JPH09502424A - 安定化製薬性ペプチド組成 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 ここに開示されるものは、患者に投与するための、安定化組成水溶液であって、生物学的活性を持つペプチド、バッファー、4 級アミン型防腐剤ないし消毒剤、および、浸透圧調整剤を含み、かつ、その組成は室温で保存・使用が可能である。バッファーは、組成の pH を 4 と 6 の間に安定化する。好ましいバッファーとしては、クエン酸、および・または、リン酸が、好ましい防腐剤ないし消毒剤としては、塩化ベンザルコニウムがある。この組成は、その中に含むペプチドが、容器表面、特に、ポリマー材料でできた容器の表面に付着するのを防ぐ。

Description

【発明の詳細な説明】 安定化製薬性ペプチド組成 この発明は、（ほぼエイコサペプチドまでの）小型および中型ペプチド、例え ば、デスモプレッシン（1-デアミノ-8-D- アルギニン・バソプレッシン、DDAVP ）のようなペプチドの、鼻腔性、経口性、非経口性投与用の、安定化、製薬組成 水溶液に係わる。 ここで用いる「安定化組成」という用語は、少なくとも一つの小型ないし中型 の生物学的に活性を持つペプチドを含む、治療用途の水溶液を指す。このような 安定化により、この組成は、生物学的活性を失うことなく、室温で長期にわたっ て保存することができる。 相当数の生物学的に活性を持つペプチド、その誘導体、および、類似体（下記 では「ペプチド類」と名づける）が、治療的に有効であることが知られている。 さまざまな理由により、それらは、組成水溶液として、すなわち、既知量のペプ チドを含む、滅菌水溶液として投与されることが多い。 投与されるペプチド類の生物学的活性が極端に高いことがよくある。したがっ て、単回投与には、ごく小量のペプチドが必要とされる。このようなペプチドの 希釈液は一般に、たとえ密封容器に保存しても、室温で長期にわたって安定であ ることはない。治療的に有効なペプチド・ホルモン類似体、デスモプレッシンは 、そのようなペプチドである。その水溶液は、8 ℃を越えない温度に保存しなけ ればならない。より高い温度、例えば、室温で保存すると、加水分解、および・ または、酸化過程により、デスモプレッシンの変性が起こり、しかも、これは、 防腐剤、例えば、クロロブタノール（1,1,1-トリクロロ-2- メチルプロパン-2- ル）の添加によっては防止できない。一方、クロロブタノールは、デスモプレッ シンを、細菌の侵襲からは有効に保護する。 ペプチド類の希釈水溶液に係わるもう一つの問題として、ペプチドの微量が、 溶液の保存されている容器の壁に付着することがある。このようなペプチド溶液 は、通常きわめて希釈度が高いので、ごく小量の付着でも、投与用のペプチド量 の実質的な減少をもたらすことになろう。 小型および中型ペプチド溶液投与において、きわめて魅力的な方法として、液 滴状ないしスプレー状で、鼻粘膜を通じて与えるやり方がある。これは、前のも のより便利で、再現性にも富む。例えば、デスモプレッシンは、0.9% 塩化ナト リウム溶液（生食液）として、このルートを通じて投与できる。 この分野では、各種の鼻腔内スプレー放出装置が知られている。一般に、ペプ チド水溶液は、用量計測性スプレー・ポンプ、例えば、ドイツ、ラドルフツェル 、Erich Pfeiffer KG 製造のものによって投与される。また別のルートとして、 「リニル」と呼ばれる特別設計の、目盛り付きプラスチック・チューブを通じて 行うやり方がある。これを、ペプチドを含む水溶液で部分的に満たす。リニルの 一端を口中に入れ、他側を、好みの鼻孔に入れる。次に、溶液を、噴気によって 鼻孔に放出する。 鼻腔投与用のペプチドは、生物活性が極度に高いことが多いので、単回投与に は、ごく小量のペプチドしか必要でない。一方、この特定の投与形態では、再現 性をよくするために、液体の最低容量が要求されることがある。したがって、鼻 腔投与ペプチド類の有効濃度範囲は、一般にきわめて低い。例えば、鼻腔投与の 場合、デスモプレッシンの単回用量は、通常、10μg と 40 μg の間であり、場 合によって、2.5 μg にも下がり、300 μg にも上がることがある。通常の投与 容量は、100 μl から 400μl である(4 x 100 μl)。このような用量を、普通 、規則的に、例えば 1 日 1 回受容する。 したがって、小型および中型ペプチド類の既知の水溶液、特に、デスモプレッ シン含有水溶液にともなう、前記安定性・保存性問題を克服するのが、この発明 の目的である。 もう一つの目的は、鼻腔、経口、または、非経口投与用ペプチドを含む、安定 化水溶液を提供することであって、これは、室温で、長期にわたって、例えば、 1 年間、中に含まれているペプチドの、部分的ないし全体的変性、または、微生 物汚染の危険なしに都合よく保存できる。 さらにもう一つの目的は、溶液中のペプチドが、容器の壁に付着するのを、そ のために特別に設計した添加剤を外部から投入することなく、防ぐことである。 さらに、さらにもう一つの目的は、生物学的に活性を持つ、小型および中型ペ プチド類の投与によって緩和される疾患や異常状態管理のための、鼻腔ないし液 滴スプレー組成水溶液を提供することである。 この発明は、小型および中型ペプチド類、特にデスモプレッシン投与用の組成 水溶液であり、これは、液中に輸送される生物学的活性成分、例えば、ペプチド 、ペプチド類似体、ペプチド類、および・または、その類似体類の混合物の安定 性を、長期にわたって、室温で維持することができる。この溶液には、バッファ ー、4 級アミン防腐剤または消毒剤、および、浸透圧調整剤が含まれる。 選択的に用いられる 4 級アミン防腐剤または消毒剤は、その名称の由来する 機能の他に、小型および中型ペプチド成分が、容器の壁、特にポリマー材料でで きた容器の壁に付着するのを防ぐという予想外の能力を持っている。 ペプチド、または、ペプチド類似体は、オキシトシンやバソプレッシン、また は、その類似体類とその誘導体類であることが好ましく、例えば、特に好ましい のはデスモプレッシン（以後、「DDAVP 」とも称する）である。その他好ましい ものとして、テリルプレッシン（N-α- トリグリシル-8- リジン）- バソプレッ シン）、アトシバン（(Mpa¹，D-Tyr(Et)²，Thr⁴，Orn⁸)- オキシトシン）、カル ベトシン（(1- デサミノ-1- モノカルバ-2(o- メチル)- チロシン）オキシトシ ン）、および、トリプトレリン [D-Trp⁶]-LHRH がある。 バッファーは、pH を 4.0 と 6.0 の間に維持できるものが好ましい。特に好 ましいのは、約 5.0 の pH である。 ある実施態様では、用いたバッファーは、酢酸／酢酸ナトリウムである。この 発明による安定化ペプチド溶液は、クエン酸、および・または、リン酸を含有す ることが好ましい。この発明による好ましいバッファー系としては、クエン酸／ リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム／リン酸水素ニナトリウム、 および、クエン酸／クエン酸ナトリウムである。特に好ましいのは、クエン酸− リン酸−ナトリウム・イオンを、約 1:3:3 から約 1:1:2 の分子比で含むバッフ ァーである。 4 級アミン防腐剤ないし消毒剤は、塩化ベンザルコニウム、(NR¹R²R³R⁴)+Cl^- であることが好ましい。ただし、ここに、R¹，R² = メチル、R3 = ベンジル、R⁴ = C₈H₁₇ から C₁₈H₃₇ である。この発明による組成は、約 0.05 から約 0.2mg/ ml の濃度の、4 級アミン防腐剤ないし消毒剤を含むのが好ましい。特に好ま しいのは、約 0.1mg/ml の濃度である。 浸透圧調整剤は、塩化ナトリウムであることが好ましい。バッファー成分も、 浸透圧調節に実質的に貢献している。 この発明の好ましい側面として、組成がさらに、一つの粘膜吸収強化剤、例え ば、胆汁塩、マクロゴール類のモノラウリル・エーテル類、リン脂質類、フシジ ン酸誘導体類を含んでいることが好ましい。 この発明による組成の好ましいある実施態様は、0.025mg から 1.5mg の酢酸 デスモプレッシン、1.35 から 1.75mg のクエン酸、2.25 から 2.65mg のリン酸 水素二ナトリウム、0.05 から 0.20mg の塩化ベンザルコニウム、および、全体 溶液に、ヒト血漿の浸透圧に等しい浸透圧を与えるのに十分な量の塩化ナトリウ ムを含んでいる。 この発明の、もう一つの好ましい実施態様においては、小型および中型ペプチ ド類の鼻腔投与によって治療し得る疾患や異常状態管理用の、スプレー用組成水 溶液の使用法についても開示してある。 第 1 図は、この発明によって調製した組成に関する安定性試験の結果をグラ フに表したものである。 次に、この発明を、下記の実験例に基づいて、さらに詳細に説明する。 実施例１ 試験組成の調製 各種防腐剤を含む、鼻腔スプレーまたは液滴組成用酢酸デスモ プレッシン（DDAVP ）を含む、5 種の試験組成を調製した。すなわち、組成 A， B，C，D，E である（第 1 表参照）。各試験標本は、1ml 当り 0.089mg の DDA VP 遊離塩基を含んでおり、第 1 表は、各系において用いたバッファーの種類 を示す。ミリポア（商標）濾過水を溶媒として用いた。 組成 A と B は、この開示にしたがって調製した。組成 C，D，E は、他の防 腐剤の比較試験のために調製した。 NaCl とクロロブタノールを含む、既知の、バッファーの入らないミニリン（ 商標、DDAVP ）の安定性は、密封したガラス容器に保存した場合、冷蔵において 3 年の有効期限を持つ。その期間よりも長期に保存すると、室温では不安定に なる。組成 E は、NaCl とクロロブタノールを含み、かつ、バッファー入り溶液 であることに注意されたい。 実施例２ ペプチド変性検出による安定性試験 実施例１ によって調製した DDAVP 組成を 、10ml のガラス瓶（加水分解等級 1、テフロン・ストッパー付属）に、65℃で 、13 週まで暗黒中で保存した。標本は、1，2，3，5，7，9，11，13 週に採取し 、HPLC｛Varian Star 装置、Lichrospher PR-18 5 μm カラム (50 x 4 mm)、ア セトニトリル／0.0667M リン酸バッファー水溶液 pH 7 の各種混合比による勾配 溶出｝で、DDAVP を分析した。 結果はグラフにして第 1 図に示してあるが、この発明による組成の優れた安 定作用を実証している。第 1 図に含まれる実験データは、下記の第 2 表に示 した、一次速度定数の計算にも使用した。 実施例３ 有効期限の計算 第 1 図の曲線の勾配と、37℃、50℃、60℃で行った同様の保 存試験から、アレニウスの活性エネルギー（E_a）を、組成 A，B，C および D つ いて得た。組成 E は、一段と安定性の低い組成であるので、アレニウス・タイ プの態様を示さなかった。 各組成の DDAVP 全含有量が、25℃、30℃で 10% (t₉₀)減少する保存時間、す なわち、「有効期限」は、E_a から計算して求めた。結果を、第 3 表にまとめ た。 第 3 表が示すように、デスモプレッシンは、組成 A と B において、室温で 長期にわたって保存される。これによって、この発明品が、冷蔵せずに、長期に わたって、保存、使用されることが実証された。 実施例４ デスモプレッシンの鼻腔内摂取比較 24 人の健康な、絶食させた男性被験者に 、スプレーとして（200 μl）、鼻腔内にデスモプレッシン（20μl ）を与えた （ランダム化）。用いたものは、組成 B か、または、クロロブタノールを防腐 剤として含む、バッファーを入れていない市販薬ミニリンであった。血液標本を 継時的に採取し、デスモプレッシン血漿濃度を、12 時間にわたって監視した。 監視は、デスモプレッシン特異的 RIA 血漿定量によって行った（Lundin，S．et al.，Acta Endocrinologica（Copenhagen）108（1985）170-183）。この二つの 組成について、ほぼ同様のデスモプレッシン血漿濃度曲線が認められた。これは 予期しない結果であった。なぜなら、H.A．Batts ら（J．Pharm．Pharmacol．1 989，156-159）は、蛙口蓋モデルにおいて粘膜繊毛輸送速度に及ぼす作用を見た ところ、クロロブタノールと塩化ベンザルコニウムが有意に異なることを観察し ているからである。粘膜繊毛による排出速度は、ペプチドや、その他の鼻腔内に 投与した生物学的活性成分の、比較的遅い鼻腔内摂取に影響を及ぼす。 実施例５ デスモプレッシンの吸収ブロック作用 塩化ベンザルコニウム＋生食液、クロロ ブタノール＋生食液、または、生食液のみを含む、125I （約 10,000 CPM/ml） で標識したデスモプレッシンの滅菌水溶液すべてを、ポリスチレン製、ポリプロ ピレン製、および、ガラス製の試験管中で、周囲温で 24 時間インキュベートし た。 それぞれ塩化ベンザルコニウム、および、クロロブタノールを含む溶液中では 、デスモプレッシンはほとんど吸着を示さないが、プラスチック試験管では、防 腐剤なしの溶液中の約半分量のデスモプレッシンしか回収されなかった。 これまでこの発明のさまざまの特質や実施態様について記載してきたけれども 、この分野に精通したものならば、この発明のさまざまな側面を修飾し、同じ目 的を達成することは可能である。この開示は、そのような修飾は、この発明の精 神と展望の中に含まれると思量する。

【手続補正書】特許法第１８４条の８ 【提出日】１９９５年１月２４日 【補正内容】 請求の範囲（補正部分） １．患者投与用の、安定な組成水溶液であって、オキシトシン、バソプレッシン 、テリルプレッシン、アトシバン、カルベトシン、トリプトレリン、および、そ の類似体とその誘導体からなるグループから選択した、少なくとも一つの生物学 的に活性を持つペプチドを含み、下記のものから成る。 a) 上記生物学的に活性を持つペプチド b) 上記組成の pH を 4.0 と 6.0 の間に維持する、クエン酸、リン酸 、および、クエン酸とリン酸との混合液から成るグループから選択したバッファ ー c) 塩化ベンザルコニウム d) 浸透圧調整剤 ２．請求項 1 による組成であって、ここに、上記バッファーが、上記 pH を約 5.0 に維持する。 ３．請求項 1 または 2 による組成であって、ここに、クエン酸とリン酸から 成る上記バッファー混合液が、クエン酸、リン酸、ナトリウム・イオンの分子比 が、約 1:3:3 から約 1:1:2 となるようにナトリウム・イオンを含む。 ４．請求項 1-3 の内のいずれかによる組成であって、ここに、上記浸透圧調整 剤が塩化ナトリウムである。 ５．請求項 1 による組成であって、ここに、上記投与が経口的である。 ６．請求項 1 による組成であって、ここに、上記投与が非経口的である。 ７．請求項 1-6 の内のいずれかによる組成であって、ここに、上記ペプチドが デスモプレッシンである。 ８．鼻腔投与用の、組成水溶液であって、オキシトシン、バソプレッシン、テリ ルプレッシン、アトシバン、カルベトシン、トリプトレリン、および、その類似 体とその誘導体からなるグループから選択した、少なくとも一つの生物学的に活 性を持つペプチドを含み、下記のものから成る。 a) 上記生物学的に活性を持つペプチド b) 上記組成の pH を 4.0 と 6.0 の間に維持する、クエン酸、リン 酸、および、クエン酸とリン酸との混合液から成るグループから選択したバッフ ァー c) 塩化ベンザルコニウム、および d) 浸透圧調整剤であって、上記組成が、上記生物学的に活性を持つペ プチドを、長期に渡って、室温で、機能的に安定な状態に維持できるようにする 。 ９．請求項 8 の組成であって、ここに、上記ペプチドはデスモプレッシンであ る。 10．請求項 8 または 9 の組成であって、ここに、上記バッフアーが上記 pH を約 5.0 に維持する。 11．請求項 8-10 の内のいずれかの組成であって、ここに、上記バッファーが、 クエン酸、リン酸、ナトリウム・イオンの分子比が、約 1:3:3 から約 1:1:2 な るような、クエン酸とリン酸二水素ナトリウムの混合液から成る。 12．請求項 8-11 の内のいずれかの組成であって、ここに、上記浸透圧調整剤が 塩化ナトリウムであり、上記塩化ナトリウムが、上記組成を、ヒト血漿浸透圧と 適合するのに十分な量として加えられるもの。 13．鼻腔投与用の、安定な組成水溶液であって、下記のものから成る。 a) 0.025mg から 1.5mg の酢酸デスモプレッシン b) 1.35mg から 1.75mg のクエン酸 c) 2.25mg から 2.65mg のリン酸水素二ナトリウム d) 0.05mg から 0.20mg の塩化ベンザルコニウム e) 上記組成に、ヒト血漿の浸透圧とほぼ等しい浸透圧を与えるのに十 分な量の塩化ナトリウム 14．密封容器であって、上記デスモプレッシンの鼻腔投与用に、請求項 13 によ って調製された、安定化スプレー用組成水溶液で満たしたもの。 15．請求項 1 の組成による小型、中型ペプチド投与の作用を受ける疾患および 異常状態の治療法。 16．請求項 9 の組成による小型、中型ペプチド投与の作用を受ける疾患および 異常状態の治療法。 17．請求項 13 の組成による小型、中型ペプチド投与の作用を受ける疾患および 異常状態の治療法。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．患者投与用の、生物学的に活性を持つ少なくとも一つのペプチドの安定な組 成水溶液であって、下記のものから成る。 a) 上記生物学的に活性を持つペプチド、 b) バッファー剤 c) 4 級アミン防腐剤または消毒剤、および d) 浸透圧調整剤 ２．請求項 1 による組成であって、ここに、上記ペプチドが、オキシトシンま たはバソプレッシンである。 ３．請求項 1 による組成であって、ここに、上記ペプチドが、オキシトシン、 バソプレッシン、テリルプレッシン、アトシバン、カルベトシン、トリプトレリ ンから成るグループから選択したペプチドの類似体、または、誘導体である。 ４．請求項 3 による組成であって、ここに、上記類似体がデスモプレッシンで ある。 ５．請求項 1 による組成であって、ここに、上記バッファー剤が、上記組成の pH を 4.0 と 6.0 の間に維持するバッファーである。 ６．請求項 5 による組成であって、ここに、上記バッファーが上記 pH を約 5 .0 に維持する。 ７．請求項 1 による組成であって、ここに、上記バッファー剤が、クエン酸、 リン酸、および、クエン酸とリン酸の混合液から成るグループから選択したバッ ファーから成る。 ８．請求項 7 による組成であって、ここに、クエン酸とリン酸から成る上記バ ッファー混合液が、クエン酸、リン酸、ナトリウム・イオンの分子比が、約 1:3 :3 から約 1:1:2 となるようにナトリウム・イオンを含むもの。 ９．請求項 1 による組成であって、ここに、上記 4 級アミン防腐剤ないし消 毒剤が、下記の構造を持つ塩化ベンザルコニウムである。 (NR¹R²R³R⁴)+Cl^- ただし、ここに、R¹ と R² は共にメチルであり、R³ はベンジルであるが、R⁴ は C₈H₁₇ から C₁₈H₃₇ までのアルキル基であってよい。 10．請求項 1 による組成であって、ここに、上記浸透圧調整剤が塩化ナトリウ ムである。 11．請求項 1 による組成であって、ここに、上記投与が経口的である。 12．請求項 1 による組成であって、ここに、上記投与が非経口的である。 13．生物学的に活性を持つ、鼻腔投与用組成水溶液であって、下記のものから成 る。 a) 一つのペプチド、一つのペプチド類似体、ペプチド類、および・ま たは、ペプチド類似体類の混合物から成るグループから選択した、上記生物学的 活性成分、 b) バッファー剤、 c) 4 級アミン防腐剤または消毒剤、および、 d) 浸透圧調整剤であって、上記組成が、上記生物学的活性成分を、長 期に渡って、室温で、機能的に安定な状態に維持できるようにする。 14．請求項 13 の組成であって、ここに、上記ペプチドがオキシトシンまたはバ ソプレッシンであるもの。 15．請求項 13 の組成であって、ここに、上記ペプチド類似体が、オキシトシン 類似体およびバソプレッシン類似体から成るグループから選ばれる。 16．請求項 15 の組成であって、ここに、上記バソプレッシン類似体がデスモプ レッシンである。 17．請求項 13 による組成であって、ここに、上記バッファー剤が、上記組成の pH を 4.0 から 6.0 の間に維持するバッファーである。 18．請求項 17 による組成であって、ここに、上記バッファーが、上記 pH を約 5.0 に維持する。 19．請求項 13 の組成であって、ここに、上記バッファー剤が、クエン酸、リン 酸、および、クエン酸とリン酸の混合液から成るグループから選択したバッファ ーから成る。 20．請求項 19 の組成であって、ここに、上記バッファーが、クエン酸、リン酸 、ナトリウム・イオンの分子比が、約 1:3:3 から約 1:1:2 となるように、ク エン酸とリン酸水素二ナトリウムの混合液を含む。 21．請求項 13 による組成であって、ここに、上記 4 級アミン防腐剤または消 毒剤が、下記の構造を持つ塩化ベンザルコニウムである。 (NR¹R²R³R⁴)+Cl^- ただし、ここに、R¹ と R² は共にメチルであり、R³ はベンジルであるが、R⁴ は C₈H₁₇ から C₁₈H₃₇ までのアルキル基であってよい。 22．請求項 13 の組成であって、ここに、上記浸透圧調整剤が塩化ナトリウムで あり、上記塩化ナトリウムが、上記組成を、ヒト血漿浸透圧と適合するのに十分 な量として加えられるもの。 23．鼻腔投与用の、安定な組成水溶液であって、次のものから成る。 a) 0.025mg から 1.5mg の酢酸デスモプレッシン b) 1.35mg から 1.75mg のクエン酸 c) 2.25mg から 2.65mg のリン酸水素二ナトリウム d) 0.05mg から 0.20mg の塩化ベンザルコニウム e) 上記組成に、ヒト血漿の浸透圧とほぼ等しい浸透圧を与えるのに十 分な量の塩化ナトリウム 24．密封容器であって、上記デスモプレッシンの鼻腔投与用に、請求項 23 によ って調製された、安定化スプレー用組成水溶液で満たしたもの。 25．請求項 1 の組成による小型、中型ペプチド投与の作用を受ける疾患および 異常状態の治療法。 26．請求項 13 の組成による小型、中型ペプチド投与の作用を受ける疾患および 異常状態の治療法。 27．請求項 23 の組成による小型、中型ペプチド投与の作用を受ける疾患および 異常状態の治療法。