JPH06239844A - 生理活性物質ｔｏｄ−４４０３類、その用途及び製造方法 - Google Patents
生理活性物質ｔｏｄ−４４０３類、その用途及び製造方法Info
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- JPH06239844A JPH06239844A JP5051415A JP5141593A JPH06239844A JP H06239844 A JPH06239844 A JP H06239844A JP 5051415 A JP5051415 A JP 5051415A JP 5141593 A JP5141593 A JP 5141593A JP H06239844 A JPH06239844 A JP H06239844A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】殺虫剤として有用な微生物の生産する生理活性
物質を提供する。 【構成】一般式 【化１】 （式中、Ｒはアルキル基を示す。）で表される生理活性
物質ＴＯＤ−４４０３類。
物質を提供する。 【構成】一般式 【化１】 （式中、Ｒはアルキル基を示す。）で表される生理活性
物質ＴＯＤ−４４０３類。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は殺虫剤として有用な生理
活性物質ＴＯＤ−４４０３類、その用途、その製造方法
及びこれを生産する微生物に関するものである。
活性物質ＴＯＤ−４４０３類、その用途、その製造方法
及びこれを生産する微生物に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】農作物の栽培において、害虫の防除は大
きな問題であり、これまで種々の殺虫剤が開発されてい
る。微生物起源の殺虫性を有するものとしては糸状菌の
生産するセトルキシン（アグリカルチュラル アンド
バイオロジカル ケミストリー(Agricultural and Biol
ogical Chemistry)，第２６巻、第３６頁（１９６２
年）が知られている。
きな問題であり、これまで種々の殺虫剤が開発されてい
る。微生物起源の殺虫性を有するものとしては糸状菌の
生産するセトルキシン（アグリカルチュラル アンド
バイオロジカル ケミストリー(Agricultural and Biol
ogical Chemistry)，第２６巻、第３６頁（１９６２
年）が知られている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明は新規な生理活
性物質を提供することを目的に種々の土壌から菌株を分
離してその生産する物質について研究を続けた結果、本
発明のストレプトミセス(Streptomyces)に属する微生物
が生産する新しい構造を有する生理活性物質が殺虫作用
を示すことを見出し本発明を完成した。
性物質を提供することを目的に種々の土壌から菌株を分
離してその生産する物質について研究を続けた結果、本
発明のストレプトミセス(Streptomyces)に属する微生物
が生産する新しい構造を有する生理活性物質が殺虫作用
を示すことを見出し本発明を完成した。
【０００４】
【問題点を解決するための手段】本発明の生理活性物質
ＴＯＤ−４４０３類は一般式
ＴＯＤ−４４０３類は一般式
【０００５】
【化２】
【０００６】（式中、Ｒはアルキル基を示す）で表され
る。
る。
【０００７】本発明の生理活性物質ＴＯＤ−４４０３類
は具体例として物質Ｆ３−２、物質Ｆ３−１及び物質Ｆ
２−１が挙げられる。
は具体例として物質Ｆ３−２、物質Ｆ３−１及び物質Ｆ
２−１が挙げられる。
【０００８】次にそれぞれの物質の理化学的性質を示
す。 （１）物質Ｆ３ー２（Ｒ＝イソブチル基） （ａ）物質の色 ：無色。 （ｂ）高分解能質量分析 ：ＨＲＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／
ｚ，ｐｏｓｉｔｉｖｅ） 計算値 ：７４８,３７０１ 実測値 ：７４８,３７４５（Ｍ＋Ｈ）+ （ｃ）分子式 ：Ｃ３７Ｈ５３Ｎ３Ｏ１３ （ｄ）分子量 ：７４７ （ｅ）紫外線吸収スペクトル：図１に示す。 （ｆ）赤外線吸収スペクトル：図２に示す。 （ｇ）核磁気共鳴スペクトル：図３に示す。 （ｈ）呈色反応 ：シリカゲル薄層上で塩化
第二鉄反応が陽性 （ｉ）溶解性 ：水に不溶、メタノール、
アセトン、酢酸エチル、クロロホルム、ヘキサンに可
溶。 （ｊ）塩基性、酸性、中性の区別：中性。 （ｋ）比旋光度 ：〔α〕２５＝ー１０（Ｃ＝
０.２３、メタノール）
す。 （１）物質Ｆ３ー２（Ｒ＝イソブチル基） （ａ）物質の色 ：無色。 （ｂ）高分解能質量分析 ：ＨＲＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／
ｚ，ｐｏｓｉｔｉｖｅ） 計算値 ：７４８,３７０１ 実測値 ：７４８,３７４５（Ｍ＋Ｈ）+ （ｃ）分子式 ：Ｃ３７Ｈ５３Ｎ３Ｏ１３ （ｄ）分子量 ：７４７ （ｅ）紫外線吸収スペクトル：図１に示す。 （ｆ）赤外線吸収スペクトル：図２に示す。 （ｇ）核磁気共鳴スペクトル：図３に示す。 （ｈ）呈色反応 ：シリカゲル薄層上で塩化
第二鉄反応が陽性 （ｉ）溶解性 ：水に不溶、メタノール、
アセトン、酢酸エチル、クロロホルム、ヘキサンに可
溶。 （ｊ）塩基性、酸性、中性の区別：中性。 （ｋ）比旋光度 ：〔α〕２５＝ー１０（Ｃ＝
０.２３、メタノール）
【０００９】 （２）物質Ｆ２ー１（Ｒ＝イソプロピル基） （ａ）物質の色 ：無色。 （ｂ）分子式 ：Ｃ３６Ｈ５１Ｎ３Ｏ１３ （ｃ）分子量 ：７３３ （ｄ）紫外線吸収スペクトル：図４に示す。 （ｅ）赤外線吸収スペクトル：図５に示す。 （ｆ）核磁気共鳴スペクトル：図６に示す。 （ｇ）溶解性 ：水に不溶、メタノール、
アセトン、酢酸エチル、クロロホルム、ヘキサンに可
溶。 （ｈ）塩基性、酸性、中性の区別：中性。
アセトン、酢酸エチル、クロロホルム、ヘキサンに可
溶。 （ｈ）塩基性、酸性、中性の区別：中性。
【００１０】 （３）物質Ｆ３ー１（Ｒ＝ｓｅｃ−ブチル基） （ａ）物質の色 ：無色。 （ｂ）分子式 ：Ｃ３７Ｈ５３Ｎ３Ｏ１３ （ｃ）分子量 ：７４７ （ｄ）紫外線吸収スペクトル：図７に示す。 （ｅ）赤外線吸収スペクトル：図８に示す。 （ｆ）核磁気共鳴スペクトル：第９に示す。 （ｇ）溶解性 ：水に不溶、メタノール、
アセトン、酢酸エチル、クロロホルム、ヘキサンに可
溶。 （ｈ）塩基性、酸性、中性の区別：中性。
アセトン、酢酸エチル、クロロホルム、ヘキサンに可
溶。 （ｈ）塩基性、酸性、中性の区別：中性。
【００１１】これらの理化学的性質、特に紫外線吸収ス
ペクトル、紫外線吸収スペクトル、プロトン、炭素核磁
気共鳴スペクトル及び高分解能質量分析値から、これら
の物質はブラストマイシン酸を有する新規な１８員環の
デプシペプチドであると判明した。
ペクトル、紫外線吸収スペクトル、プロトン、炭素核磁
気共鳴スペクトル及び高分解能質量分析値から、これら
の物質はブラストマイシン酸を有する新規な１８員環の
デプシペプチドであると判明した。
【００１２】物質Ｆ３−２の構造決定は１Ｈ及び１３Ｃ
ＮＭＲ、１Ｈ−、１Ｈ ＣＯＳＹ、１３Ｃ−、１Ｈ
ＣＯＳＹのスペクトルデータから部分構造を推定し、こ
れをＨＭＢＣ実験でつなげることにより推定した。
ＮＭＲ、１Ｈ−、１Ｈ ＣＯＳＹ、１３Ｃ−、１Ｈ
ＣＯＳＹのスペクトルデータから部分構造を推定し、こ
れをＨＭＢＣ実験でつなげることにより推定した。
【００１３】化３に構造上の位置を示す。
【００１４】
【化３】
【００１５】表１にＮＭＲのスペクトルデータの概要を
示す。
示す。
【００１６】
【表１】
【００１７】１Ｈ、及び１３Ｃ ＮＭＲから次に示すよ
うな部分構造の存在が推定された。水素結合により非遮
蔽されたフェノール性ＯＨ（δ＝１２.５１、塩化第一
鉄で陽性）を持つ、１個の１、２、３置換のベンゼン環
（δＨ＝８.５４ 、６.９４、７.３４）、１個のケト
ンを含む８個のカルボニル（Ｃｌ、Ｃ４、Ｃ６、Ｃ８、
Ｃ１０、Ｃ１２、Ｃ７’、Ｃ８’）、４個のＯＣＨ（３
ＣＨ、５ＣＨ、１１ＣＨ、１３ＣＨ）、２個のＮＣＨ
（２ＣＨ、９ＣＨ）、１個の４級炭素（Ｃ７）、３個の
ＣＨ（１６Ｃ、２２Ｃ、２５Ｃ）、３個のＣＨ２（１５
Ｃ、２１Ｃ、２７Ｃ）、１０個のＣＨ３（１４Ｃ、１７
Ｃ、１８Ｃ、１９Ｃ、２０Ｃ、２３Ｃ、２４Ｃ、２６
Ｃ、２８Ｃ、２９Ｃ）である。これらは１３Ｃ、１Ｈ−
ＣＯＳＹにより、更に確かなものになった。
うな部分構造の存在が推定された。水素結合により非遮
蔽されたフェノール性ＯＨ（δ＝１２.５１、塩化第一
鉄で陽性）を持つ、１個の１、２、３置換のベンゼン環
（δＨ＝８.５４ 、６.９４、７.３４）、１個のケト
ンを含む８個のカルボニル（Ｃｌ、Ｃ４、Ｃ６、Ｃ８、
Ｃ１０、Ｃ１２、Ｃ７’、Ｃ８’）、４個のＯＣＨ（３
ＣＨ、５ＣＨ、１１ＣＨ、１３ＣＨ）、２個のＮＣＨ
（２ＣＨ、９ＣＨ）、１個の４級炭素（Ｃ７）、３個の
ＣＨ（１６Ｃ、２２Ｃ、２５Ｃ）、３個のＣＨ２（１５
Ｃ、２１Ｃ、２７Ｃ）、１０個のＣＨ３（１４Ｃ、１７
Ｃ、１８Ｃ、１９Ｃ、２０Ｃ、２３Ｃ、２４Ｃ、２６
Ｃ、２８Ｃ、２９Ｃ）である。これらは１３Ｃ、１Ｈ−
ＣＯＳＹにより、更に確かなものになった。
【００１８】また１Ｈ−、１Ｈ ＣＯＳＹ、１３Ｃ−、
１Ｈ ＣＯＳＹのスペクトルは各種の部分構造を示唆し
た。これらの部分構造をＨＭＢＣ実験で炭素、水素間の
ロングレンジカップリングを観測することにより結合さ
せた。このようにして物質Ｆ３−２は化１に示したよう
な１８員環のシクロデプシペプタイドであることが判
り、その構造式は高分解能質量分析から得られたＣ３７
Ｈ５３Ｎ３Ｏ１３に一致した。更に物質Ｆ３−２の構造
をもとに、同様にして得られる各種スペクトルデータか
ら物質Ｆ２−１およびＦ３−１の構造を決定した。
１Ｈ ＣＯＳＹのスペクトルは各種の部分構造を示唆し
た。これらの部分構造をＨＭＢＣ実験で炭素、水素間の
ロングレンジカップリングを観測することにより結合さ
せた。このようにして物質Ｆ３−２は化１に示したよう
な１８員環のシクロデプシペプタイドであることが判
り、その構造式は高分解能質量分析から得られたＣ３７
Ｈ５３Ｎ３Ｏ１３に一致した。更に物質Ｆ３−２の構造
をもとに、同様にして得られる各種スペクトルデータか
ら物質Ｆ２−１およびＦ３−１の構造を決定した。
【００１９】本発明の生理活性物質ＴＯＤ−４４０３類
はストレプトミセス属に属する生理活性物質ＴＯＤ−４
４０３類生産菌、その突然変異体、遺伝子的形質転換体
を培養し、得られた培養菌体から採取することにより製
造することができる。
はストレプトミセス属に属する生理活性物質ＴＯＤ−４
４０３類生産菌、その突然変異体、遺伝子的形質転換体
を培養し、得られた培養菌体から採取することにより製
造することができる。
【００２０】本発明の生理活性物質ＴＯＤ−４４０３類
の生産菌の１例としては本発明者らによって福井県永平
寺町の土壌から分離されたストレプトミセス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ）属に属する微生物が挙げられる。本
菌株の微生物学的性状は以下に示す通りである。本菌株
の特徴付けは国際ストレプトミセス計画（Internationa
l Streptomyces Project：ＩＳＰ） の方法とワックス
マン氏の方法により、その記載はＩＳＰの例に準じて行
った。
の生産菌の１例としては本発明者らによって福井県永平
寺町の土壌から分離されたストレプトミセス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ）属に属する微生物が挙げられる。本
菌株の微生物学的性状は以下に示す通りである。本菌株
の特徴付けは国際ストレプトミセス計画（Internationa
l Streptomyces Project：ＩＳＰ） の方法とワックス
マン氏の方法により、その記載はＩＳＰの例に準じて行
った。
【００２１】本発明の新規物質ＴＯＤ−４４０３類生産
菌の各種性状は次の通りである。 （１）形態的性質 基菌糸は分岐せずに伸張し、菌糸の分断は観察されな
い。気中菌糸はスターチ寒天培地、チロシン寒天培地、
オートミール寒天培地等で旺盛に着生し、胞子形成も良
好である。胞子形成糸は直線型のものがほとんどである
が、その先端が鍵型、コンパクトな閉鎖型の螺旋糸を形
成しているものも認められる。胞子鎖の幅は０.６ない
し０.９ミクロン、胞子表面は滑らかで、胞子は１０個
から５０個又はそれ以上の連結が認められる。またメラ
ニン色素の生成はペプトン−イースト−鉄寒天培地上で
のみ認められる。胞子は運動性を示さず、胞子嚢、菌核
等は観察されない。
菌の各種性状は次の通りである。 （１）形態的性質 基菌糸は分岐せずに伸張し、菌糸の分断は観察されな
い。気中菌糸はスターチ寒天培地、チロシン寒天培地、
オートミール寒天培地等で旺盛に着生し、胞子形成も良
好である。胞子形成糸は直線型のものがほとんどである
が、その先端が鍵型、コンパクトな閉鎖型の螺旋糸を形
成しているものも認められる。胞子鎖の幅は０.６ない
し０.９ミクロン、胞子表面は滑らかで、胞子は１０個
から５０個又はそれ以上の連結が認められる。またメラ
ニン色素の生成はペプトン−イースト−鉄寒天培地上で
のみ認められる。胞子は運動性を示さず、胞子嚢、菌核
等は観察されない。
【００２２】（２）ジアミノピメリン酸分析 全菌体加水分解物の分析からＬ，Ｌ−ジアミノピメリン
酸が認められ細胞壁タイプＩ型である。 （３）各種培地における生育状態 培養３週間目の生育状態は表２に示す通りである。な
お、色調の判別は日本規格協会のＪＩＳ色名帳に準じ
た。
酸が認められ細胞壁タイプＩ型である。 （３）各種培地における生育状態 培養３週間目の生育状態は表２に示す通りである。な
お、色調の判別は日本規格協会のＪＩＳ色名帳に準じ
た。
【００２３】
【表２】
【００２４】 （４）生理的性質 （ａ）生育温度範 ：１５から３７℃ 最適温度 ：２７℃ （ｂ）ゼラチンの液化 ：− （ｃ）スターチの加水分解 ：＋ （ｄ）脱脂牛乳の凝固 ：− （ｅ）ペプトン化 ：− （ｆ）メラニン様色素の生成 ペプトン−イーストエキス−鉄寒天培地：＋ チロシン寒天培地 ：− トリプトン−イーストエキス寒天培地 ：− （５）各炭素の利用性（ブリドハム・ゴドリーブ寒天培
地上） Ｄ−グルコースをよく利用し、Ｄ−フルクト−ス、Ｄ−
シュクロ−スを利用するが、その他はほとんど利用しな
い。
地上） Ｄ−グルコースをよく利用し、Ｄ−フルクト−ス、Ｄ−
シュクロ−スを利用するが、その他はほとんど利用しな
い。
【００２５】上記の菌学的性質をインターナショナル・
ジャーナル・オブ・システマテイツク・バクテリオロジ
ー 、第５巻、第３０３−３０６頁（１９７２年）を参
照に同定を行った結果、本菌株はストレプトミセス・グ
リセオスポレウスとよく一致することから、ストレプト
ミセス・グリセオスポレウス ４４０３ （Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｏｓｐｏｒｅｕｓ ４４
０３）と命名し、工業技術院生命工学工業技術研究所に
平成５年２月５日に寄託した（ＦＥＲＭ Ｐ−１３４１
３号）。
ジャーナル・オブ・システマテイツク・バクテリオロジ
ー 、第５巻、第３０３−３０６頁（１９７２年）を参
照に同定を行った結果、本菌株はストレプトミセス・グ
リセオスポレウスとよく一致することから、ストレプト
ミセス・グリセオスポレウス ４４０３ （Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｏｓｐｏｒｅｕｓ ４４
０３）と命名し、工業技術院生命工学工業技術研究所に
平成５年２月５日に寄託した（ＦＥＲＭ Ｐ−１３４１
３号）。
【００２６】本菌株は他の微生物の場合にみられるよう
にその性状は変化しやすい。例えば本菌株、この株に由
来する突然変異株（自然発生又は誘発性）、形質接合体
又は遺伝子組換体であっても生理活性物質ＴＯＤ−４４
０３類の生産能を有するストレプトミセス属（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ）の菌はすべて当該物質の製造に使用
することができる。
にその性状は変化しやすい。例えば本菌株、この株に由
来する突然変異株（自然発生又は誘発性）、形質接合体
又は遺伝子組換体であっても生理活性物質ＴＯＤ−４４
０３類の生産能を有するストレプトミセス属（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ）の菌はすべて当該物質の製造に使用
することができる。
【００２７】本発明の生理活性物質ＴＯＤ−４４０３類
の製造法は生産菌の培養と培養物からの抽出、精製から
なる。
の製造法は生産菌の培養と培養物からの抽出、精製から
なる。
【００２８】本発明において、前記の菌が通常の微生物
が利用し得る栄養物を含有する培地で培養する。栄養源
としては従来放線菌の培養に利用されているものが使用
できる。例えば炭素源としてはグルコース、水アメ、デ
キストリン、シュクロース、デンプン、糖蜜、動植物油
等を使用できる。また窒素源として大豆粉、小麦胚芽、
コーンスティーブ・リカー、綿実粕、肉エキス、ペプト
ン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ソーダ、尿素
等を使用できる。その他必要に応じて、ナトリウム、カ
リウム、カルシウム、マグネシウム、コバルト、塩素、
リン酸、硫酸及びその他のイオンを生成することのでき
る無機塩類を添加することも有効である。また菌の生育
を助け本発明の生理活性物質の生産を促進するような有
機物及び無機物を適当に添加することができる。
が利用し得る栄養物を含有する培地で培養する。栄養源
としては従来放線菌の培養に利用されているものが使用
できる。例えば炭素源としてはグルコース、水アメ、デ
キストリン、シュクロース、デンプン、糖蜜、動植物油
等を使用できる。また窒素源として大豆粉、小麦胚芽、
コーンスティーブ・リカー、綿実粕、肉エキス、ペプト
ン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ソーダ、尿素
等を使用できる。その他必要に応じて、ナトリウム、カ
リウム、カルシウム、マグネシウム、コバルト、塩素、
リン酸、硫酸及びその他のイオンを生成することのでき
る無機塩類を添加することも有効である。また菌の生育
を助け本発明の生理活性物質の生産を促進するような有
機物及び無機物を適当に添加することができる。
【００２９】培養法としては好気的条件下での培養法、
特に深部培養法が最も適している。培養に適当な温度は
１５〜３７℃であるが、多くの場合２５〜２８℃付近で
培養する。ＴＯＤ−４４０３類の生産は培地や培養条件
により異なるが、振盪培養、タンク培養とも通常３〜１
０日の間でその蓄積が最高に達する。このようにし培養
菌体中のＴＯＤ−４４０３類の蓄積量が最高になった時
に培養を停止し、培養液から目的物質を単離、精製す
る。
特に深部培養法が最も適している。培養に適当な温度は
１５〜３７℃であるが、多くの場合２５〜２８℃付近で
培養する。ＴＯＤ−４４０３類の生産は培地や培養条件
により異なるが、振盪培養、タンク培養とも通常３〜１
０日の間でその蓄積が最高に達する。このようにし培養
菌体中のＴＯＤ−４４０３類の蓄積量が最高になった時
に培養を停止し、培養液から目的物質を単離、精製す
る。
【００３０】ＴＯＤ−４４０３類物質の大部分は培養菌
体中に生産されるので、培養物は濾過又は遠心分離によ
って菌体を分離し、培養菌体をアセトン、メタノールな
ど適当な有機溶媒で抽出し、抽出液を減圧濃縮後、酢酸
エチル、クロロホルムのような転溶性溶剤に転溶させる
か又いきなり培養物又は濃縮液を前述のような転溶性溶
剤にて抽出する。転溶液を濃縮乾燥させると目的のＴＯ
Ｄ−４４０３類を含むふ粉末又は油状の粗製品を得るこ
とができる。
体中に生産されるので、培養物は濾過又は遠心分離によ
って菌体を分離し、培養菌体をアセトン、メタノールな
ど適当な有機溶媒で抽出し、抽出液を減圧濃縮後、酢酸
エチル、クロロホルムのような転溶性溶剤に転溶させる
か又いきなり培養物又は濃縮液を前述のような転溶性溶
剤にて抽出する。転溶液を濃縮乾燥させると目的のＴＯ
Ｄ−４４０３類を含むふ粉末又は油状の粗製品を得るこ
とができる。
【００３１】粗製品は複数のＴＯＤ−４４０３類を含
み、そのまま殺虫剤として利用できるが、脂溶性物質の
精製に通常用いられる公知の方法、例えばシリカゲル、
アルミナなどを用いたカラムクロマトグラフィーにより
分画精製する。クロマトグラフィーの条件の選択により
目的の物質を分画し、更に純化品を必要とする場合には
精製品の順層又は逆層カラムを用いた高速液体クロマト
グラフィーによる分画を行う。その他ゲル濾過、吸着剤
を用いた分画法、再結晶法などの方法の採用もできる。
み、そのまま殺虫剤として利用できるが、脂溶性物質の
精製に通常用いられる公知の方法、例えばシリカゲル、
アルミナなどを用いたカラムクロマトグラフィーにより
分画精製する。クロマトグラフィーの条件の選択により
目的の物質を分画し、更に純化品を必要とする場合には
精製品の順層又は逆層カラムを用いた高速液体クロマト
グラフィーによる分画を行う。その他ゲル濾過、吸着剤
を用いた分画法、再結晶法などの方法の採用もできる。
【００３２】このような方法により又はこれらを適宜組
み合わせることにより、高純度の目的とするＴＯＤ−４
４０３類が得ることがでいる。
み合わせることにより、高純度の目的とするＴＯＤ−４
４０３類が得ることがでいる。
【００３３】
【実施例】次に本発明のＴＯＤ−４４０３類の製造例を
挙げる。しかしこれらは本発明を限定するものではな
い。多くの変法又は修飾手段を用いることできる。 実施例１ グルコース０.４％、麦芽エキス０.４％、酵母エキス１
％を含有する培地（pH７.２）を１００mlずつ、５００m
l三角コルベン２０本に分注し、１２０℃において２０
分間高圧滅菌した。これにストレプトミセス・グリセオ
スポレウスを１白金耳ずつ植菌し、２８℃にて５日間、
２００ｒ.ｐ.ｍにて振盪培養した。培養終了後、培養液
に４％のケイ藻土を加え、濾過にてＴＯＤ−４４０３類
を含む菌体を得た。
挙げる。しかしこれらは本発明を限定するものではな
い。多くの変法又は修飾手段を用いることできる。 実施例１ グルコース０.４％、麦芽エキス０.４％、酵母エキス１
％を含有する培地（pH７.２）を１００mlずつ、５００m
l三角コルベン２０本に分注し、１２０℃において２０
分間高圧滅菌した。これにストレプトミセス・グリセオ
スポレウスを１白金耳ずつ植菌し、２８℃にて５日間、
２００ｒ.ｐ.ｍにて振盪培養した。培養終了後、培養液
に４％のケイ藻土を加え、濾過にてＴＯＤ−４４０３類
を含む菌体を得た。
【００３４】実施例２ ストレプトミセス・グリセオスポレウスのスラント菌株
ストックから試験管内の培地（グルコース０.４％、麦
芽エキス０.４％、酵母エキス１％を含有する。pH７.
２）に接種し、２日間、２６.５℃で前培養した後、培
養液５００ml三角フラスコ中１００mlの前記培地に移
し、４日間、２６.５℃で全量２リットル培養した。
ストックから試験管内の培地（グルコース０.４％、麦
芽エキス０.４％、酵母エキス１％を含有する。pH７.
２）に接種し、２日間、２６.５℃で前培養した後、培
養液５００ml三角フラスコ中１００mlの前記培地に移
し、４日間、２６.５℃で全量２リットル培養した。
【００３５】実施例３ 実施例２で培養した培養物から、遠心分離により、菌体
を集めた。湿体菌体を５００mlのメタノールに分散し、
１時間撹拌して抽出を行った後、濾過により清澄なメタ
ノール液を回収した。次いで減圧濃縮にてメタノールを
除去し、５０mlまで濃縮し、酢酸エチル２００mlにて３
回転溶抽出を行った。酢酸エチル転溶液６００mlを減圧
濃縮して油状物質５００mgを得た。この油状物質をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、２８０mg
の粗結晶を得た。更にこの粗結晶１０mgを３mlの５０％
２ープロパノールに溶解し、内径２０mm、長さ２５０mm
のＯＤＳカラムをセットした分取用高速液体クロマトグ
ラフィーに注入した。５０％２ープロパノール４ml／分
を溶出液として流し２５４３nmの紫外線吸収により検出
して、活性画分も物質Ｆ３−２、物質Ｆ３−１及び物質
Ｆ２−１をそれぞれ採取した。この高速液体クロマトグ
ラフィーによる精製を２８回繰り返して行い、それぞれ
の活性画分を採取し、それぞれを合わせて濃縮乾固する
ことによりる物質Ｆ３−２を２３mg、物質Ｆ３−１を１
０ml及び物質Ｆ２−１を１０mlを得た。
を集めた。湿体菌体を５００mlのメタノールに分散し、
１時間撹拌して抽出を行った後、濾過により清澄なメタ
ノール液を回収した。次いで減圧濃縮にてメタノールを
除去し、５０mlまで濃縮し、酢酸エチル２００mlにて３
回転溶抽出を行った。酢酸エチル転溶液６００mlを減圧
濃縮して油状物質５００mgを得た。この油状物質をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、２８０mg
の粗結晶を得た。更にこの粗結晶１０mgを３mlの５０％
２ープロパノールに溶解し、内径２０mm、長さ２５０mm
のＯＤＳカラムをセットした分取用高速液体クロマトグ
ラフィーに注入した。５０％２ープロパノール４ml／分
を溶出液として流し２５４３nmの紫外線吸収により検出
して、活性画分も物質Ｆ３−２、物質Ｆ３−１及び物質
Ｆ２−１をそれぞれ採取した。この高速液体クロマトグ
ラフィーによる精製を２８回繰り返して行い、それぞれ
の活性画分を採取し、それぞれを合わせて濃縮乾固する
ことによりる物質Ｆ３−２を２３mg、物質Ｆ３−１を１
０ml及び物質Ｆ２−１を１０mlを得た。
【００３６】本発明の殺虫剤は本発明化合物ＴＯＤ−４
４０３を有効成分として含有してなる。本発明化合物は
それ自体で使用じてもよいが、通常は担体、界面活性
剤、その他の補助成分を配合して、粉剤、水和剤、乳
剤、粒剤として用いる。担体としてはタルク、ベントナ
イト、クレー、カオリン、珪藻土、ホワイトカーボン、
バーミュライト、消石灰、珪砂、硫安、尿素等の固体担
体、トルエン、メチルエチルケトン、メチルナフタリ
ン、イソプロピルアルコール、キシレン、シクロヘキサ
ノン等の液体担体が挙げられる。界面活性剤としてはジ
ナフチルメタンジスルホン酸塩、アルコール硫酸エステ
ル塩、アルキルアリールスルホン酸塩、リグニンスルホ
ン酸塩、ポリオキシエチレングリコールエーテル、ポリ
オキシエチレンアルキルアリールエーテル、ポリオキシ
エチレンソルビタンモノアルキレート等が挙げられる。
補助剤としてはカルボキシメチルセルロース、ポリエチ
レングルコール、アラビアゴム等が挙げられる。これら
の製剤は直接適用されるか、又は適当な濃度に希釈して
適用される。
４０３を有効成分として含有してなる。本発明化合物は
それ自体で使用じてもよいが、通常は担体、界面活性
剤、その他の補助成分を配合して、粉剤、水和剤、乳
剤、粒剤として用いる。担体としてはタルク、ベントナ
イト、クレー、カオリン、珪藻土、ホワイトカーボン、
バーミュライト、消石灰、珪砂、硫安、尿素等の固体担
体、トルエン、メチルエチルケトン、メチルナフタリ
ン、イソプロピルアルコール、キシレン、シクロヘキサ
ノン等の液体担体が挙げられる。界面活性剤としてはジ
ナフチルメタンジスルホン酸塩、アルコール硫酸エステ
ル塩、アルキルアリールスルホン酸塩、リグニンスルホ
ン酸塩、ポリオキシエチレングリコールエーテル、ポリ
オキシエチレンアルキルアリールエーテル、ポリオキシ
エチレンソルビタンモノアルキレート等が挙げられる。
補助剤としてはカルボキシメチルセルロース、ポリエチ
レングルコール、アラビアゴム等が挙げられる。これら
の製剤は直接適用されるか、又は適当な濃度に希釈して
適用される。
【００３７】次に具体例を挙げて説明する。但し％は重
量％を示す。 製剤例 １ 粉剤 物質Ｆ３−２ ０．５％、珪藻土５％、クレー９４．５
％を均一に混合し粉砕して粉剤とする。 製剤例 ２ 水和剤 物質Ｆ３−２ ２％、珪藻土５３％、クレー４０％、ジ
ナフチルメタンジスルホン酸ナトリウム塩２％、リグニ
ンスルホン酸ナトリウム塩３％を均一に混合し粉砕して
水和剤とする。
量％を示す。 製剤例 １ 粉剤 物質Ｆ３−２ ０．５％、珪藻土５％、クレー９４．５
％を均一に混合し粉砕して粉剤とする。 製剤例 ２ 水和剤 物質Ｆ３−２ ２％、珪藻土５３％、クレー４０％、ジ
ナフチルメタンジスルホン酸ナトリウム塩２％、リグニ
ンスルホン酸ナトリウム塩３％を均一に混合し粉砕して
水和剤とする。
【００３８】
【発明の効果】本発明によれば新規な生理活性物質ＴＯ
Ｄ−４４０３類が提供され、またこれは殺虫剤として利
用できる効果がある。
Ｄ−４４０３類が提供され、またこれは殺虫剤として利
用できる効果がある。
【００３９】試験例 アワヨトウに対する殺虫試験 ３０mlの三角フラスコの中に人工飼料粉末１.５gと供試
薬剤のアセトン溶液１mlを加え、よく懸濁させた後、減
圧下でアセトンを留去した。次いで蒸留水１.５mlを加
え加圧滅菌し、供試サンプルとした。この供試サンプル
に３令眠のアワヨトウ幼虫３頭を入れ、幼虫に人工飼料
を連続的に摂食させ、２１日の殺虫活性を観察した。処
理薬量は人工飼料に対する供試薬剤の濃度（ppm）を表
し、補正死虫率（％）は下記の計算式により算出した。
薬剤のアセトン溶液１mlを加え、よく懸濁させた後、減
圧下でアセトンを留去した。次いで蒸留水１.５mlを加
え加圧滅菌し、供試サンプルとした。この供試サンプル
に３令眠のアワヨトウ幼虫３頭を入れ、幼虫に人工飼料
を連続的に摂食させ、２１日の殺虫活性を観察した。処
理薬量は人工飼料に対する供試薬剤の濃度（ppm）を表
し、補正死虫率（％）は下記の計算式により算出した。
【００４０】結果を表３に示す。
【００４１】
【数１】
【００４２】
【表３】
【図１】紫外線吸収スペクトルを示す。
【図２】赤外線吸収スペクトルを示す。
【図３】核磁気共鳴スペクトルを示す。
【図４】紫外線吸収スペクトルを示す。
【図５】赤外線吸収スペクトルを示す。
【図６】核磁気共鳴スペクトルを示す。
【図７】紫外線吸収スペクトルを示す。
【図８】赤外線吸収スペクトルを示す。
【図９】核磁気共鳴スペクトルを示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｐ 17/08 Ｃ１２Ｒ 1:465）
Claims (5)
- 【請求項１】 一般式 【化１】 （式中、Ｒはアルキル基を示す。）で表される生理活性
物質ＴＯＤ−４４０３類。 - 【請求項２】 ストレプトミセス属に属する生理活性物
質ＴＯＤ−４４０３類生産菌、その突然変異体、遺伝子
的形質転換体を培養し、得られた培養菌体から請求項１
記載の生理活性物質ＴＯＤ−４４０３類を採取すること
を特徴とする当該生理活性物質ＴＯＤ−４４０３類の製
造方法。 - 【請求項３】 ストレプトミセス属に属する生理活性物
質ＴＯＤ−４４０３類生産菌、その突然変異体、遺伝子
的形質転換体を培養し得られる培養菌体。 - 【請求項４】 請求項１記載の生理活性物質ＴＯＤ−４
４０３類を有効成分として含有することを特徴とする殺
虫剤。 - 【請求項５】 微生物ストレプトミセス・グリセオスポ
レウス４４０３。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5051415A JPH06239844A (ja) | 1993-02-17 | 1993-02-17 | 生理活性物質ｔｏｄ−４４０３類、その用途及び製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5051415A JPH06239844A (ja) | 1993-02-17 | 1993-02-17 | 生理活性物質ｔｏｄ−４４０３類、その用途及び製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06239844A true JPH06239844A (ja) | 1994-08-30 |
Family
ID=12886302
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5051415A Pending JPH06239844A (ja) | 1993-02-17 | 1993-02-17 | 生理活性物質ｔｏｄ−４４０３類、その用途及び製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06239844A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997008135A1 (de) * | 1995-08-30 | 1997-03-06 | Bayer Aktiengesellschaft | Acylaminosalicylsäureamide und ihre verwendung als schädlingsbekämpfungsmittel |
-
1993
- 1993-02-17 JP JP5051415A patent/JPH06239844A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997008135A1 (de) * | 1995-08-30 | 1997-03-06 | Bayer Aktiengesellschaft | Acylaminosalicylsäureamide und ihre verwendung als schädlingsbekämpfungsmittel |
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