JPH0717517B2 - 新規化合物、その製法及びそれを含む医薬組成物 - Google Patents

新規化合物、その製法及びそれを含む医薬組成物

Info

Publication number
JPH0717517B2
JPH0717517B2 JP60269206A JP26920685A JPH0717517B2 JP H0717517 B2 JPH0717517 B2 JP H0717517B2 JP 60269206 A JP60269206 A JP 60269206A JP 26920685 A JP26920685 A JP 26920685A JP H0717517 B2 JPH0717517 B2 JP H0717517B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
group
formula
conjugate
protein
pharmaceutically useful
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP60269206A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS61155333A (ja
Inventor
アンドルー・ジヨン・ガーマン
Original Assignee
ビーチャム・グループ・ピーエルシー
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=10570497&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=JPH0717517(B2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by ビーチャム・グループ・ピーエルシー filed Critical ビーチャム・グループ・ピーエルシー
Publication of JPS61155333A publication Critical patent/JPS61155333A/ja
Publication of JPH0717517B2 publication Critical patent/JPH0717517B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/49—Urokinase; Tissue plasminogen activator
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/38—Albumins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は製薬上有用な蛋白質の共役物（conjugates）に
関する。
〔従来の技術〕
蛋白質及び水溶性重合体の共役物は広い範囲の製薬上の
目的に製造されてきている。１個以上の重合体分子の付
着は通常蛋白質と他の巨大分子又は細胞との相互反応を
妨害する効果を有する。従つて蛋白質の抗原性又はアレ
ルゲン性が消失するか又は血流からのそのクレアランス
が延長される。例えばウロキナーゼのプラズマ・クレア
ランスはメトキシポリエチレングリコールの不可逆性付
着により延長される。又は共役物は新規な性質を有して
もよく例えばヨーロッパ特許第0,038,154号は免疫抑制
性を有するポリザルコシンとアレルゲンとの共役物を開
示している。
〔発明が解決しようとしている問題点〕
クリアランスを遅延させるか又は抗原性を低下させる蛋
白質への重合体の付着は低分子量の基質に作用する蛋白
質通常酵素にとり最も用いられる。もし治療上の効果を
もたらすために蛋白質が巨大分子又は細胞に結合した基
質へ作用する必要があるならば重合体の付着がこの相互
反応を妨害して活性の損失をもたらすことが予想されよ
う。
このような効果はストレプトキナーゼ及びポリエチレン
グリコールについて示されてきておりその際減少した抗
原性がフイブリン溶解活性の低下によつてのみ達成され
た。しばしばたとえばもし蛋白質が低分子量の基質に作
用するならば重合体の付着による活性の低下に出合う。
〔問題点を解決するための手段〕
本発明によれば、可逆的結合基により少なくとも１種の
水溶性重合体に結合した製薬上有用な蛋白質よりなる共
役物、すなわち、可逆性結合基により少なくとも１種の
水溶性重合体に結合した製薬上有用な蛋白質よりなる式
（II）： 〔式中Ｘは製薬上有用な蛋白質でありNH部分はＸの蛋白
質アミノ基から誘導され；そして （ｉ） R1及びR2はそれぞれ非重合性有機基又は式-R3-
P（式中Ｐは水溶性重合体でありR3は橋かけ基である）
の基であるか；又は （ii） R1及びR2は一緒になってC3〜5ポリメチレンで
あって５−〜７−員脂環族環を完成するか又は一緒にな
って芳香族環を完成し、その際脂環族又は芳香族の環は
基R4及びR5（それらはそれぞれ非重合性有機基又は式-R
3-Pの基である）により置換され； そしてR1及びR2の少なくとも１個又はR4及びR5の少なく
とも１個は基-R3-Pである〕 で表わされる蛋白質−水溶性重合体結合物、が提供され
る。
本明細書に用いられるとき用語「製薬上有用な蛋白質
（pharmaceutically useful protein）」とはヒト又は
動物の体に治療的又は薬理学上の効果をもたらす蛋白質
を意味する。
用語「可逆性結合基（reversible linking group）」と
は臨床上有用な速度で生体内の条件下で崩壊される結合
を意味する。適当には結合基の崩壊の擬一次速度定数は
10-6〜10-3／秒の範囲内にあるだろう。
このタイプの共役物は活性蛋白質の徐放性をもたらす。
共役物は一般式（Ｉ） Ｐ−Ｌ−Ｘ （Ｉ） （式中Ｐは水溶性重合体であり;Lは可逆性結合基であ
り；そしてＸは製薬上有用な蛋白質である）により示さ
れよう。
このやり方で蛋白質に結合しそして望ましくない性質
（例えば抗原性，早いクリアランス）を除く水溶性重合
体の分子の数は蛋白質の性質に依存しそして通常の方法
により求められうる。しかし重合体分子の可逆性結合に
よる蛋白質の変性の度（即ち蛋白質に結合した重合体分
子の数）は不可逆性重合体蛋白質共役物の場合よりも重
要ではない。
それぞれの蛋白質分子はそれに付着した１個よりも多い
結合基を有しそしてそれぞれの結合基はそれに付着した
１個より多い水溶性重合体を有しよう。
水溶性重合体（Ｐ）の分子量は好ましくは500〜106の範
囲そして最も好ましく2000〜20000の範囲内になければ
ならない。
適当な水溶性重合体（Ｐ）の例はポリアミノ酸又はポリ
イミノ酸例えばポリサルコシン，ポリ−D,L−アラニ
ン，ポリヒドロキシプロリン又は多糖類及びそれらの誘
導体例えばデキストラン，ヒドロキシエチルでん粉又は
フイコル（Ficoll）又は誘導さていてもよい合成重合体
例えばポリエチレングリコール，ポリプロピレングリコ
ール，ポリビニルピロリドン，ポリビニルアルコール又
はポリアクリルアミドを含む。
適当には水溶性重合体（Ｐ）はメトキシポリエチレング
リコールである。
製薬上有用な蛋白質（Ｘ）は酵素，前酵素又は非酵素性
蛋白質でよい。
適当な非酵素性蛋白質はインターフエロン，リンホキン
特にインターロイキン−2,スタヒロコツカス．アウレウ
ス（Staphylococcus aureus）からのプロテイン（Prote
in）A,又はホルモン例えばインシユリン，成長ホルモン
又はワクチン例えばアレルゲン抽出物で用いられる蛋白
質又はウイルス被覆蛋白質を含む。
製薬上有用な蛋白質（Ｘ）が酵素又は前酵素である例は
止血薬に含まれるプロテアーゼ（それらの前酵素ととも
に），フイブリン分解酵素及びそれらの前酵素，アルギ
ナーゼ，ウリカーゼ、アスパラギナーゼ，グルタミナー
ゼ，スーパーオキシドジスムターゼ及び種々の酵素欠乏
疾患にかかつている患者に存在しない酵素例えばヘキソ
サミニダーゼＡ及びグルコセレブロシダーゼを含む。
特に好ましい態様において製薬上有用な蛋白質（Ｘ）は
フイブリン溶解酵素（fibrinolytic enzyme）又はその
前酵素（pro-enzyme）である。
本明細書に用いられる用語「フイブリン溶解酵素」とは
ヨーロツパ特許第0,009,879号（米国特許第4285932号）
に規定されている生体内のフイブリン溶解活性を示す任
意の酵素を意味する。
これらの酵素は組織培養，血液，尿又は組織からの抽出
により又は組み換えDNA法により製造されよう。
これら酵素の例は組織プラスミノーゲン活性剤例えばメ
ラノーマプラスミノーゲン活性剤を含むプラスミノーゲ
ン活性剤，ウロキナーゼ（高分子量及び低分子量の両者
及び単鎖の形），そしてストレプトキナーゼとプラスミ
ンとの複合体である。
適当な前酵素は前ウロキナーゼ及び前組織プラスミノー
ゲン活性剤を含む。
フイブリン溶解酵素及びその前酵素として上記に規定さ
れた製薬上有用な蛋白質の群は又以下のものを含む。
（ａ） ヨーロツパ公開出願第0155387号に開示された
フイブリン溶解活性ハイブリツド蛋白質； （ｂ） ヨーロツパ公開出願第0155388号に開示された
フイブリン溶解酵素の誘導体；そして （ｃ） ヨーロツパ公開出願第0152736号に開示された
蛋白質共役物。
フイブリン溶解酵素は任意にヨーロツパ特許第0,009,87
9号（米国特許第4285932号）に記載されたようにそれら
の活性中心でブロツクされていてもよい。
結合基（Ｌ）はその結合が臨床上有用な速度で生体内の
条件下で破壊されるようなものである。
結合基（Ｌ）の開裂は加水分解により又は分子間再配置
により生じよう。それは結合基（Ｌ）それ自体の中で又
は重合体と又は蛋白質との結合基（Ｌ）の境界で生じよ
う。
好ましくは開裂は未変性の蛋白質を生じさせなければな
らない。
適当な結合基（Ｌ）は置換されたマレイン酸に基く。形
成された共役物は一般式（II） 〔式中Ｘは前記同様でありそしてNH部分はＸの蛋白質ア
ミノ基から誘導され；そして （ｉ） R1及びR2はそれぞれ非重合性有機基又は式-R3-
P（式中Ｐは前記同様でありR3は橋かけ基である）の基
であるか；又は （ii） R1及びR2は一緒になつてC3〜5ポリメチレンで
あるつて５−〜７−員脂環族環を完成するか又は一緒に
なつて芳香族環を完成しその際脂環族又は芳香族の環は
基R4及びR5（式中それぞれ非重合性有機基又は式-R3-P
の基である）により置換され； そしてR1及びR2の少くとも１個又はR4及びR5の少くとも
１個は基-R3-Pである〕 により示されうる。
pH7.4及び37℃の生理学的な条件を含む中性及び酸性溶
液中で式（II）の共役物中のCO-NH結合は隣接するカル
ボキシル基により促進される方法により加水分解されそ
れにより未変性の蛋白質を生じさせる。脱アシル化の速
度は二重結合に近い原子に依存しその性質は脱アシル化
速度が劣つたように変化されないならば重要ではない。
適当な橋かけ基R3の例は直鎖又は枝分れ鎖のC1〜10の脂
肪族炭化水素鎖を含みそれは任意にアミン又はエスエル
部分により又は酵素，硫黄又は窒素から選ばれる少くと
も１個のヘテロ原子により中断又は終了してもよく任意
にC1〜6アルキル基により置換されてもよい。
好ましくはR3は二重結合に隣接した電子供与部分例えば
メチレンを含む。
適当な基-R3-Pの例はP-(CH2)n-,PO(CH2)n-,PO-,P(CH2)n
0-,PCH(CH3)-,PC(CH3)2-,POCH(CH3)-又はPOC(CH3)2-
（式中ｎは１〜６の整数である）を含む。
R1,R2,R4及びR5に関する適当な非重合性有機基は任意に
C1〜6アルキル基により置換されていてもよく酸素，硫
黄又は窒素から選ばれたヘテロ原子により中断又は末端
におかれてもよい脂肪族C1〜10炭化水素基を含む。
好ましくは非重合性有機基は二重結合に隣接する電子供
与部分例えばメチレン又はメチルを含む。
R1,R2,R4及びR5に関するこれらの基の例はR6,R6-O-又は
(R6)2N-（式中R6は直鎖又は枝分れ鎖のC1〜6アルキルで
ある）を含む。
特にR1,R2,R4又はR5はCH3,CH3CH2-,(CH3)2CH-,CH3CH2CH
2-,(CH3)3C-,CH3O-,CH3CH2O-又は(CH3)2N-であろう。
R1及びR2がそれぞれ非重合性有機基又は前述の式-R3-P
の基であり少くとも１個のR1及びR2が基-R3-Pである式
（IIA）の式（II）内の共役物の下位群がある。
式（IIA）の共役物に好ましくはR1及びR2の１個は基P-C
H2-であつて他はメチルである。
R1及びR2が一緒に結合している式（II）の共役物の例は
式（IIB） （式中r,S及びｔはそれぞれ独立して0,1又は２であつて
ｒ＋Ｓ＋ｔは０より大きくそして４より小さく即ち１〜
３の整数でありR4及びR5は前記同様である） の環状構造を含む。
又R1及びR2は一緒に結合して芳香族構造を形成しよう。
（式（II）のこのような共役物の例は式（IIC） （式中R4及びR5は式（II）に関して規定した通りであ
る） の共役物を含む。
式（IIB）及び（IIC）のR4又はR4に関するこのような非
重合性有機基は式（II）について上述したものを含む。
さらに本発明によれば蛋白質アミノ基又はその誘導基と
反応して前述の可逆性結合基を形成しうる基よりなる水
溶性重合体含有試薬と製薬上有用な蛋白質とを反応させ
ることによりなる前記の共役物を製造する方法が提供さ
れる。
Ｐ−L1 （III） （式中Ｐは前記同様でありそしてL1は前述の如く結合基
（Ｌ）を形成しうる基である） により示されよう。
共役物を製造するのに用いられる条件は重合性試薬及び
蛋白質の性質及び形成される結合の安定性に依存しそし
て当業者に明らかであろう。
適当には蛋白質は好ましくは中程度のアルカリ性pH例え
ばpH7.0〜9.5及び０〜40℃の範囲内の温度で水性緩衝液
中に溶解される。pHは反応中手動又は自動の何れかでも
し必要ならば酸又は塩基の添加によりコントロールされ
よう。
用いられる水溶性重合体含有試薬〔式（III）〕の量は
蛋白質に付着するようになる重合体分子の数をきめる。
少くとも１モル過剰の試薬〔式（III）〕を加えなけれ
ばならない。
反応が完了した後過剰の試薬及び望ましくない反応生成
物は除去されよう。適当な除去法は硫酸アンモニウム沈
でん，透析，透析過又は多数のクロマトグラフイ法例
えばゲル過，イオン交換クロマトグラフイ，疏水性相
互反応クロマトグラフイ又はアフイニテイクロマトグラ
フイを含む。
フイブリン溶解酵素及び他のセリンプロテアーゼについ
てベンズアミジンセフアロース（Sepharose）のアフイ
ニテイクロマトグラフイが特に好ましい方法である。
フイブリン溶解酵素についてそれらの活性中心の任意の
ブロツキングが重合性共役反応の前又は後に行われよ
う。
式（II）の共役物に示された結合のタイプは適当には式
（IV） （式中R1及びR2は前記同様である） の試薬と製薬上有用な蛋白質のアミノ基との反応により
得られる。
蛋白質アミノ基は原則として何れかのカルボニル基と反
応するので形成された式（II）の共役物がもしR1＝R2な
らば結合で異性を示すことは理解されよう。
式（III）及び（IV）の試薬は新規でありそしてそれ自
体本発明の一部を形成する。
式（IV）の試薬は式（IVA） 〔式中A1及びA2はそれぞれヒドロキシ基であるか又は一
緒になつて−Ｏ−でありB1及びB2は一緒になつて結合で
あるか又は結合を形成するため除去可能な基でありそし
て （ｉ） Ｒ′1及びＲ′2はそれぞれ前述の非重合体有機
基又は基Ｗであり；又は （ii） Ｒ′1及びＲ′2は一緒になつてC3〜5ポリメチ
レンとなつて５−〜７−員脂環族環を完成するか又は一
緒になつて芳香族環を完成しその際脂環族又は芳香族の
環は基Ｒ′4及びＲ′5（それぞれ前述の非重合性有機基
又は基Ｗである）により置換され少くとも１個のＲ′1
及びＲ′2又は少くとも１個のＲ′4及びＲ′5は基Ｗで
ある〕 の化合物と化合物PY（式（IVB）（式中Ｐは前記同様で
あり；基Ｗ及びＹは一緒に反応して橋かけ基R3を形成し
うる基である） とを反応させ； そして次にA1及びA2がそれぞれヒドロキシのとき反応の
生成物を脱水する及び／又はB1及びB2が除去可能な基の
とき反応の生成物を除去することにより製造されよう。
好ましくは式（IVA）の化合物において基A1及びA2は一
緒になつて−Ｏ−でありそして基B1及びB2は一緒になつ
て結合である。
基Ｗ及びＹの性質及び従つて用いられる反応条件はもた
らされる橋かけ基R3により決められる。
橋かけ基が前述のヘテロ原子を含む脂肪族炭化水素鎖の
とき基Ｙ及びＷはそれぞれ適切な長さの炭化水素鎖であ
つてそれぞれ適切な求核性ヘテロ原子O,S又はＮ及び適
当な脱離基例えばハロゲン（好ましくは臭素又は沃
素），メタンスルホニル又は４−トルエンスルホニルを
末端に有する。橋かけ基R3が脂肪族炭化水素鎖のとき基
Ｙは重合体Ｐ上の末端求核性ヘテロ原子でありそして基
Ｗは適当な脱離基により誘導された反応する炭化水素鎖
である。これらの場合の脱離基の求核性置換の反応条件
は従来行われているものでありそして主として重合体に
より決定されよう。それ故求核基が−Ｏであるとき反応
は反応が完了するまで乾燥窒素の雰囲気下任意の非極性
溶媒中で行われよう。
橋かけ基がアミド又はエステル部分を含む脂肪族炭化水
素鎖のとき基Ｗ及びＹはそれぞれ適切な長さの炭化水素
鎖であり末端の一つはカルボキシル基であり他はヒドロ
キシル又はアミノ基である。反応条件はエステル又はア
ミド結合の形成に従来用いられている条件であり例えば
適当な活性剤例えばジシクロヘキシルカルボジイミドに
より非水性条件下で酸を活性化しそして次に適切なアル
コール又はアミンと反応させる。
式（IVB）の化合物を得る重合体Ｐの誘導体化は式（IV
A）の化合物の製造と同じく従来行われている方法によ
り行われよう。
式（IV）の特に適当な試薬は式（Ｖ） （式中Ｐは前記同様である） の無水物である。
結合基（Ｌ）への水溶性重合体（Ｐ）の付着の態様は重
合体の化学的な性質に依存しよう。従つてもしＰが式
（Ｖ）のメトキシポリエチレングリコールならば試薬は
適当には式（VI） のものである。
もし重合体がポリザルコシンのとき適当な試薬は式（VI
I） のものである。
式（VI）及び（VII）においてｐ及びｍはそれぞれ重合
体の分子量が上述の範囲内に入るような整数である。
他の重合体は結合基への適当な接続がなされうる前に従
来行われている方法で誘導体化されねばならないだろ
う。
式（IV）の他の適当な試薬は式（VIII） （式中Ｐは前記同様である） の無水物である。
Ｐ基の付着の態様は式（IV）について前述した通りであ
ろう。
本発明の蛋白質共役物は好ましくは製薬組成物として投
与される。
従つて本発明は又製薬上許容される担体と組み合わされ
た本発明の共役物よりなる製薬組成物を提供する。
組成物は一般に処方された蛋白質それ自体と同一又は同
様な方法で処方されよう。これは錠剤，カプセル，クリ
ーム，シロツプ，懸濁液，溶液，再生可能な粉末及び注
射又は灌流に適した滅菌物を含むだろう。このような組
成物は従来行われている製薬上の実際上のやり方に従つ
て製薬上許容しうる物質例えば希釈剤，結合剤，着色
剤，香料，保存剤，崩壊剤などを含みうる。
本発明の組成物中の蛋白質は通常それが従来用いられる
量に近い量で投与されよう。mg/kg投与量はそれに結合
した重合体分子及び共役物の能力及びフアマーコキネテ
イツクスを考慮に入れて適切にそれより多く調節され
る。
製薬上有用な蛋白質（Ｘ）がフイブリン溶解酵素のとき
本発明による組成物はヒトへの静脈内投与に適した製薬
組成物と同じく従来行われている方法に従つて処方され
る。
代表的には静脈内投与用の組成物は滅菌等張性水性緩衝
液中の滅菌誘導体の溶液である。必要ならば組成物は又
共役物を溶液として保つ溶解剤及び注射の部位の痛みを
和らげる局所麻酔剤例えばリグノカインを含んでもよ
い。一般に共役物は単位投与物の形で投与されそして例
えば遊離の蛋白質が遊離される時間を指示すると同時に
活性単位で蛋白質の量を示す熱的にシールされた容器例
えばアンプル又はパツク中の乾燥粉末又は水のない濃縮
物である。共役物が灌流により投与されるときそれは滅
菌の製薬上の品質「注射用水」又は生理食塩水を含む灌
流瓶により供給されよう。共役物が注射により投与され
るときそれは注射用の滅菌水のアンプルにより供給され
よう。注射用又は灌流用の組成物は投与前に成分を混合
することにより作られよう。
投与の正確な量及び投与の態様は治療を行う医者による
環境に従つて必ず患者の状態に応じて決定されねばなら
ない。しかし、一般にフイブリン溶解共役物により血栓
症を治療する患者は一般に灌流により又は５回以内の注
射により0.001〜3.0mg/kg体重の蛋白質投与に等しい１
日当りの投与量を得る。好ましい投与量は50〜100mg/日
である。
どんな毒性も認められなかつたし又は上述の投与範囲で
は示されない。
本発明の他の態様によれば患者に有効且非毒性の量の本
発明の蛋白質共役物を投与することによりなる前述の製
薬上有用な蛋白質を必要とする患者を治療する方法が提
供される。
特に患者に有効且非毒性量の前述のフイブリン溶解酵素
共役物を投与することよりなる血栓症疾患を治療する方
法が提供される。
本発明は又活性の治療物質として用いられる本発明の共
役物を提供する。本発明はさらに製薬上有用な蛋白質が
活性治療物質として用いられそして特に血栓症疾患の治
療に用いられるフイブリン溶解酵素又は前酵素である共
役物を提供する。
〔実施例〕
下記の実施例は本発明を説明する。
下記の実施例において結合基において蛋白質について２
個の潜在的な結合点（即ち無水マレイン酸誘導体の２個
のカルボキシル基）が存在することに注意すべきであ
り、そして簡便のために２個の潜在的異性体の中１個の
みが名指しされそして説明されているが両者の間を区別
する試みはなされなかつた。
添付書面において 第１図:G3000 SW HPLC溶解プロフイル（OD280） ａ） HSA（若干の二量体を含む） ｂ） PEG-HSA反応混合物（実施例１） ｃ） pH5.0,37℃,2時間の加水分解後のPEG-HSAピー
ク。
第２図:G3000 SW HPLC溶離プロフイル（OD280,125I） ａ） ウロキナーゼ（高分子量） ｂ） PEG-UK反応混合物（実施例１） ｃ） ３日間PTで加水分解後のPEG-UK。
−ｘ−ｘは125Ｉプロフイルを示す。
第３図：下記の分析hplcゲル過溶離プロフイル： ａ） tPA ｂ） PEG-tPA共役物（実施例３） ｃ） 37℃21時間後の共役物 ｄ） 37℃44時間後の共役物。
見掛け上の分子量はバイオラツド（Biorad）標準物によ
る較正曲線から求められる。
第４図：ウロキナーゼ（■）及びPEG−ウロキナーゼ
（実施例2,●）による生体外のヒト血塊溶解の時間の経
過。
第５図：モルモツトの血流からのフイブリン溶解活性の
クリアランス。○はPEG−ウロキナーゼ（実施例２）
（ｎ＝４であり、△はウロキナーゼ（ｎ＝４）である。
実施例１ ２−（メトキシポリエチレン（5000）グリコキシメチレ
ン）−３−メチル無水マレイン酸の製造 （ｉ） 乾燥且再蒸留した四塩化炭素（30ml）中の2,3
−ジメチル無水マレイン酸（2.0g,15.9mモル）にＮ−ブ
ロモサクシンイミド（5.72g,32mモル）及び過酸化ベン
ゾイル（5mg）を加えた。撹拌した混合物を22時間温和
な還流下加熱した。溶液を放置して冷却しそして過蒸
発させて褐色の油（2.97g）を得た。これをバルク対バ
ルクの蒸留（1mmHg,170℃）にかけて淡緑色の油（1.40
g）を得た。これは1Hnmrにより〜85％の所望のモノブロ
モ誘導体であることが示された。少量の痕跡のジブロモ
化及び未ブロモ化物質が又存在していることが分つたが
これらは容易に除去され得ないので物質は他の変換にお
いて単離されて用いられた。1 Hnmr(CDCl3)δ4.2（CH2 Brジ置換物質）,4.1（CH2 Brモ
ノ置換物質）,2.2（CH3 ，モノ置換物質）,2.2（CH3 未置
換）。
（ii） 乾燥したメトキシポリエチレングリコール（50
00）（11.7g,2.34mモル）をベンゼン（150ml）中のナト
リウムアミド（91mg,2.34mモル）の撹拌した混合物に加
えた。ブロモメチル無水物（480mg,2.34mモル）を加え
た。反応物を22時間還流下撹拌した。冷却して溶液を
過し石油エーテル（600ml）を加えた。沈でんした個体
を過し減圧乾燥してワツクス（10g）を得た。これは
位相差赤外線分光分析により所望の化合物を含有するこ
とが示された。少しの又は全く開環は検知されなかつ
た。構造の他の特徴はNaOHによる加水分解されたサンプ
ルの滴定により求められた。1.08モル無水物／モルPEG
が検知された。
２−〔ω−メトキシポリエチレングリコキシメチレ
ン〕,3−メチルマレイル−ヒト血清アルブミンの製造 室温において0.1Mピロ燐酸ナトリウム/HCl,0.01％ツウ
イーン（Tween）80,pH7.4緩衝液（2.0ml）中のHSA「シ
グマ（Sigma）,20mg〕の撹拌した溶液に２−（メトキシ
ポリエチレン（5000）グリコキシメチレン）−３−メチ
ル無水マレイン酸（400mg）を加え0.1M NaOHの添加によ
りpHを8.0に保つた。塩基の吸収が終つた後に一部をHPL
Cゲル過により分析した。変性したHSAがアルブミン二
量体の見掛け上の分子量即ち130,000に相当する広いピ
ークとして溶離した（第1b図）。
関係のある画分を集めた。
脱アシル化がpH5.0で一層早いので可逆性をpH5.0で調べ
た。共役物の集りの一部を希HClによりpH5.0に調節し37
℃に置いた。２時間後一部をHPLCにより分析した。第1c
図は殆んど完全な可逆性が達成されたことを示す。
実施例２ ２−〔ω−メトキシポリエチレングリコキシメチレン〕
３−メチルマレイル−ウロキナーゼの製造 （ｉ） ０℃において0.1Mピロ燐酸ナトリウム/HCl,0.0
1％ツウイーン80,pH8.0緩衝液（0.5ml）中のウロキナー
ゼ〔セロノ（Serono），高分子量,1.8mg/ml〕及び〔125
I〕ウロキナーゼ（0.2μCi）の撹拌した溶液に２−（メ
トキシポリエチレン（5000）グリコキシメチレン）−３
−メチル無水マレイン酸（100mg）を加え0.1M NaOHの添
加によりpHを8.0に保つた。反応後プラスミノーゲン活
性化定量の活性は元の活性の約44％であることが分つ
た。発色基質活性は殆んど変化しなかつた。反応混合物
を４℃でセフアロース（Sepharose）6BCLのカラウ（5.1
ml）に適用しそして0.1M NaCl,0.05M NaH2PO4/Na2HPO4,
0.01％ツウイーン80,pH7.4により平衡化した。共役物は
カラムの容量後溶離する広いピークとして溶離した。関
連のある画分を集めそして共役物を−40℃で凍結保存し
た。
共役物の一部をHPLCゲル過により分析した。放射能プ
ロフイルは約160,000の見掛け上の分子量で溶離する広
いピークを示した（第2b図）。３日間室温に置かれた共
役物の一部は平均分子量が殆んど遊離のウロキナーゼの
それに実質的に低下したが（第2c図）明らかにこれらの
条件下では100％の可逆性が得られなかつた。
変性の可逆性は又プラスミノーゲン活性定量を用いても
定量された。共役物の一部に20％になるようにグルセロ
ールを加えそして溶液を37℃に置いた。一部ずつを間隔
を置いて定量した。活性の回収は３×10-5／秒の凝第一
次速度定数の大略第一次速度論に従つた。
（ii） 二番目の製造は次の如く行われた。
ウロキナーゼ（セロノ,5mg）を室温でピロ燐酸塩緩衝液
（1.2ml）に溶解させそして試薬を撹拌しつつ約２分間
にわたつて３×250mgずつ加えた。pHを0.5M NaOHの添加
により8.0に保つた。塩基の吸収が終つた後に溶液を0.0
5M NaH2PO4/Na2HPO4,0.1M NaCl,0.01％ツウイーン80pH
7.4により平衡されたベンズアミジンセフアロースのカ
ラム（9.5mm×11cmベツド重量）に適用した。過剰（加
水分解された）の試薬を溶離した後緩衝液を0.5Mアルギ
ニン,0.5M NaCl,20mMトリスヒドロキシメチルアミノメ
タン,pH7.4に変えると変性したウロキナーゼが単一のピ
ークとして溶離した。
分析用HPLCは見掛け上の平均分子量140,000を有する広
い共役されたピーク（画分の発色基質定量による）を示
した。
実施例３ ２−〔ω−メトキシポリエチレングリコキシメチレ
ン〕,3−メチルマレイル−組織プラスミノーゲン活性剤
0.02M NaH2PO4/Na2HPO4,0.3M NaCl,0.1M4−グアニジノ
酪酸,0.01％ツウイーン80,pH7.4中の組織プラスミノー
ゲン活性剤（ｔ−PA）の溶液を亜鉛キレートクロマトグ
ラフイ，リジン・セフアロース上のアフイニテイ・クロ
マトグラフイ，セフアデツクスG25のゲル過，再びリ
ジン・セフアロスクロマトグラフイ,PEG透析，セフアデ
ツクスG25のゲル過そして再びPEG透析により培養され
たヒトメラノーマ細胞上澄み液から濃度120,000SU/ml
（約1mg/ml）で得た。この溶液（1ml）を次にセフアデ
ツクスG25M〔PD-10,フアーマシア（Pharmacia）〕でゲ
ル過して0.1M4−グアニジノ酪酸及び0.01％ツウイー
ン80を含む0.1Mピロ燐酸ナトリウム緩衝液pH8.0（1.5m
l）へ落した。溶液を室温で充分に撹拌しそして２−
（メトキシポリエチレン（5000）グリコキシメチレン）
−３−メチル無水マレイン酸を250mgずつ３回約２分間
の間隔で加えその間オートビユーレツト〔ラジオメータ
（Radio-meter）〕から0.2M NaOHの添加によりpHを8.0
に保つた。塩基の吸収が終つた後に溶液をセフアデツク
スG25M（２本のPD-10カラム）を用いて４℃でゲル過
して0.05M NaH2PO4/Na2HPO4,0.1M NaCl,0.01％ツウイー
ン80,pH7.4に入れ次に同じ緩衝液により平衡にしたベン
ズアミジンセフアロースのカラム（9.5mm×11cmベツ
ド）に適用した。
過剰の（加水分解された）試薬を溶離した後緩衝液を0.
5Mアルギニン,0.5M NaCl,20mMトリスヒドロキシメチル
アミノメタンpH7.4へ変えると変性した蛋白質が単一の
ピークとして溶離した。関連のある画分を集めそして４
本のPD-10カラムを用いて100mM NH4HCO3,0.2％Ｄ−マニ
トールへ脱塩した。この溶液を次に凍結乾燥した。
変性の程度及び可逆性はhplcにより定量した（第３
図）。PEG-t-PA共役物が広いピークとして溶離しその見
掛け上の分子量は130,000であつた。0.1Mトリスヒドロ
キシメチルアミノメタン,0.9％NaCl,pH7.4（9,900SU/m
l）中で37℃で21時間後共役物は高度に脱アシル化され
て見掛け上の分子量は75,000となつた。44時間後脱アシ
ル化は完了した。
方法 （ａ） 発色基質定量 ウロキナーゼは25℃で0.1MトリエタノールアミンHCl pH
8.0中の1mMの濃度で発色基質Ｓ−2444〔カビビトラム
（KabiVitrum），スウエーデン〕について定量された。
SUは1cm路長セル中で1mlの基質中の0.001/分の405nmで
のOD増大をもたらす活性の量として規定される。
（ｂ） プラスミノーゲン活性定量 キユベツトに0.1Mトリエタノールアミン緩衝液pH7.0（2
5μｌ）中の10mMS-2251（カビビトラム，スウエーデ
ン）,10mg/mlのリス（lys）−プラスミノーゲン（カビ
ビトラム，スウエーデンそしてアプロチニン・アガロー
スにより処理）及び適当な濃度（５μｌ）のテスト活性
剤を入れた。これらを溶液を混合させることなくキユベ
ツトに加えた。ブランクのキユベツトに活性剤以外の上
記の溶液を加えた。両方のキユベツトに0.1Mトリエタノ
ールアミン緩衝液pH8.0（1ml）の添加により定量を開始
しそしてOD405（テスト対ブランク）を調べた。（時
間）2に対するODのプロツトの最初のスロープはプラス
ミノーゲン活性の速度の目安として取られた。
（ｃ） γ−カウント これはパツカード（Packard）自動ガンマシンチレーシ
ヨンスペクトロメーターを用いて行われた。
（ｄ） HPLC 分析用ゲル過HPLCは0.75ml/分の流速を用いて20％エ
タノールを含む0.08M Na2HPO4/NaH2PO4 0.32M NaCl緩衝
液pH7.0により平衡にされたTSKG 3000 SWのカラム（AW6
0CM）により行われた。分子量の測定はバイオラツドか
らの標準蛋白質について行つた。
（ｅ） ヒトプラズマ血塊溶解 血液（40ml）をヒト志願者から採りそして0.1容量の129
mMくえん酸三ナトリウムと混合した。プラズマは４℃で
15分間1700gでの遠心分離により作成しそして４〜６人
の志願者かのプラズマを集めた。
プラズマの一部（0.5ml）をCaCl2を用いて再びカルシウ
ム化して25mMの最終濃度としそして約0.1μCi〔125I〕
−フイブリノーゲン〔ザ・ラジオケミカル・センター
（the Radiochemical Centre），アムステルダムにより
供給される材料の硫酸アンモニウム沈でんにより再精
製；比放射能100μCi/mg〕を加えた。補足されたプラズ
マを50μｌのオウシトロンビン（0.9％NaCl中50NIH単位
/ml）を用いてニツケル・クロムワイヤーコイルへ塊ま
らせた。血塊を30分間25℃に置き次に１時間４°で６容
量の0.1M燐酸塩緩衝液pH7.6中で洗つた。
血塊を125Iについてカウントし次に適当にプラスミノー
ゲン活性剤を加えて５時間以内37°で３〜5mlの均質な
プラズマをインキユベートした。溶解はフイブリン劣化
生成物として放出される。125Iをカウントすることによ
り調べた。インキユベーシヨン容量から一連の部分（50
μｌ）を採る効果を差し引いてラジオレベルの放出％と
して表示される。
（ｆ） モルモツトの血流中のフイブリン溶解活性の定
量 オスのダンキン・ハートレイ（Dunkin Hartley）モルモ
ツト（350〜450g）をウレタン（25％W/V溶液;6ml/kg i.
p.）により麻酔した。１本の頸動脈を血液サンプルの採
取のためにカニユレートした。１本の大腿静脈をヘパリ
ン（50U/kg,i.v.）及びテスト下の化合物の注射のため
にカニユレートした。ヘパリン処理約５分後に投与前の
血液サンプル（2ml）を採りそして0.1容量の129mMくえ
ん酸三ナトリウムと混合した。テスト下の化合物を次に
10秒かけて注射（1ml/kg）した。さらに血液サンプルを
正確に2,4,8,16,30,60及び90分後に採つた。ヘパリン処
理（50U/kg,i.v.）を30分のサンプルの後で繰返してカ
ニユーラの開通性を保つた。すべてのくえん酸塩処理サ
ンプルをそれぞれの実験の終りまで氷中に保ち次に４°
で15分間1700gで遠心分離してプラズマを得た。それぞ
れのプラズマのサンプルを0.01％（V/V）ツウイーン80
を含む燐酸塩緩衝生理食塩水pH7.4で200倍に希釈した。
一部（30μｌ）を次に４枚のフイブリンプレートに適用
した。フイブリンプレートは0.4％（W/V）ヒトフイブリ
ノーゲン〔カビ（kabi），グレードL,フロウ．ラボラト
リーズ（Flow Laboratories），スコツトランド〕を125
mM NaCl pH7.4中の0.029Mバルビトンに溶解し10×10cm
平方のプラスチツク皿〔ステリリン（Sterilin）〕にピ
ペツト（10ml）しそして0.3mlのオウシトロンビン〔50N
IH単位/ml,パーク．デービス（Parke-Davis），英国〕
と急速に混合することにより塊ませることにより製造し
た。プレートを通常18〜24時間37℃でインキユベートし
たがもし必要ならば長くして水性ブロモフエノール青で
染めた。それぞれの溶解帯について互に直角の２本の直
径をベルニエル（Vernier）コンパスを用いて測定し
た。それぞれのサンプルの全直径を平均しそしてこの平
均を較正曲線を参照してフイブリン分解活性に転換し
た。較正曲線はテスト中の化合物の一定量を各動物の投
与前のプラズマに加えることにより得られた。これらの
標準は実験サンプルと同じ方法及び同時に処理された。
較正曲線を作るために直径（mm）を化合物のlog10濃度
に対してプロツトした。それぞれの実験サンプル中の化
合物のプラズマ濃度は与えられた投与に基いて予想され
るのと各モルモツトの体重1kg当りの50mlプラズマの推
定とのパーセントとして表示された。
〔効果〕
結果 （ａ） 生体外のフイブリン溶解活性 実施例２（ii）に記載された如く製造されたウロキナー
ゼ共役物を前述の生体外血塊溶解システムでウロキナー
ゼと比べた。第４図はテストされた濃度のそれぞれで共
役物は最初は本来のウロキナーゼよりも活性が低いが
（約２倍），実験中に恐らく重合体鎖の放出によりその
活性が増大したことを示す。５時間後溶解の程度は変性
及び未変性のウロキナーゼと殆んど同じであつた。
（ｂ） モルモツトにおけるウロキナーゼ・PEG共役物
のクリアランス 第５図はモルモツトの血流からの実施例２（ii）に記載
された共役物とウロキナーゼとのクリアランスを示す。
明らかにウロキナーゼへのポリエチレングリコールの添
加が顕著な長期間のクリアランスを生じさせる。
【図面の簡単な説明】
第１図はG3000 SW HPLC溶離プロフイル（HSA）を示し，
第２図はG3000 SW HPLC溶離プロフイル（ウロキナー
ゼ）を示し，第3a図〜第3d図は分析用hplcゲル過溶離
プロフイル（tPA）を示し，第４図はウロキナーゼ
（■）及びPEG−ウロキナーゼ（実施例2,●）による生
体外ヒト血塊溶解の時間の経過を示し，第５図はモルモ
ツトの血流からのフイブリン溶解活性のクリアランスを
示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｎ 9/48 9152−4Ｂ 9/96 9152−4Ｂ // Ａ６１Ｋ 38/46 Ｃ１２Ｎ 9/72 9152−4Ｂ

Claims (13)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】可逆性結合基により少なくとも１種の水溶
    性重合体に結合した製薬上有用な蛋白質よりなる式（I
    I）： 〔式中Ｘは製薬上有用な蛋白質でありNH部分はＸの蛋白
    質アミノ基から誘導され；そして （ｉ） R1及びR2はそれぞれ非重合性有機基又は式-R3-
    P（式中Ｐは水溶性重合体でありR3は橋かけ基である）
    の基であるか；又は （ii） R1及びR2は一緒になってC3〜5ポリメチレンで
    あって５−〜７−員脂環族環を完成するか又は一緒にな
    って芳香族環を完成し、その際脂環族又は芳香族の環は
    基R4及びR5（それらはそれぞれ非重合性有機基又は式-R
    3-Pの基である）により置換され； そしてR1及びR2の少なくとも１個又はR4及びR5の少なく
    とも１個は基-R3-Pである〕 で表わされる蛋白質−水溶性重合体結合物。
  2. 【請求項２】製薬上有用な蛋白質がフイブリン溶解酵素
    又はその前酵素である特許請求の範囲第（１）項記載の
    結合物。
  3. 【請求項３】R1及びR2の１個が基P-CH2-であって他がメ
    チルである特許請求の範囲第（１）又は（２）項記載の
    結合物。
  4. 【請求項４】水溶性重合体がメトキシポリエチレングリ
    コールである特許請求の範囲第（１）〜（３）項の何れ
    か一つの項記載の結合物。
  5. 【請求項５】製薬上有用な蛋白質が組織プラスミノーゲ
    ン活性剤又はウロキナーゼである特許請求の範囲第
    （１）〜（４）項の何れか一つの項記載の結合物。
  6. 【請求項６】結合物が２−〔ω−メトキシポリエチレン
    グリコキシメチレン〕−３−メチルマレイル−ヒト血清
    アルブミンである特許請求の範囲第（１）項記載の結合
    物。
  7. 【請求項７】結合物が２−メチル−３−〔ω−メトキシ
    ポリエチレングリコキシメチレン〕−マレイル−ヒト血
    清アルブミンである特許請求の範囲第（１）項記載の結
    合物。
  8. 【請求項８】結合物が２−〔ω−メトキシポリエチレン
    グリコキシメチレン〕−３−メチルマレイル−ウロキナ
    ーゼである特許請求の範囲第（１）項記載の結合物。
  9. 【請求項９】結合物が２−メチル−３−〔ω−メトキシ
    ポリエチレングリコキシメチレン〕−マレイル−ウロキ
    ナーゼである特許請求の範囲第（１）項記載の結合物。
  10. 【請求項１０】結合物が２−〔ω−メトキシポリエチレ
    ングリコキシメチレン〕−３−メチル−マレイル−組織
    プラスミノーゲン活性剤である特許請求の範囲第（１）
    項記載の結合物。
  11. 【請求項１１】結合物が２−メチル−３−〔ω−メトキ
    シポリエチレングリコキシメチレン〕−マレイル−組織
    プラスミノーゲン活性剤である特許請求の範囲第（１）
    項記載の結合物。
  12. 【請求項１２】蛋白質アミノ基又はその誘導体と反応し
    うる基よりなる水溶性重合体含有試薬と製薬上有用な蛋
    白質とを反応させて可逆性結合基を形成することよりな
    る、可逆性結合基により少なくとも１種の水溶性重合体
    に結合した製薬上有用な蛋白質よりなる式（II）： 〔式中Ｘは製薬上有用な蛋白質でありNH部分はＸの蛋白
    質アミノ基から誘導され；そして （ｉ） R1及びR2はそれぞれ非重合性有機基又は式-R3-
    P（式中Ｐは水溶性重合体でありR3は橋かけ基である）
    の基であるか；又は （ii） R1及びR2は一緒になってC3〜5ポリメチレンで
    あって５−〜７−員脂環族環を完成するか又は一緒にな
    って芳香族環を完成し、その際脂環族又は芳香族の環は
    基R4及びR5（それらはそれぞれ非重合性有機基又は式-R
    3-Pの基である）により置換され； そしてR1及びR2の少なくとも１個又はR4及びR5の少なく
    とも１個は基-R3-Pである〕 で表わされる蛋白質−水溶性重合体結合物を製造する方
    法。
  13. 【請求項１３】製薬上許容しうる担体と組み合わされ
    た、可逆性結合基により少なくとも１種の水溶性重合体
    に結合した製薬上有用な蛋白質よりなる式（II）： 〔式中Ｘは製薬上有用な蛋白質でありNH部分はＸの蛋白
    質アミノ基から誘導され；そして （ｉ） R1及びR2はそれぞれ非重合性有機基又は式-R3-
    P（式中Ｐは水溶性重合体でありR3は橋かけ基である）
    の基であるか；又は （ii） R1及びR2は一緒になってC3〜5ポリメチレンで
    あって５−〜７−員脂環族環を完成するか又は一緒にな
    って芳香族環を完成し、その際脂環族又は芳香族の環は
    基R4及びR5（それらはそれぞれ非重合性有機基又は式-R
    3-Pの基である）により置換され； そしてR1及びR2の少なくとも１個又はR4及びR5の少なく
    とも１個は基-R3-Pである〕 で表わされる蛋白質−水溶性重合体結合物よりなる製薬
    組成物。
JP60269206A 1984-11-30 1985-11-29 新規化合物、その製法及びそれを含む医薬組成物 Expired - Fee Related JPH0717517B2 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB848430252A GB8430252D0 (en) 1984-11-30 1984-11-30 Compounds
GB8430252 1984-11-30

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP6023584A Division JP2545339B2 (ja) 1984-11-30 1994-01-27 水溶性重合体含有試薬

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS61155333A JPS61155333A (ja) 1986-07-15
JPH0717517B2 true JPH0717517B2 (ja) 1995-03-01

Family

ID=10570497

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP60269206A Expired - Fee Related JPH0717517B2 (ja) 1984-11-30 1985-11-29 新規化合物、その製法及びそれを含む医薬組成物
JP6023584A Expired - Fee Related JP2545339B2 (ja) 1984-11-30 1994-01-27 水溶性重合体含有試薬

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP6023584A Expired - Fee Related JP2545339B2 (ja) 1984-11-30 1994-01-27 水溶性重合体含有試薬

Country Status (9)

Country Link
US (1) US4935465A (ja)
EP (1) EP0183503B1 (ja)
JP (2) JPH0717517B2 (ja)
AU (1) AU5044585A (ja)
DE (1) DE3586313T2 (ja)
DK (1) DK552285A (ja)
GB (1) GB8430252D0 (ja)
GR (1) GR852877B (ja)
PT (1) PT81581B (ja)

Families Citing this family (132)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4842868A (en) * 1986-09-26 1989-06-27 Helwing Robert F Covalently bonded active agents with carbonium ion base groups
US5214132A (en) * 1986-12-23 1993-05-25 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Polypeptide derivatives of human granulocyte colony stimulating factor
IE64284B1 (en) * 1987-08-03 1995-07-26 Ddi Pharmaceuticals Conjugates of superoxide dismutase
AU611932B2 (en) * 1987-08-21 1991-06-27 Wellcome Foundation Limited, The Novel complex
JPH079429B2 (ja) * 1988-10-12 1995-02-01 財団法人化学及血清療法研究所 人工担体およびその製造方法
US5091176A (en) * 1988-11-02 1992-02-25 W. R. Grace & Co.-Conn. Polymer-modified peptide drugs having enhanced biological and pharmacological activities
US5306500A (en) * 1988-11-21 1994-04-26 Collagen Corporation Method of augmenting tissue with collagen-polymer conjugates
US5162430A (en) * 1988-11-21 1992-11-10 Collagen Corporation Collagen-polymer conjugates
US5565519A (en) * 1988-11-21 1996-10-15 Collagen Corporation Clear, chemically modified collagen-synthetic polymer conjugates for ophthalmic applications
US5510418A (en) * 1988-11-21 1996-04-23 Collagen Corporation Glycosaminoglycan-synthetic polymer conjugates
EP0395918A3 (en) * 1989-04-13 1991-10-23 Vascular Laboratory, Inc. Plasminogen activator complex of pure pro-urokinase covalently bound by a disulfide bridge to human serum albumin
JPH04506662A (ja) * 1989-07-14 1992-11-19 アメリカン・サイアナミド・カンパニー 接合体ワクチンのためのサイトカイニンおよびホルモンのキヤリヤー
US5767072A (en) * 1989-09-14 1998-06-16 Board Of Regents, The University Of Texas System Therapeutic compositions comprising a CD4 peptide and methods of treatment of HIV infections
IE912365A1 (en) * 1990-07-23 1992-01-29 Zeneca Ltd Continuous release pharmaceutical compositions
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5382657A (en) * 1992-08-26 1995-01-17 Hoffmann-La Roche Inc. Peg-interferon conjugates
EP0676965B1 (en) 1992-11-16 2007-07-25 Centocor Inc. Method of reducing immunogenicity of variable region of antibodies
WO1994013311A1 (en) * 1992-12-10 1994-06-23 Enzon, Inc. Glycolipid enzyme-polymer conjugates
US5951974A (en) * 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
DE69430251T2 (de) * 1993-11-10 2002-11-07 Enzon, Inc. Verbesserte interferon-polymerkonjugate
US6458762B1 (en) 1994-03-28 2002-10-01 Baxter International, Inc. Therapeutic use of hemoglobin for preserving tissue viability and reducing restenosis
WO1996004340A1 (en) * 1994-08-04 1996-02-15 Gordon George Wallace Conducting electroactive biomaterials
US5738846A (en) * 1994-11-10 1998-04-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates and process for preparing the same
US5770577A (en) * 1994-11-14 1998-06-23 Amgen Inc. BDNF and NT-3 polypeptides selectively linked to polyethylene glycol
AU697440B2 (en) * 1994-12-07 1998-10-08 Novozymes A/S Polypeptide with reduced allergenicity
US5695760A (en) * 1995-04-24 1997-12-09 Boehringer Inglehiem Pharmaceuticals, Inc. Modified anti-ICAM-1 antibodies and their use in the treatment of inflammation
US6428790B1 (en) * 1995-04-27 2002-08-06 The United States Of America As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Cyanovirin conjugates and matrix-anchored cyanovirin and related compositions and methods of use
US7883693B2 (en) 1995-12-18 2011-02-08 Angiodevice International Gmbh Compositions and systems for forming crosslinked biomaterials and methods of preparation of use
US6458889B1 (en) 1995-12-18 2002-10-01 Cohesion Technologies, Inc. Compositions and systems for forming crosslinked biomaterials and associated methods of preparation and use
PT876165E (pt) * 1995-12-18 2006-10-31 Angiotech Biomaterials Corp Composicoes de polimeros reticulados e processos para a sua utilizacao
US6833408B2 (en) * 1995-12-18 2004-12-21 Cohesion Technologies, Inc. Methods for tissue repair using adhesive materials
WO1997024421A2 (en) * 1995-12-29 1997-07-10 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising immobilized enzymes
CN1273589C (zh) * 1996-02-15 2006-09-06 诺沃奇梅兹有限公司 多肽缀合
US6106828A (en) * 1996-02-15 2000-08-22 Novo Nordisk A/S Conjugation of polypeptides
TW517067B (en) * 1996-05-31 2003-01-11 Hoffmann La Roche Interferon conjugates
AU4907897A (en) 1996-10-11 1998-05-11 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic liposome composition and method
US6416756B1 (en) 1997-01-10 2002-07-09 Novozymes A/S Modified protease having 5 to 13 covalently coupled polymeric molecules for skin care
JPH10276776A (ja) * 1997-04-07 1998-10-20 Toyobo Co Ltd 可逆的に不活化された耐熱性ｄｎａポリメラーゼ
JP2002514411A (ja) * 1998-05-08 2002-05-21 ユニバーシティ オブ サザン カリフォルニア サイズ拡大型繊維素溶解酵素、及び繊維素溶解酵素のサイズ変更方法
CN1170543C (zh) * 1998-06-08 2004-10-13 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 PEG-IFN-α和三唑核苷在治疗慢性丙型肝炎中的用途
US6461849B1 (en) 1998-10-13 2002-10-08 Novozymes, A/S Modified polypeptide
TWI242000B (en) * 1998-12-10 2005-10-21 Univ Southern California Reversible aqueous pH sensitive lipidizing reagents, compositions and methods of use
US7303760B2 (en) * 1999-04-23 2007-12-04 Alza Corporation Method for treating multi-drug resistant tumors
US7112337B2 (en) 1999-04-23 2006-09-26 Alza Corporation Liposome composition for delivery of nucleic acid
US7238368B2 (en) * 1999-04-23 2007-07-03 Alza Corporation Releasable linkage and compositions containing same
KR100642955B1 (ko) 1999-04-23 2006-11-10 알자 코포레이션 방출성 결합 및 그를 함유하는 조성물
WO2001004287A1 (en) * 1999-07-07 2001-01-18 Maxygen Aps A method for preparing modified polypeptides
US6423666B1 (en) 1999-10-05 2002-07-23 Bio-Rad Laboratories, Inc. Large-pore chromatographic beads prepared by suspension polymerization
US6413507B1 (en) 1999-12-23 2002-07-02 Shearwater Corporation Hydrolytically degradable carbamate derivatives of poly (ethylene glycol)
CA2395713C (en) 2000-01-10 2012-04-10 Maxygen, Inc. G-csf conjugates
EP1982732A3 (en) 2000-02-11 2011-06-08 Bayer HealthCare LLC Factor VII or VIIA-like conjugates
US7829074B2 (en) * 2001-10-18 2010-11-09 Nektar Therapeutics Hydroxypatite-targeting poly(ethylene glycol) and related polymers
US6436386B1 (en) 2000-11-14 2002-08-20 Shearwater Corporation Hydroxyapatite-targeting poly (ethylene glycol) and related polymers
PL367154A1 (en) 2001-02-27 2005-02-21 Maxygen Aps New interferon beta-like molecules
GB0123232D0 (en) * 2001-09-26 2001-11-21 Smith & Nephew Polymers
WO2003029420A2 (en) 2001-10-02 2003-04-10 Genentech, Inc. Apo-2 ligand variants and uses thereof
BR0311978A (pt) 2002-06-21 2005-03-22 Novo Nordisk Healthcare Ag Preparação, método para preparar a mesma, formulação farmacêutica, métodos para tratar de uma sìndrome responsiva ao fator vii, para prevenir hemorragias indesejáveis, para prevenir coagulação sanguìnea indesejável e para prevenir as reações mediadas pelo fator tecidual, e, uso de uma preparação
EP2500032A1 (en) 2002-06-24 2012-09-19 Genentech, Inc. APO-2 ligand/trail variants and uses thereof
US20040152769A1 (en) * 2002-11-09 2004-08-05 Ekwuribe Nnochiri Nkem Modified carbamate-containing prodrugs and methods of synthesizing same
JP2006519766A (ja) * 2002-12-30 2006-08-31 アンジオテック インターナショナル アクツィエン ゲゼルシャフト 組織反応性化合物および組成物、ならびにそれらの使用法
US20040225077A1 (en) * 2002-12-30 2004-11-11 Angiotech International Ag Drug delivery from rapid gelling polymer composition
US20040151766A1 (en) * 2003-01-30 2004-08-05 Monahan Sean D. Protein and peptide delivery to mammalian cells in vitro
GB0305989D0 (en) * 2003-03-15 2003-04-23 Delta Biotechnology Ltd Agent
EP2263684A1 (en) 2003-10-10 2010-12-22 Novo Nordisk A/S IL-21 derivatives
ES2428358T3 (es) 2003-10-17 2013-11-07 Novo Nordisk A/S Terapia de combinación
AU2005319099B2 (en) 2004-02-02 2010-09-16 Ambrx, Inc. Modified human growth hormone
CN103755800B (zh) 2004-02-02 2016-02-24 Ambrx公司 经修饰的人类生长激素多肽与其用途
US20100028995A1 (en) * 2004-02-23 2010-02-04 Anaphore, Inc. Tetranectin Trimerizing Polypeptides
WO2005105154A1 (en) * 2004-04-21 2005-11-10 Alza Corporation Polymer conjugate releasable under mild thiolytic conditions
WO2006083260A2 (en) 2004-04-28 2006-08-10 Angiotech Biomaterials Corporation Compositions and systems for forming crosslinked biomaterials and associated methods of preparation and use
CN102532321B (zh) 2004-06-18 2018-10-12 Ambrx公司 新颖抗原结合多肽和其用途
US7638299B2 (en) 2004-07-21 2009-12-29 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
US8303973B2 (en) 2004-09-17 2012-11-06 Angiotech Pharmaceuticals (Us), Inc. Multifunctional compounds for forming crosslinked biomaterials and methods of preparation and use
US20060188498A1 (en) 2005-02-18 2006-08-24 Genentech, Inc. Methods of using death receptor agonists and EGFR inhibitors
WO2006134173A2 (en) 2005-06-17 2006-12-21 Novo Nordisk Health Care Ag Selective reduction and derivatization of engineered proteins comprising at least one non-native cysteine
EP1951890A4 (en) 2005-11-16 2009-06-24 Ambrx Inc PROCESSES AND COMPOSITIONS WITH NON-NATURAL AMINO ACIDS
US20090252720A1 (en) 2006-05-24 2009-10-08 Novo Nordisk Health Care Ag Prolonged FIX Analogues and Derivatives
WO2008030558A2 (en) 2006-09-08 2008-03-13 Ambrx, Inc. Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses
JP2010508271A (ja) 2006-10-27 2010-03-18 ウェイ‐チャン シェン 脂質化インターフェロンおよびその使用
KR101476472B1 (ko) 2007-03-30 2015-01-05 암브룩스, 인코포레이티드 변형된 ｆｇｆ-21 폴리펩티드 및 그 용도
JP2010538655A (ja) * 2007-09-12 2010-12-16 アナフォア インコーポレイテッド 自己免疫疾患についてのｈｓｐ７０に基づく治療
WO2009055014A2 (en) 2007-10-23 2009-04-30 Nektar Therapeutics Al, Corporation Hydroxyapatite-targeting multiarm polymers and conjugates made therefrom
WO2009062195A2 (en) * 2007-11-09 2009-05-14 Anaphore, Inc. Fusion proteins of mannose binding lectins for treatment of disease
ES2632504T3 (es) 2007-11-20 2017-09-13 Ambrx, Inc. Polipéptidos de insulina modificados y sus usos
NZ602170A (en) 2008-02-08 2014-03-28 Ambrx Inc Modified leptin polypeptides and their uses
MX2011000859A (es) 2008-07-23 2011-02-24 Ambrx Inc Polipeptidos g-csf bovinos modificados y sus usos.
PL2342223T3 (pl) 2008-09-26 2017-09-29 Ambrx, Inc. Zmodyfikowane polipeptydy zwierzęcej erytropoetyny i ich zastosowania
NO2337846T3 (ja) 2008-09-26 2018-06-16
WO2010042890A2 (en) 2008-10-10 2010-04-15 Anaphore, Inc. Polypeptides that bind trail-ri and trail-r2
WO2010080720A2 (en) * 2009-01-12 2010-07-15 Nektar Therapeutics Conjugates of a lysosomal enzyme moiety and a water soluble polymer
JP2013507124A (ja) * 2009-10-09 2013-03-04 アナフォア インコーポレイテッド Ｉｌ−２３ｒを結合するポリペプチド
US20110086806A1 (en) * 2009-10-09 2011-04-14 Anaphore, Inc. Polypeptides that Bind IL-23R
EP2516455A4 (en) 2009-12-21 2013-05-22 Ambrx Inc MODIFIED SWINE SOMATOTROPIN POLYPEPTIDES AND THEIR USES
NZ600361A (en) 2009-12-21 2014-06-27 Ambrx Inc Modified bovine somatotropin polypeptides and their uses
US9815876B2 (en) 2010-03-05 2017-11-14 Omeros Corporation Chimeric inhibitor molecules of complement activation
US20120135912A1 (en) 2010-05-10 2012-05-31 Perseid Therapeutics Llc Polypeptide inhibitors of vla4
SMT201900495T1 (it) 2010-08-17 2019-11-13 Ambrx Inc Polipeptidi di relaxina modificati e loro usi
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
TWI480288B (zh) 2010-09-23 2015-04-11 Lilly Co Eli 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物
WO2012151317A1 (en) 2011-05-03 2012-11-08 Genentech, Inc. Vascular disruption agents and uses thereof
US9382305B2 (en) 2011-07-01 2016-07-05 Bayer Intellectual Property Gmbh Relaxin fusion polypeptides and uses thereof
GB201117428D0 (en) * 2011-10-07 2011-11-23 Bicycle Therapeutics Ltd Structured polypeptides with sarcosine linkers
EP2606884A1 (en) 2011-12-21 2013-06-26 Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL) Inhibitors of notch signaling pathway and use thereof in treatment of cancers
JP6498600B2 (ja) 2012-06-08 2019-04-10 ストロ バイオファーマ インコーポレーテッド 部位特異的な非天然アミノ酸残基を含む抗体、その調製方法、及びその使用方法
EP2863955B1 (en) 2012-06-26 2016-11-23 Sutro Biopharma, Inc. Modified fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use
DK2890402T3 (da) 2012-08-31 2019-07-15 Sutro Biopharma Inc Modificerede aminosyrer omfattende en azidogruppe
WO2015006555A2 (en) 2013-07-10 2015-01-15 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
CR20160132A (es) 2013-08-12 2016-08-25 Genentech Inc Composiciones y método para tratar condiciones asociadas con el complemento
US9840493B2 (en) 2013-10-11 2017-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
KR20160147855A (ko) 2014-05-01 2016-12-23 제넨테크, 인크. 항-인자 d 항체 변이체 및 이의 용도
BR112017008157A2 (pt) 2014-10-24 2017-12-19 Bristol Myers Squibb Co polipeptídeos de fgf-21 modificados e usos dos mesmos
US10980892B2 (en) 2015-06-15 2021-04-20 Angiochem Inc. Methods for the treatment of leptomeningeal carcinomatosis
HK1257422A1 (zh) 2015-10-30 2019-10-18 豪夫迈‧罗氏有限公司 抗-因子d抗体变体缀合物及其用途
EP3368074A2 (en) 2015-10-30 2018-09-05 Hoffmann-La Roche AG Anti-factor d antibodies and conjugates
WO2018004338A1 (en) 2016-06-27 2018-01-04 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Cleavable tetrazine used in bio-orthogonal drug activation
US10266578B2 (en) 2017-02-08 2019-04-23 Bristol-Myers Squibb Company Modified relaxin polypeptides comprising a pharmacokinetic enhancer and uses thereof
MA52954A (fr) 2018-06-21 2021-04-28 Cellestia Biotech Ag Procédé pour la fabrication d'aminoéthers de diaryle et sels de chlorhydrate d'aminoéthers de diaryle
MX2021002575A (es) 2018-09-11 2021-06-08 Ambrx Inc Conjugados de polipeptidos de interleucina-2 y sus usos.
AU2019361206A1 (en) 2018-10-19 2021-06-03 Ambrx, Inc. Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses
CN119455003A (zh) 2019-02-12 2025-02-18 Ambrx公司 包含抗体-tlr激动剂缀合物的组合物、方法和用途
WO2020208139A1 (en) 2019-04-10 2020-10-15 Cellestia Biotech Ag Inhibitors of notch signalling pathway and use thereof in treatment of cancers
WO2021183832A1 (en) 2020-03-11 2021-09-16 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof
PE20230414A1 (es) 2020-03-24 2023-03-07 Genentech Inc Agentes de fijacion a tie2 y metodos de uso
AU2021327396A1 (en) 2020-08-20 2023-03-23 Ambrx, Inc. Antibody-TLR agonist conjugates, methods and uses thereof
WO2022122667A1 (en) 2020-12-07 2022-06-16 Cellestia Biotech Ag Pharmaceutical combinations for treating cancer
EP4008324A1 (en) 2020-12-07 2022-06-08 Cellestia Biotech AG Combinations comprising an inhibitor of an anti-apoptotic protein, such as bcl-2, bcl-xl, bclw or mcl-1, and a notch signaling pathway inhibitor for treating cancer
CN112451681B (zh) * 2020-12-09 2023-08-25 苏州大学 酸敏感型聚合物-药物偶联物及其制备和应用
MX2023011480A (es) 2021-04-03 2023-12-06 Ambrx Inc Conjugados anticuerpo anti-her2-fármaco y usos de estos.
US20240269120A1 (en) 2021-06-02 2024-08-15 Cellestia Biotech Ag Method for Treating an Autoimmune and Inflammatory Disease
EP4429661A1 (en) 2021-11-08 2024-09-18 Cellestia Biotech AG Pharmaceutical combinations for treating cancer
EP4223292A1 (en) 2022-02-07 2023-08-09 Cellestia Biotech AG Pharmaceutical combinations for treating cancer
WO2026043823A2 (en) 2024-08-19 2026-02-26 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of preparation and uses thereof

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3499007A (en) * 1964-12-05 1970-03-03 Cassella Farbwerke Mainkur Ag Addition products of maleic anhydride to polyalkylene ethers
GB1390716A (en) * 1972-06-27 1975-04-16 Mitsubishi Electric Corp Ester of trimellitic anhydride and process for producing the same
GB1479268A (en) * 1973-07-05 1977-07-13 Beecham Group Ltd Pharmaceutical compositions
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
DE3160926D1 (en) * 1980-04-15 1983-10-27 Beecham Group Plc Allergens modified with polysarcosines
JPS5896026A (ja) * 1981-10-30 1983-06-07 Nippon Chemiphar Co Ltd 新規ウロキナ−ゼ誘導体およびその製造法ならびにそれを含有する血栓溶解剤
US4640835A (en) * 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
US4609546A (en) * 1982-06-24 1986-09-02 Japan Chemical Research Co., Ltd. Long-acting composition
JPS5959629A (ja) * 1982-09-27 1984-04-05 Nippon Chem Res Kk 効力持続性組成物
JPS58225025A (ja) * 1982-06-24 1983-12-27 Nippon Chem Res Kk 効力持続性組成物
US4496689A (en) * 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
US4764368A (en) * 1984-08-29 1988-08-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Acid-cleavable compound
US4542225A (en) * 1984-08-29 1985-09-17 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Acid-cleavable compound
US4863735A (en) * 1985-02-19 1989-09-05 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable polymeric drug delivery system with adjuvant activity
US4859736A (en) * 1987-03-30 1989-08-22 Ciba-Geigy Corporation Synthetic polystyrene resin and its use in solid phase peptide synthesis

Also Published As

Publication number Publication date
GB8430252D0 (en) 1985-01-09
DK552285A (da) 1986-05-31
DE3586313T2 (de) 1993-01-21
US4935465A (en) 1990-06-19
GR852877B (ja) 1986-03-31
AU5044585A (en) 1986-07-17
DK552285D0 (da) 1985-11-28
EP0183503A3 (en) 1988-01-07
JPH06279318A (ja) 1994-10-04
EP0183503B1 (en) 1992-07-08
PT81581A (en) 1985-12-01
JP2545339B2 (ja) 1996-10-16
EP0183503A2 (en) 1986-06-04
PT81581B (en) 1987-07-22
JPS61155333A (ja) 1986-07-15
DE3586313D1 (de) 1992-08-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2545339B2 (ja) 水溶性重合体含有試薬
US4673573A (en) Novel fibrinolytic enzyme compounds
AU2003275176B8 (en) Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof
US4808405A (en) P-anisoyl streptokinase/plasminogen complex
US8129330B2 (en) Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof
DE69015182T2 (de) Thrombus-gerichtete komplexe, die aus plasminogenaktivator und fibrinfragmenten zusammengesetzt sind.
US4970159A (en) Human tissue plasminogen activator consisting essentially of t-PA residues 160 to 527
IE57946B1 (en) Enzyme-protein conjugate,process for its preparation and pharmaceutical use thereof
EP0155388A2 (en) Enzyme-protein conjugate, process for its preparation and pharmaceutical use thereof
Bode et al. Thrombolysis by a fibrin-specific antibody Fab′-urokinase conjugate
JPH0567278B2 (ja)
EP0942996B1 (en) Thrombolytic agents with antithrombotic activity
JPH01240186A (ja) フィブリン特異性２本鎖プラスミノーゲンアクチベーター
US5234686A (en) Human tissue plasminogen activator consisting essentially of t-PA residues to 160 to 527, pharmaceutical compositions and methods of treatment
JPH0569508B2 (ja)
Shier [19] Lectins as carriers: Preparation and purification of a concanavalin A—trypsin conjugate
EP0181596A2 (en) Process for preparing a urokinase complex
JP2002514411A (ja) サイズ拡大型繊維素溶解酵素、及び繊維素溶解酵素のサイズ変更方法
JPH0327286A (ja) 組織プラスミノーゲン活性化因子の誘導体
JPH06206829A (ja) 組織プラスミノーゲンアクチベーターの溶解法
WO1991019793A2 (en) Hybrid plasminogen activators
ZA200502707B (en) Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof
WO1999009185A1 (de) Plasminogenaktivator mit verbesserter zymogenität
HK1083190B (en) Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof
JPS62108824A (ja) 新規なウロキナ−ゼ重合体及び該重合体を有効成分とする血栓溶解剤

Legal Events

Date Code Title Description
R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees