JPH04504268A - ２―アミノ―９―（２，３，５―トリ―０―ベンジル―β―Ｄ―アラビノフラノシル）アデニンの製造方法および新規な中間体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ２−アミノ−９−（２，３，５−トリー〇−ベンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノ シル）アデニンの製造方法および新規な中間体 本発明は、２−アミノ−９−（２，３，５−トリー〇−ベンジルーβ−Ｄ−アラ ビノフラノシル）アデニン（Ｖ）の製造方法、および２−フルオロ−アラ−ＡＭ Ｐ。

細胞毒剤の製造に有用な、ある新規な中間体に関する。

詳しくは本発明は、保護した化合物２，６−ジ（アルコキシアセトアミド）プリ ン（ＩＤを、２．３．５−トリー〇−ベンジルーα−Ｄ−アラビノフラノシルク ロライド（１）と反応させて、２，６−ジ（アルコキシアセトアミド）−９−（ ２，３，５−トリー〇−ベンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン（ＩＶ ）を作り、次にアルコキシアセチル基を除去して、標題の糖で保護した化合物Ｖ を高収率で製造する方法に関する。

（２）先行技術 Ｊｏｈｎ　Ａ、Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙの米国特許第４゜１８８．３７８号（１９ ８０年２月１２日）の実施例２Ｂは、２−アミノ−９−（２，３，５−トリー〇 −ベンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）アデニン（Ｖ）の製造を示している 。これを達成するため、２．　３．　５−）−リー○−ベンジルー１−０−ｐ− 二トロペンゾイルーβ−Ｄ−アラビノフラノースを、エチレンクロライド中でフ ラノシルクロライド（［ｍに変換し、２．６−ジアセドアミドプリン（Ｉｌ）と 反応させる。生成した中間体（ＩＶ）を、次にメタノール中でソジウムメトキサ イドで処理して２つのアセチル基を除去し、目標とする２−アミノアデニン（Ｖ ）を全体として３４％の収率で得る。これはＭｏｎｔｇｏｍｅｒｙ等によりＪ、 Ｈｅｔｅｒｏ、Ｃｈｅｍ、１６．１５７　（１９７９）に以前に報告されたのと 同じ経路であり、同誌では全体の収率は４０％であると報告されている。この方 法は明らかに収率が低い方法である。引用した特許の実施例２Ａにおいて、Ｍｏ ｎｔｇｏｍｅｒｙは、別の反応順序により化合物（Ｖ）製造している。これは２ ，６−ジクロロプリンを前もって製造しておき（示されていない）、それを次に エタノール中でソジウムアジドで処理して、実施例１に記載されたように２，６ −ジアシドプリンを製造する。これを接触的水素化し、化合物（Ｖ）を得る。こ れは明らかに長い、望ましくない経路である。

目的 それ故、２．６−ジアミツー９−　（２，３，５−トリー〇−ベンジルーβ−Ｄ −アラビノフラノシル）プリンを、高収率で製造する方法を提供するのが本発明 の目的である。さらに、新規な中間体を提供するのも本発明の目的である。さら に、経済的である方法を提供することも本発明の目的である。これ等および他の 目的は、以下の記載により一層明らかになるであろう。

一般的記述 本発明は、化合物、２，６−ジアミツー９−（２，３゜５−トリー〇−ベンジル ーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン（ｖ）の製造方法に関し、その方法は、 （ａ）２．６−ジ（アルコキシアセトアミド）プリン（ＩＩ）を、２，３．５− トリー〇−ベンジルーα−Ｄ−アラビノフラノシルクロライド（［ＩＩ）　（ア ルキ（ａｌｋ）とは直鎖は分岐の、１〜６個の炭素原子を存する低級アルキル基 をいう）と、非極性水不溶性有機溶媒中において、塩酸受容体存在下に反応させ 、２，６−ジ（アルコキシアセトアミド）−９−（２，３，５−１−クー０−ベ ンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン（！■）を最初の反応混合物中に 作り、 （ｂ）　その最初の反応物から、中間体（【Ｖ）を、非極性有機溶媒を除去する ことにより分離し、（Ｃ）　中間体（ｍから２，６−ジアルコキシアセチル基を 除去して、化合物（Ｖ）を製造する。化合物（ＩＩ）として化合物、２，６−ジ （メトキシアセトアミド）プリンが好ましい。

本発明は、新規な中間体、２，６−ジ（アルコキシアセトアミド）−９−（２， ３，５−）リーＯ−ベンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン（ｎ）に関 する。

アルキ（ａｌｋ）は好ましくはメチル基である。中間体（ｍ、シロップは定量的 収率で得られ、ソジウムメトキサイドで容易に変換され、本発明の方法により、 高収率で目標とする化合物（Ｖ）を形成する。

中間体（Ｉｔ）および（ｍ中のアルキル基は、直鎖または分岐の、メチル、エチ ル、プロピル、ブチル、ペンチル、またはヘキシル基から選択する。メチルが好 ましい。

工程（ａ）における非極性溶媒は、ジクロロメタン、またはアセトニトリルとす ることができる。

工程（ａ）における反応は、好ましくは８０℃〜８５℃の間の温度で行う。７５ ℃と１００”Ｃの間の高い温度を用いることができる。反応混合物は通常、少く とも約１８時間溶媒中で還流する。

酸受容体は、任意の適合したアミン、または他のルイス塩基である。ジイソプロ ピルエチルアミンが好ましい。

水は工程（ｂ）において反応混合物から除去する。ｎ　−プロパツールのような 種々の脱水剤を用いることができる。

工程（Ｃ）で、２．６−ジアルコキシアセチル基を除き、２．３．５−トリー〇 −ベンジルー２，６−ジアミツブリン（ｍを提供する反応のために、反応混合物 を低級アルカノール中、約４５℃および５５℃の間の温度に保つ。

低級アルカノールはメチルまたはエチルアルコールとすることができる。これら の基を除去する他の方法は、閉鎖系中における、メタノール中のメチルアミンま たはアンモニア、メタノールまたはエタノールである。

具体的な記述 改良された方法による２−フルオロ−アラ−ＡＭＰの製造のための８工程の順序 は次の通りである。

久」口Ｌ１ ２−フルオロ−アラーへＭＰＣフルダラビン　ホスフェート〉ＲＯＣＨＩ　ｇｏ Ｉｉ　＋　Ａｅｍ　Ｏ２：　９’ｌ　（ＲＯＣＨ＋　Ｘ）ｔ　ＯＲ禦ＣＨＩ　□ ｌ６２） ＩＩ（９０％） ｐ−ニトロベンゾイル−β−Ｄ−ＩＩＩ（〜１００％）アラビノース：　Ｂｎ尊 ベンジル ＮＨＣ（０）Ｒ Ｒ禽Ｃ口ａＯｃＨ＋　（Ｓド日１６９丁）ＩＶ（１０１Ｎ） ＮＨ。

ｎ０ ｖ（６８（イ） （支）子嚢５５３） Ｖｒ　（３９１ＶＩＩ　（８ＯＮ） （ト）子嚢５５６）　σＦ量２８５．４）ＶＩ　Ｉ　Ｉ　（５６Ｎ）　（ｆｉ子 子嚢１＋５．２）２−フルオロ−アラ−ＡＭＰ （フルダラビン　小スフエート） 本方法における最も顕著な改良は、２，６−ジアミツプリンについて、２つの保 護アセチル基をメトキシアセチル基で置換することである。２．６−ジアミツプ リンおよびメトキシ酢酸無水物から９０％の収率で製造した、２．６−ジ（メト キシアセトアミド）プリン（ＩＩ）は、保護した１−クロロ−α−Ｄ−アラビノ ースと非常に良く結合し、結合した生成物（ｍを、本質的に１００％収率で与え る。これは、上の先行技術で記述した、クロロシュガーとわずか３４〜４０％収 率で結合する２、６−ジアセドアミドプリンと極めて対照的である。さらに反応 時間は、５日に対して、１６〜１８時間（−晩）に減少し、そして酸受容体とし ての分子篩（反応中にこわれる）をジイソプロピルエチルアミンに置きかえるこ とができる。

さらに、中間体（ＩＩ）の高い溶解性のため、カップリング工程に用いる溶媒（ エチレンジクロライド）の容積を１０倍減らすことかでき、かくて中間体（ｍの 大規模生産を容易にする。

保護されたジアミン（Ｖ）の２−フルオロ誘導体（ＶＩ）への低温ジアゾ化−フ ルオル化は十分に研究され、反応を３００ｇレベルまで、そしてより不利だが５ ００ｇまで、のスケールとすることができる。保護されたヌクレオシド（■］） のヌクレオシド（Ｖ［Ｉ）への水素化−説ベンジル化は８０％の平均収率で良好 に進行した。炭素触媒上へのパラジウムを本質的にシュミレートするために、よ り安価なパラジウムクロライドを活性炭存在下に用いた。

さらに以前の報告（前に述べたＭｏｎｔｇｏｍｅｒｙ。

米国特許およびＪ、Ｈｅｔ、Ｃｈｅｍ）は、接触的水素化は部分的脱フルオル化 をもたらすと述べている。本明細書に記載した方法は、水素化を塩酸存在下で行 う場合、脱フルオル化がなく、精製工程を簡単にする。

最後に、ヌクレオシド（Ｖｌｌ）の、目標とする５′−ホスフェート（ＶＩＩＩ ）へのホスホリル化で起る一定しない収率という問題は、本質的に無水のヌクレ オシドを用いることにより解決した。反応均一性を達成するための時間は２０分 からほぼ３時間に伸びたが、良好品質生産物の７５〜７９％（平均７６％）とい う再現性ある収率が達成できた。良好な収率を維持するために、反応混合物中に 痕跡の水分を提供する注意をはられねばならないことが見出された メトキシ酢酸（３６０ｇ、４モル）および無水酢酸（４０９ｇ、４モル）の混合 物を、バブルプレート（ｂｕｂｂ　１　ｅ−ｐ　Ｉ　ａ　ｔ　ｅ）蒸溜カラムお よびフラクションカッター（ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｃｕｔｔｅｒ）を備えた２１の ３つロフラスコ中で、攪拌しながら加熱した。酢酸および無水酢酸を、内部温度 が１６４°Ｃに達する迄、大気圧で蒸溜した。圧力を下げ、生成物を、６５〜７ １″Ｃ，０，２ｍｍＨｇで集め、２２９ｇ（７１％）の純粋な標記化合物を得た 。全体で３４．８ｋｇのメトキシ酢酸を処理して２６．１ｋｇ（８３％）の無水 物ＣＤを得た。

材料 メトキシ酢酸 無水酢酸 ２．６−ジ（メトキシアセトアミド）プリン（ｍ２．６−ジアミツブリンー水和 物（５０４ｇ、３．　０モル）とメトキシ酢酸無水物（１，５３ｋｇ、９．４６ モル）とのピリジン（３，５Ｌ）中の混合物を、攪拌しながら加熱（スチームバ ス）した。温度を約１ｏ分内に８８°Ｃに上げ、混合物は均一になった。そのあ と温度は自発的に１０３°Ｃに上昇した（発熱）。反応混合物を一時間攪拌し、 その間に温度は９７℃に下がり、固体が沈澱し始めた。加熱を止め反応温度は５ ８℃に下がった。反応混合物をメチルエチルケトン（３，５β）で徐々に希釈し 、次にゆつくり一晩攪拌した。その固体を集め、フィルターケーキをメチルエチ ルケトン（８００ｍｌ）で洗浄した。そのケーキをビーカーに移し、メチルエチ ルケトン（６１）とともに攪拌した。その固体生成物を濾過により集め、メチル エチルケトン（２ｆ）で洗い、−晩風乾した。風乾した物質は、次に８０〜８５ °Ｃ１０，３ｍｍＨｇで工８時間恒量まで乾燥し、７９０ｇ（９０％）の標記ジ アミド（！ｌ）、融点２１９〜２２０°Ｃを得た。

この方法で、全量で７．３５ｋｇの２，６−ジアミツブリンと２２．３３ｋｇの メトキシ酢酸無水物（【）を処理して、１１．７０ｋｇ（９１％）の標記ジアミ ド（ＩＩ）を得た。

元素分析、　Ｃ＋＋Ｈ＋ａＮｓ　Ｏａ　（２９４，２７）　ニ対する計算値：　 Ｃ，４４，８９，Ｈ，４，７９；　Ｎ。

２８．５６゜測定値：　Ｃ，４４，９１；　Ｈ，４，７１：　Ｎ、２８．３６゜ 材料 ２．６−ジアミツプリン メチルエチルケトン メトキシ酢酸無水物 ピリジン ２．３．５−）クー０−ベンジルーα−Ｄ−アラビノジルクロライド（Ｉ［■） メチレンクロライド（６，２５１＞中の２．　３．　５−トリー〇−ベンジルー ｔ−ｏ−ｐ−ニトロベンゾイル−β−Ｄ−アラビノフラノース（１，２５ｋｇ、 ２．２モル）の機械的に攪拌した溶液に、４〜６°Ｃで２時間、塩化水素をバブ ルした。反応混合物を１６°Ｃに温め、Ｎｔを１０分間パージし、焼結ガラス分 散管を通して濾過した。残つた固体、ｐ−ニトロ安息香酸をメチレンクロライド で洗浄した（２Ｘ１．２５１）。溶媒を、大部分のメチレンクロライドが除去さ れるまで、攪拌しながら２３〜２７℃（内部）で除去した（アスピレータ−）。

エチレンジクロライド（ＥＤＣ，１，２５１りを加え、次に内部温度３７℃まで 除去した（アスピレータ−）。

遊離したｐ−ニトロ安息香酸を滴定すると、クロロシュガー（ｒ目）の収率は、 シロップの重量　９７５ｇ、１０１％と一致して、本質的に定量的であることが わかった。

材料 ２．３．５−）リー０−ベンジルーｔ−ｏ−ｐ−二トロペンゾイルーβ−Ｄ−ア ラビノース メチレンクロライド 塩化水素、気体 エチレンジクロライド ２．６−ジ（メトキシアセトアミド”）−９−（２，３゜５−トリー〇−ベンジ ルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン（ｍ ２．６−ジ（メトキシアセトアミド）プリン（ＩＩ）（６４６ｇ、２．２０モル ）をエチレンジクロライド（ＥＤＣ）（４，８Ｊ）中に懸濁した。その混合物を 、蒸溜により、６００ｍ１のＥＤＣを除去することにより乾燥した。

上で作ったα−クロロシュガー（ＩＩＩ）　（２，２０モル）の濃縮した溶液、 続いて新たに蒸溜したジイソプロピルエチルアミン（３５４ｇ、２．７５モル） を、該懸濁液に加えた。その混合物を攪拌しながら一晩還流させ（スチームバス ）、その熱溶液を脱イオン化した水（４１）中に攪拌しながら注いだ。有機層を 分離し、水相をＥＤＣ（１，５ｆ）で洗浄した。いっしょにした有機層を脱イオ ン水（２Ｘ２１）で洗浄した。ＥＤＣを攪拌しながら除去した（アスピレータ− 、スチームバス）。残渣をｎ−プロパツール（２１）と共に共沸させ、ｎ−プロ パツールは蒸溜により除去し、化合物ｔＶを、シロップとして得た。収量は１． ５５ｋｇ、１０１％であり、本質的に定量的であった。

材料 ２．６−ジ（メトキシアセトアミド）プリン（ＩＩ）α−クロロシュガー（ＩＩ Ｉ） エチレンジクロライド ジイソプロピルエチルアミン ｎ−プロパツール ２−アミノ−９−（２，３，５−）ジ−０−ベンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノ シル）アデニン（Ｖ）保護した２、６−ジ（メトキシアセトアミド）プリン（ｍ 　（１，５５ｋｇ、２．２０モル）を攪拌しながらメタノール（３，６４７）に 溶解し、４６〜４８℃に温めた。

ソジウムメトキサイドの溶液（２５０ｍｌのメタノール中３０ｇ、９５％、０． ５５モル）を加え、その溶液を６１°Ｃに加温した。反応は約１時間で完了しく ｔｉｃ）、その時点で生成物は沈澱し始めた。混合物を３０℃に冷却し、次に一 晩冷蔵した。その生成物を集め、氷−冷メタノール（８００ｍｌ）で洗浄し、風 乾して、標記化合物（Ｖ）８２３ｇ（６８％）、融点６０〜６２℃を得た。

材料 中間体（ｍ ソジウムメトキサイド（９５％） メタノール、無水（Ｒ） エーテル、無水（Ｒ） ９−（２，３，５−トリー〇−ベンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）−２− フルオロアデニン（Ｖ［）テトラヒドロフラン（１，１２５１）中の、保護した ヌクレオシドＶ（３００ｇ、０．５４３％ル）の機械的に攪拌した溶液を一３２ ℃に冷却した（ドライアイス−アセトン）。フルオロホウ酸（４８％、１５０ｍ １）を３５〜４０分かけて加えた。温度を添加の間−２３°Ｃ〜２ビＣに上げ、 その温度を冷却により維持した。水（７５ｍｌ）中の亜硝酸ナトリウム（６２ｇ 、０．８９９モル）の溶液を１０分かけて、次に残りのフルオロホウ酸（ｌｌ） を５５分かけて、温度を−２３°Ｃルー２ピＣの間に維持しながら、添加した。

混合物を一２３°Ｃ〜−２１’Ｃで、２．５時間攪拌し、次に攪拌しながら、酢 酸エチル（１，５１りと氷（１，５ｋｇ）の混合物中に注いだ。水中に水酸化ナ トリウム（５１０ｎ＋１）の５０％溶液を加えて、ｐＨを８に調節した。酢酸エ チル相を分離し、水相を酢酸エチルで抽出した（１ｉ７，６００ｍ１）。酢酸エ チル相および抽出液をいっしょにし、脱イオン水（２Ｘ５００　ｍｌ）で洗浄し く２ｘ５００ｍｌ）、濃縮した（アスピレータ−、スチームバス）。残渣をベン ゼンで共沸させ（２Ｘ７５０ｍｌ）、半固体状の塊をエタノール（３６０ｍｌ） に溶解した。ベンゼン（７０ｍｌ）を溶液に加え、攪拌し、固体が沈澱しはじめ た時、４３°Ｃに冷却した。この時点で、アンモニアで飽和した冷エタノール（ ３６０ｍｌ）を加え、混合物を２４℃まで急速に冷却した（アイスバス）。その 混合物を次に冷蔵庫に一晩貯蔵した。その沈澱を集め、エタノール（２５０ｍｌ ）および石油エーテル（４００ｎ＋１）で洗浄し、風乾して、有機性の副生物お よび残りの塩を含む、１２９ｇの粗生成物、融点１５５〜７℃を得た。

この方法で、３．１０ｋｇの出発物質（Ｖ）を処理して、１．２５ｋｇ（４０， １％）の粗生成物（ＶＩ）を得た。このものを下に記載したように（方法Ａ）再 結晶して、１゜００ｋｇ（３２，１％）の精製した生成物、融点１５６゜５〜１ ５８°Ｃと、２番目の収穫物（ｃｒｏｐ）８０ｇ（２，６％）を得た。また同じ 方法で、２．４０ｋｇの前駆体Ｖを処理し、１．０２ｋｇ（４２，３％）（７） 粗ＶＩヲ得た。２番目の収穫物、１００ｇを母液から単離した。粗（Ｖｌ）１． ０２ｋｇを、上記の８０ｇｃ７）２番目ノ収穫物トイっしょにし、再結晶しく方 法Ｂ）、９１０ｇの精製した生成物と、９７ｇの２番目の収穫物を得た。かくし て全体で５．５０ｋｇの前駆体（Ｖ）を処理して、次の工程で用いる１、９１ｋ ｇ（３４，５％）の純粋な物質と、２０７ｇ（３，７％）の２番目の収穫物を得 た。

−ルーベンゼンに（ｌｏｍｌ／ｇ；　還流まで予熱）、２つのバッチ、９００ｇ および３５０ｇ、で溶解した。フリット（Ｎｏｒ　ｉ　ｔ）Ａを、スチームでジ ャケットした漏斗を用いて、セライトパッドを通して濾過した熱溶液に、加えた 。濾過したケーキを、９０％エタノール−ベンゼン（ＩＩりで洗浄した。いっし ょにした濾液を室温に一晩冷却した。固体を集め、エタノール（ｌｌ７）、およ び石油エーテ／Ｉ、（１，５４７）で洗浄し、６ｏ″ＣＳＯ。

３　ｍｍＨｇで２時間乾燥し、１．００ｋｇの精製した生成物、融点１５６〜１ ５８°Ｃを得た。母液は１．８ｆに濃縮した（アスピレータ−、スチームバス） 。沈澱した固体を、混合物を還流するまで加熱することにより、溶解した。

その溶液を室温まで冷却した。生じた混合物を濾過し、８０ｇの第２の収穫物を 得た。

方法Ｂ：　方法は、再結晶溶媒が９ｇ％エタノールーベンゼン（１０ｍｌ／ｇ） ではなく、９２％エタノール−トルエン（１０ｍｌ／ｇ）である点を除いて、上 と同じで２−アミノ−９−（２，３，５−トリー〇−ベンジルーβ−Ｄ−アラビ ノフラノシル）アデニン（Ｖ）ＨＦ フルオロポリツクアシッド（４８％） 亜硝酸ナトリウム 酢酸エチル 水酸化ナトリウム、５０％水溶液 エタノール、３Ａ、特別に変性 アンモニア、気体 石油エーテル（３５〜６０°Ｃ） フリットＡ、酸で洗浄 セライト、分析グレード 濃塩酸（０，５ｍｌ／ｇヌクレオシド、５０＋ｎｌ、　０．　６０８モル）を、 メトキシエタノール（５００ｍｌ）中の中間体ＶＩ（１００ｇ、０．１８０モル ）の懸濁液に加え、均一な黄色溶液とし、その溶液に塩化パラジウム（３゜０ｇ ）およびフリットＡ（１０ｇ）を加えた。その混合物に水素をフラッシュしく２ Ｘ２０ｐｓｉｇ）、水素圧を５０　ｐｓｉｇに上げた。１０分後、２　ｐｓｉｇ に下った圧力を５０ｐｓｉｇに戻した。その方法を、もはや水素吸収がなくなる までもう２回繰り返した（全時間、５０分）。出発物質はｔｉｃでは存在しなか った。触媒をセライトベッドを通して除去し、フィルターケーキをメトキシエタ ノールで洗浄した（２Ｘ５０ｍｌ）。濾液を冷却しくアイスバス）、濃水酸化ア ンモニウム（〜５５１１１１）をｐＨ〜８まで加えた（明るいピンク色）。沈澱 （ＮＨ，ＣＩ）を濾過により除去し、濾液を絶乾近くまで濃縮した。生じた固体 を水（１５０ｍｌ）でスラリーにし、濾過し、エタノール（５０ｍｌ）で洗浄し 、５５ｇの粗生成物を得た（風乾）。粗生成物を、熱エタノール−水（１，６ｆ 、Ｉ　：１　ｖ／ｖ　）から再結晶し、風乾後、４４ｇ（−水ｉ物として８１％ ）の標記ヌクレオシドＶＩ［、融点２６４〜２６６°Ｃ（分解）を得た。

この方法で、全量３．１５ｋｇの保護したヌクレオシドを処理し、１．５３ｋｇ の粗製の風乾した生成物を得た。

粗生成物は熱エタノール−水（３０ｍｌ／ｇ、４６Ｉ！、１　：　１　ｖ／ｖ） から再結晶し、９ｏ″ＣＳＯ，３ｍｍＨｇで２４時間乾燥し、純粋な無水の標記 化合物（ＶＩ　Ｉ）、１．　２９５ｋｇ（８０％、平均収率）、融点２６４〜２ ６６°Ｃ（分解）を得た。λ−ａｘ　（Ｈｚ　Ｏ）　２６１ｎｍ　（ｅ＝１５． 元素分析値、Ｃ＋。Ｈ＋２Ｆ　ＮＳ　０４　（２８５、２４）に対する計算値： 　Ｃ，４２，１１；　Ｈ，４，２４゜Ｆ、６．６６；　Ｎ、２４．５５．　測定 値：ｃ、４２．００；　Ｈ，４，４０；　Ｆ、６．６０；　Ｎ、２２−メトキシ エタノール 塩化パラジウム 濃塩酸（３７，３％） ノリットＡ 濃水酸化アンモニウム エタノール、３Ａ、特別に変性 セルロース粉末、ＣＦ−１１ ９−β−Ｄ−アラビノフラノシルー２−フルオロアデニン−５′−ホスフェート （ＶＩ［［）ＮＳＣ３１２８８７最後の７８５ｇの中間体（Ｖ［Ｄを処理するの に用いる典型的な１００ｇの実験を記述する。オキシ塩化リン（８０，０ｇ、４ ９ｍＬ５２３ミリモル）を、冷たい（０℃、アイスバス）トリメチルホスフェー ト（Ｉｆ）に加え、その溶液を０“Ｃに１時間保った。９−β−Ｄ−アラビノフ ラノシルー２−フルオロアデニン（Ｖｌｌ）（１００，０ｇ、３５０．６ミリモ ル）を攪拌しながら一度に加えた。反応混合物は２時間５０分後均−になった（ 明るい黄色の溶液）。反応混合物を冷蔵庫（〜１”Ｃ）に１５時時間−た。出発 物質はｔＩ！ｃでは存在しなかった。水（７０ｍｌ）を加え、その溶液を、３時 間０°Ｃで攪拌した。その混合物を次に、冷たい（〜０℃、アイスバス）メチレ ンクロライド（８１）中に攪拌しながら注ぎ、攪拌しながら、透明なメチレンク ロライドの泪が得られるまでアイスバス中に保持した（１時間）。メチレンクロ ライドはデカンテーションにより除き、残りの黄色のゴム状（ｇｕｍｍｙ）の塊 りを、温い（〜５０℃）水（７００ｍｌ）に溶解した。その溶液に結晶種を入れ 、室温で一晩放置した。生じた結晶生成物を濾過により集め、水（５０ｍｌ）お よびエタノール（２Ｘ５０ｍｌ）で洗浄した。その生成物を、室温、０．　３　 ｍｍＨｇで４時間乾燥し、７８．５ｇの最初の収穫物（ｃｒｏｐ　ｍａｔｅｒｉ ａｌ）（ｔｉｃで痕跡の不純物）、融点２００〜２０５°Ｃ（分解）を得た（〜 １８５°Ｃで前もって褐色化）。

粗製のゴム状生成物を単離した後に残ったメチレンクロライド上澄液を水で抽出 した（３ｘ５００ｍｌ）。水抽出物をいっしょにし、ダウエックス−５０（酸型 ）樹脂を入れたカラム（５６０Ｘ８０ｍｍ）にしみ渡らせた。そのカラムを水で 溶出し、生成物を含むフラクション（ＵＶモニターおよびｔｉｅによる）を集め た。その水溶液を、次に少体積（約２５０ｍ１）まで濃縮しくアスピレータ−） 、常温まで一晩冷やした。生じた結晶性固体を濾過により除き、少量の水、引き 続きエタノールで洗浄し、上のように乾燥し、最初の収穫物と同じ純度（ｔｉｃ による）を有する１１．０ｇの生成物を得た。同じ方法で、最初の収穫物からの 母液を上に記述したように処理し、他の収穫物と同じ純度（ｔｌｃによる）の、 ｔｏ、５ｇの生成物を得た。いっしょにした収量は１００ｇである（−水和物と して計算した７０％）。

この方法で、７８５ｇのよく乾燥した（２４時間、９０°Ｃ１０，３ｍｍＨｇ　 ）　、本質的に無水の出発ヌクレオシド（ＶＩ［）を処理して、７９９ｇ（−水 和物として計算して７６％）の良好な品質の標記化合物（ＶＩＩＤを得た。しか し、最初のシリーズの実験においては、−水和物として５１０ｇのヌクレオシド を処理してわずか３５１ｇ（５４％）を得たのみである。これは１２９５ｇの前 駆体（ｖＩ【）カラノ、全体（７）収量１１５０　ｇ　（６８％）　＋：Ｊｌ応 する（注１を参照のこと）。

最終の再結晶（注２を参照） 上記物質１１３４ｇを、５バツチで、前もって加熱した脱イオン水に溶解した（ ８２℃、１５ｍ１／ｇ）。その化合物は３〜５分のうちに７３〜７５℃で溶解し た。５つのバッチからの溶液を濾紙を通して濾過し、濾液を２２βフラスコに移 した。その溶液を攪葎し、生成物分解を最小にするため４５〜５０℃に急速に冷 却した。この時点で、生成物は結晶し始め、混合物を、沈澱が本質的に完了する まで、約一時間かけてゆっくり冷やした（注３を参照）。その溶液は、次に２時 間かけて２２℃に冷やしくウォターパス）、次に一時間冷却した（アイスバス） 。生じた沈澱（ミルク状スラリー）をフィルタークロスを通す濾過により、４バ ツチで集めた。完了に６時間要した。フィルターケーキを冷たい脱イオン水（１ ゜２５１）およびエタノール（１，８４７）で逐次洗浄した。

その生成物を室温、０．　３　ｍｍＨｇで、２４時間乾燥し、この時点で０．８ 水和物として９１６ｇの重量があった。

その生成物をさらに、５５〜６０℃、０．　３　ｍｍＨｇで７２時間乾燥し、８ ８１ｇ（８２％回収）の無水の物質を得た。前駆体ヌクレオシドＶｌｌからの平 均収率は５６％であった。母液を再処理し、更なる生成物を単離した。

注ｌ二　予備実験でヌクレオシド（ＶＩ　Ｉ）を風乾後、真空下、室温で数日間 乾燥して、−水和物を得た。その−水和物は反応が進行するに従い、反応媒体中 に容易に溶解しく〜２０分）、過剰のオキシ塩化リンが水和水をこわすのに適当 なようであり、収率は６５〜６８％であった。

現在の研究では、１０ｇでの探索実験および、次の３回の１００ｇでの実験のう ち２回は意にかなった収率を与えた。しかし最後の２回の１００ｇでの実験（同 時に行った）では、収率は平均して４１％であり、試みの試験を問題をなくすた めに、再び行なった。

先ずそのヌクレオシドを２４時間、０．　３３　ｍｍＨｇ、９０℃で乾燥し、本 質的に無水の物質を得た。トリメチルホスフェート反応溶媒を蒸溜し、初溜およ び後溜部分を廃てた。この変化により、均一な反応系を得るための時間は２時間 ５０分に伸びた。しかし、室温、０．　３ｍｍＨｇで４時間乾燥した後の、−水 和物としての生成物（Ｖ［ｍに基づく収率は再現性があり、かつ著しく改善され た（７５〜７９％、平均７６％）。

注２：　最後の工程における広範な取扱いを考慮して、最後の再結晶は偶然に入 った水溶性不純物を除去するために必要である。しかしながら、その酸性の生成 物は熱水中で不安定である。再結晶中に幾分かの分解が起こり、純度の真の改良 がなされない。最終工程における注意深い取扱いによって、最後の再結晶を避け ることができる。

注３：　沈澱が完結する以前に温度を３２〜３３℃に下げると、その生成物はゲ ルとして沈澱するであろう。

トリメチルホスフェート オキシ塩化リン（ｄ＝１．６４５） メチレンクロライド モレキュラーシーブ、４Ａ ダウエックス　５０Ｗ−Ｘ２．５０〜１００メツシユアルコール、３Ａ、特別に 変性 物理的および分析データ ２−フルオロ−アラ−アデノシン　５′−ホスフェート、Ｃ３２，８９３２，７ ７ Ｈ３，５９３，７４ Ｎ　１９．１７　１９．０４ Ｆ　５．２０　４．９６ Ｐ　８．４８　８．４０ 紫外吸収データ： （ｐＨ７緩衝液）λｍ−ｘ　（Ｈｔ　０）　２６２ｎｍ　ｅ　１４．９００（０ ，１Ｎ　ＭＣＩ）λ−ａｘ　（Ｈ２Ｏ）　２６２ｎｍ　Ｅ　１３．１００（０， Ｉ　Ｎ　Ｎａ０Ｈ）λ、、、（Ｈｔ　０）　２６１ｎｍ　ε１５，６００ｉ　ｓ 　ｏ　−Ｐ　ｒ　０Ｈ−Ｈｘ　０−ＮＨ４０Ｈ（７：２：１）、Ｒｆ＝０．３０ 、痕跡の不純物 ｎ　Ｐ　ｒ　ＯＨ−Ｍ　ｅ　ＯＨ−Ｈｔ　０　ＮＨａ　ＯＨ（４：３：２：ｌ） 、Ｒｆ＝０．４１、痕跡の不純物Ｍ　ｅ　ＯＨ−Ｈｔ　〇−ＮＨ，ＯＨ（７５： ２５：１）、Ｒｆ＝０．７０、痕跡の不純物 水：　９　ｍｇ／ｍｌ　（８，７および９．３ｍｇ／ｍｌ）、２ｄａｔ’　ｎｓ 、ｐＨ〜２ エタノール：　不溶 ナトリウム塩： 水：　＞　１００ｍｇ／ｍｌ　（上限は測定せず）上記の記述は、本発明の説明 のためのみであり、本発明は以下の請求の範囲によってのみ限定されるものであ ることを意図する。

国際調査報告

Claims (19)

【特許請求の範囲】
1. １．（ａ）２，６−ジ（アルコキシアセトアミド）プリン（ＩＩ）を２，３，５ −トリ−Ｏ−ベンジル−１−クロローａ−Ｄ−アラビノフラノース（ＩＩＩ）（ アルキ（ａｌｋ）は、直鎖または分枝の、１〜６個の炭素原子を有する低級アル キルである）と、非極性水不溶性有機溶媒中で、塩酸受容体の存在下に反応させ て、２，６−ジ（アルコキシアセトアミド）−９−（２，３，５−トリ−Ｏ−ベ ンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン（ＩＶ）を最初の反応混合物中で 製造し、 （ｂ）非極性有機溶媒を除去することにより、最初の反応混合物からＩＶを分離 し、 （ｃ）中間体（ＩＶ）から２，６−ジアルコキシアセト基を除去する、 ことよりなる、化合物２，６−ジアミノ−９−（２，３，５−トリ−Ｏ−ベンジ ルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン（Ｖ）の製造方法。
2. ２．（ａ）２，６−ジ（アルコキシアセトアミド）プリン（ＩＩ）を、２，３， ５−トリ−Ｏ−ベンジル−１−クロローａ−Ｄ−アラビノフラノース（ＩＩＩ） （アルキ（ａＩｋ）は直鎖または分枝の、１〜６個の炭素原子を有する低級アル キル基）と、非極性水不溶性有機溶媒中で，塩酸受容体存在下に反応させて、２ ，６−ジ（アルコキシアセトアミド）−９−（２，３，５−トリ−Ｏ−べンジル ーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン（ＩＶ）を最初の反応混合物中で製造し 、 （ｂ）非極性有機溶媒を除去することにより、最初の反応混合物から（ＩＶ）を 分離し、 （ｃ）（ＩＶ）をソジウムメトキサイドと、エタノールおよびメタノールからな る群より選択された低級アルカノール中で反応させ、 （ｄ）第二の反応混合物から、沈澱により、（Ｖ）を分離する： ことよりなる、２，６−ジアミノ−９−（２，３，５−トリ−Ｏ−ベンジルーβ −Ｄ−アラビノフラノシル）プリン（Ｖ）の製造方法。
3. ３．有機溶媒がジクロロエタンであり、低級アルカリノールがメタノールである 、請求項２に記載の方法。
4. ４．酸受容体が有機溶媒中に供給されたジイソプロピルエチルアミンである、請 求項２に記載の方法。
5. ５．酸受容体が有機溶媒中に供給されたモレキュラーシーブである、請求項３に 記載の方法。
6. ６．有機溶媒がジクロロエタンであり、酸受容体がジイソプロピルエチルアミン であり、反応を約８０〜８５℃の温度で行う、請求項２に記載の方法。
7. ７．有機溶媒がジクロロエタンであり、最初の反応混合物を少くとも約１８時間 還流させる、請求項２に記載の方法。
8. ８．還流した後の最初の反応混合物を、水で抽出し、水を最初の反応混合物から 分離し、次に（ＩＶ）を有機溶媒から分離する、請求項７に記載の方法。
9. ９．ｎ−プロパノールを、水を反応混合物から分離した後に、最初の反応混合物 に加え、残った水およびジクロロエタンをその有機溶媒中で共沸させ、次にｎ− プロパノールを反応混合物から除去する、請求項８に記載の方法。
10. １０．第二の反応混合物中において、低級アルカノールがメタノールであり、第 二の反応混合物を４５〜５５℃の間の温度に少くとも約３時間保持し、そして常 温で少くとも約１８時間保持する。請求項２に記載の方法。
11. １１．有機溶媒がジクロロエタンであり、最初の反応混合物を少くとも約１８時 間還流し、第二の反応混合物中の低級アルカノールがメタノールであり、第二の 反応混合物を、約４５〜５５℃の間の温度に、少くとも約３時間維持する、請求 項２に記載の方法。
12. １２．還流した後の最初の反応混合物を、水で抽出する請求項１１に記載の方法 。
13. １３．ｎ−プロパノールを、水を最初の反応混合物から分離した後に、最初の反 応混合物に加え、残った水およびジクロロエタンをその有機溶媒中で共沸させ、 次にｎ−プロパノールを反応混合物から除去する、請求項１２に記載の方法。
14. １４．第二の反応混合物の温度が約４５〜５５℃である、請求項１１に記載の方 法。
15. １５．アルキ（ａｌｋ）がメチル基である、請求項２に記載の方法。
16. １６．化合物、２，６−ジ（アルコキシアセトアミド）−９−（２，３，５−ト リ−Ｏ−ベンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル）プリン。
17. １７．アルキ（ａｌｋ）がメチル基である、請求項１６に記載の化合物。
18. １８．９−（２，３，５−トリ−Ｏ−ベンジルーβ−Ｄ−アラビノフラノシル） −２−フルオロアデニン（ＶＩ）を作る反応について、（Ｖ）の２−アミノ基を 、有機溶媒中でのフルオロホウ酸との反応により、２−フルオロ基で置換し、（ ＶＩ）を、反応混合物中で、有機溶媒中の水素および塩化パラジウムにより、加 圧下、シールされた容器中で処理し、９−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２−フ ルオロアデニン（ＶＩＩ）を製造し、（ＶＩＩ）を反応混合物物から分離する、 請求項１に記載の方法。
19. １９．有機溶媒がメトキシエタノールである、請求項１８に記載の方法。