JPH0545240B2 - - Google Patents
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- JPH0545240B2 JPH0545240B2 JP15474984A JP15474984A JPH0545240B2 JP H0545240 B2 JPH0545240 B2 JP H0545240B2 JP 15474984 A JP15474984 A JP 15474984A JP 15474984 A JP15474984 A JP 15474984A JP H0545240 B2 JPH0545240 B2 JP H0545240B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reagent
- acetylcholine
- reagents
- substrate
- absorbance
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は、コリンエステラーゼ（以下ChEと略
す。）定量用試薬に関するものである。 現在臨床検査室などで用いられているChEの定
量方法には、 (1) アセチルコリンを基質として、PH変化を測定
する方法。 (2) 基質にチオコリンエステルを用い、遊離する
SH基を測定する方法。 (3) ベンゾイルコリンなどを基質とし、遊離する
コリンをコリンオキシターゼを用い、H2O2と
して測定する方法。 などがある。これらのうち、(1)の方法が古くから
検査室に取り入れられている標準的な方法である
が、至適PHを維持できないとか、PH変化が必ずし
も指示薬の変色程度と平行しないことなどのため
に精度が悪く、(2)、(3)の方法にとつてかわられつ
つあるのが現状である。しかし、(2)では共存SH
化合物による誤差、(3)ではH2O2定量にまつわる
諸問題や発色系のフエノールによる妨害などの問
題があり、現在のところいずれも満足できるまで
に至つていない。 このような観点から、特開昭58−155099号公報
には、アセチルコリン、酢酸キナーゼ、アデノシ
ン三リン酸を含有するChE定量用試薬が提案され
ている。この試薬を説明すると、基質としてアセ
チルコリンを使用し、生体試料中のChEを作用さ
せると、基質は酢酸とコリンとに分解する。 ここに、酢酸キナーゼを作用させるとアデノシ
ン三リン酸（以下ATPという。）を補基質として
酢酸は、アセチルリン酸に変化する。この反応式
を下記に示す。 アセチルコリンChE −−−→ 酢酸＋コリン 酢酸＋ATP酢酸キナーゼ −−−−−−→ アセチルリン酸 ＋アデノシン二リン酸 この酢酸キナーゼの作用は、酢酸のみに基質特
異性を有するものであつて、他の有機酸、無機酸
などを共存していても作用するものではない。次
いで、ここで生成したアセチルリン酸又はアデノ
シン二リン酸（以下ADPという。）を定量すれば
ChEの定量は完了する。この際、アセチルリン酸
は適当な色源体と反応させれば、可視部の比色法
で定量可能であり、ADPはピルビン酸キナーゼ
と乳酸脱水素酵素との共役酵素系を使用すること
により定量可能である。特に、後者の方法は全反
応系を酵素系として行うものであり、共存物質の
影響を受けにくく、極めて有利な方法である。こ
の場合の反応式を下記に示す。 ADP＋ホスホエノールピルビン酸 ピルビン酸キナーゼ −−−−−−−−−→ ATP＋ピルビン酸 ピルビン酸 ＋NADH乳酸脱水素酵素 −−−−−−−→ 乳酸＋NAD+ （ただし、NADHは還元型β−ニコチンアミド
−アデニン・ジヌクレオド、NAD+は、酸化型β
−ニコチンアミド−アデニン・ジヌクレオドを表
す。） このNADHの紫外部（340nｍ）の吸光度を測
定することにより、極めて容易に高精度の定量を
行うことができる。また、ピルビン酸キナーゼの
作用により生成ADPをATPに再生することがで
きるので、酢酸キナーゼの酢酸に対する作用が増
強され、極めて高感度の測定が可能となる。 この試薬を実際的に製品化するにあたつては、
酢酸キナーゼ、ATP、NADHを主成分とする試
薬（以下第一試薬と呼ぶ。）と、基質であるアセ
チルコリンを主成分とする試薬（以下第二試薬と
呼ぶ。）を各々調整し、ChE測定の両試薬を混合
しており、第一試薬のPHはChEの至適PHである
7.0〜8.0の間に管理されており、また第二試薬の
PHは特に管理されておらず、中性付近である。 この場合には、第一試薬においては、NADH
に由来する340nｍにおける吸光度が、試薬保存
中に低下する傾向があり、また第二試薬において
は、保存中にアセチルコリンの自然分解が起こる
傾向があつた。このアセチルコリンの自然分解が
起こると、酢酸が生じ、第一試薬と第二試薬とを
混合した際に反応が進行し、340nｍにおける吸
光度が低下することになる。 すなわち、上記試薬の測定原理は、最終的に
340nｍにおける吸光度の減少速度を測定するも
のであるから、第一試薬と第二試薬との混合時の
第一試薬の吸光度及び第一試薬と第二試薬とを混
合したときの吸光度が少なくとも1.0であること
が望まれており、340nｍにおける吸光度は通常
の分光光度計の性能上2.0が限界であるので、2.0
の吸光度が1.0付近まで低下する期間が、調製後
の試薬の使用期間ということになり、前記した試
薬は、この点が十分でなく、一度の調製でできる
だけ長期間使用可能な試薬が望まれている。 本発明者らは、このような要求を満足すべく鋭
意研究を重ねた結果、第一試薬、第二試薬のそれ
ぞれのPHを特定の範囲に管理することにより、両
試薬の調製後の安定性が飛躍的に向上することを
見出し、本発明に到達したのである。 すなわち、本発明は、酢酸キナーゼ、ピルビン
酸キナーゼ、乳酸脱水素酵素、アデノシン三リン
酸、ホスホエノールピルビン酸、還元型β−ニコ
チンアミド−アデニン・ジヌクレオチド、マグネ
シウム塩を含有する第一試薬とアセチルコリンを
含有する第二試薬とからなり、かつ第一試薬のPH
が8.0〜10.0であり、第二試薬のPHが3.5〜5.5であ
ることを特徴とするChE定量用試薬である。 本発明の試薬は、例えば以下のように構成され
ている。 (1) 酵素試薬（凍結乾燥品） 酢酸キナーゼ、ピルビン酸キナーゼ、乳酸脱
水素酵素、ATP、ホスホエノールピルビン酸、
NADH (2) 基質剤（粉末） アセチルコリン、硫酸アンモニウム (3) 酵素試薬溶解液 緩衝液、マグネシウム塩、カリウム塩、防腐
剤 (4) 基質剤溶解液 緩衝液、防腐剤 第一試薬、第二試薬を調製するには、(3)で(1)
を、(4)で(2)を溶解することによつて行えばよく、
ChE測定時に第一試薬、第二試薬を所定の比率で
混合すればよい。 本発明において、第一試薬、第二試薬調製後の
PHは前者が8.0〜10.0に、後者が3.5〜5.5に管理す
ることが必要である。 このPHからはずれると、第一試薬においては、
340nｍにおける吸光度の低下が著しく、また第
二試薬においては、アセチルコリンの自然分解が
多く観察されるのである。この第一試薬のPHを
8.0〜10.0に、第二試薬のPHを3.5〜5.5に管理する
には、例えば次の緩衝剤を用いて行うことができ
る。第一試薬において使用する乾燥剤としては、
例えばトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
−HCl、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタ
ン−マレイン酸、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペ
ラジン−N′−エタンスルホン酸、−NaOH、グリ
シン−KOH、トリエタノールアミン塩酸−
NaOHなど通常の使用範囲がPH8.0〜10.0のもの
であればよい。 また、第二試薬に使用する緩衝剤としては、例
えば、フタル酸水素カリウム−HCl、クエン酸−
クエン酸ナトリウム、マレイン酸−NaOH、グ
リシン−HCl、３，3′−ジメチルグルタル酸−
NaOH、乳酸−乳酸ナトリウムなど通常の使用
範囲がPH3.5〜5.5のものであればよい。 その他の試薬の使用量としては、アセチルコリ
ン20〜200ｍＭ、酢酸キナーゼ５〜100u／ml、
ATP1.5〜15ｍＭ、ピルビン酸キナーゼ３〜
50u／ml、乳酸脱水素酵素１〜20u／ml、
NADH0.1〜1.0ｍＭ、NADH0.1〜1.0ｍＭ程度が
適当である。 次にChEを定量するには、一定の比率で第一試
薬と第二試薬とを混合した後に目的物質である
ChEの至適PHである7.0〜8.0の間になるように第
一試薬と第二試薬を混合すればよい。 そのときの第一試薬と第二試薬の使用時の液比
は、使用する自動分析機によつて異なるが、好ま
しくは第一試薬：第二試薬が２：１〜10：１（容
量比、以下同じ。）であり、さらに好ましくは
２：１〜８：１であり、最も好ましくは２：１〜
５：１である。また、第一試薬、第二試薬の緩衝
剤の濃度としては、例えば第一試薬、第二試薬の
液比を２：１〜５：１、第一試薬のPHが8.0〜
10.0、第二試薬のPHが3.5〜5.5であり、さらに第
一試薬、第二試薬を混合した時のPHが7.0〜8.0の
間であるという条件を設定すれば、簡単な実験に
よつて求めることができる。例えば、第一試薬に
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン−マレ
イン酸を、第二試薬にクエン酸−NaOHを用い
た場合、前者が25〜70ｍＭ、後者が90〜130ｍＭ
とすればよい。 次に、本発明を実施例により具体的に説明す
る。 実施例 １ (1) 酵素試薬（凍結乾燥品） 酢酸キナーゼ ２×104ユニツト ピルビン酸キナーゼ １×104ユニツト 乳酸脱水素酵素 １×103ユニツト ATP １ｇｒ ホスホエノールピルビン酸 0.05ｇｒ NADH 0.14ｇｒ (2) 基質剤（粉末） アセチルコリン 1.4ｇｒ 硫酸アンモニウム 0.33ｇｒ (3) 酵素試薬溶解液 トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン−
HCl（PH9.0） 30ｍＭ／Ｌ 硫酸マグネシウム 15ｍＭ／Ｌ 塩化カリウム 50ｍＭ／Ｌ アジ化ナトリウム 10ｍＭ／Ｌ (4) 基質剤溶解液 マレイン酸−NaOH（PH4.5） 95ｍＭ／Ｌ アジ化ナトリウム ５ｍＭ／Ｌ 酵素試薬(1)を(3)の酵素試薬溶解液100mlで溶解
して第一試薬を調製し、また基質剤(2)を(4)の基質
剤溶解液25mlで溶解して第二試薬を調製した。両
試薬を10℃恒温槽中に７日間放置し、第一試薬の
340nｍにおける吸光度を調製直後ものと比較し
た。 また、７日間放置後の第一試薬、第二試薬を４
対１の液量比で混合した時、アセチルコリンの分
解で生じた酢酸による340nｍにおける初期吸光
度の低下を測定し、同じく調製直後のものと比較
した。その結果を表１に示す。 なお、調製後の第一試薬、第二試薬のPHは、そ
れぞれ溶解液の緩衝剤のPHである9.0、4.5とな
り、両試薬混合後のPHは7.5であつた。
す。）定量用試薬に関するものである。 現在臨床検査室などで用いられているChEの定
量方法には、 (1) アセチルコリンを基質として、PH変化を測定
する方法。 (2) 基質にチオコリンエステルを用い、遊離する
SH基を測定する方法。 (3) ベンゾイルコリンなどを基質とし、遊離する
コリンをコリンオキシターゼを用い、H2O2と
して測定する方法。 などがある。これらのうち、(1)の方法が古くから
検査室に取り入れられている標準的な方法である
が、至適PHを維持できないとか、PH変化が必ずし
も指示薬の変色程度と平行しないことなどのため
に精度が悪く、(2)、(3)の方法にとつてかわられつ
つあるのが現状である。しかし、(2)では共存SH
化合物による誤差、(3)ではH2O2定量にまつわる
諸問題や発色系のフエノールによる妨害などの問
題があり、現在のところいずれも満足できるまで
に至つていない。 このような観点から、特開昭58−155099号公報
には、アセチルコリン、酢酸キナーゼ、アデノシ
ン三リン酸を含有するChE定量用試薬が提案され
ている。この試薬を説明すると、基質としてアセ
チルコリンを使用し、生体試料中のChEを作用さ
せると、基質は酢酸とコリンとに分解する。 ここに、酢酸キナーゼを作用させるとアデノシ
ン三リン酸（以下ATPという。）を補基質として
酢酸は、アセチルリン酸に変化する。この反応式
を下記に示す。 アセチルコリンChE −−−→ 酢酸＋コリン 酢酸＋ATP酢酸キナーゼ −−−−−−→ アセチルリン酸 ＋アデノシン二リン酸 この酢酸キナーゼの作用は、酢酸のみに基質特
異性を有するものであつて、他の有機酸、無機酸
などを共存していても作用するものではない。次
いで、ここで生成したアセチルリン酸又はアデノ
シン二リン酸（以下ADPという。）を定量すれば
ChEの定量は完了する。この際、アセチルリン酸
は適当な色源体と反応させれば、可視部の比色法
で定量可能であり、ADPはピルビン酸キナーゼ
と乳酸脱水素酵素との共役酵素系を使用すること
により定量可能である。特に、後者の方法は全反
応系を酵素系として行うものであり、共存物質の
影響を受けにくく、極めて有利な方法である。こ
の場合の反応式を下記に示す。 ADP＋ホスホエノールピルビン酸 ピルビン酸キナーゼ −−−−−−−−−→ ATP＋ピルビン酸 ピルビン酸 ＋NADH乳酸脱水素酵素 −−−−−−−→ 乳酸＋NAD+ （ただし、NADHは還元型β−ニコチンアミド
−アデニン・ジヌクレオド、NAD+は、酸化型β
−ニコチンアミド−アデニン・ジヌクレオドを表
す。） このNADHの紫外部（340nｍ）の吸光度を測
定することにより、極めて容易に高精度の定量を
行うことができる。また、ピルビン酸キナーゼの
作用により生成ADPをATPに再生することがで
きるので、酢酸キナーゼの酢酸に対する作用が増
強され、極めて高感度の測定が可能となる。 この試薬を実際的に製品化するにあたつては、
酢酸キナーゼ、ATP、NADHを主成分とする試
薬（以下第一試薬と呼ぶ。）と、基質であるアセ
チルコリンを主成分とする試薬（以下第二試薬と
呼ぶ。）を各々調整し、ChE測定の両試薬を混合
しており、第一試薬のPHはChEの至適PHである
7.0〜8.0の間に管理されており、また第二試薬の
PHは特に管理されておらず、中性付近である。 この場合には、第一試薬においては、NADH
に由来する340nｍにおける吸光度が、試薬保存
中に低下する傾向があり、また第二試薬において
は、保存中にアセチルコリンの自然分解が起こる
傾向があつた。このアセチルコリンの自然分解が
起こると、酢酸が生じ、第一試薬と第二試薬とを
混合した際に反応が進行し、340nｍにおける吸
光度が低下することになる。 すなわち、上記試薬の測定原理は、最終的に
340nｍにおける吸光度の減少速度を測定するも
のであるから、第一試薬と第二試薬との混合時の
第一試薬の吸光度及び第一試薬と第二試薬とを混
合したときの吸光度が少なくとも1.0であること
が望まれており、340nｍにおける吸光度は通常
の分光光度計の性能上2.0が限界であるので、2.0
の吸光度が1.0付近まで低下する期間が、調製後
の試薬の使用期間ということになり、前記した試
薬は、この点が十分でなく、一度の調製でできる
だけ長期間使用可能な試薬が望まれている。 本発明者らは、このような要求を満足すべく鋭
意研究を重ねた結果、第一試薬、第二試薬のそれ
ぞれのPHを特定の範囲に管理することにより、両
試薬の調製後の安定性が飛躍的に向上することを
見出し、本発明に到達したのである。 すなわち、本発明は、酢酸キナーゼ、ピルビン
酸キナーゼ、乳酸脱水素酵素、アデノシン三リン
酸、ホスホエノールピルビン酸、還元型β−ニコ
チンアミド−アデニン・ジヌクレオチド、マグネ
シウム塩を含有する第一試薬とアセチルコリンを
含有する第二試薬とからなり、かつ第一試薬のPH
が8.0〜10.0であり、第二試薬のPHが3.5〜5.5であ
ることを特徴とするChE定量用試薬である。 本発明の試薬は、例えば以下のように構成され
ている。 (1) 酵素試薬（凍結乾燥品） 酢酸キナーゼ、ピルビン酸キナーゼ、乳酸脱
水素酵素、ATP、ホスホエノールピルビン酸、
NADH (2) 基質剤（粉末） アセチルコリン、硫酸アンモニウム (3) 酵素試薬溶解液 緩衝液、マグネシウム塩、カリウム塩、防腐
剤 (4) 基質剤溶解液 緩衝液、防腐剤 第一試薬、第二試薬を調製するには、(3)で(1)
を、(4)で(2)を溶解することによつて行えばよく、
ChE測定時に第一試薬、第二試薬を所定の比率で
混合すればよい。 本発明において、第一試薬、第二試薬調製後の
PHは前者が8.0〜10.0に、後者が3.5〜5.5に管理す
ることが必要である。 このPHからはずれると、第一試薬においては、
340nｍにおける吸光度の低下が著しく、また第
二試薬においては、アセチルコリンの自然分解が
多く観察されるのである。この第一試薬のPHを
8.0〜10.0に、第二試薬のPHを3.5〜5.5に管理する
には、例えば次の緩衝剤を用いて行うことができ
る。第一試薬において使用する乾燥剤としては、
例えばトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
−HCl、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタ
ン−マレイン酸、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペ
ラジン−N′−エタンスルホン酸、−NaOH、グリ
シン−KOH、トリエタノールアミン塩酸−
NaOHなど通常の使用範囲がPH8.0〜10.0のもの
であればよい。 また、第二試薬に使用する緩衝剤としては、例
えば、フタル酸水素カリウム−HCl、クエン酸−
クエン酸ナトリウム、マレイン酸−NaOH、グ
リシン−HCl、３，3′−ジメチルグルタル酸−
NaOH、乳酸−乳酸ナトリウムなど通常の使用
範囲がPH3.5〜5.5のものであればよい。 その他の試薬の使用量としては、アセチルコリ
ン20〜200ｍＭ、酢酸キナーゼ５〜100u／ml、
ATP1.5〜15ｍＭ、ピルビン酸キナーゼ３〜
50u／ml、乳酸脱水素酵素１〜20u／ml、
NADH0.1〜1.0ｍＭ、NADH0.1〜1.0ｍＭ程度が
適当である。 次にChEを定量するには、一定の比率で第一試
薬と第二試薬とを混合した後に目的物質である
ChEの至適PHである7.0〜8.0の間になるように第
一試薬と第二試薬を混合すればよい。 そのときの第一試薬と第二試薬の使用時の液比
は、使用する自動分析機によつて異なるが、好ま
しくは第一試薬：第二試薬が２：１〜10：１（容
量比、以下同じ。）であり、さらに好ましくは
２：１〜８：１であり、最も好ましくは２：１〜
５：１である。また、第一試薬、第二試薬の緩衝
剤の濃度としては、例えば第一試薬、第二試薬の
液比を２：１〜５：１、第一試薬のPHが8.0〜
10.0、第二試薬のPHが3.5〜5.5であり、さらに第
一試薬、第二試薬を混合した時のPHが7.0〜8.0の
間であるという条件を設定すれば、簡単な実験に
よつて求めることができる。例えば、第一試薬に
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン−マレ
イン酸を、第二試薬にクエン酸−NaOHを用い
た場合、前者が25〜70ｍＭ、後者が90〜130ｍＭ
とすればよい。 次に、本発明を実施例により具体的に説明す
る。 実施例 １ (1) 酵素試薬（凍結乾燥品） 酢酸キナーゼ ２×104ユニツト ピルビン酸キナーゼ １×104ユニツト 乳酸脱水素酵素 １×103ユニツト ATP １ｇｒ ホスホエノールピルビン酸 0.05ｇｒ NADH 0.14ｇｒ (2) 基質剤（粉末） アセチルコリン 1.4ｇｒ 硫酸アンモニウム 0.33ｇｒ (3) 酵素試薬溶解液 トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン−
HCl（PH9.0） 30ｍＭ／Ｌ 硫酸マグネシウム 15ｍＭ／Ｌ 塩化カリウム 50ｍＭ／Ｌ アジ化ナトリウム 10ｍＭ／Ｌ (4) 基質剤溶解液 マレイン酸−NaOH（PH4.5） 95ｍＭ／Ｌ アジ化ナトリウム ５ｍＭ／Ｌ 酵素試薬(1)を(3)の酵素試薬溶解液100mlで溶解
して第一試薬を調製し、また基質剤(2)を(4)の基質
剤溶解液25mlで溶解して第二試薬を調製した。両
試薬を10℃恒温槽中に７日間放置し、第一試薬の
340nｍにおける吸光度を調製直後ものと比較し
た。 また、７日間放置後の第一試薬、第二試薬を４
対１の液量比で混合した時、アセチルコリンの分
解で生じた酢酸による340nｍにおける初期吸光
度の低下を測定し、同じく調製直後のものと比較
した。その結果を表１に示す。 なお、調製後の第一試薬、第二試薬のPHは、そ
れぞれ溶解液の緩衝剤のPHである9.0、4.5とな
り、両試薬混合後のPHは7.5であつた。
【表】
実施例 ２
酵素試薬の溶解液の緩衝剤をトリス（ヒドロキ
シメチル）アミノメタン−マレイン酸PH8.5−30
ｍＭに、また基質剤の溶解液の緩衝剤をグリシン
−HClPH4.0−75ｍＭを用いた以外はすべて実施
例１と同じ試薬を用い、実施例１と同様の安定性
テストを行つたところ、表２に示す結果となつ
た。
シメチル）アミノメタン−マレイン酸PH8.5−30
ｍＭに、また基質剤の溶解液の緩衝剤をグリシン
−HClPH4.0−75ｍＭを用いた以外はすべて実施
例１と同じ試薬を用い、実施例１と同様の安定性
テストを行つたところ、表２に示す結果となつ
た。
【表】
なお、調製後の第一試薬、第二試薬のPHはそれ
ぞれの溶解液の緩衝剤のPHである8.5、4.0とな
り、両試薬混合後のPHは7.3となつた。 比較例 １ 酵素試薬の溶解液の緩衝剤をＮ−２−ヒドロキ
シエチルピペラジン−N′−エタンスルホン酸−
NaOHPH7.5−100ｍＭを用い、基質剤の溶解液は
緩衝剤を使用せず水溶液とした以外はすべて実施
例１と同じ試薬を用い、実施例１と同様の安定性
テストを行つた。その結果を表３に示す。 なお、第一試薬のPHは7.5で、第二試薬のPHは
7.0で、両試薬混合後のPHは7.5となつた。
ぞれの溶解液の緩衝剤のPHである8.5、4.0とな
り、両試薬混合後のPHは7.3となつた。 比較例 １ 酵素試薬の溶解液の緩衝剤をＮ−２−ヒドロキ
シエチルピペラジン−N′−エタンスルホン酸−
NaOHPH7.5−100ｍＭを用い、基質剤の溶解液は
緩衝剤を使用せず水溶液とした以外はすべて実施
例１と同じ試薬を用い、実施例１と同様の安定性
テストを行つた。その結果を表３に示す。 なお、第一試薬のPHは7.5で、第二試薬のPHは
7.0で、両試薬混合後のPHは7.5となつた。
【表】
以上のごとく、本発明の試薬は、試薬調製後の
安定性が飛躍的に向上し、これを長期間保存する
ことができる。
安定性が飛躍的に向上し、これを長期間保存する
ことができる。
Claims (1)
- １ 酢酸キナーゼ、ピルビン酸キナーゼ、乳酸脱
水素酵素、アデノシン三リン酸、ホスホエノール
ピルビン酸、還元型β−ニコチンアミド−アデニ
ン・ジヌクレオチド、マグネシウム塩を含有する
第一試薬とアセチルコリンを含有する第二試薬と
からなり、かつ第一試薬のPHが8.0〜10.0であり、
第二試薬のPHが3.8〜5.5であることを特徴とする
コリンエステラーゼ定量用試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15474984A JPS6131098A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | コリンエステラ−ゼ定量用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15474984A JPS6131098A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | コリンエステラ−ゼ定量用試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6131098A JPS6131098A (ja) | 1986-02-13 |
| JPH0545240B2 true JPH0545240B2 (ja) | 1993-07-08 |
Family
ID=15591068
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15474984A Granted JPS6131098A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | コリンエステラ−ゼ定量用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6131098A (ja) |
-
1984
- 1984-07-25 JP JP15474984A patent/JPS6131098A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6131098A (ja) | 1986-02-13 |
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