JPH08208704A - 新規な糖タンパク質複合体、その製造方法、並びに抗腫瘍剤、免疫調節剤及び増殖因子阻害剤 - Google Patents
新規な糖タンパク質複合体、その製造方法、並びに抗腫瘍剤、免疫調節剤及び増殖因子阻害剤Info
- Publication number
- JPH08208704A JPH08208704A JP7041230A JP4123095A JPH08208704A JP H08208704 A JPH08208704 A JP H08208704A JP 7041230 A JP7041230 A JP 7041230A JP 4123095 A JP4123095 A JP 4123095A JP H08208704 A JPH08208704 A JP H08208704A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glycoprotein complex
- extract
- sugar
- protein
- complex according
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/37—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi
- C07K14/375—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi from Basidiomycetes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 新規な糖タンパク質複合体、その製法、並び
に抗腫瘍剤、免疫調節剤及び増殖因子阻害剤を提供す
る。 【構成】 糖タンパク質複合体は、カワラタケ属担子菌
の菌糸体などの抽出物を化学処理して得られ、ゲルクロ
マトグラフィー測定の分子量が５，０００〜１，００
０，０００で、フェノール硫酸法の糖質量に対するロー
リー−フォーリン法のタンパク質量（タンパク質／糖
質）が０．７〜５．０で、糖質中グルカンの１８〜１０
０％が１→３グルカンである。 【効果】 化学処理により生理活性が顕著に上昇するの
で、投与量を減少させながら、抗悪性腫瘍剤、免疫調節
剤又は増殖因子阻害剤として利用できる。
に抗腫瘍剤、免疫調節剤及び増殖因子阻害剤を提供す
る。 【構成】 糖タンパク質複合体は、カワラタケ属担子菌
の菌糸体などの抽出物を化学処理して得られ、ゲルクロ
マトグラフィー測定の分子量が５，０００〜１，００
０，０００で、フェノール硫酸法の糖質量に対するロー
リー−フォーリン法のタンパク質量（タンパク質／糖
質）が０．７〜５．０で、糖質中グルカンの１８〜１０
０％が１→３グルカンである。 【効果】 化学処理により生理活性が顕著に上昇するの
で、投与量を減少させながら、抗悪性腫瘍剤、免疫調節
剤又は増殖因子阻害剤として利用できる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、新規の糖タンパク質複
合体、その製造方法、並びにその糖タンパク質複合体を
有効成分とする抗腫瘍剤、免疫調節剤、及び増殖因子阻
害剤に関する。本発明の糖タンパク質複合体は、悪性腫
瘍、免疫系が関与する種々の疾患、及び増殖因子が関与
する種々の疾患の治療や予防に利用することができる。
合体、その製造方法、並びにその糖タンパク質複合体を
有効成分とする抗腫瘍剤、免疫調節剤、及び増殖因子阻
害剤に関する。本発明の糖タンパク質複合体は、悪性腫
瘍、免疫系が関与する種々の疾患、及び増殖因子が関与
する種々の疾患の治療や予防に利用することができる。
【０００２】
【従来の技術】担子菌由来の種々の多糖体やタンパク多
糖体が、抗腫瘍効果を示すことが知られている（Chihar
a G : Revista Espanda de Entomologia, 4:85-96, 198
4 ）。これらの中には、免疫系を主とする生体防御機構
の機能を調節する作用を有することが示されている物質
があり、この調節作用（免疫調節作用）を介して抗腫瘍
効果を発現すると考えられている。従って、現在では、
これらの物質は、生物学的応答修飾物質（Biological R
esponse Modifier：ＢＲＭ）の一つと位置づけられてい
る。サルノコシカケ科のカワラタケ属に属する担子菌由
来のタンパク多糖体であるクレスチン（商品名：三共：
一般名＝ＰＳＫ）は、すでに臨床的に用いられており、
癌患者の生存期間を延長させる効果のあることが実証さ
れている (NakazatoH, et al.: The Lancet, 343:1122-
1126, 1994 ）。その作用機序についても多くの報告が
なされ、サイトカイン産生誘導作用 (Hirose K, et al.
: Lymphokine Res. 9:475-483, 1990）、Ｔ細胞活性化
作用(Hirai R, et al. :Int J Immunopharmac. 15:745-
750, 1993)等の免疫調節作用を示すことが明らかにされ
ている。また、最近、ＰＳＫが、増殖因子、例えばトラ
ンスフォーミング成長因子β１（Transforming Growth
Factorβ１：ＴＧＦ−β１）及び血小板由来増殖因子
（Platelet Derived Growth Factor ：ＰＤＧＦ）の作
用を阻害する活性を有することが見出された（松永謙
一、他：日本癌学会総会、第５３回総会記事、p. 455,
1994) 。
糖体が、抗腫瘍効果を示すことが知られている（Chihar
a G : Revista Espanda de Entomologia, 4:85-96, 198
4 ）。これらの中には、免疫系を主とする生体防御機構
の機能を調節する作用を有することが示されている物質
があり、この調節作用（免疫調節作用）を介して抗腫瘍
効果を発現すると考えられている。従って、現在では、
これらの物質は、生物学的応答修飾物質（Biological R
esponse Modifier：ＢＲＭ）の一つと位置づけられてい
る。サルノコシカケ科のカワラタケ属に属する担子菌由
来のタンパク多糖体であるクレスチン（商品名：三共：
一般名＝ＰＳＫ）は、すでに臨床的に用いられており、
癌患者の生存期間を延長させる効果のあることが実証さ
れている (NakazatoH, et al.: The Lancet, 343:1122-
1126, 1994 ）。その作用機序についても多くの報告が
なされ、サイトカイン産生誘導作用 (Hirose K, et al.
: Lymphokine Res. 9:475-483, 1990）、Ｔ細胞活性化
作用(Hirai R, et al. :Int J Immunopharmac. 15:745-
750, 1993)等の免疫調節作用を示すことが明らかにされ
ている。また、最近、ＰＳＫが、増殖因子、例えばトラ
ンスフォーミング成長因子β１（Transforming Growth
Factorβ１：ＴＧＦ−β１）及び血小板由来増殖因子
（Platelet Derived Growth Factor ：ＰＤＧＦ）の作
用を阻害する活性を有することが見出された（松永謙
一、他：日本癌学会総会、第５３回総会記事、p. 455,
1994) 。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者は、前記の担
子菌由来のタンパク多糖体の各種誘導体とその生理活性
について鋭意研究を重ねた結果、そのタンパク多糖体
に、化学処理、特に過沃素酸による酸化処理等を施すこ
とにより、抗腫瘍作用、免疫調節作用及び増殖因子阻害
作用が顕著に上昇することを見出した。本発明はこうし
た知見に基づくものである。
子菌由来のタンパク多糖体の各種誘導体とその生理活性
について鋭意研究を重ねた結果、そのタンパク多糖体
に、化学処理、特に過沃素酸による酸化処理等を施すこ
とにより、抗腫瘍作用、免疫調節作用及び増殖因子阻害
作用が顕著に上昇することを見出した。本発明はこうし
た知見に基づくものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】従って、本発明は、カワ
ラタケ属に属する担子菌の菌糸体、培養物又は子実体の
抽出物を化学処理して得られる下記の理化学的性質を有
する糖タンパク質複合体であって、ゲルクロマトグラフ
ィーによる測定で５，０００〜１，０００，０００の範
囲の分子量を示し、フェノール硫酸法で定量した糖質量
に対するローリー−フォーリン（Ｌｏｗｒｙ−Ｆｏｌｉ
ｎ）法で定量したタンパク質の量（タンパク質／糖質）
が０．７〜５．０であり、糖質中グルカンの１８〜１０
０％が１→３グルカンである構造を有することを特徴と
する、糖タンパク質複合体に関する。また、本発明は、
カワラタケ属に属する担子菌由来の菌糸体、培養物又は
子実体の抽出物であって、１→３、１→４及び／又は１
→６グルカンと約５〜６０％のタンパク質を含むタンパ
ク多糖体に、化学処理を施すことを特徴とする、糖タン
パク質複合体の製造方法にも関する。更に、本発明は、
前記の糖タンパク質複合体を有効成分として含有する、
抗腫瘍剤、免疫調節剤、又は増殖因子阻害剤にも関す
る。
ラタケ属に属する担子菌の菌糸体、培養物又は子実体の
抽出物を化学処理して得られる下記の理化学的性質を有
する糖タンパク質複合体であって、ゲルクロマトグラフ
ィーによる測定で５，０００〜１，０００，０００の範
囲の分子量を示し、フェノール硫酸法で定量した糖質量
に対するローリー−フォーリン（Ｌｏｗｒｙ−Ｆｏｌｉ
ｎ）法で定量したタンパク質の量（タンパク質／糖質）
が０．７〜５．０であり、糖質中グルカンの１８〜１０
０％が１→３グルカンである構造を有することを特徴と
する、糖タンパク質複合体に関する。また、本発明は、
カワラタケ属に属する担子菌由来の菌糸体、培養物又は
子実体の抽出物であって、１→３、１→４及び／又は１
→６グルカンと約５〜６０％のタンパク質を含むタンパ
ク多糖体に、化学処理を施すことを特徴とする、糖タン
パク質複合体の製造方法にも関する。更に、本発明は、
前記の糖タンパク質複合体を有効成分として含有する、
抗腫瘍剤、免疫調節剤、又は増殖因子阻害剤にも関す
る。
【０００５】以下、本発明を詳細に説明する。本発明に
よる糖タンパク質複合体を製造する際に用いる、担子菌
由来のタンパク多糖体は、例えば特公昭４６−１７１４
９号、特公昭５１−３６３２２号、特公昭５６−１４２
７４号、特公昭５６−１４２７５号及び特公昭５６−１
４２７６号各公報などに記載されている。前記タンパク
多糖体は、担子菌の一種であるカワラタケ属（Coriolu
s）に属する菌類を培養して得られる菌糸体、培養物
（Ｂｒｏｔｈ）、又は子実体からの抽出により得られる
抽出物である。前記タンパク多糖体は、約１８〜３８％
のタンパク質を含み、分子量（超遠心分離測定法）が５
０００以上、好ましくは５０００〜１，０００，０００
である。
よる糖タンパク質複合体を製造する際に用いる、担子菌
由来のタンパク多糖体は、例えば特公昭４６−１７１４
９号、特公昭５１−３６３２２号、特公昭５６−１４２
７４号、特公昭５６−１４２７５号及び特公昭５６−１
４２７６号各公報などに記載されている。前記タンパク
多糖体は、担子菌の一種であるカワラタケ属（Coriolu
s）に属する菌類を培養して得られる菌糸体、培養物
（Ｂｒｏｔｈ）、又は子実体からの抽出により得られる
抽出物である。前記タンパク多糖体は、約１８〜３８％
のタンパク質を含み、分子量（超遠心分離測定法）が５
０００以上、好ましくは５０００〜１，０００，０００
である。
【０００６】また、前記タンパク多糖体の代表例はＰＳ
Ｋとも呼称されているものであって、クレスチンという
商品名で三共株式会社から市販されている。また、前記
タンパク多糖体については最近の新薬、第２８集第１４
〜１６頁，１９７７年及び第２９集第９６〜１０１頁，
１９７８年や、医薬品要覧，第１３４６頁，昭和５４年
５月第６版，薬業時報社発行等にも記載されている。そ
の性状の一端を示せば次のとおりである。ＰＳＫは、カ
ワラタケ菌ＣＭ１０１株〔ＦＥＲＭ−Ｐ２４１２（ＡＴ
ＣＣ２０５４７）〕の菌糸体を水系溶媒、例えば、熱水
又はアルカリ溶液（例えば、アルカリ金属の水酸化物、
特には水酸化ナトリウムの水溶液）で抽出し、精製した
後に乾燥して得ることができる。主要画分の糖部分はβ
−Ｄ−グルカンで、このグルカン部分の構造はβ１→
３、β１→４及びβ１→６結合を含む分枝構造であり、
主な構成単糖はグルコースやマンノースであり、約１８
〜３８％のタンパク質を含む。タンパク質の構成アミノ
酸は、アスパラギン酸やグルタミン酸等の酸性アミノ酸
と、バリンやロイシン等の中性アミノ酸が多く、リジン
やアルギニン等の塩基性アミノ酸は少ない。水に可溶で
あるが、メタノール、ピリジン、クロロホルム、ベンゼ
ン又はヘキサンには殆ど溶けない。約１２０℃から徐々
に分解する。
Ｋとも呼称されているものであって、クレスチンという
商品名で三共株式会社から市販されている。また、前記
タンパク多糖体については最近の新薬、第２８集第１４
〜１６頁，１９７７年及び第２９集第９６〜１０１頁，
１９７８年や、医薬品要覧，第１３４６頁，昭和５４年
５月第６版，薬業時報社発行等にも記載されている。そ
の性状の一端を示せば次のとおりである。ＰＳＫは、カ
ワラタケ菌ＣＭ１０１株〔ＦＥＲＭ−Ｐ２４１２（ＡＴ
ＣＣ２０５４７）〕の菌糸体を水系溶媒、例えば、熱水
又はアルカリ溶液（例えば、アルカリ金属の水酸化物、
特には水酸化ナトリウムの水溶液）で抽出し、精製した
後に乾燥して得ることができる。主要画分の糖部分はβ
−Ｄ−グルカンで、このグルカン部分の構造はβ１→
３、β１→４及びβ１→６結合を含む分枝構造であり、
主な構成単糖はグルコースやマンノースであり、約１８
〜３８％のタンパク質を含む。タンパク質の構成アミノ
酸は、アスパラギン酸やグルタミン酸等の酸性アミノ酸
と、バリンやロイシン等の中性アミノ酸が多く、リジン
やアルギニン等の塩基性アミノ酸は少ない。水に可溶で
あるが、メタノール、ピリジン、クロロホルム、ベンゼ
ン又はヘキサンには殆ど溶けない。約１２０℃から徐々
に分解する。
【０００７】なお、本発明の出発原料に関しては、前記
のカワラタケ菌ＣＭ１０１株のみならず、カワラタケ属
に属する他のカワラタケ菌株（例えば、ＦＥＲＭ−Ｐ
Ｎｏ．２４１３〜２４２６）やニクウスバタケ〔Coriol
us consors (Berk.) Imaz.〕、ヤキフタケ
のカワラタケ菌ＣＭ１０１株のみならず、カワラタケ属
に属する他のカワラタケ菌株（例えば、ＦＥＲＭ−Ｐ
Ｎｏ．２４１３〜２４２６）やニクウスバタケ〔Coriol
us consors (Berk.) Imaz.〕、ヤキフタケ
【外１】 ミノタケ〔Corilous biformis (Klotz.) Pat. 〕、アラ
ゲカワラタケ
ゲカワラタケ
【外２】 サカズキカワラタケ〔Coriolus conchifer (Schw.) Pa
t. 〕、ハカワラタケ〔Coriolus pargamenus (Fr.) Pa
t.〕等の担子菌菌株も使用可能である。
t. 〕、ハカワラタケ〔Coriolus pargamenus (Fr.) Pa
t.〕等の担子菌菌株も使用可能である。
【０００８】前記抽出物を以下のように化学処理するこ
とにより目的の生理活性物質・糖タンパク質複合体を得
ることができる。化学処理は、例えば、酸化処理、還
元、緩和水解、及び生成低分子の除去の各工程からな
る。前記抽出物の酸化処理は、グリコールの開裂処理を
伴うものであり、特には過沃素酸又はその塩類を用いて
実施することができる。具体的には、例えば、０．０１
〜０．２Ｍメタ過沃素酸ナトリウムを含む水溶液又は中
性領域ｐＨの緩衝液に前記の抽出物を溶解し、０〜４０
℃で２４時間〜６０日間処理することにより糖質部の酸
化を行う。次に、還元剤、例えば、水素化硼素ナトリウ
ムで還元して得られるタンパク多糖体ポリアルコールを
４〜８０℃にて０．０１〜１規定濃度の無機酸（例え
ば、硫酸、塩酸）又は有機酸（例えば、シュウ酸、ギ
酸）を用いて１時間〜９６時間程度の緩和水解を行い、
酸化をうけた糖鎖部分を除去する。こうしたメタ過沃素
酸ナトリウムによる酸化から緩和水解に至る一連の操作
を一回〜数回繰り返して行い、１→４、及び１→６結合
した糖質部を減少させ、生成低分子を除去することによ
り、目的の生理活性物質・糖タンパク質複合体を得るこ
とができる。
とにより目的の生理活性物質・糖タンパク質複合体を得
ることができる。化学処理は、例えば、酸化処理、還
元、緩和水解、及び生成低分子の除去の各工程からな
る。前記抽出物の酸化処理は、グリコールの開裂処理を
伴うものであり、特には過沃素酸又はその塩類を用いて
実施することができる。具体的には、例えば、０．０１
〜０．２Ｍメタ過沃素酸ナトリウムを含む水溶液又は中
性領域ｐＨの緩衝液に前記の抽出物を溶解し、０〜４０
℃で２４時間〜６０日間処理することにより糖質部の酸
化を行う。次に、還元剤、例えば、水素化硼素ナトリウ
ムで還元して得られるタンパク多糖体ポリアルコールを
４〜８０℃にて０．０１〜１規定濃度の無機酸（例え
ば、硫酸、塩酸）又は有機酸（例えば、シュウ酸、ギ
酸）を用いて１時間〜９６時間程度の緩和水解を行い、
酸化をうけた糖鎖部分を除去する。こうしたメタ過沃素
酸ナトリウムによる酸化から緩和水解に至る一連の操作
を一回〜数回繰り返して行い、１→４、及び１→６結合
した糖質部を減少させ、生成低分子を除去することによ
り、目的の生理活性物質・糖タンパク質複合体を得るこ
とができる。
【０００９】本発明による生理活性物質・糖タンパク質
複合体は以下の理化学的性状を有する。すなわち、ゲル
クロマトグラフィー〔例えば、デキストランゲル又はア
ガロースゲル（Ｓｕｐｅｒｏｓｅ ６：ファルマシア）
を用いたゲルクロマトグラフィー〕による測定で５，０
００〜１，０００，０００の範囲の分子量を示し、フェ
ノール硫酸法（J.E.Hodge, B.T.Hofreiter, "Methods i
n carbohydrate chemistry" Vol. 1 ed. by R.L.Whistl
er, M.I.Wolfrom, Academic Press, Inc., NewYork, N.
Y., 1962 p388）で定量した糖質量に対するローリー−
フォーリン（Ｌｏｗｒｙ−Ｆｏｌｉｎ）法〔O.H.Lowry,
N.J.Rosebrough, A.L.Farr, and R.J.Randall, J.Rand
all, J.Biol.Chem., 193, 265(1951) 〕で定量したタン
パク質の量（タンパク質／糖質）が０．７〜５．０、糖
質中グルカンの１８〜１００％は１→３グルカン、特に
はβ１→３グルカンである構造を有する糖タンパク質複
合体である。
複合体は以下の理化学的性状を有する。すなわち、ゲル
クロマトグラフィー〔例えば、デキストランゲル又はア
ガロースゲル（Ｓｕｐｅｒｏｓｅ ６：ファルマシア）
を用いたゲルクロマトグラフィー〕による測定で５，０
００〜１，０００，０００の範囲の分子量を示し、フェ
ノール硫酸法（J.E.Hodge, B.T.Hofreiter, "Methods i
n carbohydrate chemistry" Vol. 1 ed. by R.L.Whistl
er, M.I.Wolfrom, Academic Press, Inc., NewYork, N.
Y., 1962 p388）で定量した糖質量に対するローリー−
フォーリン（Ｌｏｗｒｙ−Ｆｏｌｉｎ）法〔O.H.Lowry,
N.J.Rosebrough, A.L.Farr, and R.J.Randall, J.Rand
all, J.Biol.Chem., 193, 265(1951) 〕で定量したタン
パク質の量（タンパク質／糖質）が０．７〜５．０、糖
質中グルカンの１８〜１００％は１→３グルカン、特に
はβ１→３グルカンである構造を有する糖タンパク質複
合体である。
【００１０】本発明による生理活性物質・糖タンパク質
複合体は、塩酸加水分解物のアミノ酸分析により、アス
パラギン酸、スレオニン、セリン、グルタミン酸、プロ
リン、グリシン、アラニン、システイン、バリン、メチ
オニン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニル
アラニン、リジン、ヒスチジン及びアルギニンが検知さ
れ、その中でアスパラギン酸、スレオニン、セリン、グ
ルタミン酸、グリシン、アラニン、フェニルアラニン、
バリン、イソロイシン及びロイシンの占める含量が検知
全アミノ酸量の７５モル％以上である。更に、硫酸加水
分解後の糖質分析により、フコース、キシロース、マン
ノース、ガラクトース及びグルコースが検知され、その
中でグルコース、マンノース及びキシロースの占める含
量が検知全糖質量の９０重量％以上である。
複合体は、塩酸加水分解物のアミノ酸分析により、アス
パラギン酸、スレオニン、セリン、グルタミン酸、プロ
リン、グリシン、アラニン、システイン、バリン、メチ
オニン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニル
アラニン、リジン、ヒスチジン及びアルギニンが検知さ
れ、その中でアスパラギン酸、スレオニン、セリン、グ
ルタミン酸、グリシン、アラニン、フェニルアラニン、
バリン、イソロイシン及びロイシンの占める含量が検知
全アミノ酸量の７５モル％以上である。更に、硫酸加水
分解後の糖質分析により、フコース、キシロース、マン
ノース、ガラクトース及びグルコースが検知され、その
中でグルコース、マンノース及びキシロースの占める含
量が検知全糖質量の９０重量％以上である。
【００１１】本発明による生理活性物質・糖タンパク質
複合体は、担子菌より得られる化学処理前タンパク多糖
体と比較して、抗腫瘍効果、インターロイキン−１β
（ＩＬ−１β）誘導能、インターロイキン−６（ＩＬ−
６）誘導能、Ｔ細胞増殖誘導能、ＴＧＦ−β１阻害能、
及びＰＤＧＦ阻害能に関して、２〜１０倍以上の活性の
上昇が認められる。すなわち、担子菌カワラタケ属菌か
らの抽出物に、過沃素酸処理を施して、１→４、特にβ
１→４、及び１→６、特にβ１→６結合した糖質部を選
択的に減少させる修飾を加えることにより、高い活性を
有する生理活性物質が得られる。
複合体は、担子菌より得られる化学処理前タンパク多糖
体と比較して、抗腫瘍効果、インターロイキン−１β
（ＩＬ−１β）誘導能、インターロイキン−６（ＩＬ−
６）誘導能、Ｔ細胞増殖誘導能、ＴＧＦ−β１阻害能、
及びＰＤＧＦ阻害能に関して、２〜１０倍以上の活性の
上昇が認められる。すなわち、担子菌カワラタケ属菌か
らの抽出物に、過沃素酸処理を施して、１→４、特にβ
１→４、及び１→６、特にβ１→６結合した糖質部を選
択的に減少させる修飾を加えることにより、高い活性を
有する生理活性物質が得られる。
【００１２】ＰＳＫは、多くの疾患に対する有効性が示
唆されており、本発明の生理活性物質はＰＳＫよりも低
用量でＰＳＫと同等の活性を示すことから、ＰＳＫが有
効である各種疾患に、本発明の生理活性物質・糖タンパ
ク質複合体を適用することができる。例えば、悪性腫
瘍、細菌や真菌、ウイルス、原虫等の感染症、自己免疫
疾患、種々の免疫抑制状態、肺線維症、肝線維化、糸球
体腎炎、汎発性強皮症、動脈硬化などである。
唆されており、本発明の生理活性物質はＰＳＫよりも低
用量でＰＳＫと同等の活性を示すことから、ＰＳＫが有
効である各種疾患に、本発明の生理活性物質・糖タンパ
ク質複合体を適用することができる。例えば、悪性腫
瘍、細菌や真菌、ウイルス、原虫等の感染症、自己免疫
疾患、種々の免疫抑制状態、肺線維症、肝線維化、糸球
体腎炎、汎発性強皮症、動脈硬化などである。
【００１３】本発明の生理活性物質・糖タンパク質複合
体を、抗悪性腫瘍剤、免疫調節剤（例えば、ＩＬ−１β
誘導剤、ＩＬ−６誘導剤、又はＴ細胞増殖誘導剤）、又
は増殖因子阻害剤（例えば、ＴＧＦ−β１阻害剤、又は
ＰＤＧＦ阻害剤）としてヒト又は動物に使用する場合に
は、任意慣用の方法で各種経路の投与用に調製すること
ができる。すなわち、舌下投与を含む経口投与、皮下、
静脈内、筋肉内等への注射、経直腸投与（座剤）等であ
る。経口投与は、それに適用される錠剤、顆粒剤、散剤
又はカプセル剤などである。それらの組成物中に結合
剤、包含剤、賦形剤、潤滑剤、崩壊剤又は湿潤剤を含有
していてもよい。また、経口用液体製剤は、内用水剤、
振とう合剤、懸濁液剤、乳剤、シロップ剤の形態であっ
てもよく、あるいは使用する前に再溶解させる乾燥生成
物の形態であってもよい。更に、このような液体製剤
は、添加剤或いは保存剤のいずれを含有していてもよ
い。注射剤、座剤又は軟膏等の非経口投与剤において
は、その組成物が安定剤、緩衝剤、保存剤又は等張化剤
などの添加剤を含んでいてもよい。なお、上記組成物は
水溶液、懸濁液、溶液、油性又は水性ビヒクル中の乳液
のような形態であってもよく、一方、活性成分は使用す
る前に適当なビヒクル（例えば、発熱物質不含の滅菌し
た水）で再溶解させる粉末であってもよい。投与量は、
投与方式、並びに年齢、個人差及び疾患の程度によって
異なるが、一般には体重１ｋｇ、一日当たり０. ０５〜
５００ｍｇ、経口投与の場合は２〜５００ｍｇを１回か
ら３回に分けて投与する。
体を、抗悪性腫瘍剤、免疫調節剤（例えば、ＩＬ−１β
誘導剤、ＩＬ−６誘導剤、又はＴ細胞増殖誘導剤）、又
は増殖因子阻害剤（例えば、ＴＧＦ−β１阻害剤、又は
ＰＤＧＦ阻害剤）としてヒト又は動物に使用する場合に
は、任意慣用の方法で各種経路の投与用に調製すること
ができる。すなわち、舌下投与を含む経口投与、皮下、
静脈内、筋肉内等への注射、経直腸投与（座剤）等であ
る。経口投与は、それに適用される錠剤、顆粒剤、散剤
又はカプセル剤などである。それらの組成物中に結合
剤、包含剤、賦形剤、潤滑剤、崩壊剤又は湿潤剤を含有
していてもよい。また、経口用液体製剤は、内用水剤、
振とう合剤、懸濁液剤、乳剤、シロップ剤の形態であっ
てもよく、あるいは使用する前に再溶解させる乾燥生成
物の形態であってもよい。更に、このような液体製剤
は、添加剤或いは保存剤のいずれを含有していてもよ
い。注射剤、座剤又は軟膏等の非経口投与剤において
は、その組成物が安定剤、緩衝剤、保存剤又は等張化剤
などの添加剤を含んでいてもよい。なお、上記組成物は
水溶液、懸濁液、溶液、油性又は水性ビヒクル中の乳液
のような形態であってもよく、一方、活性成分は使用す
る前に適当なビヒクル（例えば、発熱物質不含の滅菌し
た水）で再溶解させる粉末であってもよい。投与量は、
投与方式、並びに年齢、個人差及び疾患の程度によって
異なるが、一般には体重１ｋｇ、一日当たり０. ０５〜
５００ｍｇ、経口投与の場合は２〜５００ｍｇを１回か
ら３回に分けて投与する。
【００１４】
【作用】担子菌カワラタケ属由来のタンパク多糖体、特
にＰＳＫは、糖質部とタンパク質部を有している。その
主要構成糖はグルコースであり、糖質とタンパク質はＯ
−グリコシド結合及びＮ−グリコシド結合で互いに結合
していると考えられている。グルカン部のＮＭＲによる
分析の結果、β１→３、β１→４、β１→６等の種々の
結合様式を含むポリマーであることが明らかになってい
る。すなわち、ＰＳＫは、同一分子中に種々の構造を含
む複合体であると考えられる。この中で、抗腫瘍作用を
はじめとするＰＳＫの作用が、いずれの構造に由来する
のかは、現在のところ充分には解明されていないが、前
記のタンパク多糖体を過沃素酸酸化することにより、１
→４、特にβ１→４、及び１→６、特にβ１→６結合し
た糖質部が減少し、それに伴って、生理活性が顕著に上
昇するものと考えられる。従って、ＰＳＫは臨床的には
通常１日あたり３ｇが１〜３回に分けて内服されている
のに対し、本発明による化学処理により、その投与量を
減少させることができる。
にＰＳＫは、糖質部とタンパク質部を有している。その
主要構成糖はグルコースであり、糖質とタンパク質はＯ
−グリコシド結合及びＮ−グリコシド結合で互いに結合
していると考えられている。グルカン部のＮＭＲによる
分析の結果、β１→３、β１→４、β１→６等の種々の
結合様式を含むポリマーであることが明らかになってい
る。すなわち、ＰＳＫは、同一分子中に種々の構造を含
む複合体であると考えられる。この中で、抗腫瘍作用を
はじめとするＰＳＫの作用が、いずれの構造に由来する
のかは、現在のところ充分には解明されていないが、前
記のタンパク多糖体を過沃素酸酸化することにより、１
→４、特にβ１→４、及び１→６、特にβ１→６結合し
た糖質部が減少し、それに伴って、生理活性が顕著に上
昇するものと考えられる。従って、ＰＳＫは臨床的には
通常１日あたり３ｇが１〜３回に分けて内服されている
のに対し、本発明による化学処理により、その投与量を
減少させることができる。
【００１５】
【実施例】以下、実施例によって本発明を具体的に説明
するが、これらは本発明の範囲を限定するものではな
い。実施例１：本発明による糖タンパク質複合体Ｓ１の調製 ＰＳＫ（商品名クレスチン）５ｇを０. ０４Ｍメタ過沃
素酸ナトリウム（ＮａＩＯ4 ：２１３．９）水溶液２リ
ットルに溶解し、４℃で暗所にて１４日間、時々撹拌し
ながら、糖質部の沃素酸酸化を行った後、エチレングリ
コール２０ｇを添加して数時間撹拌することにより、過
剰のメタ過沃素酸ナトリウムを分解して反応を停止させ
た。得られた反応液に希酢酸を加えて中和した後、水素
化硼素ナトリウム５ｇを加えて還元反応を一夜行わせる
ことにより、アルデヒド・タンパク多糖体を安定なアル
コール・タンパク多糖体に変換させた後、ビスキング透
析チューブを用いて流水中で透析し、低分子物を除去し
た。その後、透析内液に硫酸を加えてその濃度が０. １
Ｎになるようにし、室温にて２４時間緩和加水分解を行
うことにより開裂糖鎖部分を除去し、水酸化ナトリウム
水溶液で中和した後に濃縮し、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ２
５カラムを用いたゲル濾過により低分子を除き、次いで
凍結乾燥を行い、目的物（以下、Ｓ１と呼ぶ）１．７ｇ
を得た。
するが、これらは本発明の範囲を限定するものではな
い。実施例１：本発明による糖タンパク質複合体Ｓ１の調製 ＰＳＫ（商品名クレスチン）５ｇを０. ０４Ｍメタ過沃
素酸ナトリウム（ＮａＩＯ4 ：２１３．９）水溶液２リ
ットルに溶解し、４℃で暗所にて１４日間、時々撹拌し
ながら、糖質部の沃素酸酸化を行った後、エチレングリ
コール２０ｇを添加して数時間撹拌することにより、過
剰のメタ過沃素酸ナトリウムを分解して反応を停止させ
た。得られた反応液に希酢酸を加えて中和した後、水素
化硼素ナトリウム５ｇを加えて還元反応を一夜行わせる
ことにより、アルデヒド・タンパク多糖体を安定なアル
コール・タンパク多糖体に変換させた後、ビスキング透
析チューブを用いて流水中で透析し、低分子物を除去し
た。その後、透析内液に硫酸を加えてその濃度が０. １
Ｎになるようにし、室温にて２４時間緩和加水分解を行
うことにより開裂糖鎖部分を除去し、水酸化ナトリウム
水溶液で中和した後に濃縮し、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ２
５カラムを用いたゲル濾過により低分子を除き、次いで
凍結乾燥を行い、目的物（以下、Ｓ１と呼ぶ）１．７ｇ
を得た。
【００１６】実施例２：本発明の糖タンパク質複合体Ｓ
２の調製 カワラタケ菌ＣＭ１０１株〔ＦＥＲＭ−Ｐ２４１２（Ａ
ＴＣＣ２０５４７）〕を、グルコース５％、ペプトン
０．２％、酵母エキス０．３％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．１％
及びＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏの０．１％（いずれも重量
％）からなる培地に接種し、１０日間培養し、培地表面
に発育した菌苔を生理食塩水とともにホモゲナイズした
ものを種菌とした。この種菌を上記と同一組成の培地２
００ｍｌの入った１リットル容の培養用フラスコ１００
本にそれぞれ接種し、２５〜２７℃で２５日間培養した
後、乾燥器中で乾燥し、乾燥菌糸体を得た。乾燥菌糸体
収量は培養器一本当たり２. ０〜４. ５ｇであった。こ
の菌糸体１００ｇに０. １規定の水酸化ナトリウム水溶
液３リットルを加え、９７℃で１時間、撹拌しながら抽
出した。抽出終了後、室温にまで冷却し、濾紙濾過によ
り、抽出液を回収した。次いで、希塩酸で中和し、エバ
ポレーターで液を濃縮した。濃縮液１リットルに対し飽
和溶液となるように硫酸アンモニウムを加え、塩析を行
い、生じた沈殿を遠心分離により分取した。分取した沈
殿は蒸留水に再溶解し、透析及び限外濾過処理し、分子
量５０００以下の低分子物質を除去した。次いで、凍結
乾燥して、タンパク多糖体粉末１５ｇを得た。以下、こ
のタンパク多糖体をＰＰと呼ぶ。タンパク多糖体ＰＰ５
ｇを０. ０８Ｍメタ過沃素酸ナトリウム (ＮａＩＯ4 ）
水溶液２リットルに溶解し、２２℃の暗所にて７日間、
時々撹拌することにより、糖質部の過沃素酸酸化を行っ
た。実施例１と同様の方法にて還元、緩和水解、脱塩及
び凍結乾燥を行い、目的物質（以下、Ｓ２と呼ぶ）１．
４ｇを得た。
２の調製 カワラタケ菌ＣＭ１０１株〔ＦＥＲＭ−Ｐ２４１２（Ａ
ＴＣＣ２０５４７）〕を、グルコース５％、ペプトン
０．２％、酵母エキス０．３％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．１％
及びＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏの０．１％（いずれも重量
％）からなる培地に接種し、１０日間培養し、培地表面
に発育した菌苔を生理食塩水とともにホモゲナイズした
ものを種菌とした。この種菌を上記と同一組成の培地２
００ｍｌの入った１リットル容の培養用フラスコ１００
本にそれぞれ接種し、２５〜２７℃で２５日間培養した
後、乾燥器中で乾燥し、乾燥菌糸体を得た。乾燥菌糸体
収量は培養器一本当たり２. ０〜４. ５ｇであった。こ
の菌糸体１００ｇに０. １規定の水酸化ナトリウム水溶
液３リットルを加え、９７℃で１時間、撹拌しながら抽
出した。抽出終了後、室温にまで冷却し、濾紙濾過によ
り、抽出液を回収した。次いで、希塩酸で中和し、エバ
ポレーターで液を濃縮した。濃縮液１リットルに対し飽
和溶液となるように硫酸アンモニウムを加え、塩析を行
い、生じた沈殿を遠心分離により分取した。分取した沈
殿は蒸留水に再溶解し、透析及び限外濾過処理し、分子
量５０００以下の低分子物質を除去した。次いで、凍結
乾燥して、タンパク多糖体粉末１５ｇを得た。以下、こ
のタンパク多糖体をＰＰと呼ぶ。タンパク多糖体ＰＰ５
ｇを０. ０８Ｍメタ過沃素酸ナトリウム (ＮａＩＯ4 ）
水溶液２リットルに溶解し、２２℃の暗所にて７日間、
時々撹拌することにより、糖質部の過沃素酸酸化を行っ
た。実施例１と同様の方法にて還元、緩和水解、脱塩及
び凍結乾燥を行い、目的物質（以下、Ｓ２と呼ぶ）１．
４ｇを得た。
【００１７】実施例３：本発明の糖タンパク質複合体Ｓ
３の調製 実施例２で調製したタンパク多糖体ＰＰ５ｇを０. ０４
Ｍメタ過沃素酸ナトリウム (ＮａＩＯ4 ）水溶液２リッ
トルに溶解し、２５℃の暗所にて１４日間、時々撹拌す
ることにより、糖質部の過沃素酸酸化を行い、実施例１
と同様の方法で還元した後、緩和水解、脱塩及び凍結乾
燥を行い、目的物質（以下、Ｓ３と呼ぶ）１. ６ｇを得
た。
３の調製 実施例２で調製したタンパク多糖体ＰＰ５ｇを０. ０４
Ｍメタ過沃素酸ナトリウム (ＮａＩＯ4 ）水溶液２リッ
トルに溶解し、２５℃の暗所にて１４日間、時々撹拌す
ることにより、糖質部の過沃素酸酸化を行い、実施例１
と同様の方法で還元した後、緩和水解、脱塩及び凍結乾
燥を行い、目的物質（以下、Ｓ３と呼ぶ）１. ６ｇを得
た。
【００１８】実施例４：本発明の糖タンパク質複合体の
理化学分析 （１）元素分析 Ｙａｎａｃｏ ＣＨＮ コーダーＭＴ−３型を用いて行
った。 （２）タンパク質／糖質比 本発明による糖タンパク質複合体を蒸留水に溶解した
後、そのタンパク質量をＬｏｗｒｙ−Ｆｏｌｉｎ法（ア
ルブミンを標準物質）で、その糖質量をフェノール硫酸
法（グルコースを標準物質）で各々測定した。 （３）糖組成 本発明による糖タンパク質複合体を１規定硫酸中にて１
００℃で１６時間加水分解を行い、生成物についてＤＩ
ＯＮＥＸ社製のＢｉｏ−ＬＣを用いた陽イオン交換（Ａ
Ｓ６カラム）クロマトグラフィーを行い、パルスアンペ
ロメトリー検出器により糖の検出・同定及び定量を行っ
た。結果を重量％で示した。 （４）アミノ酸組成 本発明による糖タンパク質複合体を６規定の塩酸中にて
１１０℃で２２時間加水分解し、分解生成物についてア
ミノ酸分析計（日立Ｌ−８５００) を用いニンヒドリン
発色法により測定した。モル％で算出した。 （５）β１，３グルカンの定量 本発明による糖タンパク質複合体をＤ2 Ｏに溶解し、重
水素置換を行なった後、ナトリウム−３−トリメチルシ
リルプロピオネート−２，２，３，３，−Ｄ４（ＴＳ
Ｐ）を内部標準として、９０℃で日本電子製ＮＭＲ（Ｊ
ＮＭ−ＧＳＸ５００型により５００ＨｚでＮＭＲを測定
し、グルカンのプロトンに起因するシグナル（α１，４
結合：５．３５±０．０１ｐｐｍ，α１，３結合：５．
２７±０．０１ｐｐｍ，α１，６結合：５．００±０．
０１，β１，３結合：４．７７±０．０１，β１，４結
合：４．５５±０．０１ｐｐｍ，β１，６結合：４．５
２±０．０１ｐｐｍ）を測定した。１，３グルカンのう
ちβ１，３グルカン量（％）は、これら結合量に対する
百分率で表示した。 （６）分子量の測定 本発明による糖タンパク質複合体を蒸留水に溶解し、Ｓ
ｕｐｅｒｏｓｅ ６（ファルマシア）を用いたゲルクロ
マトグラフィーを行い、その溶出位置から算出した。本
発明の糖タンパク質複合体Ｓ１、Ｓ２及びＳ３の測定値
を下表に示す。
理化学分析 （１）元素分析 Ｙａｎａｃｏ ＣＨＮ コーダーＭＴ−３型を用いて行
った。 （２）タンパク質／糖質比 本発明による糖タンパク質複合体を蒸留水に溶解した
後、そのタンパク質量をＬｏｗｒｙ−Ｆｏｌｉｎ法（ア
ルブミンを標準物質）で、その糖質量をフェノール硫酸
法（グルコースを標準物質）で各々測定した。 （３）糖組成 本発明による糖タンパク質複合体を１規定硫酸中にて１
００℃で１６時間加水分解を行い、生成物についてＤＩ
ＯＮＥＸ社製のＢｉｏ−ＬＣを用いた陽イオン交換（Ａ
Ｓ６カラム）クロマトグラフィーを行い、パルスアンペ
ロメトリー検出器により糖の検出・同定及び定量を行っ
た。結果を重量％で示した。 （４）アミノ酸組成 本発明による糖タンパク質複合体を６規定の塩酸中にて
１１０℃で２２時間加水分解し、分解生成物についてア
ミノ酸分析計（日立Ｌ−８５００) を用いニンヒドリン
発色法により測定した。モル％で算出した。 （５）β１，３グルカンの定量 本発明による糖タンパク質複合体をＤ2 Ｏに溶解し、重
水素置換を行なった後、ナトリウム−３−トリメチルシ
リルプロピオネート−２，２，３，３，−Ｄ４（ＴＳ
Ｐ）を内部標準として、９０℃で日本電子製ＮＭＲ（Ｊ
ＮＭ−ＧＳＸ５００型により５００ＨｚでＮＭＲを測定
し、グルカンのプロトンに起因するシグナル（α１，４
結合：５．３５±０．０１ｐｐｍ，α１，３結合：５．
２７±０．０１ｐｐｍ，α１，６結合：５．００±０．
０１，β１，３結合：４．７７±０．０１，β１，４結
合：４．５５±０．０１ｐｐｍ，β１，６結合：４．５
２±０．０１ｐｐｍ）を測定した。１，３グルカンのう
ちβ１，３グルカン量（％）は、これら結合量に対する
百分率で表示した。 （６）分子量の測定 本発明による糖タンパク質複合体を蒸留水に溶解し、Ｓ
ｕｐｅｒｏｓｅ ６（ファルマシア）を用いたゲルクロ
マトグラフィーを行い、その溶出位置から算出した。本
発明の糖タンパク質複合体Ｓ１、Ｓ２及びＳ３の測定値
を下表に示す。
【００１９】
【表１】 測定値 測定項目 Ｓ１ Ｓ２ Ｓ３ １．元素分析 Ｃ％ ４４．４ ４３．７ ４６．８ Ｈ％ ５．９ ６．２ ６．０ Ｎ％ ６．７ ５．０ ８．９ ２．タンパク質／糖質比 １．７ １．３ ３．３ ３．糖組成 ａ．ク゛ルコース ％ ７８ ６９ ８０ ｂ．マンノース ％ １８ ２１ １４ ｃ．カ゛ラクトース％ ０ ２ １ ｄ．キシロース ％ ３ ４ ３ ｅ．フコース％ １ ４ ２ ａ＋ｂ＋ｄ／総計％ ９９ ９４ ９７
【００２０】
【表２】 測定値 測定項目 Ｓ１ Ｓ２ Ｓ３ ４．アミノ酸組成 ａ．アスハ゜ラキ゛ン酸％ １２．２ １０．４ １６．２ ｂ．スレオニン ％ ４．６ ３．８ １．８ ｃ．セリン ％ ４．６ ３．０ ２．７ ｄ．ク゛ルタミン 酸％ １３．１ １０．７ １０．７ ｅ．ク゛リシン％ １１．５ １１．６ ２４．３ ｆ．アラニン％ １３．１ １２．２ １５．０ ｇ．ハ゛リン ％ ８．６ ８．７ ３．２ ｈ．１／２シスチン％ ０．０ ０．２ １．３ ｉ．メチオニン ％ ０．２ ０．８ ０．６ ｊ．イソロイシン％ ５．９ ６．６ ２．１ ｋ．ロイシン％ ９．９ １２．１ ３．９ ｌ．チロシン％ ０．６ １．７ １．７ ｍ．フェニルアラニン％ ４．２ ５．７ ４．６ ｎ．リシ゛ン ％ ３．３ ２．５ ０．７ ｏ．ヒスチチ゛ン ％ ０．９ １．３ ０．９ ｐ．アルキ゛ニン ％ １．７ ２．１ ０．６ ｑ．フ゜ロリン％ ５．８ ６．７ ８．８ a+b+c+d+e+f+g+j+k+m/総計％ ８７．７ ８４．８ ８４．５ ５．β１，３ク゛ルカン量（総ク゛ルカン％） ６５ １００ ２６６．分子量 5,000 − 1,000,000 同左 同左
【００２１】実施例５：抗腫瘍活性 ５週齢の雌Ｊｃｌ：ＩＣＲマウス（日本クレア株式会社
より購入；一群１０匹）の皮下にサルコーマ１８０細胞
（北里研究所より入手し、Ｊｃｌ：ＩＣＲマウスの腹腔
内で継代している腫瘍細胞株）を１×１０6 個移植して
担癌マウスとした。一定量の本発明糖タンパク質複合体
Ｓ１又はタンパク多糖体（ＰＳＫ）を生理食塩水に溶解
し、移植翌日から週３回、合計１０回、マウス一匹の体
重１０ｇ当たり０．１ｍｌとなるように腹腔内投与し
た。なお、担癌・コントロール群のマウスには、生理食
塩水を、マウス一匹の体重１０ｇ当たり０．１ｍｌの量
で腹腔内投与した。移植２５日目にマウスをと殺し、腫
瘍を取り出し、その重量を天秤にて測定した。検体の抗
腫瘍活性は下記の式（１）から算出した。
より購入；一群１０匹）の皮下にサルコーマ１８０細胞
（北里研究所より入手し、Ｊｃｌ：ＩＣＲマウスの腹腔
内で継代している腫瘍細胞株）を１×１０6 個移植して
担癌マウスとした。一定量の本発明糖タンパク質複合体
Ｓ１又はタンパク多糖体（ＰＳＫ）を生理食塩水に溶解
し、移植翌日から週３回、合計１０回、マウス一匹の体
重１０ｇ当たり０．１ｍｌとなるように腹腔内投与し
た。なお、担癌・コントロール群のマウスには、生理食
塩水を、マウス一匹の体重１０ｇ当たり０．１ｍｌの量
で腹腔内投与した。移植２５日目にマウスをと殺し、腫
瘍を取り出し、その重量を天秤にて測定した。検体の抗
腫瘍活性は下記の式（１）から算出した。
【００２２】
【式１】
【００２３】図１に示すように、本発明による糖タンパ
ク質複合体Ｓ１の抗腫瘍活性（図１のＢ）は、ＰＳＫの
抗腫瘍活性（図１のＡ）に比し、明らかに優れていた。
一方、Ｓ２及びＳ３の抗腫瘍活性も、表３に示すよう
に、出発物質ＰＰの抗腫瘍活性よりも高かった。
ク質複合体Ｓ１の抗腫瘍活性（図１のＢ）は、ＰＳＫの
抗腫瘍活性（図１のＡ）に比し、明らかに優れていた。
一方、Ｓ２及びＳ３の抗腫瘍活性も、表３に示すよう
に、出発物質ＰＰの抗腫瘍活性よりも高かった。
【００２４】
【表３】抗腫瘍活性（投与量０．３ｍｇ／ｋｇ） ＰＰ ２８％ Ｓ２ ７８％Ｓ３ ８０％
【００２５】実施例６：免疫調節活性（Ｔ細胞の増殖促
進効果） ＰＳＫで免疫したＢＡＬＢ／ｃマウスのリンパ節から分
離し、ｉｎ ｖｉｔｒｏで培養でき、ＰＳＫに反応して
増殖するＴ細胞クローンＫＯＡ−２（ＦＥＲＭ−ＢＰ４
９８５）に対する本発明糖タンパク質複合体の作用を検
討した。９６ウエルの培養用マイクロプレート（ファル
コン３０７２、日本ベクトンデイッキンソン社）の各ウ
エルに、ＫＯＡ−２の２×１０4 個及びマイトマイシン
Ｃ処置ＢＡＬＢ／ｃマウス脾細胞（脾細胞とマイトマイ
シンＣ５０μｇ／ｍｌを３７℃で３０分間反応させるこ
とにより増殖能を失わせた細胞）の５×１０5 個と、本
発明糖タンパク質複合体Ｓ１又はＰＳＫ溶液とを加え、
全体の培養液( １０％牛胎児血清添加ＲＰＭＩ １６４
０）の量を２００μｌ／ウエルになるようにして、３７
℃の５％炭酸ガス培養器中で３日間培養した。培養終了
６時間前に、 3Ｈ−標識チミジン（アマシャム社）を１
８．５ＫＢｑ／ウエル加えた。なお、前記の実験におい
てマイトマイシンＣ処置ＢＡＬＢ／ｃマウス脾細胞を使
用する理由は、以下のとおりである。すなわち、脾細胞
中に含まれる抗原提示能を有する細胞（例えば、Ｂ細
胞、マクロファージ）が、ＰＳＫ又は本発明糖タンパク
質複合体Ｓ１を取り込み、ＰＳＫ又は本発明糖タンパク
質複合体Ｓ１の抗原部分をクラスII組織適合性抗原と結
合した形でそれらの細胞の表面上に提示する。ＫＯＡ−
２は組織適合性抗原に結合したＰＳＫ又は本発明糖タン
パク質複合体Ｓ１の抗原部分に反応し、増殖する。従っ
て、ＫＯＡ−２の増殖には抗原提示細胞の存在が必要で
ある。また、脾細胞をマイトマイシンＣで処理してある
のは、ＰＳＫ又は本発明糖タンパク質複合体Ｓ１が脾細
胞自身の増殖をも促進する作用を有しているので、本測
定（ＫＯＡ−２の増殖を測定する）において、脾細胞の
増殖する反応を回避するためである。
進効果） ＰＳＫで免疫したＢＡＬＢ／ｃマウスのリンパ節から分
離し、ｉｎ ｖｉｔｒｏで培養でき、ＰＳＫに反応して
増殖するＴ細胞クローンＫＯＡ−２（ＦＥＲＭ−ＢＰ４
９８５）に対する本発明糖タンパク質複合体の作用を検
討した。９６ウエルの培養用マイクロプレート（ファル
コン３０７２、日本ベクトンデイッキンソン社）の各ウ
エルに、ＫＯＡ−２の２×１０4 個及びマイトマイシン
Ｃ処置ＢＡＬＢ／ｃマウス脾細胞（脾細胞とマイトマイ
シンＣ５０μｇ／ｍｌを３７℃で３０分間反応させるこ
とにより増殖能を失わせた細胞）の５×１０5 個と、本
発明糖タンパク質複合体Ｓ１又はＰＳＫ溶液とを加え、
全体の培養液( １０％牛胎児血清添加ＲＰＭＩ １６４
０）の量を２００μｌ／ウエルになるようにして、３７
℃の５％炭酸ガス培養器中で３日間培養した。培養終了
６時間前に、 3Ｈ−標識チミジン（アマシャム社）を１
８．５ＫＢｑ／ウエル加えた。なお、前記の実験におい
てマイトマイシンＣ処置ＢＡＬＢ／ｃマウス脾細胞を使
用する理由は、以下のとおりである。すなわち、脾細胞
中に含まれる抗原提示能を有する細胞（例えば、Ｂ細
胞、マクロファージ）が、ＰＳＫ又は本発明糖タンパク
質複合体Ｓ１を取り込み、ＰＳＫ又は本発明糖タンパク
質複合体Ｓ１の抗原部分をクラスII組織適合性抗原と結
合した形でそれらの細胞の表面上に提示する。ＫＯＡ−
２は組織適合性抗原に結合したＰＳＫ又は本発明糖タン
パク質複合体Ｓ１の抗原部分に反応し、増殖する。従っ
て、ＫＯＡ−２の増殖には抗原提示細胞の存在が必要で
ある。また、脾細胞をマイトマイシンＣで処理してある
のは、ＰＳＫ又は本発明糖タンパク質複合体Ｓ１が脾細
胞自身の増殖をも促進する作用を有しているので、本測
定（ＫＯＡ−２の増殖を測定する）において、脾細胞の
増殖する反応を回避するためである。
【００２６】培養終了後、セルハーベスターにてウエル
内の細胞をフィルター上に回収・洗浄した。前記フィル
ターを乾燥させた後、バイアルに入れ、液体シンチレー
ターを加え、液体シンチレションカウンターにて細胞に
取り込まれた放射活性を測定した。その結果、図２に示
すように、ＰＳＫ（図２のＡ）の至適添加濃度３００μ
ｇ／ｍｌに比して、本発明糖タンパク質複合体Ｓ１（図
２のＢ）の至適添加濃度は１００μｇ／ｍｌであり、１
／３の濃度でほぼ同等の活性を示すことが判明した。一
方、Ｓ２及びＳ３の活性も、表４に示すように、ＰＰの
活性よりも高かった。
内の細胞をフィルター上に回収・洗浄した。前記フィル
ターを乾燥させた後、バイアルに入れ、液体シンチレー
ターを加え、液体シンチレションカウンターにて細胞に
取り込まれた放射活性を測定した。その結果、図２に示
すように、ＰＳＫ（図２のＡ）の至適添加濃度３００μ
ｇ／ｍｌに比して、本発明糖タンパク質複合体Ｓ１（図
２のＢ）の至適添加濃度は１００μｇ／ｍｌであり、１
／３の濃度でほぼ同等の活性を示すことが判明した。一
方、Ｓ２及びＳ３の活性も、表４に示すように、ＰＰの
活性よりも高かった。
【００２７】
【表４】 １００μｇ／ｍｌ添加時のＫＯＡ−２細胞の増殖（ 3Ｈ−標識チミジンの取り込み，ｄｐｍ） ＰＰ ４１，５００ Ｓ２ １６０，８００Ｓ３ １５５，０００
【００２８】実施例７：免疫調節活性〔免疫調節性サイ
トカイン産生誘導効果〕 健常人（４８才、男子）から採取した末梢血液（ヘパリ
ン加）３０ｍｌに等量のハンクス液を加えて混和し、試
験管内に前もって添加しておいたＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑ
ｕｅ液（ファルマシア）に重層し、２０００ｒ．ｐ．ｍ
で１５分間遠心分離し、中間層の単核球画分を採取し
た。その単核球画分の細胞をハンクス液にて３回洗浄し
た後、１０％の牛胎児血清を添加したＲＰＭＩ １６４
０培地に懸濁させ、１×１０6 ／ｍｌに調整した。９６
ウエルの培養用マイクロプレート（ファルコン３０７
２、日本ベクトンデイッキンソン社）の各ウエルに上記
細胞を０．１ｍｌずつ分注し、ついで本発明糖タンパク
質複合体Ｓ１又はＰＳＫ溶液を加え、全体の培養液（１
０％牛胎児血清添加ＲＰＭＩ １６４０）の量を２００
μｌ／ウエルになるようにして、３７℃の５％炭酸ガス
培養器中で２４時間培養した。培養終了後、遠心分離に
より培養上清を分離し、市販の酵素免疫測定キット（イ
ンターロイキン１βは大塚製薬製、インターロイキン６
はResearch and Diagnostic System社製）を用いてサイ
トカイン量を定量した。その結果、図３及び図４に示す
ように、本発明糖タンパク質複合体Ｓ１添加によるイン
ターロイキン１β産生（図３のＢ）及びインターロイキ
ン６産生（図４のＢ）は、ＰＳＫ添加のインターロイキ
ン１β産生（図３のＡ）及びインターロイキン６産生
（図４のＡ）に比して有意に高値を示した。一方、Ｓ２
及びＳ３の活性も、表５に示すように、ＰＰの活性より
も高かった。
トカイン産生誘導効果〕 健常人（４８才、男子）から採取した末梢血液（ヘパリ
ン加）３０ｍｌに等量のハンクス液を加えて混和し、試
験管内に前もって添加しておいたＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑ
ｕｅ液（ファルマシア）に重層し、２０００ｒ．ｐ．ｍ
で１５分間遠心分離し、中間層の単核球画分を採取し
た。その単核球画分の細胞をハンクス液にて３回洗浄し
た後、１０％の牛胎児血清を添加したＲＰＭＩ １６４
０培地に懸濁させ、１×１０6 ／ｍｌに調整した。９６
ウエルの培養用マイクロプレート（ファルコン３０７
２、日本ベクトンデイッキンソン社）の各ウエルに上記
細胞を０．１ｍｌずつ分注し、ついで本発明糖タンパク
質複合体Ｓ１又はＰＳＫ溶液を加え、全体の培養液（１
０％牛胎児血清添加ＲＰＭＩ １６４０）の量を２００
μｌ／ウエルになるようにして、３７℃の５％炭酸ガス
培養器中で２４時間培養した。培養終了後、遠心分離に
より培養上清を分離し、市販の酵素免疫測定キット（イ
ンターロイキン１βは大塚製薬製、インターロイキン６
はResearch and Diagnostic System社製）を用いてサイ
トカイン量を定量した。その結果、図３及び図４に示す
ように、本発明糖タンパク質複合体Ｓ１添加によるイン
ターロイキン１β産生（図３のＢ）及びインターロイキ
ン６産生（図４のＢ）は、ＰＳＫ添加のインターロイキ
ン１β産生（図３のＡ）及びインターロイキン６産生
（図４のＡ）に比して有意に高値を示した。一方、Ｓ２
及びＳ３の活性も、表５に示すように、ＰＰの活性より
も高かった。
【００２９】
【表５】 ５００μｇ／ｍｌ添加培養群上清中の含量（ｎｇ／ｍｌ） インターロイキン１β インターロイキン６ ＰＰ ０．６ １．３ Ｓ２ １．５ ２．８ Ｓ３ １．４ ２．６
【００３０】実施例８：増殖因子阻害活性 ０．２％牛血清アルブミン添加燐酸緩衝液 (ｐＨ７．
４) にヒト由来遺伝子組換えＴＧＦ−β１（Research a
nd Diagnostic System社製）又はＰＤＧＦ（Research a
nd Diagnostic System社製）を加え、１００ｎｇ／ｍｌ
になるように調整した。試験管に上記溶液を０．２ｍ
ｌ、次いで一定量の本発明糖タンパク質複合体Ｓ１又は
ＰＳＫを０．２％牛血清アルブミン添加燐酸緩衝液に溶
解させた溶液を０．２ｍｌ加え、２２℃で３時間反応さ
せた。反応終了後、市販の酵素免疫測定キット（ＴＧＦ
−β１はアマシャム社製、ＰＤＧＦはResearch and Dia
gnostic System社製）を用いて、反応液中のＴＧＦ−β
１又はＰＤＧＦを定量した。検体のＴＧＦ−β１又はＰ
ＤＧＦ結合活性は下記の式（２）から算出した。
４) にヒト由来遺伝子組換えＴＧＦ−β１（Research a
nd Diagnostic System社製）又はＰＤＧＦ（Research a
nd Diagnostic System社製）を加え、１００ｎｇ／ｍｌ
になるように調整した。試験管に上記溶液を０．２ｍ
ｌ、次いで一定量の本発明糖タンパク質複合体Ｓ１又は
ＰＳＫを０．２％牛血清アルブミン添加燐酸緩衝液に溶
解させた溶液を０．２ｍｌ加え、２２℃で３時間反応さ
せた。反応終了後、市販の酵素免疫測定キット（ＴＧＦ
−β１はアマシャム社製、ＰＤＧＦはResearch and Dia
gnostic System社製）を用いて、反応液中のＴＧＦ−β
１又はＰＤＧＦを定量した。検体のＴＧＦ−β１又はＰ
ＤＧＦ結合活性は下記の式（２）から算出した。
【００３１】
【式２】
【００３２】その結果、図５（ＴＧＦ−β１）及び図６
（ＰＤＧＦ）に示すように、本発明糖タンパク質複合体
Ｓ１のＴＧＦ−β１及びＰＤＧＦの直接結合能（図５及
び図６のＢ）は、ＰＳＫの直接結合能（図５及び図６の
Ａ）に比して明らかに高かった。一方、Ｓ２及びＳ３の
活性も、表６に示すように、ＰＰの活性よりも高かっ
た。
（ＰＤＧＦ）に示すように、本発明糖タンパク質複合体
Ｓ１のＴＧＦ−β１及びＰＤＧＦの直接結合能（図５及
び図６のＢ）は、ＰＳＫの直接結合能（図５及び図６の
Ａ）に比して明らかに高かった。一方、Ｓ２及びＳ３の
活性も、表６に示すように、ＰＰの活性よりも高かっ
た。
【００３３】
【表６】
【００３４】
【発明の効果】本発明による新規な糖タンパク質複合
体、担子菌カワラタケ属由来のタンパク多糖体を過沃素
酸酸化することにより、１→４及び１→６結合した糖質
部が減少し、それに伴って、生理活性が顕著に上昇す
る。従って、本発明による酸化処理により、前記のタン
パク多糖体よりも投与量を減少させながら、抗悪性腫瘍
剤、免疫調節剤（例えば、ＩＬ−１β誘導剤、ＩＬ−６
誘導剤、又はＴ細胞増殖誘導剤）、又は増殖因子阻害剤
（例えば、ＴＧＦ−β１阻害剤、又はＰＤＧＦ阻害剤）
として用いることができる。
体、担子菌カワラタケ属由来のタンパク多糖体を過沃素
酸酸化することにより、１→４及び１→６結合した糖質
部が減少し、それに伴って、生理活性が顕著に上昇す
る。従って、本発明による酸化処理により、前記のタン
パク多糖体よりも投与量を減少させながら、抗悪性腫瘍
剤、免疫調節剤（例えば、ＩＬ−１β誘導剤、ＩＬ−６
誘導剤、又はＴ細胞増殖誘導剤）、又は増殖因子阻害剤
（例えば、ＴＧＦ−β１阻害剤、又はＰＤＧＦ阻害剤）
として用いることができる。
【図１】実施例５において測定した、本発明による糖タ
ンパク質複合体Ｓ１の抗腫瘍活性とＰＳＫの抗腫瘍活性
とを対比して示すグラフである。
ンパク質複合体Ｓ１の抗腫瘍活性とＰＳＫの抗腫瘍活性
とを対比して示すグラフである。
【図２】実施例６において測定した、本発明による糖タ
ンパク質複合体Ｓ１のＴ細胞増殖促進活性とＰＳＫのＴ
細胞増殖促進活性とを対比して示すグラフである。
ンパク質複合体Ｓ１のＴ細胞増殖促進活性とＰＳＫのＴ
細胞増殖促進活性とを対比して示すグラフである。
【図３】実施例７において測定した、本発明による糖タ
ンパク質複合体Ｓ１のＩＬ−１β産生誘導活性とＰＳＫ
のＩＬ−１β産生誘導活性とを対比して示すグラフであ
る。
ンパク質複合体Ｓ１のＩＬ−１β産生誘導活性とＰＳＫ
のＩＬ−１β産生誘導活性とを対比して示すグラフであ
る。
【図４】実施例７において測定した、本発明による糖タ
ンパク質複合体Ｓ１のＩＬ−６産生誘導活性とＰＳＫの
ＩＬ−６産生誘導活性とを対比して示すグラフである。
ンパク質複合体Ｓ１のＩＬ−６産生誘導活性とＰＳＫの
ＩＬ−６産生誘導活性とを対比して示すグラフである。
【図５】実施例８において測定した、本発明による糖タ
ンパク質複合体Ｓ１のＴＧＦ−β１との結合活性とＰＳ
ＫのＴＧＦ−β１との結合活性とを対比して示すグラフ
である。
ンパク質複合体Ｓ１のＴＧＦ−β１との結合活性とＰＳ
ＫのＴＧＦ−β１との結合活性とを対比して示すグラフ
である。
【図６】実施例８において測定した、本発明による糖タ
ンパク質複合体Ｓ１のＰＤＧＦとの結合活性とＰＳＫの
ＰＤＧＦとの結合活性とを対比して示すグラフである。
ンパク質複合体Ｓ１のＰＤＧＦとの結合活性とＰＳＫの
ＰＤＧＦとの結合活性とを対比して示すグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 14/375 8517−4Ｈ Ｃ１２Ｐ 21/00 Ａ //(Ｃ１２Ｐ 21/00 Ｃ１２Ｒ 1:645）
Claims (11)
- 【請求項１】 カワラタケ属に属する担子菌の菌糸体、
培養物又は子実体の抽出物を化学処理して得られる下記
の理化学的性質を有する糖タンパク質複合体であって、
ゲルクロマトグラフィーによる測定で５，０００〜１，
０００，０００の範囲の分子量を示し、フェノール硫酸
法で定量した糖質量に対するローリー−フォーリン（Ｌ
ｏｗｒｙ−Ｆｏｌｉｎ）法で定量したタンパク質の量
（タンパク質／糖質）が０．７〜５．０であり、糖質中
グルカンの１８〜１００％が１→３グルカンである構造
を有することを特徴とする、糖タンパク質複合体。 - 【請求項２】 塩酸加水分解物のアミノ酸分析により、
アスパラギン酸、スレオニン、セリン、グルタミン酸、
プロリン、グリシン、アラニン、システイン、バリン、
メチオニン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェ
ニルアラニン、リジン、ヒスチジン及びアルギニンが検
知され、その中でアスパラギン酸、スレオニン、セリ
ン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、フェニルアラ
ニン、バリン、イソロイシン及びロイシンの占める含量
が検知全アミノ酸量の７５モル％以上である、請求項１
に記載の糖タンパク質複合体。 - 【請求項３】 硫酸加水分解後の糖質分析により、フコ
ース、キシロース、マンノース、ガラクトース及びグル
コースが検知され、その中でグルコース、マンノース及
びキシロースの占める含量が検知全糖質量の９０重量％
以上である、請求項１に記載の糖タンパク質複合体。 - 【請求項４】 カワラタケ属に属する担子菌の菌糸体、
培養物又は子実体の抽出物が、熱水又はアルカリ溶液に
よる抽出物であり、それを化学処理して得られる、請求
項１に記載の糖タンパク質複合体。 - 【請求項５】 カワラタケ属に属する担子菌の菌糸体、
培養物又は子実体の抽出物が、熱水又はアルカリ溶液に
よる抽出物であって、１→３、１→４及び／又は１→６
グルカンと約５〜６０％のタンパク質を含むタンパク多
糖体であり、それを化学処理して得られる、請求項１に
記載の糖タンパク質複合体。 - 【請求項６】 化学処理に、過沃素酸又はその塩類によ
る酸化処理が含まれる、請求項１に記載の糖タンパク質
複合体。 - 【請求項７】 カワラタケ属に属する担子菌の菌糸体、
培養物又は子実体の抽出物がＰＳＫである、請求項５に
記載の糖タンパク質複合体。 - 【請求項８】 カワラタケ属に属する担子菌由来の菌糸
体、培養物又は子実体の抽出物であって、１→３、１→
４及び／又は１→６グルカンと約５〜６０％のタンパク
質を含むタンパク多糖体に、化学処理を施すことを特徴
とする、糖タンパク質複合体の製造方法。 - 【請求項９】 請求項１に記載の糖タンパク質複合体を
含有することを特徴とする、抗腫瘍剤。 - 【請求項１０】 請求項１に記載の糖タンパク質複合体
を含有することを特徴とする、免疫調節剤。 - 【請求項１１】 請求項１に記載の糖タンパク質複合体
を含有することを特徴とする、増殖因子阻害剤。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7041230A JPH08208704A (ja) | 1995-02-06 | 1995-02-06 | 新規な糖タンパク質複合体、その製造方法、並びに抗腫瘍剤、免疫調節剤及び増殖因子阻害剤 |
| CA002168827A CA2168827A1 (en) | 1995-02-06 | 1996-02-05 | Glycoproteins, process for preparation thereof, and pharmaceutical composition |
| AU43369/96A AU681054B2 (en) | 1995-02-06 | 1996-02-06 | Novel glycoproteins, process for preparation thereof, and pharmaceutical composition |
| EP96101623A EP0725077A1 (en) | 1995-02-06 | 1996-02-06 | Novel glycoproteins, process for preparation thereof, and pharmaceutical composition |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7041230A JPH08208704A (ja) | 1995-02-06 | 1995-02-06 | 新規な糖タンパク質複合体、その製造方法、並びに抗腫瘍剤、免疫調節剤及び増殖因子阻害剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08208704A true JPH08208704A (ja) | 1996-08-13 |
Family
ID=12602616
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7041230A Pending JPH08208704A (ja) | 1995-02-06 | 1995-02-06 | 新規な糖タンパク質複合体、その製造方法、並びに抗腫瘍剤、免疫調節剤及び増殖因子阻害剤 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0725077A1 (ja) |
| JP (1) | JPH08208704A (ja) |
| AU (1) | AU681054B2 (ja) |
| CA (1) | CA2168827A1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005075740A (ja) * | 2003-08-28 | 2005-03-24 | Hajime Otani | 免疫賦活化組成物、並びにそれが含まれた医薬品、動物薬、食品、飼料及び化粧品 |
| WO2011010717A1 (ja) * | 2009-07-24 | 2011-01-27 | 株式会社クレハ | 抗ｐｓｋ抗体 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2156767A1 (en) * | 1994-08-25 | 1996-02-26 | Kenichi Matsunaga | Binding agent for growth factor |
| US6864231B2 (en) | 2001-01-09 | 2005-03-08 | Pharmachem Laboratories, Inc. | Glycoprotein matrix compositions and methods related thereto |
| US7048932B2 (en) * | 2002-05-22 | 2006-05-23 | The Chinese University Of Hong Kong | Preparation and standardization of immunomodulatory peptide-linked glucans with verifiable oral absorbability from coriolus versicolor |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5932480B2 (ja) * | 1981-02-10 | 1984-08-09 | 呉羽化学工業株式会社 | 新規な糖蛋白複合体 |
| DE3448149C2 (ja) * | 1983-08-11 | 1990-01-04 | Kureha Kagaku Kogyo K.K., Tokio/Tokyo, Jp | |
| JPH0643336B2 (ja) * | 1988-06-30 | 1994-06-08 | 呉羽化学工業株式会社 | 血管増殖抑制剤 |
| AU3230393A (en) * | 1992-11-30 | 1994-06-22 | Department Of The Army | Purified coriolus versicolor polypeptide complex |
| WO1994012199A1 (en) * | 1992-11-30 | 1994-06-09 | Department Of The Army | Purified coriolus versicolor polypeptide complex |
| CA2156767A1 (en) * | 1994-08-25 | 1996-02-26 | Kenichi Matsunaga | Binding agent for growth factor |
-
1995
- 1995-02-06 JP JP7041230A patent/JPH08208704A/ja active Pending
-
1996
- 1996-02-05 CA CA002168827A patent/CA2168827A1/en not_active Abandoned
- 1996-02-06 EP EP96101623A patent/EP0725077A1/en not_active Withdrawn
- 1996-02-06 AU AU43369/96A patent/AU681054B2/en not_active Ceased
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005075740A (ja) * | 2003-08-28 | 2005-03-24 | Hajime Otani | 免疫賦活化組成物、並びにそれが含まれた医薬品、動物薬、食品、飼料及び化粧品 |
| WO2011010717A1 (ja) * | 2009-07-24 | 2011-01-27 | 株式会社クレハ | 抗ｐｓｋ抗体 |
| JP5683466B2 (ja) * | 2009-07-24 | 2015-03-11 | 株式会社クレハ | 抗ｐｓｋ抗体 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0725077A1 (en) | 1996-08-07 |
| AU4336996A (en) | 1996-08-15 |
| AU681054B2 (en) | 1997-08-14 |
| CA2168827A1 (en) | 1996-08-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mizuno et al. | Reishi, Ganoderma lucidum and Ganoderma tsugae: bioactive substances and medicinal effects | |
| Fujii et al. | Isolation and characterization of a new antitumor polysaccharide, KS-2, extracted from culture mycelia of Lentinus edodes | |
| EP1451336B1 (en) | Production of fungal extracellular immune stimulating compounds | |
| US4289688A (en) | Protein-bound polysaccharides | |
| US4163780A (en) | Ks-2-a | |
| CS200503B2 (en) | Method of preparation of the antigall substances | |
| HU188599B (en) | Process for preparing physiologically active substance designated as ch-1 | |
| EP0058093B1 (en) | Glycoprotein having anti-tumour and lectin-like activity | |
| HU176828B (en) | Process for producing nitrogen-containing polysaccharides of tumor-inhibiting activity | |
| JPH08208704A (ja) | 新規な糖タンパク質複合体、その製造方法、並びに抗腫瘍剤、免疫調節剤及び増殖因子阻害剤 | |
| CA1339308C (en) | Polysaccharides and antiviral drug containing polysaccharides as active ingredient | |
| WO1992010562A1 (en) | Ganoderma lucidium iy009 which produces proteoglycan (g009) having effect of enhancing antitumor immunity | |
| JP4448330B2 (ja) | マツタケ由来陰イオン交換樹脂吸着画分、免疫増強剤、及びストレス負荷回復促進剤 | |
| US4086216A (en) | Glycoprotein extracted from the mushroom psalliota xanthoderma and its application in anti-viral therapy | |
| JPH09309842A (ja) | 新規な生理活性物質、その製造方法及び医薬組成物 | |
| JPH04300898A (ja) | 新規糖タンパク複合体およびその製造方法 | |
| JPWO1992010202A1 (ja) | 抗腫瘍免疫増強効果のある蛋白多糖體（ｇ００９） | |
| WO1984002912A1 (fr) | Proteine a effet oncostatique, son procede de preparation et mediament oncostatique la contenant | |
| JP3152402B2 (ja) | 抗腫瘍剤及びその製法 | |
| KR900002671B1 (ko) | 종양면역 증강효과가 있는 단백다당체(리오필란 a) | |
| KR900003303B1 (ko) | 스트레팍스 및 이를 생성하는 균주 | |
| SU961565A3 (ru) | Способ получени мукополисахаридов | |
| TWI404541B (zh) | 新穎的抗腫瘤蛋白 | |
| JPH01121302A (ja) | 粘質多糖体及びその製造方法 | |
| JPH08113540A (ja) | 増殖因子結合剤 |