JPH0455425B2 - - Google Patents

Description

技術分野 本発明は、生物学的に活性なビタミンＤ化合物
に関する。特に、本発明は、側鎖に22，23−シス
二重結合を有する新規な1α，25−ジヒドロキシ
ル化（1α，25−dihydroxylated）ビタミンＤ化
合物及びその製造方法に関する。

背景 動物及び人間におけるカルシウムとホスフエー
トのホメオスタシスはビタミンＤ代謝産物
（metabolite）によつて規制され、1α，25−ジヒ
ドロキシビタミンD₃は一般に、正常なカルシウ
ムとホスフエートのバランスの、最も活性があり
かつ最も重要なビタミンＤ誘導調整剤であると考
えられる。この天然の代謝産物及びこれと構造的
に関係のある化合物は従つて、骨の疾患及び関連
するカルシウム代謝障害の予防と治療に有効な薬
剤として薬学的に大きな関心を集めている。天然
のD₃代謝産物以外に、最近、薬効がありかつ治
療剤としてかなり有望な数多くの化合物がつくら
れており、これらの中には、1α−ヒドロキシビ
タミンD₃，1α−ヒドロキシビタミンD₂、1α，25
−ジヒドロキシビタミンD₂及びある種のふつ素
化類似体がある（米国特許第3741996号、第
3907843号、第3880894号、第4226788号、第
4358406号）。公知の活性類似体のほとんどは、ス
テロール側鎖がビタミンD₃に生ずるので、ステ
ロール側鎖（即ち、飽和側鎖）のタイプに特徴が
ある。22，23−不飽和側鎖を有する公知の類似体
は、ビタミンD₂シリーズの化合物（即ち、Ｃ−
24−メチル置換基を有する22，23−トランス不飽
和体）によつて代表され、上記した化合物以外
に、25−ヒドロキシビタミンD₂（米国特許第
3585221号）、24−及び24，25−ジヒドロキシ誘導
体〔ジヨーンズ（Jones）等著、アーカイブス・
オブ・バイオケミストリー・アンド・バイオフイ
ジツクス（Arch.Biochem.Biophys.）第202巻、
第450頁（1980年）〕並びに24−メチル置換基を欠
く３つの化合物〔米国特許第3786062号；ボゴス
ロフスキー（Bogoslovskii）等著、ジヤーナ
ル・オブ・ゼネラル・ケミストリー・ユーエスエ
スアール（J.Gen.Chem.USSR）第48巻(4)，828
頁（1978年）；ケミカル・アブストラクト
（Chem.Abstr.）第89j巻、163848j，209016s）が
ある。

発明の開示 なる構造によつて表わすことができる新規なビ
タミンＤ類似体が見出された。

この新規な化合物は、シス（即ちＺ）幾何異性
を有する側鎖の22，23二重結合に特徴がある。
（例えば、1α、25−ジヒドロキシビタミンD₃にお
けるような）通常の飽和側鎖又は（例えば、1α，
25−ジヒドロキシビタミンD₂におけるような）
22，23−トランス（22E）不飽和側鎖を有する化
合物に特有な側鎖幾何異性とは著しく異なる側鎖
幾何異性をもたらすこの22Z二重結合の存在によ
り、このシス不飽和生成物は低い生物活性を呈す
るものと考えられていた。驚いたことに、この物
質は、変わつた側鎖構造にも拘らず、高い活性を
示し、試験動物の血清のカルシウムレベルを高め
る能力に関し、1α，25−ジヒドロキシビタミン
Ｄと同様な活性を呈するものである。

化合物の調製 本発明の新規な生成物である、上記した化合物
は、ビタミンＤの欠乏したねずみから得た肝臓
均質質（Iiver homogenate）を使用し、炭素25
で生体外酵素ヒドロキシル化により、 なる構造を有する22Z−デヒドロビタミン
（dehydro−vitamin）Ｄ前駆物質からつくつた。

手順は次の通りであつた。雄の子供のねずみ
に、スダ（Suda）等の記載〔ジヤーナル・オ
ブ・ニユートリシヨン（J.Nutr.）、第100巻，第
1049頁（1970年）〕に従つて、２週間、低カルシ
ウムでビタミンＤの不足した規定食を与えた。ね
ずみを斬首により殺し、肝臓を取出した。20％
（重量／体積）均等質を氷で冷却した0.25Mスク
ロース中でつくつた。組織，0.125Mのスクロー
ス、50mMのホスフエート緩衝剤（PEPH7.4）、
22.4mMのグルコース−６−ホスフエート、
20mMのATP，160mMのニコチンアミド、
25mMのスクシネート、0.4mMのNADP、5mM
のMgCl₂，0.1MのKCl及び0.5ユニツトのグルコ
ース−６−ホスフエト−デヒドロジエナーゼ
（dehydrogenase）の1gに相当する肝臓均質物の
アリコートを含む、125mlの三角フラスコに入れ
た10mlの培養基において培養を行なつた。反応
は、95％エタノール100μlに上記した化合物で
ある基質400μgを溶解したものを添加することに
より、開始させた。培養基の混合物を、１分間に
80回の振動を与える振盪を行ないながら、37℃で
３時間培養させた。メタノール20mlとジクロロメ
タン10mlを添加することにより反応を停止させ
た。ジクロロメタン10mlを更に添加してから、有
機相を集めるとともに、水性相をジクロルメタン
10mlで再抽出した。全３回の抽出により得た有機
相を一緒にし、回転蒸発器で蒸発させた。所望の
生成物を含む残渣をCHCl₃：ヘキサン（65：35）
混合物１mlに溶解し、これを、同じ溶媒を含み、
この溶媒で平衡溶出処理されるセフアデツクス・
エルエイチ−20（Sephadex LH−20）カラム
（0.7cm×14cm）にかけた。最初の10mlを棄て、次
の40mlを集めて蒸発させた。次に、残渣を２−プ
ロパノールの８％ヘキサン液に溶解し、約70.3
Kg／cm²（1000psi）の圧力下でで２ml／分の流速
で作動するゾルバツクスーシル（Zorbax−SIL）
カラム〔4.6mm×25cm、デラウエア州、ウイルミ
ントン（Wilmington）のデユポン（Dupont）社
製〕を使用した高性能液体クロマトグラフイ〔モ
デル・エイエルシー／ジーピーシー204エイチピ
ーエルシー（Model LC／GP.C 204 HPLC）、
マサチユーセツツ州、メドフオード（Medford）
のウオーターズ・アソシエーツ（Waters
Associates）社製〕にかけた。44mlの所望の25−
ヒドロキシル化生成物を溶出した。この生成物
を、約84Kg／cm²（1200psi）の下で２ml／分の流
速で作動する逆転相カラム〔西ドイツ国、ダルム
スタツト（Darmstadt）のエー・メルク（Ｅ・
Merck）社製のリフロゾルブ・エルペ−18
（Richro−sorbRP−18）、4.6cm×25cm〕を使用し
た高性能液体クロマトグラフイによつて更に精製
した。カラムを22％のH₂Ｏを含むエタノールで
溶出し、化合物50mlを溶出した。生成物を、ゾル
バツクス−シルカラムを使用し、上記した条件で
HPLCによつて更に精製した。得られた生成物
は、次に物理的特性測定のための処理にかけた。

生成物の特性測定 95％エタノール中の生成物の紫外線吸収は、
λ_nax＝265nm及びλ_nio228nmであつたが、これは
５，６−シス−トリエン発色団の存在を示すもの
である。

この物質の質量スペクトルは、25−ヒドロキシ
ル化生成物に必要とされるようなｍ／e414の分子
状イオンを含む。１及び２分子のH₂Ｏを除去す
ると、ｍ／ｅが396と378のフラグメントイオンが
得られる。ステロイド側鎖全体を失なう（C₁₇／
C₂₀結合の開裂）と、ｍ／e287のフラグメントを
生じ、これから１及び２分子のH₂Ｏを取除くと、
ｍ／ｅが269と251のピークが得られる。このスペ
クトルは、ｍ／e152と134（152−H₂Ｏ）で顕著な
ピークを示し、これは環Ａフラグメントを表わ
し、1α，3β−ジヒドロキシビタミンＤ化合物の
特徴を示すものである。更に、スペクトルは
C₂₄／C₂₅の結合の開裂により生じるｍ／e59の著
しく顕著なフラグメントピークを示した。このイ
オンの存在により、生成物中の25−ヒドロキシ基
の存在が確認された。かくして、これらのデータ
により、得られた生成物の構造は、上記した構造
によつて表わされるような、1α，25−ヒドロ
キシル化化合物であると認められた。

生物活性 新規な同族体の生物活性は、ねずみの生体内分
析によつて確められた。雄の子供のねずみに、
（上記した）スダ（Suda）等の低カルシウムでビ
タミンＤが欠乏した規定食を３週間与えた。これ
らを次に、各５匹づつのねずみのグループに分け
た。対照グループのねずみは頸静脈内に95％エタ
ノール0.05mlを受け、一方、その他のグループの
ねずみには、95％エタノール0.05mlに溶解した
325pモルの化合物１又は1α、25−ジヒドロキシ
ビタミンD₃を与えた。18時間後に、斬首によつ
てねずみを殺し、血液を採取した。血液の遠心分
離により得た血清を0.1％塩化ランタン溶液で希
釈（１：20）し、血清カルシウム濃度を原子吸光
分光分析装置で測定した。結果を次の表に示す。

【表】 上記結果から、本発明の化合物は薬効が著しく
かつ1α，25−ジヒドロキシビタミンD₃とほぼ同
等の生物活性を呈することがわかる。

このような高い薬効により、本発明の化合物
は、人間における種々のタイプのくる病、上皮小
体機能減退症、骨異栄養症、骨軟化症又は骨孔症
のような病気の治療又は予防における治療予防剤
としての用途、あるいは動物における関連したカ
ルシウム欠乏症（例えば、授乳熱、脚衰弱、卵殻
薄化）の処置に向けての用途が見出される。ま
た、この化合物は、人間の白血病のような、ある
種のがんの処置に使用することもできる。

治療の目的には、この化合物は、通常の投与経
路によつてかつ選択された投与の方法に適した形
態で投与することができる。この化合物は、許容
することができかつ無害な医薬担体と配合して、
丸薬、錠剤、ゼラチンカプセルもしくは坐薬の形
態にするか、あるいは無害な溶媒又はオイルの溶
液、エマルジヨン、分散液又は懸濁液として提供
することができ、しかもかかる配合物は、特定の
用途に対して適切な、治療活性がありかつ有益な
成分を含むこともできる。人間に使用する場合に
は、この化合物は、１日当り0.25乃至10μgの量投
与すると有利であり、特定の投与量は、当業者が
よく承知しているように、処置しようとする病
気、病歴、患者の状態及び反応に従つて調整され
る。

本発明の新規な生成物の製造に必要な、上記化
合物である22Z−デヒドロ前駆物質自体は、下
記の反応工程に示す方法によつて得られる。反応
工程において、アラビア数字（例えば、１，２，
３など）によつて表わされる化合物は、反応工程
において番号が付されている構造のものを云う。
上記した25−ヒドロキシル化反応の所望の物質
（化合物）は、反応工程及び以下の記載にお
いてアラビア数字１１で示されている。

（22Z）−3β−（メトキシメトキシ）−5α，8α−
（４−フエニル−１，２−ウラゾロ）コレスター
６，22−ジエン(2)．乾燥したテトラヒドロフラン
（73ml）に入れたイソペンチル・ホスホニウム・
プラミド〔（CH₃）₂CHCH₂CH₂PPh₃Br〕（1.67g，
4.04ミリモル）を、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサ
ンの1.7M溶液、2.42ml，4.11ミリモルを用い、３
乃至５℃で攪拌しながら処理した。室温で１時間
攪拌した後、オレンジレツド溶液を３℃まで冷却
し、乾燥したTHF（24ml）に入れたアルデヒド(1)
（1.84g，3.36ミリモル）を加えた。無色の反応混
合物を室温で１晩攪拌してから、水中に注入し、
ベンゼンで抽出した。有機抽出物を５％HCl，飽
和炭酸水素ナトリウム及び水で洗浄し、乾燥させ
（Na₂SO₄）、真空中で濃縮してオイル状にし、こ
れをシリカゲルのカラムで精製した。ベンゼン−
エーテル（94：６）混合物で溶出したところ、付
加物(2)（1.38g，68％）が泡として得られた。核
磁気共鳴即ちNMRは0.83（3H，ｓ，18−H₃），
0.89及び0.91（6H，各ｄ，Ｊ＝6.8Hz，26−H₃及び
27−H₃），0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.8H_z，21−H₃），
0.98（3H，ｓ，19−H₃），3.30（1H，dd，J₁＝
4.4H_z，J₂＝14H_z，９−Ｈ），3.38（3H，ｓ，
OCH₃），4.33（1H，ｍ，３−Ｈ），4.70及び4.81
（2H，ABq，Ｊ＝6.8Hz，OCH₂Ｏ），5.21（2H，
brm，22−Ｈ及び23−Ｈ），6.23及び6.39（2H，
ABq，Ｊ＝8.5Hz，６−Ｈ及び７−Ｈ）、7.41
（5H，brm，Ar−Ｈ），IRは1756，1703，1601，
1397，1046cm^-1、質量スペクトルはｍ／z601
（M⁺，１％）、426(4)，364(61)，１349(16)，253(1
８），251(18)，119（PhNCO，100）であつた。

（22Z）−5α，8α−（４−フエニル−１，２−ウ
ラゾロ）コレスター６，22−ジエン−3β−オー
ル(3)．メタノール（20ml）−THF（12ml）混合物
に溶かした付加物(2)（601mg１ミリモル）とｐ−
トルエンスルホン酸（523mg，2.75ミリモル）の
溶液を室温で２日間攪拌した。反応混合物を飽和
炭酸水素ナトリウムに注ぎ、ベンゼンで数回抽出
した。抽出物を水で洗浄し、乾燥し（Na₂SO₄）、
減圧下で蒸発させた。粗生成物をカラムクロマト
グラフイ（溶離液、ベンゼン：エーテル70：30）
で精製したところ、ヒドロキシ付加物(3)（550mg，
99％）が泡として得られた。NMRは0.83（3H，
ｓ，18−H₃）、0.89及び0.91（6H，各ｄ，Ｊ＝6.8
Hz、26−H₃及び27−H₃），0.95（3H，ｓ，19−
H₃），0.98（3H，ｄ，Ｊ＝6.8Hz，21−H₃），3.16
（1H，dd，J₁＝4.4Hz，J₂＝14Hz，９−Ｈ），4.44
（1H，ｍ，３−Ｈ），5.22（2H，brm，22−Ｈ及び
23−Ｈ），6.22及び6.39（2H，ABq，Ｊ＝8.5Hz，
６−Ｈ及び７−Ｈ），7.40（5H，brm、Ar−Ｈ）；
IRは3447，1754，1700，1600，1397cm^-1；質量
スペクトルはｍ／ｚ（557（M⁺，１％），382(35)，
349(33)，253(20)，251(33)，119(110) ，55(82)で
あつた。

（22Z）−コレスター５，７，22−トリエン−
3β−オール(4)．付加物(3)（530mg，0.95ミリモル）
をテトラヒドロフラン（60ml）中で、水素化リチ
ウムアルミニウム（1g）を用いて18時間還流し
て還元することにより、ジエン(4)に転化させた。
通常の処理の後、生成物をシリカ（溶離液，ベン
ゼン−エ−テル94：６）上でクロマトグラフイに
かけて精製し、エタノールから晶出して純粋なジ
エン(4)（290mg、76％）を得た。融点は148乃至
151℃，〔α〕^24/D＝−132°（Ｃ＝0.9，CHCl₃），
NMRは0.66（3H，ｓ，18−H₃），0.90及び0.91
（6H，各ｄ，Ｊ＝6.8Hz，26−H₃及び27−H₃），
0.96（3H，ｓ，19−H₃），0.98（3H，ｄ，Ｊ＝6.9
Hz，21−H₃），3.64（1H，ｍ，３−Ｈ），5.20
（2H、brm，22−Ｈ及び23−Ｈ），5.39及び5.57
（2H，ABq，Ｊ＝６Hz，７−Ｈ及び６−Ｈ），
UVはλ_nax281nm，IRは3346，1463，1375，
1364，1067，1040，831cm^-1、質量スペクトルは
ｍ／z382（M⁺，100），349(65)，323(32)，271(15)，
253(30)であつた。

（5Z，7E，22Z）−９，10−セココレスター５，
７，10(19)，22−テトラエン−3β−オール(5)．エ
ーテル（120ml）とベンゼン（30ml）に溶解した
５，７ジエン(4)（150mg，0.39ミリモル）（アルゴ
ンで40分間ガス抜きを施こした）に、紫外線
（UV）ランプとビコール（Vycor）フイルタと
を用いて０℃で13分間、照射を行なつた。得られ
た混合物のHPLC（２−プロパノールの１％ヘキ
サン液）を行なつたところ、プレビタミン（56.9
mg，38％）が無色のオイルとして得られた。
NMRは0.75（3H，ｓ，18−CH₃），0.90及び0.91
（6H、各ｄ，Ｊ＝6.7Hz，26−H₃及び27−H₃），
0.99（3H，ｄ，Ｊ＝6.8Hz，21−H₃），1.64（3H，
ｓ，19−H₃），3.90（1H，ｍ，３−Ｈ），5.20
（2H，brm，22−Ｈ及び23−Ｈ），5.69及び5.95
（2H，ABq，Ｊ＝12Hz，７−Ｈ及び６−Ｈ）で
あり、UVはλ_nax261nm，λ_nio234nmであつた。

還流エタノール中でこのプレビタミン中間体
（56mg，0.15ミリモル）の熱異性化（３時間）を
行なつたところ、HPLCによる分離後にオイル状
のビタミン同族体(5)（43mg，77％）が得られた。
NMRは0.60（3H，ｓ，18−H₃），0.89及び0.90
（6H，各ｄ，Ｊ＝6.7H_z，26−H₃及び27−H₃），
0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.6H_z，21−H₃），3.96（1H，
ｓ，３−Ｈ），4.82及び5.05（2H，各narr.m，19
−H₂），5.20（2H，brm，22−Ｈ及び23−Ｈ），
6.04及び6.24（2H，ABq，Ｊ＝11.4Hz，７−Ｈ及
び６−Ｈ），UVはλ_nax265.5nm，λ_nio228nm，IR
は3427，1458，1379，1048，966，943，892cm^-1、
質量スペクトルはｍ／z382（M⁺，21），349(5)，
271(8)，253(14)，136(100) ，118(32)であつた。ビ
タミン同族体(5)は公知の化合物である（上記した
ボゴスロフスキーの文献参照）。

化合物(5)のヒドロキシル化．新たに再結晶させ
たｐ−トルエンスルホニルクロリド（50mg，0.26
ミリモル）をビタミン(5)（50mg，0.13ミリモル）
の乾燥ピリジン（300μl）溶液に加えた。４℃で
30時間後に、反応混合物を氷／飽和N_aHCO₃に攪
拌しながら注いだ。混合物を15分間攪拌し、ベン
ゼンで抽出した。有機抽出物を飽和N_aHCO₃、飽
和硫酸銅．及び水で洗浄し、乾燥し（Na₂SO₄），
真空中で濃縮してオイル状のトシレート６を得
た。粗製のトシレート６を無水メタノール（10
ml）中でN_aHCO₃（150mg）を用いて処理し、混合
物を55℃で8.5時間攪拌した。冷却し、２mlに濃
縮してから、混合物をベンゼン（80ml）で希釈
し、水で洗浄し、乾燥し（Na₂SO₄）、減圧下で
蒸発させた。このようにして得られたオイル状の
３，５−シクロビタミンＤ化合物は、精製するこ
となく次の酸化工程に使用するのに充分なほど純
度がよかつた。乾燥したCH₂Cl₂（５ml）に入れた
S_eO₂（5.1mg，0.046ミリモル）の激しく攪拌した
懸濁液に、第３ブチルヒドロペルオキシド
（16.5μl，0.118ミリモル）を加えた。30分後に乾
燥ピリジン（50μl）を加え、混合物を室温で更に
25分間攪拌し、CH₂Cl₂（３ml）で希釈し、０℃に
冷却した。CH₂Cl₂に入れた粗製の３，５−シク
ロビタミン生成物(7)を次に加えた。反応を０℃で
15分間進めてから、放置して室温までゆつくり
（30分間）暖めた。混合物を分離漏斗に移し、30
mlの10％NaOHとともに振盪した。エーテル
（150ml）を加え、分離した有機相を10％NaOH、
水で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させた。真空中で
濃縮乾燥させたところ、黄色いオイル状残渣が得
られ、これを７：３のヘキサン−酢酸エチルに展
開したシリカゲルTLCプレート上で精製したと
ころ、１−ヒドロキシシクロビタミン生成物（20
mg，37％）が得られた。NMRは0.59（3H，ｓ，
18−H₃），0.63（1H，ｍ，３−Ｈ）、0.89及び0.90
（6H，各ｄ，Ｊ＝6.9Hz，26−H₃及び27−H₃），
0.96（3H，ｄ，Ｊ＝6.9Hz，21−H₃），3.25（3H，
ｓ，−OCH₃），4.17（2H，ｍ，１−Ｈ及び６−
Ｈ），4.96（1H，ｄ，Ｊ＝9.3Hz，７−Ｈ），5.1−
5.4（4H，brm，19−H₂，22−Ｈ及び23−Ｈ）、質
量スペクトルはｍ／z412（M⁺，26），380(48)，
339(22)，269(28)，245(20)，135(100) であつた。
この生成物は、構造(8)の1α−ヒドロキシシクロ
ビタミンＤ化合物を主成分とするものであり、そ
の他、少量の対応する1β−ヒドロキシ−エピマ
ーを含む。これらの成分は、所望の場合には、こ
の段階で分離することができるが、このような分
離は必要でない。

上記のようにして得られた１−ヒドロキシシク
ロビタミン生成物（18mg）を氷酢酸（0.8ml）中
で加熱し（55℃，15分）、混合物を中和し（氷／
飽和NaHCO₃）、ベンゼンとエーテルで抽出し、
HPLC（溶離液、２−プロパノールの1.5％ヘキサ
ン液）分離をしたところ、純粋な1α−ヒドロキ
シ−3β−アセトキシビタミン(9)（6.60mg，34％、
溶出42ml）と(10)（4.20mg，22％、溶出50ml）とが
得られた。

化合物(9)は、NMRが0.60（3H，ｓ，18−H₃），
0.90及び0.92（6H、各ｄ，Ｊ＝7.0H_z、26−H₃、
及び27−H₃），0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.8H_z，21−
H₃），2.04（3H，ｓ，−OCOCH₃），4.41（1H，ｍ，
１−Ｈ），5.02（1H，narr.m，19−Ｈ），5.1−5.4
（4H，brm，３−，19−，22−及び23−Ｈ），
6.03及び6.35（2H，ABq，Ｊ＝11.4H_z，７−Ｈ及
び６−Ｈ），UVがλ_nax264.5nm，λ_nio227.5nm、
質量スペクトルがｍ／z440（M⁺，10），380(72)，
362(7)，269(31)，251(12)，135(100) ，134(99)で
あつた。

化合物(10)は，NMRが0.60（3H，ｓ，18−H₃），
0.90及び0.91（6H、各ｄ，Ｊ＝7.0H_z，26−H₃及
び27−H₃），0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.9H_z，21−
H₃），2.05（3H，ｓ，−OCOCH₃），4.49（1H，ｍ，
１−Ｈ），5.00及び5.14（2H、各narr.m，19−
H₂），5.20（3H，brm，３−，22−及び23−Ｈ），
5.82及び6.59（2H，ABq，Ｊ＝12.0H_z，７−Ｈ及
び６−Ｈ），UVがλ_nax270nm，λ_nio228nm、質量
スペクトルはｍ／z440（M⁺，４），380(30)，269
(10)，135(100) ，134(52)であつた。

化合物(9)及び(10)の3β−アセトキシ基の加水分解 3β−アセトキシ誘導体９及び１０のそれぞれ
を同じ手順で加水分解させた。3β−アセトキシ
ビタミン（0.7−６mg）のエタノール（0.1ml）溶
液を10％KOHのメタノール（0.8ml）液で処理
し、混合物を50℃で１時間加熱した。通常の処理
をし、最後にHPLC精製（溶離液、２−プロパノ
ールの８％ヘキサン液）したところ、対応する１
−ヒドロキシビタミンが得られた。化合物(11)
は、NMRが0.59（3H，ｓ，18−H₃），0.89及び
0.90（6H、各ｄ，Ｊ＝7.0H_z，26−H₃及び27−
H₃），0.96（3H，ｄ，Ｊ＝6.8H_z，21−H₃），4.23
（1H，ｍ，３−Ｈ），4.43（1H，ｍ，１−Ｈ），
5.00（1H，narr.m，19−Ｈ），5.1−5.4（3H，
brm，19−，22−及び23−Ｈ），6.02及び6.39
（2H，ABq，Ｊ＝11.4H_z，７−Ｈ及び６−Ｈ），
UVがλ_nax264.5nm，λ_nio227.5nm、質量スペクト
ルがｍ／z398（M⁺，21），380(8)，287(6)，269(7)，
251(5)，152(36)，134(100) であつた。（溶出量は
39ml）。

化合物(12)は、NMRが0.61（3H，ｓ，18−
H₃），0.89及び0.91（6H、各ｄ，Ｊ＝7.0Hz、26−
H₃及び27−H₃），0.97（3H，ｄ，Ｊ＝6.9H_z，21
−H₃），4.25（1H，ｍ，３−Ｈ），4.51（1H，ｍ，
１−Ｈ），4.98及び5.13（2H、各narr.m，19−
H₂），5.21（2H，brm，22−Ｈ及び23−Ｈ），5.89
及び6.59（2H，ABq，Ｊ＝11.5Hz，７−Ｈ及び６
−Ｈ），UVがλ_nax273nm，λ_nio229.5nm、質量ス
ペクトルがｍ／z398（M⁺．17），380(4)，287(5)，
269(5)，251(4)，152(29)，134(100) であつた。（溶
出量は38ml。） 上記方法において、高圧液体クロマトグラフイ
（HPLC）は、ゾルバツクス−シル（デユポン社）
〔6.2mm×25cmカラム、流速４ml／分，約105Kg／
cm²（1500psi）〕を使用したウオーターズ・アソシ
エイツ社のモデル・エイエル−／ジーピーシー
204で行なつた。カラムクロマトグラフイは、シ
リカゲル60（Silica Gel 60），70〜230ASTMメツ
シユ（メルク社）で行なつた。分取薄層クロマト
グラフイ（TLC）は、シリカ60ピーエフ−254
（Silica60PF−254）（20cm×20cmのプレート，１
mmシリカゲル）で行なつた。照射は、ビコールフ
イルタを備えた、ハノビア（Hanovia608A36）
水銀アークランプを使用して行なつた。反応は全
て、不活性雰囲気（例えば，アルゴン）の下で行
なうのが好ましい。

本発明の化合物は、所望の場合には、当業者に
とつて明らかでありかつ周知であるように、ヘキ
サン，エーテル及びアルコール（無水又は水性）
のような適宜の溶媒からの晶出により結晶形で、
及び混合物として容易に得ることができる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ なる構造を有する化合物。 ２ 結晶形をなす特許請求の範囲第１項記載の化
   合物。 本発明は、保健社会福祉省（Department of
   Health and Human Services）のエヌ・アイ・
   エイチ許可第エイ・エム14881号（NIH Grant
   No.14881）により政府の支持を得てなされたもの
   である。