JPH0654311B2 - 亜硝酸イオンによる口臭測定用分析素子 - Google Patents

亜硝酸イオンによる口臭測定用分析素子

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JPH0654311B2
JPH0654311B2 JP61257917A JP25791786A JPH0654311B2 JP H0654311 B2 JPH0654311 B2 JP H0654311B2 JP 61257917 A JP61257917 A JP 61257917A JP 25791786 A JP25791786 A JP 25791786A JP H0654311 B2 JPH0654311 B2 JP H0654311B2
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Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は口臭測定法、特に簡便、迅速かつ精度の高い口
臭測定法及びその分析素子に関する。
〔発明の背景〕
口臭中の主な臭気成分としては、揮発性硫黄化合物,ア
ルコール化合物,アルデヒド化合物,アミン化合物,ア
ンモニア等が証明されている。特に口腔より発生する臭
気成分については、硫化水素,メチルメルカプタン,ジ
メチルサルファイド等のメルカプト化合物が主成分であ
ることが知られている。よって口臭測定の目的で、呼気
又は唾液中のメルカプト化合物を検出する方法が提案さ
れている。
特開昭57-135360号には、4,4′−ビスジメチルアミノジ
フェニルカルビトールを用いて唾液中のメルカプト化合
物を測定する方法、特開昭57-148252号にはジチオビス
ニトロ安息香酸を用いる方法、特開昭58-191957号には
メルカプト基発色試薬(NAM)と反応させ蛍光によっ
て呼気中のメルカプト化合物を測定する方法、特開昭60
-178828号には過マンガン酸塩を用いてその退色度より
唾液中のメルカプト化合物を測定する方法が述べられて
いる。
しかしこれらの方法は、口臭を十分に検知するには測定
感度が低かったり、測定感度は十分であるが試薬の安定
性が悪い等の欠点を有しており、口臭を正確に測定する
ことはできなかった。
更に特願昭61-137947号には、メルカプト化合物を指標
として口臭を検知するには感度的に無理があるので唾液
中に存在する亜硝酸イオンを指標とする口臭の検知方法
として亜硝酸イオンをジアゾ反応で発色せる試薬及びそ
れを含浸させた試験紙が提案されている。この方法は検
出の感度,簡便性等が改良されているが、この発色試薬
又は発色試薬を含浸させた試験紙は、空気中の亜硝酸イ
オンによって発色したり、また空気中の酸素によって発
色試薬が酸化され着色する等の欠点を有している。
またこの試験紙は、その取扱いが簡便であり、かつ直に
結果が得られるので有用であるが、その構成上から半定
量または定性分析の領域にとどまっており、これらの問
題点の改良が望まれている。
〔発明の目的〕
本発明は、上記の点に鑑み、亜硝酸イオンをジアゾ反応
で発色させる安定した試薬を提供することであり、他の
目的は簡便、迅速で且つ亜硝酸イオンの定量分析可能な
方法及び分析素子を提供することである。
更に他の目的は、この発色試薬もしくは分析素子を用い
た口臭検知方法を提供することである。
〔発明の構成〕
前記本発明の目的は、液体不浸透性支持体上に、亜硝酸
イオンとジアゾ反応して発色する化合物とポリマ酸とを
含有する試薬層を設け、更にその上に流体試料を均一に
延展する亜硝酸イオンに対して不活性、透過性の展開層
を設けたことを特徴とする亜硝酸イオンによる口臭測定
用分析素子によって達成される。
本発明の方法は前記化合物とポリマ酸を含んでなりジア
ゾ反応により呈色する試薬(以後単に呈色試薬と称す)
の反応に迅速・簡便性とその安定性に基いて構成される
ので、該呈色試薬を使用できる態様であればその活用手
段は問わないが、本発明の効果を最もよく発揮させる手
段としては該呈色試薬を組込んだ分析素子を構成するこ
とである。
該分析素子の基本的態様としては、液体不浸透性支持体
上に前記呈色試薬を含有する試薬層を設け、更にその上
に流体試料を均一に延展する亜硝酸イオンに対し不活
性、透過性の展開層を設けることによって、流体試料を
均一迅速に試薬層に供給し亜硝酸イオンの呈色定量分析
を可能とする。
更に分析操作の利便、分析素子の性能補完のため分析素
子に各種の補助部材、補助構成層を付帯させることがで
きる。
本発明において、使用される亜硝酸イオンをジアゾ反応
で発色させる化合物(以後ジアゾ反応発色試薬という)
は、ジアゾ成分とカップリング成分とからなる。
ジアゾ成分とは、亜硝酸と反応してジアゾニウム塩を形
成する化合物であり、第一級アミノ基を有するアミン化
合物である。好ましいアミン化合物としては、複素環ア
ミン、芳香族アミン誘導体があげられる。例えば、アニ
リン,p−ニトロアニリン,スルファニル酸,p−シア
ノアニリン,p−クロルアニリン,アニシジン,トルイ
ジン,2,4,6−トリクロルアニリン,1−ナフチルアミ
ン,4−アミノピリジン,4−アミノアンチピリン等及
びこれらの誘導体があげられる。これらのアミン化合物
は、無機塩例えば塩酸塩、硫酸塩及び有機酸の状態で用
いることが好ましい。
カップリング成分とは、ジアゾニウム塩と反応する化合
物であり、アミノ基及び/または水酸基を有する芳香族
化合物、または誘導体である。
例えば、1−ナフチルアミン,N−1−ナフチル−N′
−ジエチルエチレンジアミン,N−1−ナフチルエチレ
ンジアミン,N−(1−ナフチルアミノ)−3−プロパ
ンスルホン酸,1−ナフトール,2−ナフトール,フェ
ノール,J酸,γ酸,H酸等及びこれらの誘導体をあげ
ることができる。またカップリング成分が芳香族アミン
の場合は、有機酸塩、無機酸塩で用いてもよい。
またその他のカップリング成分として、1−フェニル−
3−メチルピラゾロンのような活性メチレン基を有した
化合物、3−ヒドロキシ−1,2,3,4−テトラヒドロ−7,8
−ベンゾキノリンなども用いられる。
これら2つの成分を水または水可溶性の溶媒に溶解して
ジアゾ反応発色試薬とする。この場合、2つの成分の比
率、発色試薬の濃度は、検出すべき亜硝酸イオンの濃度
によって適当に調整される。ジアゾ反応発色試薬の溶解
に酸が用いられるが、有機酸では、pHが高く、発色試
薬の安定性が悪くなる。無機の強酸ではpHが低いため
発色試薬の安定性は改良されるが、試験紙や分析素子中
に発色試薬を含有させる場合に問題となる。
そこでポリマ酸を使用することによりこれらの問題を解
決することができる。
本発明で使用されるポリマ酸としては特開昭59-44659
号、同59-104552号に記載の化合物があげられる。
次に本発明のポリマ酸の具体例を示す。
例示ポリマ酸: (1) ポリアクリル酸 (2) ポリメタクリル酸 (3) イタコン酸−スチレン共重合体 (重量% 50:50) (4) アクリル酸−アクリル酸ブチル共重合体 (重量% 75:25) (5) アクリル酸−塩化ビニリデン共重合体 (重量% 80:20) (6) エチレン−マレイン酸モノブチル共重合体 (重量% 50:50) (7) スチレン−マレイン酸モノブチル共重合体 (重量% 50:50) (8) マレイン酸モノブチル−メチルエチルケト ン共重合体 (重量% 50:50) (9) マレイン酸モノブチル−イソブチレン共重合体 (重量% 50:50) (10) メタクリル酸−ジビニルベンゼン (重量% 98:2) (11) アクリル酸−スチレン−ジビニルベンゼン (重量% 90:8:2) (12) ポリスチレンスルホン酸 (13) ポリアクリルアミド−2−メチルエタンスル
ホン酸 (14) アミンメタアクリロイルオキシプロパンスル
ホン酸 (15) スチレンスルホン酸−スチレン共重合体 (重量% 80:20) (16) スチレンスルホン酸−ジビニルベンゼン共重
合体 (重量% 90:10) (17) アクリルアミド−2−メチルエタン スルホン酸−アクリル酸ブチル−スチレン共重合体
(重量% 15:80:5) (18) メタアクリロイルオキシプロパンスルホン酸
−2,3−ジメチル−1,3−ブタジエン−アクリロニトリル
共重合体 (重量% 8:75:17) (19) スチレンスルホン酸−塩化ビニリデン (重量% 75:25) (20) メタアクリロイルオキシプロパンスルホン酸
−メタアクリル酸メチル (重量% 50:50) (21) ポリ−2−アクリロイルオキシエチルホスフ
ェート (22) ポリ−2−メタアクリロイルオキシエチルホ
スフェート (23) 2−アクリロイルオキシエチルホスフェート
−アクリル酸メチル共重合体 (重量% 80:20) (24) 4−メタクリロイルオキシブチルホスフェー
ト−スチレン−ジビニルベンゼン共重合体 (重量% 50:45:5) (25) 2−メタクリロイルオキシエトキシエチルホ
スフェート−アクリル酸エチル−アクリロニトリル共重
合体 (重量% 15:70:15) (26) 2−アクリルアミド−2−メチルプロパンス
ルホン酸−アクリル酸ブチル共重合体 (重量% 50:50) (27) 2−アクリルアミド−2−メチルプロパンス
ルホン酸−アクリル酸アミド共重合体 (重量% 75:25) 更に市販の強酸および弱酸性カチオンイオン交換樹脂も
用いる事ができる。例えばアンバーリスト15、アンバー
ライトCG−50、アンバーライトIRC−50(商品名、
Rohm & Hoss社製)を挙げる事ができる。これらの樹
脂をそのまま、あるいは粉砕くして用いることが出来
る。
本発明のポリマ酸は、発色試薬溶液または分析素子に流
体試料を適用した層内のpHが約0.1乃至約2になる程
度に存在すればよい。
本発明に係る分析素子の試薬層は、親水性高分子物質を
バインダとして用いる事が可能である。例えばゼラチ
ン、フタル化ゼラチンの如きゼラチン誘導体、ポリビニ
ルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルア
ミド、ポリメタアクリルアミド、更にカルボキシメチル
セルロースナトリウム塩、ヒドロキシエチルセルロース
等のセルロース誘導体等が好ましい。
特にフタル化ゼラチン、ポリアクリルアミド、ポリビニ
ルアルコール、ポリビニルピロリドンヒドロキシエチル
セルロース等が有用に用いる事ができる。
更に本発明に係るポリマ酸をそのままバインダとして用
いる事も可能である。
上記バインダから成る試薬層に本発明に係るジアゾ成
分、カップリング成分およびポリマ酸を同一の層または
別々の単層体に分けて含有する事ができる。またジアゾ
成分、カップリング成分、ポリマ酸を含有する層を順次
積層して積層体としてもよい。また別の態様では支持体
上にジアゾ成分、カップリング成分を含有する層および
ポリマ酸の層(但しバインダは、あってもなくても良
い)を順次積層する事も可能である。
更に前述の三つの化合物を隣接する三つの層にそれぞれ
分離して含有する事も可能である。
当然の事ながら上記試薬層には、分析反応を行なう上で
付加的な物質、例えば界面活性剤、保恒剤等を添加する
事も可能である。
本発明の試薬層は、他の層も含めて本発明の支持体上
に、例えば浸漬塗布法、エアーナイフ法、カーテン塗布
法または米国特許2,681,294号に記載の如きホッパを用
いる押出し塗布法等各種の塗布法で塗布する事が可能で
あり、所望により二層または、それ以上の層を米国特許
2,761,791号および英国特許837,095号に記載の方法で同
時に塗布する事もできる。
更本発明に係る分析素子の試薬層の乾燥温度は任意に選
択することが出来る。例えば室温乃至100℃まで広範な
温度範囲で用いられる。
本発明に係る分析素子の支持体は、液体不浸透性であれ
ばその種類を問わないが、例えば酢酸セルロース、ポリ
エチレンテレフタレート、ポリカーボネート、またはポ
リスチレンのような種々の重合体材料が、この使用目的
に適する。この場合の上記支持体の厚さは任意である
が、好ましくは約50ミクロンから250ミクロンである。
また、本発明に係る支持体の観察側の一側面は、その目
的に応じ任意に加工することは可能である。更に試薬層
を積層する側の支持体面に、場合によっては下塗り層を
使用して試薬層と支持体との接着性を改良する事ができ
る。また、分析素子の構成層が不分離である場合には透
明支持体が好ましい。
本発明に係る展開層は特公昭53-21677号に記載された性
能、即ち(1)一定容量の流体試料を試薬層の単位面積
当りに均一に延展し、(2)流体試料中の分析反応を阻
害する物質または要因を除去し、(3)分光光度分析を
行なう際に支持体をへて透過する測定光を反射するバッ
クグラウンド作用を行なう機能を有するものであれば、
任意に選択する事が出来る。従って、本発明に係る展開
層は、上記3つの機能を全て行ない得るが、また3つの
機能を適宜分離し、各機能毎に別の層を使用することも
可能である。更に、3つの機能のうち、2つの機能を有
する層と、残りの他の機能を有する層を組み合わせ使用
することもできる。例えば二酸化チタンおよび二酢酸セ
ルロースから成るブラッシュポリマと称される非繊維多
孔質媒体の展開層、特開昭56-24576号、特開昭57-12584
7号および特開昭57-19746号等に記載の繊維構造展開層
が挙げられる。
本発明に係る分析素子は種々の異なる配置のうち、任意
の一つをとることが可能である。更に本発明の試薬層を
各種の機能層、試薬含有層および部材、例えば、米国特
許3,992,158号記載の試薬層、反射層、下塗り層、同4,0
42,335号記載の放射線ブロッキング層、同4,066,403号
記載のバリヤ層、同4,144,306号記載のレジストレーシ
ョン層、同4,166,093号記載のマイグレーション防止
層、同4,127,499号記載のシンチレーション層、特開昭5
5-90859号記載の清掃層および米国特許4,110,079号記載
の破壊性ポッド状部材等を任意に組合わせて、本発明の
目的に合わせた分析素子を構成することが可能である。
前記層の製造および前記層の本発明に係る分析素子への
組み込み法は、前記開示技術に記載の方法と同じである
か、または類似である。前記開示技術には、このような
層製造に使用可能な有用な材料についても開示されてい
る。
本発明に係る分析素子は、支持体側もしくは支持体と反
対側から目視で判定することができる。また反射分光光
度測定により比色定量が可能である。また測定波長は、
ジアゾ成分とカップリング成分との組み合せによって40
0〜700nmの広い領域で選択できる。
以上のように構成された分析素子は、展開層側から流体
試料を供給した後、試薬層の分析反応を支持体側又は支
持体と反対側から観察し、反射濃度を測定し、得られた
測定値を予め作成しておいた検量線にあてはめる事で未
知被検物質の量を決定する事ができる。
該分析素子に適用される流体試料の量は任意に定めるこ
とができるが、好ましくは約50μから約5μであ
り、更に好ましくは約20μから約5μである。通常
10μの流体試料を適用するのが好ましい。
本発明の分析素子を用いれば、種々の流体試料中に存在
する亜硝酸イオンを定性又は定量分析することが可能で
あるが、特に尿や唾液中の亜硝酸イオンの分析に用いら
れる。
〔実施例〕
以下に実施例をあげて本発明を更に具体的に説明する
が、これによって本発明の実施態様が限定されるもので
はない。
比較例 (1) 試験紙の作製 ジメチル−α−ナフチルアミン 0.5g スルファニル酸 0.2g ポリマ酸(例示No.4)2.5g 水100mで溶解し発色試薬を作製した。この溶液にガ
ラス繊維紙(東洋紙(株)GC−50)を浸漬した。
余分な溶液を除き凍結乾燥機で2時間乾燥させた後0.5c
m×0.5cmの大きさに切り、両面テープで0.6cm×4cmの
大きさのプラスチックスティックに貼付し試験紙Aとし
た。
上記の発色試薬において、ポリマ酸を除き水のかわりに
10%酢酸100mを用いた以外は試験紙Aと同様の操作
を行なって試験紙Bを得、比較例とした。
(2) 試験紙による亜硝酸イオンの検出 亜硝酸ナトリウムの標準液(0.5μg/m,10μg/
m,100μg/m)をそれぞれの試験紙に滴下し、
発色の程度を目視にて判定した。結果を表−1にしめ
す。
また、試験紙A,Bを大気中室温で放置したところ、試
験紙Bは数時間後淡紅色の着色がみられ、時間の経過に
従い着色が進行した。
しかし試験紙Aについては、着色はみられず白色の状態
が保持された。
このようにポリマ酸を用いても、同様の感度が得られ、
しかも試験紙の保存性が改良されていることがわかる。
実施例−1 (1) 分析素子の作製 透明な厚さ約180ミクロンの下引きポリエチレンテレフ
タレート支持体上に、下記組成の試薬層を塗布した。
試薬層として N−1−ナフチル−N′−ジエチルエチレンジ アミンしゅう酸塩 0.51g/m2 スルファニル酸 0.23g/m2 ポリマ酸(例示No.26 ) 2.52g/m2 オクチルフェノキシポリエトキシエタノール (商品名 Triton X-100;Rohm &,Hass社製) 0.80g/m2 ポリアクリルアミド 12.51g/m2 から成る乾燥膜厚約20μmの層 更に試薬層の上に下組成製の多孔性展開層を積層した。
繊維展開層として 粉末紙(D) 101.7g/m2 (東洋紙(株)) スチレン−グリシジルメタアクリレート 共重合体(重合比9:1) 25.56g/m2 オクチルフェノキシポリエトキシエタノール (Triton X-100) 14.00g/m2 から成る乾燥膜厚約300μmの繊維展開層。
(2) 分析素子による亜硝酸イオンの測定 清浄な状態で採取した唾液に、亜硝酸ナトリウムを加
え、種々の濃度の亜硝酸ナトリウム含有唾液を調整し上
記の分析素子の展開層上に唾液10μを滴下した。
滴下30秒後546nmで反射濃度(Dr)を測定した。第1
図に示すように、反射濃度と亜硝酸ナトリウム濃度レベ
ル間に良好な相関がみられ、定量が可能である。
実施例−2 スルファニル酸及びポリマ酸(例示No.26)のかわりに
表2に示すような組み合せを用いて、実施例−1と同様
に分析素子を作製し、検出を行なった。
ジアゾ成分 ポリマ酸 4−アミノアンチピリンHCl 例示No.4 4−ニトロアニリン 例示No.13 4−シアノアニリン 例示No.23 実施例−1と同様に亜硝酸ナトリウムの濃度レベルと反
射濃度との間に良好な関係がみられた。
また、実施例−1,2で作製した分析素子を大気中、室
温で放置しても着色はみられなかった。
実施例−3 実施例1で作製した分析素子を検量線を用いて唾液中の
亜硝酸イオンの濃度を測定し、同時に官能テストも行な
った。
官能評価の評価基準 無〜低臭 不快臭なし 0 低〜中低度臭 不快臭わずか 1 中低度〜強い悪臭 不快臭 2 強い悪臭 強い不快臭 3 第2図に示すように良好な相関関係を示した。
〔発明の効果〕
本発明によれば、このように口臭の指標となる亜硝酸イ
オンが短時間、簡便で精度よく測定することができ、唾
液中の亜硝酸イオンを測定することにより口臭の程度を
知ることができる。
【図面の簡単な説明】
第1図は亜硝酸イオン濃度と反射濃度(Dr)との相関
を示し、第2図は亜硝酸イオン濃度と口臭官能テストと
の相関を示す図である。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】液体不浸透性支持体上に、亜硝酸イオンと
    ジアゾ反応して発色する化合物とポリマ酸とを含有する
    試薬層を設け、更にその上に流体試料を均一に延展する
    亜硝酸イオンに対して不活性、透過性の展開層を設けた
    ことを特徴とする亜硝酸イオンによる口臭測定用分析素
    子。
JP61257917A 1986-10-28 1986-10-28 亜硝酸イオンによる口臭測定用分析素子 Expired - Lifetime JPH0654311B2 (ja)

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