JPH05292906A - アレルゲン低減化された米調製物、その製造方法及びそれを含む加工食品 - Google Patents
アレルゲン低減化された米調製物、その製造方法及びそれを含む加工食品Info
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- JPH05292906A JPH05292906A JP4103643A JP10364392A JPH05292906A JP H05292906 A JPH05292906 A JP H05292906A JP 4103643 A JP4103643 A JP 4103643A JP 10364392 A JP10364392 A JP 10364392A JP H05292906 A JPH05292906 A JP H05292906A
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- General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 アレルゲン低減化された米調製物、その製造
方法及びそれを含む加工食品を提供する。 【構成】 グロブリン含量の低い米を水又は塩水溶液で
処理することにより分子量12,000〜30,000のタンパク質
を実質的に除去した。 【効果】 アレルゲンタンパク質が効率良く除去され、
且つコメ本来の品質が損なわれることなく、アレルゲン
低減化された米調製物を提供することができる。
方法及びそれを含む加工食品を提供する。 【構成】 グロブリン含量の低い米を水又は塩水溶液で
処理することにより分子量12,000〜30,000のタンパク質
を実質的に除去した。 【効果】 アレルゲンタンパク質が効率良く除去され、
且つコメ本来の品質が損なわれることなく、アレルゲン
低減化された米調製物を提供することができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、アレルゲン低減化米調
製物、その製造方法及びそれを含む加工食品に関する。
特に、本発明はコメに対してアレルギー反応を起こす患
者の食料として用いることができるアレルゲン低減化米
に関する。
製物、その製造方法及びそれを含む加工食品に関する。
特に、本発明はコメに対してアレルギー反応を起こす患
者の食料として用いることができるアレルゲン低減化米
に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、食物アレルギー患者が急増してい
る。これは食生活の洋風化に伴うタンパク質の多量摂取
に加え、その他の要因（例えば、排気ガスの大気汚染、
あるいは気密性が高くカーペットを敷いた洋風住宅など
の生活様式の変化）が複雑に重なりあい、生活環境下に
存在する様々な物質がアレルゲンに変貌していることに
起因している。
る。これは食生活の洋風化に伴うタンパク質の多量摂取
に加え、その他の要因（例えば、排気ガスの大気汚染、
あるいは気密性が高くカーペットを敷いた洋風住宅など
の生活様式の変化）が複雑に重なりあい、生活環境下に
存在する様々な物質がアレルゲンに変貌していることに
起因している。
【０００３】コメに対するアレルギーの急増もその一例
である。このような食物アレルギーは小児に加え成人に
も多くみられるようになり、本人の肉体的、精神的苦痛
はもとより、親や家族全体にも多大の精神的苦痛を与え
る。食物アレルギー患者の治療法として食物を制限する
か、あるいは摂取させない方法が試みられている。しか
しながら、食物を制限することは、生命の維持、発育に
も支障をきたしかねない。そこで、アレルギーを起こす
成分のみを除去し、他の栄養成分は損なわないような食
品を摂取させるのは好ましい方法の一つである。
である。このような食物アレルギーは小児に加え成人に
も多くみられるようになり、本人の肉体的、精神的苦痛
はもとより、親や家族全体にも多大の精神的苦痛を与え
る。食物アレルギー患者の治療法として食物を制限する
か、あるいは摂取させない方法が試みられている。しか
しながら、食物を制限することは、生命の維持、発育に
も支障をきたしかねない。そこで、アレルギーを起こす
成分のみを除去し、他の栄養成分は損なわないような食
品を摂取させるのは好ましい方法の一つである。
【０００４】この種の方法としては、例えば特開平2-16
7040号公報に記載されているように、コメに含まれてい
るアレルギー関与タンパク質を除去するためにタンパク
質分解酵素を作用させてコメ中の塩可溶性タンパク質に
対する１０％三塩化酢酸可溶率が８０％以上となるまで
加水分解し、可溶性成分を除去する方法が知られてい
る。しかし、この方法では未だ十分にアレルゲンを除去
するまでには到らず、２０〜３０％のコメアレルギー患
者は改善されていなかった。
7040号公報に記載されているように、コメに含まれてい
るアレルギー関与タンパク質を除去するためにタンパク
質分解酵素を作用させてコメ中の塩可溶性タンパク質に
対する１０％三塩化酢酸可溶率が８０％以上となるまで
加水分解し、可溶性成分を除去する方法が知られてい
る。しかし、この方法では未だ十分にアレルゲンを除去
するまでには到らず、２０〜３０％のコメアレルギー患
者は改善されていなかった。
【０００５】コメに対してアレルギーを起こす患者に特
異的な成分（アレルゲン）として、電気泳動法（ＳＤＳ
−ＰＡＧＥ）で解析した場合の分子量12,000〜30,000、
とりわけ分子量16,000付近のタンパク質が重要である。
（以下本明細書においてタンパク質の分子量はＳＤＳ−
ＰＡＧＥの結果より算出されたものとする。）しかし、
たとえば特開平２−１６７０４０号公報に記載の方法で
は未だ十分満足するに至るまで除去することが出来なか
った。
異的な成分（アレルゲン）として、電気泳動法（ＳＤＳ
−ＰＡＧＥ）で解析した場合の分子量12,000〜30,000、
とりわけ分子量16,000付近のタンパク質が重要である。
（以下本明細書においてタンパク質の分子量はＳＤＳ−
ＰＡＧＥの結果より算出されたものとする。）しかし、
たとえば特開平２−１６７０４０号公報に記載の方法で
は未だ十分満足するに至るまで除去することが出来なか
った。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明者等は各種コメ
について詳細に分析したところ、ササニシキ、コシヒカ
リ、ニホンマサリ、農林８号など一般市販のコメの如く
コメタンパク質中のグロブリン含量が１０％以上あるコ
メを従来の低アレルゲン化処理法で処理してもその除去
率には限界があることが判った。
について詳細に分析したところ、ササニシキ、コシヒカ
リ、ニホンマサリ、農林８号など一般市販のコメの如く
コメタンパク質中のグロブリン含量が１０％以上あるコ
メを従来の低アレルゲン化処理法で処理してもその除去
率には限界があることが判った。
【０００７】本発明者らは、かかる問題点を解決しでき
る限り多くのコメアレルギー患者に提供できるよう鋭意
努力した結果、グロブリン含量、とりわけ分子量16,000
付近のグロブリン含量が１０％以下のコメを用い塩水抽
出することにより、優れたアレルゲン低減化米を製造す
ることができることを見出し、本発明を完成させるに至
った。即ち、本発明の目的は、コメに対してアレルギー
反応を起こす患者の食料として極めて有効なアレルゲン
低減化米調製物を提供することにある。
る限り多くのコメアレルギー患者に提供できるよう鋭意
努力した結果、グロブリン含量、とりわけ分子量16,000
付近のグロブリン含量が１０％以下のコメを用い塩水抽
出することにより、優れたアレルゲン低減化米を製造す
ることができることを見出し、本発明を完成させるに至
った。即ち、本発明の目的は、コメに対してアレルギー
反応を起こす患者の食料として極めて有効なアレルゲン
低減化米調製物を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】従って、本発明は、グロ
ブリン含量の低い米に含まれる分子量12,000〜30,000の
タンパク質が実質的に除去された、米調製物に関する。
また、本発明は、グロブリン含量の低い米を塩水溶液で
処理することを特徴とする、グロブリン含量の低い米に
含まれる分子量12,000〜30,000のタンパク質が実質的に
除去された米調製物の製造方法にも関する。更に、本発
明は、グロブリン含量の低い米に含まれる分子量12,000
〜30,000のタンパク質が実質的に除去された米調製物を
使用して得た、米加工食品にも関する。
ブリン含量の低い米に含まれる分子量12,000〜30,000の
タンパク質が実質的に除去された、米調製物に関する。
また、本発明は、グロブリン含量の低い米を塩水溶液で
処理することを特徴とする、グロブリン含量の低い米に
含まれる分子量12,000〜30,000のタンパク質が実質的に
除去された米調製物の製造方法にも関する。更に、本発
明は、グロブリン含量の低い米に含まれる分子量12,000
〜30,000のタンパク質が実質的に除去された米調製物を
使用して得た、米加工食品にも関する。
【０００９】本発明のアレルゲン低減化米調製物は、分
子量12,000〜30,000とりわけ分子量16,000付近のタンパ
ク質が除去もしくは低減化されているものである。
子量12,000〜30,000とりわけ分子量16,000付近のタンパ
ク質が除去もしくは低減化されているものである。
【００１０】本発明の米調製物は、グロブリン含量の低
い米をアレルゲン低減化処理することによって調製する
ことができる。ここで、アレルゲン低減化処理とは、塩
水溶液によるタンパク質抽出操作である。アレルゲン低
減化処理において、グロブリン含量の低い米に対して、
抽出時の品温を凍結点以上〜１５℃以下として塩水溶液
中で攪拌する、塩水溶液によるタンパク質抽出処理を行
うことにより、極めて短時間でかつ抽出回数も少なく、
効率的にアレルゲンタンパク質を除去分離することがで
きる。上記品温とは、コメが分散している塩水溶液の温
度である。本発明に用いるコメ、塩の水溶液、水、また
酵素や界面活性剤を使用する時はそれらも含めて、各々
又は全てを予めそれぞれの物質の凍結点以上〜１５℃以
下に冷却し使用すれば更に好ましく、また上記物質の各
々又は全てを配合した後に凍結点以上〜１５℃以下に冷
却してもよい。更に上記塩水溶液に、タンパク質分解酵
素を添加することにより、タンパク質の溶出、除去が促
進され、これに界面活性剤を添加すると、タンパク質分
解酵素がコメに浸透して、その作用が促進されるので好
ましい。
い米をアレルゲン低減化処理することによって調製する
ことができる。ここで、アレルゲン低減化処理とは、塩
水溶液によるタンパク質抽出操作である。アレルゲン低
減化処理において、グロブリン含量の低い米に対して、
抽出時の品温を凍結点以上〜１５℃以下として塩水溶液
中で攪拌する、塩水溶液によるタンパク質抽出処理を行
うことにより、極めて短時間でかつ抽出回数も少なく、
効率的にアレルゲンタンパク質を除去分離することがで
きる。上記品温とは、コメが分散している塩水溶液の温
度である。本発明に用いるコメ、塩の水溶液、水、また
酵素や界面活性剤を使用する時はそれらも含めて、各々
又は全てを予めそれぞれの物質の凍結点以上〜１５℃以
下に冷却し使用すれば更に好ましく、また上記物質の各
々又は全てを配合した後に凍結点以上〜１５℃以下に冷
却してもよい。更に上記塩水溶液に、タンパク質分解酵
素を添加することにより、タンパク質の溶出、除去が促
進され、これに界面活性剤を添加すると、タンパク質分
解酵素がコメに浸透して、その作用が促進されるので好
ましい。
【００１１】本発明に用いられるグロブリン含量の低い
低グロブリン米は、タンパク質中のグロブリン含量が
０．５〜１０％、好ましくは０．５〜８％、更に好まし
くは０．５〜５％、とりわけ分子量16,000のグロブリン
の含量が０．５〜７％、好ましくは０．５〜５％であ
り、精白した粒若しくは精白しない粒のまま、あるいは
粉砕して米粉の状態で用いられる。本発明の原料である
低グロブリン米を産出するイネとしては、農水省農業生
物資源研究所で作られた８５ＫＧ４系統の変種米があ
る。上記低グロブリン米としては、米粒の一部又は全部
が粉質傾向にあることが好ましく、特に粒の中心部が、
少しもしくはわずかに粉質傾向にあることが好ましい。
低グロブリン米は、タンパク質中のグロブリン含量が
０．５〜１０％、好ましくは０．５〜８％、更に好まし
くは０．５〜５％、とりわけ分子量16,000のグロブリン
の含量が０．５〜７％、好ましくは０．５〜５％であ
り、精白した粒若しくは精白しない粒のまま、あるいは
粉砕して米粉の状態で用いられる。本発明の原料である
低グロブリン米を産出するイネとしては、農水省農業生
物資源研究所で作られた８５ＫＧ４系統の変種米があ
る。上記低グロブリン米としては、米粒の一部又は全部
が粉質傾向にあることが好ましく、特に粒の中心部が、
少しもしくはわずかに粉質傾向にあることが好ましい。
【００１２】本発明方法においては、場合により界面活
性剤及び／又はタンパク質分解酵素を使用することがで
き、タンパク質分解酵素としては特開平2-167040号公報
に記載のものを利用することができるが、界面活性剤と
しては特にポリグリセリンエステルや、リゾリン脂質
（例えば、リゾレシチン）の使用が好ましい。除去すべ
きタンパク質の溶出流去を促進するために使用するタン
パク質分解酵素として好ましいものは、例えば、パパイ
ン、ブロメライン、トリプシン、ペプシン、パンクレア
チン、アクチナーゼ、α−キモトリプシンなどを挙げる
ことができる。タンパク質分解酵素の使用量は、塩水溶
液１００重量部に対して、０．０５〜５重量部、また界
面活性剤の使用量は、塩水溶液１００重量部に対して、
０．０２〜５重量部程度が好ましい。また、酵素反応に
先立ち、コメを含む塩水溶液を減圧若しくは加圧処理す
ることにより塩水抽出除去又は酵素反応が助長される。
減圧の程度は１０〜５０mmHg、加圧の程度は２〜１０kg
／cm 2が適当である。
性剤及び／又はタンパク質分解酵素を使用することがで
き、タンパク質分解酵素としては特開平2-167040号公報
に記載のものを利用することができるが、界面活性剤と
しては特にポリグリセリンエステルや、リゾリン脂質
（例えば、リゾレシチン）の使用が好ましい。除去すべ
きタンパク質の溶出流去を促進するために使用するタン
パク質分解酵素として好ましいものは、例えば、パパイ
ン、ブロメライン、トリプシン、ペプシン、パンクレア
チン、アクチナーゼ、α−キモトリプシンなどを挙げる
ことができる。タンパク質分解酵素の使用量は、塩水溶
液１００重量部に対して、０．０５〜５重量部、また界
面活性剤の使用量は、塩水溶液１００重量部に対して、
０．０２〜５重量部程度が好ましい。また、酵素反応に
先立ち、コメを含む塩水溶液を減圧若しくは加圧処理す
ることにより塩水抽出除去又は酵素反応が助長される。
減圧の程度は１０〜５０mmHg、加圧の程度は２〜１０kg
／cm 2が適当である。
【００１３】本発明のアレルゲン低減化米は、低グロブ
リン含量米に塩の水溶液を加え、品温を凍結点以上〜１
５℃以下にして静置又は攪拌し、溶出するタンパク質画
分を流去することによって得られる。品温が凍結点以下
になると一回のアレルゲンタンパク質の抽出量が減少し
抽出効率が低下する。品温が１５℃を越えると凍結点以
下における場合と同じく抽出効率が低下する。一方、静
置分離、遠心分離、濾過分離、膜分離などの固液分離操
作においても、１５℃以下で処理した場合より時間と収
率面で効率が劣る。本発明において抽出処理後は、脱塩
もしくは脱塩せずに調製物とすることができる。
リン含量米に塩の水溶液を加え、品温を凍結点以上〜１
５℃以下にして静置又は攪拌し、溶出するタンパク質画
分を流去することによって得られる。品温が凍結点以下
になると一回のアレルゲンタンパク質の抽出量が減少し
抽出効率が低下する。品温が１５℃を越えると凍結点以
下における場合と同じく抽出効率が低下する。一方、静
置分離、遠心分離、濾過分離、膜分離などの固液分離操
作においても、１５℃以下で処理した場合より時間と収
率面で効率が劣る。本発明において抽出処理後は、脱塩
もしくは脱塩せずに調製物とすることができる。
【００１４】本発明のアレルゲン低減化米調製物におい
ては、その粉末１ｇに１ＭＮａＣｌ１０mlを加えて３０
分間室温で静置又は攪拌した場合に、その上清中のタン
パク質濃度が４００μｇ／ml以下、好ましくは２００μ
ｇ／ml以下、更には１００μｇ／ml以下になれば極めて
有効である。
ては、その粉末１ｇに１ＭＮａＣｌ１０mlを加えて３０
分間室温で静置又は攪拌した場合に、その上清中のタン
パク質濃度が４００μｇ／ml以下、好ましくは２００μ
ｇ／ml以下、更には１００μｇ／ml以下になれば極めて
有効である。
【００１５】本発明の抽出剤溶液である塩水溶液として
は、食塩水が最も適当であるが、炭酸ナトリウム重炭酸
ナトリウムなどの炭酸塩やナトリウム塩が好ましく、そ
の他、各種の燐酸塩、カリウム塩、カルシウム塩、硫酸
塩又は塩酸塩、例えば塩化カリウム、硫酸ナトリウム、
ポリ燐酸ナトリウムなどの水溶液も使うことができる。
塩水濃度は０．０５〜３モル濃度、好ましくは０．５〜
１．５モル濃度が適当である。
は、食塩水が最も適当であるが、炭酸ナトリウム重炭酸
ナトリウムなどの炭酸塩やナトリウム塩が好ましく、そ
の他、各種の燐酸塩、カリウム塩、カルシウム塩、硫酸
塩又は塩酸塩、例えば塩化カリウム、硫酸ナトリウム、
ポリ燐酸ナトリウムなどの水溶液も使うことができる。
塩水濃度は０．０５〜３モル濃度、好ましくは０．５〜
１．５モル濃度が適当である。
【００１６】本発明方法の好ましい実施態様の一つを具
体的に述べれば、コメに対して１〜２０倍量の０．０５
Ｍ〜３Ｍ濃度の凍結温度以上の塩水溶液、例えば食塩水
溶液を加え、品温を凍結温度以上〜１５℃以下として、
２分〜４８時間静置又は攪拌、例えば、米粒のままであ
れば６時間〜４８時間、好ましくは８時間〜２４時間、
粉体であれば２分〜８時間、好ましくは５分〜３時間静
置又は攪拌し、分子量10,000〜30,000とりわけ分子量1
6,000付近のタンパク質画分、好ましくは分子量30,000
〜40,000とりわけ分子量33,000付近のタンパク質画分及
び分子量50,000〜60,000とりわけ分子量52,000〜57,000
のタンパク質画分も溶出させ、その後静置もしくは遠心
などの方法で分離して、本発明のアレルゲン低減化米調
製物を得る。この操作を必要であれば数回繰り返して行
う。普通１〜３回程度でよい。また、この操作は回分式
ではなく連続式に実施することも当然可能である。なお
塩の水溶液で溶出後、水洗して塩分を除去あるいは更に
厳密に水溶出アレルゲンの除去をすることもできる。目
的とするタンパク質画分が十分に溶出され、アレルゲン
低減化米調製物が得られたかどうかは、電気泳動法、高
速液体クロマトグラフィーなどで、除去すべきタンパク
質画分の存在を確認して判定することができる。更に厳
密に測定するには、免疫学的分析法、例えばエンザイム
イムノアッセイ法、ラジオイムノアッセイ法などの方法
によればよい。
体的に述べれば、コメに対して１〜２０倍量の０．０５
Ｍ〜３Ｍ濃度の凍結温度以上の塩水溶液、例えば食塩水
溶液を加え、品温を凍結温度以上〜１５℃以下として、
２分〜４８時間静置又は攪拌、例えば、米粒のままであ
れば６時間〜４８時間、好ましくは８時間〜２４時間、
粉体であれば２分〜８時間、好ましくは５分〜３時間静
置又は攪拌し、分子量10,000〜30,000とりわけ分子量1
6,000付近のタンパク質画分、好ましくは分子量30,000
〜40,000とりわけ分子量33,000付近のタンパク質画分及
び分子量50,000〜60,000とりわけ分子量52,000〜57,000
のタンパク質画分も溶出させ、その後静置もしくは遠心
などの方法で分離して、本発明のアレルゲン低減化米調
製物を得る。この操作を必要であれば数回繰り返して行
う。普通１〜３回程度でよい。また、この操作は回分式
ではなく連続式に実施することも当然可能である。なお
塩の水溶液で溶出後、水洗して塩分を除去あるいは更に
厳密に水溶出アレルゲンの除去をすることもできる。目
的とするタンパク質画分が十分に溶出され、アレルゲン
低減化米調製物が得られたかどうかは、電気泳動法、高
速液体クロマトグラフィーなどで、除去すべきタンパク
質画分の存在を確認して判定することができる。更に厳
密に測定するには、免疫学的分析法、例えばエンザイム
イムノアッセイ法、ラジオイムノアッセイ法などの方法
によればよい。
【００１７】こうして得られた本発明のアレルゲン低減
化米調製物は、用途によって、そのまま利用するか、あ
るいは乾燥し、粉末化あるいは粒状にして用いる。乾燥
方法は食品の乾燥に用いられる方法であればどのような
方法でもよい。例えば、噴霧、真空、熱風、凍結、天
日、電磁波、あるいはこれらを組み合わせた乾燥方法な
どが挙げられる。粉末化も例えば、ロール式、臼杵式、
衝撃式などの方法が挙げられる。
化米調製物は、用途によって、そのまま利用するか、あ
るいは乾燥し、粉末化あるいは粒状にして用いる。乾燥
方法は食品の乾燥に用いられる方法であればどのような
方法でもよい。例えば、噴霧、真空、熱風、凍結、天
日、電磁波、あるいはこれらを組み合わせた乾燥方法な
どが挙げられる。粉末化も例えば、ロール式、臼杵式、
衝撃式などの方法が挙げられる。
【００１８】本発明で得られた低アレルゲン化米調製物
はそのまま炊飯して用いるか、あられ、煎餅などの米
菓、モチ、ビーフン、ぎゅうひなど、あるいは酒や酢の
原料として通常のコメと同様の加工用途にも用いること
ができ、通常の米と同等の美味な調理品を得ることがで
きる。更にアレルギー患者用のその他の食品原料の一部
として併用することもでき、例えば低アレルゲン化米を
含むマカロニ、スパゲッティ、うどん、そば、パン、ク
ッキー、菓子などの製造に利用することができる。もち
ろん、人間だけでなく動物の飼料例えばペットフードと
して用いても何ら差し支えない。従ってその用途及び用
法は特に制限されるものではない。
はそのまま炊飯して用いるか、あられ、煎餅などの米
菓、モチ、ビーフン、ぎゅうひなど、あるいは酒や酢の
原料として通常のコメと同様の加工用途にも用いること
ができ、通常の米と同等の美味な調理品を得ることがで
きる。更にアレルギー患者用のその他の食品原料の一部
として併用することもでき、例えば低アレルゲン化米を
含むマカロニ、スパゲッティ、うどん、そば、パン、ク
ッキー、菓子などの製造に利用することができる。もち
ろん、人間だけでなく動物の飼料例えばペットフードと
して用いても何ら差し支えない。従ってその用途及び用
法は特に制限されるものではない。
【００１９】次に、本発明の効果を確認する検査方法に
ついて以下の実験例で説明する。実験例１ 低グロブリン米（コメタンパク質中のグロブリン含量４
％；８５ＫＧ４系統のイネより得られたコメ）の粉砕物
１ｇに１０mlの１Ｍ−ＮａＣｌを含む７６mMトリスクエ
ン酸緩衝液（pH７．４）を加え、１４時間、４℃にて攪
拌した後、２０分間遠心分離（10000 ×Ｇ）し、上清
（抽出液）を分離した。抽出液は０．１５mMＮａＣｌを
含む２０mMりん酸緩衝液（pH７．４）に対してポアサイ
ズ分子量3500カットの透析チューブを用いて４℃にて２
４時間透析した。透析後の抽出液を凍結乾燥して塩抽出
物を得た（以下、抽出物Ａとする）。なお、本実験例で
用いた前記の８５ＫＧ４低グロブリン系統のイネは以下
の方法で作出した。即ち、コシヒカリ（稲の品種）の種
子をγ線照射処理して突然変異を誘発させ、得られた種
子を栽培し米を得た。こうして得られた米をタンパク質
分析し、グロブリンとりわけ分子量16,000のグロブリン
含量の低い目的の変異品種を得た。
ついて以下の実験例で説明する。実験例１ 低グロブリン米（コメタンパク質中のグロブリン含量４
％；８５ＫＧ４系統のイネより得られたコメ）の粉砕物
１ｇに１０mlの１Ｍ−ＮａＣｌを含む７６mMトリスクエ
ン酸緩衝液（pH７．４）を加え、１４時間、４℃にて攪
拌した後、２０分間遠心分離（10000 ×Ｇ）し、上清
（抽出液）を分離した。抽出液は０．１５mMＮａＣｌを
含む２０mMりん酸緩衝液（pH７．４）に対してポアサイ
ズ分子量3500カットの透析チューブを用いて４℃にて２
４時間透析した。透析後の抽出液を凍結乾燥して塩抽出
物を得た（以下、抽出物Ａとする）。なお、本実験例で
用いた前記の８５ＫＧ４低グロブリン系統のイネは以下
の方法で作出した。即ち、コシヒカリ（稲の品種）の種
子をγ線照射処理して突然変異を誘発させ、得られた種
子を栽培し米を得た。こうして得られた米をタンパク質
分析し、グロブリンとりわけ分子量16,000のグロブリン
含量の低い目的の変異品種を得た。
【００２０】抽出後のコメ残渣は１４時間１ＭＮａＣｌ
を含む７６mMトリスクエン酸緩衝液（pH７．４）２０ml
にて攪拌し更に２時間水洗した。この時上清のタンパク
質濃度は１４μｇ／mlであった（合計１０ml）。コメ残
渣を凍結乾燥した後、凍結乾燥体０．８ｇに１０mlの尿
素抽出剤（７Ｍ尿素及び２０mM２−メルカプトエタノー
ルを含む７６mMトリスクエン酸緩衝液）を加え１０分間
室温にて攪拌した。２０分間の遠心分離（10000 ×Ｇ）
で上清（尿素抽出物）を分離し、塩抽出物と同様に精製
した（以下、抽出物Ｂとする）。
を含む７６mMトリスクエン酸緩衝液（pH７．４）２０ml
にて攪拌し更に２時間水洗した。この時上清のタンパク
質濃度は１４μｇ／mlであった（合計１０ml）。コメ残
渣を凍結乾燥した後、凍結乾燥体０．８ｇに１０mlの尿
素抽出剤（７Ｍ尿素及び２０mM２−メルカプトエタノー
ルを含む７６mMトリスクエン酸緩衝液）を加え１０分間
室温にて攪拌した。２０分間の遠心分離（10000 ×Ｇ）
で上清（尿素抽出物）を分離し、塩抽出物と同様に精製
した（以下、抽出物Ｂとする）。
【００２１】次に、タンパク質量２mgに相当する抽出物
Ａ及び抽出物Ｂにそれぞれ最終濃度でＳＤＳ１％、２−
メルカプトエタノール１％、トリス塩酸緩衝液１mM、グ
リセリン２０％となるように、それぞれを加え、蒸留水
で１mlとし電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）試料を調製し
た。両試料をそれぞれ１００℃にて２分間加熱処理し
０．０５％となるようにＢＰＢ（ブロモフェノールブル
ー）を加えた。１０〜２０％グラジェントＳＤＳ−ポリ
アクリルアミドゲルに試料５μｌを加え４０mAにて７０
分間電気泳動して抽出物Ａ及び抽出物Ｂをそれぞれ分画
した。次に、抽出物Ａ及び抽出物Ｂの分画成分をミリポ
ア社製イモビロンＰ膜に８０mA定電流にて一時間、電気
泳動的に転写した。転写膜を５％スキムミルクでブロッ
キングした後、コメアレルギー患者血清及びコメアレル
ギーを持たないコントロール成人血清を１４時間室温に
て反応させた。膜を洗浄した後、ビオチン結合抗ヒトＩ
ｇＥ抗体（タゴ社製）の５００倍希釈液、ペルオキシダ
ーゼを結合したアビジン（1000倍希釈液）をそれぞれ２
時間３７℃にて反応させ膜に結合したＩｇＥ抗体を酵素
標識化した。
Ａ及び抽出物Ｂにそれぞれ最終濃度でＳＤＳ１％、２−
メルカプトエタノール１％、トリス塩酸緩衝液１mM、グ
リセリン２０％となるように、それぞれを加え、蒸留水
で１mlとし電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）試料を調製し
た。両試料をそれぞれ１００℃にて２分間加熱処理し
０．０５％となるようにＢＰＢ（ブロモフェノールブル
ー）を加えた。１０〜２０％グラジェントＳＤＳ−ポリ
アクリルアミドゲルに試料５μｌを加え４０mAにて７０
分間電気泳動して抽出物Ａ及び抽出物Ｂをそれぞれ分画
した。次に、抽出物Ａ及び抽出物Ｂの分画成分をミリポ
ア社製イモビロンＰ膜に８０mA定電流にて一時間、電気
泳動的に転写した。転写膜を５％スキムミルクでブロッ
キングした後、コメアレルギー患者血清及びコメアレル
ギーを持たないコントロール成人血清を１４時間室温に
て反応させた。膜を洗浄した後、ビオチン結合抗ヒトＩ
ｇＥ抗体（タゴ社製）の５００倍希釈液、ペルオキシダ
ーゼを結合したアビジン（1000倍希釈液）をそれぞれ２
時間３７℃にて反応させ膜に結合したＩｇＥ抗体を酵素
標識化した。
【００２２】一方、DAB(3,3-diamino-benzidine tetrah
ydrochloride）２５mgを５０mMトリス塩酸緩衝液（pH
７．６）１００mlに溶かし、過酸化水素（３０％）５０
μｌを加えて発色液を調製した。この発色液を転写膜に
加えＩｇＥ抗体の検出を行った。結果を示した表１及び
表２から明らかなように、患者血清（血清Ｎｏ．１〜Ｎ
ｏ．７）は抽出物Ａと強く反応した（表１）。これに対
して、患者血清は抽出物Ｂとほとんど反応せず、健常人
血清（血清Ｎｏ．8 〜Ｎｏ．１０）と差が認められず、
患者血清が特異的に認識する分画成分は抽出物Ｂには認
められなかった（表２）。
ydrochloride）２５mgを５０mMトリス塩酸緩衝液（pH
７．６）１００mlに溶かし、過酸化水素（３０％）５０
μｌを加えて発色液を調製した。この発色液を転写膜に
加えＩｇＥ抗体の検出を行った。結果を示した表１及び
表２から明らかなように、患者血清（血清Ｎｏ．１〜Ｎ
ｏ．７）は抽出物Ａと強く反応した（表１）。これに対
して、患者血清は抽出物Ｂとほとんど反応せず、健常人
血清（血清Ｎｏ．8 〜Ｎｏ．１０）と差が認められず、
患者血清が特異的に認識する分画成分は抽出物Ｂには認
められなかった（表２）。
【００２３】実験例２ 実験例１で用いた低グロブリン米粉砕物１ｇに、前記実
験例１に記載の尿素抽出剤１０mlを加え、前記実験例１
と同様の方法にてコメタンパク質の抽出、精製を行い、
抽出物Ｃを得た。前記実験例１の抽出物Ｂ及び抽出物Ｃ
のそれぞれ１ｇを尿素抽出剤１０mlに溶解し、その溶液
１００μｌを５０％グリセリンを含む０．５Ｍ食塩水溶
液９００μｌに加えて、１４時間４℃にて攪拌した。遠
心分離（10,000×Ｇ）を２０分間行った後、上清を得て
それぞれ抽出液Ｂ及び抽出液Ｃとした。
験例１に記載の尿素抽出剤１０mlを加え、前記実験例１
と同様の方法にてコメタンパク質の抽出、精製を行い、
抽出物Ｃを得た。前記実験例１の抽出物Ｂ及び抽出物Ｃ
のそれぞれ１ｇを尿素抽出剤１０mlに溶解し、その溶液
１００μｌを５０％グリセリンを含む０．５Ｍ食塩水溶
液９００μｌに加えて、１４時間４℃にて攪拌した。遠
心分離（10,000×Ｇ）を２０分間行った後、上清を得て
それぞれ抽出液Ｂ及び抽出液Ｃとした。
【００２４】コメアレルギー患者を腹臥位にして片腕の
全体をアルコール綿で消毒し、自然乾燥した後、抗原液
として抽出液Ｂ、抽出液Ｃ及びコントロール（５０％グ
リセリン、０．５ＭＮａＣｌ溶液）を１滴づつ滴下し
た。消毒した針を滴下した抗原液を通して斜めの方向に
皮内に突き刺し、２０分間後に膨疹とその回りの発赤の
有無を判定した。判定は、Sheldon J.M., らの方法（A
manual of clinical Allergy 159 W.B.Saunders Compan
y Philadelphia and London, 1967)に準じた。即ち、コ
ントロールと同じ場合は陰性（−）、発赤が認められる
かどうか判定が困難な場合は（±）、発赤が認められる
が、直径２１mm以下の場合は（＋）、２１mm以上の発赤
があり、膨疹は無い場合は（＋＋）、そして発赤、膨疹
の両方が認められる場合は（＋＋＋）とした。結果を表
３に示す。この表３から明らかなように、抽出物Ｂで
は、アレルゲンとなるタンパク質は認められず、抽出物
Ｃには認められた。即ち、塩水処理したコメにはアレル
ゲンとなる分子量16,000のタンパク質がないことを示し
ている。
全体をアルコール綿で消毒し、自然乾燥した後、抗原液
として抽出液Ｂ、抽出液Ｃ及びコントロール（５０％グ
リセリン、０．５ＭＮａＣｌ溶液）を１滴づつ滴下し
た。消毒した針を滴下した抗原液を通して斜めの方向に
皮内に突き刺し、２０分間後に膨疹とその回りの発赤の
有無を判定した。判定は、Sheldon J.M., らの方法（A
manual of clinical Allergy 159 W.B.Saunders Compan
y Philadelphia and London, 1967)に準じた。即ち、コ
ントロールと同じ場合は陰性（−）、発赤が認められる
かどうか判定が困難な場合は（±）、発赤が認められる
が、直径２１mm以下の場合は（＋）、２１mm以上の発赤
があり、膨疹は無い場合は（＋＋）、そして発赤、膨疹
の両方が認められる場合は（＋＋＋）とした。結果を表
３に示す。この表３から明らかなように、抽出物Ｂで
は、アレルゲンとなるタンパク質は認められず、抽出物
Ｃには認められた。即ち、塩水処理したコメにはアレル
ゲンとなる分子量16,000のタンパク質がないことを示し
ている。
【００２５】実験例３ 低グロブリン米の代わりに市販精白米の粉を用いた以外
は、実験例１と同じ方法で処理し、得られた塩水抽出液
を抽出液Ｅ、塩水抽出残渣の尿素抽出液を抽出液Ｆとし
た。結果を示した表４及び表５から明らかなように、患
者血清（血清Ｎｏ．１〜Ｎｏ．７）は抽出物Ｅと強く反
応し、特に、分子量３万以下に分画されたタンパク質成
分と強く反応した（表４）。更に、患者血清（血清Ｎ
ｏ．１〜Ｎｏ．７）は抽出物Ｆの分子量３万以下に分画
されたタンパク質成分、特に分子量16,000に分画された
タンパク質成分とは７名中２名ほど反応した。分子量3
0,000〜40,000あるいは50,000〜70,000の分画タンパク
質とは反応しており、健常人血清との差異が認められ、
患者血清が特異的に認識する分画成分が抽出物Ｆにも認
められた（表５）。
は、実験例１と同じ方法で処理し、得られた塩水抽出液
を抽出液Ｅ、塩水抽出残渣の尿素抽出液を抽出液Ｆとし
た。結果を示した表４及び表５から明らかなように、患
者血清（血清Ｎｏ．１〜Ｎｏ．７）は抽出物Ｅと強く反
応し、特に、分子量３万以下に分画されたタンパク質成
分と強く反応した（表４）。更に、患者血清（血清Ｎ
ｏ．１〜Ｎｏ．７）は抽出物Ｆの分子量３万以下に分画
されたタンパク質成分、特に分子量16,000に分画された
タンパク質成分とは７名中２名ほど反応した。分子量3
0,000〜40,000あるいは50,000〜70,000の分画タンパク
質とは反応しており、健常人血清との差異が認められ、
患者血清が特異的に認識する分画成分が抽出物Ｆにも認
められた（表５）。
【００２６】実験例４ 市販精白米粉砕物１ｇに実験例１記載の尿素抽出剤１０
mlを加え、実験例１と同様の方法でコメタンパク質の抽
出、精製を行い抽出物Ｇを得た。抽出物Ｆ及び抽出物Ｇ
を用いて実験例２と同様に判定を行った。結果を表６に
示す。
mlを加え、実験例１と同様の方法でコメタンパク質の抽
出、精製を行い抽出物Ｇを得た。抽出物Ｆ及び抽出物Ｇ
を用いて実験例２と同様に判定を行った。結果を表６に
示す。
【００２７】
【実施例】以下、実施例によって本発明を具体的に説明
するが、これらは本発明の範囲を限定するものではな
い。実施例１ 低グロブリン米（前記実験例１で使用した８５ＫＧ４低
グロブリン系統のイネより得られたコメ；グロブリン含
量３％）５kgを３０リットルの容器に入れ、１ＭＮａＣ
ｌ溶液１８kgを加え、４℃の品温で２４時間浸漬及び時
々攪拌し、放置後、５００μｍの節目の金網でコメと抽
出液を分離した。この操作を同様に２回繰り返した。次
いで、得られたコメに水２０リットルを加えて２時間放
置し、上清を除去した。これを再度繰り返して得たコメ
を熱風乾燥機で乾燥し、本発明の低アレルゲン米４．９
kgを得た。この低アレルゲン米をコメアレルギー患者の
皮内反応で検査したところ陰性２３名、陽性１名であっ
た。ただし陰性とは（−）、陽性とは（＋＋）以上をい
う。また、コメアレルギー患者８名に１日８０ｇの量で
１週間摂取させたところ、特に摂取させたことに起因す
る発症は認められなかった。
するが、これらは本発明の範囲を限定するものではな
い。実施例１ 低グロブリン米（前記実験例１で使用した８５ＫＧ４低
グロブリン系統のイネより得られたコメ；グロブリン含
量３％）５kgを３０リットルの容器に入れ、１ＭＮａＣ
ｌ溶液１８kgを加え、４℃の品温で２４時間浸漬及び時
々攪拌し、放置後、５００μｍの節目の金網でコメと抽
出液を分離した。この操作を同様に２回繰り返した。次
いで、得られたコメに水２０リットルを加えて２時間放
置し、上清を除去した。これを再度繰り返して得たコメ
を熱風乾燥機で乾燥し、本発明の低アレルゲン米４．９
kgを得た。この低アレルゲン米をコメアレルギー患者の
皮内反応で検査したところ陰性２３名、陽性１名であっ
た。ただし陰性とは（−）、陽性とは（＋＋）以上をい
う。また、コメアレルギー患者８名に１日８０ｇの量で
１週間摂取させたところ、特に摂取させたことに起因す
る発症は認められなかった。
【００２８】実施例２ 低グロブリン米（８５ＫＧ４系統のイネより得られた精
白米：グロブリン含量３％）２kgを２０リットルの容器
に入れ１ＭＮａＨＣＯ3 溶液１５kgを加え、更にデカグ
リセリンモノオレート２５ｇを加えてから、１３℃の品
温で２４時間攪拌した。以後の操作は実施例１と同様の
処理をした。この低アレルゲン米をコメアレルギー患者
の皮内反応で検査したところ陰性１２名、陽性０名であ
った。ただし陰性とは（−）、陽性とは（＋＋）以上を
いう。また、コメアレルギー患者５名に１日５０ｇの量
で１週間摂取させたところ、特に摂取させたことに起因
する発症は認められなかった。
白米：グロブリン含量３％）２kgを２０リットルの容器
に入れ１ＭＮａＨＣＯ3 溶液１５kgを加え、更にデカグ
リセリンモノオレート２５ｇを加えてから、１３℃の品
温で２４時間攪拌した。以後の操作は実施例１と同様の
処理をした。この低アレルゲン米をコメアレルギー患者
の皮内反応で検査したところ陰性１２名、陽性０名であ
った。ただし陰性とは（−）、陽性とは（＋＋）以上を
いう。また、コメアレルギー患者５名に１日５０ｇの量
で１週間摂取させたところ、特に摂取させたことに起因
する発症は認められなかった。
【００２９】実施例３ 実施例１で用いた低グロブリン米５kgを３０リットルの
容器に入れ、１ＭＮａＣｌ溶液１０リットル及びリゾレ
シチン１ｇを入れ、４℃の品温で３０分間攪拌し、実施
例１と同様に上清を分離した。更に、得られたコメに品
温３０℃の０．５ＭＣａＣｌ2 と０．５ＭＮａ2 ＳＯ4
の混合溶液２０リットル及びタンパク分解酵素（プロナ
ーゼ）２０ｇを加え、８０mmHgで３０分間脱気し、３０
分間静置した後、塩水の品温を７℃まで冷却し時々攪拌
しながら３０時間放置した。その後ふるいで塩水溶液と
分離した。次いで、ふるいの上から塩分がなくなるまで
水をかけた。得られた米を乾燥機に入れ４０℃の温風で
乾燥し、本発明の低アレルゲン米４．７kgを得た。この
低アレルゲン米をコメアレルギー患者の皮内反応で検査
したところ陰性１５名、陽性０名であった。ただし陰性
とは（−）、陽性とは（＋＋）以上をいう。また、コメ
アレルギー患者８名に１日５０ｇの量で１１日間摂取さ
せたところ、特に摂取させたことに起因する発症は認め
られなかった。
容器に入れ、１ＭＮａＣｌ溶液１０リットル及びリゾレ
シチン１ｇを入れ、４℃の品温で３０分間攪拌し、実施
例１と同様に上清を分離した。更に、得られたコメに品
温３０℃の０．５ＭＣａＣｌ2 と０．５ＭＮａ2 ＳＯ4
の混合溶液２０リットル及びタンパク分解酵素（プロナ
ーゼ）２０ｇを加え、８０mmHgで３０分間脱気し、３０
分間静置した後、塩水の品温を７℃まで冷却し時々攪拌
しながら３０時間放置した。その後ふるいで塩水溶液と
分離した。次いで、ふるいの上から塩分がなくなるまで
水をかけた。得られた米を乾燥機に入れ４０℃の温風で
乾燥し、本発明の低アレルゲン米４．７kgを得た。この
低アレルゲン米をコメアレルギー患者の皮内反応で検査
したところ陰性１５名、陽性０名であった。ただし陰性
とは（−）、陽性とは（＋＋）以上をいう。また、コメ
アレルギー患者８名に１日５０ｇの量で１１日間摂取さ
せたところ、特に摂取させたことに起因する発症は認め
られなかった。
【００３０】比較例１ 市販の精白米（ササニシキ）２kgを用いた以外は実施例
３と同様の方法で処理し、処理した米１．８kgを得た。
この処理米をコメアレルギー患者の皮内反応で検査した
ところ陰性１４名、陽性６名であった。
３と同様の方法で処理し、処理した米１．８kgを得た。
この処理米をコメアレルギー患者の皮内反応で検査した
ところ陰性１４名、陽性６名であった。
【００３１】加工食品製造例 実施例１及び比較例１で得たコメから常法によって煎餅
を製造した。即ち、米を蒸煮してから練り、成形して冷
凍してから乾燥し、続いて焼成し、更に醤油掛けを行
い、乾燥させて煎餅とした。こうして得られた煎餅の歯
ざわり、焼き色、風味を比較した結果を表７に示す。即
ち、実施例１で得たコメで製造した煎餅の方が優れてい
た。
を製造した。即ち、米を蒸煮してから練り、成形して冷
凍してから乾燥し、続いて焼成し、更に醤油掛けを行
い、乾燥させて煎餅とした。こうして得られた煎餅の歯
ざわり、焼き色、風味を比較した結果を表７に示す。即
ち、実施例１で得たコメで製造した煎餅の方が優れてい
た。
【００３２】
【発明の効果】本発明によれば、アレルゲンタンパク質
が効率良く除去され、且つコメ本来の品質が損なわれる
ことなくアレルゲン低減化米調製物を提供することがで
き、コメのアレルギー患者にとり、多大の利益をもたら
すものである。
が効率良く除去され、且つコメ本来の品質が損なわれる
ことなくアレルゲン低減化米調製物を提供することがで
き、コメのアレルギー患者にとり、多大の利益をもたら
すものである。
【００３３】
【表１】
【００３４】
【表２】
【００３５】
【表３】
【００３６】
【表４】
【００３７】
【表５】
【００３８】
【表６】
【００３９】
【表７】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 飯田 修一 茨城県那珂郡大宮町3101−11 (72)発明者 椿 和文 東京都荒川区東尾久７丁目２番35号 旭電 化工業株式会社内 (72)発明者 鈴木 隆 東京都荒川区東尾久７丁目２番35号 旭電 化工業株式会社内
Claims (6)
- 【請求項１】 グロブリン含量の低い米に含まれる分子
量12,000〜30,000のタンパク質が実質的に除去された、
米調製物。 - 【請求項２】 グロブリン含量の低い米を水又は塩水溶
液で処理することを特徴とする、グロブリン含量の低い
米に含まれる分子量12,000〜30,000のタンパク質が実質
的に除去された米調製物の製造方法。 - 【請求項３】 グロブリン含量の低い米に含まれる分子
量12,000〜30,000のタンパク質が実質的に除去された米
調製物を使用して得た米加工食品。 - 【請求項４】 グロブリン含量の低い米が、米に含まれ
るタンパク質中のグロブリン含量が１０％以下の米であ
る請求項１記載の米調製物。 - 【請求項５】 グロブリン含量の低い米が、米に含まれ
るタンパク質中のグロブリン含量が１０％以下の米であ
る請求項２記載の米調製物の製造方法。 - 【請求項６】 グロブリン含量の低い米が、米に含まれ
るタンパク質中のグロブリン含量が１０％以下の米であ
る請求項３記載の米加工食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04103643A JP3126481B2 (ja) | 1992-03-30 | 1992-03-30 | アレルゲン低減化された米調製物、その製造方法及びそれを含む加工食品 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04103643A JP3126481B2 (ja) | 1992-03-30 | 1992-03-30 | アレルゲン低減化された米調製物、その製造方法及びそれを含む加工食品 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05292906A true JPH05292906A (ja) | 1993-11-09 |
| JP3126481B2 JP3126481B2 (ja) | 2001-01-22 |
Family
ID=14359456
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP04103643A Expired - Lifetime JP3126481B2 (ja) | 1992-03-30 | 1992-03-30 | アレルゲン低減化された米調製物、その製造方法及びそれを含む加工食品 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3126481B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0987133A (ja) * | 1995-09-21 | 1997-03-31 | Techno-Bull:Kk | 老化防止化粧料 |
| JP2012115197A (ja) * | 2010-11-30 | 2012-06-21 | National Agriculture & Food Research Organization | 麹等カビによる前発酵工程を含む米粉パンの製法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6056995B2 (ja) * | 2016-02-08 | 2017-01-11 | シヤチハタ株式会社 | ボルト・ナット用マーキング用具 |
-
1992
- 1992-03-30 JP JP04103643A patent/JP3126481B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0987133A (ja) * | 1995-09-21 | 1997-03-31 | Techno-Bull:Kk | 老化防止化粧料 |
| JP2012115197A (ja) * | 2010-11-30 | 2012-06-21 | National Agriculture & Food Research Organization | 麹等カビによる前発酵工程を含む米粉パンの製法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3126481B2 (ja) | 2001-01-22 |
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