JPH0853360A - ヒスタミン遊離抑制剤並びにこれを含有する化粧品及び食品 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】 ジャンボサ・ブルガリス、ピペル・アドゥン
カム、アナカルディウム・オクシデンタレ、スミラック
ス・ジャペカンガ、ヒメナエア・コウルバリルなどの植
物の抽出物を有効成分とするヒスタミン遊離抑制剤並び
にこれを含有する化粧品及び食品。 【効果】 上記のヒスタミン遊離抑制剤は抗炎症作用お
よび抗アレルギー作用を有する医薬として有用である。
また、この化粧品は、アレルギー症状や炎症による皮膚
のかゆみ、痛みなどを改善するとともに皮膚に保湿性を
付与することができる。更に、この食品は、日常的に摂
取することにより、風邪に伴う炎症やのどのはれ、花粉
症、せきなどを予防・改善することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、植物抽出物を有効成分
とするヒスタミン遊離抑制剤に関し、更に詳細には、抗
炎症剤または抗アレルギー剤として、あるいは風邪に伴
う炎症やのどのはれ、花粉症、せきなどの予防・改善、
皮膚のかゆみ、痛みなどを改善するとともに皮膚への保
湿性の付与を目的として化粧品または食品に配合される
ヒスタミン遊離抑制剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】炎症やアレルギーの発症にはヒスタミン
が関与していることが知られているが、ヒスタミンが肥
満細胞から遊離される際には、ヒアルロニダーゼが介在
しているとされている。このヒアルロニダーゼは、更に
結合組織のマトリックスを破壊し、炎症系の細胞の組織
への浸潤や血管の透過性を促進する役割を演じているの
で、当該酵素を阻害することによって炎症やアレルギー
反応が抑制されることが期待される。事実、抗アレルギ
ー剤成分として知られるクロモグリク酸ナトリウムやト
ラニラスト等は、ヒアルロニダーゼの阻害剤であること
も知られている。

【０００３】医薬品成分に関する抗炎症、抗アレルギー
の研究は数多く行なわれているが、抗炎症あるいは抗ア
レルギー活性を有する食品素材については、甘草抽出物
などが伝承にのみ基づいて使用されているのが現状であ
る。 また、抗炎症あるいは抗アレルギー活性を有する
化粧品原料についても種々探索されているが、安全かつ
有望なものは未だ得られていない。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】２１世紀に向けて、疾
病の治療よりも予防の必要性が叫ばれている。 例え
ば、炎症やアレルギーは、人体の持つ抵抗力の過剰反応
と考えられる側面もあるが、発病時の苦難を思うとき、
なんらかの予防措置が必要とされる。 この措置は、食
品や化粧品のように日常的に摂取されたり用いられてい
るものにより講じられることが望ましいが、抗炎症、抗
アレルギー活性を有する有用な食品素材あるいは化粧品
原料は得られておらず、このような素材、原料の提供が
課題として残されている。

【０００５】また、生体のヒアルロン酸含量を維持し、
高める必要性については、皮膚だけの問題にとどまらな
い。 大動脈や関節腔液などにおいても、ヒアルロン酸
による保水構造は重要な働きをしている。 老化が人体
のヒアルロン酸含量の低下を伴う以上、高齢化社会に向
けて、皮膚や血管などの、ヒアルロン酸により保持され
る水分含量を維持する必要性は、ますます高まると予想
される。しかし現状では、化粧品用保湿剤として外用さ
れるヒアルロン酸にのみ関心が向けられ、人体内のヒア
ルロン酸含量ひいては水分含量を維持しようとする試み
は皆無に等しく、重要な課題として残されている。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者は、ヒアルロン
酸の加水分解酵素であるヒアルロニダーゼと肥満細胞か
らのヒスタミンの遊離の関係に着目し、ヒアルロニダー
ゼを阻害することによりヒスタミンの遊離を抑制するこ
とのできる天然物を見いだすべく鋭意検索を行なった。
そしてその結果、特に南米に産するある種の植物の抽出
物は、強力なヒアルロニダーゼ阻害作用およびヒスタミ
ン遊離抑制作用を有し、ヒスタミン遊離抑制剤として利
用可能であることを見出し本発明を完成するに至った。

【０００７】すなわち本発明の第一の目的は、ジャンボ
サ・ブルガリス（Jambosa vulgaris）、ピペル・アドゥ
ンカム（Piper aduncum） 、アナカルディウム・オクシ
デンタレ（Anacardium occidentale）、スミラックス・
ジャペカンガ（Smilax japecanga）、ヒメナエア・コウ
ルバリル（Hymenaea courbaril）、アンキエテア・サル
タリス（Anchietea salutaris）、ピプタデニア・ペレ
グリナ（Piptadenia peregrina）、ストリフノデンドロ
ン・バルバティマオ（Stryphnodendron barbatimao）、
アルクティウム・ラッパ（Arctium lappa）、ペリアン
ドラ・ドゥルシス（Periandra dulcis）、ユーカリプト
ゥス・グロブルス（Eucalyptus globulus）、ミルシア
・スファエロカルパ（Myrcia sphaerocarpa）、コッコ
ロバ・ウビフェラ（Coccoloba uvifera）、シヌス・ア
ロエイラ（Schinus aroeira）、グァズマ・ウルミフォ
リア（Guazuma ulmifolia）、アルクトスタフィロス・
ウバ・ウルシ（Arctostaphylos uva-ursi）、セストル
ム・シュード・キナ（Cestrum pseudo-quina）、フェラ
リア・プルガンス（Ferraria purgans）およびアニバ・
カネリラ（Aniba canelilla）、アディアンツム・カピ
ッルス・ヴェネリス（Adiantum capillus-veneris）、
エリスロザイルム・カトゥアーバ（Erythroxylum catua
ba）、ピセコロビウム・トルトゥム（Pithecolobium to
rtum）、ハマメリス・ヴィルギニアーナ（Hamamelis vi
rginiana）、カリニアナ・レガリス（Cariniana legali
s）、フェヴィッレア・トゥリロバータ（Fevillea tril
obata）、クラテッラ・アメリカーナ（Curatella ameri
cana）、ヘディキウム・コロナリウム（Hedychium coro
narium）およびレミジア・フェッルギネア（Remijia fe
rruginea）からなる群より選ばれる少なくとも１つの植
物の抽出物を有効成分とするヒスタミン遊離抑制剤を提
供するものである。

【０００８】また、本発明の第二の目的は、当該ヒスタ
ミン遊離抑制剤を含有する化粧品および食品を提供する
ものである。

【０００９】本発明のヒスタミン遊離抑制剤の有効成分
は、前記植物の、全草、樹皮、心材、葉、花、種子、
茎、根などを常法により抽出することにより得られる。

【００１０】抽出に用いられる植物は、南米等で古くか
ら生薬として用いられているものであるが、その主なも
のとしては、ジャンボサ・ブルガリス（ジャムボ アマ
レロ）［Jambosa vulgaris（Jambo-amarelo）］（植物
の学名に続けてカッコ内に植物の名称を記した。以下同
じ）、ピペル・アドゥンカム（アペルタ・ルアン）［Pi
per aduncum（Aperta-ruao）］ 、アナカルディウム・
オクシデンタレ（カジュエイロ）［Anacardium occiden
tale（Cajueiro）］、スミラックス・ジャペカンガ（ジ
ャペカンガ）［Smilax japecanga（Japecanga）］、ヒ
メナエア・コウルバリル（ジャトバ）［Hymenaea courb
aril（Jatoba）］、アンキエテア・サルタリス（シポー
・スマ）［Anchietea salutaris（Cipo-suma）］、ピプ
タデニア・ペレグリナ（アンジコ）［Piptadenia pereg
rina（Angico）］、ストリフノデンドロン・バルバティ
マオ（バルバティマン）［Stryphnodendron barbatimao
（Barbatimao）］、アルクティウム・ラッパ（バルダ
ナ）［Arctium lappa（Bardana）］、ペリアンドラ・ド
ゥルシス（アルカスズ）［Periandra dulcis（Alcacu
z）］、ユーカリプトゥス・グロブルス（エウカリプ
ト、フトモモ科ユーカリの木）［Eucalyptus globulus
（Eucalipto）］、ミルシア・スファエロカルパ（ペド
ゥラ・ウメ・カアー）［Myrcia sphaerocarpa（Pedra-u
me-caa）］、コッコロバ・ウビフェラ（ウバ・ド・マ
ト）［Coccoloba uvifera（Uva-do-mato）］、シヌス・
アロエイラ（アロエイラ）［Schinus aroeira（Aroeir
a）］、グァズマ・ウルミフォリア（ムタムバ）［Guazu
ma ulmifolia（Mutamba）］、アルクトスタフィロス・
ウバ・ウルシ（ウバウルシナ、ツツジ科ウワウルシ）
［Arctostaphylos uva-ursi（Uva-ursina）］、セスト
ルム・シュード・キナ（クイナ・ド・マト）［Cestrum
pseudo-quina（Quina-do-mato）］、フェラリア・プル
ガンス（ルイバルボ・ド・カンポ）［Ferraria purgans
（Ruibarbo-do-campo）］、アニバ・カネリラ（カスカ
・プレシオサ）［Aniba canelilla（Casca-precios
a）］、アディアンツム・カピッルス・ヴェネリス（ア
ヴェンカ・カベッロ・デ・ヴェヌス）［Adiantum capil
lus-veneris（Avenca-cabello-de-Venus）］、エリスロ
ザイルム・カトゥアーバ（カトゥアーバ）［Erythroxyl
um catuaba（Catuaba）］、ピセコロビウム・トルトゥ
ム（ジュレマ）［Pithecolobium tortum（Jurema）］、
ハマメリス・ヴィルギニアーナ（ハマメリス）［Hamame
lis virginiana（Hamamelis）］、カリニアナ・レガリ
ス（ジェクイティバ・ローサ）［Carinianalegalis（Je
quitiba-rosa）］、フェヴィッレア・トゥリロバータ
（シポー・ジャトバ）［Fevillea trilobata（Cipo-jat
oba）］、クラテッラ・アメリカーナ（リセイラ）［Cur
atella americana（Lixeira）］、ヘディキウム・コロ
ナリウム（ナポレオン）［Hedychium coronarium（Napo
leao)］およびレミジア・フェッルギネア（クイナ・ダ
・セッラ）［Remijia ferruginea（Quina-da-serra）］
などが挙げられる。

【００１１】これら植物の抽出に用いる溶剤としては、
水、メタノールもしくはエタノールなどのアルコール類
またはアセトンなどのケトン類よりなる群から選ばれる
単独または２種以上の溶剤の任意の混合溶剤のいずれで
あってもよいが、抽出物が最終的に食品等に配合される
ことを考慮すると、安全性の点で、水、エタノール、ま
たはこれらの混合溶剤を用いるのが好ましい。

【００１２】抽出の際の植物と溶剤との比率は特に限定
されるものではないが、植物１に対して溶剤２〜１００
０重量倍、特に抽出操作、効率の点で５〜１００重量倍
が好ましい。 また、抽出温度は室温−常圧下での溶剤
の沸点の範囲とするのが便利であり、抽出時間は抽出温
度等によって異なるが、２時間〜２週間の範囲とするの
が好ましい。

【００１３】また、このようにして得られた植物抽出物
は必要に応じて、カラムクロマトグラフィー等に付して
分画物としても良い。具体的には、植物抽出物を少量の
水、メタノール、エタノール等の溶媒あるいはこれらの
混合溶媒に溶解し、セファデックス ＬＨ−２０（ファ
ルマシア社製）、ダイヤイオン ＨＰ２０（三菱化成工
業製）、セパビーズ ＨＰ１ＭＧ（三菱化成工業製）、
トヨパール ＨＷ４０Ｆ（東洋曹達工業製）等のカラム
に吸着させた後、水で十分に洗浄し、メタノール、エタ
ノール、アセトン等の親水性溶媒あるいはこれらの混合
溶媒で溶出させればよい。

【００１４】更に、これらの抽出物や分画物は、これら
から溶媒を除去することによって乾燥物とすることもで
き、保存性や取扱いの容易さからこの状態の物が好まし
い。

【００１５】以上のようにして得られる植物抽出物、若
しくはその分画物またはこれらの乾燥物を用いてヒスタ
ミン遊離抑制剤を調製するには、それらの抽出物等をそ
のままあるいは公知の医薬用担体若しくは化粧品や食品
への添加用の担体と共に製剤化すれば良い。 製剤化に
当っては、２種以上の植物の抽出物等を混合しても良
い。

【００１６】ヒスタミン遊離抑制剤の調製に用いること
のできる医薬用担体としては、特に制限はなく、通常用
いられているものを使用することができるが、好ましい
例としては、デンプン、乳糖、白糖、マンニット、カル
ボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩等の
固形担体；蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エタ
ノール等のアルコール、プロピレングリコール、ポリエ
チレングリコール等の液体担体や各種の動植物油、白色
ワセリン、パラフィン、ロウ等の油性担体等が挙げられ
る。

【００１７】また、ヒスタミン遊離抑制剤の剤型として
は、錠剤、顆粒剤、粉剤およびシロップ剤等の経口剤並
びに座剤および外用剤等の非経口剤、さらには、化粧
品、食品への添加用剤を挙げることができる。

【００１８】本発明のヒスタミン遊離抑制剤は、ヒスタ
ミン遊離抑制作用により、スギ花粉やハウスダスト等に
起因するアレルギー性鼻炎やアレルギー性皮膚炎等のア
レルギー性炎症に起因する疾患およびアレルギー性喘
息、食物アレルギー等のアレルギー性疾患の治療・予防
剤等の医薬として広く利用することが可能であると共
に、ヒアルロニダーゼ阻害活性も併有するため、強力な
ヒアルロン酸分解阻止剤として皮膚や動脈壁、関節腔な
どに含まれるヒアルロン酸含量の低下を抑制し、皮膚の
保湿性および柔軟性を高め、加齢に伴う動脈硬化を予防
し、関節炎の改善などにも寄与するものである。

【００１９】医薬として利用する場合の植物抽出物の投
与量は、使用する植物の種類、生成の程度や、患者の年
齢、症状等により大きく変動するが、一般には、経口投
与の場合、乾燥重量として５〜５００ｍｇ／日の範囲で
ある。

【００２０】また、本発明の食品および化粧品は、その
目的に応じて通常用いられる適宜な成分と前記ヒスタミ
ン遊離抑制剤を配合することにより製造することができ
る。

【００２１】例えば、本発明の食品は、前記ヒスタミン
遊離抑制剤の他に、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトー
ス、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コ
ーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コ
ハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフ
ェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プ
ロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリ
グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソ
ルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸
エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼ
ラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ類、ニコチン酸ア
ミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウ
ム塩類、色素、香料、保存剤等、通常の食品原料として
使用されているものを適宜配合することにより製造さ
れ、飴、チューインガム、牛乳、ヨーグルト、乳清飲
料、乳酸菌飲料、ジュース、飲料、アイスクリーム、プ
ディング、水ようかん等を得ることができる。

【００２２】また、本発明の化粧品は、前記ヒスタミン
遊離抑制剤の他に、植物油等の油脂類、ラノリンやミツ
ロウ等のロウ類、炭化水素類、脂肪酸、高級アルコール
類、エステル類、種々の界面活性剤、色素、香料、ビタ
ミン類、植物・動物抽出成分、紫外線吸収剤、抗酸化
剤、防腐・殺菌剤等、通常の化粧品原料として使用され
ているものを適宜配合して製造することができ、他の抗
炎症・抗アレルギー性化粧品原料、例えば、甘草抽出成
分（特にグリチルレチン酸）、塩酸ジフェンヒドラミ
ン、アズレン、ｄｌ−α−トコフェロール及びその誘導
体、ビタミンＢ₂及びＢ₆などと共に用いることにより、
更にその効果を高めることもできる。

【００２３】更にまた、本発明の化粧品を製造する場合
において、前記ヒスタミン遊離抑制剤とヒアルロン酸等
を併用することにより、保湿効果を一層高めることが出
来る。

【００２４】すなわち、本発明のヒスタミン遊離抑制剤
は、ヒアルロニダ−ゼ阻害活性をも併有するものである
ため、皮膚中のヒアルロン酸の分解を阻止することによ
り間接的に保湿・美肌効果を持つが、ヒアルロン酸を始
めとする他の保湿・美肌性化粧品成分、例えば、エラス
チン、コラーゲン、レシチン、スクワレン、プラセンタ
ーリキッド（胎盤抽出液）、グリセリン類、グリコール
類、発酵代謝産物、乳酸菌培養液、ビタミンＡおよび
Ｃ、コンドロイチン硫酸ナトリウム、２−ピロリドン−
５−カルボン酸ナトリウム（ＰＣＡ−Ｎａ）、バクモン
ドウ粘液多糖類等の植物多糖類などと共に用いることに
より、より一層保湿効果を高めることができる。

【００２５】本発明のヒスタミン遊離抑制剤を配合する
化粧料は、化粧水、化粧クリーム、乳液、ファンデーシ
ョン、口紅、整髪料、ヘアトニック、育毛料等の剤形の
他、歯磨き、洗口液、シャンプー、リンス、入浴剤等の
剤形とすることもできる。

【００２６】本発明の植物は南米等で古くから生薬とし
て用いられているものであり、それらの抽出物やその分
画物等は安全性の点での問題はない。 しかし、食品や
化粧品に配合する場合は、その効果や添加した際の香
り、色調の点から見て、植物抽出物やその分画物の乾燥
重量換算として、０.０００１〜５％の濃度範囲とする
ことが望ましい。

【００２７】

【作用および発明の効果】本発明で用いる植物抽出物は
ヒスタミン遊離抑制剤は、肥満細胞からのヒスタミン遊
離抑制活性と共に強力なヒアルロニダーゼ阻害活性を有
するものである。そして、原料である植物は南米等で古
くから生薬として用いられているものであり、それらの
抽出物等は安全性の点での問題はない。従って、本発明
のヒスタミン遊離抑制剤は抗炎症作用および抗アレルギ
ー作用を有する医薬として有用なものである。

【００２８】また、本発明のヒスタミン遊離抑制剤は、
ヒアルロニダーゼ阻害作用も有するため、皮膚や動脈
壁、関節腔などに含まれるヒアルロン酸含量の低下を抑
制し、皮膚の保湿性および柔軟性を高め、加齢に伴う動
脈硬化を予防、関節炎の改善等の薬剤として利用できる
可能性を有する。

【００２９】更に、このヒスタミン遊離抑制剤を含む食
品を日常的に摂取することにより、風邪に伴う炎症やの
どのはれ、花粉症、せきなどを予防・改善することがで
きる。 同様に、このヒスタミン遊離抑制剤はヒアルロ
ニダーゼ阻害活性をも有するものであるから、これを含
む化粧品の使用により、アレルギー症状や炎症による皮
膚のかゆみ、痛みなどを改善するとともに皮膚に保湿性
を付与することが可能である。

【００３０】

【実施例】次に本発明のヒスタミン遊離抑制剤の製造
法、ヒアルロニダーゼ阻害もしくはヒスタミンの遊離抑
制試験並びに抗炎症剤、抗アレルギー剤、食品および化
粧品の製造に関する実施例を挙げ、本発明を更に詳しく
説明するが、本発明はこれらの実施例になんら制約され
るものではない。

【００３１】実 施 例 １ 植物抽出物の製造：植物の特定の部位の乾燥物１００ｇ
を、１０００ｍｌの５０容量％エタノール中に室温にて
７日間浸し、上澄み液を濾過した。 得られた抽出液を
減圧下濃縮乾固し、乾燥物を得た。 各植物についての
抽出部位及び抽出物の収量は表１に示す通りである。

【００３２】

【００３３】実 施 例 ２ 植物抽出物の製造：表２に示された植物の乾燥物１００
ｇを、１０００ｍｌの５０容量％エタノール中に室温に
て７日間浸し、上澄み液を濾過した。得られた抽出液を
減圧下濃縮乾固し、乾燥物を得た。 各植物の抽出物の
収量も表２に示す。

【００３４】

【００３５】実 施 例 ３ ヒアルロニダーゼ阻害活性の検定（１）：実施例１の表
１に示す植物の抽出物について、そのヒアルロニダーゼ
阻害活性を後記方法により測定した。 その結果を表３
に示す。

【００３６】（ 測 定 法 ）牛睾丸由来のヒアルロニダ
ーゼ（Ｓｉｇｍａ、ＴｙｐｅＩＶ）を用い、コンパウン
ド４８／８０による不活性型酵素の活性化段階の阻害作
用を中心に測定した。 酵素活性は、ヒアルロン酸の加
水分解により生成するＮーアセチルヘキソサミンを還元
末端とする四糖の還元力の増加をＡ₅₈₅で比色定量する
ことにより、測定した（前田有美恵ら：食衛誌、３１
巻、２３３〜２３７頁、１９９０）。

【００３７】すなわち、適量の被験試料を０.１Ｍ 酢酸
緩衝液（ｐＨ４.０）１００μｌに溶かして試験管にと
り、同緩衝液５０μｌに溶かした酵素 ０.１０ｍｇ（１
００ＮＦ ｕｎｉｔｓ）を加え、３７℃で２０分間イン
キュベートする。 次いで、同緩衝液１００μｌに溶か
したコンパウンド４８／８０（５０μｇ）を加え、更に
３７℃で２０分間インキュベートする。 更に、同緩衝
液２５０μｌに溶かしたヒアルロン酸ナトリウム塩（２
００μｇ、微生物由来）を加えて３７℃で４０分間イン
キュベートする。 最後に、０.４ＮのＮａＯＨ １００
μｌを加えて氷冷後、ホウ酸緩衝液（ｐＨ９.１）１０
０μｌを加えて３分間煮沸し、氷冷後、ｐ−ジメチルア
ミノベンズアルデヒド試液３ｍｌを加えて、３７℃で２
０分間インキュベートした後、Ａ₅₈₅を測定した。

【００３８】対照には試料溶液の代わりに上記酢酸緩衝
液を用いた。 また、それぞれのブランクとして、酵素
溶液の代わりに上記酢酸緩衝液を用いた。 阻害活性は
次の式から求められる阻害率で表した。

【００３９】 Ａ： 対照溶液のＡ₅₈₅ Ｂ： 対照溶液のブランクのＡ₅₈₅ Ｃ： 試料溶液のＡ₅₈₅ Ｄ： 試料溶液のブランクのＡ₅₈₅

【００４０】

【００４１】実 施 例 ４ ヒアルロニダーゼ阻害活性の検定（２）：実施例２の表
２に示す植物の抽出物について、実施例３と同様にして
ヒアルロニダーゼ阻害活性を測定した。その結果を表４
に示す。

【００４２】

【００４３】実 施 例 ５ ラット腹腔肥満細胞からのヒスタミン遊離に対する抑制
活性の検定 （１）：実施例１の表１に示す植物の抽出物について、
下記の方法で、そのヒスタミン遊離に対する抑制活性を
測定した。 その結果を表５および表６に示す。

【００４４】（ 試 験 動 物 ）体重２７２〜３４９ｇ
のウイスター系雄性ラット（日本エスエルシー）を、５
日間以上馴化した後、使用した。 温度２０〜２５℃、
湿度４０〜７０％、照明１２時間／日（７時点灯、１９
時消灯）の環境下で飼育した。 飼育中は、固型飼料Ｍ
Ｆ（オリエンタル酵母工業製）と５μｍのフィルターろ
過後、紫外線照射した水道水を自由摂取させた。

【００４５】（ ラット腹腔肥満細胞の単離 ）放血致死
させたラットの腹腔内にＭＣＭ液（１４０ｍＭのＮａＣ
ｌ、２.５ｍＭのＫＣｌ、１.０ｍＭのＣａＣｌ₂、１.２
ｍＭのＭｇＣｌ₂、５ｍＭのグルコースおよび０.１％の
ＢＳＡを含むｐＨ７.１の６.７ｍＭリン酸緩衝液）を１
匹あたり１１ｍｌ注入し、３分間腹部をマッサージして
から腹腔浸出液を回収し、フィコール・グラディエント
（Ficoll gradient ）法により肥満細胞を単離した。得
られた細胞はＭＣＭ液で２回洗浄後、２.５×１０⁴個／
０.５ｍｌ／チューブとなるようにＭＣＭ液に懸濁さ
せ、細胞懸濁液とした。

【００４６】（ ヒスタミン遊離抑制試験 ）２.５×１
０⁴個／０.５ｍｌ／チューブの細胞浮遊液を３７℃で１
０分間プレインキュベートした後、５０％メタノールに
適当濃度で溶解または懸濁させた被験試料液１０μｌを
加えて３７℃で１０分間放置した。 これに、脱顆粒誘
発剤としてコンパウンド４８／８０（２５μｇ／ｍｌ）
１０μｌを加えて３７℃で１０分間反応させた（コンパ
ウンド４８／８０の最終濃度は０.５μｇ／ｍｌ）。反
応後、氷冷したＭＣＭ液 ０.５ｍｌを加え、遠心分離
（４２０×ｇ、５分、４℃）した上清中に遊離されたヒ
スタミン量を、ショア（Ｓｈｏｒｅ）等のＯＰＴ（O-ph
tal-aldehyde）蛍光法（JPET,127,182-186,1959 ）に準
じて、遠心方式汎用自動分析装置（COBAS R FARAII、バ
クスター）にて定量した。 測定された遊離ヒスタミン
量から次式によりヒスタミン遊離抑制率を算出した。

【００４７】 Ｃ：誘発剤を加えない対照の細胞から遊離されるヒスタ
ミン量 Ｒ：誘発剤を加えたときに細胞から遊離されるヒスタミ
ン量 ＳＲ：被験試料を共存させて誘発剤を加えたときに細胞
から遊離されるヒスタミン量

【００４８】 （注）被験試料の反応液中における最終濃度は全て２００μｇ／ｍｌ。

【００４９】 * ＩＣ₈₅；ヒスタミンの遊離を８５％抑制する濃度

【００５０】実 施 例 ６ ラット腹腔肥満細胞からのヒスタミン遊離に対する抑制
活性の検定 （２）：実施例２の表２に示す植物の抽出物について、
下記の方法で、そのヒスタミン遊離に対する抑制活性を
測定した。 その結果を表７に示す。

【００５１】（ 試 験 動 物 ）７日以上順化した９〜
１２週令のウィスター系雄性ラット（日本クレア）を使
用した。 温度２３.５±２℃、湿度５５±１０％、照明
時間１２時間（７時点灯、１９時消灯）の環境下で飼育
した。 飼育中は固形飼料ＣＥ２（日本クレア）と水道
水を自由摂取させた。

【００５２】（ ラットの腹腔肥満細胞の単離 ）放血致
死させたラットの腹腔内に２（V／V）％牛胎児血清（以
下２％ＦＣＳ）含有タイロード（Tyrode）液（ＰＢＳ
（＋）に０.５（W／V）％しょ糖を添加）約１５ｍｌを
注入し、軽く腹壁をマッサージしてから腹腔浸出液を採
取した。さらに同様の操作を１回くりかえした。 この
ようにして得られた腹腔浸出液を４℃、１００ｇ、１０
分間遠心分離して沈澱した細胞を集めた。 これを２ｍ
ｌの２％ＦＣＳ含有タイロード液に懸濁させ、２％ＦＣ
Ｓ含有タイロード液に対してメトリズアミド（metrizam
ide）を２２.５（W／V）％に溶解した溶液に重層し、３
５０ｇ、１５分間、室温で遠心分離して肥満細胞を単離
した。 このようにして得られた肥満細胞は２％ＦＣＳ
含有タイロード液に浮遊させて、４℃、１００ｇ、１０
分間遠心分離を行ない洗浄した。 洗浄を２回行なった
後、２.５×１０⁴個／０.５ｍｌとなるよう２％ＦＣＳ
含有タイロード液に懸濁させた。

【００５３】（ ヒスタミン遊離抑制試験 ）２.５×１
０⁴個／０.５ｍｌ／チューブの細胞浮遊液を３７℃で１
０分間プレインキュベートした後、２５％エタノールに
適当濃度に溶解または懸濁させた被検試料液５μｌを加
えて３７℃で１０分間放置した。これに脱顆粒誘発剤と
してコンパウンド４８／８４溶液（２５μｇ／ｍｌ）１
０μｌを加えて３７℃で２０分間反応させた。

【００５４】反応後、氷冷した２％ＦＣＳ含有タイロー
ド液０.５ｍｌを加え、遠心分離（４℃、１５０ｇ、１
０分）した上澄中のヒスタミンを高速液体クロマトグラ
フィーで分離し、ショアー（Shore）等のＯ−フタルア
ルデヒド蛍光法（ＪＰＥＴ,１２７, １２８〜１８６,
１９５９）に準じて測定した。測定された遊離ヒスタミ
ン量から次式によりヒスタミン遊離抑制率を算出し、Ｉ
Ｃ₅₀（ヒスタミンの遊離を５０％抑制する濃度）を求め
た。

【００５５】 Ｃ ： 誘発剤を加えない対照の細胞から遊離されたヒ
スタミン量 Ｒ ： 誘発剤を加えた時に細胞から遊離されたヒスタ
ミン量 ＳＲ： 被検試料を共存させて誘発剤を加えた時に細胞
から遊離されたヒスタミン量

【００５６】

【００５７】実 施 例 ７ 錠 剤 ：実施例１と同様の方法で得たスミラックス
・ジャペカンガ（ジャペカンガ）抽出物１５０ｇを同量
の乳糖及びステアリン酸マグネシウム５ｇと混合した。
得られた混合物を単発式打錠機にて打錠し、直径１０
ｍｍ、重量３００ｍｇの錠剤を製造した。この錠剤を一
日２錠、一週間服用することにより、花粉症の目のかゆ
みや鼻汁過多等の症状は大幅に軽減された。

【００５８】実 施 例 ８ 顆 粒 剤 ：実施例７で得た錠剤を粉砕、整粒し、篩
別して２０〜５０メッシュの顆粒剤を得た。 実 施 例 ９ ハマメリス・ヴィルギニアーナの大量抽出：実施例のに
方法に準じ、ハマメリス・ヴィルギニアーナ１ｋｇを１
０リットルの５０容量％エタノールで抽出し、抽出物２
０５ｇを得た。

【００５９】実 施 例 １０ 錠 剤：実施例９のハマメリス・ヴィルギニアーナ抽出
物１５０ｇを、同量の乳糖およびステアリン酸マグネシ
ウム５ｇと混合した。 得られた混合物を単発式打錠機
にて打錠し、直径１０ｍｍ、重量３００ｍｇの錠剤を製
造した。

【００６０】実 施 例 １１ 顆 粒 剤 ：実施例１０で得た錠剤を粉砕、整粒し、
篩別して２０〜５０メッシュの顆粒剤を得た。

【００６１】実 施 例 １２ キャンデー：実施例１のアンキエテア・サルタリス（シ
ポー・スマ）抽出物を用い、下記の組成のキャンデーを
製造した。 味は苦みもなく、良好であった。

【００６２】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） グ ラ ニ ュ ー 糖 ５５.０ 水 飴 ４３.５ ク エ ン 酸 １.０ 香 料 ０.２ 色 素 ０.２ アンキエテア・サルタリス抽出物 ０.１

【００６３】実 施 例 １３ チョコレート：実施例１のグァズマ・ウルミフォリア
（ムタムバ）抽出物を用いて下記の組成のチョコレート
を製造した。

【００６４】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） ビターチョコレート １８.０ カカオバター １６.８５ 粉 糖 ４０.０ 全 脂 粉 乳 ２０.０ レ シ チ ン ５.０ 香 料 ０.１ グァズマ・ウルミフォリア抽出物 ０.０５

【００６５】実 施 例 １４ ジ ュ ー ス ：実施例１のスミラックス・ジャペカンガ
（ジャペカンガ）抽出物を用いて下記の組成のジュース
を製造した。 該抽出物がジュースの味や色に影響を与
えることはなかった。

【００６６】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） 冷凍濃縮温州みかん果汁 ５.０ 果糖ブドウ糖液糖 １１.０ ク エ ン 酸 ０.２ Ｌ−アスコルビン酸 ０.０２ 香 料 ０.２ 色 素 ０.１ スミラックス・ジャペカンガ抽出物 ０.２ 水 ８３.２８

【００６７】実 施 例 １５ コーヒー飲料 ：実施例１のグァズマ・ウルミフォリア
（ムタムバ）抽出物を用いて下記の組成のコーヒー飲料
を製造した。

【００６８】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） グ ラ ニ ュ ー 糖 ８.０ 脱 脂 粉 乳 ５.０ カ ラ メ ル ０.２ コーヒー抽出物 ２.０ 香 料 ０.１ ポリグリセリン脂肪酸エステル ０.０５ 食 塩 ０.０５ グァズマ・ウルミフォリア抽出物 ０.１ 水 ８４.５

【００６９】実 施 例 １６ キャンデー：実施例２のカリニアナ・レガリス（ジェク
イティバ・ローサ）抽出物を用い、下記の組成のキャン
デーを製造した。

【００７０】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） グ ラ ニ ュ ー 糖 ５５.０ 水 飴 ４３.５ ク エ ン 酸 １.０ 香 料 ０.２ 色 素 ０.２ カリニアナ・レガリス抽出物 ０.１

【００７１】実 施 例 １７ チョコレート：実施例２のエリスロザイルム・カトゥア
ーバ（カトゥアーバ）抽出物を用いて下記の組成のチョ
コレートを製造した。

【００７２】

【００７３】実 施 例 １８ ジ ュ ー ス ：実施例２のアディアンツム・カピッルス
・ヴェネリス（アヴェンカ・カペッロ・デ・ヴェヌス）
抽出物を用いて下記の組成のジュースを製造した。

【００７４】

【００７５】実 施 例 １９ コーヒー飲料 ：実施例２のカリニアナ・レガリス（ジ
ェクイティバ・ローサ）抽出物を用いて下記の組成のコ
ーヒー飲料を製造した。

【００７６】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） グ ラ ニ ュ ー 糖 ８.０ 脱 脂 粉 乳 ５.０ カ ラ メ ル ０.２ コーヒー抽出物 ２.０ 香 料 ０.１ ポリグリセリン脂肪酸エステル ０.０５ 食 塩 ０.０５ カリニアナ・レガリス抽出物 ０.１ 水 ８４.５

【００７７】実 施 例 ２０ エモリエントクリーム ：実施例１のスミラックス・ジ
ャペカンガ（ジャペカンガ）抽出物を用いて下記の組成
のエモリエントクリームを製造した。

【００７８】

【００７９】実 施 例 ２１ エモリエントローション：実施例１のアンキエテア・サ
ルタリス（シポー・スマ）抽出物を用いて下記の組成の
エモリエントローションを製造した。

【００８０】

【００８１】実 施 例 ２２ シャンプー ：実施例１のグァズマ・ウルミフォリア
（ムタムバ）抽出物を用いて下記の組成のシャンプーを
製造した。

【００８２】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） ラウリルポリオキシエチレン（３モル）硫酸エステル トリエタノールアミン塩（４０％水溶液） ３０.０ ラウリルポリオキシエチレン（３モル）硫酸エステル ナトリウム塩（４０％水溶液） ２０.０ ラウロイルジエタノールアミド ４.０ グァズマ・ウルミフォリア抽出物 ０.１ 精 製 水 ４５.９

【００８３】実 施 例 ２３ 歯 磨 剤 実施例１のスミラックス・ジャペカンガ（ジャペカン
ガ）抽出物を用いて下記の組成の歯磨剤を製造した。

【００８４】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） リン酸カルシウム２水和物 ４２.０ グリセリン １８.０ カラギーナン ０.９ ラウリル硫酸ナトリウム １.２ サッカリンナトリウム ０.１ パラオキシ安息香酸ブチル ０.００５ スミラックス・ジャペカンガ抽出物 ０.０５ 香 料 １.０ 精 製 水 ３６.７４５

【００８５】実 施 例 ２４ エモリエントクリーム：実施例２のピセコロビウム・ト
ルトゥム（ジュレマ）抽出物を用いて下記の組成のエモ
リエントクリームを製造した。

【００８６】

【００８７】実 施 例 ２５ エモリエントローション：実施例２のクラテッラ・アメ
リカーナ（リセイラ）抽出物を用いて下記の組成のエモ
リエントローションを製造した。

【００８８】

【００８９】実 施 例 ２６ シャンプー ：実施例２のハマメリス・ヴィルギニアー
ナ（ハマメリス）抽出物を用いて下記の組成のシャンプ
ーを製造した。

【００９０】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） ラウリルポリオキシエチレン（３モル）硫酸エステル トリエタノールアミン塩（４０％水溶液） ３０.０ ラウリルポリオキシエチレン（３モル）硫酸エステル ナトリウム塩（４０％水溶液） ２０.０ ラウロイルジエタノールアミド ４.０ ハマメリス・ヴィルギニアーナ抽出物 ０.１ 精 製 水 ４５.９

【００９１】実 施 例 ２７ 歯 磨 剤 実施例２のヘディキウム・コロナリウム（ナポレオン）
抽出物を用いて下記の組成の歯磨剤を製造した。

【００９２】 （ 組 成 ） （ 配 合 ％ ） リン酸カルシウム２水和物 ４２.０ グリセリン １８.０ カラギーナン ０.９ ラウリル硫酸ナトリウム １.２ サッカリンナトリウム ０.１ パラオキシ安息香酸ブチル ０.００５ ヘディキウム・コロナリウム抽出物 ０.０５ 香 料 １.０ 精 製 水 ３６.７４５ 以 上

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ｃ１２Ｎ 9/99

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ジャンボサ・ブルガリス（Jambosa vulg
   aris）、ピペル・アドゥンカム（Piper aduncum） 、ア
   ナカルディウム・オクシデンタレ（Anacardium occiden
   tale）、スミラックス・ジャペカンガ（Smilax japecan
   ga）、ヒメナエア・コウルバリル（Hymenaea courbari
   l）、アンキエテア・サルタリス（Anchietea salutari
   s）、ピプタデニア・ペレグリナ（Piptadenia peregrin
   a）、ストリフノデンドロン・バルバティマオ（Stryphn
   odendron barbatimao）、アルクティウム・ラッパ（Arc
   tium lappa）、ペリアンドラ・ドゥルシス（Periandra
   dulcis）、ユーカリプトゥス・グロブルス（Eucalyptus
   globulus）、ミルシア・スファエロカルパ（Myrcia sp
   haerocarpa）、コッコロバ・ウビフェラ（Coccoloba uv
   ifera）、シヌス・アロエイラ（Schinus aroeira）、グ
   ァズマ・ウルミフォリア（Guazuma ulmifolia）、アル
   クトスタフィロス・ウバ・ウルシ（Arctostaphylos uva
   -ursi）、セストルム・シュード・キナ（Cestrum pseud
   o-quina）、フェラリア・プルガンス（Ferraria purgan
   s）、アニバ・カネリラ（Aniba canelilla）、アディア
   ンツム・カピッルス・ヴェネリス（Adiantum capillus
   −veneris）、エリスロザイルム・カトゥアーバ（Eryth
   roxylum catuaba）、ピセコロビウム・トルトゥム（Pit
   hecolobium tortum）、ハマメリス・ヴィルギニアーナ
   （Hamamelis virginiana）、カリニアナ・レガリス（Ca
   riniana legalis）、フェヴィッレア・トゥリロバータ
   （Fevillea trilobata）、クラテッラ・アメリカーナ
   （Curatella americana）、ヘディキウム・コロナリウ
   ム（Hedychium coronarium）およびレミジア・フェッル
   ギネア（Remijia ferruginea）からなる群より選ばれる
   少なくとも１つの植物の抽出物を有効成分とするヒスタ
   ミン遊離抑制剤。
2. 【請求項２】 ヒアルロニダーゼ阻害活性を有する、請
   求項第１項記載のヒスタミン遊離抑制剤。
3. 【請求項３】 抗炎症剤または抗アレルギー剤である請
   求項第１項または第２項記載のヒスタミン遊離抑制剤。
4. 【請求項４】 請求項第１項または第２項記載のヒスタ
   ミン遊離抑制剤を含有する化粧品。
5. 【請求項５】 請求項第１項または第２項記載のヒスタ
   ミン遊離抑制剤を含有する食品。