JPH0529231B2 - - Google Patents

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Koichi Iwanami

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1986-07-28

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1986-07-28

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1993-04-28

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Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明はホスフアチジルイノシトールの精製方
法に関する。

〔従来の技術〕

リン脂質は動植物生体に広く分布し、各種の生
理的機能を果している。このためリン脂質は動脈
硬化症、高脂血症、肝臓病、心臓病等の治療剤や
食品、香粧品、医薬品等の乳化剤等に利用されて
いる。

通常リン脂質は植物種子から油脂を抽出、精製
する際、ガム質として分離、精製して得られる
が、種子原料の種類により含有されるリン脂質の
組成が異なる。通常植物種子中のリン脂質組成
は、ホスフアチジルコリン（以下、PCという）
ホスフアチジルエタノールアミン（以下、PEと
いう）、ホスフアチジルセリン（以下、PSとい
う）、およびホスフアチジルイノシトール（以下、
PIという）が主体であり、これらは現在までの
技術では分離が非常に困難なため、混合物のまま
使用されることが多い。

従来のリン脂質を分画する方法としては、アセ
トンやアルコールを使用して目的物を濃縮し、さ
らにケイ酸、アルミナなどでクロマトグラフイー
を行つている。特にPIを単離する場合は、リン
脂質をイソプロパノール処理してPIの濃度を高
めた後、ケイ酸カラムを用いてクロマトグラフイ
により分画を行つている（例えば生化学実験構座
３、脂質の化学p.278）。

〔発明が解決しようとする問題点〕

しかしながら、このような従来の方法では、ケ
イ酸カラムおよびアルミナカラムを使用し、２回
以上カラムクロマトグラフイーを行う必要があ
り、その操作は複雑で多大の労力と時間を要し、
効率が悪いとともに、高純度のPIを得ることが
できず、工業的規模でPIの精製を行うことがで
きないという問題点があつた。

本発明はPIを高純度に効率良く精製すること
ができるPIの精製方法を提案することを目的と
している。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明はホスフアチジルイノシトールを多糖体
系陰イオン交換体に吸着させ、ホスフアチジルイ
ノシトールよりも前記陰イオン交換体に対する親
和性の高いバツフア塩を含む有機溶媒により前記
陰イオン交換体からホスフアチジルイノシトール
を溶離させることを特徴とするホスフアチジルイ
ノシトールの精製方法である。

本発明で精製の対象となるリン脂質は動物、植
物、微生物のいずれからのものでも良い。被精製
物としてのリン脂質はクロロホルム、メタノール
等の有機溶媒により抽出されたリン脂質画分でも
よいが、さらにメタノール、エタノール、プロパ
ノール等のアルコールによりPC、PE等の他のリ
ン脂質を抽出除去してPIを濃縮した粗PI画分が
好ましい。

本発明において精製に用いる多糖体系陰イオン
交換体は、セルロース、アガロース、デキストラ
ン等の天然架橋多糖体高分子からなる担体に、解
離基として陰イオン交換基をつけたもので、交換
基量が１ｇ当り0.1〜0.5meqのものが好ましい。
このような陰イオン交換体としては例えばセルロ
ース、アガロース、デキストランの架橋体等の高
分子鎖の置換基にアミノエチル基、ジエチルアミ
ノエチル基、トリエチルアミノエチル基、グアニ
ドエチル基、パラアミノベンジル基等を導入した
もの；セルロース、アガロース、デキストランの
架橋体等にグリセリル基またはポリグリセリル基
によりトリエタノールアミンをカツプルしたも
の；ベンゾイル化されたジエチルアミノエチルセ
ルロースまたはジエチルアミノエチルアガロー
ス；ベンゾイル化−ナフトイル化されたジエチル
アミノエチルセルロースまたはジエチルアミノエ
チルアガロース；セルロースまたはアガロース、
弱くリン酸化されたセルロースまたはアガロース
にポリエチレンイミンを吸着させたものなど、一
般にイオン交換クロマトグラフイーに使用されて
いるものが使用できる。

このような陰イオン交換体は、予め有機溶媒に
より膨潤させ、バツフア塩と接触させて活性化し
た後、有機溶媒の存在下に前記被精製物を接触さ
せ、PIを吸着させる。陰イオン交換体と被精製
物の接触方法は、被精製物と陰イオン交換体を有
機溶媒の存在下に混合撹拌するバツチ方式でもよ
いが、陰イオン交換体をカラム充填し、溶媒に溶
解した被精製物をカラム通液して接触させる連続
方式でもよい。

陰イオン交換体の活性化に使用するバツフア塩
としては、後工程の溶離に使用するものと同じも
のが使用でき、例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン
酸等のアルカリ塩、アンモニウム塩、アミン塩な
どがある。活性化の方法はこれらのバツフア塩の
水溶液を陰イオン交換体と接触させ、液と分離後
メタノール等により水分を除去し、その後有機溶
媒で陰イオン交換体を膨潤させる。

膨潤に使用する有機溶媒および被精製物を溶解
する有機溶媒は同じものが使用でき、例えばクロ
ロホルム、メタノール、エタノール、イソプロパ
ノール、ブタノール、アセトン、アセトニトリ
ル、ジクロルメタン、四塩化炭素等が単独でまた
は混合して使用できるが、極性溶媒を含む混合溶
媒が好ましい。

こうして被精製物を陰イオン交換体に接触させ
ることにより、PIおよび他のリン脂質は陰イオ
ン交換体に吸着される。そこで溶媒を陰イオン交
換体から分離し、新しい溶媒で陰イオン交換体を
洗浄すると、陰イオン交換体に吸着された他のリ
ン脂質を完全に除去できる。

こうして分離した陰イオン交換体に、バツフア
塩を含む有機溶媒を接触させることにより、吸着
されたPIを溶離させ、高純度で回収することが
できる。バツフア塩はPIよりも陰イオン交換体
に対する親和性（吸着性）が高いもので、活性化
に使用した前記例示のものが使用でき、溶解性を
よくするために少量の水を加えてもよい。また有
機溶媒も前記と同じものが使用できる。

以下、バツチ方式の場合を例にとつて、PIの
精製方法を具体的に説明する。まず、陰イオン交
換体を常法により活性化し、クロロホルム−メタ
ノール溶媒〔10：０〜０：10（ｖ／ｖ）〕溶液で膨
潤させ、膨潤させた陰イオン交換体と前記溶媒を
10：１〜１：20（ｖ／ｖ）の割合で混合しておく。
一方、原料リン脂質から得られた粗PI画分をク
ロロホルム、ジクロロエタン、ジクロロメタン、
四塩化炭素等のハロゲン系炭化水素に溶解し、こ
れを前記陰イオン交換体と溶媒の混合物に加え、
０〜40℃の間で撹拌する。撹拌時間は適宜決めら
れるが、15分〜２時間位が好ましい。こうして
PIを吸着させた陰イオン交換体を濾過し、クロ
ロホルム−メタノール溶媒（10：０〜０：10
（ｖ／ｖ））に酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム
等のバツフア塩を0.1〜0.5％（ｗ／ｖ）の濃度に
加えた溶媒で、PIのみを溶離させ精製する。

カラム通液方式の場合は、陰イオン交換体をカ
ラム充填して、上記に準じた条件で通液し、吸着
および溶離を行う。こうして得られるPIは高純
度であるが、さらに高度の精製を付加してもよ
い。

〔発明の効果〕

本発明によれば、PIを多糖体系陰イオン交換
体に吸着させて精製を行うようにしたので、簡単
な操作により、少ない労力および時間で効率よ
く、大量かつ高純度に高収率でPIの精製を行う
ことができる。

〔実施例〕

以下、本発明の実施例について説明する。

実施例１乾燥酵母１Kgよりクロロホルム−メタノール
（１：１（ｖ／ｖ））で抽出した脂質14ｇをイソプ
ロパノール１で洗浄し、粗PI画分３ｇを得た。

一方、セルロースにジエチルアミノエチル基を
導入した多糖体系陰イオン交換体DEAE−セフア
ロース、CL−6B（フアルマシア社製、商標）100
mlを1N酢酸ナトリウム（PH7.0）に懸濁した後濾
過し、水を加え緩く撹拌して濾過し、次にメタノ
ールを加え緩く撹拌して濾過し、さらにクロロホ
ルム−メタノール（１：４（ｖ／ｖ））で洗浄し、
前処理した。

前処理した含溶媒陰イオン交換体100mlに、上
記の粗PI画分２ｇを加え、１時間室温で撹拌し
て吸着させた。これを濾別し、クロロホルム−メ
タノール（１：４（ｖ／ｖ））100mlで洗い、フラ
クシヨン１（F₁）を得た。次にクロロホルム−メ
タノール（１：４（ｖ／ｖ））の0.1％酢酸ナトリ
ウム（ｗ／ｖ）溶液１で洗浄し、フラクフヨン
２（F₂）を得た。

フラクシヨン１、２をそれぞれ濃縮、脱塩した
ものについて薄層クロマトグラフイー（TLC）
により分析した結果、フラクシヨン１には１ｇの
脂質があり、PS、その他のPI以外のリン脂質が
含まれ、フラクシヨン２にはPIのみが800mg含ま
れていた。

各フラクシヨンのTLC図を第１図に示す。

実施例２ペースト状大豆リン脂質20ｇをイソプロパノー
ル１で洗い、３ｇの粗PI画分を得た。

一方、セルロースにトリエチルアミノエチル基
を導入した多糖体系陰イオン交換体TEAE−セル
ロース（セルバ・フアインバイオケミカ社製、商
標）を実施例１と同様に前処理し、前記粗PI画
分を実施例１と同様に吸着させた。

その後クロロホルム−メタノール（１：1.1
（ｖ／ｖ））100mlで洗い、フラクシヨン１（F₁）
を得た。次にクロロホルム−メタノール（１：１
（ｖ／ｖ））の0.3％酢酸アンモニウム（ｗ／ｖ）
溶液１で洗い、フラクシヨン２（F₂）を得た。

フラクシヨン１にはPI以外の脂質が１ｇ、フ
ラクシヨン２にはPIのみが1.8ｇ含まれていた。

各フラクシヨンのTLC図を第２図に示す。

実施例３架橋デキストランにジエチル−（２−ハイドロ
キシプロピル）アミノエチル基を導入した多糖体
系陰イオン交換体QAE−セフアデツクス（フア
ルマシア社製、商標）50mlを実施例１と同様に前
処理し、これに牛脳からの抽出脂質のFolch画分
Ｉ（シグマ社製、PI10〜20％含有）１ｇを実施例
１と同様にして吸着させ、その後濾別してクロロ
ホルム−メタノール（１：１（ｖ／ｖ））100mlで
洗い、フラクシヨン１（F₁）を得た。次にクロロ
ホルム−メタノール（１：４（ｖ／ｖ））の0.1％
酢酸アンモニウム（ｗ／ｖ）溶液500mlで洗い、
フラクシヨン２（F₂）を得た。

フラクシヨン１、２をそれぞれ濃縮、脱塩した
ものについて分析した結果、フラクシヨン１には
PI以外のリン脂質が500mg含まれ、フラクシヨン
２にはPIのみが120mg含まれていた。

各フラクシヨンのTLC図を第３図に示す。

比較例ケイ酸をクロロホルムに懸濁してカラムに充填
し、クロマトグラフイーによりリン脂質の分画を
行つた。まず実施例１と同様にして得られた粗
PI画分３ｇをケイ酸カラム（φ4.5×32cm）に展着
し、次にクロロホルム−メタノールの混合溶媒で
溶出させるが、メタノールの濃度を15％、25％、
30％、40％、50％、80％と順次増加させて溶出さ
せた。流す溶媒量はそれぞれ２、４、２、
１、２、２で、20〜200mlずつ分取してい
き、50画分を得た。それぞれの画分をまとめた後
濃縮したものをTLCにより分析した。その結果、
溶出溶媒の極性を順次上げていきクロマトグラフ
イーを行つても、十分な分離はできず、またPI
とPSの分離も非常に困難であつた。

各フラクシヨンのTLC図を第４図に示す。

【図面の簡単な説明】

第１図ないし第４図はそれぞれ実施例１〜３お
よび比較例の結果を示すTLC図である。

【特許請求の範囲】

１次式で示されるビス（ジフエニルホスフイノ）アミン
に、テトラヒドロフラン等の有機溶媒中で次式 R′MgX′ （）〔式中、R′はアルキル基又はアリール基を示
し、X′は塩素、臭素又は沃素原子を示す〕で表
わされるグリニヤール試薬を反応させ、その反応
生成物に次式 RX 〔〕〔式中、Ｒはアルキル基又はベンジル基を示
し、Ｘは塩素、臭素又は沃素原子を示す〕で表わ
されるハライド化合物を反応させることを特徴と
する、次式〔式中、Ｒ及びＸは前記と同じ意味を有する〕

JP17719186A 1986-07-28 1986-07-28 ホスフアチジルイノシト−ルの精製方法 Granted JPS6333389A (ja)

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Robles et al.	1969	Synthesis of lecithins by acylation of O-(sn-glycero-3-phosphoryl) choline with fatty acid anhydrides
EP0922707B2 (en)	2009-11-18	A process for the purification of phosphatidylserine
DE2322552C2 (de)	1986-08-28	Verfahren zum Abtrennen von Protein A aus Staphylococcus aureus aus einer Flüssigkeit
DK172721B1 (da)	1999-06-14	Fremgangsmåde til fremstilling af æggeblommelecithin i det væsentlige uden urenheder og om ønsket med reduceret phosphatidy
JPH0556359B2 (ja)	1993-08-19
JP2883202B2 (ja)	1999-04-19	Ｌ―アルファ―グリセリルホスホリルコリンおよびｌ―アルファ―グリセリルホスホリルエタノールアミンの製造法
JPH0244316B2 (ja)	1990-10-03
JP3504267B2 (ja)	2004-03-08	スフィンゴミエリンの抽出法
JP3483908B2 (ja)	2004-01-06	グリセロりん脂質の製造方法
EP0706982A1 (en)	1996-04-17	Method of separating optical isomers
EP1213294B2 (en)	2008-10-22	Purifying process for phosphatidylserine
Hara et al.	1979	Simple procedures for the rapid cleavage of ester lipids and for the large-scale isolation from brain of cerebroside sulfate
JPH0367676B2 (ja)	1991-10-23
JPH10295396A (ja)	1998-11-10	モエノマイシンａの製造法
JPH05132490A (ja)	1993-05-28	リン脂質画分の分画精製方法
JP3507528B2 (ja)	2004-03-15	シクロデキストリンの回収方法
JPS6333389A (ja)	1988-02-13	ホスフアチジルイノシト−ルの精製方法
JPH07113024B2 (ja)	1995-12-06	ピロロキノリンキノンの精製方法
JPH0469160B2 (ja)	1992-11-05
KR890001003B1 (ko)	1989-04-18	Lpf-ha의 정제방법
JPH0662648B2 (ja)	1994-08-17	高純度レシチンの製造方法
DE2812609A1 (de)	1978-10-19	Verfahren zur reinigung roher urokinase
US2432638A (en)	1947-12-16	Method for the isolation of penicillin
WO1987004711A1 (fr)	1987-08-13	Procede de production de lecithine de jaune d'oeuf contenant une quantite reduite de phosphatidyle-ethanolamine (pe) et/ou ne contenant essentiellement aucune impurete
JPH0121836B2 (ja)	1989-04-24