を呈
し、メトレは通常２〜４本、その大きさは１５〜２５×
２〜３ミクロンである。フイアライドの形状は細長いペ
ン先型である。分生子の形状は、だ円形を呈し、その大
きさは３〜７×３ミクロンであり、分生子が互いに密着
し、直径２０〜４０ミクロンの粘球となつて、メトレの
先端にかたまりを形成する。
【００１２】上記ＦＯ−１５１３株の培養所見、形態的
特徴等に基づき、既知菌種との比較を試みた結果、本菌
株をグリオクラジウム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ）属に
属する一菌株と同定し、グリオクラジウム エスピー
．ＦＯ−１５１３と命名した。本菌株はグリオクラジウ
ム エスピー．ＦＯ−１５１３として工業技術院微生
物工業技術研究所に寄託されている。（ＦＥＲＭ Ｐ
−１２２２０号）。
特徴等に基づき、既知菌種との比較を試みた結果、本菌
株をグリオクラジウム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ）属に
属する一菌株と同定し、グリオクラジウム エスピー
．ＦＯ−１５１３と命名した。本菌株はグリオクラジウ
ム エスピー．ＦＯ−１５１３として工業技術院微生
物工業技術研究所に寄託されている。（ＦＥＲＭ Ｐ
−１２２２０号）。
【００１３】以上、ＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌につい
て説明したが、菌の一般的性状として菌学上の性状はき
わめて変異し易く、一定したものではなく、自然的にあ
るいは通常行われる紫外線照射または変異誘導体、例え
ばＮ−メチル−Ｎ−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、
エチルメタンスルホネートなどを用いる人工的変異手段
により変異することは周知の事実であり、このような人
工的変異株は勿論、自然変異株も含め、グリオクラジウ
ム属に属し、ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有
する菌株はすべて本発明に使用することができる。また
、細胞融合、遺伝子操作などの細胞工学的に変異させた
菌株も物質ＦＯ−１５１３物質生産菌として包含される
。
て説明したが、菌の一般的性状として菌学上の性状はき
わめて変異し易く、一定したものではなく、自然的にあ
るいは通常行われる紫外線照射または変異誘導体、例え
ばＮ−メチル−Ｎ−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、
エチルメタンスルホネートなどを用いる人工的変異手段
により変異することは周知の事実であり、このような人
工的変異株は勿論、自然変異株も含め、グリオクラジウ
ム属に属し、ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有
する菌株はすべて本発明に使用することができる。また
、細胞融合、遺伝子操作などの細胞工学的に変異させた
菌株も物質ＦＯ−１５１３物質生産菌として包含される
。
【００１４】本発明においては、先ずグリオクラジウム
に属するＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌が培地に培養され
る。本菌の培養においては、通常真菌の培養法が一般に
用いられる。培地としては、微生物が同化し得る炭素源
、資化し得る窒素源、さらには必要に応じて無機酸塩な
どを含有させた栄養培地が使用される。同化し得る炭素
源としては、ブドウ糖、ショ糖、糖密、デキストリン、
セルロースなどが単独または組み合わせて用いられる。
に属するＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌が培地に培養され
る。本菌の培養においては、通常真菌の培養法が一般に
用いられる。培地としては、微生物が同化し得る炭素源
、資化し得る窒素源、さらには必要に応じて無機酸塩な
どを含有させた栄養培地が使用される。同化し得る炭素
源としては、ブドウ糖、ショ糖、糖密、デキストリン、
セルロースなどが単独または組み合わせて用いられる。
【００１５】資化し得る窒素源としては、ペプトン、肉
エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・ステ
イープ・リカー、綿実粕、カゼイン、大豆蛋白加水分解
物、アミノ酸、尿素などの有機窒素源、硝酸塩、アンモ
ニウム塩などの無機窒素化合物が単独または組み合わせ
て用いられる。その他、必要に応じてナトリウム塩、カ
リウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、リン酸塩な
どの無機塩、重金属塩類が添加される。さらに、培地に
は、必要に応じて、本菌の生育やＦＯ−１５１３Ａ物質
の生産を促進する微量栄養素、発育促進物質、前駆物質
などを適当に添加してもよい。
エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・ステ
イープ・リカー、綿実粕、カゼイン、大豆蛋白加水分解
物、アミノ酸、尿素などの有機窒素源、硝酸塩、アンモ
ニウム塩などの無機窒素化合物が単独または組み合わせ
て用いられる。その他、必要に応じてナトリウム塩、カ
リウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、リン酸塩な
どの無機塩、重金属塩類が添加される。さらに、培地に
は、必要に応じて、本菌の生育やＦＯ−１５１３Ａ物質
の生産を促進する微量栄養素、発育促進物質、前駆物質
などを適当に添加してもよい。
【００１６】培養は通常振とうまたは通気攪拌培養など
の好気的条件下で行うのがよい。工業的には深部通気攪
拌培養が好ましい。培養のｐＨは中性付近で培養を行う
のが好まし。培養温度は２０〜３７℃で行い得るが、通
常は２４〜３０℃に保つのがよい。培養時間は、液体の
場合、通常２〜３日間培養を行うと、本ＦＯ−１５１３
Ａ物質が蓄積されるので、培養中の蓄積量が最大に達し
た時に、培養を終了すればよい。
の好気的条件下で行うのがよい。工業的には深部通気攪
拌培養が好ましい。培養のｐＨは中性付近で培養を行う
のが好まし。培養温度は２０〜３７℃で行い得るが、通
常は２４〜３０℃に保つのがよい。培養時間は、液体の
場合、通常２〜３日間培養を行うと、本ＦＯ−１５１３
Ａ物質が蓄積されるので、培養中の蓄積量が最大に達し
た時に、培養を終了すればよい。
【００１７】これらの培地組成、培地の液性、培養温度
、通気量などの培養条件は使用する菌株の種類や外部の
条件などに応じて好ましい結果が得られるように適宜調
節、選択されることはいうまでもない。液体培養におい
て、発泡があるときは、シリコン油、植物油、界面活性
剤などの消泡剤を適宜使用できる。
、通気量などの培養条件は使用する菌株の種類や外部の
条件などに応じて好ましい結果が得られるように適宜調
節、選択されることはいうまでもない。液体培養におい
て、発泡があるときは、シリコン油、植物油、界面活性
剤などの消泡剤を適宜使用できる。
【００１８】このようにして得られた培養物に蓄積され
るＦＯ−１５１３Ａ物質は、菌体内および培養濾液中に
含有されるので、培養物を遠心分離して培養濾液と菌体
とに分離し、各々から本ＦＯ−１５１３Ａ物質を採取す
るのが有利である。
るＦＯ−１５１３Ａ物質は、菌体内および培養濾液中に
含有されるので、培養物を遠心分離して培養濾液と菌体
とに分離し、各々から本ＦＯ−１５１３Ａ物質を採取す
るのが有利である。
【００１９】培養濾液からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取
するには、先ず培養濾液を酢酸エチル、酢酸ブチル、ベ
ンゼンなどの非親水性有機溶媒で抽出し、抽出液を減圧
濃縮して粗製のＦＯ−１５１３Ａ物質が得られる。この
粗製物質はさらに脂溶性物質の精製に通常用いられる公
知の方法、例えばシリカゲル、アルミナなどの担体を用
いるカラムクロマトグラフイーにより各々ＦＯ１５１３
Ａ物質を分離精製することができる。
するには、先ず培養濾液を酢酸エチル、酢酸ブチル、ベ
ンゼンなどの非親水性有機溶媒で抽出し、抽出液を減圧
濃縮して粗製のＦＯ−１５１３Ａ物質が得られる。この
粗製物質はさらに脂溶性物質の精製に通常用いられる公
知の方法、例えばシリカゲル、アルミナなどの担体を用
いるカラムクロマトグラフイーにより各々ＦＯ１５１３
Ａ物質を分離精製することができる。
【００２０】菌体からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取する
には、菌体を含水アセトン、含水メタノールなどの含水
親水性有機溶媒で抽出し、得られた抽出液を減圧濃縮し
、その濃縮物を酢酸エチル、酢酸ブチル、ベンゼンなど
の非親水性有機溶媒で抽出し、得られた抽出液は、前記
の培養濾液から得た抽出液と合わせて分離精製するか、
あるいは前記と同じ方法によりＦＯ−１５１３Ａ物質を
分離精製することができる。
には、菌体を含水アセトン、含水メタノールなどの含水
親水性有機溶媒で抽出し、得られた抽出液を減圧濃縮し
、その濃縮物を酢酸エチル、酢酸ブチル、ベンゼンなど
の非親水性有機溶媒で抽出し、得られた抽出液は、前記
の培養濾液から得た抽出液と合わせて分離精製するか、
あるいは前記と同じ方法によりＦＯ−１５１３Ａ物質を
分離精製することができる。
【００２１】次に、本発明のＦ−１５１３Ａ物質の理化
学的性状について述べる。 （１）分子式；Ｃ４５Ｈ８２Ｏ５ （高分解能スペクト
ルでｍ／ｚ６３０（Ｍ−４Ｈ２ Ｏ）＋ が観察された
）（２）分子量；７０２（ＦＡＢマススペクトルよりｍ
／ｚ７０３（Ｍ＋１）＋ が観察された）（３）比旋光
度；〔α〕２２Ｄ ＝＋０．４（Ｃ＝１、クロロホルム
） （４）紫外線吸収スペクトル（メタノール中）；図１の
通り （５）赤外線吸収スペクトル（四塩化炭素中）；図２の
通り
学的性状について述べる。 （１）分子式；Ｃ４５Ｈ８２Ｏ５ （高分解能スペクト
ルでｍ／ｚ６３０（Ｍ−４Ｈ２ Ｏ）＋ が観察された
）（２）分子量；７０２（ＦＡＢマススペクトルよりｍ
／ｚ７０３（Ｍ＋１）＋ が観察された）（３）比旋光
度；〔α〕２２Ｄ ＝＋０．４（Ｃ＝１、クロロホルム
） （４）紫外線吸収スペクトル（メタノール中）；図１の
通り （５）赤外線吸収スペクトル（四塩化炭素中）；図２の
通り
【００２２】（６）溶媒に対する溶解性；メタノール、
エタノール、アセトニトリル、酢酸エチル、ベンゼンに
可溶、水に不溶 （７）塩基性、酸性、中性の区別；中性（８）物質の色
、形状；無色油状 （９）プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム
中）；図３の通り。
エタノール、アセトニトリル、酢酸エチル、ベンゼンに
可溶、水に不溶 （７）塩基性、酸性、中性の区別；中性（８）物質の色
、形状；無色油状 （９）プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム
中）；図３の通り。
【００２３】次に、本発明のＦＯ−１５１３Ａ物質の生
物学的性状について述べる。ラツト由来アシルコエンザ
イムＡコレステロールアシル転位酵素に対する阻害作用
アシルコエンザイムＡコステロールアシル転位酵素活性
に対する影響は、ラツト肝ミクロソーム画分より調整し
た粗酵素を用い３００μＭ〔１−１４Ｃ〕Ｏｌｅｏｙｌ
−ＣｏＡ；３ｍｇ／ｍｌコレステロールを各々２０μｌ
（０．０２μＣｉ）；６．６７μｌ 添加し、３７℃
で３０分間反応させ、総脂質をクロロホルム：メタノー
ル（２：１）混合液で抽出した。
物学的性状について述べる。ラツト由来アシルコエンザ
イムＡコレステロールアシル転位酵素に対する阻害作用
アシルコエンザイムＡコステロールアシル転位酵素活性
に対する影響は、ラツト肝ミクロソーム画分より調整し
た粗酵素を用い３００μＭ〔１−１４Ｃ〕Ｏｌｅｏｙｌ
−ＣｏＡ；３ｍｇ／ｍｌコレステロールを各々２０μｌ
（０．０２μＣｉ）；６．６７μｌ 添加し、３７℃
で３０分間反応させ、総脂質をクロロホルム：メタノー
ル（２：１）混合液で抽出した。
【００２４】抽出後、ＴＬＣ（キーゼルゲルＧＦ２５４
、展開溶媒として石油エーテル：ジエチルエーテル：
酢酸、９０：１０：１）で各脂質を分離後、コレステロ
ールエステル画分をかきとり、液体シンチレーシヨンカ
ウンターでアシルコエンザイムＡコレステロールアシル
転位酵素活性を測定した。本酵素活性を５０％阻害する
濃度を算定した結果、ＦＯ−１５１３Ａ物質は２５μｇ
／ｍｌであつた。
、展開溶媒として石油エーテル：ジエチルエーテル：
酢酸、９０：１０：１）で各脂質を分離後、コレステロ
ールエステル画分をかきとり、液体シンチレーシヨンカ
ウンターでアシルコエンザイムＡコレステロールアシル
転位酵素活性を測定した。本酵素活性を５０％阻害する
濃度を算定した結果、ＦＯ−１５１３Ａ物質は２５μｇ
／ｍｌであつた。
【００２５】
【発明の効果】以上のように、本発明のＦＯ−１５１３
Ａ物質はアシルコエンザイムＡコレステロールアシル転
位酵素に対して著しい阻害活性を示すことから、ヒトの
コレステロール蓄積に起因する疾病の予防および治療に
有用である。
Ａ物質はアシルコエンザイムＡコレステロールアシル転
位酵素に対して著しい阻害活性を示すことから、ヒトの
コレステロール蓄積に起因する疾病の予防および治療に
有用である。
【００２６】次に、実施例を挙げて本発明を具体的に説
明する。
明する。
【実施例】５００ｍｌ容三角フラスコにグルコース０．
１％、スターチ２．４％、ペプトン０．３％、肉エキス
０．３％、イーストエキストラクト０．５％、炭酸カル
シウム０．４％を含む培地（ｐＨ７．０の調整）１００
ｍｌを仕込み、綿栓後、蒸気滅菌し、寒天培地上に生育
させたグリオグラジウム エスピー．ＦＯ−１５１３
（ＦＥＲＭ Ｐ−１２２２０）を白金耳にて無菌的に
接種し、２７℃で４８時間振とう培養して種培養液を得
た。
１％、スターチ２．４％、ペプトン０．３％、肉エキス
０．３％、イーストエキストラクト０．５％、炭酸カル
シウム０．４％を含む培地（ｐＨ７．０の調整）１００
ｍｌを仕込み、綿栓後、蒸気滅菌し、寒天培地上に生育
させたグリオグラジウム エスピー．ＦＯ−１５１３
（ＦＥＲＭ Ｐ−１２２２０）を白金耳にて無菌的に
接種し、２７℃で４８時間振とう培養して種培養液を得
た。
【００２７】一方、５０ｌ ジヤーフアーメンター１基
にグルコース１．０％、可溶性デンプン３．０％、大豆
粉２．０％、ドライイースト０．３％、塩化カリウム０
．３％、炭酸カルシウム０．２％、硫酸マグネシウム０
．０５％、リン酸カリウム０．５％、寒天０．１％（ｐ
Ｈ７．０に調整）に仕込み、蒸気滅菌冷却後、種培養し
た種培養液２００ｍｌを無菌的に移植し、攪拌速度２５
０ｒｐｍ、通気量１０ｌ ／分の培養条件下で２７℃で
７２時間、通気攪拌した。
にグルコース１．０％、可溶性デンプン３．０％、大豆
粉２．０％、ドライイースト０．３％、塩化カリウム０
．３％、炭酸カルシウム０．２％、硫酸マグネシウム０
．０５％、リン酸カリウム０．５％、寒天０．１％（ｐ
Ｈ７．０に調整）に仕込み、蒸気滅菌冷却後、種培養し
た種培養液２００ｍｌを無菌的に移植し、攪拌速度２５
０ｒｐｍ、通気量１０ｌ ／分の培養条件下で２７℃で
７２時間、通気攪拌した。
【００２８】培養後、培養液３０ｌ を酢酸エチル１８
ｌ で抽出し、抽出液を減圧濃縮して粗製物を得た。こ
の粗製物をシリカゲル（２５０ｇ、メルク社製、Ａｒｔ
．９３８５）のカラムにチヤージし、クロロホルム−メ
タノール（９：１）で溶出するカラムクロマトグラフイ
ーを行った。各フラクシヨンは１００ｍｌづつ分画し、
活性成分を含むフラクシヨンを集め、減圧乾固して粗活
性物質１．５ｇを得た。
ｌ で抽出し、抽出液を減圧濃縮して粗製物を得た。こ
の粗製物をシリカゲル（２５０ｇ、メルク社製、Ａｒｔ
．９３８５）のカラムにチヤージし、クロロホルム−メ
タノール（９：１）で溶出するカラムクロマトグラフイ
ーを行った。各フラクシヨンは１００ｍｌづつ分画し、
活性成分を含むフラクシヨンを集め、減圧乾固して粗活
性物質１．５ｇを得た。
【００２９】これを５回に分けて高速液体クロマトグラ
フイーにより分離精製した。装置はトリロータＶ（日本
分光社製）を用い、カラムはＹＭＣ−Ｐａｃｋ Ａ−
３４３（ＯＤＳ系樹脂、山村化学研究所製）を用い、溶
媒系は、８５％のアセトニトリル水を用い、検出はＵＶ
２８０ｎｍ、流速は８ｍｌ／分で行った。その結果、Ｆ
Ｏ−１５１３Ａ物質２００ｍｇを単離した。
フイーにより分離精製した。装置はトリロータＶ（日本
分光社製）を用い、カラムはＹＭＣ−Ｐａｃｋ Ａ−
３４３（ＯＤＳ系樹脂、山村化学研究所製）を用い、溶
媒系は、８５％のアセトニトリル水を用い、検出はＵＶ
２８０ｎｍ、流速は８ｍｌ／分で行った。その結果、Ｆ
Ｏ−１５１３Ａ物質２００ｍｇを単離した。
Claims (5)
- 【請求項１】 次の理化学的性質を有するＦＯ−１５
１３Ａ物質。 （１）分子式；Ｃ４５Ｈ８２Ｏ５ （高分解能スペクト
ルでｍ／ｚ６３０（Ｍ−４Ｈ２ Ｏ）＋ が観察された
）（２）分子量；７０２（ＦＡＢマススペクトルよりｍ
／ｚ７０３（Ｍ＋１）＋ が観察された）（３）比旋光
度；〔α〕２２Ｄ ＝＋０．４（Ｃ＝１、クロロホルム
） （４）紫外線吸収スペクトル（メタノール中）；図１の
通り （５）赤外線吸収スペクトル（四塩化炭素中）；図２の
通り （６）溶媒に対する溶解性；メタノール、エタノール、
アセトニトリル、酢酸エチル、ベンゼンに可溶、水に不
溶 （７）塩基性、酸性、中性の区別；中性（８）物質の色
、形状；無色油状 - 【請求項２】 グリオクラジウム属に属し、ＦＯ−１
５１３Ａ物質を生産する能力を有する微生物を培地に培
養して培養中にＦＯ−１５１３Ａ物質を蓄積せしめ、該
培養物からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取することを特徴
とするＦＯ−１５１３Ａ物質の製造法。 - 【請求項３】 グリオクラジウム属に属し、ＦＯ−１
５１３Ａ物質を生産する能力を有する微生物がグリオク
ラジウム エスピー．ＦＯ−１５１３（Ｇｌｉｏｃｌ
ａｄｉｕｍ ｓｐ．ＦＯ−１５１３ ＦＥＲＭ
Ｐ−１２２２０）である請求項３記載の製造法。 - 【請求項４】 グリオクラジウム属に属し、ＦＯ−１
５１３Ａ物質を生産する能力を有する微生物。 - 【請求項５】 微生物がグリオクラジウム エスピ
ー．ＦＯ−１５１３である請求項５記載の微生物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03162182A JP3074038B2 (ja) | 1991-06-06 | 1991-06-06 | Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03162182A JP3074038B2 (ja) | 1991-06-06 | 1991-06-06 | Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04360894A true JPH04360894A (ja) | 1992-12-14 |
| JP3074038B2 JP3074038B2 (ja) | 2000-08-07 |
Family
ID=15749575
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03162182A Expired - Fee Related JP3074038B2 (ja) | 1991-06-06 | 1991-06-06 | Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3074038B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998006867A1 (en) * | 1996-08-09 | 1998-02-19 | Yungjin Pharmaceutical Ind. Co., Ltd. | A new method for producing pravastatin precursor, ml-236b |
| WO1999041265A1 (fr) * | 1998-02-16 | 1999-08-19 | The Kitasato Institute | Nouvelles substances kf-1040 et leur procede de fabrication |
-
1991
- 1991-06-06 JP JP03162182A patent/JP3074038B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998006867A1 (en) * | 1996-08-09 | 1998-02-19 | Yungjin Pharmaceutical Ind. Co., Ltd. | A new method for producing pravastatin precursor, ml-236b |
| WO1999041265A1 (fr) * | 1998-02-16 | 1999-08-19 | The Kitasato Institute | Nouvelles substances kf-1040 et leur procede de fabrication |
| US6432682B1 (en) | 1998-02-16 | 2002-08-13 | The Kitasato Institute | Substances KF-1040 and process for producing of the same |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3074038B2 (ja) | 2000-08-07 |
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