JPH04504247A - 大環状二官能キレート剤、その錯体及びそれらの抗体接合体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

大里盆二１ｒキレート　、その許 びそれ”の′　Ａ 官能化されたキレート、または三官能コオーデイネイターは、癌または腫瘍細胞 エピトープまたは抗原に対して特異性を有する抗体に共有結合し得ることが知ら れている。このような抗体／キレート複合体の放射性核種錯体は、放射性核種を 癌または腫瘍細胞に運ぶ手段として診断用途及び／または治療用途に有益である 。例えば、メアーズ（Ｍｅａｒｅｓ）ら著、Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅａ＋、　１ ４２巻、６８〜７８頁（１９８４年）、及びタレジャレフ（Ｋｒｅｊ　ｃａｒｅ ｋ）ら著、Ｂｉｏｃｈｅｍ、　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ｒｅｓ、Ｃｏｍｍ、　 ７７巻、５８１〜５８５頁（１９７７年）を参照のこと。 アミノカルボン酸キレートが知られており、長年にわたって研究されている０代 表的なアミノカルボン酸は、ニトリロトリ酢酸（ＮＴＡ）、エチレンジアミンテ トラ酢酸（ＥＤＴＡ）、ヒドロキシエチルエチレンジアミントリ酢酸（ＨＥＤＴ Ａ）　、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、トランス−１，２−ジ アミノシクロヘキサンテトラ酢酸（ＣＤＴＡ）及び１，４，７．１０−テトラア ザシクロドデカンテトラ酢酸（ＤＯＴＡ）である、アミノカルボン酸系の多数の 三官能キレート剤が提案され調製された。 例えば、ＤＴＰへの環状酸無水物〔ハトウィッチ（ｌｌｎａｔｏｗｉｃｈ）ら著 、５ｃｊｅｎｃｅ　２２０巻、６１３〜６１５頁（１９８３年）；米国特許第４ ．４７９，９３０号）及びＤＴＰＡの混合カルボキシカルボン酸無水物〔ガンソ ウ（Ｇａｎｓｏｗ）の米国特許第４，４５４，１０６号及び同第４．４７２．５ ０９号；フレジャレフら著、Ｂｉｏｃｈｅｍ、　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓ。 Ｒｅｓ、Ｃｏａ＋ｓ＋、　７７巻、５８１〜５８５頁（１９７７年）〕が報告さ れている。酸無水物が蛋白質にカップリングされる場合、カップリングはアミド 結合の形成により進行し、こうしてジエチレントリアミン（ＤＥＴＡ）主鎖の上 にもとの５個のカルボキシメチル基のうちの４個を残す〔ハトウィッチら著、Ｉ ｎｔ、Ｊ、Ａｐｐｌ、　ｌ５ｏｔ。 ３３巻、３２７〜３３２頁（１９８２年）を参照のこと。〕その他、米国特許第 ４，４３２，９０７号及び同第４．３５２，７５１号明細書は、金属イオンを“ 有機標的分子または抗体の如き有機種”に結合するのに有益な三官能キレート剤 を開示している。上記のように、カップリングはジアミノテトラ酢酸ジ無水物の 利用によるアミド基により得られる。酸無水物の例は、ＥＤＴＡ、　ＣＤＴＡ。 プロピレンジアミンテトラ酢酸及びフェニレン１　、２−シアミンテトラ酢酸の ジ酸無水物を含む、最近の米国特許第４．６４７．４４７号明細書は、種々の診 断技術に使用するための錯形成酸のアニオンから生成された幾つかの錯塩を開示 している。ｔｆ形成酸のカルボキシル基による接合が教示されており、これはア ミド結合による連鎖を与える。 Ｊ、　ｏｆ　Ｒａｄｉｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　５７巻（ １２号）、５５３〜５６４頁（１９８０年）に於いて、バイツ（Ｐａｉｋ）らは 、′封鎖”ジエチレントリアミン、即ちビス−（２−フタルイミドエチル）アミ ンとの反応にＰ−ニトロベンジルプロミドを使用し、その後、脱ブロッキング操 作を行ないクロロ酢酸を使用してカルボキシメチル化してＮ’　−ｐ−ニトロベ ンジルジエチレントリアミンＮ、Ｎ、Ｎ″／　、Ｎ１１−テトラ酢酸を得ること を開示している。再度、結合は窒素によるものであるので、テトラ酢酸誘導体が 得られる。三官能キレート剤の接合及びインジウムによるキレート化が説明され ている。また、エチレンジアミンまたはジエチレントリアミンの如きアミンをカ ルボキシメチル化の前に通用な臭化アルキルと反応させることによる窒素原子上 の置換がエフケルマン（Ｅｃｋｅｌｍａｎ）らによりＪ。 ｏｆ　Ｐｈａｒａ＋、Ｓｃｉ、　６４巻（４号）、７０４〜７０６頁（１９７５ 年）に教示されている。これらの化合物は潜在的な放射性製薬造影剤として提案 されている。 アミノカルボン酸官能性に基く三官能キレート剤のその他の類がまた文献に良く 記載されている。こうして、サンドバーブ（Ｓｕｎｄｂｅｒｇ）、メアーズらは 、Ｊ、　ｏｆ　Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、　１７巻（１２号）　、１３０４頁（１９７ ４年）にＥＤＴＡの三官能′Ｒ偵体を開示していた。これらの化合物の代表例は 、■−（ｐ−アミノフェニル）−エチレンジアミンテトラ酢酸及び１−（ｐ−ベ ンゼン−ジアゾニウム）−エチレンジアミンテトラ酢酸である。パラ置換基によ るタンパク質へのカップリング及びキレート基への放射性金属イオンの結合が説 明されている。また、これらの化合物がＢｉｏｃｈｅ＋５ｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂ ｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｃｏｏ＋ｍｕｎｉｃａ−ｔｉｏｎｓ 　７５巻（１号）、１４９頁（１９７７年）及び米国特許第３．９９４．９６６ 号及び同第４，０４３，９９８号明細書に開示されている。 ＥＤＴＡ構造への芳香族基の結合がエチレンジアミン主鎖の炭素によることを注 目することが重要である。ＥＤＴＡ、　ＨＥＤＴＡ及びＤＴＰＡ系の光学活性二 官能キレート剤が米国特許第４．６２２．４２０号明細書に開示されている。こ れらの化合物に於いて、アルキレン基は芳香族基（これはタンパク質への結合に 必要とされる官能基を含む）をキレート官能基を含むポリアミンの炭素に連鎖す る。このような化合物に関するその他の文献は、プレチビール（Ｂｒｅｃｈｂｉ ｅｌ　）ら著、Ｉｎｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、　２５巻、２７７２〜２７８１頁（１９ ８６年）、米国特許第４．６４７，４４７号明細書及び国際特許国際公開第ＷＯ ３６１０６３８４号明細書を含む。 最近、或種の大環状三官能キレート剤及び診断用途または治療用途のためのそれ らの銅キレート複合体の使用が米国特許第４．６７８．６６７号明細書及びモイ （Ｍｏｉ）ら著、Ｉｎｏｒｇ、Ｃｈｅｍ。 ２６巻、３４５８〜３４６３頁（１９８７年）に開示されていた。三官能キレー ト分子の残部へのアミノカルボン酸官能基の結合は、環状ポリアミン主鎖の環炭 素による。こうしてまた、環状アミンの環炭素に一端で結合されたリンカ−は、 タンパク質と反応し得る官能基にその一端で結合される。 また、注目に値する三官能キレート剤の別の類は、分子のキレート部分、即ちア ミノカルボン酸がタンパク質と反応し得る部分を含む分子の官能基に窒素を介し て結合される化合物からなる。−例として、ミコラ（Ｍｉｋｏｌａ）らは、特許 出願（国際特許国際公開第ＷＯ３４１０３６９Ｂ　、１９８４年９月２７日に国 際公開）明細書に、ｐ−ニトロベンジルプロミドをＤＥＴＡと反応させ、その後 ブロモ酢酸と反応させてアミノカルボン酸をつくることにより調製された三官能 キレート剤を開示している。 ニトロ基は相当するアミン基に還元され、その後チオホスゲンとの反応によりイ ソチオシアネート基に変換される。これらの化合物は、診断薬剤として使用する ために生物有機分子に接合し得るランタニドをキレート化し得る三官能キレート 剤である０分子のリンカ一部分の結合はアミノカルボン酸の窒素の一つによるの で、一つの有効なアミノカルボキシル基がキレート化のために失なわれる。こう して４個（５個ではない）の酸基を含むＤＥＴＡ系二官能キレート剤が調製され る。 これに関して、この類の三官能キレート剤は、蛋白質への結合がアミド基による ものであり、その後カルボキシルキレート基が失なわれるキレートに類似する。 最近、カー＝　イ（Ｃａｒｎｅｙ）、ロジャース（Ｒｏｇｅｒｓ）、及びジョン ソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ　）は、“八ｂｓｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃａ ｌｌｙ旧ｇｈｅｒＴｉｓｓｕｅ　Ｕｐｔａｋｅ　ｆｒｏｍ　Ｉｎｄｉｕｍ−１１ １Ｌａｂｅｌｅｄ　Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　：　Ｃｏ−ａｄｍｉｎｉｓｔｒａＬ ｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｎｄｉｕｍ−１１１ａｎｄ　Ｉｏｄｉｎｅ−１２５Ｌａｂｅｌ ｅｄＢ７２．３　ｉｎ　ａ　Ｎｕｄｅ　Ｍｏｕｓｅ　Ｍｏｄｅｌ”及び”Ｉｎｆ ｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ＣｈｅｌａｔｏｒＤｅｎｔｉ−ｃｉｔｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　 Ｂｉｏｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｎｄｉｕｍ−１１１Ｌａｂｅｌｅｄ Ｂ７２．３１ｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ　ｉｎ　Ｎｕｄｅ　Ｍｉｃｅ”　 と題するアブストラクト（癌に関するモノクローナル抗体の第３回国際会議；サ ンジエゴ、カリフォルニア、１９８８年２月４日〜６日）を開示した。ＥＤＴＡ 及びＤＴＰＡ二官能キレート剤でキレート化したインジウム−１１１の生体分布 が開示されている。　ＥＤＴＡ／ＤＴＰＡ部分への芳香族環の結合はアセテート メチレンによる。また、最近の会議〔バイオテクノロジーに於ける化学に関する フロリダ会議、１９８８年４月２６日〜２９日、パーム・コースト、フロリダ州 〕で、Ｄ、に、ジョンソンらは、ｐ−イソチオシアナートベンジル部分がカルボ キシメチル基の一つのメチレン炭素で結合されるＥＤＴＡ及びＤＴＰＡの三官能 誘導体を開示していた。既に、ラクト（Ｈｕｎｔ）らは米国特許第４，０８８， ７４７号及び同第４．０９１，０８８号（１９７８年）明細書に、ＥＤＤ＾部分 への芳香族環の結合がアルキレンまたはアセテートメチレンによるエチレンジア ミンジ酢酸（ＥＤＤ＾）系キレート剤を開示していた。これらの化合物はへパト ビリアリイ（ｈｅｐａＬｏｂｉｌｉａｒｙ）作用を研究するためのキレート剤と して有益であると教示されている。好ましい金属はテクネチウム−９９■である 。また、インジウム−１１１及びインジウム−１１３ｍが造影用に有益な放射性 核種として教示されている。 それ故、容易に解離せず、所望の組織以外の全生体の迅速なりリアランスを示し 、且つ抗体と接合して所望の結果を生じる錯体を提供することが有利である。 添付図面に於いて、図は以下のように説明し得る。 第１図〜第７図及び第１５図〜第２１図は、本発明の１ｓ３Ｓ−を含む複合体と して投与された１５１８−の生体分布を示す、抗体ＣＣｎｖ−ＩｇＧを本発明の 複合体中に使用した。生体分布を、１、Ｓ　１７４−Ｔｔｓ瘍を有するヌードマ ウスで測定した。 第８図〜第１４図及び第２２図〜第２８図は、本発明の１Ｓ３Ｓ−を含む複合体 として投与された１ｓ３ｓＩＩの生体分布を示す０本発明の複合体は抗体フラグ メントとしてＣＣ４＊−Ｆ（ａｂ’　）ｉを使用した。生体分布を、ＬＳ　１７ ４−Ｔ［ｒ＠を有するヌードマウスで測定した。 第２９図〜第３４図は、”’Ｌｕ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）または”’Ｌｕ（ＰＡ− ＤＯＴＡ）を含む複合体としてＩ？？Ｌ、の生体分布を示す、複合体は抗体とし てＣＣ，、−１ｇＧを使用した。生体分布を、ＬＳ　ｌ７４−Ｔｌ１ｌ瘍を有す る（ｂａｌｂ／ｃ）マウスで測定した。 驚くことに、本発明の錯体及び／または複合体は比較的安定であり（即ち、容易 に解離せず）、成るものは全身並びに肝臓、腎臓及び骨の如き一部の非標的器官 から迅速なりリアランスを示す。 本発明は、夫々がキレート官能基、及び生物分子に共有結合するための化学的に 反応性の基を含む新規な三官能キレート剤の設計及び合成を含む、また、種々の 三官能コオーディネイト（ＢＦＣ）−金属錯体の調製方法並びに診断用途及び／ または治療用途に通した放射性核種（例えば、サマリウム−１５３、ルテチウム −１７７及びイツトリウム−９０）でラベルした抗体及び／またはフラグメント を調製するための抗体への錯体の連鎖が本発明の一部を形成している。 本発明は金属イオン、特に希土類型化学作用を有する“放射性”金属イオンと錯 体を形成する新規な三官能キレート剤に関する。好ましい希土類型金属イオンは 、Ｌａ＋　Ｃｅ＋　Ｐｒ、　Ｎｄ＋Ｐｍ、　Ｓｒｓ、　Ｅｕ、　Ｇｄ、　Ｔｂ、 　Ｄｙ、　Ｈｏ、　Ｅｒ、　Ｔｔｓ、　Ｙｂ＋　Ｌｕ、　Ｙ及びＳｃを含み、５ Ｌｌｌ、　ｌｌｏ、　Ｙ及びＬｕが特に好ましい。好ましい放射性希土類型金属 イオンは、１ｓ３５．　＋６６Ｈ，９０ｙ、　１ｌｌｐＩＩ、ＩＳ？Ｑｄ。 ”’Ｌａ＋　”’Ｌｕ＋　１７’Ｙｂ＋　”Ｓｃ　、及び目ｔＰｒを含み、ｌ５ ３Ｓ１１゜１６６Ｈｏ、　９０ｙ及び＋７？ｌｕが特に好ましい。重要であり得 るその他の放射性金属イオンは４’ｌＳ、　９９ｍ７ｃ、＋ｓｉＲ，＋１１１１ １？ｅ、　９’７Ｒｕ。 ＋ｏｓＲｈ、　＋６９ｐｄ、　＋９マＰｔ、”Ｃｕ、　””Ａｕ、　”’Ａｕ、 　”Ｇａ、　”Ｇａ。 目ＩＩ、、　Ｉ＋３＋＋＋ｌｎ、　ＩＩｓ鋤１ｎ、　Ｉｌ？ｍｓ、、及びＺ　Ｌ 　Ｚ　ｐ　ｂ／　ｔ　ｌ　１Ｂｉである。 このようにして形成された錯体は抗体またはそのフラグメントに結合（共有結合 ）でき、治療目的及び／または診断目的に使用できる。錯体及び／または複合体 は生体内または試験管内の使用のために製剤化し得る。製剤化した複合体の好ま しい用途は、動物、特にヒトの癌の治療である。 また、癌の如き疾患状態の診断及び／または治療のために非放射性金属を含む本 発明の錯体及び／または複合体の使用が可能である。このような使用は、過温症 （特開間第６１−１５８．９３１号）及び螢光免疫案内治療（ＦＩＧＳ）　（Ｋ 、ペッダーリン（Ｐｅｔｔｅｒｓｓｏｎ）ら著、Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉ ｓｔｒｙ　２９巻（１号）、６０〜６４頁（１９８３年）及びＣ，メアーズら著 、Ａｃｃ、　Ｃｂｅｍ、　Ｒｅｓ。 １７巻、２０２〜２０９頁（１９８４年）〕を誘導するために高周波を使用する 非放射性金属に関して知られている。 更に詳しくは、本発明は次式の化合物またはその製薬上許容し得る塩に関する。 （Ｉ） 式中： 各Ｑは独立に水素または（ＣＨ［ｉ”　）ｐＣ（ｈＲであり；ＱＩは水素ｔタハ （ＣＨＲ”　）ｗｃＯｚＲ”ｔ？アリｉ各Ｒは独立に水素、ベンジルまたはＣ６ 〜Ｃ４アルキルであり； 但し、Ｑ及びＱｌの合計のうち少なくとも二つは水素以外である必要があり； 各ＲＳ　ｒは独立に水素、０１〜Ｃ４アルキルまたは−（Ｃ。 −Ｃｔアシルル）フェニルであり； Ｘ及びＹは夫々独立に水素であり、あるいは隣りのＸ及びＹと一緒になって付加 的な炭素−炭素結合を形成してもよく；ｎは０または１であり； ｍはＯ〜１０の整数であり； ｐは１または２であり； ｒはＯまたは１であり； Ｗは０または１であり； 但し、Ｘ及び／またはＹが付加的な炭素−炭素結合を形成する場合にはｎは１で あり、且つｒ及びＷの合計は０または１であり； Ｌはそれが結合される炭素原子に共存結合されたリンカ−／スペーサー基であり 、それらの炭素原子のうちの一つの１個の水素原子を置換し、前記のリンカ−／ スペーサー基は次式により表わされ、 式中： ＳはＯまたは１の整数であり； ｔは０〜２０の整数であり； Ｒ１は抗体もしくはそのフラグメントへの共有結合を可能にする電子部分もしく は核部分、または抗体もしくはそのフラグメントに結合し得る合成リンカ−２ま たはその前駆体であり；且つ Ｃｙｃは脂環式部分、芳香族部分、脂肪族複素環部分、または芳香族複素環部分 を表わし、前記の部分の夫々は抗体または抗体フラグメントへの結合を妨害しな い１個以上の基で必要により置換されてもよく；但しｓ　、　ｔ　、ｍ、　ｒ及 びｎがＯである場合にはＲ１はカルボキシル以外である。 式（Ｉ）の化合物の好ましい特徴は、Ｒが水素であり、Ｒ５がＨまたはメチルで あり；ｎがＯであり；ｍが０〜５゛であり；ｒが０であり；且つＬが次式の化合 物であり；Ｒ２は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド 、チオセミカルバジド、カルボキシル、ブロモアセトアミド及びマレイミドから なる群から選ばれ；Ｒ３はＣ，−Ｃ，アルコキシ、　０ＣＨｚＣＯＪ、ヒドロキ シ及び水素からなる群から選ばれ； Ｒ４は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミ カルバジド、カルボキシル、ブロモアセトアミド及びマレイミドからなる群から 選ばれ；但し、Ｂｔ及びＲ４は両方とも水素であることはないが、Ｒ２及びＲ４ のうち一つは水素である必要がある化合物；またはその製薬上許容し得る塩であ る。 本発明の複合体が所望される場合、Ｒ２及びＲ４はニトロ以外である必要がある 。Ｒ２またはＲ４がニトロである場合には、リンカ一部分（Ｌ）の前駆体が存在 する。この前駆体部分は式（Ｉ）の化合物の調製のためＲ３またはＲ４に関して 形成される部分であって抗体または抗体フラグメントに結合しない如何なる部分 であり得る。 また、本発明は希土類型金属イオン錯体、特に放射性の中性もしくは荷電された 希土類型金属イオン錯体、並びに前記の錯体及び抗体または抗体フラグメントに より形成された複合体に関する。加えて、本発明はまた本発明の複合体及び製薬 上許容し得る担体を存する製剤、特に製薬上許容し得る担体が液体である製剤に 関する。また、本発明は有効量の製剤を哺乳類に投与することを含んでなる哺乳 類の疾患状態、特に癌の診断方法または治療方法を含む。 本明細書で使用される下記の用語は、これらの意味を有する。Ｒ’、Ｒ”または Ｒ４の定義に関して、請求電子”部分は、イソチオシアネート、ブロモアセトア ミド、マレイミド、イミドエステル、チオフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシスクシ ニミルエステル、ピリジルジスルフィド、及びフェニルアジドを含むが、これら に限定されない。好適な請求核”部分は、カルボキシル、アミノ、アシルヒドラ ジド、セミカルバジド、及びチオセミカルバジドを含むが、これらに限定されな い。 “合成リンカ−°°は抗体または抗体フラグメントに共有結合し得る合成の有機 もしくは無機のリンカ−を含み、好ましい合成リンカ−は患者の血清中で安定で あるが放射性複合体に関してクリアランスの器官内で開裂の可能性を有する生物 分解性の合成リンカ−１例えば生物分解性のペプチドまたはペプチド含有基であ る請求電子部分のうち、イソチオシアネートが好ましく請求核部分のうち、アミ ノ、セミカルバジド及びチオセミカルバジドが好ましい　Ｒ１の種類及び／また は位置は、それがキレート化反応をかなり妨害しないようなものであることが望 ましい。 式（１）中の“Ｘ−Ｃ−Ｙ”という用語は、隣接炭素原子間の二重結合または三 重結合の任意の存在を表わす。不飽和結合は、式（Ｉ）中の“ｍ”という用語に より特定される０〜１０個の炭素原子の鎖長中に独立に存在してもよい。 本明細書に使用される“哺乳類”という用語は、乳腺により分泌される乳により 幼動物を育てる動物、好ましくは温血哺乳類、更に好ましくはヒトを意味する。 “抗体”は、あらゆるポリクローナル、モノクローナル、キメラ抗体または異種 抗体、好ましくはモノクローナル抗体を云う、°°抗体フラグメント”はＦａｂ フラグメント及びＦ（ａｂ’　）ｚフラグメント、並びに所望の一種以上のエピ トープに対して特異性を有する抗体のあらゆる部分を含む“金属キレート／抗体 複合体”または“複合体”という用語を使用する場合、“抗体”部分は全抗体及 び／または抗体フラグメントを含み、それらの半合成変異体または遺伝子操作し た変異体を含むことを意味する。 本明細書で使用される“錯体”は、希土類型金属イオン、特に放射性希土類型金 属イオンで錯形成された本発明の化合物、例えば式（１）の化合物を云い、この 場合、少なくとも一種の金属原子がキレート化され、または封鎖される。“放射 性金属イオンキレート／抗体複合体”または“放射性金属イオン複合体”は抗体 または抗体フラグメントに共有結合される放射性金属イオン複合体を云う。“金 属イオン”という用語と組合せて使用される場合の“放射性°゛は、粒子及び／ または光子を放出する希土類型元素の一種以上の同位元素、例えばｌ５３５１Ｉ ｌ、＋＆６１１．９１１Ｙ、　１４９ＰＩｌｌ、　１５９ｃｄ、　＋４０１．、 　＋７？ｌ、。 １’１ＳＹ１．４？Ｓｃ１及び１４！ｐｒを云う、“三官能コオーディネイター パ、“三官能キレート剤°”及び“°官能化キレート剤”とトに共有結合する手 段として利用できるキレート剤部分に共有結合されたリンカ−／スペーサー部分 及び金属イオンをキレート化し得るキレート剤部分を有する化合物を云う。 本明細書に使用される°“製薬上許容し得る塩゛°は、哺乳類の治療または診断 に有益であるように充分無毒性である式（１）の化合物のあらゆる塩を意味する 。こうして、これらの塩は本発明によれば有益である。有機源及び無機源の両方 から、通常の方法により生成されるこれらの塩の代表例は、例えば、硫酸、塩酸 、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、バルミチ ン酸、胆汁酸、パーモン酸（ｐａｌｍｏｉｃ　ａｃｉｄ）、粘液酸、グルタミン 酸、α−シツウノウ酸、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ギ酸、 ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン 酸、ソルビン酸、ピクリンＬ安息香酸、ケイ皮酸及びその他の好適な酸を含む、 また、アンモニウムイオン、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、及 びその他の同様なイオンの如き有機源及び無機源の両方から通常の反応により生 成される塩が含まれる。塩がカリウム、ナトリウム、アンモニウム、またはこれ らの混合物である式（１）の化合物の塩が特に好ましい。 勿論、式（１）の化合物の遊離酸が使用でき、また、例えばカルボキシレート及 び／または窒素原子がプロトン化される場合、即ちＲ１塩が生成される場合には 、これらの化合物のプロトン化形態が使用できる。 式（Ｉ）の好ましい化合物は、Ｑｌが水素でありＬが次式により示されるような 式Ａにより表わされる化合物またはその製薬上許容し得る塩を含む。 （エエ）Ｑ 式中： 各Ｑは独立に水素またはＣＩＩＲ’ＣＯ，ｌｌであり；夫々のＲは独立に水素、 ベンジルまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、Ｑの少なくとも二つは水素以外である必要があり；ｍはＯ〜５の整数であ り； Ｒ２は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミ カルバジド、カルボキシル、ブロモアセトアミド及びマレイミドからなる群から 選ばれ；Ｒ３はＣ１〜Ｃ４アルコキシ、　０ＣＨｚＣＯｔＨ−ヒドロキシ及び水 素からなる群から選ばれ； Ｒ４は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミ カルバジド、カルボキシル、ブロモアセトアミド及びマレイミドからなる群から 選ばれ；各Ｒ５は独立に水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；但し、Ｒ２及び Ｒ４は両方とも水素であることはないが、Ｒｔ及びＲ４の一つは水素である必要 がある。 Ｒ３及びＲ４が共に水素である式（ｎ）に於いて、これらの化合物またはその製 薬上許容し得る塩は次式により表わされる。 各Ｑは独立に水素またはＣＨＲ’ＣＯ□Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル またはＣ１〜Ｃ，アルキルであり； 但し、Ｑの少なくとも二つは水素以外である必要があり；ｍはＯ〜５の整数であ り； ＲＺはニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミカルバ ジド、カルボキシル、ブロモアセトアミド及びマレイミドからなる群から選ばれ ；夫々のＲｓは独立に水素またはＣ，〜Ｃ，アルキルである。 Ｒ２が水素である式（ＩＩ）に於いて、これらの化合物またはその製薬上許容し 得る塩は次式により表わされる。 （ｍ　Ｑ 式中： 夫々のＱは独立に水素またはＣＩＩＲ’ＣＯ□Ｒであり；夫々のＲは独立に水素 、ベンジルまたは０１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、Ｑの少なくとも二つは水素以外である必要があり；ｍは０〜５の整数であ り； Ｒ：ＩはＣ３〜Ｃ４アルコキシ、−０ＣＨ，ＣＯ□Ｈ及びヒドロキシからなる群 から選ばれ； Ｒ４はニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミカルバ ジド、カルボキシル、ブロモアセトアミド、及びマレイミドからなる群から選ば れ；各Ｒ５は独立に水素または０１〜Ｃ４アルキルである）式（１）の更に好ま しい化合物は、少なくとも一つのＱが水素であり次式により表わされる化合物ま たはその製薬上許容し得る塩を含む。 （Ｖ） 式中： 各Ｑは独立に水素またはＣＨＲ’ＣＯＪであり；Ｑ’は水素または（ＣＯＨ２） 、Ｃｏ、Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジルまたはＣ，−Ｃ，アルキルであ り； 但し、Ｑ及びＱ’の合計の少なくとも二つは水素以外である必要があり且つＱの 一つは水素であり；ｍは０〜５の整数であり； Ｗは０または１であり； Ｒ２は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミ カルバジド、カルボキシル、マレイミド及びブロモアセトアミドからなる群から 選ばれ；Ｒ３はＣ２〜Ｃ４アルコキシ、　０ＣＨｚＣＯｔ）Ｉ、ヒドロキシ及び 水素からなる群から選ばれ； Ｒ４は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミ カルバジド、カルボキシル、マレイミド及びブロモアセトアミドからなる群から 選ばれ；各Ｒ５は独立に水素または０１〜Ｃ４アルキルであり；但し、Ｒ２及び Ｒ４は両方とも水素であることはないがＲｚ及びＲ４の一つは水素である必要が ある。 式（１）のその他の好ましい化合物は、Ｑ’がＣＯ□Ｒ（ｗ＝０）であり次式に より表わされる化合物またはその製薬上許容し得る塩を含む。 （’ＶＩ） 式中： 各Ｑは独立に水素またはＣＨＲ’ＣＯ□Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル または０１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、少なくとも一つのＱは水素以外である必要があり；ｍは０〜５の整数であ り； Ｒ２は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミ カルバジド、カルボキシル、マレイミド及びブロモアセトアミドからなる群から 選ばれ；Ｒ３は０１〜Ｃ４アルコキシ、−０ＣＪＣＯＪ、ヒドロキシ及び水素か らなる群から選ばれ； Ｒ４は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミ カルバジド、カルボキシル、マレイミド及びブロモアセトアミドからなる群から 選ばれ；各Ｒ５は独立に水素または０１〜Ｃ４アルキルであり；但し、Ｒ２及び Ｒ４は両方とも水素であることはないがＲｚ及びＲ４の一つは水素である必要が ある。 式（Ｖｌ）の幾つかの好ましい化合物は、Ｒ３及びＲ４が共に水素である化合物 であり、これらの化合物またはその製薬上許容し得る塩は次式により表わされる 。 （Ｖｌ工） 式中： 各Ｑは独立に水素またはＣＨＲ’Ｃ０２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、少なくとも一つのＱは水素以外である必要があり；ｍは０〜５の整数であ り； Ｒ２はニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミカルバ ジド、カルボキシル、プロモアセトアミド及びマレイミドからなる群から選ばれ ；各Ｒ５は独立に水素またはＣ３〜Ｃ４アルキルである。 式（Ｖｌ）のその他の好ましい化合物は、Ｒ２が水素であり次式により表わされ る化合物またはその製薬上許容し得る塩である。 （Ｖエエエ） 式中： 各Ｑは独立に水素またはＣＩＩＲ’Ｃ０ｚＲであり；各Ｒは独立に水素、ベンジ ルまたはＣ６〜Ｃ４アルキルであり； 但し、少なくとも一つのＱは水素以外である必要があり；ｍはＯ〜５の整数であ り； ＲコはＣ，−Ｃ，アルコキシ、　０ＣＨｚＣＯｄｌ、及びヒドロキシからなる群 から選ばれ； Ｒ４はニトロ、アミノ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チオセミカルバ ジド、カルボキシル、マレイミド及びブロモアセトアミドからなる群から選ばれ ；各Ｒ５は独立に水素または０１〜Ｃ４アルキルである。 体は、所望の一種以上のエピトープに対して高い特異性を有本明細書に記載され たー官能キレート剤〔式（１）〜（■）のいずれか一つにより表わされる〕は、 金属イオンキレート（また、本明細書中で“錯体”と称される）を生成するよう に希土類型金属イオン、特に放射性希土類型金属イオンをキレート化または封鎖 するのに使用し得る。錯体は、官能化部分〔式（１）中“Ｒ１”により表わされ る〕の存在のため、官能化ポリマー支持体の如き官能化支持体に結合でき、ある いは好ましくは、Ｌが式（Ａ）を表わし且つＲ３及びＲ４がニトロ以外である必 要がある式（１）の錯体の場合には、タンパク質または更に詳しくは抗体または 抗体フラグメントに共有結合し得る。こうして、本明細書に記載された錯体（希 土類型金属イオン、特に放射性希土類型金属イオンと錯形成された弐ｌ〜■のい ずれか一つにより表わされる）は、抗体または抗体フラグメントに共有結合でき 、本明細書中で°“複合体゛°と称される。 本明細書中に記載された複合体中に使用し得る抗体または抗体フラグメントは、 当業界で公知の技術により調製し得る。 高度に特異的なモノクローナル抗体は、当業界で公知のハイブリダイゼーション により生産し得る。例えば、コーラ−（Ｋｏｈｌｅｒ）及びミルスティン（Ｍｉ ｌｓｔｅｉｎ）著［ＮａＬｕｒｅ　２５６巻、４９５〜４９７頁（１９７５年） ；及びＥｕｒ、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ　、　６巻、５１１〜５１９頁（１９７６年 ）〕を参照のこと。このような抗体は、通常高度に特異的な反応性を有する。放 射性金属イオン複合体に於いて、所望の抗原またはハブテンに対して向けられる 抗体が使用し得る。放射性金属イオン複合体中に使用される抗（式中：Ｌｎは するモノクローナル抗体、またはそのフラグメントであることが好ましい。本発 明に使用される抗体は、例えば、腫瘍、バクテリア、菌類、ウィルス、寄生虫、 マイコプラズマ、分化その他の細胞膜抗原、病原体表面抗原、毒素、酵素、アレ ルゲン、薬剤及びあらゆる生物活性分子に対して向けられる。 抗体または抗体フラグメントの幾つかの例は、ＣＣ−１１，ＣＣ−４６゜ＣＣ− ４９，ＣＣ−４９Ｆ（ａｂ’　）＊＋　ｃｃ−８３，ＣＣ−８３Ｆ（ａｂ’　） ｚ、及び８７２．３である。（ＣＣ−４９，ＣＣ−８３及び８７２．３抗体に関 して、Ｄ、コルチー？　−（Ｃｏｌｃｈｅｒ）　ら著、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、 　４８巻、４５９７〜４６０３頁（１９８８年、８月１５日）を参照のこと〕。 ハイプリドーマ細胞系８７２．３はザ・アメリカン・タイプ・カルチャー・コレ クション（ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅ ｃｔｉｏｎ）（ＡＴＣＣ）に寄託され、登録番号ＨＢ８１０８を有する。種々の ＣＣ抗体が、１９８７年７月１５日に出願された米国特許出願第７−０７３．６ ８５号明細書（これはＮＴｌ５により入手し得る）に開示されている。その他の ネズミモノクローナル抗体はＴＡＧ−７２、腫瘍関連抗原のエピトープに結合す る。抗原の更に完全なリストが米国特許第４，１９３．９８３号明細書（これは 本明ｍ書に参考として含まれる）に見られる０本発明の放射性金属イオン複合体 は種々の癌の診断及び治療に特に好ましい。 本発明の好ましい希土類型（ランタニドまたは擬似ランタニド）錯体は、次式に より表わされる。 Ｃ（Ｌｎ　（ＢＦＣ）　） （ＩＸ） Ｃｅ’や、Ｐｒ’◆、Ｎｄ”、Ｐ＋ａ’３　５ｍ”、Ｅｕ３＊、Ｇｄ３＊、　Ｔ ｂ”、ｐ、１゜Ｈｏ”、　Ｅｒ”、　Ｔｅａ’・、　ｙｂ”及びＬｕ”の如き希 土類金属（ランタニド）イオン、またはＳｃ”、Ｙ”及びＬａ３°の如き擬似ラ ンタニド金属イオンであり（特に好ましい金属イオンはＹ”＋ＨＯ”ｌ　Ｌｕ” または５ｌ１３′″である）；ＢＦＣは二官能キレート剤を表わし；Ｃは全錯体 を中性にするのに充分な電荷の製薬上許容し得るイオンまたは複数のイオンの基 を表わす）ＢＦＣが４個以上の負に荷電された部分を含む場合、ＣはＨ”　＋　 Ｌｉ’　＋　Ｎａ”　＋　Ｋ”　ｔ　Ｒｂ”　、　Ｃｓ”　＋　Ｍｇ”　＋　Ｃ ａ”　＋　Ｓｒ”＋Ｂａ”　＋　ＮＨ４”　＋　Ｎ（ＣＨｓ）ａ”　＋　Ｎ（Ｃ ｚＨｓ）ｎ。、　Ｎ（ＣＪｔ）ａ”　。 Ｎ（Ｃ４Ｈ９）４”　Ｉ　Ａｓ（Ｃ６１１ｓｌａ”ｌ　（（ＣｉＨｓ）ｚＰ＝） 　Ｊ”及びその他のプロトン化アミンの如きカチオンまたは複数のカチオンの基 である。ＢＦＣが３個の負に荷電された部分を含む場合、Ｃは必要とされない。 ＢＦＣが２個の負に荷電された部分を含む場合、ＣはＦ−、ＣＩＡ−、Ｂｒ　− 、ド、　１０４−　、　ＢＰ、−。 ＨｔＰＯａ−ＩＨＣＯｆｆ−、ＨＣＯ□−、ＣＨｘＳＯｉ−、ＨｓＣ−ＣｈｋＩ ａ−５０！−。 ＰＦｈ−、ＣＨｓＣＯｔ−及びＢ（Ｃ４Ｈ６）　４−の如きアニオンである。 本発明の複合体、及び成る場合には本発明の錯体は、製剤として使用し得る。製 剤は抗体及び／または金属イオンを含む式（Ｉ）の化合物及び生理学上許容し得 る担体、賦形剤またはビレクルを含む、こうして、製剤は錯体（金属イオン士リ ガンド）、複合体（金属イオン士すガンド＋抗体）または（リガンド＋抗体）を 含む生理学上許容し得る担体からなり得る。このような製剤の調製方法は公知で ある。製剤は懸濁液、注射溶液またはその他の好適な製剤の形態であってもよい 。アジュバントと共に、またはアジュバントを使用しない生理学上許容し得る懸 濁媒体が使用し得る。 本発明の製剤は、リガンドにより錯形成された活性な放射性核種を含む固体形態 または液体形態である。これらの製剤は、二成分（即ち、リガンドと金属、錯体 と抗体、リガンド／抗体と金属）が使用前の適当な時に混合されるようなキット 形態であってもよい。予備混合されるにしても、またはキットとして使用される にしても、製剤は通常製薬上許容し得る担体を必要とする。 本発明の注射用組成物は、懸濁液または溶液形態のいずれであってもよい。好適 な製剤の調製に於いて、一般に、塩の水溶解性は酸形態よりも大きいことが認め られる。溶液形態では、錯体（または、所望の場合、別個の成分）が生理学上許 容し得る担体に溶解される。このような担体は好適な溶剤、必要によりベンジル アルコールの如き防腐剤、及び緩衝剤を含む、有益な溶剤は、例えば、水、水性 アルコール、グリコール、及びリン酸エステルまたは炭酸エステルを含む、この ような水溶液は５０容量％以下の有機溶剤を含む。 注射用懸濁液は、担体として液体懸濁媒体（アジュバントを含み、またはそれを 含まない）を必要とする本発明の組成物である。懸濁媒体は、例えば、水性ポリ ビニルピロリドン、植物油もしくは高度に精製された鉱油の如き不活性油、また は水性カルボキシメチルセルロースであり得る。必要により錯体を懸濁液中に保 つ場合には、好適な生理上許容し得るアジュバントが、カルボキシメチルセルロ ース、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、及びアルギネートの如き増粘剤の中が ら選ぶことができる。また、多くの表面活性剤、例えば、レシチン、アルキルフ ェノール、ポリエチレンオキサイド付加物、ナフタレンスルホネート、アルキル ベンゼンスルホネート、及びポリオキシエチレンソルビタンエステルが懸濁剤と して有効である。 液体懸濁媒体の親水性、密度、及び表面張力に作用する多くの物質が、個々の場 合に注射用懸濁液をつくることを助けることがある。例えば、シリコーン消泡剤 、ソルビトール、及び糖が全て有効な懸濁剤である。 “°有効量”の製剤が治療に使用される。投薬量は、治療される疾患に応じて変 化する。試験管内診断は本発明の製剤を用いて行ない得るが、また本発明の製剤 を使用する生体内診断が意図される。また、本発明の複合体及び製剤が放射免疫 真向外科手術（ＲｒＧＳと称する）に使用し得る。しかしながら、またこの目的 に使用し得るその他の金属は９９″”ＴＣ＋　”’Ｉｎ。 ＋１！＠ｌ、　６’ｌＧａ及び６１Ｇａを含む。 本発明のキレート剤の幾つかのその他の用途は、例えば、式Ｉの錯体、特にＧｄ ″３と式Ｖｌとの錯体に関して、磁気共鳴造影、例えば診断薬剤として種々の目 的のためのポリマー支持体への結合、及び選択抽出によるランタニド金属または 擬似ランタニド金属イオンの除去を含み得る。 本発明はキレート剤、錯体、及び抗体複合体を提供するものであり、これらの成 るものは当業界で既知のものよりも安定であり、かつ／または改良された生体分 布を有し、がっ／または生体からの迅速なりリアランスを有する。また、本発明 のキレート剤、錯体、及び抗体複合体の調製方法が提供される。 式（Ｉ）により表わされる本発明の１２員の大環状の三官能キレート剤の妥当な 全般の合成方法は、適当な電子試薬（例工ば、適当に置換されたα−ハロカルボ ン酸エステル）で窒素原子の一つのみの位置に於ける遊離塩基大環状化合物（例 えば、１．４，７．１０−テトラアザシクロドデカン）のモノ官能化を伴なう、 この電子試薬は、タンパク質、抗体または抗体フラグメントへの三官能リガンド の共有結合を可能にする好適なリンカ一部分または適当に保護されたリンカ一部 分を有する必要がある。 モノ−Ｎ−官能ポリアザ大環状化合物の製造のためのアルキル化技術は、生成物 を分離し難い混合物をもたらす場合があることが当業界で認められている（Ｔ、 カデン（Ｋａｄｅｎ）著、Ｔｏｐ、Ｃｕｒｒ、Ｃｈｅｍ、　１２１＠、１５７〜 １７５頁（１９８４年）を参照のこと〕。この問題は、モノアルキル化付加物の 生成を有利にする大過剰量の大環状化合物の報告された使用により解決されたＣ Ｍ、スチューダ−（Ｓ　ｔｕｄｅｒ）及びＴ、Ａ、カダン著、）Ｉｅｌｕ、Ｃｈ ｉｍ。 Ａｃｔａ　６９巻、２０８１〜２０８６頁（１９８６年）；Ｅ、キムテ（Ｋｉｍ ｕｒａ）ら著、Ｊ、Ｃｈｅｓ、Ｓｏｃ、Ｃｈｅｍ、Ｃｏｎ＋ｍｕｎ、　１１５８ 〜１１５９頁（１９８６年）を参照のこと〕。 モノ−Ｎ−官能ポリアザ大環状化合物へのその他の経路は、長時間の保護、官能 化、及び脱保護反応機構を伴なう（ｐ、ｓ。 バラジシニ（Ｐａｌｌａｖｉｃｉｎｔ）　ら著、Ｊ、Ａａ＋ｅｒ、Ｃｈｅａ＋、 Ｓｏｃ、　１０９巻、５１３９〜５１４４頁（１９Ｂ７年）；Ｍ、Ｆ、トウイー トル（Ｔｗｅｅｄ　ｌｅ）　ら著、Ｅｕｒ、Ｐｕｂ、Ｐａｔ、Ａｐｐｌｎ、　Ｎ ｏ、０２３２−７５１を参照のこと〕。置換フェニルピルビン酸とアミンの還元 アミン化の最近の論文が、最近の会ｍ　（Ｄ、に、ジョンソンら、生物工学に於 ける化学に関するフロリダ会議、１９８８年４月２６日〜２９日、パーム・コー スト、フロリダ州）のアブストラクトとしてアボッ′ト・ラボラトリイズ（Ａｂ ｂｏｔｔ　Ｌａｂｓ、）により発行された。プロトン転移を促進しない溶媒中で 約１〜５当量の好適な大環状化合物と共に電子試薬を使用することによりモノ− Ｎ−アルキル化ポリアザ大環状化合物を調製する方法が米国特許出願第２８９． １６３号（１９８８年１２月２日にＷ、Ｊ、クルーバー（Ｋｒｕｐｅｒ）により 出ｗＪ）明細書に開示されている。 本発明のキレート剤への全般の合成経路が、下記の合成反応機構１−ＴＶに開示 されており、適当な有機溶媒中の種々の化学量論、温度及び濃度に於ける好適な 電子試薬とポリアザ大環状化合物の反応を伴なう、好適な有機溶媒の例は、アセ トニトリル、イソプロパツール、塩化メチレン、トルエン、クロロホルム、ｎ− ブタノール、四塩化炭素、テトラヒドロフラン、クロロホルム中の５％エタノー ルの如き、溶解性を支持するあらゆる炭化水素であり、クロロホルム、塩化メチ レン、ｎ−ブタノール、１．４−ジオキサン及びアセトニトリルが最も好ましい 、化学量論量またはほぼ化学量論量の大環状化合物及び電子試薬を使用すること ができ、単一工程で相当するモノ−Ｎ−アルキル化生成物を生成する０反応の温 度範囲は約０°Ｃ〜はぼ還流温度、好ましくはＯ′Ｃ〜２５゛Ｃである。完結ま での反応時間は約１〜約２４時間である。 置換α−ハロ酸エステルへの全般の接近が、合成反応機構■及び■の総合的な実 行性に好ましい。一つの好適な方法は、その場で生成された酸ハロゲン化物の臭 素化または塩素化を伴なう０例えば、Ｄ、Ｎ、ハープ（ｌｌａｒｐｐ）　ら著、 Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、　４０巻、３４２０〜３４２７頁（１９７５年）を参照 のこと。この方法は、反応性のベンジル基さえをも含むアルカン酸の徹底的α− ハロゲン化を可能にする。置換酸ハロゲン化物への全般の方法は、塩化チオニル または塩化スルフリルと有機酸の反応を伴なう。 例えば、Ｅ、シュウエンク（Ｓｃｈｗｅｎｋ）　ら著、Ｊ、Ａｍｅｒ、Ｃｈｅｍ 、Ｓｏｃ。 ７０巻、３６２６〜３６２７頁（１９４４年）を参照のこと。二つの方法は、し ばしば市販されている遊離カルボン酸を使用する。 １．４，７．１０−テトラアザシクロドデカンの如きポリアザ大環状化合物は、 Ｔ、　Ｊ、アドキンス（Ａｔｋｉｎｓ）ら著、Ｊ、　Ａｒｂｅｒ。 Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、　９６巻、２２６８〜２２７０頁（１９７４年）及びＴ、Ｊ 、リッチマン（Ｒｉｃｈｍａｎ）　ら著、Ｏｒｇ、５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　５８巻 、８６〜９８頁（１９７８年）のような文献に記載の方法により調製し得る。 モノ−Ｎ−官能大環状化合物のカルボキシメチル化は、ブロモ酢酸誘導体及び好 適な塩基を使用するデスロイックス（Ｄｅｓｒｅｕｘ）の方法により行ない得る 。（Ｊ、Ｆ、デスロイックス著、Ｉｎｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、　１９巻、１３１９〜 １３２４頁（１９８０年）を参照のこと〕。 本発明の化合物を調製するのに必要とされる全ての出発物質は、市販されている か、または既知文献の記載によりつくることができる。 下記の反応機構■に於いて、Ｑ’が水素である式（１）の化合物が調製される。 唯一の化合物が示された用語により示されているが、Ｑｌが水素であり、ｒがＯ または１であり、ｎがＯまたは１であり、ｍが０−１０である式（１）内のその 他の同様な部分がまたこの方法により調製し得る。 反応機構■ 下記の反応機構Ｈに於いて、Ｑ’が水素である式（１）の化合物が調製される。 唯一の化合物が示された用語により示されているが、Ｑ’が水素であり、ｒがＯ または１であり、ｎがＯまたは１であり、ｍが０〜１０である式（１）内のその 反応機構■ 下記の反応機構■に於いて、Ｑ’がＣＯ□Ｒである式（Ｉ）の化合物が調製され る。唯一の化合物が示された用語により示されているが、Ｑ’がｃｏｚＲであり 、ｍがＯ〜１０であり、ｎが０または１でありｒがＯである式（Ｉ）内のその他 の同様な部分がまたこの方法により調製し得る。 反応機構■ 下記の反応機構■に於いて、Ｑｌが（ＣＩＩＲ”　）、Ｃ０ｚＲである式（１） の化合物が調製される。唯一の化合物が示された用語により示されているが、Ｑ ’が（ＣＩＩＲ”　）　ｗＣＯＪであり、ｍがＯ〜１０であり、ｎがＯまたは１ であり、且つｒがＯである式（１）内のその他の同様な部分がまたこの方法によ り調製し得る。 反応機構■に於いて、Ａ′を含む示された試薬はα−酸に対して好ましい離脱基 であり、例えばＡ′はフェニルまたはＣＦ３である。 光学活性のアルキル化剤の使用はジアステレオマーを最小にし、合成を簡素化す る。単一の容易に精製されるランタニド錯体を生じる単一のジアステレオマー〇 単離が、放射キレート化並びに抗体接合に好ましい。 反応機構■ 下記の反応機構Ｖに於いて、Ｑｌが水素または（ＣＨＲ’）。ＣＯ，Ｒであり且 つＲ２が水素である式（Ｉ）の化合物が調製される。二つの化合物のみが示され た用語により示されているが、Ｑｌが水素または（ＣＨＲ’）　、ＣＯ□Ｒであ り、Ｑが水素または（ＣＩＩＲ’）　、ｃｏｚｉ＋であり、ｒがＯまたは１であ り、ｎが０または１であり、Ｗが０または１であり、ｍが０〜１０であり、ｐが １または２であり、Ｌが式Ａを表わし、Ｒ３が前に定義されたとおりであり、Ｒ ２及びＲ４が水素、アミノ、ニトロ、イソチオシアナート、セミカルバジド、チ オセミカルバジド、マレイミド、ブロモアセトアミド及びカルボキシルからなる 群から選ばれる式（Ｉ）内のその他の同様な部分がまたこの方法により調製し得 る。 反応機構Ｖ また請求電子部分（式中“’Ｒ１”）は、当業界で既知の方法より調製し得る。 このような方法が、Ａｃｃ、Ｃｈｅｎ＋、Ｒｅｓ、　１７巻、２０２〜２０９頁 （１９８４年）に見られる。Ｒ１がイソチオシアナート部分（Ｌが式Ａである場 合、存在するＲ２またはＲ４がイソチオシアナートである）である式（１）の化 合物を調製し得る方法は、アミノキレート（Ｌが式Ａである場合に存在するＲ２ またはＲ４がアミノである）をチオホスゲンと反応させることを伴ない、この方 法は米国特許出願第２８９．１７２号（１９８８年１２月２３日にＬＪ、ファジ オ（Ｆａｚｉｏ）　らにより出願された）明細書に開示されている。 放射性核種が幾つかの方法で生成し得る。核反応器中で、核種が中性子で衝撃さ れて放射性核種を得る０例えば、次式％式％ Ｓｍ−１５２＋中性子−一→５ｓ−１５３＋ガンマー線放射性核種を得る別の方 法は、線形加速器またはサイクロトロン中で核種を粒子で衝撃することである。 更に別の方法は核分裂生成物の混合物から放射性核種を単層することである０本 発明に使用される核種を得る方法は、本発明に重要ではない。 本発明の複合体は、まず錯体を生成し、その後、抗体または抗体フラグメントを 結合することにより調製し得る。こうして、その方法は、リガンドを調製し、ま たは得、錯体を金属により生成し、その後、抗体を添加することを伴なう、また 、ラベルした抗体複合体を生成する方法は、まずＢＦＣを抗体に接合し、その後 、それをキレート化して放射性核種−ＢＦＣでラベルしたＡｂを生成することを 伴ない得る０本発明の複合体の生成をもたらすあるゆる好適な方法が、本発明の 範囲内である。 以下の実施例に於いて、特にことわらない限り、下記の用語及び条件を使用した 。 質量スペクトルは、フィニガン（Ｆｉｎｎｉｇａｎ）ＴＳＱ質量分析計（Ｑ’Ｍ Ｓ型式）またはνＧ　２ＡＢ−ＭＳ高分解能質量分析計（３：ｌのジチオスレイ トール：ジチオエリスリトールを用いる、キセノンによる高速原子衝Ｉｉ）のい ずれかで得た。 ’ＨＮ？ＩＲスペクトル及び１３ＣＮＭＲスペクトルは、パリアン（Ｖａｒｉａ ｎ）シＸＲ−３００　、プルカー（Ｂｒｕｋｅｒ）ＡＰＣ３００ＸＩＢＭ／プル カーＮＲ−８０またはジオール（Ｊｅｏｌ）ＦＸ４００分光計を使用して得た。 特にことわらない限り、全てのスペクトルを３０℃で得た。 ’ＨＮＭＲは、上記の装置の夫々に関して３００ＭＨ２，８０Ｍ１１２または４ ００ＭＨｚで測定した。　′３ＣＮＭＲは、上記の装置の夫々に関して７５ＭＨ ｚ、　２０ＭＨｚまたは１００ＭＨｚで測定した。ＮＭＲの値はＴＭＳ　（テト ラメチルシラン）に対するδであり、またはＤｔＯが溶媒である場合にはＤＳＳ 　（２，２−ジメチル−２−シラペンクン−５−スルホン酸、ナトリウム塩）に 対スるδである。 赤外スペクトル（ＩＲ）は、ニコレフト（Ｎｉｃｏｌｅｔ）５ＳＸ　ＦＴ／ＩＲ 装置で記録した。 クロマトグラフィー操作に関して、殆どの溶媒はフィッシャー（Ｆｉｓｈｅｒ） ＨＰＬＣ等級材料であった。酢酸アンモニウムはアルドリッチ（Ａｌｄｒｉｃｈ ）から購入した。バーンステッドナノピュア−（Ｂａｒｎｓｔｅａｄ　ＮＡＮＯ ｐｕｒｅ、商標）水濾過系を用いて水を精製した。有機化合物の分取りロマトグ ラフィーは、標準技術を使用する垂直重力クロマトグラフィーまたはＣ０副ステ イル（Ｓｔｉｌｌ）　ら著、Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、　４３巻、２９２３〜２９ ２４頁（１９７８年）により記載されているようなフラッシュクロマトグラフィ ーにより行なった。 一且蓮及−−底一一立一 これらの溶媒系及び市販の垂直相のシリカＴＬＣプレート（ＧＨＬＦ　２５０ミ クロン、アナルテク（八ｎａｌｔｅｃｈ）社またはメルり・キーゼル（Ｍｅｒｃ ｋ　Ｋｉｅｓｅｌ）ゲル６０ｈｓｎ）を用いて、Ｒｆ値を記録した。 全ての比率（％）は、特にことわらない限り重量基準である。 幾つかの固体は、約５５〜６０″Ｃの温度で数時間にわたって回転エバポレータ ー（プツチ（Ｂｕｃｈｉ）４６１）を使用して乾燥した。 その他、ビルチス（ν１ｒｔｉｓ）型式１０−０１０自動凍結乾燥器またはスピ ード・バク（Ｓｐｅｅｄ　Ｖａｃ、商標）濃縮装置を溶媒除去のために使用した 。 サマリウム−１５３及びルテチウム−１７７は、リサーチ・リアクター（Ｒｅｓ ｅａｒｃｈ　Ｒｅａｃｔｏｒ）、ミズーリイ大学（コロンビア、■）により生成 した。イツトリウム−９０は、オーク・リッジ・ナシヨナル・ラボラトリ４　（ Ｏａｋ　Ｒｉｄｇｅ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）から購入した 。 １−（４−イソチオシアナートベンジル）ジエチレンアミンペンタ酢酸（ＳＣＮ −Ｂｚ−ＤＴＰ＾）は、ｈ、−、プレチビール（Ｂｒｅｃｈｂｉｅｌ）ら著、Ｉ ｎｏｒｇ、Ｃｈｅ＋＋＋、　２５巻、２７７２〜２７８１頁（１９８６年）の操 作の改良法により調製し、陰イオン交換ＨＰＬＣ（Ｑ−セファローズ（商１）） で精製して単一種を得た。使用した薬品の幾つかは、下記の源から得た。Ｎ−２ −ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）の 遊離酸及びナトリウム塩をベージング・ダイアグノスチクス（Ｂｅｈｒｉｎｇ　 Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（う・ジョラ（Ｌａ　Ｊｏｌｌａ）、　ＣＡ）から購入 した。クエン酸ナトリウム（保証法）をフィッシャー・サイエンティフィック（ Ｆｉｓｃｈｅｒ　５ｃｉｅｎｔｉｆｔｃ）から購入した。チオホスゲンをアルド リッチ・ケミカルズ（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）から購入した。酢 酸アンモニウム、クエン酸ナトリウム、エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ ）及びリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）をシグマ・ダイアグノスティクス（Ｓｉｇ ａ＋ａ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）から購入した。 使用したＨＰＬＣは、手動充填のＱ−セファローズ（商標）（ファーマシア）　 １．５　ＣＴＩ　Ｘ　２５ｃｍまたは２．５　ｃｖａ　ｘ　２５ｃｍ　；デュポ ン・インストルメンツ（ＤｕＰｏｎｔ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）からのゾルパ ックス（Ｚｏｒｂａｘ、商標）ＢＩＯシリーズＧＦ−２５０（９，４１１１１Ｘ ２５Ｃ１１）　；セパレーション・グループ（Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　Ｇｒｏｕ ｐ）（ヘスペリア、ＣＡ）からのバイダック（Ｖｙｄａｃ）　（ザ・セパレーシ ョン・グループ、ヘスペリア、ＣＡの商標）プロティンＣ−４（４，６ｍｍＸ２ ５ｃｍ）　；及びファーマシアからのモノ−Ｑ及びＳＰ−セファデックス（ファ ーマシア・バイオテクノロジー・プロダクツ（ＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃ ｈｎｏｌｏｇｙ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）の商標）であった、セップーパク（Ｓｅｐ −Ｐａｋ）　（ウォーターズ・アソシエーツ（Ｗａｔｅｒｓ　Ａｓ５ｏｃｉａｔ ｅｓ）の商標）Ｃ−１８カートリツジをウォーターズ・アソシエーツ（ミルフォ ード、ＭＡ）から購入し、セファデックス（商標）Ｇ−２５使い捨て式カラム（ ２，２ｄ）をアイソラブ（Ｉｓｏｌａｂ）社（アクロン、ＯＨ）から購入し、セ ントリコン（Ｃｅｎｔｒｉｃｏｎ）　−３０（アミコン・ディビジョン、Ｗ、Ｒ ，ブレース・アンド・カンパニイ（＾ａｅｉｃｏｎ　Ｄｉｖｉｓｉｏｎ、　Ｗ、 Ｒ，Ｇｒａｃｅ　＆　Ｇｏ、）、デンバー、ＭＡの商標）マイクロコンセントレ ータ−をアミコンから購入した。 ５つのＨＰＬＣ系を分析及び試料分離に使用した。 系Ｉは、ＬＫＢ２１５０ポンプ、及び２１５２コントローラー、ＵＶ検出器−Ｌ ＫＢ２２３８Ｕνコード（Ｃａｒｄ）、ベートホルト（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ）ＬＢ ５０６ＡＨＰＬＣラジオアクティビティ・モニター（ザ・インターナショナル・ ベートホルト・グループ（ｔｈｅ　ＩｎｔｅｒｎａｔｔｏｎａｌＢｅｒｔｈｏｌ ｄ　Ｇｒｏｕｐ）　製）及びギルリン・フラクション・コレクター（Ｇｉｌｓｏ ｎ　Ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ）２０１−２０２　（ギルリン・イ ンターナショナル（Ｇｉｌｓｏｎ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）、ミドルトン 、罰）からなっていた。 系■は、自動試料採取器、ＷＩＳＰ７１０Ｂ、二つのポンプ（型式５１０）及び 自動勾配調節装置（ウォーターズ・アソシエーツ製）、パーキン−エルマーＬＣ −７５分光測光検出器、ベックマン型式％式％ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ）　、及び両分回収装置（ファマシア製Ｆｒａｃ−１００）を 備えていた。 系■は、ウォーターズ６６０溶媒プログラマ−を備えた２個のウォーターズト６ ０００Ａポンプ、ウォーター父型式４８１バリアプル・ウェブレングス・ディテ クター（Ｖａｒｉａｂｌｅ　ＷａｖｅｌｅｎｇｔｈＤｅｔｅｃｔｏｒ）　、及び ウォーターズ・データ・モジュール（Ｗａ　ｔｅｒｓＤａｔａ　Ｍｏｄｕｌｅ） からなっていた、また、ｌ５ＣＯ画分回収装置を分取に使用した。 系■は、可変式波長ＵＶ検出装置を備えたダイオネックス（Ｄｉｏｎｅｘ）Ｂｉ ｏＬＣ（商標）システムであった。 系■は、ｌ５ＣＯモデル２３６０勾配プログラマ−を備えたウォーターズ・モデ ル５９０ポンプ及びグイオネックス可変式波長検出器であった。 遠心分離及び濃縮に関して、ソーパル（Ｓｏｒｖａｌｌ）ＲＴ６０００Ｂ（デュ ポンの冷凍遠心分離）を使用した。スピード・バク（Ｓｐｅｅｄ　Ｖａｃ）　’ ａ’ｉｉ；ｊＡ装置（サバント・インストルメンツ（ＳａｖａｎｔＩｎｓ　ｔｒ ｕｍｅｎ　ｔｓ）社、ヒックスビル、Ｎ、Ｙ、）を、揮発性溶媒の除去に使用し た。放射能測定は、カピンテック（Ｃａｐｉｎｔｅｃ）ラジオアイソトープ・カ リプレーター（Ｒａｄｉｏｉｓｏｔｏｐｅ　Ｃａ１ｉｂｒａｔｏｒ）（カピンテ ック社の商標）ＣＲＣ−１２、またはベックマン（Ｂｅｃｋｍａａ）ＬＳ９８０ ０　（ベックマン・インストルメンツ社、イルビン、ＣＡ）による液体シンチレ ーション、または３インチのタリウムドリフトヨウ化ナトリウムウェル結晶で適 合されたカンベック（Ｃａｎｂｅｒｒａ）３５°マルチチャンネル分析装置で行 なった。 錯体の生成に関する実施例に於いて、錯体（％）測定は、示される場合、下記の 一般の交換法により行なった。 １０−のプラスチックカラムに１〜２−のＳＰ−セファデックス（商標）Ｃ−２ ５樹脂を充填し、これを水で膨潤した。過剰の水は、圧力をカラムの上部にかけ ることにより除去した。 試験溶液（１５ｍ）を樹脂の上部に添加し、その後、４：ｌ（ｖ：ｖ）の等張食 塩水：濃ＮＨａＯＨ２ｒｔｒｌを溶離剤として使用した。溶離剤を計量管中に集 めた。溶離剤更に２ｄを使用した。第二計量管中に溶離剤を集めた後、空気圧を 樹脂の上部にかけて樹脂を乾燥した。乾燥樹脂を第三計量管に移した。 夫々の管の活性を、カンベック・マルチチャンネル分析装置と対のＮａＩウェル 計数器で測定した０話体としての金属の量を、溶離剤中に見られる全活性に対す る比率（％）として示した０Ｍ離の未錯化状態の金属の量を、樹脂中に残留する 全金属に対する比率（％）として示した。 イオン六　による　１　の １０ｍのプラスチックカラムに、ＳＰ−セファデックス（商標）Ｃ−２５樹脂を 充填し水中で膨潤させた。過剰の水を、カラムを３．００Ｏｒｐｍで４分間遠心 分離することにより除去したｅ　ｇＷ体溶液２００〜５００　ｍの容量を樹脂の 上部に入れ、管を３．ＯＯＯｒｐｍで４分間再度遠心分離した。未錯化金属はカ ラム中に残留し、錯化金属は溶媒で溶出した。 イ・　１ウム　の量 ３　Ｘｌ０−’Ｍのイツトリウム溶液を水中で調製することにより錯体をつくっ た（ＹＣｆｆｉ、・６ＨｚＯ＋　３０３．２６ｇ１モル；またはＹ（ＯＡｃ）ｚ 、　１２．１％１ｌｚＯ）、放射性Ｙ３°溶液（オークリッジ・ナショナル・ラ ボラトリイズ）を添加して所望の水準の放射能を得た。リガンド溶液（０，０３ Ｍ）　ｌ０ｕ１をＹ”溶液９９０　ｊｌｌに添加して、１：１のモル比のリガン ド：金属を得た。１０倍量のりガント溶液を、１０：１のリガンド対金属の比の ために使用した。数Ｉの量のＨＣｆまたはＮａＯＨを使用してｐｔ＋を７．４に 調節した。その後、上記のカチオン交換法を使用して、その溶液を錯化イツトリ ウムの量に関して試験した。 サマ１ウム「　の菖　１ Ｓｌｍｔ（ｈ　（３４８，７ｇ　１モル）を０．１　ＭのＨｌに溶解することに より３　Ｘｌ０−’Ｍのサマリウムを調製した以外は上記のようにしてサマリウ ム錯体を生成した。放射性Ｓａ＋−１５３を、ミズーリー大学リサーチ・リアク ター、コロンビア、ミズーリー州から０．１　ＭのＨｌ中の約３Ｘ１０−’Ｍの 溶液として得た。 本明細書に使用される幾つかの用語に関して、以下に定義を示す。 ＭＵｒＪ！Ｕｉ’ Ｃｏｎｃ、は濃厚を意味する。 一０Ａｃはアセテート基、−０ＣＯＣＩ＋、を意味する。 ＴＬＣは薄層クロマトグラフィを意味する。 Ｄｒ　Ｈ，０ば脱イオンＮＡｌｌｌ０ピユアー（商標）水を意味する。 ＮＡＮＯヒュア−（商標）水は、バーンステッドＮＡＮＯピュアー（商標）水濾 過系から得られた純水である。 周囲温度は室温、即ち約２０〜約２５℃を意味する。 −夜は約９〜１８時間を意味する。 ＬＣは液体クロマトグラフィーを意味する。 ＮＢＳはＮ−ブロモスクシンイミドを意味する。 ＭＥＳは２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸を意味する。 ＨＰＬＣは高速液体クロマトグラフィーを意味する。 ＰＰＢは、１２０ｍＭのＮａＣ１，２，７ｍＭのＫＣ１！、及び１０ｍＭのリン 酸塩緩衝剤、ｐＨ７，４を含む、シグマ社からのリン酸塩緩衝食塩水を意味する 。 ＳＰ−セファデックス（商標）Ｃ−２５樹脂は、ファーマシア社により販売され る、スルホン酸官能基を有する陽イオン交換樹脂である。 ｒｐｍは回転数７分である。 ｐＤは、水素が重水素化される場合のｐＨを意味する。 ＤＯＴＡは１．４，７．１０−テトラアザシクロドデカン−１゜４．７．１０− テトラ酢酸である。 ＨＥＰＥＳはＮ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ′−２−エタンスルホン 酸である。 ＢＦＣは三官能キレート剤である。 Ｃｙｃｌｅｎは１，４，７．１０−テトラアザシクロドデカンである。 ＰＡ−ＤＯＴＭＡは、ａ−［２−（４−アミノフェニル）エチル〕−１．４．７ ．１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７゜ｌＯ−テトラ酢酸である。 ＰＡ−ＤＯＴＡはα−（２−（４−アミノフェニル）エチル〕−１，４，７，１ ０−テトラアザシクロドデカン−１−アセチル−４，７，１０−）リス（メチル 酢酸）である。 ＢＡ−ＤＯＴＡはα−（４−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザ シクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸である。 ＯＭｅ−ＢＡ−ＤＯＴＡはα−（５−アミノ−２−メトキシフェニル）−１，４ ，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７゜１０−テトラ酢酸である 。 Ｅ八−ＤＯ３Ａは１−　（２−（４−アミノフェニル）エチル〕−１，４，７， １０−テトラアザシクロドデカン−４，７，１０−トリ酢酸である。 ＤＴＰＡはジエチレントリアミンペンタ酢酸である。 ５ＣＮ−Ｂｚ−ＤＴＰＡは１−（４−イソチオシアナートベンジル）−ジエチレ ントリアミンペンタ酢酸である。 ＥＤＴＡはエチレンジアミンテトラ酢酸である。 キレート剤はリガンドと同じである。 錯体はキレートと同じである。 複合体は抗体または抗体フラグメントに共有結合されたキレート剤または錯体で ある。 抗体はＣＣ−４９，ＣＣ−８３及び８７２．３並びにＦａｂ及びＦ（ａｂ’　） ｚの如きそれらのフラグメントを意味する。その他の可能な抗体は前記のとおり である。ハイブリドーマ細胞系がザ・アメリカン・タイプ・カルチャー・コレク ションに寄託され、登録番号ＡＴＣＣＨＢ８１０８を有し、その他の命名された ネズミモノクローナル抗体がＴＡＧ−７２、腫瘍関連抗原のエピトープに結合す る。 本発明は、下記の実施例を考慮することにより更に明瞭になる。これらの実施例 は本発明の使用を単に説明することを目的とする。 皇１ＪＯし因１袈 五−人 誠、１−２−ブロモ−４−（４−ニトロフェニル）−ブタン酸メチルエステルの 調製 四塩化炭素５Ｊｄ及び塩化チオニル１５．ｄ（０，２モル）の溶液に、４−（４ −ニトロフェニル）ブタン酸１０．４６ｇ　（０，０５モル）を窒素雰囲気下に 添加した。その溶液を１時間還流させ、初期に塩化水素ガス及び二酸化硫黄ガス の放出を伴なった。 温かい溶液に、四塩化炭素２５Ｊｄ中のＮ−ブロモスクシンイミド１１．０ｇ　 （０，０６モル）及び４８％の水性臭化水素触媒３滴を添加した。臭素ガス放出 を認めた。暗赤色の溶液を３５分間還流させた。溶液を冷却し、メタノール１０ ０１ｄに撹拌しながら注入した。ＴＬＣ分析（６０：　４０酢酸エチル：ヘキサ ンｖ：ｖ）は新規な生成物（Ｒｆ−０，６９、シリカプレート）を示した。 過剰の溶媒を回転蒸発により除去し、暗赤色の油を、溶離剤として塩化メチレン を使用してフラッシュシリカゲルパッド（１インチ×５インチ）で濾過した。溶 媒を蒸発して透明な油（収量１５−４３ｇ）を得、これは標題生成物：出発ブタ ン酸誘導体のメチルエステルの８５　：　１５混合物であった。標題生成物を、 下記のデータにより特性決定した。 ’）Ｉ　ＮＭＲ（ＣＤＣＩ！、２） ８．１６（ｄ）、　７．３８（ｄ）、　４．２０（ｄｄ）、　３．７９（ｓ）、 　２．８８（ｍ）、　２．３８（ｍ）　；目ＣＮＭＲ（ＣＤＣｆｆｉｓ、　７５ ＭＨｚ）１６９．６．１４７．５．１２９．３．１２３．７．５３．０．４４． ４．３５．５．３３．０゜■一旦 α−（２−（４−ニトロフェニル）エチル）−１，４，７゜１０−テトラアザシ クロドデカン−１−酢酸、１−メチルエステルの調製 ペンテンで安定化したクロロホルム１７Ｍ１中の１．４，７゜１０−テトラアザ シクロドデカン１．７２ｇ　（１０，０ミリモル）の撹拌溶液に、α、　！！、 −２−ブロモー４−（４−ニトロフェニル）ブタン酸、メチルエステル（例Ａの 操作により調製した）２．０７ｇ　（５，８２ミリモル）を撹拌しながら窒素雰 囲気下で５分間にわたって添加した。反応混合物を約２５°Ｃで４８時間撹拌し た。ＴＬＣ（アナルテクシリカゲルプレートで溶媒系２を使用）は、標題化合物 （Ｒｆ−０，７３）の生成を示した。黄色のクロロホルムを容液を１インチ×１ ６インチのフラッシュシリカゲルカラム（５％メタノール性クロロホルムで前溶 出）に通用し、５％メタノール性クロロホルムで溶出し、その後溶媒系２で溶出 した。純粋な標題生成物を含む両分を合わせ、蒸発して標題生成物２．１５ｇ　 （５，４６ミリモル、収率９４％）を淡黄色のガラスとして得た。このガラスの クロロホルム溶液をジエチルエーテルで、すり砕いて分析純度の白色粉末（融点 １５６〜１５９℃）の沈殿を生じ、以下のデータにより特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ　３＞ ８．１４（ｄ）、　７．３９（ｄ）、　３．７Ｈｓ）、　３．３９（ｄｄ）、　 ２．５−３．０（ｍ）。 ２．０８（ｍ）、　２．０Ｂｍ＋）　；’　３ＣＮＭＲ（ＣＤＣＩｌｓ　、７５ ＭＨｚ）１７２．７．１４９．３．１４６．４．１２９．２．１２３．６．６２ ．３．５１．２．４Ｂ、９゜４７．２．４５．８．４５．４．３２．８．３０． ９゜五一旦 ２−ブロモ−２−（４−ニトロフェニル）エタン酸メチルエステルの調製 乾燥ベンゼン（１００ｄ）中のｐ−ニトロフェニル酢酸（２５，０ｇ、０．１４ モル）及び塩化チオニル（１５，１ｄ、０゜２１モル）の混合物を窒素パッド下 で３時間にわたって還流し、撹拌した。 その後、混合物を減圧で蒸発乾固した。残渣を四塩化炭素に溶解し、窒素パッド 下で還流し、撹拌した。臭素（７，２ｍ、０．１４モル）を、還流混合物に３日 間の期間にわたって少しずつ添加した。反応混合物を冷却し、酸塩化物をメタノ ール（５０ｔｄ、徐々に添加）で消失させた。得られたブロモエステル（２７ｇ 、収率７１％）をガラスらせんの６インチカラムで減圧蒸留（沸点１６８℃、１ ．１＋ｍｓ）により黄色の油として回収した。標題生成物の構造を、下記のデー タにより確認した。 ’　ＨＮＭＲ（ＣＤＣｊ！　ｓ） ８．２５（ｄ）、　？、８Ｈｄ）、　５．５Ｈｓ）、　３．８６（ｓ）。 夛り一匡 α−（４−ニトロフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン− １−酢酸１−メチルエステルの調製アセトニトリル２０Ｍ１中の２−ブロモ−２ −（４−ニトロフェニル）エタン酸メチルエステル（例Ｃの操作により調製した ）５２９■（２，０６８ミリモル）に、完全な溶解を行なうのに充分なメタノー ルを含むアセトニトリル２０ｄ中の１．４，７゜１０−テトラアザシクロドデカ ン３５４■（２，０６８ミリモル）の溶液を一度に全部添加した。得られたピン ク色の溶液を１．５時間撹拌し、その後３５°Ｃで少容量まで減圧濃縮した。こ の粗モノエステルテトラアミンを、２０％（ｗｔ／ｖ）のＮＨ４０ＡＣ／　Ｃｌ １ｓＯＨで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。 こうしてトリアセテート塩として単離した精製モノエステルテトラアミンを、そ の後、遊離アミンに変換した。こうして、水３１１ｉ中の２７０■をＯ″Ｃで水 性ＫｚＣＯｚ（１０％−ｔ／ｗＬ）で処理してｐ）Ｉｌｌとした。その後、塩基 性溶液をクロロホルム１０−で５回抽出し、クロロホルム層を合わせ、硫酸ナト リウムで乾燥し、ｆｉｌ！Ｌで所望のモノエステルテトラアミン１６０■（収率 ４２％）を得、ＮＭＲ及び高速原子衝撃質量分析法により特性決定した。 ’　ＩＩ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ　２） ８．１２（ｄ）、７．４４（ｄ）、４．７５（ｓ）、３．７６（ｓ）、２．６７ −２．４４（ｇｇ）；”　ＣＮＭＲ（ＣＤＣｊ！　３） １７１．５．１４７．６．１４４．０．１３０．０．１２４．０．６７．０．４ ９．８．４７．９゜４６．９．４６．０゜ ■一旦 Ｎ−（２−メトキシ−５−ニトロベンジル）−１，４，７゜１０−テトラアザシ クロドデカンの調製１．４，７．１０−テトラアザシクロドデカン（１６，８ミ リモル）２．９ｇを含む撹拌クロロホルム溶液（２０ａ＆）に、２−メトキシ− ５−二トロペンジルプロミド２．１ｇ（８，５ミリモル）を含むクロロホルム溶 液（２０ｄ）を一度に添加した。室温で３時間撹拌した後、反応混合物を濾過し 、濾液を濃縮（減圧）し残渣を得、これをクロマトグラフィーにかけた（シリカ 、溶媒系３）、モノアルキル化生成物を７９％の収率で単離しく融点１５４〜１ ５６°Ｃ）、下記のデータにより特性決定した。 目ＣＮＭＲ（ＣＤＣ／！り １６２．４７．１４０．６３．１２７．９２．１２５．４９．１２４．５３．１ ０９．９１．５５．８８゜５３．２５．５０．９０．４７．１８．４５．４５． ４５．２９゜五一旦 Ｎ−（２−ヒドロキシ−５−二トロベンジル）−１，４゜７．１０−テトラアザ シクロドデカンの調製１．４，７．１０−テトラアザシクロドデカン（２，３ｇ 、１４ミリモル）の１．４−ジオキサン溶液（２０ｄ）中に、２−ヒドロキシ− ５−ニトロベンジルプロミド（１，２ｇ、７ミリモル）のジオキサン溶液（１５ ｄ）を絶えず撹拌しながら一度に添加した。数分後、ｈｃＯｓ（１ｇ　）を添加 し、撹拌を室温で１時間続けた。その後、反応混合物を濾過し、濾液を減圧で濃 縮して黄色の半固体を得、これをシリカゲルでクロマトグラフィーにかけ（カラ ム）、溶媒系５で溶出した。所望のモノアルキル化生成物を明黄色の溶出液の最 後の１７３（これはまた未反応アミンを含んでいた）から単離した。濃縮後、黄 色の油をＣＨＣｊ！３　（１００ｄ）ですり砕き、濾過してＣＨＣｆコ可溶性ア ミン出発物質を除去した。その後、最終生成物を黄色の固体（１，２ｇ、収率５ ５％）として純粋形態で単離しく融点１４２〜１４５°Ｃ）、更に下記のデータ により特性決定した。 ”ＣＮＭＲ（ＤｚＯ） ２５．０４．２５．２Ｂ、　２６．８３．３１．８０．３６．５４．１０１．８ ８．　ＬＯ７，２２゜１１０．９２．１１１．８０．１１５．２６．１５９．９ ９゜拠−且 １−　（２−（４−ニトロフェニル）エチル）−１，４，７゜１０−テトラアザ シクロドデカンの調製ペンテンで安定化したクロロホルム５０！ｄ中の１．４． ７゜１０−テトラアザシクロドデカン３．５０ｇ　（２０，３ミリモル）の撹拌 溶液に、１−（２−ブロモエチル）−４−二トロベンゼン４．０Ｂｇ　（１７， １１Ｊモル）を窒素雰囲気下で激しく撹拌しながら５分間にわたって滴下して添 加した。 撹拌を室温（約２５°Ｃ）で約１８時間続け、その後、アミン臭化水素酸塩の結 晶が溶液から沈殿した。全反応混合物を、クロロホルム中５％のメタノールで前 溶出したフラッシュシリカゲルカラム（１インチ×１８インチ）に通用した。こ の溶液２００ｍを溶離剤として適用し、その後、溶媒系３で溶出した。 所望の生成物からｐ−二トロスチレン（Ｒｆ−０，９８；溶媒系１　）　１．４ ５ｇ　（９，７ミリモル）を分離した。所望の一官能標題生成物を黄橙色の油（ ２，２７ｇ、７．０６ミリモル、収率４０．６％）として単離し、これは放置す ると固化した（Ｒｆ−０，７３、溶媒系１）。 標題生成物の試料をＣＨＣｆｓ／シクロヘキサンで再結晶し、これは下記の特性 を示した。融点１４６．５〜１４８．５°Ｃ０’　ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１ｆｆ） ８．１３５（ｄ、　ｍ）、　７．３９５（ｄ、　ｍ）、　２．９Ｈｔ）、　２． ７７（ｔ）、　２．７２（ｔ）。 ２．５０（ｔ）、　２．６０（ｓ）　；’　３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ　ｓ　、７５ ＭＨ２）１４８．５．１４６．７．１２９．６．１２３．４．５５．５．５１． ４．４６．９．４５．９゜４５．１．３３．７゜ ■一旦 １−（４−ニトロベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンの 調製 クロロホルム５０ｄ中に、１，４．７．１０−テトラアザシクロドデカン３．５ 　ｇ　（２０，３ミリモル）及びｐ−ニトロベンジルプロミド１．７　ｇ　（７ ，８７ミリモル）を添加し、混合物を窒素下で２５°Ｃで２４時間撹拌した。そ の後、臭化水素酸塩のクロロホルムスラリーをフラッシュシリカゲル（溶媒系３ ）の１インチ×１フインチのカラムに通用した。標題生成物２．１３ｇ　（６， ９３ミリモル）を分析純度の淡黄色の固体として収率８８％で得（Ｒｆ−０，５ ８、溶媒系３）（融点１２８〜１２９°Ｃ）、更に下記のデータにより特性決定 した。 ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｆ　３） ８．１９（ｄ）、　７．４９（ｄ）、　３．６９（ｓ）、　２．８２（ｔ）、　 ２．７０（ｔ）、　２．５９（ｍ）　；”ＣＮＭＲ（ＣＤＣｊ！　ｓ、７５Ｍｌ １ｚ）１４７．２．１２８．４．１２３．８．５８．［１，５１，７，４７，１ ，４６，３，４５，１。 （例Ｉはない、後の生物学実施例番号との混同を避けるため１−（４−アミノベ ンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンの調製 メタノールｌＱｍＪｉに１−（４−ニトロベンジル）−１，４゜７．１０−テト ラアザシクロドデカン（例ト■の操作により調製した）６９０■（２，２５ミリ モル）を溶解した。その溶液に、ｌＯ％パラジウム／カーボン触媒３５０ｍｇを 添加した。過剰の水素を２５°Ｃで溶液にパージした。４５分以内に、ＴＬＣは 、４１題生成物が調製されたことを示した（Ｒｆ−０，３３、溶媒系３）、生成 されたｔ１題生成物のクロマトグラフィー精製を１インチ−×１６インチのフラ ッシュシリカカラム（溶媒系３）で行なし１、標題生成物４８０ｍｇ　（収率７ ７％）を淡黄色の透明な油として得た。 遊離塩基標題生成物（１０３ｍｇ、０．３７ミリモル）を、無水塩化水素を遊離 塩基のエタノール溶液中に吹き込んで塩酸塩に変換した。冷エタノールで洗浄し 減圧で乾燥した後、標題生成物の得られた四基酸塩を１４７ｍｇ（０，３４７ミ リモル）の収四で得、（融点２５５〜２６０°Ｃ（分解））、更に下記の分析に より特性決定した。 ’Ｉ＋（１１２０，ｐＤ−１，９） ７．５６（ｄ）、　７．４７（ｄ）、　３．９５（ｓ）、　３．２８（ｔ）、　 ３．２３（Ｌ）、　３．０９（Ｌ）。 ２．９（ｉ（ｔ）　； ”ＣＮＭＲ（ＤｇＯｌｐＤ、−１，９＋　７５ＭＩＩｚ）１３８．３．１３４． ２．１３２．２．１２６．０．５８．５．５０．３．４６．７．４４．６゜２− メトキシ−５−ニトロベンジルニトリルの調製７０°Ｃの水（５，３ｄ）中のシ アンイヒナト１ノウム（６ｇ、１２１．９ミリモル）の溶液に、エタノール（１ ５ｍｉ）中の２−メトキシ−５−二トロペンジルプロミド（２５ｇ　、１０１． ６ミリモル）の物を１．５時間還流させ、冷却し、濾過した。濾過ケークをアセ トニトリルで洗浄し、濾液を減圧で蒸発させて２−メトキシ−５−ニトロベンジ ルニトリル（１９，５ｇ、収率１００％）ヲ黄褐色の固体として得た。 生成物を、下記の分析により特性決定した。 ”　ＣＮＨＲ（ＣＤＣｆ　り １６１．４．１４１．０．１２５．７．１２４．６．１１９．８．１１６．５． １１０．２．５６．３゜２−メトキシ−５−ニトロフェニル酢酸の調製ｃｏｎｃ 、　ＩＩＣＩ！、　（２０ｍ１　）中の２−メトキシ−５−ニトロベンジルニト リル（１９，５ｇ）（例１（の操作により調製した）のスラリーを３時間還流し た。冷却後、粗生成物を濾過により回収し、熱時濾過した。橙色の溶ンαを冷却 しＩｌｌで酸性にした。沈殿をｄ２過し、水洗し、乾燥して２−メトキシ−５− 二１−ロフェニル酢酸を白色の固体（１５ｇ、収率７０％）として得た。生成物 を、下記の分析により特性決定した。 １コＣＮＭＩ？（ＣＤＣ１ａ−ＣＤａＯＤ）１７２．８．１（ｉ２．５．１４０ ．７．１２６．２．１２４．７．１２４．１．１０９．７．５５．８゜α−ブロ モ−（２−メトキシ−５−ニトロフェニル）酢酸メチルエステルの！ｊｊ！！ 乾燥ベンゼン（５（］＋＋ｊり中の２−メトキシ−５−ニトロフェニル酢酸（２ ，２６ＥＨ１１０，７４ミリモル）のスラリーに、塩化チオニル（４，０ｍｆｌ 、５４．８ミリモル）を添加した。乾燥管及び冷却器をフラスコに設置し、混合 物を２時間還流させた。得られた黄色の溶液を減圧で受容量に濃縮し、乾燥四塩 化炭素中に吸収させた。臭素（０，６ｍｅ、　１１．６ミリモル）を添加し、大 気水分を排除して２日間還流させた０反応混合物を受容量に濃縮し、メタノール （５０ｕ１ｊりを添加した。過剰のメタノールを減圧で蒸発させた後、得られた 油をクロマトグラフィー（シリカゲル、塩化メチレン−ヘキサン４：１）で精製 した。 標題生成物（２，３９９ｇ、収率７４％）を黄色の油として得た。生成物を下記 の分析により特性決定した。 ’ＩＩ　ＮＭＲ（ＣＤＣＬ） ８．４５（ｄｄ）、　８．１５（ｄｄ）、　６．９５（ｄ）、　５．７５（ｓ） 、　３．９９（ｓ）、　３．７８（ｓ）。 廿り二Ｎ クロロホルム（１０ｄ）中のα−ブロモ（２−メトキシ−５−ニトロフェニル） −酢酸メチルエステル（２，３９９ｇ　、　７．８９ミリモル）（例Ｍの操作に より調製した）の溶液を、クロロホルム（５０ｄ）中の１．４，７．１０−テト ラアザシクロドデカン（２，７２ｇ　、１５．７９ミリモル）の撹拌溶液に添加 した。混合物を室温で２時間撹拌した。その後、濁った混合物を室温で減圧で受 容量に濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィー（シリカゲル、溶媒系３）によ り精製した。標題化合物を黄色の固体（２，６０ｇ　、　８３％）として回収し 、下記の分析により特性決定した。 ’　３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ　２） １７０．７．１６１．６．１３９．９．１２５．０．１２４．５．１２４．２． １１０．２．５９．５゜５５．５．５０．５．４８．０．４７．３．４５．６． ４４．３．４３．５゜倒−Ｑ− ｄ　、ｆ−２−ブロモー４−（４−ニトロフェニル）−ブタン酸イソプロピルエ ステルの調製 ハープら署、Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ　４０巻、３４２０〜３４２７頁（１９７５ 年）の操作を用いて、４−（４−ニトロフェニル）ブタン酸（２１，０ｇ、０． １０モ、ル）を窒素雰囲気下で四塩化炭素（１０ｍ）及び塩化チオニル（３０ｄ 、０．４モル）の溶液に添加した。溶液を１時間還流させ、初期に塩化水素及び 二酸化硫黄の迅速な放出があった。この時点で、Ｎ−ブロモスクシンイミド（２ ２，０ｇ、０．１２モル）を四塩化炭素（５０ｄ）中の溶液として添加し、４８ ％の水性臭化水素触媒８滴を温かい溶液に添加し、その直後に臭素の発生を認め た。暗赤色の溶液を更に３５分間還流させた。溶液を冷却し、撹拌しながらイソ プロパツール（４００ｄ）に注入した。ＴＬＣ分析（塩化メチレン、シリカゲル プレート）は新しい生成物（Ｒｆ−０，７３）を明らかにした。 過剰の溶媒を除去し、暗赤色の油を、Ｗｊ離剤として塩化メチレンを使用してフ ラッシュシリカゲルパッド（３インチ×６インチ）で濾過した。溶媒を減圧で除 去し、淡黄色の油をフラッシュシリカゲルカラム（３インチ×１８インチ）に適 用し、塩化メチレンで溶出して標題のブロモエステル生成物をイソプロパツール 溶媒和物（これは未臭素化エステル５％未満を含んでいた）として７５％の収率 で透明な油として得、これを下記の分析により特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ！３） ８．１６（ｄ、２１１）、　７．３８（ｄ、２Ｈ）、　５．０５（ｓｅｐｔｅｔ 、ｌ１ｌ）、　４．１４（ｄｄ、１１１）。 ２．８８（＋ｍ、４Ｈ）、　２．３９（ａ＋、４Ｈ）、　１．２９（ｄ、６１１ ）　；’　”ＣＮＭＲ（ＣＤＣＩ！　３） １６８．７．１４７．７．１２９．３．１２３．８．６９．９．４５．１．３５ ．６．３３．０゜２１．５．２１．２゜ ペンテンで安定化したクロロホルム３Ｃ１ｄ中のサイクレン（ｃｙｃｌｅｎ）遊 離塩基３．１３７ｇ　（１８，２ミリモル）の撹拌溶液に、ｄ　、１−２−ブロ モ−４−（４−ニトロフェニル）−ブタン酸イソプロピルエステル（例Ｏの操作 により調製した）　４．８１ｇ　（１４，６ミリモル（補正済））を窒素雰囲気 下で撹拌しながら５分間にわたって添加した０反応溶液を室温で２４時間撹拌し た。ＴＬＣ分析（溶媒系２）は、標題のモノアルキル化生成物への変換を明らか にした（Ｒｆ−０，７８、ニンヒドリン、ヨウ素、及びＵＶ活性で検出）。黄色 のクロロホルム溶液を、５％メタノール性クロロホルムで前溶出した１インチ× １フインチのフラッシュシリカゲルカラムに通用した。この溶媒系３００１ｄで 溶出し、その後、溶媒系２で溶出し、純粋な標題生成物を含む両分を得、これを 合わせ、蒸発して標題生成物４．８５ｇ（５，４６ミリモル）を明色の油として 収率７９％で得、更に下記の分析により特性決定した。 ’　ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３） ８．１５（ｄ、２Ｈ）、　７．４０（ｄ、２Ｈ）、　５．０７（ｐ、ＩＨ）、　 ３．３５（ｄｄ、ＩＨ）。 ２．６５−３．０（＋＊、１３■）、　２．５−２．６４（ｍ、４Ｈ）、　２． １４（ｍ、ＩＨ）、　２．００（ｍ、ＩＨ）。 １．２８（ｄｄ、６Ｈ）　；・ ”ＣＮＭＲ（ＣＤＣｆ　３） １７１．６．１４９．５．１４６．５．１２９．２．１２３．６．６Ｂ、１．６ ２．７．４９．２゜４７．５．４５．９．４５．７．３２．９．３１．０．２２ ．１．２２．０　。 ＩＲ（ＣＤＣｊ！　ｚ）ａｉ−’ ３２３１（Ｎ−Ｈ）、　２９７８．２９３３．１７２１（エステルカルボニル） 、１６０１、１５１２．１４５８．１３４５．１１０７　；高速原子衝撃質量分 析スペクトル、ｍ／　ｅ　４２２（Ｍ＋Ｈ））　’　。 ４０８、３９２゜ −１ガントの喋袈 直１」Ｌ− 新しく粉末にした無水炭酸カリウム４．６　ｇ　（３３，３ミリモル）を含むア セトニトリル４６ｄに、α−（４−ニトロフェニル）−１，４，７，１０−テト ラアザシクロドデカン−１−酢酸１−メチルエステル（例りの操作により調製し た）７００■（１，９１ミリモル）を溶解した。この懸濁液に、エチルブロモア セテ−）　１．０２２ｇ　（６，１２ミリモル）を一度に全部添加した。室温で ４時間撹拌した後、懸濁液を減圧で濾過し、濾過ケークをアセトニトリル１５ｄ で２回洗浄し、濾液を３８°Ｃで減圧で蒸発させて標題の粗テトラエステルを紫 色の固体として得た。その後、テトラエステルを、５％ＣｚＨｓＯ）！／　ＣＨ ｓＣｊ！　３ついで溶媒系３で溶出してシリカゲルクロマトグラフィーにより精 製して所望の生成物６２０ｍｇ　（０，９８８ミリモル、収率５２％）を得た。 この生成物を高速原子衝撃質量分析法（（Ｍ十〇）　”＝６２４）により特性決 定し、更に下記の分析により特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１２ｚ） ８．２４（ｄ）、　７．４５（ｄ）、　４．９４（ｓ）、　４．３５−４．１０ （ｍ）、　３．７９（ｓ）。 ３．７５−１．８４（ｍ）、　１．３４−１．２２（１１）　；”　ＣＮＭＲ（ ＣＤＣｉ　５） １７４．３．１７３．８．１７３．６．１７１．５．１４７．６．１３８．９． １３１．５゜１２３．４．６４．８．６１．５．６１．４．６０．２．５５．４ ．５５．０．５３．１．５２．９゜５２．７．５２．４．５１．９．５１．７． ４Ｂ、８．４Ｂ、３．４４．９．１９．１．１４．１゜ス１１１１ α−（４−ニトロフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン− １，４，７，１０−テトラ酢酸の調製６ＮのＨ１３０ｄ中に、α−（４−ニトロ フェニル）＝１゜４．７．１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０ −テトラ酢酸モノメチルトリエチルエステル（実施例１の操作により調製した） を溶解し、混合物を還流させて一夜加熱した。この還流期間の終了時に、溶液を ７０°Ｃで減圧で濃縮して黄色の固体を得た。この固体を水３ＪＩ１１に溶解し 、濾過し、濾液を蒸発させて粗生成物２５３ｍｇ　（０，３７８ミリモル、収率 ７９％）を得た。この生成物を分取ＴＬＣ（シリカゲル、２０％のＮｌ（，０＾ ｃ／Ｃ１ｈＱＨ（ｗｔ／　ｖ　）で展開）により精製し、高速原子衝１１ｆｉｉ 分析法（（Ｍｉｌｌ）　”−５２６）により特性決定し、更に下記の分析により 特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ） ８．２１（ｄ）、　７．４２（ｄ）、　４．８３（ｓ）、　３．８３−２．１９ （ｍ）、　１．９２（ｓ）　；１１ＣＮＭＲ（Ｄ２０） １７５．０．１？３．６．１７１．８．１６７．８．１６６．３．１４６．９． １３８．３゜１３０．１．１２３．０．６２：２．５４．０．５３．０．５２． ２．５Ｑ、４．９７．３．４６．８゜４４．８．４２．８．２０，０゜ １隻拠主 テトラ酢酸（実施例２の操作により調製した）のニトロ基の接触水素化をアダム ス触媒（ＰｔＯｚ）及び水素を使用して行なって、実質的に定量的な収率で！！ 題生成物を得た。この生成物を高速原子衝！Ｉ（ＣＭ＋Ｈ）　”＝４９６）及び 陰イオン交換ＨＰＬＣ（Ｑ−セファロース（商標）で）により特性決定し、更に 下記の分析により特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｔＯ） ８．１２（ｄ）、　７．８６（ｄ）、　５．６６（Ｓ）、　４．７３−４．５７ （＋１）、　４．２７−３．７８（Ｉｍ）。 ３．３９−２．９１　（ｍ）　； １３ＣＮＭＲ（０２０） １７６．５４．１７６．５２．１７６．４６．１４１．１．１２８．９．１２０ ．９．１１２．５゜６５．０．５５．９．５５．７．５３．６．４９．７．４９ ．５．４９．３．４５．７．４５．４゜４４．９．４４．６．４１．４゜ 方法Ｂ： この化合物を合成する別の方法は、例りからのモノエステルテトラアミン化合物 をモノ酸テトラアミン化合物に変換しく６Ｈの１ｌｃｆ、−夜還流）、その後ブ ロモ酢酸を用いて水溶液中でアルキル化し、その後、ニトロ基をアミン基に還元 （Ｐｔ０２触媒）して上記の生成物と同じ生成物を得ることであった・ 実ｌｌ生先 α−（４−ニトロフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン− １，４，７−）り酢酸の調製６ＮのＨＣＩ！６０ｄ中に、モノエステルテトラア ミン化合物（例りの操作により調製した）　２．０　ｇ　（５，４８ミ′リモル ）を溶解した。混合物を９５°Ｃで一夜（約１０時間）加熱し、その後それを７ ５℃で減圧で濃縮して、モノ酸テトラアミン四塩酸塩２．５３ｇ　（５，１１ミ リモル、収率９６％）を黄色の固体として得た。 上記のモノ酸テトラアミン四塩酸塩（０，５ｇ、１．０ミリモル）を水１５１ｄ に溶解し、ＮａＯＨでｐＨ９に１！節した。ブロモ酢酸の別溶液を調製しく０． ７１ｇ、５．１３ミリモル）、モノ酸テトラアミンの水溶液に添加した。溶液の ｐＨを再度９に調節し、１、　ＯＮのＮａＯＨの少量ずつの添加により反応中に このｐＨに保った０反応液を撹拌しながら、アリコートを異なる時点で取り出し 、アルキル化の進行を陰イオン交換ＨＰＬＣにより監視した。 ジアルキル化生成物（合計３個のアセテート基が存在）の量が最大値に達した時 、全反応混合物を凍結乾燥して暗色の固体を得た。その後、アルキル化生成物の この粗混合物をシリカゲルクロマトグラフィー（溶媒系１で溶出）により精製し 、その後陰イオン交換クロマトグラフィー（０〜１００％のＬＭのＮＨ４０ＡＣ の勾配で溶出）により精製し、分取ＴＬＣプレートの徹底的な精製操作は、標題 生成物３０■（０，０６ミリモル、６．０％）を黄色の固体として与えた。この 生成物を高速原子衝撃質量分析法（（Ｍ＋）Ｉ）　”−４６８）、陰イオン交換 ＨＰＬＣにより特性決定し、更に下記の分析により特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ） ８．１２（ｂｓ）、　７．３５（ｂｓ）、　４．７６（ｓ）、　３．５７−３． ４４（ａ＋）、　２．９７−１．８３（ｏ＋）、　１．８０（ｓ）　； ｔｉｃ　ＮＭＲ（ＤｚＯ） １Ｂ１．７５．　１８０．６８．　１７９．００．　１？５．３７．　１４７． ７０．　１４１．２２゜１３３．０８．　１２３．５３．　６８．４４．　５９ ．７２．　５６．００．　５２．８０．　４９．９６゜４９．２９．　４７．８ ６．　４５．３６．　４４．２６．　４２．７８．　４２．２５．　２３．７２ 　。 実Ｗ アルキル化生成物の粗混合物を、実施例４に記載した操作により調製した。この 粗混合物を、２０％のＮｌ１４０ＡＣ／　ＣＨ＊ＯＨ（ｗＬ　：Ｖ）で溶出して シリカゲルカラムでクロマトグラフィーにかけた。このカラムからの適当な両分 を合わせ、蒸発乾固した。 相当量のＮＨａＯＡｃを有する粗生成物をＮＡＮＯピュアー（商標）水８０ｍＡ に溶解し、凍結乾燥して淡褐色の固体を得た。この固体をＮＡＮＯピュアー（商 標）水２０ｄに溶解し、Ｈ２雰囲気下で、水素吸収が停止するまで、Ｐｔ（ｈ触 媒と共に振とうした。触媒を減圧濾過により分離し、濾液を凍結乾燥して黄色の 固体を得た。固体を溶媒系４　３ｄに溶解し、溶媒系４を用いてシリカゲルでク ロマトグラフィーにかけた。その後、溜めた両分を減圧でストリフピングして凍 結乾燥し、淡黄色の固体７７９．６■を得た。　”ＣＮＭＲ及びプロトンＮＭＲ は、この生成物が二種の可能な幾何異性体の５０７５０混合物であることを示唆 する。異性体混合物を過剰のＨＣｆｆｉと接触させ、凍結乾燥して標題生成物５ ４８．４ｍｇ　（収率６１％）を得た。融点〉２７０″Ｃ０陰イオン交換クロマ トグラフイー（ＨＰＬＣ系■）は一つの主ピークを示した（純度〉９４％）。高 速原子衝撃質量スペクトルは幾何異性体（Ｍ＋Ｈ）　’−４３８を示した。 災立医ｌ アルゴンでパージしたアセトニトリル中のα−（２−（４−ニトロフェニル）エ チル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−酢酸ｌ−メチルエ ステル（例Ｂの操作により調製した＞　１．４３ｇ　（３，６３モル）の溶液に 、無水炭酸ナトリウム１．７１　ｇ　（１２，３４ミリモル）を激しく撹拌しな がら添加した０反応混合物に、メチルブロモアセテート１．７８　ｇ　（１１， ６１ミリモル）を添加し、反応混合物を約２５℃で４８時間撹拌した。 ＴＬＣ分析は新規な生成物（Ｒｆ−０，６２、溶媒系２）の生成を示した。その スラリーにフラッシュシリカゲル６．０ｇを添加し、アセトニトリルを回転エバ ポレーターで除去した。得られた物質を、５％メタノール性クロロホルムで前溶 出した１インチＸ１６インチのシリカカラムに適用した。調製した溶液約４００ −を使用して幾つかの無極性不純物及び未反応アルキル化剤を溶出した。その後 、溶媒系２を適用し、生成物（Ｒｆ−０，６２）を含む画分を集め、合わせ、蒸 発させて標題生成物２．１　ｇ　（３，４４ミリモル、収率９５％）を淡黄色の ガラスとして得た。’ＨＮＭＲは、この生成物が配座異性体または幾何異性体の ２：ｌ混合物であることを示した。 ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｊ！　ａ、　５０°Ｃ）８．１３７（ｄ）、　８．１２８（ ｄ）、　７．３９８（ｄ）、　７．３８５（ｄ）、　３．８２（ｓ）。 ３．７６（ｓ）、３．７５（ｓ）、３．７４（ｓ）、３．６８（ｓ）、１．５− ３．５２（ｍ）；”　ＣＮＭＲ（ＣＤＣｊ！　３　、　５０　”Ｃ、７５ＭＨｚ ）１７５．８．　１７４．２．　１７４．１．　１７４．０．　１４９．０．　 １２９．５．　１２９．３゜１２３．６．　６０．１．　５５．１．　５２．８ ．　５２．７．　５２．６．　５２．４．　５２．２．　５２．１゜５２、Ｑ、 ５１．２．　５１．１．　５１．０．　４９．１．　４Ｂ、８．　４７．５．　 ４５．２．　３４．２゜３２．６゜ 亥ｆ 窒素雰囲気下で１０％のパラジウム／カーボン触媒４００■を含むメタノール２ ５ｄ中に、α−（２−（４−ニトロフェニル）エチル）−１，４，７，１０−テ トラアザシクロドデカン−１゜４．７．１０−テトラ酢酸１，４．７．１０−テ トラメチルエステル（実施例６の操作により調製した）　１．４１ｇ　（２，３ １ミリモル）を溶解した。過剰の水素を１気圧で３時間にわたって溶液中にパー ジした。ＴＬＣは強いニンヒドリン陽性の物質（Ｒｆ−０，６２、溶媒系２）の 生成を示した。メタノール性触媒スラリーをセライトで濾過し、溶媒を蒸発させ て標題生成物１．２１ｇ　（２，０８ミリモル、収率９１％）を白色の固体ガラ ス（配座異性体の２：１混合物として）として得た。少量の配座異性体または幾 何異性体を、１０％メタノール性クロロホルムを用いて、フラッシュクロマトグ ラフィーにより主異性体から分離して１題生成物をオフホワイトの粉末（融点８ ９〜９５”Ｃ）として得、これを下記の分析により特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｊ！□５０″Ｃ） ６．９４（ｄ）、　６．８９（ｄ）、　６．６９（ｄ）、　６．６６（ｄ）、　 ３．９０ｇ）、　３．８０（ｓ）。 ３．７８（ｓ）、３．７４（ｓ）、３．７３（ｓ）、３．７２（ｓ）、３．７０ ｓ）、１．５−３．５（鍋）； ”ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ２１　ｓｏ″Ｃ，７５ＭＩＩｚ）１７６．１．　１７４． ０．　１７３．９．　１７２．２．　１７０．４．　１６９．６．　１４４．２ ゜１４４．１．　１３０．６．　１３０．５．　１２９．５．　１２９．１．　 １１５．９．　１１５．８．　６２．６゜５８．７．　５５．１．　５４．３． 　５２．７．　５２．５．　５２．３．　５２．２．　５２．１．　５２．０゜ ５１．９．　５１．８．　５１．７．　５０．２．　５０．０．　４７．３．　 ４４．７．　３２．８．　３１．８゜３０．０．　２５．２； 高速原子衝撃質量スペクトル、ｍ／　ｅ　６０２　（Ｍ＋Ｎａ”）　、　６１Ｂ （Ｍ＋Ｋ”）　ｅ、（６２４Ｍ＋２Ｎａ”−Ｈ’）　”。 裏旌且ｌ 濃塩酸５０Ｊｄ中に、α−（２−（４−アミノフェニル）−エチル）−１，４， ７，１０−テトラアザシクロドデカン−１゜４．７．１０−テトラ酢酸１，４． ７．１０−テトラメチルニス１．５ｇ（２，５９ミリモル）を溶解した０反応混 合物を約１０５°Ｃで６時間還流させた。ＴＬＣ（溶媒系１）は、塩酸塩として の標題生成物（Ｒｆ−０，４３）へのエステル（Ｒｆ−０，８８）の変換を示し た。過剰の溶媒を回転エバポレーターで除去し、得られた白色の固体を乾燥した 。塩酸塩としての標題生成物を１．６ｇの収量で得、下記の分析により特性決定 した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ，ｐＤ”　１．０　、　９０°Ｃ）７．４８（ｄ）、７．４ ２（ｄ）、２．８−４．３（履）、２．２３（＋ｓ）、２．０３（ｍ）；１３Ｃ ＮＭＲ（０，０，ｐＤ−１，０、９０°Ｃ、７５ＭＨｚ）１７６．４．　１７４ ．９．　１７１．６．　１４４．７．　１３２．９．　１３２．８．　１３０． ４゜１２５．７．　６１．７．　５６．８．　５６．０．　５３．７．　５３． １．　５１．６．　４７．９．　３４．３゜３７．６゜ 高速原子衝撃質量スペクトルｍ／　ｅ　５２４　（Ｍ＋Ｈ）　”　、　５４６（ Ｍ＋Ｎａ”）　”、　５６８　（Ｍ＋２Ｎａ”−Ｈ”）　”。 フラッシュクロマトグラフィー及び溶媒系１を使用して、エステルの痕跡量の不 純物を、塩酸塩としての標題生成物から除去した。１インチ×２３インチのフラ ッシュシリカゲルカラムに、塩酸塩としての標題生成物１．１０ｇを適用した。 １１題生成物のみを混合アンモニウムカリウム塩として含む両分を合わせて５８ ０＋ｎｇを得た。 ＋１ＰＬｃ分析は、その物質が２３Ｏｎ＋ａ及び２５４ｎａ＋で９８％より高い 純度であることを示した。 高速原子衝撃質量スペクトル、ｍ／　ｅ　５６２　（Ｍ＋Ｋ）　”、　５８４（ Ｍ＋Ｋ”＋Ｎａ”−Ｈ”）　、　６００　（Ｍ＋２Ｋ”−Ｈ”）　”。 テトラ酸及びトリ酸（２，０５ｇ）（実施例８の操作により調製した）の両方を 含む粗溶液を最小量の溶媒系１に溶解し、この溶媒で前溶出したフラッシュシリ カゲルの１２インチ×３インチのカラムに通用した。標題生成物（溶媒系１中Ｒ ｆ　−０，６３）を含む溶出画分を集め、α−（２−（４−アミノフェニル）　 エチル）　−１、４、７，１０−テトラアザシクロドデカ７−１　、４．１０− ）り酢酸混合アンモニウム、カリウム塩２００■を得た。′Ｈ及び”ＣＮＭＲ分 析は、このトリ酸が対称異性体（１，４，１０−トリ酸位置異性体）であること を示唆した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ，ｐＤ−０，５（ＤＣＩ）、　Ｔ　−９０”Ｃ）７．５２（ ｄ）、　７．４６（ｄ）、　３．６０（ｍ）、　３．５４（ｍ）、　３．１９（ ＋ｏ）　；”ＣＮＭＲ（ＤｚＯ，ｐＤ＝０．５．　Ｔ−９０°Ｃ）１７６．１． １７０．２．１４０．０．１３２．７．１３１．１．１２６．１．５７．６．５ ７．２゜５６．１．５４．９．５３．２．５１．５．５１．２．３１．２゜高速 原子衝撃質量スペクトル、ｍ／　ｅ　４６６　［Ｍ＋Ｈ”　）　”　。 ５４２　（Ｍ＋２に−Ｈ）　）　’。 裏胤Ｎ刊 メチルブロモアセテ−）（５６５ｍ、　５．９７ミリモル）をアセトニトリル（ ２０１１！ｌ）中のα−（２−メトキシ−５−ニトロフェニル）−１，４，７， １０−テトラアザシクロドデカン−１−酢酸メチルエステル（５８０■、１．４ ７ミリモル）（例Ｎの操作により調製した）及び粉末炭酸カリウム（１，１５ｇ 、８．３２ミリモル）だ。粗生成物をクロマトグラフィー（シリカゲル、塩化メ チレン中８％のメタノール）により生成した。標題生成物を黄色の固体（４６９ ■、収率５２％）　、ＴＬＣＲｆ−０，４（シリカゲル、ＣＨ（／！、中ｌθ％ のＣ１ｌ！ＯＨ）として得、下記の分析により特性決定した。 １３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｆ　５） １７３．２．１７２．６．１６１．２．１３９．１．１２５．１．１２４．６． １２０．５゜１１０．７．５７．０．５５．６．５３．５．５２．６．５１．３ ．５０．８．４６．８．４６．０゜４４．０゜ 皇施拠旦 濃塩酸（５ｄ、Ｊ、Ｔ、ベーカー（Ｂａｋｅｒ）ウルトレックス（ＵＬＴ−ＲＥ χ）中のα−（２−メトキシ−５−ニトロフェニル）−１゜４．７．１０−テト ラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸テトラメチルエステル（ 実施例１０の操作により調製した）の溶液を窒素雰囲気下で５時間還流させた。 その後、溶液を減圧でｉｌｌ縮乾固して固体残渣を残した。これをクロマトグラ フィー（シリカゲル、溶媒系６）により精製して標題生成物をオフホワイトの固 体（２０９■）として得た。この物質を四基酸塩に゛変換し、下記の分析により 特性決定した。 ”ＣＮＭＲ（０２０−ＤＣ／！、　８０°Ｃ）１７１．０．１６６．９．１６１ ．２．１３９．０．１２５．５．１１９．３．１１．０．７゜５６．８．５４． ５．５２．７．５１．０．４９．２．４９．０．４６．３．４２．９゜裏施土肥 − 水（２０Ｍ１）中のα−（２−メトキシ−５−ニトロフェニル）−１，４，７， １０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７゜１０−テトラ酢酸（１５７■） （実施例１１の操作により調製した）の溶液中に、酸化白金（２０■）を添加し た。この混合物を室温で１時間水素化した（１気圧の水素）、濾過後、その物質 をクロマトグラフィー（シリカゲル、溶媒系５）により更に精製して標題化合物 （１４１■）をオフホワイトの固体として得、下記の分析により特性決定した。 １３ＣＮＭＲ（ＤｚＯ）−ＤＣＩ　） １７５．５．１７２．６．１７２．３．１５９．９．１２８．８．１２７．５． １２４．６゜１２３．８．１１５．５．６１．２．５８．１．５７．３．５５． ７．５３．４．５１．６．４９．６゜４７．４゜ １施■旦 撹拌しながらアルゴンでパージしたアセトニトリル４−中に、１−（４−アミノ −ベンジル）−１，４，７−１０−テトラアザシクロデカン四塩酸塩（例Ｊの操 作により調製した）、炭酸カリウム２６０■（１，８８ミリモル）、及びメチル ブロモアセテート１０８■（０，７０８ミリモル）を添加した。混合物を２５° Ｃで４８時間撹拌した。塩を含む溶液を１　ｃｍ　Ｘ　４　ｃｔ＊のフラッシュ シリカゲルカラムに適用し、アセトニトリルで溶出した。所望の生成物を含む両 分を合わせ、溶媒を回転蒸発により標題生成物６５■（０，１３２ミリモル、収 率５６％）を得、これを下記の分析により更に特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ） ７．２９（ｄ）、　６．７５（ｄ）、　４．６２（ｓ）、　４．２０（ブロード ｓ）、　３．７０（ｓ）。 ３．６９（ｓ）、　３．６４（ｓ）、　３．６２（ｔ）、　３．２７（ｓ）、　 ３．０６（ｔ）、　２．８２（ブロードｔ）、２．７９　（ブロードｔ）；”　 ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ　３．　７５ＭＨ２）１７！、４．　１７１．０．　１４８ ．４．　１３２．８．　１１７．５．　１１５．０．５５．９．５５．３゜５４ ．７．５３．１．５１．７．５１．４．５０．６．５０．５．４７．４゜実１１ １Ｈ １−（４−アミノベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン− ４，７，１０−トリ酢酸塩酸塩の調製６Ｎの塩酸２ｄ中で、１−（４−アミノベ ンジル）−１゜４．７．１０−テトラアザシクロドデカン−４，７，１０−）り 酢酸、４．７．１０−）リメチルエステル（実施例１３の操作により調製した） ４２■（０，０８５ミリモル）を８０″Ｃに２時間加熱した。ＴＬＣは幾つかの 生成物（所望の標題生成物に関してＲｆ−０，６０、溶媒系１）。溶媒を除去し て粗標題生成物４１■を得た。 裏血炭用 アルゴンでパージしたアセトニトリル７５Ｉｄｌ中の１−（２−（４−ニトロフ ェニル）エチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン２．２４ｇ　 （６，９７ミリモル）（例Ｇの操作により調製した）の溶液中に、無水炭酸カリ ウム３．１７ｇを激しく撹拌しながら添加した。この反応混合物中に、メチルブ ロモアセテ−１−３，２０ｇ　（２０，９ミリモル）を５分間にわたって滴下し て添加した０反応混合物をアルゴン雰囲気下で１７時間撹拌した。ＴＬＣ分析は 出発物質（Ｒｆ　＝０．７３、溶媒系１）から新規な生成物（Ｒｆ＝０．４６、 溶媒系１）への変換を示した。 その溶液にクロロホルム７０ｄを添加し、懸濁した塩を含む溶液を１インチスフ インチのフラッシュシリカカラムに通用した。クロロホルム中１０％のメタノー ルを用いて生成物を溶出して標題生成物２．９５ｇを褐色の油として得、これは 減圧乾燥後に脆いガラスを生成した（収率７８％）、標題生成物を下記の分析に より特性決定した。 ’ＩＩ　ＮＭＲ（ＣＤＣ１，３） ８．１７（ｍ、＋ｓ）、　７．４−７．６６（ｍ）、　２．３８−３．９５（ｓ ）。 ’　”ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ　ｓ　、７５ＭＨｚ）１７１．５．１７１．２．１４ ６．７．１４４．５．１３０．３．１２３．９．５６．０．５５．２゜５３．５ ．５３．４．５２．６．５１．９．５１．８．５０．６．４８．１．２９．５゜ １１舅用 メタノール５０ｄ中に、粗１−　（２−（４−ニトロフェニル）エチル）−１， ４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−４゜７．１０−トリ酢酸、４，７． １０−）リメチルエステル（実施例１５の操作により調製した）　２．８　ｇ　 （５，１８ミリモル）を溶解した。窒素でパージした撹拌溶液中に１０％パラジ ウム／カーボン触媒（６００■）を添加した。溶液を窒素の雰囲気下に保ち、そ の後、水素（１気圧、２０〜２５°Ｃ）を撹拌溶液に２．５時間パージした。そ の後、溶液を窒素で数分間パージし、触媒をセライトの短かい床による濾過によ り除去した。ＴＬＣ分析（クロロホルム中１０％のメタノール）は標題生成物（ Ｒｆ　＝０、１４　）を明らかにした。標題生成物をクロロホルムでシリカゲル から溶出して２．２　ｇ　（４，３３ミリモル、収率８３％）を白色のガラスと して得、下記の分析により特性決定した。 ’　ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１２３） ７．０３（ｄ、ｍ）、　６．６３（ｄ）、　３．４−３．６（ｍ）、　２．７− ３．２（ｍ）　；’　”ＣＮＭＲ（ＣＤＣ１，ｓ　、　７５ＭＨｚ）１７１．４ ．１７１．２．１４５．６．１２９．７．１２５．６．１１５．５．５５．９． ５４．４゜５４．３．５３．０．５２．８．５１．８．５１．６．５０．３．４ ７．８．２８．６　；高速原子衝撃質量スペクトル、ｍ／　ｅ　５０８　（Ｍ＋ Ｈ”）　”。 １血孤Ｈ 濃塩酸３〇−中に、１−　（２−（４−アミノフェニル）エチル）−１，４，７ ，１０−テトラアザシクロドデカン−４，７゜１０−トリ酢酸、４，７．１０− ）リメチルエステル（実施例１６の操作により調製した）８５０■（１，６９ミ リモル）を溶解した。 溶液を７０〜８０°Ｃで２．５時間撹拌し、溶液を撹拌しなから２５°Ｃに冷却 し、撹拌を約１８時間続けた。溶媒を減圧（１０ａ＊　、　７５°Ｃ）で回転エ バポレータ′−で除去した。溶媒和物及び過剰の塩化水素を得られた透明な油か ら減圧乾燥（１０−’ｍｍ　、　４５℃）により除去した。標題生成物を８９０ ■の収量で白色の固体（Ｒｆ−０，４６、溶媒系２）として得、下記の分析によ り更に特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ９ｐＤ−１，９、Ｔ　＝９０°Ｃ）７．５０（ｄ）、　７． ４Ｈｄ）、　４．２６（ｓ）、　３．４３−３．６８（ｍ）、　３．０−３．３ （ｍ）　；”ＣＮＭＲ（ＤｚＯ，ｐＤ−１，９、Ｔ−９０°Ｃ）１７６．７．　 １７０．９．　１３９．８．　１３３．０．　１３１．２．　１２５．９．５７ ．５．５７．１゜５５．４．　５４．４．　５２．７．　５１．０．　５０．６ ．　３１．３　；高速原子衝撃質量スペクトル、ｍ／ｅ　４６６（Ｍ＋Ｈ”）、 　４８ＢＣＭ＋Ｎａ”）　、５１０　（Ｍ＋２Ｎａ”−Ｈ”）　”。 １０ｃｍのバーチシル（Ｐａｒｔｉｓｉｌ）　５００５３　ＲＡＣｎ逆相カラム を用いるＨＰＬＣ分析は、９２％より大きい面積の純度（２５４Ｍ　）を示した 。溶離剤は０．０５Ｍのリン酸カリウム溶液（ｐＨ１，０）中の１０％のアセト ニトリルであった。 叉施炭則 １−　［２−（４−アミノフェニル）エチル］−１，４，７゜１０−テトラアザ シクロドデカン−４，７，１０−）り酢酸、塩酸塩（実施例１７の操作により調 製した、１０６■、０．２１ミリモル）を、窒素雰囲気下で水２Ｉ７２中で撹拌 しながら溶解した。 重炭酸ナトリウム（１０５，６■、１．２６ミリモル）を徐々に添加して二酸化 炭素の発生（ｐＨ８，６を生じる）による発泡を防止した。チオホスゲン（１６ ，８ｍ、０．２２ミリモル）を添加し、１時間激しく撹拌した後、ＴＬＣ分析（ アセトニトリル中２０％の水）は、出発物質（Ｒｆ−０，１２）から標題生成物 （Ｒｆ　−０，２６）への変換を示した。溶媒を回転蒸発により粗生成物から除 去して、塩化ナトリウムを含む標題生成物１３０■を得た。 この物質の赤外分析（ＫＢｒペレット）は、イソチオシアネート部分（ＳＣＮ　 ＝　２１５０ｃｍ　−’　）の存在を確カメタ。 裏施撚用 １−　（２−（４−ニトロフェニル）−エチル）−１，４゜７．１０−テトラア ザシクロドデカン（例Ｇの操作により調製した）３９５＠ｇ（１，１２ミリモル ）及びに、ＣＯ３１，５ｇ　（１１ミリモル）を含む撹拌アセトニトリル溶液５ ｄ中に、エチルブロモアセテート４９６ｄ　（４，５ミリモル）を一度に添加し た。Ｈ１雰囲気下で６８°Ｃで１時間加熱した後、得られた懸濁液を濾過した。 濾過ケークをＣ１ｈＣＮ（２Ｘ１０ｄ）で洗浄した。その後、濾液を濃縮して粗 生成物を粘稠な油として得、ジエチルエーテル３０−ですり砕いて、：ａ縮して １−　（２−（４−ニトロフェニル）エチル）−１，４，７，１０−テトラアザ シクロドデカン−４゜７　、１０−　）り酢酸トリエチルエステル６５０■（収 率１００％）を得、下記の分析により特性決定した。 ’　ＨＮＭＲ（ＣＤＣｆ　３） ８．２（ｄ）、　７．６（ｄ）、　４．３（ｑ）、　２．６−３．８（＋ａ）、 　１．５５（ｔ）　；高速原子衝撃質量スペクトル（Ｍ＋Ｈ）　”＝５８８゜裏 隻糎銭 水１５　ａｌｌ中の１−　（２−（４−ニトロフェニル）エチル〕−１，４，７ ，１０−テトラアザシクロドデカン−４，７，１０−トリ酸トリエチルエステル （実施例１９の操作により調製した）２００ｍｇ　（０，３５ミリモル）の懸濁 液中にＮａＯＨ（５０％−ｔ／ｗｔ、　３当量）５９ｊ１１を添加した。混合物 を８０°Ｃで６時間撹拌した。その後、得られた均一の橙色の溶液を室温に冷却 し凍結乾燥して褐色の固体を得、これを０〜１０％の水性ＨＯＡｃの線形勾配を 用いてＨＰＬＣ（Ｑ−セファロース（商標）　、ＨＰＬＣ系■）により６０分間 精製して加水分解生成物１−　（２−（４−ニトロフェニル）エチル）−１，４ ，７，１０−テトラアザシクロドデカン−４，７，１０−）り酢酸を得（収率５ ０％）、下記の分析により特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ） ８．２２（ｄ）、　７．５５（ｄ）、　３．６０−３．９０（ｍ）、　３．１０ −３．４０（ｍ）。 パール（Ｐａｒｒ）−水素化装置中に、１−　（２−（４−ニトロフェニル）エ チル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−４，７，１０−）り酢 酸（実施例２０の操作により調製した）２１４■（０，４３ミリモル）及び１０ ％のＰｄ／Ｃ４０■の水溶液５０ｍを入れた。水素の吸収が停止するまで懸濁液 を振とうした。濾過後、水溶液を凍結乾燥して１−　（２−（４−アミノフェニ ル）エチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−４，７，１０− ）り酢酸１９７ｍｇ　（収率９８％）を黄褐色の固体として得、下記の分析によ り特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ） ７．３５（ｄ）、７．２０（ｄ）、３．１０−３．７０（ａ＋）　；”ＣＮＭＲ （ＤｚＯ） １７３．８５．　１７２．５０．　１３７．９０．　１３１．９０．　１３０． ２２．　１２１．５５゜５６．２５．　５５．１４．　５４．４２．　５０．１ ２．　４９．６５．　４９．３１．　３１．００゜実ＪＬ［ホユ １−（２−メトキシ−５−ニトロベンジル）−１，４，７゜ｌＯ−テトラアザシ クロドデカンｌＯｇ（３ミリモル）（例Ｅの操作により調製した）を含む撹拌ア セトニトリル溶液（２０ｄ）中にメチルブロモアセテート１．６ｇ（１１ミリモ ル）を一度に添加した。１時間後、炭酸カリウム（０，３ｇ）を添加し、撹拌を 室温で１２時間続けた。その後、反応混合物を濾過し、濾過を減圧で濃縮した。 得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、Ｃｌｌ３ＣＮ／　ＣＨｘＯ ｔｌ　、　９　：　１　、　ｖ　：　ｖ　）にかけ、濃縮後、トリエステルを収 率６８％で白色の固体として得、下記の分析により更に特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＣＤ（／！３） ８．１９（ｄ）、　８．１４（ｓ）、　７．１８（ｄ）、　２．５８−３．９９ （ｍ）　；ＩｆｆＣ）１門Ｒ（ＣＤＣｌ　２） １７３．５３．１７２．８３．１６４．５９．１４２．２８．１２８．５１．１ ２７．６９゜１２６．４９．１１２．３０．５７．２５．５６．９０．５５．０ ３．５４．２１．５３．０６゜５２．０９．５２．００．５１．５４．５０．６ ８．５０．３０．４９．８５．４９．６３゜４９．３１．４９．００．４８．６ ８．４８．３７．４Ｂ、０５．４７．７０．４７．３９゜実ＪＬｆ組υ １−（２−メトキシ−５−ニトロベンジル）−１，４，７゜１０−テトラアザシ クロドデカン−４、７，１０−）＋Ｊ酢酸４　。 ７．１０−）リメチルエステル（実施例２２の操作により調製した）　０．２５ ｇ　（０，４５ミリモル）を含む６Ｍの塩酸溶液（３ＩＩｉ）を撹拌し１００″ Ｃで２４時間加熱した。室温に冷却した後、水５−を添加し、水溶液を凍結乾燥 して黄褐色の固体を得た。カラムクロマトグラフィー（シリカ、溶媒系５）の後 、トリ酸をオフホワイトの固体として収率６０％で単離しく融点２２８〜２３０ °Ｃ（分解））、下記の分析により更に特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ） ８．１．８（ｄ）、８．０９（ｓ）、７．１２（ｄ）、３．８７（ｓ）、２．１ ０−３．６０（ｍ）；”ＣＮＭＲ（Ｄ！０） １８０．４５．１７９．８０．１６３．６６、１４０．２２．１２８．６０．１ ２６．２４゜１２２．６６、１１１．５０．５９．９１．５９．０６．５６．４ ４．５２．７５．５０．９２゜４Ｂ、８４゜ １隻勇旦 Ｐｔ０ｔ　５０■を含む窒素パージした水溶液５０ｄ中に、■−（２−メトキシ −５−ニトロベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−４， ７，１０−）り酢酸（実施例２３の操作により調製した）５０■を添加した。バ ールボンベ中で１時間水素化した後、溶液を濾過し、水性濾液を凍結乾燥してア ニリン誘導体を黄褐色の固体（収率９５％）、融点〉２４０’Ｃ（分解）として 得、下記の分析により更に特性決定した。 ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ） ７．５４（ｂｓ）、　７．２Ｈｄ）、　７．０９（ｄ）、　７．０５（ｓ）、　 ６．８８（ｓ）、　３．８４（ｓ）、　３．７８（ｓ）、　２．８５−３．５６ （ｍ）　；Ｉ３ＣＮＭＲ（ＩｈＯ） １８０．５９．１７９．７７、１５３．３８．１２４．１６．１２４．０３．１ ２２．８２゜１２０．１８．１１３．６８．１１２．４３．５９．０６．５７． ０２．５５．９６．５３．６７゜５０．５２．５０．０８．４９．７０．４９． ０４．４８．３２゜１隻五刹 １−（２−ヒドロキシ−５−二トロベンジル）−１，４゜７．１０−テトラアザ シクロドデカン（２００■、０．６２ミリモル）（例Ｆの操作により調製した） の水溶液（１戚）に、ブロモ酢酸（３０９，，２，２ミリモル）及びＮａ０１１ 　（３，５ｒｔｄｌ、約ＩＭ）を室温で撹拌しながら添加した。反応の進行をＬ Ｃ（陰イオン交換、Ｑ−セファロース（商標））により監視し、ｐＨを必要に応 じてＮａＯＨの添加により約８に維持した。１２時間後、溶液を凍結乾燥し固体 残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（カラム）にかけ溶媒系５で溶出した。 主な黄色の両分を濃縮し、水に溶解し、凍結乾燥して所望の生成物を明黄色の粉 末（１５０■、収率４９％）（融点２３０〜２３５’Ｃ（分解））として得、下 記の分析により更に特性決定した。 ”ＣＮＭＲ（ＤｚＯ） １６６．４１．１６５．６０．１６０．００．１１９．９１．１１６．０２．１ １３．８５゜１１１．７１．１０４．５９．４５．２０．４４．５０．４３．９ ６．３６．４３゜災施撚皿 １−（２−ヒドロキシ−５−二トロベンジル）−１，４゜７．１０−テトラアザ シクロドデカン−４，７，１０−）り酢酸（２００■、０．４ミリモル）（実施 例２５の操作により調製した）のアルゴンでパージした水溶液（２５ｄ”）中に 、ＰＬＯ，（１３０■）を添加し、その後Ｈ，（バール水素化装置）を導入した 。黄色が完全に消失した後、溶液をアルゴンでパージし、濾過した。 その後、水溶液を凍結乾燥して生成物を黄褐色の固体（１４６■、収率７８％） を得た。 裏施■釘 乾燥アセトニトリル３５ｄ中のα−（３−（４−ニトロフェニル）プロピル）− １，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−酢酸１−メチルエステル（ 例Ｐの操作により調製した）　１．００ｇ　（２，３７ミリモル）の溶液に、窒 素下で無水炭酸カリウム１．１５ｇ　（８，３２ミリモル）を添加した。乳酸メ チルエステルの光学活性α−ベンゼンスルホネ−１（１，７９ｇ、７．３６ミリ モル、Ｓ　：　Ｒ＝９８：２）を添加し、混合物を６０分間撹拌した。ＴＬＣ分 析は新規生成物（標題テトラエステルに関してＲｆ＝０．７１、溶媒系２及びト リエステルに関してＲｆ＝０．８９）の生成を示した。懸濁された炭酸塩を含む 得られた溶液をクロロホルム４〇−中に注ぎ、沈殿した無機塩を濾過した。 溶媒をこの濾液から除去し、橙色の粗油を溶離剤として溶媒系２を用いて１イン チ×１６インチのフラッシュシリカゲルカラムで２回クロマトグラフィーにかけ 、標題生成物をテトラエステルジアステレオ異性体（アンダーアルキル化生成物 （ｕｎｄｅｒａｌｋｙｌａｔｅｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を含まない）の非分割混 合物（１，ＯＯｇ、　１．４７ミリモル、収率６２％）として得た。 この物質の’ＨＮＭＲ分析は、それが約０．５当量の未反応ベンゼンスルホネー ト誘導体を含むことを示した。この物質のＮＭＲスペクトルはクロロホルム中６ ０°Ｃで合一しなかった。 ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｆ　５１６０℃） ７．９−８．１（ｎ＋、２Ｈ）、　７．２−７．４（＋ｉ、２Ｈ）、　５．０６ （１１，ＬＨ）、　３．４−４．０（０１゜９Ｈ）、　１．７−３．４（蹟、２ ０Ｈ）、’　１．０−１．７（＋ｎ、１５Ｈ）　；ＩＲ（ＣＤＣＱ　ｓ）　ｃｍ −’ ２９８０、２８４０．１７２５．１７１０　（エステルカルボニル）＋　１５９ ０゜１５１０、１４４０．１３４０　； 高速原子衝撃質量スペクトル、ｍ／ｅ７０２（旧Ｎａ’）　”、　６８７゜実ｍ α−（２−（４−ニトロフェニル）エチル）−１，４，７゜ｌＯ−テトラアザシ クロドデカン−１−（Ｒ，Ｓ）−アセチル−４，７，１０−）リス−（Ｒ−メチ ル酢酸）、１−イソプロピル−４，７，１０−）リメチルエステル（実施例２７ の操作により調製した）９５０ｍｇ　（１，４０ミリモル未修正）（これは未反 応のα−（３−（４−二トロフェニル）プロピル）−１，４，７゜１０−テトラ アザシクロドデカン−１−酢酸１メチルエステルを含んでいた）を、窒素雰囲気 下で１０％パラジウム／カーボン触媒１．ＯＯｇを含む３０％の水性メタノール ｌｏｄに溶解した。 過剰の水素を、その溶液中に７時間パージした。この時点で、ＴＬＣ検査は強い ニンヒドリン陽性の物ｆ　（Ｒｆ　＝０．６２溶媒系２、出発物質に関してＲｆ 　＝０．７１）の生成を明らかにした。 メタノール性触媒スラリーをセライトで濾過し、溶媒を蒸留して標題の粗生成物 ８００■を透明な油（これはベンゼンスルホネートエステルの同時の水添分解か らのベンゼンスルホン酸（Ｒｆ−０，０９、溶媒系２）を含んでいた）として得 た。粗油をクロロホルム中１０％のメタノールを用いて１インチ×８インチのフ ラッシュシリカゲルカラムでクロマトグラフィーにかけ、これは空隙中に明黄色 のバンドを溶出した。その後、溶媒系２を通用して標題生成物（４８０■）を未 分割のジアステレオ異性体及び幾何異性体の混合物として収率５２％で溶出した 。三つの異なるａｂ四重線を’ＨＮＭＲの芳香族領域中で観察した。 ’Ｉｆ　ＮＭＲ（ＣＤＣｊ！　３．３０°Ｃ）６．６３−８．０（＋ｓ　（四重 線）、４１１）、　５．０７（ｍ、ＩＨ，イソプロピルメチンＨ）、　３．５３ −３．９（…、１３Ｈ，３，８５，３，７３，３，６９及び３．５６で四つの一 重線）、　３．４６（ｍ、１Ｂ）、　３．２５（ブロードｔ、３１１）、　２− ３．１（ｍ、１４Ｈ）。 １．０−２．０（ｍ、１５８）　； ”ＣＮＭＲ（ＣＤＩ！、　３０°Ｃ） １７？、３．１７７、１７６．４．１７６．２．１７５．９．１７４．３．１７ ２．９．１７０．６゜１４５．３．１４４．９．１３０．８．１２９．７．１２ ９．３．１２９．１．１２８．８．１２８．４゜１２７．５．１２６．３．１１ ５．２．１１５．１．１１４．９．６９．帆６８．４．６７．３゜６１゜６．５ ７．８．５７．４．５６．７．５６．５．５６．４．５２．９．５２．７．５２ ．１゜５０．８．５０．７．５０．６．４７．３．４７．１．４７．０．４６． ９．４６．５．４６．３゜４６．１．４４．８．４４．５．４４．３．３４．１ ．３２．９．３２．５．３２．２．３１゜８゜２４．８．２２．２．２２．１． ２２．０．２１．８．２１．６．１５．８．１４．９．７．７゜７．５．７．４ ．７．１　； 夏Ｒ（ＣＤＣＩ！　３）ｃｍ−’ ２９６０、２Ｂ４０．１７２０．　１５１０．１４５０．１３７５　；高速原子 衝撃質量スペクトル、ｍ／ｅ６７２（旧Ｎａ’）　”、　６８６゜Ｘ施拠銭 α−（２−（４−アミノフェニル）エチル）−１，４，７゜１０−テトラアザシ クロドデカン−１−（Ｒ，Ｓ）−アセチル−４、７，１０−トリス−（Ｒ−メチ ル酢酸）１−イソプロピル−４，７，１０−トリメチルエステルのジアステレオ 異性体混合物（４００■、０．５９ミリモル）（実施例２８の操作により調製し た）を、６Ｎの濃塩酸５０ｄに溶解し３０時間還流させた。ＴＬＣ分析（溶媒系 １）は、エステル（Ｒｆ−０，９８、溶媒系ｌ）から二つの新しいスポットＲｆ −０，６、高ジアステレオ異性体及びＲｆ−０，５４、低ジアステレオ異性体、 溶媒系１、両スポットともＵ■、ニンヒドリン、及びヨウ素に陽性であった）へ の変換を示した。過剰の溶媒を回転エバポレーターで除去し、乾燥した後、標題 生成物の粗ジアステレオ異性体の混合物（４０３■）を塩酸塩として得た。標題 生成物の二つのジアステレオ異性体の分取分離を、粗塩２９０■（０，５１ミリ モル）をｌＸ１３ｃｍのシリカフラッシュゲルカラムに適用し、これを溶媒系８ で溶出した。高Ｒｆジアステレオ異性体がカラムから最初に溶出したので、高Ｒ ｆジアステレオ異性体（１１９■、０゜２１ミリモル）は低Ｒｆジアステレオ異 性体（９０■、０．１６ミリモル）よりも純粋な形態で得られた。 高Ｒｆジアステレオ異性体に関する’ＨＮＭＲ：’ＨＮ門Ｒ（ＤｔＯ，９０°Ｃ ，ｐＤ＝７．５）７．１２（ｄ、２Ｈ）、　６．８０（ｄ、２）１）、　３．６ ６（＋＋ｇ、ｌＢ）、　３．５７　（ブロードｔ。 ３Ｈ）、　２−３．４（ｍ、１９Ｈ）、　１．８９（ｍ、ＩＨ）、　１．３７（ ｍ、ＬＨ）、　１．１５（ｄ、３Ｈ）。 １．１０（ｄ、３１１）、　１．０６（ｃｌ、３）り　；１３ＣＮＭＲ（ＤｔＯ ，９０℃、　ｐＤ寓７．５）１８４．４．１８４．２．１８４．０．１８３．３ ．１３５．９．１３２．６．１３１．７゜１１９．１．７Ｂ、２．６９．０．６ １．７．６１．５．６１．１．５７．４．５４．１．４９．７゜４９．６．４８ ．２．４７．７．４７ｔ２．３４．８．３３．８．９．６．９．１．９．０　。 高速原子衝撃質量スペクトル、ｍ／　ｅ　５６６　（Ｍ［”）　”、　５８８〔 旧Ｎａ’）　”、　６０４（Ｍ＋Ｋ”）”、　６２６　（Ｍ＋Ｋ”＋Ｎａ”−Ｈ ”）　”　＋６４２　（Ｍ＋２Ｋ”−ＩＩ”）　”。 −ナ社　の８．ＩＩ 金属リガンド錯体を、下記の種々の方法により調製した。 これらの方法は、水溶液中で金属とリガンドを混合し、ｐｔｔを所望の値に調節 することを含んでいた。錯体形成は、塩及び／または緩衝剤を含む溶液並びに水 中で行なった０時として、加熱溶液は、錯体形成を周囲温度で行なった場合より も扁い錯体の収率を与えることがわかった。また、ＢＦＣの合成中に使用した処 理は錯体形成を行なうことが示された。 ｌ施炭共 α−（４−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン− １，４，７，］、］Ｏ−テトラ酢酸実施例３の操作により調製した）の少量の試 料５３■（０，０９４ミリモル）を、水１００Ｉに溶解し、ｐｌ（６〜７で０． ０４３ＭのＳｍ　（ＯＡｃ）　：ｌ溶液（４８，８■、０．１２８ミリモル）３ ｍ２で処理した。この溶液を１００’Ｃで加熱し、錯体形成の程度を陰イオン交 換ＨＰＬＣにより測定した。錯体形成が陰イオン交換クロマトグラフィー、）Ｉ ＰＬＣ系■により完結した時、錯体の溶液を室温（約２５”Ｃ）に冷却し凍結乾 燥した。サマリウム錯体をシリカゲルクロマトグラフィー（溶媒系１で溶出）に より精製した。この操作が、標題生成物を収率８２％で与えた。この錯体をＴＬ Ｃ１高速原子衝撃質量分析法、陰イオン交換ＨＰＬＣにより特性決定し、下記の 分析により更に特性決定した。 ’Ｉｔ（ＤｚＯ） ８．９４．７．８１．７．２１．６．９７．６．８０．５．６３．５．０１．４ ．５Ｂ、　４．０１゜３．５６．１．７８．１．５３．１．２４．１．１０．０ ．７７、−２．８０．−２．９５゜−３，２１，−３，９１１ １３ＣＮＭＲ（ＤｔＯ） １９０．３．１８４．９．１８１．４．１４６．８．１３４．３．１２２．７． １１６．４゜８０．８．７２．６．６４．２．５７．２．５５．８．５４．７． ５３．４．５１．５．４９．７゜４５．５．４３．５．２３．６゜ 高速原子面Ｈ質量スペクトル、ＣＭ＋ｔｌ”）　”＝６４５（Ｓｓ同位元素０、 ＩＮのＩＩＣｊ！中の１５０ＪＪＩの５ａｄ−１５３（０，Ｉ　ＮのＨＣ２中３ ×１０−’Ｍ）及び６００ＩのＳａ＋Ｃｆ１（３Ｘｌ０−’Ｍ）の溶液を、５ｓ −１５３溶液を５ＩＩｌｃ　ｆ　３溶液に添加することにより調製した。 その後、２．０ＭのＮａ０Ａｃ　５．　Ｏｉｄを添加し、その後）ＩＥＰＥＳ緩 衝液中の５０ｍＭのりガント（実施例３の操作により調製した）４５４を添加し た。溶液のｐＨを、０．５ＭのＨＥＰＥＳ　２７５Ｉ１１で７に調節した。この 溶液を夫々５００４の二つのフラクションに分け、一つのフラクションを１００ °Ｃで１時間加熱した。 これらの溶液をＳＰ−セファデックス（商標）陽イオン交換樹脂に通した。錯体 としての金属の比率（％）を、前記の掻作を用いて測定した。結果は、加熱試料 に関して錯体としての金属９９．６％及び未加熱試料に関して９６．６％を示し た。 ■プロフィールによるキレートの６ 金属リガンド錯体の安定性は、それらを種々のｐＨ値に暴露し、溶液中の錯体に 関して分析することにより測定した。低ｐＨでは、リガンドのプロトン化が金属 の放出をひき起こす場合がある。高ｐＨでは、金属の水酸化物がキレート形成と 競合する。こうして、不活性キレートを期待する場合には、所望の不活性キレー トは高ｐＨ値及び低ｐＨ値に暴露された場合にキレートとして残存する。 本発明のキレートの幾つかに関する種々のｐＨ値に放ける不活性のプロフィール を、以下の実施例に記載された方法を用いて作成した。成る場合には、未錯化金 属を、溶液を陽イオン交換樹脂に通すことにより除去した。希薄な水酸化ナトリ ウム溶液及び塩酸溶液を使用して錯体溶液のｐＨを約１から約１４に調節した。 その後、錯体としての金属の比率（％）を前記の方法により測定した。 同様にして、幾つかの三官能キレート複合体を調製し、ｐＨ２，８，４，０及び ６．０に暴露した。溶液中に残存する複合体の量を、放射計検出器を用いてＩＩ ＰＬＣにより測定した。結果が、生物学の欄に於ける例ＸＸ中に示される。 夫旌斑共 例３０からの加熱されたサンプル及び未加熱のサンプルのそれぞれを２Ｘ２５０ μｌのアリコートに分けた。１個の２５０１１１のアリコートをＨＣｉ！、によ り下記の表に示すＩｌｌに調整した。第二の２５０４のアリコートをＩｌｌ量の ＮａＯＨにより所望のｐＨに調整した。所望のｐＨが達成された後、２５１ｔｌ のアリコートを取り出し、そして錯体としての金属のパーセントを前記のように して決定した。結果は次の通りであった。 このデーターが示すところによれば、このサンプルは加熱の有無及び試験ｐ８に 関係なく安定である。 夫施斑刹 ７、ｌＯ−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸（例３の 方法により製造される）を含有する溶液１０ＪＬ１を、Ｙ−９０でスパイクした １００１！１のＹ（ＯＡｃ）　ｚ　（０，００３Ｍ）に加えた。この溶液に５０ ０ｐｌの水を加え、次に１２５ｊ１１のＮａ０Ｎａ（０，５Ｍ）を加えた。水（ ２６５ｍ）をこの溶液に加えて全容をｌｄにした。この溶液を２個のアリコート に分けた。一方のアリコートを１００℃に１時間加熱した。加熱されたサンプル 及び未加熱のサンプルの両者を、前に記載したイオン交換法を用いて試験して錯 体としての金属の％を決定した。この結果は、加熱されたサンプル及び未加熱の サンプルについてそれぞれ８４％及び４％の錯体としての金属を示した。 夫ｌ性社 α−（４−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン− １，４，７，１０−テトラ酢酸（例３の方法により製造される）の溶液を蒸留水 に溶解して１．６３■／ｄの濃度とした。 塩化ルテチウムを０．ＩＮ）ＩＩに溶解して３．９　ｍｇ／ｄ（０，０１Ｍ）の 濃度にすることにより塩化ルテチウム溶液を調製した。 ルテチウム−１７’７（０，３ｌ１Ｍ）をトレーサーとして使用した。 ３０ｕＩ容量の０．０１Ｍルテチウム溶液を２４のＬｕ−１７７溶液に加えた。 上記からの適当量のリガンドを加え、そしてＨＥＰＥＳ緩衝液（０，Ｉ　Ｍ、　 ｐ）１７．６　）を加えて全容１０ｍとした。得られる溶液中のリガンド及びル テチウムは０．３ｍＭであった。次に、この溶液を１００℃に１時間加熱し、そ して前記の陽イオン交換法により錯体としてのＬｕの量が８６％であると決定さ れた。 実［位 サンプル７■（１０，８μｍｏｌｅ）のα−（４−アミノフェニル）−１，４， ７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７゜１０−テトラ酢酸、サマリ ウム（ｎｌ）錯体（例３０の方法により製造）を４００ＪＩＩの水に溶解した。 過剰のチオホスゲン（５０Ｊｌｌ）を添加し、次に４００　ＩＬｌのＣＯＣｌ、 を添加し、そして二相反応混合物を３０分間激しく撹拌した。この時間の終りに 、水層を５００　ＪのＣ１１Ｃｊ２．により４回抽出し、そして次に水層を凍結 乾燥して目的とする標記化合物を定量的量で得た。 ＵＶは、この化合物が２７２ｎｍ及び２８２ｎｍにバンドを有することを示した 。シリカゲルを用い７５二２５　（ｖ　：　ｖ）のＣ１ｈＣＮ　：１＋２０によ り展開したＴＬＣはＲｆ＝０．３８を与えた。出発物質はＲｆ−０，１９を有す る。ＩＲは２１００ｃ＋ｉ−’における一３ＣＮストレットを示し、ファスト・ アトム・ボンバードメント・マス・スペクトル（Ｍ十Ｈ”　）”は６８７であっ た。 ２施■並 サンプル９０１１ｇ　（１６０ｍｍｏｌｅ）のα−（４−アミノフェニル）−１ ，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７゜１０−テトラ酢酸（ 例３の方法により製造）をｌｌ１１の水に溶解した。この溶液に、５１■（１９ ２ｍｍｏｌｅ）のＹ　（ＯＡｃ）　ｘを含有する水３Ｉ１１を加えた。ｐＨ６〜 ７のこの反応混合物を１００℃に２時間加熱した０次に、得られる溶液をガラス ウールに通し、そしてハイブリダイスさせて１２６■の黄色固体を得た。固体を シリカゲル（溶剤系１）上でクロマトグラフ処理し、７１■（７６％）の目的の 錯体生成物を得た。陰イオン交換による分析が示すところによれば、Ｌｌ（Ｕの Ｓｎ錯体と同じ保持時間が見出された。標記の生成物は次のように特徴付けられ た：”ＣＮＭＲ（Ｄ！０） １８０．８．１８０．５．１７９．９．１４６．１．１３３．４．１２２．０． １１６．１゜？４．９．６６．３．５６．３．５５．８．５５．４．５５．１． ５４．８．５２．２．４６．０゜４４．０．２３．６； ’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ） ６．９０（ｄ）、　６．７０（ｄ）、　４．４０（ｓ）、　３．４５−３．０６ （ｍ）、　２．７１−２．１０（ａ＋）。 １．７５（ｓ）　。 ファスト・アトム・ボンバードメント・マス・スペクトルはＣＭ十Ｈ”″）　” 　＝５８２であった。 裏旌拠ｒ α−（４−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン− １，４，７，１０−テトラ酢酸−イツトリウム錯体のサンプル（例３６の方法に より製造）（１０■、１７μ５ｏｌｅ）を４００ｕｌの水に溶解した。この溶液 に６ｄｌ１１のチオホスゲン（過剰量）及び４００ｊｔ１のＣ）ＩＣｆｆｉ、を 加え、そして得られる溶液を４０分間激しく撹拌した。この間少量ずつ固体Ｎａ ＨＣＯｉを添加してｐｌ＋を約８に保持した０反応の終りにおいて水相を分離１ ３ＣＮＭＲ（Ｄ、０．８８°Ｃ、７５ＭＨｚ）し、そしてｌＩｉのＣｌｌＣｆ５ により４回抽出し、そして凍結乾燥した。標記生成物をＴＬＣ及びＵＶスペクト ルにより特徴リガンドα−［２−（４−アミノフェニル）エチル］−１゜４．７ ．１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸（例８の方 法により製造）を、強陽イオン交換樹脂（ＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ”’　Ｃ−２ ５、ファルマシア）上でのクロマトグラフィーにより混合プロトン化アンモニウ ム塩に転換した。 カラムはプロトン化形であり、そして蒸留水で洗浄した。リガンドのｉｌｌｖＭ された水溶液をカラムに通用し、次にカラムを蒸留水で洗浄した。リガンドをカ ラムから０．５　Ｍ　ＮＨ，ＯＨにより溶出した。溶出液を乾燥させた。 ５−の蒸留水中Ｙ（ＯＡｃ）　ｚ　・４ＨｔＯ（０，０７２８ｇ　−０，１２５ ｍｍｏｌｅ）の溶液を、５ｄの水中混合プロトン化アンモニウム塩リガンド（０ ，１２０ｇ　、　０．２１５＋ａ＋ｏｌｅ）の温溶液に加えた。溶液を還流し、 そして０．１　Ｍ　ＮＨ，ＯＩＩによりｐＨを約７．０に調整した。１時間還流 した後、溶液を冷却しそして乾燥した。白色固体を油浴中で約１０５°Ｃにて真 空下で加熱することにより過剰のＮＨ４０ＡＣを除去した。標記化合物（約１当 量の酢酸アンモニウムを含有していた）の収量は０．１４２ｇ　（９４％）であ り、そして次のように特徴付けられたニ ア３．１μ５ｏｌｅ）の溶液、及び１０−の蒸留水中４２■のＰＡ−ＤＯＴＡ混 ２３．８．　２７．６．　３５．４．４９．６．５５．０．５６．２．５６．９ ．５７．１．　６５．７゜６８．０．　１２１．７．　１３２．６．　１３８． ８．　１８０．７．　１８１．４．　１８２．０．　１８３．１　；ファスト・ アトム・ボンバードメント・マス・スペクトル、ｍ／ｅ６１０（陽性イオン、Ｃ Ｍ−＋２　Ｈ’　）　”　）、６０８（陰性合アンモニウムーカリウム塩（６３ ２，９７ｇ　／　ｍｏｌｅ、６６．４　ｕ　ｍｏｌｅ）の溶液を混合し、そして 蒸気浴上で加熱した。３０分間の後、例４１に記載の方法を用いてＨＰＬＣによ り決定する場合、（Ｓｓ（ＰＡ−ＤＯＴＡ）　）を形成する反応は完了した。分 液漏斗中で振とＡ）９５：５の０．０５Ｍ　Ｎａ０Ａｃ緩衝液（ｐＨ６，０）　 ：　ＣＨ３ＣＮ　、　Ｂ　）３０　：　７０の０．０５　Ｎａ０Ａｃ緩衝液（ｐ Ｈ６，０）　：　ＣＨ３ＣＮ　、　１５分間でＡからＢへ、であった。ＰＡ−Ｄ ＯＴＡ塩酸塩（保持時間＝１．３１分）及びＰＡ−ＤＯＴＡ混合アンモニウム− カリウム塩（保持時間−４，５５分）くいずれも例８の方法により製造したもの ）のそれぞれの溶液を１．６ｍＭ、ｐＨ６，０の０．５　Ｍ　Ｎａ０Ａｃ緩衝液 として調製した。キレートの生成は保持時間＝３．９６分におけるピークの出現 により決定した（例３８からのサンプルと比較して確認された）、キレート形成 の結果は次の通りであった。 明らかに、ＢＦＣの精製の方法はキレート化速度に対して効果を有する。 夫施■婬 ５ｓ（ＯＡｃ）　ｓ　・３１１ｚＯの溶液（２ｄの蒸留水中１３．２■）を、α −（２−（４−アミノフェニル）エチル）−１，４，７，１０−テトラアザシク ロドデカン−１−（Ｒ，Ｓ）−アセチック−４，７，１０−トリス−（メチルア セチック）アンド（例２９の方法により製造；高Ｒｆジアステレオマー）の溶液 （２ｍｌの蒸留水中３０■）に加えた。このｐＨ６，５の溶液を蒸気浴中で加熱 し、そして反応をＨＰＬＣによりモニターした。３０分間の加熱の後、ロータリ ーエバポレーターで溶液を乾固し、そして真空オーブン中で乾燥した。 ファスト・アトム・ボンバードメント・マス・スペクトル、ｍ　／　ｅ　７１５ 　（陽性イオン、（Ｍ＋２Ｈ”　）”　、Ｓｍアイソトープパターン）　、７３ ７（陽性イオン、（Ｍ＋Ｈ”＋Ｎａ”：ｌ　”、Ｓ＋ａアイソトープパターン） 　、７１３（陰性イオン、（Ｍ−）　、Ｓｍアイソトープパターン）。 下記の例においては、錯体溶液をイオン交換カラムを通してすべての過剰の遊離 金属を溶液から除去した。感受性の系は平衡にもどりそして類偵の量の遊離金属 が溶液中に存在するであろう。不活性系は平衡化せず、そして非キレート化金属 の量は減少するであろう、ＩＷ体が低い収量で形成され得るとしても、それをイ オン交換樹脂に通すことによる精製が錯化していない金属を含有しない使用可能 な安定な錯体をもたらすであろう。 裏嵐斑Ｕ α−（２−メトキシ−５−アミノフェニル）−１，４，７゜１０−テトラアザシ クロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸（例１２の方法により製造）の３ Ｘ１０””Ｍ溶液を、該化合物５．８■を３２５ＩのＮＡＮＯｐｕｒｅ（Ｔ”水 に溶解することにより調製した。この溶液の１０４のアリコートを、５ｓ−１５ ３でスパイクされた９９０４の３　ＸＩＯ”’Ｍ　５ｒａＣ１３（０，Ｉ　Ｎ　 ＨＣＮ中）に加えた。次に、Ｎａ０１１によりｐＨを７．０にした。この溶液を ５００ｕｌずつの２つの両分に分け、一方の百分を１００°Ｃにて１時間加熱し た。加熱されたサンプル及び未加熱のサンプルの両者を前記の陽イオン交換法に より試験して錯体としての金属の％を決定した０次に、この溶液を５Ｐ−Ｓｅｐ ｈａｄｅｘ　（ＴＩ″）樹脂に通した。 錯体形成を精製されたサンプルとして再び測定した。結果を次の表に示す。 災施班■ 例４３からの加熱された精製サンプル及び未加熱の精製サンプルをそれぞれ２ｘ ２５０ｊｌｌのアリコートに分けた。１つのアリコートは１（ＣＩ！、により調 整し、他方のアリコートはＮａＯＨにより調整して下記の表に示すｐＨにした。 所望のｐＨが達成された後、サンプルを１０分間放置し、そして錯体としての金 属の量を前記の陽イオン交換法により決定した。その結果を次の表に示す。 実Ｊｌｆ建匝 ７．９■のα−（２−メトキシ−５−ニトロフェニル）−１゜４．７．１０−テ トラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸（例１１の方法により 製造）を４６４１！１のＮＡＮＯｐｕｒｅ”’水に溶解することにより３　Ｘｌ ０−”Ｍ溶液を副型した。この溶液の１０ｐ１のアリコートを、５ｓ−１５３に よりスパイクされた９５０Ｉの３　Ｘｌ０−’Ｍ　ＳｔｍＣｌ　！（０，１Ｎ　 ＨＣｊ２中）に加えた０次に、ｐＨをＮａＯＨにより７．０にした。この溶液を ５００　ｕＩずつの２個の両分に分け、そして一方の百分を１００℃にて１時間 加熱した。 加熱されたサンプル及び未加熱サンプルの両者を、前記の陽イオン交換法を用い て試験して錯体としての金属の％を決定した。溶液を５Ｐ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ　 ”’樹脂に通した６次に、前記の一般的方法を用いて、精製されたサンプルにつ いて錯体形成を測定した。結果を次の表に示す。 ！嵐Ｎ並 例４５からの加熱された精製サンプル及び未加熱の精製サンプルのそれぞれを２ 個のアリコートに分けた。一方のアリコートはＨＣｌ２により調整し、そして他 方のアリコートはＮａ０）ｌにより調整して下記の表に示すｐＨにした。所望の ｐＨが達成された後、サンプルを１０分間放置し、そして前記の陽イオン交換法 により錯体としての金属の量を測定した。結果を次の表に亥ｍ α−（４−ニトロフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン− １，４，７−トリ酢酸（例４の方法により製造）の０．０２１９Ｍ（ＩｏｏＪ、 、２．１９５＋ｍｏ１ｇ）溶液を５ｌｌ（ＯＡＣ）３の０．０４３Ｍ　（２５ｐ １．１．０７５ａｕ＋＋ｏｌｅ）溶液と接触させた０反応混合物を陰イオン交換 ＨＰＬＣ（Ｑ−５ｅｐｈａｒｏｓａ　”’カラム、ＩＣｌｌＸ２５ＣＩｌ。 流速＝２ｍ／分、３０分間にわたる０〜Ｉ　Ｍ　ＮＨ４０ＡＣグラジエントによ り溶出）にかけた、１時間後、錯体（保持時間１１．１分）が７７％（面積％） で生成し、そしてリガンドのピーク（保持時間１５．５分）から完全に分離した 。標記化合物が生成した追加の証拠がシリカゲルＴＬＣ（溶剤系４）において得 られ、ここでリガンドはＲｆ＝０．５９を有し、そして錯体はＲｆ＝０．００を 有した。 裏脂孤■ 異性体（例５の方法により製造）の０．０２２Ｍ溶液（１００１１１，２、２μ ＋ｍｏｌｅ）をＳｓ　（ＯＡＣ）　３の０．０４３Ｍ溶液（６，４ｍ、０．２７ ５μ＋ａｏｌｅ）と接触せしめた０反応混合物を陰イオン交換ＨＰＬＣ（Ｑ−５ ｅｐｂａｒｏｓｅ　（Ｔ”カラム、Ｉ　Ｃ１ｌ　Ｘ　２５ｃｍ、流速−２−７分 、３０分間にわたる０〜０．２５Ｍ　Ｎ８４０ＡＣグラジエント）にかけた。 ４０分間の後、錯体（保持時間９．０分）が６６％（面積％）の収率で生成し、 そしてリガンドのピーク（保持時間１８．５分）から完全に分離した。 裏立医■ α−（４−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン− １，４，７−）り酢酸五塩酸塩及びα−（４−アミノフェニル）−１，４，７， １０−テトラアザシクロドデカン−１，４，１０−テトラ酢酸五塩酸塩（例５の 方法により製造）の３Ｘ１０−”Ｍ溶液を、４．２■を３００　ＪのＮＡＮＯｐ ｕｒｅ　（丁に）水に溶解することにより調製した。この溶液のＩＯＪのアリコ ートを、Ｓｍ−１５３によりスパイクされた１５４の２Ｘ１０−”Ｍ　ＳｍＣ１ ３（０，Ｉ　Ｎ　ＨＣｆ中）に加えた。水の添加により体積をｌｄにした。次に 、ＮａＯＨによりｐＨを７．０にした。この溶液を５００Ｉｌ！ずつの２個の両 分に分け、そして一方の両分を１００″Ｃにて１時間加熱した。 加熱されたサンプル及び未加熱サンプルの両者を前記の陽イオン交換法により試 験して、錯体としての金属の％を決定した。この結果は、加熱されたサンプル及 び未加熱サンプルについて、それぞれ錯体としての金属８９％及び９６％を示し た。 亥１彫刈 例４９からの加熱されたサンプル及び未加熱サンプルのそれぞれを２個のアリコ ートに分けた。一方のアリコートをＨＣｆで調整し、そして他方のアリコートを Ｎａ０１ｌで調整して下記の表に示すｐＨとした。所望のｐＨが達成された後、 サンプルを１０分間放置し、そして前記の陽イオン交換法により錯体としての金 属の％を決定した。結果を次の表に示す。 α−（４−ニトロフェニル）　−１、４、７’、１０−テトラアザシクロドデカ ン−１，４，７−）り酢酸（例４の方法により製造）の２Ｘ１０−”Ｍ溶液、１ ５ｄの５−ＣＩ！、３（０，Ｉ　Ｎ　ＨＣＩ！、中０．０２Ｍ）及び２Ｉの５ｓ −１５３をＮＡＮＯｐｕｒｅ”’水により１−にした。ｐＨをＮａＯＨにより７ ．０にした。この溶液を５０ｏＩずつの２個の両分に分け、そして一方の両分を １００″Ｃにて１時間加熱した。加熱されたサンプル及び未加熱のサンプルの両 者を前記の陽イオン交換法を用いて試験し、錯体としての金属の％を決定した。 この結果は、加熱されたサンプル及び未加熱のサンプルについてそれぞれ、錯体 としての金属７４％及び４２％を示した。 夫施■皿 例５１の加熱されたサンプルを２個のアリコートに分けた。 一方のアリコートをＨＣｊ２により調整しそして他方のアリコートをＮａＯＨに より調整して下記の表に示すｐＨにした。所望のｐＨが達成された後、サンプル を１０分間放置し、そして前記の陽イオン交換法により錯体としての金属の量を 決定した。この結果を次の表に示す。 実ＪＬｆボ４ ＥＡ−ＤＯ３Ａ　（例１７の方法により製造）の固体を水に溶解することにより その溶液を調製した。最終濃度は０．ＯＩＭであった。 塩化ルテチウムをＱ、　ｌ　Ｎ　ＩＩｃｊＥ中に溶解することにより塩化ルテチ ウム溶液を調製した。生ずる塩化ルテチウムの濃度は３．９　ｍｇ／ｒｒｔｉ　 （０，０１Ｍ　Ｌｕ）であった、トレーサーとしてルテチウム−１７７を使用し た。 ３０Ｉ！１容量の０．ＯＩＭ　Ｌｕ溶液を２４のＬｕ−１７７溶液に加えた。 ３０Ｊ容量のリガンドを加え、そしてＨＥＰＥＳ緩衝液（０，１Ｍ。 ｐＨ＝７．６）を加えて全容１．０−とした。 錯体としてのＬ「の量は前記の陽イオン交換法により９８％と決定された。 ス１１吐阻 リガンド１−　（２−（４−アミノフェニル）エチル）−１゜４．７．１０−テ トラアザシクロドデカン−４，７，１０−）り酢酸（例１７の方法により製造） を、強陽イオン交換樹脂（ＳＰ−５ｅｐｈａｄｅｘ　”’　Ｃ−２５，Ｐｈａｒ ｍａｃｉａ）上でのクロマトグラフィーにより混合プロトン化アンモニウム塩に 転換した。カラム

【よプロトン化形であり、そして蒸留水で洗浄された。リガン ドの濃水溶液をカラムに適用し、次に蒸留水によりカラムを洗浄した。リガンド をカラムから０．５　Ｍ　ＮＨ４０１１により溶出した。 溶出液をロータリーエバポレーターで乾固し、そして真空オーブン中で乾燥させ た。 １０ｄの蒸留水中Ｙ（ＯＡＣ）！　・４）１ｚｏ（０，２０３ｇ、３３８．１０ １　ｇ　／　＋１ｏｌｅ、０．６００ｍｍｏｌｅ）の溶液を、１０ｄの蒸留水中 混合プロトン化アンモ−ラム塩すガンド（０，３００ｇ、４９９．６１５　ｇ　 ／　ｍｏｌｅ、　０．６００ｎｖｏｌｅ）の温溶液に加えた。この溶液を還流し 、そして０．１　Ｍ　ＮＨ，０１１によりｐＨを約７．０に調製した。１５分間 の還流の後、この溶液を冷却し、そしてロータリーエバポレーター上で乾燥させ た。 白色固体を油浴中、真空下で約１０５°Ｃにて加熱することにより過剰の酢酸ア ンモニウムを除去した。標記化合物（約１当量の酢酸アンモニウムを含有する） が３７３ｍｇ　（９９％）の収量で得られ、そして次の様に特徴付けられた：” ＣＮＭＲ（８８°Ｃ，０２０，７５ＭＨｚ）２４．４．２８．４．５１．２．５ ６．５．５７．２（２Ｃ）、　５７．７．６７．２．６７．６゜１２０．５．　 １３２．３．　１３５．２．　１８２．１．　１８２．５．　１８３．０　。 ファスト・アトム・ボンバードメント・マス・スペクトル、ｍ　／　ｅ　５５２ 　（陽性イオン、（Ｍ＋Ｈ”　）　”　）　、ｍ／　ｅ　６１０（陰性イオン、 （Ｍ＋０Ａｃ−）　−）。 １施■妙 Ｙ（ＯＡｃ）３・４１ｂＯの代りにＳ＋ｗ（ＯＡｃ）　ｓ　・３８ｔＯ（０，２ ２９ｇ　、　３８１．５３１ｇ／ｍｏｌｅ、０．６００ｍｍｏｌｅ）を用いて例 ５４の方法を反復したとき、標記化合物（約１当量の酢酸アンモニウムを含有す る）が４０８■（９９％）の収量で得られ、そして次のように特徴付けられた： １ゴＣＮＭＲ（８８℃、　０．０　、　７５ＭＨｚ）２３．８．２７．９．５１ ．４．５７．５．５Ｂ、Ｈ３Ｃ）、　６８．７．７３．４．１２０．３゜１３２ ．２．　１３４．７．　１８５．０．　１８６．８．　１９２．１　。 ファスト・アトム・ボンバードメント・マス・スペクトル、ｍ／ｅ６１５（陽性 イオン、ＣＭ十Ｈ”　）”　、Ｓｉアイソトープバター７）　、ｍ／　ｅ　６７ ３　（陰性イオン、（Ｍ＋　０Ａｃ−）＼Ｓ１１アイソトープパターン）。 夫施開皿 １−（２−（４−ニトロフェニル）エチル）−１，４，７゜１０−テトラアザシ クロドデカン−４，７，１０−テトラ酢酸（例２０の方法により製造）の１．４ ８■／　１００Ｉ１１（０，０３Ｍ）溶液１０ｊ１！を、Ｓ＋＋＋−１５３でス パイクされたＳｍＣｊ！３の溶液（０，ＩＮＨＣ２中０．０２Ｍ）１５ｍに加え た。　ＮＡＮＯｐｕｒｅ′Ｔ”水により体積を１Ｉ１１１！にした。この溶液を ２個の５００℃画分に分け、そして一方の両分を１００℃にて１時間加熱した。 加熱されたサンプル及び未加熱のサンプルの両者を前記の陽イオン交換法により 試験して錯体としての金属の％を決定した。この結果は、加熱されたサンプル及 び未加熱のサンプルについて、それぞれ錯体としての金属８１％及び４３％を示 した。 裏施斑鉦 例５６の加熱されたサンプルを２個のアリコートに分けた。 一方のアリコートをＨＣｊｉ！で調整し、そして他方のアリコートをＮ　ａ　Ｏ Ｈで調整して下記の表に示すｐＨにした。所望のｐＨが達成された後、サンプル を１０分間放置し、そして錯体としての金属の量を前記の陽イオン交換法により 決定した。結果を次の表に示す。 直ｉｆ引坦 １−（２−（４−アミノフェニル）エチル）−１，４，７゜１０−テトラアザシ クロドデカン−４，７，１０−）り酢酸（例２０の方法により製造）の４．６５ ■／　１００ｄ溶液３ＩＪ１を、Ｓｍ−１５３によりあらかじめスパイクされた Ｓ＋＊Ｃｉ！、ｚ（０，Ｉ　Ｎ　ＨＣＩ中０．０２Ｍ）の溶液１５ｊｚ１に加え た。ＮＡＮＯｐｕｒｅ””水により体積を１−にした、溶液のｐＨをＮａＯＨに より７．３に調整した。この溶液を２個のアリコートに分け、そして一方のアリ コートを１００℃にて１時間加熱した。加熱されたサンプル及び未加熱のサンプ ルの両者を前記の陽イオン交換法により試験して錯体としての金属の％を決定し た。その結果は、加熱されたサンプル及び未加熱のサンプルについて、それぞれ 錯体としての金属９６％及び９３％を示した。 裏血五皿 例５８の加熱されたサンプル及び未加熱のサンプルのそれぞれを２個のアリコー トに分けた。各サンプルの一方のアリコートをｌｌｉにより調整しそして他方の アリコートをＮａ０１１により調整して下記の表に示すｐＨにした。所望のｐＨ が達成された後、サンプルを１０分間放置し、そして前記の陽イオン交換法によ り錯体としての金属の量を決定した。結果を次の表に示す。 災施五皿 １−（２−メトキシ−５−ニトロベンジル）−１，４，７゜１０−テトラアザシ クロドデカン−４，７，１０−）り酢酸（例２５の方法により製造）の３Ｘ１０ ””Ｍ溶液を２６０ＩのＮＡＮＯｐｕｒｅ””水中に３．９■を溶解することに より調製した。この溶液の１０４のアリコートを０．ＩＮＨＣｆｆｉ中５ｓ−１ ５３（３Ｘｌ０−’Ｍ）　１０Ｊ！１によりスパイクされた２　ｘｉｏ−”ＭＳ ｍＣｊ！　ｚ（水中）　１５１１１に加えた。９６５ハの蒸留水の添加により体 積を１−にした。次に、ＮａＯＨによりｐＨを７．０にした。この溶液を２個の ５００　Ｊｔｌずつの画分に分け、そして一方の両分を１００″Ｃにて１時間加 熱した。 加熱されたサンプル及び未加熱のサンプルの両者を前記の陽イオン交換法により 錯体としての金属の％を決定した。この結果は、加熱されたサンプル及び未加熱 のサンプルにつき、それぞれ錯体としての金属７１％及び７４％を示した。 裏腹健社 例６０の加熱されたサンプル及び未加熱のサンプルをそれぞれ２個の２５０　ｊ ｌｌのアリコートに分けた。一方のアリコートをＨＣｌにより調整し、そして他 方のアリコートをＮａＯＨにより調整して下記の表に示すｐＨにした。所望のｐ Ｈが達成された後、サンプルを１０分間放置し、そして前記の陽イオン交換法に より錯体としての金属の量を決定した。結果を次の表に示す。 ス】ｌホ７ ｌ−（２−ヒドロキシ−５−アミノベンジル）−１，４゜７．１０−テトラアザ シクロドデカン−４，７，１０−）り酢酸（例２６の方法により製造）の３　Ｘ ｌ０−２Ｍ溶液を、１００ｊ１１のＮＡＮＯｐｕｒｅ””水に３．２■を溶解す ることにより調製した。 この溶液の１０ＪＬ！のアリコート（２０ｔ！ｌに稀釈）を、５ｓ−１５３でス パイクした２　ｘｌＯ−”Ｍ　Ｓｎ＋Ｃｆ　：＋（水中）１５Ｊ１１に加えた。 　９５０ｍの蒸留水及び２０ｄの０．　Ｉ　Ｎ　Ｎａ０１１の添加により体積を １ｒｄにした。この溶液を５００Ｉずつの２個の両分に分け、そして一方の両分 を１００°Ｃにて１時間加熱した。加熱したサンプル及び未加熱のサンプルの両 者を前記の陽イオン交換法により試験することにより錯体としての金属の％を決 定した。９５％未満の金属が錯形成した時、溶液を５Ｐ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ　” ”樹脂に通した。錯体としての金属の％を再び測定した。結果を次の表に示す。 災隻■録 例６２からの加熱した精製クロマトグラフ処理サンプル及び未加熱の精製クロマ トグラフ処理サンプルをそれぞれ２個の２５０　ＪＬｌのアリコートに分けた。 一方の２５０　ｐｌのアリコートをＨｌにより調整し、そして他方のアリコート をＮａＯＨで調整して下記の表に示すｐＨにした。所望のｐｔ＋が達成された後 、サンプルを１０分間放置し、そして前記の陽イオン交換法により錯体としての 金属の％を測定した。結果を次の表に示す。 狭」ｌ自ヒョ［虹７ 同じ分子中に金属キレート化基例えばＤＴＰＡ及び反応性リンカ−（アリールア ミン）を有する生物機能性キレートは、癌又は腫瘍細胞エピトープ又は抗原に対 する特異性を有する種々の標的指向生物分子に共有結合により連結され得ること が知られている。この様な接合体の放射性核種錯体は該放射性核種を癌又は腫瘍 細胞に運ぶ手段として診断的及び／又は療法的用途において有用である。〔参照 、Ｍｅａｒｅｓら、Ａｎａｌ。 Ｂｉｏｃｈｅ＋＊、　１４２．６８−７８（１９８４）　；　さらにＭｅａｒｅ ｓ及びＧｏｏｄｗｉｎら、Ｊ、Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｃｈｅ＋ｎ、　３（２）（１９ ８４）２１５−２１６頁の検討を参照のこと；さらに最近の参照文献は１９８７ 年７月７日発行のＭｅａｒｅｓ、米国特許Ｎａ　４．６７８，６７７、及びＢｒ ｅｃｈｂｉｅｌら、Ｉｎｏｒｇ、Ｃｈｅ＋＊、　２５＋２７７２−２７８１　（ １９８６）である。〕考えられるところでは、放射性金属又は発光（ｌｕ＋５ｉ ｎｅｓｃｅｎｔ）金属を用いる生成物もインビトロ−イムノアッセイのために使 用することができる。 １１１皿 ラベルされた抗体の有用性は多くの因子、例えば１）抗体の特異性、２）使用条 件下での錯体の無活性又は安定性（すなわち、血清安定性）、及び３）抗体の完 全性、すなわち抗体の特異性及び免疫反応性がラベル化工程により影響されない こと、に依存する。 錯体の安定性又は不活性は診断及び／又は原注剤としての放射性核種−抗体接合 体の効率にとって最も重要である。動的反応しやすさが、例えば血清中で不安定 性、及び錯体からの放射性核種の分離を導くことがある。従って、これが診断的 及び療法的有効性を低下せしめる。さらに、これが正常組繊に対する一般的照射 撰傷の大きな可能性を生じさせる。 （Ｃｏｌｅら、Ｊ、Ｎｕｃｌ、Ｍｅｄ、　２８．８３−９０（１９Ｂ？）　）。 −に・　る　・　夕　の゛ 抗体への放射性核種の連結は、当業界において良く知られている方法により抗体 にＢＦＣを連結し、次に抗体と適合性の条件下で放射性核種をキレート化するか 、あるいは予備形成された（周囲温度又は上昇した温度）金属−ＢＦＣ錯体への 抗体の接合により行うことができる。（Ｍｅａｒｅｓら、Ａｃｃ。 Ｃｂｅｍ、Ｒｅｓ、　１７．．２０２−２０９（１９８４）　〕、例を提供する 。 出ユ込」」」■ロー ０、ＩＮ）ＩＣｊ２中１Ｓ３ＳＬｍの溶液１５０４と９４の１−（４−イソチオ シアナトベンジル）−ジエチレントリアミンペンタ酢酸とを混合し、これにＨＥ ＰＥＳ緩衝液（０，５Ｍ、　ｐｔ１８．９、約３０Ｊ１１）を加えてｐＨを約６ にすることにより、１−（４−イソチオシアナトベンジル）−ジエチレントリア ミンペンタ酢酸−サマリウム−１５３錯体［””Ｓｍ（ＳＣＮ−Ｂｚ−ＤＴＰＡ ）　）を製造した。接合させるため、２２．５　Ｘ　１０−”モルのＣＣ−４９ のＩｇＧ又はＦ（ａｂ’　）ｚ（５０ａ＋Ｍ　ＨＥＰＥＳ、　ｐＨ８，５中蛋白 質濃度約Ｉ　Ｘｌ０−’Ｍ）を１１ｆｆＳＩｌ錯体と混合し、そして炭酸ナトリ ウム溶液（１，０Ｍ、１２−１５ｕｌ）の添加によりｐＨを８．９に調整した。 接合は室温（約２５°Ｃ）にて約３時間行った。接合させるため、２２．５Ｘ１ ０−”１ＩｌｏｌｅのＣＣ−４９のＩｇＧ又はＦ（ａｂ’　）ｚ（５０ｓａ＋ｏ ｌｅ　ＨＥＰＥＳ、　ｐＨ８，５中約１×１０−’Ｍ濃度の蛍白ｆ）をｌ５３Ｓ Ｌｌｌ錯体と混合し、そして炭酸ナトリウム溶液（１，０Ｍ、１２−１５１１１ ）の添加によりｐＨを８．９に調整した。接合は室温（約２５°Ｃ）にて約３時 間行った。Ｉ　５３　ＳＴａ錯体でラベルされたＩｇＧ又はＦ（ａｂ’　）ｚを 単離し、そして例Ｘ■に記載するように特徴付けた。 生立笠災肢 Ｉ　びＬ］びに　′　Ａ−Ｄ・ニ　キレートのインビボ・スフ１−ニング ある種の稀土類キレートの安定性が動物におけるインビボ試験により試験されて いる。例えば、Ｒｏｓｏｆｆら、ｔｈｅ　Ｉｎｔｅｒ−ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏ ｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｒａｄｉａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｌ５ｏｔｏ ｐｅｓ　１４＋１２９−１３５（１９６３）は、ある種のアミノカルボン酸につ いて、マウスにおける放射性稀土類キレートの分布を報告している。 「稀土類イオンに対するキレート化剤と体構成成分（無機又は有機）との間の競 争がその付着と排出を決定することがインビボで見出された。本発明の強い稀土 類キレートはほとんど解離せずそして排出されると信じられ、他方、従来技術の 弱い又は中程変の強さのキレートは一層容易に解離されそしてそれ故に肝臓のご とき器官に沈着する。しかしながら、肝臓における放射性核種の濃度は常に弱い 錯体形成のためと言うわけではなく、ある場合には、肝膜に対する金属キレート の親和性のためである。実際に、キレートが調製されそして肝機能の評価のため に用いられた（Ｆｒｉｔｚｂｅｒｇ、　Ａｌａｎ　Ｒ，。 Ｒａｄｉｏｐｈａｒｎ＋ａｃｅｕｔｉｃａｌｓ　：　Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ａｎｄ 　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ。 Ｖｏｌ、１．１９８６　；米国特許ｋ　４，０８８，７４７及びＮａ　４，０９ １．０８８）。 強い稀土類キレートの例である、例３の化合物のイツトリウムキレート及びサマ リウムキレートの生体分布が決定され、そして肝臓中での量％が、キレートの安 定性を量的に推定するためのインビボスクリーニング法として用いられた。比較 のためにＮＴＡ＆′びＥＤＴＡのキレートが含まれる。さらに、対照として未キ レート化形の塩化サマリウムとしてサマリウムが注射された。 １５０〜２００ｇのＳｐｒａｇｕｅ−１１ａｗｌａｙラットをＣｈａｒｌｅｓ　 ＲｉｖｅｒＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。これらの動物をケージに入 れ、そして水及び飼料を自由に摂取させた。使用前に動物を少なくとも５日間順 化させた。錯体の注射に先立ち、動物を熱ランプのもとに置き（１５〜３０分間 ）、尾部静脈を膨張させた。 次に、動物を拘束ケージに入れ、アルコールでふいて尾をきれいにし、そして尾 部静脈を介して動物に注射した（５０〜２００Ｉ）。注射の後、動物を他のケー ジに入れ、その２時間後に動物を頚部脱臼により殺した。次に動物を解剖し、部 分を脱イオン水ですすぎ、バットして乾燥させ、そして秤量した計数バイアルに 秤り込んだ。注射したのと同一の材料の少なくとも３個の標準を調製し、そして 動物組織を用いて計数した。 量％は、器官における計数値を標準における計数値で除して１００倍したもので ある（次の表を参照のこと）。 、表。 生体分布データー （車）錯体は、例ＩＡ及びＨについてはりガント対金属比１：１で、例Ａについ ては５：１で、そして例Ｂ及びＣについては約３００：１で調製された。 勇ｌ及び旦 インチリウム（痕跡量の”Ｙによりスパイクされている）とＢＡ−ＤＯＴＡであ る例３のリガンド、及びＥＤＴＡ（比較例Ｅ）との１：１錯体を前記の方法によ り調製した。次に、幾つかのＬｏｏｊＬｌアリコートを別々の遠心チューブに移 した。過剰のＹ（ＩＩＩ）を加えて合計容量の変化を最小にし、そして時間を記 録した。金属の添加から０．５時間後、前記の陽イオン交換法により錯体％を決 定し、そしてこれを錯体の最初の量と比較した。錯体対添加した金属の％かりガ ント−金属錯体の反応性についての標示を与える。結果を次の表に示す。 錯体の検討 ０、ＩＮＨｉ中１Ｓ３ＳＬ１の？８液１００ｕｌに、５Ｉｌｌの５ＣＮ４Ａ−０ ０３八（５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ中５ｍＭ、ｐＨ８，２）（例１８において調製） を加えた。 これをポルテックスミキサー上で混合し、そしてＨＥＰＥＳ緩衝液（０，５Ｍ、 　ｐＨ８，９）を徐々に加えて（合計約２５Ｊ）ｐＨを約７に調整した。キレー ト化の進行をＧＦ−２５０カラム上でのＨＰＬＣ（ＨＰＬＣシステムＩ）により モニターした。約５０％の収量が得０．ＩＮＨｉ中１′３ＳＩＩｌの溶液１５０ Ｊ１１（約４．６　ａ＋ｃｉ）に、エバの酢酸ナトリウム（２，０Ｍ）及び７Ｉ Ｊ１のα−（２−（４−アミノフェニル）エチル）−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸混合アンモニウム、カリウ ム塩（５０ＩＩＭ　ＨＥＰＥＳ中５ｎ＋Ｍりｐｎｓ、ｓ、例９の方法により調整 ）を加えた。この混合物を機械的に振とうし、そして）ＩＥＰＥＳ緩衝液（０， ５Ｍ、　ｐｔ１８．９　；約３１ｍ添加）により徐々に滴定してｐＨ１にした。 次にこれを砂浴中で９８℃にて１時間加熱した。終了後、５Ｉの混合物を用いて 、ＩＩＰＬｃシステム■にてＭｏｎｏ−Ｑ　”’カラム上で、グラジェント溶剤 系（０〜１５分間、０−１００％Ｂ；ここでＡ−水、Ｂ　−１，０Ｍ酢酸アンモ ニウム及び０．１　ｍＭ　ＥＤＴＡ）により溶出して分析を行った。１Ｓ３Ｓｎ ｌに基いて８５〜９５％の収率が得られた。こうして得られた、α−（２−（４ −アミノフェニル）エチル〕−１・、４，７．１０−テトラアザシクロドデカン −１，４，７，１０−テトラ酢酸−サマリウム−１５３錯体を、同一の非−放射 性サンプルとの比較により、Ｍｏｎｏ−Ｑ　””カラム及びＣＦ−２５０カラム 上でのそれぞれのクロマトグラフィー挙動により特徴付けた。放射性錯体の存在 のさらなる証明を、イソチオシアナト誘導体及びそれに続く抗体への接合により 決定した。錯体はまた、加熱することなく、６〜１８時間のインキュベーション により調製され、７０〜８０％の収量が得られた。 例Ｖにおいて得られた反応混合物に、２ＩのＨＥＰＥＳ緩衝液（０，５Ｍ、　ｐ Ｈ８，９）　、２ｔｉのチオホスゲン及び０．２　ｄのクロロホルムを加えた。 この混合物を、数秒間ずつ２又は３回機械的に激しく振とうした。 クロロホルム層を廃棄し、そして目的生成物を主として含有する水層を確保し、 そしてさらに精製した。α−〔２−（４−イソチオシアナトフェニル）エチル） −１，４，７゜１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢 酸−サマリウム−１５３錯体の収率は、ＨＰＬＣシステム■を用いるＧＦ−２５ ０カラム上でのＨＰＬＣによるｌ　Ｓ３　Ｓｍ活性測定に基き、８５−９０％で あった。精製のため、水相を５ｅｐ−Ｐａｋ　”’　Ｃ−１８カートリツジに通 し、そして水中９０％アセトニトリルにより溶出した。最初３００　ｊｌｌの流 出液を廃棄し、そして次の９００　Ｊｌｌに出てきた５ＣＮ−誘導体をＧＦ−２ ５０上でのＨＰＬＣにより特徴付けた。　１５３５１Ｍ活性の回収は９０％より 良好であった。次に、溶剤のバルクを１．５〜２時間にわたって蒸発せしめ、そ して残渣を用いて抗体に接合させた。 孤−■ ０．１ＮＨ（ｆ！中１５３Ｓ、の溶液２００ＩにＩＩの酢酸ナトリウム（２，０ Ｍ）及び１２Ｉｌｌのα−（４−アミノフェニル）−１，４゜７．１０−テトラ アザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸（５０ｍｍｏｌｅ　ＨＥＰ ＥＳ、　ｐＦＩ８．５中５１ｔｉｍｏｌｅ）　（例３の方法により調整）を添加 した。混合物を機械的に振とうしそしてＨＥＰＥＳ緩衝液（０，５Ｍ、　ｐＨ８ ，９；約３８Ｊ１１添加）により徐々にｐＨ７に滴定した。次にこれを砂浴にて ９８°Ｃに１時間加熱した。終了後、５μ！の混合物を用いて、Ｍｏｎｏ−Ｑ　 ’丁Ｎ）カラム（ＨＰＬＣシステム■、グラジェント溶剤系：ｏ−ｔｓ分間、０ −１００％Ｂ：ここでＡ＝水、そしてＢ　＝　１．０　Ｍ酢酸アンモニウム及び ０．１ｍｍｏｌｅ　ＥＤＴＡ）上で分析した。一般に、　１５３ｓ＋１に基き８ ５−９５％の収量が得られた。錯体はまた室温での１２〜１８時間のインキュベ ーションにより調製され、８０〜９０％の標記化合物の収率が得られた。こうし て製造されたα−（４−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシク ロドデカン−１，４，７゜１０−テトラ酢酸−サマリウム１５３錯体を真正サン プルとの比較により、Ｍｏｎｏ−Ｑ　”’カラム上でのそれらのクロマトグラフ ィー挙動、イソチオシアナト誘導体への転換、及びそれに続く抗体への接合によ り特徴付けた。 夕Ｌ」皿 例■において得られた反応混合物に、２ＩＪ１のＨＥ　Ｐ　Ｅ　Ｓ緩衝液（０， ５Ｍ、　ｐＨ８，９）、２　ｔｌのチオホスゲン及び０．２１ｄのクロロホルム を加えた。これを数秒間ずつ２又は３回激しく機械的に振とうした。クロロホル ム相を廃棄し、そして目的生成物を主として含有する水相を確保しそしてさらに 精製した。 α−（４−イソチオシアナトフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロ ドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸−サマリウム−１５３錯体の収率は、 ＨＰＬＣシステムＩを用いて１５１５、活性に基きＧＦ−２５０カラム上でのＨ ＰＬＣにより分析した場合９０％より高かった。精製するため、水相を５ｅｐ− Ｐａｋ　（Ｔ”Ｃ−１８カートリツジに通し、そして水中９０％アセトニトリル により溶出した。最初の０．３　ｍの溶出液を廃棄し、そして、次の１．２−中 に目的生成物が８６〜９３％の回収率で出てきた０次に、溶剤を約２時間にわた って蒸発せしめ、そして残渣を用いて抗体に接合せしめた。 使用した抗体はＣＣ−４９、すなわち腫瘍関連抗原であるＴＡＧ−７２のエピト ープに結合するネズミモノクローナルＩｇＧであった。接合させるため、１８７ Ｉの抗体溶液（５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、　ｐＨ８．５中１．２０Ｘ１０−’Ｍ） を、例■に記載したようにして精製された４、　５　Ｘ　１０−’モルの１Ｓ” ５ｓ（ＳＣＮ−ＥＡ−ＤＯ３Ａ）と混合し、次に炭酸ナトリウム溶液（１，０Ｍ 　）を加えてｐＨを８６９に上げた０反応を室温にて２時間続けた。終了後、　 ′５３Ｓ１１でラベルされたＩｇＧを５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ−２５（２，２ｄ） ディスポーサブシカラム上での遠心ゲル濾過により単離し、そしてＧＦ−２５０ カラム上でクエン酸緩衝液（０，２５Ｍ、　ｐＨ７、４）により溶出するＨＰＬ Ｃによりさらに精製した。ラベルされたＩｇＧを含む両分をプールし、濃縮し、 そしてＣｅｎｔｒｉｃｏｎ　”’コンセントレーターを用いてＰＢＳ中に交換（ ３Ｘ）した、こうして得られた１５３３．でラベルされたｔｇｃＯ比活性は約０ ．１６μＣ１／ｎ蛋白質であった。 （”３Ｓｓ（ＥＡ−ＤＯ３Ａ）　）−４ｇＧ調製物の完全性（ｉｎｔｅｇｒｉｔ ｙ）をＨＰＬＣ（Ｓｉｖａｋｏｆｆ、　Ｓ、１．、　ＢｉｏＣｈｒｏｍ、　１（ １）、　４２−４８（１９８６））　、並びに標準的生化学的方法、例えばドデ シル硫酸ナトリウム：ポリアクリルアミドゲル電気泳動及びオートラジオグラフ ィー、及び固相ラジオイムノアッセイ（［１ＩＡ）により証明した。 （Ｄａｖｉｄ　Ｃｏ１ｃｈｅｒ　ら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　４３．７３６− ７４２（１９８３）　）。 Ｌａｎ＋ｏｙｉ及びＮ１５ｏｎｏｆｆ　（Ｅ、Ｌａｍｏｙｉ及びＡ、Ｎ１５ｏｎ ｏｆｆ、　Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ。 Ｍｅｔｈｏｄｓ、　５６．２３５−２４３（１９８３））により記載されている 方法に従っての酵素消化により調製されたＣＣ−４９のＦ、（ａｂ’　）ｚ断片 （５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、　ｐＨ１８，５中Ｉ　Ｘｌ０−’Ｍの溶液２２５ｊ１ １）を例■に記載されているようにして製造された２、　９　Ｘ１０−”ｍｏｌ ｅの１５１５ｍ（ＳＣＮ−ＥＡ−ＤＯ３Ａ）と混合した。炭酸ナトリウム（１， ０Ｍ、約５４）を添加してｐＨを８．９にし、そして反応を約２．５時間続けた 。終了後、ｌ５２Ｓ−でラベルされた断片を単離し、そして例■に記載したよう にして特徴付けた。 Ａ　びＢ （ｌＳ’５ｓ（ＥＡ−ＤＯ３Ａ）　）及び（”３Ｓｓ（ＥＡ−ＤＯ３Ａ））　− Ｆ（ａｂ’　）ｚの生体内位置決定 １ゝ３Ｓ腫（ＥＡ−ＤＯ３Ａ）でラベルしたＣＣ−４９のＩｇＧ（例■から）及 びＦ（ａｂ’　）！　（例Ｘから）のを相性を、無胸腺マウスにおけるヒト腫瘍 外植体によるラベルされた物質の取込みにより証明した。すなわち、雌性無胸腺 マウス（Ｎｕ／Ｎｕ、　ＣＤ　Ｉバックグラウンド）にヒト結腸癌細胞ＬＳ−１ ７４Ｔ（約Ｉ　ＸＩＯ”　ｌ胞／動物）を皮下接種（Ｓ、Ｃ）　（０，１ｄ／源 ）した。接種の約２週間後、各動物に尾部静脈を通してＰＢＳ中約２μＣｉ　（ １５〜３０４）のｌ　５３５　ｍでラベルされた抗体を注射した。マウスを種々 の時間間隔で殺した。放血の後、腫瘍及び選択された組織を切取りそして秤量し 、そしてガンマ−カウンターで放射能を測定した。各組織中の１Ｓ′ＳＬＩ＋の 分当りカウント（ＣＰＭ）を測定し、そして注射した量当り組織の重ｆｇ当りＣ ＰＭを１００倍したもの（注射した量に対する％／ｇ）として表現した。結果を 第１図〜第１４図、並びに第１Ａ表及び第１Ｂ表に示ず。′５３Ｓｌｌｌ（ＳＣ Ｎ−Ｂｚ−ＤＴＰＡ）でラベルされたＣＣ−４９からのＩｇＧ及びＦ（ａｂ’　 ）ｚ（例ＺＡから）を比較のために含めた。結果を第１Ｃ表及び第１Ｄ表に示す 。 劃−ｘｎ 使用した抗体はＣＣ−４９、すなわち腫瘍関連抗原であるＴＡＧ−７２のエピト ープに結合するネズミモノクローナルＩｇＧであった。接合のため、１７８Ｉの 抗体溶液（５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、、ｐＨ８，５、中１．２６Ｘ１０−’Ｍ）を ３．４　Ｘ　１０−”ｍｏｌｅのａ−（２−（４−イソチオシアナトフェニル） エチル）−１，４，７，１０−テトラアザビシクロドデカン−１，４，７，１０ −テトラ酢酸−サマリウム錯体（例■に記載されているようにして調製）と混合 し、次に炭酸ナトリウム溶液（１，０Ｍ、約１７１Ｊりの添加によりｐＨを８． ９に上げた。反応を室温にて２時間続けた。終了後、＋５３８．でラベルされた ＩｇＧを５ｅｐｈａｄｅｘ　””　Ｇ−２５（２，２ｍ１ｉ）ディスポーサブシ カラム上での遠心ゲル濾過により単離し、そしてＧＦ−２５０カラム上でクエン 酸緩衝液（０，２５Ｍ、　ｐＨ１，４）により溶出するＨＰＬＣによりさらに精 製した。標識されたＩｇＧを含有する両分をプールし、濃縮し、そしてＣｅｎｔ ｒｉｃｏｎ　”’　コンセントレータ−の使用によりＰＢＳに交換（３回）した 。 こうして調製されたｌ５ｊＳＩｌでラベルされたＩｇＧの比活性は約０．１６μ Ｃ１／ｐｇ蛋白質であった。α−（２−（４−イソチオシアナトフェニル）−エ チル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テ トラ酢酸−サマリウム１５３１Ｍ体−ＩｇＧ調製物の均−性及び完全性（ｉｎｔ ｅｇｒｉ　ｔｙ）を例■に記載したＨＰＬＣ及び標準的生化学的方法により評価 した。 下記の例は、ラベルされた抗体接合体を製造するための別法であり、この方法は まずＢＦＣを抗体に接合し、そして次にキレート化して放射性核種−ＢＦＣでラ ベルされたＡｂを得ることを含んで成る。 まずＢＦＣｌ例えばα−（２−（４−イソチオシアナトフェニル）エチル）−１ ，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸（ ＳＣＮ−ＰＡ−ＤＯＴＡ）をｐＨ８〜９にて抗体とカップリングさせ、次にｐＨ ６にて室温で数時間＋５３５．とキレート化することにより、′Ｓ’Ｓ＋ａ（Ｐ Ａ−ＤＯＴＡ）でラベルされた抗体を製造することができる。 典型的な実験において、ＩｇＧ　ＣＣ−４９をｆｉ［Ｌ、そしてＣｅｎｔｒｉｃ ｏｎ　（Ｔ′’　コンセントレータ−（３０に分子量カットオフ）中の炭酸緩衝 液（５０ｍＭ、ｐＨ９，１）中に３回交換して、１．５×１０−’Ｍより高い濃 度の抗体を含有する溶液を残した。接合体を形成するため、２５Ｘ１０−’ｍｏ ｌｅのＩｇＧ　ＣＣ−４９を含有する抗体溶液１６１１を５ＩＪ１の５ＣＮ−Ｐ Ａ−１１０ＴＡ　（同じ炭酸緩衝液中５ｓ＋Ｍ濃度、例１８の方法により調製） と混合した。この混合物を室温にて５時間放置し、そして５ｏｒｖａｌｌ　ＲＴ 遠心機中５００ＯｒｐｍにてＣｅｎｔｒｉｃｏｎ　”’コンセントレーター中の ３０に膜を通して濾過することにより停止した。抗体接合体をさらにＰＢＳ（ｐ Ｈ７，４）中０．２５Ｍ　ＤＴＰ八溶濃溶液２ｄり洗浄し、そしてＭＥＳ緩衝液 （２０ｍＭ、ｐＨ５，８）により５回洗浄し、各洗浄の後３０分間遠心分離した 。終りにおいて、ＰＡ−ＤＯＴＡ−ＩｇＧ接合体を最小容量（約１００Ｊ１１） に濃縮し、そしてその完全性をＧＦ−２５０カラム上）ＩＰＬｃ分析によりチェ ックした。精製された接合体に０．　ＩＮ　）Ｉｉ（５０ｍ）中ＩｓコＳｓおよ び２０ＩＬ１のＭＥＳ緩衝液（１，０Ｍ。 ｐＨ６）の混合物を加え、ポルテックスミキサー上で混合し、そして室温にて一 夜放置した。遠心ゲル濾過による停止の後、ＨＰＬＣ分析により推定される導入 された＋３３８．の量は０．２２　ＲＦＣ−３ｔａ／抗体であった。この１５３ ３１１が、抗体に共有結合により連結されたＢＦＣとのキレートを介して抗体に 結合しており非特異的結合によるものではないことが、対照実験からの結果との 比較により示された。対照実験においては、ＩｇＧ　ＣＣ−４９溶液を同一条件 下でｌ５３Ｓ、混合物と混合した。同様の方法で単離された抗体はそれと結合し た適切な量のＩｆｉ２３１１を有しなかった。従ってこれは、抗体によるＳｍ− １５３の非特異的結合がこれらの条件下で行われなかったことを示した。 ＣＣ−４９のＦ（ａｂ’　）ｚ断片［Ｅ、Ｌａｍｏｙｉら、Ｊ、　１ｍｍｕｎｏ １．Ｍｅｔｈｏｄｓ５６、２３５−２４３（１９８３）により記載された方法に 従って酵素消化により調製したもの）　（５０＋ｓＭ　ＨＥＰＦ、Ｓ　、　ｐＨ ８，５中Ｉ　Ｘｌ０−’Ｍの溶液２２５Ｊ）を、例■に記載したようにして調製 された２、９Ｘ　１０−”ｍｏｌｅのα−（２−（４−イソチオシアナトフェニ ル）エチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１゜４．７．１ ０−テトラ酢酸−サマリウム−１５３錯体と混合した。 炭酸ナトリウム（１，０Ｍ、約９！Ｊ１）を加えてｐ）ｌを約８．９にし、そし て反応を約２．５時間続けた。　１　％　３３ｍでラベルされた断片を単離し、 そして例■に記載したようにして特徴付けた。比活性は約Ｏ０４μＣ１／ｎであ った。 ＸＩ′ｖ　Ａ　びＢ α−（２−（４−イソチオシアナトフェニル）エチル〕−１，４，７，１０−テ トラアザシクロドデカン−１，４，７゜１０−テトラ酢酸−サマリウム−１５３ ｔｆ体でラベルされたＣＣ−４９のＩｇＧ及びＦ（ａｂ’　）ｚの接合体（例Ｘ ■及び例Ｘ■から）の有用性が、無胸腺マウスでのヒト腫瘍外植体によるラベル された物質の取込みにより示された。生体分布を例ＸＩに記載した方法を用いて 決定した。結果を、ＴｇＧについて第１図〜第７図に示し、そしてＦ（ａｂ’　 ）ｚについて第８〜１４図に示し、さらに第ｎＡ表及び第１１８表に示す。 ’　５ｆｆＳ＋ｅ（ＳＣＮ−Ｂｚ−ＤＴＰＡ）とＩｇＧ及びＦ（ａｂ’　）ｚと のラベルされた物質（例ＺＡから調製）を比較のため研究に含めた。（第１Ｃ表 及び第１Ｄ表を参照のこと）。 ＣＣ−４９の全体１ｇＧ（０，２５Ｍ　ＨＥＰＥＳ、　ｐＨ８，７中１．２　Ｘ ｌ０−’Ｍの溶液１７４Ｊｌｌ）を、例■において調製された２、　ＯＸ　１０ −”＋ｎｏｌｅのα−（４−イソチオシアナトフェニル）−１，４，７，１０− テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸−サマリウム−１５ ３（２，８ｍｃｉ）と混合し、次に炭酸ナトリウム溶液を添加してｐＨを約８． ７に維持した。反応を室温にて２．５時間続けた。終了後、ｌ３３５．でラベル されたＩｇＧを５ｅｐｈａｄｅｘ　（Ｔ′″’ｃ−２５（２，２ｄ）ディスポー サブシカラム上での遠心ゲル濾過により単離し、そしてさらにＧＦ−２５０カラ ム上でクエン酸緩衝液（０，０２５Ｍ、　ｐＨ７，４）での溶出による）ＩＰＬ ｃにより精製した。 ラベルされたＩｇＧを含存する両分をプールし、濃縮し、そしてＣｅｎｔｒｉｃ ｏｎ　”’コンセントレーターを用いてＰＢＳ中に交換した（３回）。サマリウ ム−１５３でラベルされたＩｇＧ１製物の均−性及び完全性をＨＰＬＣ及び例■ に記載した標準的生化学的方法により証明した。 Ｌａｍｏｙｉらにより記載された方法に従って酵素消化により調製したＣＣ−４ ９のＦ（ａｂ’　）２　（０，２５Ｍ　）ＩＥＰＥＳｉｌ衝液、ｐＨ８，７中２ 、４　Ｘｌ０−’Ｍ溶液８４Ｉ）を２．１　Ｘｌ０−”５ｏｌｅのα−（４−イ ソチオシアナトフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１ ，４，７，１０−テトラ酢酸−サマリウム−１５０錯体（例■の方法により調製 ）と混合した。炭酸ナトリウムを加えてｐｔ＋を８．７にし、そして反応を約２ 時間続けた。終了後、＋５３５ｍでラベルされた断片を単離し、そして例■に記 載したようにして特徴付けた。 ＸｖＩＩ　Ａ　びＢ 例ＸＩに記載した方法に従って生体内研究を行い、そして結果を第１図〜第１４ 図並びに第ＨＡ表及び第１Ｉ［Ｂ表に示す。 Ｘ■　Ａ　びＢ 例Ｖ、Ｖ１．ＸＩ、ＸＩ及びＸ■に記載した方法に従って標記化合物を調製しそ して生体内研究を行い、そして結果を第■Ａ表及び第１ＶＢ表に示す。 ＸＩＸ　Ａ　びＢ 例ＸＩに記載された方法に従って標記化合物を調製しそして生体内研究を行った が、組織を消化しそして液体シンチレーションにより計数した。結果を第ＶＡ表 及び第Ｖ８表に示す。 ［ （”３Ｓ＋＊（ＲＦＣ））　ＣＣＣＣ−４９−ｌ及び［”’Ｌｕ（ＲＦＣ））　 −ＣＣ−４９−ＩｇＧの生体外ｐＨ安定性 （”’５Ｉｌ（ＲＦＣ）　）−ＣＣ−４９−ＩｇＧ又は（”’Ｌｕ（ＲＰＣ）　 ）　−ＣＣ−４９−１ｇＧを、０．２　Ｍ　Ｎａ０Ａｃ緩衝液中ｐＨ６，０、４ ，０及び２．８にて、室温、蛋白質温度約５　Ｘｌ０−”Ｍ、約０．５の錯体／ 抗体にて、放置した。サンプルをある時間間隔で採取し、そしてＨＰＬＣ（ＧＰ −２５０カラム）により、蛋白質からの１５２Ｓ−又はＩ　？　？　Ｌ　ｕ活性 の解離について分析した。一般に、研究を５日間、又は放射性同位元素の９０％ が解離するまで行った。結果を、１日当り放射性同位元素の喪失の初期濃度とし て表現した。この結果は、酸性ｐＨにて標準（””５ｌｌ（ＢＺ−ＤＴＰＡ）　 ）錯体と比べて、””Ｓｍ（ＰＡ−ＤＯＴＡ）、　′？’Ｌｕ（ＰＡ−ＤＯＴＡ ）、　”５ｓ（ＢＡ−ＤＯＴＡ）、　”Ｓｍ　（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）。 及び’　”Ｓ＋ｍ（ＭｅＯ−ＢＡ−ＤＯＴＡ）の卓越した安定性を示した。結果 を下記の表に示す。 インビトロでの錯体のこの大きな安定性は、体及び非標的組織（例えば、腎臓、 肝臓）からの１ｉｄｓ１１及び＋？？Ｌｕの早いクリアランスとよく相関する。 第１図〜第３４図を参照のこと。 土工■Ｌ〜反受Ｊユ 例Ｖ、Ｖ１．ＸＩ［及びＸｍに記載した方法により標記化合物を調製し、そして 例ＸＩの方法により生体内研究を行った。 第ＶＩＡ表及び第Ｖ７８表に結果を示す。 斑−ｕｌ ＩＳ’Ｓｓ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）錯体の製造ＬｏｏＩｌｌのｌｓ”５ｓ（０，Ｏ ＩＮ　ＨＣｌ１中０．３　Ｘｌ０−”Ｍ　；　５　ｍｃｉ）に６パのＰＡ−ＤＯ ＴＭＡ（例２９の方法により調製される高Ｒｆジアステレオマー；　Ｍｉｌｉｉ −Ｑ　””水中５ｍＭ）　、２０ｕのＭＥＳ緩衝液（１，０Ｍ、　ｐＨ６）及び ＩＩのＨＥＰＥＳ緩衝液（０，５Ｍ、　ｐ）１Ｂ、　７　）を加えた。この溶液 をポルテックスミキサー上で混合し、そして混合物の最終ρ１１は約６であった 。この混合物を９０℃にて３０分間加熱した後、それをＧＦ−２５０カラム上で のＨＰＬＣにより錯化の程度について分析し、そして９０％以上の収率が一般に 得られた。’　”Ｓｓ−ＰＡ−ＤＯＴＭＡｔｉ体の特徴付けが、合成されそして 例４２に独立して記載されているようにして特徴付けられている非−放射性−Ｓ ｓ錯体との比較により与えられた。 ■一旦旦 ””’５ｓ（ＳＣＮ−Ｐへ〜ＤＯＴＭＡ）の製造ノ例ＸＸＵにおいて製造されそ して室温にて２０分間冷却した１ｓ３Ｓａ＋　ＰＡ−ＤＯＴＭＡ錯体に、９０％ アセトニトリル−水媒体中１％チオホスゲン溶液１０ｍを添加した。この混合物 をポルテックスミキサー上で激しく混合し、そして室温にて５〜２０分間放置し た。ＨＰＬＣ分析によりモニターした場合、反応は即座に起った。活性化された ＋５３Ｓｌｌｌｉ体を精製するため、これをクロロホルム（２００ｕずつ）によ り３回抽出し、そして水層を、５−のメタノール及び５−のＭＥＳ緩衝液（２０ ｕＭ、ｐＨ５，８）により前処理されたＰＲＰカートリッジ（ＰＲＰカートリッ ジ＝Ａ］１ｔｅｃｈ　Ａｓ５ｏｃｊａｔｅｓ、　Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ、　ＩＬか らのＭｉｎｉ−ｃｌｅａｎ　”’カートリッジ）に通した。５ｄのＭＥＳ緩衝液 及び５ｄのＭｉｌｌｉ−Ｑ（ＴＩ水により洗浄した後、これを９００　ｕｌの９ ０％アセトニトリルにより抽出して、最初の１００ＩＪ１を廃棄し、約９０％の １５３３１ｍ活性を回収した。混合物を、４０℃より低温にて減圧下で蒸発乾固 し、そしてほとんど標記化合物を含有する残渣を抗体への接合のために用いた。 ｘｘ■Ａ　びＢ ’　Ｓ！Ｓｓ（ＳＣＮ−ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）とＩｇＧ及びＦ（ａｂ’　）ｚ−Ｃ Ｃ４ｇとの接合一般に、抗体を濃縮し、そしてＣｅｎｔｒｉｃｏｎ　ｌＴ′’コ ンセントレータ−（３０に分子量カットオフ）中の炭酸緩衝液（ｐＨ９，０又は ９．５．５０ｄ）に交換して、１．５Ｘ１０’″４Ｍ以上の蛋白質濃度にした。 接合のため、少量の炭酸緩衝液（最終蛋白質濃度を１．５　Ｘｌ０−’Ｍにする ことが要求される）を’　”Ｓｓ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）のイソチオシアナト誘導 体（例ＸＸＩ［［において調製）に加え、そしてＲＦＣ−ＩＳ”Ｓｓ錯体と等モ ルの濃縮された抗体を加えた。 これをポルテックスミキサー上で混合し、そして室温にて１時間、又は５Ｆ−２ ５０カラム上でのＨＰＬＣ分析により示される場合に４０〜５０％のＩ　Ｓ　３ ３ｍが抗体に結合するまで反応せしめた。 ５ｅｐｈａｄｅｘ　’丁”　Ｇ−２５カラム（２，２ａｆ）上での２回の連続す る遠心ゲル濾過により、ラベルされた抗体を単離した。ラベルされた抗体の均一 性、完全性及び免疫反応性をＩＩＰＬＣ分析及び前記の標準的生化学的技法によ り分析した。 ＸＸＶＡ　びＢ ’　”Ｓｓ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）でラベルされたＩｇＧ及びＦ（ａｂ’　）ｉ− ＣＣ４＊の生体分布の研究 例ＸＩに記載したのと類似の方法で研究を行った。結果を第■Ａ表及び第■Ｂ表 に示す。第１５図〜第２８図を参照のこと。 ■−■■ ’　”Ｌｕ　（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）錯体の製造３０ｍの１７’Ｌｕ（１，Ｉ　Ｎ 　ＨＣｌ２中６　Ｘｌ０−”Ｍ　；　４　ａｃｔ）に３６ｍのＰ八−ＤＯＴＭＡ 　（例２９の方法により製造ｉ　Ｍｌｌｌｌ−Ｑ””水中５＋ｍＭ溶液）に加え た。溶液をポルテックスミキサー上で混合し、そして１１５ＩのＭＥＳ緩衝液（ １，０Ｍ、ｐＨ６，０）を加えて溶液をｐＨ５，５〜６に中和した。これを９０ °Ｃにて３０分間加熱して９０％より良好なキレート化をもたらした。混合物を 、５ｄのメタノール及び５ｍｌ！のＭＥＳ緩衝液（２’ＯｍＭ、ｐＨ５，８）に より前処理したＰＰＰカートリッジに通した。これを５Ｉ１１のＭｉｌｌｉ−（ Ｉ　ＩＮ）水により洗浄した。錯体を１０００ｉｌｌの９０％アセトニトリル中 に抽出して、出発１　’　？　Ｌ　ｕ活性の７８％を得た（抽出液の最初の１０ ０４を廃棄）。 Ｕ舅 ’　”Ｌｕ　（ＳＣＮ−ＰＡ−ＤＯｆＭＡ）の製造例ＸＸＶＩにおいて得られた ９０％アセトニトリル中”’Ｌｕ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）に９０％アセトニトリル 中ｌＯ％チオホスゲン６Ｉｉを加えた。この溶液をポルテックスミキサー上で混 合し、そして２０分間の後、１１　Ｐ　Ｌ　Ｃによりイソチオシアネート誘導体 の形成について分析した。溶剤及び過剰のチオホスゲンの除去を、４０°Ｃより 低い温度にて減圧下での１〜２時間の蒸発により行った。 ±−■■ １７’Ｌｕ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）とＩｇＧ　ＣＣ４９との接合炭酸緩衝液（５０ ＋ｍＭ、ｐＨ９，１）中の抗体ＩｇＧ　ＣＣ４９を同じ緩衝液中等モル量のイソ チオシアナト誘導体（例ＸＸＶＩの方法により製造）と混合した。反応を１．５ 　ＸＩＯ”’Ｍの抗体濃度にて７０分間続け、そしてラベルされた抗体を単離し 、そして例■に記載した方法により特徴付けた。 ■−■入 ”’Ｌｕ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）及び１７’Ｌｕ（Ｐ＾−〇ＯＴＭ）によりラベル されたＩｇＧ−ＣＣ４９の長時間生体分布の研究Ｉ’ｌＬｕでラベルされた抗体 を用いて、その長い半減期（１６１時間）を利用して長時間動物試験を行った。 これは、例ＸＩに記載した方法に従って３週間にわたりＢａ１ｂ／ｃマウスにお いて行った。結果を第■Ａ表に示す。第２９図〜第３４図を参照のこと。 以下の表からのデーターをプロットする図において、次の記号を用いた。 図において、データーは次の通りである。 ”　ＣＣＣＣ４９−ｌ’：　ＬＴ１７４−Ｔ！！ｌ！ｉヲ７８持スルヌＦマウス 中”　ＣＣ４９−Ｆ　（ａｂ　’　）　Ｚ　：　ＬＳ１７４−Ｔ腫瘍を担持する ヌードマウス中 ””　ＣＣＣＣ４９−ｌ　：　ｂａｌｂ／ｃマウス中。 星上人聚 （１Ｓ″５ｓ（ＥＡ−ＤＯ３Ａ）　）　−ＩｇＧ−ＣＣ−４９として注射された ＋５３５．の生体分布 注射した量に対する％／ｇ °ｎ＝４ 茅」」Ｌ表 （”３Ｓｍ（ＨＡ−ＤＯ３Ａ））　−Ｆ（ａｂ’　）ｚ−ＣＣ−４９として注射 されたＩ　５３３　ｎの生体分布 注射した量に対する％／ｇ 　ｎ−４ 第」３四表 （””Ｓ＋ａ（Ｂｚ−ＤＴＰＡ））　−１ｇＧ−ＣＣ−４９として注射された１ ｓ３Ｓ１１ノ生体分布 注射した量に対する％／ｇ 男」」１表 ［”３Ｓｍ（Ｂｚ−ＤＴＰＡ））　−Ｆ（ａｂ’　）ｚ−ＣＣ−４９として注射 された１５３３ｍの生体分布 注射した量に対する％／ｇ メ」ヨ（表 （””Ｓａ＋（ＰＡ−ＤＯＴＡ））　−１ｇＧ−ＣＣ−４９として注射された１ ５３Ｓｔａの生体分布 注射した量に対する％／ｇ メＩＩＢ表 （”３Ｓｓ（ＰＡ−ＤＯＴＡ）　）　−Ｆ（ａｂ’　）ｚ−ＣＣ−４９として注 射されたｌ８３ＳＩ１１の生体分布 注射した量に対する％／ｇ 　ｎ−４ メ」シ源表 （ＩＳ”Ｓｎ＋（ＢＡ−ＤＯＴＡ））　−ＩｇＧ−ＣＣ−４９として注射された ＋５３５．の生体分布 注射した量に対する％／ｇ 　ｎ−４ 裏ｍＢ表 （”３ＳＩＩｌ（ＢＡ−ＤＯＴＡ）　）　−Ｆ（ａｂ’　）ｚ−ＣＣ−４９とし て注射されたｌ５３ＳａＩの生体分布 注射した鼠に対する％／ｇ 」迅し配表 （”’Ｌｕ（ＰＡ−ＤＯＴＡ）　）　−ＩｇＧ−ＣＣ−４９として注射された１ ’ｌ？ｌｕの生体分布 注射した量に対する％／ｇ 茅ｊワＬ表 （１７’Ｌｕ（ＰＡ−ＤＯＴＡ）　）　−Ｆ（ａｂ’　）ｚ−ＣＣ−４９として 注射されたＩ’＋７１ｕの生体分布 注射した量に対する％／ｇ １ｎ＝４ 裏さ〜（表 （”Ｙ（ＰＡ−ＤＯＴＡ））　−１ｇＧ−ＣＣ−４９として注射された９０Ｙの 生体分布 注射した量に対する％／ｇ ”ｎ＝３ メさ−Ｌ表 （”Ｙ（ＰＡ−ＤＯＴＡ））　−Ｆ（ａｂ’　）ｚ−ＣＣ−４９として注射され た９０Ｙの生体分布 注射した量に対する％／ｇ 中ｎ＝４ メＶＩＡ表 （１Ｓ３Ｓａ＋（ＭｅＯ−ＢＡ−ＤＯＴＡ））　−１ｇＧ−ＣＣ−４９として注 射されたｌ　Ｓ　３Ｓｒｒ、の生体分布 注射した量に対する％／ｇ 中ｎ＝４ ＩＬＬ表 （”’Ｓｓ（ＭｅＯ−ＨＡ−ＤＯＴＡ）　）　−Ｆ（ａｂ’　）ｚ−ＣＣ−４９ として注射された１ＳｆｆＳＩ１１の生体分布注射した量に対する％／ｇ １１＊ｎ−４ ぶＶＩＩＡ表 （′Ｓ”Ｓａ＋（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）　〕−〕ＩｇＧ−ＣＣ−４として注射され た＋５３５．の生体分布 注射した量に対する％／ｇ ｎ−４ 芽ＶＨＢ、表 （ｌＳ’Ｓｍ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ）　）　−Ｆ（ａｂ’　）！−ＣＣ−４９とし て注射されたｌＳ″５Ｉ１１の生体分布 注射した量に対する％／ｇ １ｎ＝４ 第■Δ表 （”’Ｌｕ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ））　−１ｇＧ−ＣＣ−４９として注射されたｌ ’ｌ’ｌｌｕの生体分布注射した量に対する％／ｇ （”’Ｌｕ（ＰＡ−ＤＯＴＭＡ））　−１ｇＧ−ＣＣ−４９として注射されたＩ ｊ？ｌｕの生体分布注射した量に対する％／ｇ ９　ｎ＝４ 本発明の他の具体例は本明細書及びそこに開示されている発明の実施から当業者 にとって明らかであろう。明細書及び例は単に例示するものとして意図され、本 発明の真の範囲及び本質は次の請求の範囲によって示されるであろう。 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ Ｏ−１ｕ　（／Ｊ　仝　び　■　く　■注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 残留ＩＳ！Ｓｍ％ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ Ｏ間　令　■　■　Ｏｆｕ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ ＯＮ　−ト　（７）　Ｏ）　０ 注射量の％／ｇ −−間　Ｎ）Ｃ／Ｊ Ｏ（７１０（、ｒＩＯＣＪＩ　Ｏ 注射量の％／ｇ 残留１５３５ｍ％ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ Ｏ−ｔ％−１（／Ｊ　仝 体内残留”３ｍ％ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ ＯＭ　皐　■　Ｃｆｌ　ＯＮ 注射量の％／ｇ ＯＮ　皐　■　■　０ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 体内残留”５ｍ％ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ ＯＣＪＪ　■　■　〜　び 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 注射量の％／ｇ 体内残留Ｌｕ−１７７％ 補正書の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） 平成２年１２月２５日

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）〔式中、 各Ｑは独立に水素又は（ＣＨＲ５）ｐＣＯ２Ｒであり；Ｑ１は水素又は（ＣＨＲ ５）ｗＣ０２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又はＣ１〜Ｃ４アルキルで あり、但しＱ及びＱ１の全体の少なくとも２個は水素以外であり； 各Ｒ５は独立に水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり；Ｘ及びＹはそれぞれ独立に 水素であり、あるいは隣接するＸ及びＹと一緒になって追加の炭素一炭素結合を 形成し；ｎは０又は１であり； ｍは０〜１０の整数であり； ｐは１又は２であり； ｒは０又は１であり； ｗは０又は１であり； 但し、Ｘ及び／又はＹが追加の炭素ー炭素結合を形成する時、ｎは１のみであり 、そしてｒ及びｗの合計はＯ又は１であり；Ｌはそれが結合している炭素原子の １つに共有結合しておりそしてその１つの水素原子を置換しているリンカー／ス ペーサー基であり、該リンカー／スペーサー基は次の式：▲数式、化学式、表等 があります▼ （式中、 ｓは０又は１の整数であり； ｔは０〜２０の整数であり； Ｒ１は、抗体又はその断片への共有結合による連結を可能にする親電子性又は親 核性成分、あるいは抗体又はその断片に結合することができる合成リンカー、あ るいはその前駆体であり；そして Ｃｙｃは、環状脂肪族成分、芳香族成分、脂肪族複素環成分、又は芳香族複素環 成分であり、該成分のそれぞれは場合によっては、抗体又は抗体断片への結合を 妨害しない１又は複数の基により置換されており； 但し、ｓ，ｔ，ｍ，ｒ及びｎが０の時、Ｒ１はカルボキシル以外である）〕 で表わされる化合物、又はその医薬として許容される塩。 ２．前記医薬として許容される塩がカリウム、ナトリウム、リチウム、アンモニ ウム、カルシウム、マグネシウム、及び塩化水素アダクトから成る群から選択さ れたものである、請求項１に記載の化合物。 ３．Ｒ及びＲ５の両者が水素である、請求項１に記載の化合物。 ４．Ｒが水素であり、Ｒ５がメチルであり、そしてｗが０である、請求項１に記 載の化合物。 ５．ｎ及びｒがともにＯであり、そしてｍが０〜５である、請求項１に記載の化 合物。 ６．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＡ）（式中、Ｘ，Ｙ，Ｑ，Ｑ１，ｍ，ｎ 、及びｒは請求項１に定義した通りであり； Ｒ２は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカ ルバジド、マレイミド、プロモアセタミド及びカルボキシから成る群から選択さ れ；Ｒ３はＣ１〜Ｃ４アルコキシ、−ＯＣＨｚＣＯｚｌｌ、ヒドロキシ及び水素 から成る群から選択され； Ｒ４は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカ ルバジド、マレイミド、プロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択 され；但し、Ｒ２及びＲ４は両者が水素であることはできないが、しかしＲ２及 びＲ４の一方は水素でなければならない）で表わされる化合物、又はその医薬と して許容される塩。 ７．Ｒ３及びＲ４が水素である、請求項６に記載の化合物。 ８．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）（式中、 各Ｑは独立に水素又はＣＨＲ５ＣＯ２Ｒであり；各Ｑは独立に水素、ベンジル又 はＣ１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、Ｑの少なくとも２個は水素以外でなければならず；ｍは０〜５の整数であ り； Ｒ２は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカ ルバジド、マレイミド、ブロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択 され；Ｒ３はＣ１〜Ｃ４アルコキシ、−ＯＣＨ２Ｃ００Ｈ、ヒドロキシ及び水素 から成る群から選択され； Ｒ４は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカ ルバジド、マレイミド、ブロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択 され；各Ｒ５は独立に水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり；但し、Ｒ２及びＲ４ の両者が水素であることはできないが、しかしＲ２及びＲ４の一方は水素でなけ ればならない）で表わされる、請求項６に記載の化合物、又はその医薬として許 容される塩。 ９．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩＩ）（式中、 各Ｑは独立に水素又はＣＨＲ５Ｃ０２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又 はＣ１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、Ｑの少なくとも２個は水素以外でなければならず；ｍは０〜５の整数であ り； Ｒ２はニトロ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカルバジド、マレ イミド、プロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択される） で表わされる請求項８に記載の化合物、又はその医薬として許容される塩。 １０．１−〔２−（４−アミノフェニル）エチル〕−１，４，７，１０−テトラ アザシクロデカン−４，７，１０−トリ酢酸４，７，１０−トリメチルエステル である、請求項９に記載の化合物。 １１．１−〔２−（４−アミノフェニル）エチル〕−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカン−４，７，１０−トリ酢酸塩酸塩である請求項９に記載の化 合物。 １２．１−〔２−（４−イソチオシアナトフェニル）エチル〕−１，４，７，１ ０−テトラアザシクロドデカン−４，７，１０−トリ酢酸である請求項９に記載 の化合物。 １３．１−（４−アミノベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデ カン−４，７，１０−トリ酢酸塩酸塩である請求項９に記載の化合物。 １４．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＶ）（式中、 各Ｑは独立に水素又はＣＨＲ５Ｃ０２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又 はＣ１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、Ｑの少なくとも２個は水素以外でなければならず；ｍは０〜５の整数であ り； Ｒ３はＣ１〜Ｃ４アルコキシ、−ＯＣＨ２ＣＯ２Ｈ及びヒドロキシから成る群か ら選択され； Ｒ４はニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカルバジ ド、マレイミド、プロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択され； そして各Ｒ５は独立に水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルである）で表わされる請求項 ８に記載の化合物、又はその医薬として許容される塩。 １５．１−（２−メトキシ−５−アミノベンジル）−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカン−４，７，１０−トリ酢酸である、請求項１４に記載の化合 物。 １６．１−（２−ヒドロキシ−５−アミノベンジル）−１，４．７，１０−テト ラアザシクロドデカン−４，７，１０−トリ酢酸である、請求項１４に記載の化 合物。 １７．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ）〔式中、 各Ｑは独立に水素又はＣＨＲ５ＣＯ２Ｒであり；Ｑ１は水素又は（ＣＨＲ５）ｗ ＣＯ２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、Ｑ及びＱ１の全体の少なくとも２個は水素以外であり、そしてＱの１つは 水素であり； ｍは０〜５の整数であり； ｗは０又は１であり； Ｒ２は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカ ルバジド、マレイミド、プロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択 され；Ｒ３はＣ１〜Ｃ４アルコキシ、−ＯＣＨ２ＣＯ２Ｈ、ヒドロキシ及び水素 から成る群から選択され； Ｒ４は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカ ルバジド、マレイミド、プロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択 され；各Ｒ５は独立に水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり；但し、Ｒ２及びＲ４ の両方が水素であることができず、しかしＲ２及びＲ４の一方は水素でなければ ならない〕で表わされる請求項６に記載の化合物、又はその医薬として許容され る塩。 １８．Ｒが水素であり、そしてＲ３がＣ１〜Ｃ４アルキルである請求項１７に記 載の化合物。 １９．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩ）（式中、 各Ｑは独立に水素又はＣＨＲ５ＣＯ２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又 はＣ１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、少なくとも１個のＱは水素以外であり；ｍは０〜５の整数であり； Ｒ２は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカ ルバジド、マレイミド、プロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択 され；Ｒ３はＣ１〜Ｃ４アルコキシ、−ＯＣＨ２ＣＯ２Ｈ、ヒドロキシ及び水素 から成る群から選択され； Ｒ４は水素、ニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカ ルバジド、マレイミド、プロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択 され；各Ｒ５は独立に、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり；但し、Ｒ２及びＲ ４の両方が水素であることはできず、しかしＲ２及びＲ４の一方は水素でなけれ ばならない）で表わされる、請求項６に記載の化合物、又はその医薬として許容 される塩。 ２０．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩＩ）（式中、 各Ｑは独立に水素又はＣＨＲ５ＣＯ２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又 はＣ１〜Ｃ４アルキルであり； 但し、少なくとも１個のＱは水素以外であり；ｍは０〜５の整数であり； Ｒ２はニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカルバジ ド、マレイミド、プロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択され； そして各Ｒ５は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキルである）で表わされる、請求項 １９に記載の化合物、又はその医薬として許容される塩。 ２１．α−〔２−（４−アミノフェニル）エチル〕−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカン−１−（Ｒ，Ｓ）−アセチック４，７，１０−トリス−（Ｒ −メチルアセチック）アシド１−イソプロピル−４，７，１０−トリメチルエス テルである請求項２０に記載の化合物。 ２２．α−〔２−（４−アミノフェニル）エチル〕−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカン−１−（Ｒ，Ｓ）−アセチック４，７，１０−トリス−（Ｒ −メチルアセチック）アシドである請求項２０に記載の化合物。 ２３．α−〔２−（４−イソチオシアナトフェニル）エチル〕−１，４，７，１ ０−テトラアザシクロドデカン−１−（Ｒ，Ｓ）−アセチック−４，７，１０− トリス−（Ｒ−メチルアセチック）アシドである、請求項２０に記載の化合物。 ２４．α−〔２−（４−アミノフェニル）エチル〕−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカン−１，４，１０−トリ酢酸混合アンモニウムカリウム塩であ る、請求項２０に記載の化合物。 ２５．α−（４−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデ カン−１，４，７−トリ酢酸である請求項２０に記載の化合物。 ２６．α−（４−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデ カン−１，４，１０−トリ酢酸である請求項２０に記載の化合物。 ２７．α−（４−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデ カン−１，４，７，１０−テトラ酢酸である、請求項２０に記載の化合物。 ２８．α−（４−イソチオシアナトフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザ シクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸である請求項２０に記載の化合 物。 ２９．α−〔２−（４−ニトロフェニル）エチル〕−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸１，４，７，１０−テトラ メチルエステルである、請求項２０に記載の化合物。 ３０．α−〔２−（４−アミノフェニル）エチル〕−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸１，４，７，１０−テトラ メチルエステルである、請求項２０に記載の化合物。 ３１．α−〔２−４−アミノフェニル）エチル〕−１，４，７，１０−テトラア ザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸である、請求項２０に記載の 化合物。 ３１．α−〔２−（４−イソチオシアナトフェニル）エチル〕−１，４，７，１ ０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸である、請求項 ２０に記載の化合物。 ３２．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩＩＩ）（式中、 各Ｑは独立に水素又はＣＨＲ５ＣＯ２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又 はＣ１−Ｃ４アルキルであり； 但し、少なくとも一個のＱは水素以外であり；ｍは０〜５の整数であり； Ｒ３はＣ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＣＨ２ＣＯ２Ｈ、ヒドロキシ及び水素から成る 群から選択され； Ｒ４はニトロ、アミノ、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカルバジ ド、マレイミド、プロモアセタミド及びカルボキシルから成る群から選択され； そして各Ｒ５は独立に水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルである）で表わされる特許請 求の範囲第６項に記載の化合物。 ３３．α〔２−メトキシ−５−ニトロフェニル）−１，４，７，１０−テトラア ザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸テトラアンモニウム塩である 、請求項３２に記載の化合物。 ３４．α−（２−メトキシ−５−アミノフェニル）−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸テトラアンモニウム塩であ る、請求項３２に記載の化合物。 ３５．α−（２−メトキシ−５−イソチオシアナトフェニル）−１，４，７，１ ０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸テトラアンモニ ウム塩である、請求項３２に記載の化合物。 ３６．次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）〔式中、 各Ｑは独立に水素又は（ＣＨＲ５）ｐＣＯ２Ｒであり；Ｑ１は水素又は（ＣＨＲ ５）ｗＣＯ２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又はＣ１〜Ｃ４アルキルで あり、但しＱ及びＱ１の全体の少なくとも２個は水素以外であり； 各Ｒ５は独立に水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり；Ｘ及びＹはそれぞれ独立に 水素であり、あるいは隣接するＸ及びＹと一緒になって追加の炭素一炭素結合を 形成し；ｎは０又は１であり； ｍは０〜１０の整数であり； ｐは１又は２であり； ｒは０又は１であり； ｗは０又は１であり； 但し、Ｘ及び／又はＹが追加の炭素一炭素結合を形成する時、ｎは１のみであり 、そしてｒ及びｗの合計は０又は１であり；Ｌはそれが結合している炭素原子の １つに共有結合しておりそしてその１つの水素原子を置換しているリンカー／ス ペーサー基、該リンカー／スペーサー基は次の式：▲数式、化学式、表等があり ます▼ （式中、 ｓは０又は１の整数であり； ｔは０〜２０の整数であり； Ｒ１は、抗体又はその断片への共有結合による連結を可能にする親電子性又は親 核性成分、あるいは抗体又はその断片に結合することができる合成リンカー、あ るいはその前駆体であり；そして Ｃｙｃは、環状脂肪族成分、芳香族成分、脂肪族複素環成分、又は芳香族複素環 成分であり、該成分のそれぞれは場合によっては、抗体又は抗体断片への結合を 妨害しない１又は複数の基により置換されており； 但し、ｓ，ｔ，ｍ，ｒ及びｎが０の時、Ｒ１はカルボキシル以外である）〕 で表わされる化合物又はその医薬として許容される塩とＬａ，Ｃｅ，Ｐｒ，Ｎｄ ，Ｐｍ，Ｓｍ，Ｅｕ，Ｇｄ，Ｔｂ，Ｄｙ，Ｈｏ，Ｅｒ，Ｔｍ，Ｙｂ，Ｌｕ，Ｙ及 びＳｃから成る群から選択された金属のイオンとから形成された錯体。 ３７．金属イオンがＳｍ，Ｌｕ又はＹである、請求項３６に記載の錯体。 ３８．前記金属イオンが１５３Ｓｍ，１６４Ｈｏ，９０Ｙ，１４９Ｐｍ，１５９ Ｇｄ，１４０Ｌａ，１７７Ｌｕ，１１７５Ｙｂ，４７Ｓｃ又は１４２Ｐｒである 、請求項３６に記載の錯体。 ３９．前記金属イオンが１５３Ｓｍ，１７７Ｌｕ又は９０Ｙである、請求項３８ に記載の錯体。 ４０．前記金属イオンが請求項６の化合物と共に錯形成している、請求項３６〜 ３９のいずれか１項に記載の錯体。 ４１．前記金属イオンが請求項８の化合物と錯形成している、請求項３６〜３９ のいずれか１項に記載の錯体。 ４２．前記金属イオンが請求項９の化合物と錯形成している、請求項３６〜３９ のいずれか１項に記載の化合物。 ４３．前記金属イオンが請求項１４の化合物と錯形成している、請求項３６〜３ ９のいずれか１項に記載の錯体。 ４４．前記金属イオンが請求項１７の化合物と錯形成している、請求項３６〜３ ９のいずれか１項に記載の錯体。 ４５．前記金属イオンが請求項１９の化合物と錯形成している、請求項３６〜３ ９のいずれか１項に記載の錯体。 ４６．前記金属イオンが請求項２０の化合物と錯形成している、請求項３６〜３ ９のいずれか１項に記載の錯体。 ４７．前記金属イオンが請求項３２の化合物と錯形成している、請求項３６〜３ ９のいずれか１項に記載の方法。 ４８．前記金属イオンが請求項２７の化合物と錯形成している、請求項３８に記 載の錯体。 ４９．前記金属イオンが、請求項２７の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項４８に記載の錯体。 ５０．前記金属イオンが、請求項２７と錯形成している９０Ｙである、請求項４ ８に記載の錯体。 ５１．前記金属イオンが、請求項２８の化合物と錯形成している、請求項３８に 記載の錯体。 ５２．前記金属イオンが、請求項２８の化合物と錯形成している、請求項５１に 記載の錯体。 ５３．前記金属イオンが請求項３１の化合物と錯形成している、請求項３８に記 載の錯体。 ５４．前記金属イオンが、請求項３１の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項５３に記載の錯体。 ５５．前記金属イオンが、請求項３１の化合物と錯形成している９０Ｙである、 請求項５３に記載の錯体。 ５６．前記金属イオンが、請求項３１の化合物と錯形成している１７７Ｌｕであ る、請求項５３に記載の錯体。 ５７．前記金属イオンが請求項３２の化合物と錯形成している、請求項３８に記 載の錯体。 ５８．前記金属イオンが、請求項３２の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項５７に記載の錯体。 ５９．前記金属イオンが、請求項３２の化合物と錯形成している９０Ｙである、 請求項５７に記載の錯体。 ６０．前記金属イオンが、請求項３２の化合物と錯形成している１７７Ｌｕであ る、請求項５７に記載の錯体。 ６１．前記金属イオンが請求項１１の化合物と錯形成している、請求項３８に記 載の錯体。 ６２．前記金属イオンが、請求項１１の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項６１に記載の錯体。 ６３．前記金属イオンが請求項１２の化合物と錯形成している、請求項３８に記 載の錯体。 ６４．前記金属イオンが、請求項１２の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項６３に記載の錯体。 ６５．前記金属イオンが請求項３４の化合物と錯形成している、請求項３８に記 載の錯体。 ６６．前記金属イオンが、請求項３４の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項６５に記載の錯体。 ６７．前記金属イオンが請求項３５の化合物と錯形成している、請求項３８に記 載の錯体。 ６８．前記金属イオンが、請求項３５の化合物と錯形成している、請求項３８に 記載の錯体。 ６９．前記金属イオンが請求項２２の化合物と錯形成している、請求項３８に記 載の錯体。 ７０．前記金属イオンが、請求項２２の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項６９に記載の錯体。 ７１．前記金属イオンが、請求項２２の化合物と錯形成している９９Ｙである、 請求項６９に記載の錯体。 ７２．前記金属イオンが、請求項２２の化合物と錯形成している１７７Ｌｕであ る、請求項６９に記載の錯体。 ７３．前記金属イオンが請求項２３の化合物と錯形成している、請求項３８に記 載の錯体。 ７４．前記金属イオンが、請求項２３の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項７３に記載の錯体。 ７５．前記金属イオンが、請求項２３の化合物と錯形成している９０Ｙである、 請求項７３に記載の錯体。 ７６．前記金属イオンが、請求項２３の化合物と錯形成している１７７Ｌｕであ る、請求項７３に記載の錯体。 ７７．Ｌａ，Ｃｅ，Ｐｒ，Ｎｄ，Ｐｍ，Ｓｍ，Ｅｕ，Ｇｄ，Ｔｂ，ｎｙ，Ｈｏ， Ｅｒ，Ｔｍ，Ｙｂ，Ｌｕ，Ｙ及びＳｃから成る群から選択された金属とイオンと 共に錯形成しており、そして抗体又は抗体断片と共有結合している、次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）〔式中、 各Ｑは独立に水素又は（ＣＨＲ５）ｐＣＯ２Ｒであり；Ｑ１は水素又は（ＣＨＲ ５）ｗＣＯ２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又はＣ１〜Ｃ４アルキルで あり、但しＱ及びＱ１の全体の少なくとも２個は水素以外であり； 各Ｒ５は独立に水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり；Ｘ及びＹはそれぞれ独立に 水素であり、あるいは隣接するＸ及びＹと一緒になって追加の炭素一炭素結合を 形成し；ｎは０又は１であり； ｍは０〜１０の整数であり； ｐは１又は２であり； ｒは０又は１であり； ｗは０又は１であり； 但し、Ｘ及び／又はＹが追加の炭素一炭素結合を形成する時、ｎは１のみであり 、そしてｒ及びｗの合計は０又は１であり；Ｌはそれが結合している炭素原子の １つに共有結合しておりそしてその１つの水素原子を置換しているリンカー／ス ペーサー基、該リンカー／スペーサー基は次の式：▲数式、化学式、表等があり ます▼ （式中、 ｓは０又は１の整数であり； ｔは０〜２０の整数であり； Ｒ１は、抗体又はその断片への共有結合による連結を可能にする親電子性又は親 核性成分、あるいは抗体又はその断片に結合することができる合成リンカー、あ るいはその前駆体であり；そして Ｃｙｃは、環状脂肪族成分、芳香族成分、脂肪族複素環成分、又は芳香族複素環 成分であり、該成分のそれぞれは場合によっては、抗体又は抗体断片への結合を 妨害しない１又は複数の基により置換されており； 但し、ｓ，ｔ，ｍ，ｒ及びｎが０の時、Ｒ１はカルボキシル以外である）〕 で表わされる化合物、又はその医薬として許容される塩、を含んで成る接合体。 ７８．前記金属が１５３Ｓｍ，１６６Ｈｏ，９０Ｙ，１４９Ｐｍ，１５９Ｇｄ， １４０Ｌａ，１７７Ｌｕ，１７５Ｙｂ，４７Ｓｃ又は１４２Ｐｒである、請求項 ７７に記載の接合体。 ７９．前記金属が１５３Ｓｍ，９０Ｙ又は１７７Ｌｕである、請求項７８に記載 の接合体。 ８０．前記抗体又は抗体断片がモノクローナル抗体又はその断片である、請求項 ７７〜７９のいずれか１項に記載の接合体。 ８１．前記抗体又は抗体断片がＣＣ−４９．ＣＣ−４９Ｆ（ａｂ′）２，ＣＣ− ８３，ＣＣ−８３Ｆ（ａｂ′）２、又はＢ７２．３である、請求項８０に記載の 接合体。 ８２．前記化合物が請求項６に定義されているものである、請求項７７〜８１の いずれか１項に記載の接合体る８３．前記化合物が請求項８に定義されているも のである、請求項７７〜８１のいずれか１項に記載の接合体。 ８４．前記化合物が請求項９に定義されているものである、請求項７７〜８１の いずれか１項に記載の接合体。 ８５．前記化合物が請求項１４に定義されているものである、請求項７７〜８１ のいずれか１項に記載の接合体。 ８６．前記化合物が請求項１７に定義されているものである、請求項７７〜８１ のいずれか１項に記載の接合体。 ８７．前記化合物が請求項１９に定義されているものである、請求項７７〜８１ のいずれか１項に記載の接合体。 ８８．前記化合物が請求項２０に定義されているものである、請求項７７〜８１ のいずれか１項に記載の接合体。 ８９．前記化合物が請求項３２に定義されているものである、請求項７７〜８１ のいずれか１項に記載の接合体。 ９０．前記金属イオンが、請求項２８の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項７８〜８１のいずれか１項に記載の接合体。 ９１．前記金属イオンが、請求項３２の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項７８〜８１のいずれか１項に記載の接合体。 ９２．前記金属イオンが、請求項３２の化合物と錯形成している９０Ｙである、 請求項７８〜８１のいずれか１項に記載の接合体。 ９３．前記金属イオンが、請求項３２の化合物と錯形成している１７７Ｌｕであ る、請求項７８〜８１のいずれか１項に記載の接合体。 ９４．前記金属イオンが、請求項３５の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項７８〜８１のいずれか１項に記載の接合体。 ９５．前記金属イオンが、請求項２３の化合物と錯形成している１５３Ｓｍであ る、請求項７８〜８１のいずれか１項に記載の接合体。 ９６．前記金属イオンが、請求項２３の化合物と錯形成している９０Ｙである、 請求項７８〜８１のいずれか１項に記載の接合体。 ９７．前記金属イオンが、請求項２３の化合物と錯形成している１７７Ｌｕであ る、請求項７８〜８１のいずれか１項に記載の接合体。 ９８．抗体又は抗体断片と共有結合により結合している、次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）〔式中、 各Ｑは独立に水素又は（ＣＨＲ５）、ｐＣＯ２Ｒであり；Ｑ１は水素又は（ＣＨ Ｒ５）ｗＣＯ２Ｒであり；各Ｒは独立に水素、ベンジル又はＣ１〜Ｃ４アルキル であり、但しＱ及びＱ１の全体の少なくとも２個は水素以外であり； 各Ｒ５は独立に水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり；Ｘ及びＹはそれぞれ独立に 水素であり、あるいは隣接するＸ及びＹと一緒になって追加の炭素一炭素結合を 形成し；ｎは０又は１であり； ｍは０〜１０の整数であり； ｐは１又は２であり； ｒは０又は１であり； ｗは０又は１であり； 但し、Ｘ及び／又はＹが追加の炭素ー炭素結合を形成する時、ｎは１のみであり 、そしてｒ及びｗの合計は０又は１であり；Ｌはそれが結合している炭素原子の １つに共有結合しておりそしてその１つの水素原子を置換しているリンカー／ス ペーサー基であり、該リンカー／スペーサー基は次の式：▲数式、化学式、表等 があります▼ （式中、 ｓは０又は１の整数であり； ｔは０〜２０の整数であり； Ｒ１は、抗体又はその断片への共有結合による連結を可能にする親電子性又は親 核性成分、あるいは抗体又はその断片に結合することができる合成リンカー、あ るいはその前駆体であり；そして Ｃｙｃは、環状脂肪族成分、芳香族成分、脂肪族複素環成分、又は芳香族複素環 成分であり、該成分のそれぞれは場合によっては、抗体又は抗体断片への結合を 妨害しない１又は複数の基により置換されており； 但し、ｓ．ｔ，ｍ，ｒ及びｎが０の時、Ｒ１はカルボキシル以外である）〕 で表わされる化合物、又はその医薬として許容される塩。 ９９．前記抗体又は抗体断片がモノクローナル抗体又はその断片である、請求項 ９８に記載の接合体。 １００．前記抗体又は抗体断片がＣＣ−４９，ＣＣ−４９Ｆ（ａｂ′）２，ＣＣ −８３，ＣＣ−８３Ｆ（ａｂ′）２、又はＢ７２．３である、請求項９９に記載 の接合体。 １０１．前記化合物が請求項６に定義されているものである、請求項９８に記載 の接合体。 １０２．前記化合物が請求項８に定義されているものである、請求項９８に記載 の接合体。 １０３．前記化合物が請求項９に定義されているものである、請求項９８に記載 の接合体。 １０４．前記化合物が請求項１４に定義されているものである、請求項９８に記 載の接合体。 １０５．前記化合物が請求項１７に定義されているものである、請求項９８に記 載の接合体。 １０６．前記化合物が請求項１９に定義されているものである、請求項９８に記 載の接合体。 １０７．前記化合物が請求項２０に定義されているものである、請求項９８に記 載の接合体。 １０８．前記化合物が請求項３２に定義されているものである、請求項９８に記 載の接合体。 １０９．医薬として許容されるキャリヤーと共に、請求項７７〜９７のいずれか １項に記載の接合体を含んで成る医薬製剤。 １１０．請求項１０９の製剤の有効量を哺乳類に投与することを含んで成る、該 動物における疾患状態の診断及び／又は治療のための方法。 １１１．前記疾患状態が癌である、請求項１１０に記載の方法。