JPH09301989A

JPH09301989A - 新規抗生物質ポリケトマイシンとその製造方法

Info

Publication number: JPH09301989A
Application number: JP11355396A
Authority: JP
Inventors: Tomio Takeuchi; 富雄竹内; Hironobu Iinuma; 寛信飯沼; Hiroshi Osanawa; 博長縄; Masa Hamada; 雅濱田; Isao Momose; 功百瀬
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Priority date: 1996-05-08
Filing date: 1996-05-08
Publication date: 1997-11-25

Abstract

(57)【要約】【課題】メチシリン耐性菌を含むグラム陽性菌に対す
る抗菌活性および抗腫瘍活性を示す新しい分子骨格を有
する抗生物質を提供する。【解決手段】次式（Ｉ）で表わされるポリケトマイシンが新規抗生物質としてス
トレプトミセス sp.ＭＫ277-ＡＦ１株の培養により得ら
れた。ポリケトマイシンあるいはそれの塩は各種の細菌
に対する抗菌活性と抗腫瘍活性とを有する抗生物質であ
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、抗菌活性と抗腫瘍
活性または抗癌活性とを示す新規抗生物質ポリケトマイ
シン(Polyketomycin)、あるいはこれの塩に関し、また
ポリケトマイシンの製造法に関する。さらに本発明は、
ポリケトマイシンまたはそれの塩を有効成分とする抗菌
剤および抗腫瘍剤に関する。また、本発明は新規抗生物
質ポリケトマイシンを生産する特性を持つ微生物として
ストレプトミセス sp.ＭＫ277-ＡＦ１株を包含する。

【０００２】

【従来の技術】種々な多数の抗菌物質が知られており、
また種々な多数の抗腫瘍性物質が知られている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】細菌感染症の化学療法
において、多剤耐性菌の出現は重大な問題である。従来
知られているまたは使用されている既知の抗菌性化合物
とは、異なる化学構造を有し且つ優れた抗菌活性を示す
新しい化合物の発見または創製をすることは常に望まれ
ており、そのための研究が行われている。また抗腫瘍性
物質は、一般に強い毒性を有するものが多く、その抗腫
瘍剤としての使用に当たって大きな制約となっている。
そこで、毒性が低く且つ新規な化学構造を有する抗腫瘍
性物質を発見または創製することが常に望まれており、
そのための研究が行われている。

【０００４】

【問題点を解決するための手段】本発明者らは、上記の
要望に応えることができる抗菌活性および抗腫瘍活性を
持つ新規な抗生物質を提供することを目的に、従来より
有用な抗生物質の開発と実用化の研究を促進してきた。
その結果、土壌試料から新規な微生物としてストレプト
ミセス属に属する菌株を分離することに成功し、またこ
の菌株が新しい構造骨格を有する抗生物質を生産してい
ることを見い出だした。この新規抗生物質を単離するこ
とに成功し、後記の式（Ｉ）で示される化学構造を有す
ることを確認し、そしてポリケトマイシンと命名した。
更に、この新規抗生物質が薬剤耐性菌（メチシリン耐性
菌等）をふくんだグラム陽性の細菌に抗菌活性を示し、
また癌細胞の増殖に対して抑制活性を示すことを見い出
した。

【０００５】すなわち、第１の本発明においては、次式
（Ｉ）：で表わされる化合物であるポリケトマイシン、あるいは
これの塩が提供される。ポリケトマイシンは、酸性物質
であり、その塩としては、第４級アンモニウム塩などの
有機塩基との塩、あるいは製薬学的に許容できる各種金
属との塩、例えばナトリウムのようなアルカリ金属との
塩があり、これらの塩も上記の抗菌活性と抗腫瘍活性を
有する。

【０００６】次に、抗生物質ポリケトマイシンの理化学
的性状を記載する。Ａ）外観及び性質：橙色粉末、酸性物質Ｂ）融点： 194〜196℃（分解）Ｃ）比旋光度：［α］_D ²⁴ −58.9°（ｃ1.00、メタノ
ール）Ｄ）ＴＬＣのＲｆ値： 0.53 シリカゲル（Art.105715、メルク社製）の薄層クロマト
グラフィーで展開溶媒としてクロロホルム−メタノール
−酢酸(10:1:0.03)で展開して測定した場合Ｅ）マススペクトル(m/z): 865.5（Ｍ＋Ｈ)⁺ 864.3（Ｍ^-）Ｆ）高分解能マススペクトル: 実験値 864.2831
（Ｍ^-）計算値 864.2841 Ｇ）分子式: Ｃ₄₄Ｈ₄₈Ｏ₁₈

【０００７】Ｈ）紫外線吸収スペクトル（i）メタノール溶液中で測定したＵＶ吸収スペクトル
は添付図面の図１に示す。主なピークは次のとおりであ
る。 λｍａｘｎｍ（ε) 208(36300)、243(36200)、281(217
00)、445(5700) （ii）0.01Ｎ NaＯＨ−メタノール溶液中で測定したＵ
Ｖ吸収スペクトルは添付図面の図２に示す。主なピーク
は次のとおりである。 λｍａｘｎｍ（ε) 206(56700)、250(31400)、279(sh.
23200)、569(5000) （iii)0.01ＮＨＣｌ−メタノール溶液中で測定したＵ
Ｖ吸収スペクトルは添付図面の図３に示す。主なピーク
は次のとおりである。 λｍａｘｎｍ（ε) 208(36200)、243(36400)、283(205
00)、444(5700) Ｉ）赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤法）：添付図面
の図４に示す。 νｍａｘ（ｃｍ^-1）3430、2975、2935、1699、1680、16
50、1635、1610、1585、1455、1410、1250、1205、113
0、1055、1000、 858、800 Ｊ）¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣl₃/ＴＭＳ):添付図
面の図５に示す。Ｋ）¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣl₃/ＴＭＳ):添付
図面の図６に示す。さらに、抗生物質ポリケトマイシンの生物学的性状を次
に記載する。

【０００８】Ａ）抗菌活性本発明による抗生物質ポリケトマイシンの各種細菌に対
する最低発育阻止濃度は、次の表１にしめす通りであ
る。この抗菌スペクトルは日本化学療法学会標準法に基
ずき、ミュラーヒントン寒天培地で倍数希釈法により測
定した。

【０００９】

【００１０】Ｂ）癌細胞増殖抑制活性各種の癌細胞を用いて癌細胞の増殖を50％抑制するポリ
ケトマイシンの濃度(ＩＣ₅₀値)を、ＭＴＴ法(「Journal
of Immunological Methods」65巻、55-60頁(1983年)参
照）で測定した。その結果を表２に示す。

【００１１】

【００１２】表１の結果から明らかなように、本発明に
よる抗生物質ポリケトマイシンは、各種の細菌に対して
抗菌活性を有することから抗菌剤として有用である。ま
た、表２の結果から明らかなように、ポリケトマイシン
は各種の癌細胞の増殖を抑制する抗腫瘍活性または抗癌
活性を有するから抗腫瘍剤または抗癌剤として有用であ
る。

【００１３】さらに第２の本発明によれば、ストレプト
ミセス属に属する、前記の式（Ｉ）のポリケトマイシン
の生産菌を培地に培養し、培養物からポリケトマイシン
を採取することを特徴とする、抗生物質ポリケトマイシ
ンの製造法を提供される。

【００１４】第２の本発明の方法で使用できるポリケト
マイシンの生産菌の一例として、ストレプトミセス sp.
ＭＫ277−ＡＦ１株がある。この生産菌は平成６年10
月、微生物研究所において、神奈川県三浦市の土壌より
分離された放線菌で、ＭＫ277−ＡＦ１の菌株番号が付
された微生物である。

【００１５】ＭＫ277−ＡＦ１株の菌学的性状を次に記
載する。１．形態ＭＫ277−ＡＦ１株は、分枝した基生菌糸より３〜８回
転のらせん形成を有する気菌糸を伸長する。成熟した胞
子鎖は10〜50個あるいはそれ以上の円筒形の胞子を連鎖
し、胞子の大きさは約0.5〜0.7 × 0.8〜1.1ミクロンで
ある。なお、胞子の表面は平滑である。輪生枝、菌束
糸、胞子のう及び運動性胞子は認められない。

【００１６】２．各種培地における生育状態色の記載について［］内に示す色の標準は、コンティ
ナー・コーポレーション・オブ・アメリカのカラー・ハ
ーモニー・マニュアル(Container Corporationof Ameri
caのcolor harmony manual）を用いた。

【００１７】（１）シュクロース・硝酸塩寒天培地（27
℃培養）発育はうす茶［3gc, Lt Tan 〜 4gc, Nude Tan］、気菌
糸は着生せず、溶解性色素は認められない。（２）グルコース・アスパラギン寒天培地（27℃培養）発育はうす赤味だいだい［5le, Rust Tan］〜明るい茶
[5pi, Copper Brown]、気菌糸は着生せず、溶解性色素
はピンク〜うす赤を呈する。発育の色及び溶解性色素は
水酸化ナトリウムの添加により青味灰に変化するが、塩
酸による変化は認められない。（３）グリセリン・アスパラギン寒天培地（ISP-培地
５、27℃培養）明るい茶［5pi, Copper Brown］〜灰味赤茶[5pl, Deep
Brown]の発育上に、白の気菌糸をわずかに着生する。溶
解性色素はうす赤茶〜茶を呈する。水酸化ナトリウムの
添加により発育の色は暗い茶に、溶解性色素は青味茶に
変化するが、塩酸による変化は認められない。（４）スターチ・無機塩寒天培地（ISP-培地４、27℃培
養）うすだいだい［3ca, Pearl Pink］〜暗い黄[3pe, Ambe
r]〜明るい茶[4ng, LtBrown]の発育上に、白〜茶白の気
菌糸を綿状に着生する。溶解性色素はかすかに茶色味を
帯びる程度である。（５）チロシン寒天培地（ISP-培地７、27℃培養）うす赤味茶[4lg, Lt Spice Brown］〜灰味赤茶[5ni, Co
coa Brown]〜茶紫[8pl, Burgundy]の発育上に、白の気
菌糸を部分的に着生する。溶解性色素は灰味赤茶〜茶紫
を帯びる。発育の色及び溶解性色素は水酸化ナトリウム
の添加により暗い青味灰に変化するが、塩酸による変化
は認められない。

【００１８】（６）イースト・麦芽寒天培地（ISP-培地
２、27℃培養）発育は明るい茶［4pe, Orange Rust〜5pg, Lt Copper B
rown]、気菌糸は着生せず、溶解性色素はかすかに茶色
味を帯びる。（７）オートミール寒天培地（ISP-培地３、27℃培養）黄だいだい［3pc, Amber〜3nc, Amber］の発育上に、白
の気菌糸を綿状に着生し、溶解性色素はうすだいだいを
帯びる。発育の色及び溶解性色素は水酸化ナトリウムの
添加により茶紫に変化するが、塩酸による変化は認めら
れない。（８）スターチ寒天培地（27℃培養）発育は黄茶［3le, Cinnamon］〜うす茶[4ie, Cork Ta
n]、気菌糸は着生せず、溶解性色素は認められない。（９）ゼラチンの穿刺培養 15％単純ゼラチン培地（20℃培養）で、発育はうす黄〜
うす黄茶、気菌糸は着生せず、溶解性色素は黄茶を帯び
る。グルコース・ペプトン・ゼラチン培地（27℃培養）
の場合、発育はうす黄茶〜黄茶、気菌糸は着生せず、溶
解性色素は暗い茶を呈する。（10）脱脂牛乳（37℃培養）発育はうす黄、気菌糸は着生せず、溶解性色素は茶色味
を帯びる。

【００１９】３．生理的性質（１）生育温度範囲グルコース・アスパラギン寒天培地(グルコース1.0％、
アスパラギン0.05％、リン酸二カリウム0.05％、ひも寒
天3.5％、pH7.0)を用い、10℃、20℃、24℃、27℃、30
℃、37℃、50℃の各温度で試験した結果、10℃、50℃を
除き、そのいずれの温度でも生育する。生育至適温度は
30℃付近と思われる。（２）スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天培
地、ISP−培地４およびスターチ寒天培地、いずれも27
℃培養）スターチ・無機塩寒天培地では培養後３日目頃より、スタ
ーチ寒天培地の場合、培養後５日目頃よりスターチの加
水分解を認め、その作用は中等度〜強い方である。（３）メラニン様色素の生成（トリプトン・イースト・
ブロス、ISP-培地１；ペプトン・イースト・鉄寒天培
地、ISP−培地６；チロシン寒天培地、ISP−培地７；い
ずれも27℃培養）いずれの培地でも陽性である。（４）炭素源の利用性（プリドハム・ゴドリーブ寒天培
地、ISP−培地９、27℃培養）Ｄ−グルコース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース、
Ｄ−フラクトース、シュクロース、イノシトール、ラム
ノース、ラフィノース及びＤ−マンニトールを利用して
発育する。

【００２０】（５）ゼラチンの液化（15％単純ゼラチン
培地、20℃培養；グルコース・ペプトン・ゼラチン培
地、27℃培養） 15％単純ゼラチン培地では、培養後３日目頃よりゼラチ
ンの液化を認めるが、その作用は弱く、21日間の観察で
は完了しなかった。グルコース・ペプトン・ゼラチン培
地の場合、液化性は認められない。（６）脱脂牛乳の凝固、ペプトン化（脱脂牛乳、37℃培
養）培養後５日目頃より凝固状を呈し、ペプトン化が始まる
が、その作用はゆっくりと進行し、21日間の観察では完
了しなかった。（７）硝酸塩の還元反応（0.1％硝酸カリウム含有ペプ
トン水、SP−培地８、27℃培養）陰性である。

【００２１】以上の性状を要約すると、ＭＫ277-ＡＦ１
株は、分枝した基生菌糸より３〜８回転のらせん形成を
有する気菌糸を伸長する。成熟した胞子鎖には10〜50個
あるいはそれ以上の円筒形の胞子を連鎖し、その表面は
平滑である。種々の培地で、発育は明るい茶〜灰味赤茶
を呈する。気菌糸は着生しない場合と、白から茶白の気
菌糸を綿状に着生する場合がある。溶解性色素はうすい
だいだい、ピンクあるいは茶を呈する場合がある。発育
の色及び溶解性色素は、水酸化ナトリウムの添加により
青味灰に変化するが、塩酸による変化は認められない。
生育至適温度は30℃付近である。メラニン様色素の生成
は陽性、スターチの水解性は中等度〜強い方、蛋白分解
力は中等度〜弱い方である。なお、細胞壁に含まれる
２，６−ジアミノピメリン酸はＬＬ−型であった。菌体
成分のメナキノンは、ＭＫ-９（Ｈ８）が主であり、Ｍ
Ｋ-９（Ｈ６）を少量含む。又、リン脂質はＰII型（ホ
スファチジルエタノールアミンを含有し、ホスファチジ
ルコリン及び未知のグルコサミン含有リン脂質を含まな
い）を示した。

【００２２】これらの性状より、ＭＫ277-ＡＦ１株はス
トレプトミセス（Streptomyces）属に属すると考えられ
る。近縁の既知菌種を検索すると、ストレプトミセス・
シンナバリヌス（Streptomyces cinnabarinus）（文
献：International Journal ofSystematic Bacteriolog
y、19巻、416頁、1969年)、ストレプトミセス・フェオ
クロモゲネス（Streptomyces phaeochromogenes)(文
献：International Journalof Systematic Bacteriolog
y、18巻、357頁、1968年)及びストレプトミセス・パリヅ
ス（Streptomyces pallidus)(文献：International Jou
rnal of SystematicBacteriology、22巻、335頁、1972
年）があげられた。そこで上記３種の当研究所保存菌種
とＭＫ277-ＡＦ１株とを実地に比較検討する予定であ
る。現時点ではＭＫ277-ＡＦ１株をストレプトミセス・
エスピー（Streptomyces sp.)ＭＫ277-ＡＦ１株とす
る。なお、ＭＫ277-ＡＦ１株を工業技術院生命工学工業
技術研究所に寄託申請し、平成8年2月16日、FERM P-154
42として受託された。

【００２３】第２の本発明の方法を実地するに当たって
は、ストレプトミセス属に属するポリケトマイシンの生
産菌を栄養培地に接種し、この培地中で培養する。ここ
で用いる栄養培地は、前記の生産菌が資化できる炭素源
と窒素源を栄養成分として含有するものである。その栄
養源としては、微生物の栄養源として通常使用されるも
の、例えば炭素源、窒素源、無機塩などの同化できる栄
養源を使用できる。例えば、ぶとう糖、麦芽糖、糖蜜、
デキストリン、グリセリン、澱粉などの炭水化物や、大
豆油、落花生油などの油脂のごとき炭素源、ならびにペ
プトン、肉エキス、綿実粉、大豆粉、酵母エキス、カゼ
イン、コーン・スターチ・リカー、ＮＺ−アミン、硫酸
アンモニウム、硝酸アンモニウム、塩化アンモニウムな
どの窒素源、さらに燐酸二カリウム、燐酸ナトリウム、
食塩、炭酸カルシウム、硫酸マグネシウム、塩化マンガ
ンなどの無機塩が使用でき、必要により微量金属、例え
ばコバルト、鉄などを添加することができる。栄養源と
しては、その他、抗生物質ポリケトマイシンを生産する
のに使用菌が利用しうるものであればいずれの公知の栄
養源でも使用できる。

【００２４】培地における上記のごとき栄養源の配合割
合は特に制約されるものでなく、広範囲に亘って変える
ことができ、使用するポリケトマイシン生産菌によっ
て、最適の栄養源の組成及び配合割合は、当事者であれ
ば簡単な小規模実験により容易に決定することができ
る。また、上記の栄養源からなる栄養培地は、培養に先
立ち殺菌することができ、この殺菌の前又は後で、培地
のpHを６〜８の範囲、特にpH6.5〜7.5の範囲に調節する
のが有利である。

【００２５】かかる栄養培地でのポリケトマイシン生産
菌の培養は、一般の放線菌による抗生物質の製造におい
て通常使用されている方法に準じて行うことができる。
通常は好気条件下に培養するのが好適であり、通常は攪
拌しながら及び／又は通気しながら行うことができる。
また、培養方法としては静置培養、振とう培養、通気攪
拌をともなう液体培養のいずれも使用可能であるが、液
体培養がポリケトマイシンの大量生産に適している。

【００２６】使用しうる培養温度はポリケトマイシン生
産菌の発育が実質的に阻害されず、該抗生物質を生産し
うる範囲であれば、特に制限されるものではなく、使用
する生産菌に応じて適宜選択できるが、特に好ましいの
は25℃〜30℃の範囲内の温度を挙げることができる。培
養は通常ポリケトマイシンが十分に蓄積するまで継続す
ることができる。その培養時間は培地の組成や培養温
度、使用温度、使用生産菌株などにより異なるが、通常
72〜120時間の培養で目的の抗生物質を得ることができ
る。

【００２７】培養中の新規抗生物質ポリケトマイシンの
蓄積量はスタヒロコッカス・アウレウス・スミスを使用
して、通常の抗生物質の定量に用いられる円筒平板法に
より定量することができる。

【００２８】かくして、培養物中に蓄積されたポリケト
マイシンは、これを培養物から採取する。培養後、必要
により、濾過、遠心分離などのそれ自体公知の分離方法
によって菌体を除去した後、その濾液を有機溶媒、特に
酢酸ブチルなどを用いた溶媒抽出や、吸着やイオン交換
能を利用したクロマトグラフィー、ゲルろ過、向流分配
を利用したクロマトグラフィーを単独でまたは、組み合
わせて使用することにより単離精製して採取することが
できる。吸着やイオン交換能を有するクロマトグラフィ
ー用担体としては、活性炭，シリカゲル，多孔性ポリス
チレン−ジビニルベンゼン樹脂もしくは各種のイオン交
換樹脂を用いることができる。また、分離した菌体から
は、適当な有機溶媒を用いた溶媒抽出法や菌体破砕によ
る溶出法により菌体から目的の抗生物質を抽出し、上記
と同様に単離精製することができる。かくして、前記し
た特性を有する新規抗生物質としてポリケトマイシンが
得られる。

【００２９】さらに、第３の本発明では、前記の式
（Ｉ）で表わされるポリケトマイシンまたはそれの製薬
学的に許容できる塩を有効成分とする抗菌剤が提供され
る。

【００３０】さらに、第４の本発明では、前記の式
（Ｉ）で表わされるポリケトマイシンまたはそれの製薬
学的に許容できる塩を有効成分とする抗腫瘍剤が提供さ
れる。本発明による抗菌剤または抗腫瘍剤においては、
有効成分としてのポリケトマイシンあるいはその塩は製
薬学的に許容できる常用の固体または液体担体、例えば
エタノール、水、デンプン等と混和されている形の組成
物であることができる。また、第５の本発明では、新規
な微生物として、上記の式（Ｉ）のポリケトマイシンを
生産する特性を持つストレプトミセスsp. ＭＫ277-ＡＦ
１株が提供される。

【００３１】

【発明の実施の形態】次に実施例により本発明を更に詳
細に説明するが、本発明は下記の実施例に限定されるも
のではない。

【００３２】実施例１抗生物質ポリケトマイシンの製
造ポテトスターチ２％、グルコース２％、酵母エキス0.5
％、塩化ナトリウム0.25％、トーストソーヤミール２
％、炭酸カリウム0.32％、硫酸銅0.0005％、塩化マンガ
ン0.0005％、硫酸亜鉛0.005％を含む液体培地（pH7.4に
調整）を三角フラスコ（500ml容）に110mlずつ分注し、
常法により120℃で20分滅菌したものに寒天斜面培地に
培養したストレプトミセスsp.ＭＫ277-ＡＦ１株(FERM P
-15442）を接種し、その後30℃で５日間回転振とう培養
した。これにより種母培養液を得た。

【００３３】ポテトスターチ２％、グルコース２％、酵
母エキス 0.5％、塩化ナトリウム0.25％、トーストソー
ヤミール２％、炭酸カリウム0.32％、硫酸銅0.0005％、
塩化マンガン0.0005％、硫酸亜鉛0.005％を含む液体培
地（pH7.4に調整）を三角フラスコ（500ml容）に110ml
ずつ分注し、常法により120℃で20分滅菌後、上記種母
培養液をそれぞれ２mlずつ接種し、27℃で４日間回転振
とう培養した。このようにして得られた培養液を遠心分
離し、菌体を分離した。培養ろ液８リットルは、酢酸ブ
チル８リットルで抽出し、酢酸ブチル層を無水硫酸ナト
リウムにより乾燥した。菌体は、メタノール１リットル
を加え、攪拌後濾過した。さらに、ろ別した菌体にメタ
ノール１リットルを加え、攪拌後に濾過した。このメタ
ノール抽出溶液は減圧下で300mlまで濃縮した。その濃
縮物に水700mlを加え、酢酸ブチルで１リットルで二度
抽出し、酢酸ブチル層は無水硫酸ナトリウムにより乾燥
した。二つの酢酸ブチル層を合わせて減圧下で濃縮乾固
した。

【００３４】得られた残渣を、セファデックスＬＨ-20
(700ml）でのクロマトグラフィーに供しメタノールによ
り溶出した。抗菌活性のある分画を集め減圧下で濃縮乾
固した。この残渣をシリカゲル（Art.105715、メルク社
製）の薄層クロマトグラフィーで展開溶媒としてクロロ
ホルム−メタノール−酢酸（10：１：0.03）で分離精製
すると、橙色粉末28.7mgを得た。これを酢酸ブチル100m
lに溶解し、水100mlを加え１Ｎ−ＨＣｌでpH2.0に調整
し分配した。この酢酸ブチル層を水100mlで洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下で濃縮乾固し
た。さらに乾固物をセファデックスＬＨ−20（200ml）
でのクロマトグラフィーに供しクロロホルム−メタノー
ル（１：１）の混合液で溶出し、分離精製した。

【００３５】ポリケトマイシンが融点194〜196℃（分
解）の橙色粉末として27.9mgの収量で得られた。

【００３６】

【図面の簡単な説明】

【００３７】

【図１】ポリケトマイシンのメタノール溶液中の紫外線
吸収スペクトルである。

【００３８】

【図２】ポリケトマイシンの0.01N NaOH−メタノール溶
液中の紫外線吸収スペクトルである。

【００３９】

【図３】ポリケトマイシン 0.01N HCl−メタノール溶液
中の紫外線吸収スペクトルである。

【００４０】

【図４】ポリケトマイシンのKBr錠剤法で測定した赤外
線吸収スペクトルである。

【００４１】

【図５】ポリケトマイシンの重クロロホルム溶液（内部
標準：トリメチルシラン）にて測定したプロトン核磁気
共鳴スペクトルである。

【００４２】

【図６】ポリケトマイシンの重クロロホルム溶液（内部
標準：トリメチルシラン）にて測定した炭素13核磁気共
鳴スペクトルである。

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【手続補正書】

【提出日】平成９年１月９日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００１４

【補正方法】変更

【補正内容】

【００１４】第２の本発明の方法で使用できるポリケト
マイシンの生産菌の一例として、ストレプトミセス sp.
ＭＫ277−ＡＦ１株がある。この生産菌は平成６年10
月、微生物化学研究所において、神奈川県三浦市の土壌
より分離された放線菌で、ＭＫ277−ＡＦ１の菌株番号
が付された微生物である。

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００２０

【補正方法】変更

【補正内容】

【００２０】（５）ゼラチンの液化（15％単純ゼラチン
培地、20℃培養；グルコース・ペプトン・ゼラチン培
地、27℃培養） 15％単純ゼラチン培地では、培養後３日目頃よりゼラチ
ンの液化を認めるが、その作用は弱く、21日間の観察で
は完了しなかった。グルコース・ペプトン・ゼラチン培
地の場合、液化性は認められない。（６）脱脂牛乳の凝固、ペプトン化（脱脂牛乳、37℃培
養）培養後５日目頃より凝固状を呈し、ペプトン化が始まる
が、その作用はゆっくりと進行し、21日間の観察では完
了しなかった。（７）硝酸塩の還元反応（0.1％硝酸カリウム含有ペプ
トン水、ISP−培地８、27℃培養）陰性である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ１２Ｒ 1:465） (72)発明者濱田雅東京都新宿区内藤町１番地26 秀和レジデンス405号 (72)発明者百瀬功東京都日野市栄町３丁目１番地35号

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】次式(I): で表わされる化合物である抗生物質ポリケトマイシン、
またはそれの塩。
【請求項２】ストレプトミセス属に属する、請求項１
に記載の式（Ｉ）のポリケトマイシンの生産菌を培地に
培養し、培養物からポリケトマイシンを採取することを
特徴とする、抗生物質ポリケトマイシンの製造法。
【請求項３】抗生物質ポリケトマイシン、またはそれ
の塩を有効成分とする抗菌剤。
【請求項４】抗生物質ポリケトマイシン、またはそれ
の塩を有効成分とする抗腫瘍剤。
【請求項５】抗生物質ポリケトマイシンを生産する特
性を持つストレプトミセス sp.ＭＫ277-ＡＦ１株。