JPH09508705A

JPH09508705A - 自動分析の方法および装置

Info

Publication number: JPH09508705A
Application number: JP8506636A
Authority: JP
Inventors: チヤツプ，バーノン・エル; ロバン，ピーター・イー; キム，ヤング・ラン; ラルー，ロデリツク・ウオルトン; スチユアート，ジヨン・ポール
Original assignee: アボツト・ラボラトリーズ
Priority date: 1994-08-01
Filing date: 1995-07-28
Publication date: 1997-09-02
Also published as: ES2311659T3; AU3271895A; DE69532045D1; EP1356859B1; EP0774113B1; DE69534429T2; ATE252938T1; AU3235095A; ES2180650T3; CA2192835C; ATE403491T1; DE69534429D1; ES2251722T3; EP0810026A1; WO1996004544A1; JP2863511B2; EP1356859A1; DE69527292T2; US5631730A; WO1996004543A1

Abstract

(57)【要約】全血サンプルの分析装置を提供する。本装置は、蛍光サイトメトリ分析装置と一体化した従来型の血液分析装置を備えている。前記２基の分析装置を制御し、前記２基の分析装置からデータを収集、利用し、定量的な分析結果を報告する制御装置が設けてある。全血サンプルの分析方法も提供する。このような方法の一つは、１基の分析装置による血液サンプルに関連したインピーダンスの分析、血液サンプルに関連した光散乱の分析、血液サンプルに関連した蛍光の分析を行う。収集データを利用して、分析結果を報告する。

Description

【発明の詳細な説明】自動分析の方法および装置関連出願の参照本明細書は、「METHOD AND APPARATUS FOR PERFORMING AUTOMATED ANALYSIS（自動化分析の方法および装置）」と題する１９９４年８月１日出願の特許出願明細書第０８/２８３３７９号の部分継続出願である。前記明細書は本明細書の譲受人に譲渡されている。前記明細書の開示を参照によりその全体を本明細書に組み込む。背景本発明は、一般的に粒子分析に関し、詳細には「インピーダンス」分析、「光散乱」分析、「蛍光」分析および流動サイトメトリック（cytometric）法の一体化により自動化血球（bloodcell）分析を実施する方法および装置に関する。また、本発明は、多目的試薬システムおよび全血（wholeblood）サンプルの迅速分析に関する。ヒトの末梢血液は、通常、赤血球（ＲＢＣ）、血小板（ＰＬＴ）、白血球（ＷＢＣ）を含み、これらはすべて、一般に血漿と称する導電性媒体中に浮遊している。血漿は、タンパク質、陰イオン、陽イオンを含んでいる。また、血漿は、血液凝固を促す成分も含む。通常、成人の血液には、１立方ミリメートル当たりＲＢＣが約４，５００，０００個から５，０００，０００個含まれている。成熟したRBCには核がなく、一般に半径約７．５〜８ミクロン、厚さ約１．５〜１．８ミクロンで両面が凹状になった円盤形をしている。ＲＢＣがヘモグロビンを含むため、血液は赤色になる。ヘモグロビンは、酸素および二酸化炭素の運搬を助けるとともに、血液のｐＨを維持する役目を担っている。通常、成人の血液には、１立方ミリメートル当たり血小板が約２００，０００個から４００，０００個含まれている。血小板は、両面が凸状になった多孔質（ cellular）の小さな粒子であり、大きさが平均７〜８ミクロンある。一般に、血小板は、均質なマトリックスに粒状の中央部分が埋め込まれた構造になっている。また、末梢血液には、診断指標として重要な初期成熟レベルの赤血球が含まれている。このような赤血球の例として、網赤血球（reticulocytes）と有核赤血球がある。初期生成段階における赤血球は、主に核から成り、赤芽球（erythroblast）と称される。赤芽球が成熟するにつれて、核は小さくなり、仁を失って（anucleolate）、より球形に近づく。さらに成熟が進むと、核は完全になくなる。未成熟な赤血球は、核を保持しており、有核赤血球（ＮＲＢＣ）と称される。様々な疾病に罹患している患者の状態を把握する上で、これまでＮＲＢＣのカウントが有効であった。ところが、末梢血液中のＮＲＢＣに災いされて、白血球数のカウントが不正確になることが珍しくない。これは、ＮＲＢＣ中に核があるため、ＮＲＢＣと小さな白血球の区別がつきにくいことが一因である。網赤血球は、成熟レベルがＮＲＢＣと成熟したＲＢＣとのちょうど中間にあたる赤血球である。網赤血球は、患者が貧血状態にあるかどうかを判断する手段となる。貧血は、通常、血液からの赤血球の排出速度が、赤血球の補充がつかないほど上昇するか、または赤血球の形成および血液中への放出の速度が低下する結果として起こる。貧血患者の網赤血球カウントの増加は、赤血球が迅速に交代している指標であり、急性失血または溶血状態を示している。通常の人の血液では、ＷＢＣと称される白血球の濃度が、赤血球の濃度よりもはるかに低い。ＷＢＣの正常濃度は、１マイクロリットル当たり約７０００個である。ＷＢＣの大きさは様々であり、その大半は直径が約７．５〜１２．５ミクロンである。ＷＢＣは、ＲＢＣよりも球形に近く、通常、ＲＢＣよりも幾分大きい。一般にＷＢＣは、粒状のものと、非粒状のものとに分類できる。粒状のＷＢＣには、好中球、好酸球、および好塩基球の三つがあり、非粒状のＷＢＣには、単核細胞とリンパ球とがある。これらのＷＢＣを、総称して「五区分(five-partdifferential）」と称し、中でも好中球およびリンパ球が重要である。通常、好中球は、全ＷＢＣの約５０％から６０％を占める。好中球の細胞質には、染色可能な無数の微細粒子が含まれている。一定の条件下で、好中球は血管外に出て分解し、結合組織内に粒子を放出する。この粒子は、ある種の酵素を豊富に含んでおり、この酵素は活性化して人体の防衛機構に関わる。リンパ球は、ヒトのＷＢＣの約３０％を占める。正常なリンパ球の核は、細胞の体積ほぼ全体を占め、したがって、核を取り巻く細胞質は、非常に薄い殻になっている。リンパ球の細胞質はリボ核酸を含み、このため染料に染まる。リンパ球は血管外に出て、結合組織に入り、やはり人体の防衛機構の一部を構成し、人体の免疫反応で主要な役割を果たす。リンパ球には、現在、臨床土重要となっている三つの主要な「サブセット(sub set)」、すなわち、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、および別名「大型粒状リンパ球」あるいはＮＫ細胞と称するナチュラルキラー細胞（Natural Killer cells）がある。各サブセットは、特徴的な細胞表面マーカまたは抗原の有無によって区別される。またＢリンパ球は、表面の免疫性グロブリン（immunoglobulin）濃度か高く、これに対してＴリンパ球には、免疫性グロブリンがほとんど、あるいはまったくない。Ｔリンパ球の特徴は、各種の表面マーカに対抗して抗体が生成される点である。Ｔリンパ球は、表面マーカおよび全体機能によって分類されている。「ヘルパー(helper)」Ｔ細胞は、Ｂ細胞が一定の種類の抗体分子を生成するの助け、またその他のＴ細胞の免疫反応を促進する。調節細胞である「サプレッサ(suppresso r)」Ｔ細胞は、その他のＴ細胞やＢ細胞の反応性を抑制する。サプレッサＴ細胞には、いくつかのサブセットがあり、やはり特徴的な表面マーカによって識別される。血球数のカウント、血球の大きさの測定、血球の分類ができれば、ヒトの健康状態を判断する場合に有用である。例えば、現在、循環ＣＤ４リンパ球（ヘルパーＴ細胞は、細胞の表面にＣＤ４抗原が表現されている）の濃度は、ＨＩＶ感染の指標として最も優れている。ＣＤ４の濃度は、実験的治療への登録についての患者の分類、抗ウィルス治療の開始時期の決定、臨床試験の治療効果のモニタリングに利用される。ＣＤ４リンパ球濃度は、ＨＩＶ感染患者にとって重要であるため、正確に測定することが望ましい。現在の細胞分析技術には、細胞のカウントおよび分類を行う方法が二つある。この二つは、一般に「流動サイトメトリ（flowcytometry)」、「イメージサイトメトリ(imagecytometry)」と呼ばれている。流動サイトメトリ法は、流動セルの感知ゾーンに、１度に一つずつ細胞を通す操作が主な作業であり、患者の試験負荷が重要な尺度となる臨床用途に好適な技法である。その大きな理由は、１秒間当たり分析可能な細胞数が少なくとも１桁大きいからである。流動サイトメトリを組み込んだ計測法は、さらに二つの方法に分けられ、一般に「従来の血液分析法(conventionalhematology)」と「蛍光サイトメトリ(fluor escencecytometry)」とに分類される。一般に従来の血液分析法では、主にインピーダンスおよび光散乱技法により大きさと形状のみによって細胞を識別するのに対して、蛍光サイトメトリでは、大きさおよび形状に加えて、細胞の核酸含有量または表面の抗原あるいはその両者を利用するのが、二つの方法の主な違いである。したがって、蛍光法を利用して、細胞の種類をさらに細かく分類することができる。前記二つの方法の第二の相違点は、従来の血液分析法では、結果が絶対値で与えられるのに対して、蛍光サイトメトリでは、相対値で結果が出ることである。従来の血液分析器では、体積および希釈度が正確であり、したがって、細胞濃度の絶対値、または人の血液１マイクロリットル当たりの細胞数の絶対値が測定できる。一方、蛍光サイトメトリ法では、相対濃度、すなわち、様々な細胞の百分率がわかる。第三の違いは、血液分類法が、一般に自動化されているのに対して、現在一般的に行われている蛍光サイトメトリ法では、サンプル作成やサンプル分析がせいぜい半自動化されている程度である。したがって、蛍光サイトメトリ法は、従来の血液分析法に比べて作業集約度が非常に高い。両方法とも、細胞ごとに分析を行う。よって、全血液の細胞濃度が高いため、各細胞を分離し、流動セル内で感知できるように、分析前に血液サンプルを希釈する必要がある。３０００がある。この装置は、ＡｂｂｏｔｔＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓの前身であるＳｅｑｕｏｉａ−Ｔｕｒｎｅｒが数年は、「インピーダンス」測定により、ＲＢＣおよびＰＬＴのカウントおよび大きさ判定を行い、「吸収」測定によりＲＢＣ（ＭＣＨ）中のヘモグロビン濃度を求め、さらには「光散乱」測定によりＷＢＣおよび五区分のカウントおよび分類を行っている。を行い、細胞のパラメータを測定して試験結果を出す。患者の全血液サンプルが分析装置に供給されるとオペレータによる操作が実質的に不要になるように、サンプル作成は完全に自動化されている。上に述べたように、種々の細胞について正確な「カプル体積、試薬体積、希釈体積を正確に測定している。細胞のカウントは、一般に、１マイクロリットルの血液当たりの「事象(event)」の数ということになる。ここでいう事象とは、ＲＢＣ、ＰＬＴ、ＷＢＣ、およびこれらのクラス、サブクラスである。１などがある。これらの装置では、散乱、インピーダンス、および吸収を組み合わせて使用して細胞を識別、定量している。したがって、前記の装置は、従来の血液分析装置に分類される。一方、蛍光流動サイトメータ（cytometer）では、光散乱による蛍光細胞分析の原理を採用している。このため、一般に、細胞を適当な染料で着色するか、細胞表面の抗原または抗体に蛍光色素の標識（label）をつけ、特定の抗原抗体反応発生の指標とする必要がある。蛍光流動サイトメトリでは、前もって着色または蛍光標識をつけた粒子、通常は細胞を血液その他の生物的液体サンプルに懸濁させた液体を、焦点を絞った一本または複数本の光ビームでサンプル中の個々の粒子を照明する流動セル（flow cell）を介して移動させる。１基または複数基の検出器で、光ビームと、流動セルを通過する標識済み粒子との間の相互作用を検出する。一般に、検出器の一部は、蛍光放出を測定するように設計してあり、その他の検出器は散乱強度またはパルス持続時間を測定する。したがって、流動セルを通過する各粒子は、検出器で測定した放出色、光の強度、その他の特徴、すなわち散乱を軸とする特性空間（featurespace）に写像することができる。特性空間内の、重複がない別々の領域に、サンプル内の様々な粒子を写像することができ、各粒子を特性空間への写像にしたがって分析できることが好ましい。この点で、流動サイトメトリは従来の血液分析装置と異なり、特性空間軸の一部に蛍光放出を含む。上述したように、リンパ球のサブクラスは、健康状態の判断要素であり、したがって、このサブクラスおよびその他のパラメータを正確に測定することが望ましい。既知の血液分析装置および蛍光流動サイトメトリの血液細胞分析能力は、大幅に向上したが、これらの装置には、一定のクラスの細胞についての正確なカウント値を求めるのが容易ではないという問題がある。ＣＤ４の患者の細胞カウントは、このような問題をかかえる一例である。現在の計測方法では、血液分析装置および別の蛍光流動サイトメトリ計測装置で測定した細胞パラメータからＣＤ４の患者の細胞カウントを計算している。この計算では、患者１人について１週間間隔で行ったＣＤ４の絶対カウントを最大100％まで変動させることができる。例えば、1991年、ＯｒｔｈｏＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓＳｙｓｔｅｍｓＩｎｃ．発行のＵｐｄａｔｅ，ＴｅｓｔｉｎｇＩｎＴｈｅＢｌｏｏｄＢａｎｋ,第５巻,No.2の１〜６ページを参照のこと。以下の論文に、現在の方法および装置を使ったＣＤ４のカウントに関する上記以外の問題点が述べられている。・Ｌａｎｃｅｔ、第３４０巻、１９９２年８月２２日、４８５ページ異なる分析装置を利用した場合のＣＤ４カウント結果の変動について述べている。この変動は、リンパ球のカウント結果が異なったために生じたものと思われる。・ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＤｉｓｅａｓｅｓ、１９９０年、第１６１巻、３５６〜３５７ページこのリンパ球濃度の変動によるＣＤ４カウントの変動について述べている。リンパ球濃度の変動によって生じたＣＤ４カウントの変動は、患者の意欲に悪影響を及ぼす。・ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｃｑｕｉｒｅｄＩｍｍｕｎｅＤｅｆｉｃｉｅｎｃｙＳｙｎｄｒｏｍｅｓ、１９９０年、第３巻、Ｎｏ．２、１４４〜１８１ページＨＩＶ陽性被験者と対照被験者について、ＣＤ４カウントが大きく変動したと報じている。ＣＤ４陽性のリンパ球の割合は、比較的一定しているのに対して、ＷＢＣカウントおよびリンパ球であるＷＢＣの割合は大きく変動する。この変動は、標準的な分析方法が必要であることを示している。・ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ、１９８３年８月、第１４巻、Ｎｏ．８、５０９〜５１４ページ自動血液分析装置における様々な誤測定およびその原因について述べている。上記の各参照論文の開示全体を、参照により本明細書に組み込むものとする。手作業によるサンプル作成は、厳密な管理が不可能であり、オペレータの技能に左右されることが、ＣＤ４カウントの変動原因の一つとしてあげられる。例えば、ＣＤ４のカウントを行う従来の方法では、まず手始めに患者から試験管二本分の血液を採取する。一方の試験管は血液分析装置にかけ、リンパ球の総カウント、リンパ球のパーセンテージ、および総ＷＢＣカウントを初めとして、血液サンプルに関するいくつかの測定パラメータまたは計算パラメータあるいはその両者を求める。二本目の試験管の血液サンプルは、蛍光流動サイトメトリ装置にかけて分析する。流動サイトメトリ試験のサンプル作成作業は、手間がかかる作業であり、オペレータの技能に左右される。この作業は、自動化や高精度測定にはなじみにくいものである。流動サイトメトリ装置用のサンプルを作成する場合、ピペットを使い、手作業によりサンプル用試験管から分析用試験管に血液を移す。適切な蛍光色素標識済みモノクロナール（monoclonal）抗体を添加する。次にサンプル／抗体混合物を所定時間、所定温度で保温し、抗体／抗原結合が起こるようにする。保温による作業終了後、ＲＢＣ溶解剤を添加して、サンプル中のＲＢＣを破壊する。溶解作業中はタイミングが重要である。十分な時間だけ溶解反応を持続できない場合には、ＲＢＣがサンプル中に残り、測定値にひずみが出る。溶解反応の継続時間が長すぎる場合は、溶解剤がＷＢＣを侵す場合がある。溶解反応が完全に終了したことを確認した後、サンプルを遠心分離し、洗浄して、溶解したＲＢＣにより残った堆積物を除去する。サンプルが十分に清浄になったことを確認するまで、遠心分離／洗浄作業を数回実施する場合もある。堆積物、すなわち赤血球の「基質(stroma)」は、通常の流動サイトメータの検出動作に干渉する。ここまでで、サンプルにはＷＢＣが含まれるようになっており、抗体は、相補性表面抗原(com plementarysurfaceantigen)を備えた細胞に結合されている。サンプルを固定液に再度懸濁してから、蛍光流動サイトメトリ装置に通す。蛍光流動サイトメトリ装置は、リンパ球サブセットについては、百分率だけを計測する。サンプル作成作業中に何度も手作業による希釈および減容作業を実施するため、正確な測定体積の分離ができないということが、百分率だけしか計測しない少なくとも一つの理由になっている。したがって、蛍光流動サイトメトリ装置は、ＣＤ３（Ｔ細胞マーカ）とＣＤ４（ヘルパーＴマーカ）の両方について陽性なリンパ球の百分率としてＣＤ４陽性ヘルパーＴ細胞を識別する。ＣＤ４のカウントを以下に式により算出する。（リンパ球の百分率／１００）×（ＷＢＣのカウント）＝リンパ球カウント（リンパ球内のヘルパーＴ細胞の百分率／１００）×リンパ球カウント＝ＣＤ４カウントリンパ球のカウントおよびＷＢＣのカウントは、血液分析計測装置により測定し、「リンパ球内のヘルパーＴ細胞の百分率」の値は、流動サイトメータによる散乱および蛍光の写像に基づく補正係数を掛けた後、蛍光装置で測定する。リンパ球サブセットに関してカウント値を計算する現在の方法には、いくつか問題点がある。まず第一に、計算が、それぞれ独自の較正機能および全体分離機能を備えた独立した測定装置で得られた値に基づいている。さらに、異なる計測装置により、試験方法が異なる。血液分析計測装置の測定値が蛍光測定装置の測定値と異なるだけでなく、血液分析装置が異なると、得られる結果も変わることがある。蛍光サイトメトリ試験におけるサンプル作成の自動化の試みがこれまで行われてきたが、部分的にしか成功していない。このようなシステムでは、密度勾配遠心法による、その他の末梢血球からのリンパ球の分離または赤血球の溶解あるいはその両方、遠心分離による赤血球ゴースト（ghost）および細胞堆積物の除去、適切な固定液を含有する等張性（isotonic）生理食塩水に白血球を懸濁することによる残留白血球の形態の保全などのサンプル作成作業を今だにオペレータが行わなければならない。これらの操作を行うには、オペレータが手作業によりサンプルの体積を変化させ、自動機械式分与装置で得られるサンプル体積精度に近い精度をだす必要がある。独立した測定装置で測定を行う現在の技法の問題点としてさらにあげられるのは、試験管二本を満たすのに、比較的多量の血液が必要になることである。これは、採取量が増えるほど、溶血（赤血球の破壊）を起こす可能性が高くなるからである。また、一定の患者からは、試験管二本分の採血を行わないほうが望ましい場合や、採血が不可能な場合がある。白血球の分析では、ＲＢＣをすべて溶解することが望ましい。ＲＢＣの数は、ＷＢＣを約７００から１０００倍上回るため、少数の非溶解赤血球によって白血球のカウントが大幅に狂う場合がある。赤血球の溶解に利用する試薬の中には、保温期間が長すぎて自動臨床分析装置では実用にならないものもある。たとえば、K．Ａ．ＭｕｒｉｈｅａｄがＣｌｉｎｉｃａｌＣｙｔｏｍｅｔｒｙ、Ａｎｎ．N．Y．Ａｃｄ．Ｓｃｉ、第４６８巻、１１３〜１２７ページ（１９８６年）で推奨しているＴｒｉｓ緩衝塩化アンモニウム溶液では、赤血球を溶解するには５分から１０分必要であり、自動化には不向きである。さらに、ある溶解試薬で不完全な溶血を行うと、自動臨床電気光学システムのバックグラウンドカウントが高くなるほどのヘモグロビンおよび粒状物質を含む赤血球基質が生成する場合がある。通常、このような基質が発生すると、分析対象であるＷＢＣを遠心分離によって赤血球の基質から分離する必要があり、この操作は、自動化に試薬システムを採用した場合の制約因子となる。現在使用されている試薬システムでは、固定したＷＢＣを鑑別分析（differen tialanalysis）前に細胞化学的に着色する必要がある。このような試薬システムでは、複数の試薬および保温期間を適当な時期に追加する必要があり、有核赤血球またはリンパ球サブセットの定量には一般的に適用できない場合がある。さらに、最終的に得られたカウントの精度が、試薬の添加、その他、血液サンプルの取り扱い操作の各段階で低下する場合がある。溶解によってＮＲＢＣの核が破壊されないため、従来の血液分析装置による分析で、ＲＢＣの初期段階である有核赤血球ＮＲＢＣが末梢血液から発見された場合、ＮＲＢＣを小さなリンパ球と混同することもありえる。ＮＲＢＣの百分率が比較的低くても、ＲＢＣとＷＢＣとの数の比の影響により、ＷＢＣおよびリンパ球のカウントに大きな誤差がでることがある。こうなると、新生児のサンプルや子供のサンプルでは障害になる。通常、新生児や子供の末梢血液サンプルにはＮＲＢＣが含まれる。このため、実験室では、新生児や子供のサンプルの一部については、手作業によるスライド検査を行う。従来の血液分析装置では、通常のリンパ球散乱クラスタ（cl uster）の展開に注目することにより、前記のサンプルにフラグ（flag）を付けることしかできない。手作業の検査では、有核細胞１００個当たりのＮＲＢＣの数がわかる。この百分率を利用して、以下のように分析装置によるＷＢＣカウントを補正する。補正ＷＢＣカウント＝分析装置のカウント（１−手作業により求めたＮＲＢＣ百分率／１００）ＮＲＢＣのカウントを正確かつ自動的に行う必要があることは明らかである。そのほか、末成熟赤血球の一種として重要なものに、「網赤血球」があり、この赤血球には、通常、検出可能な量のＲＮＡが含まれている。手作業により網赤血球を特定し、その数を数える方法では、染料でＲＮＡを沈殿させる必要がある。着色した血液から塗抹標本（smear）を取り、手作業により顕微鏡で調べる。沈殿させたＲＮＡは、細胞内の点または繊状として現われる。顕微鏡下でＲＢＣを１０００個手作業により数え、網赤血球となるＲＢＣの数を１０で割って網赤血球の百分率を求める。以下の式により、ＲＢＣのカウントから網赤血球のカウントを求める。網赤血球のカウント＝（ＲＢＣのカウント）×（網状赤血球の百分率）／１００手作業によるこの方法の精度と確度は、理想には及ばない。網赤血球特定の可否やカウント技術のばらつきがかなりある。したがって、上に述べた欠陥を解消する細胞分析システムが必要である。発明の概要全血液サンプルを分析する装置を提供する。この装置は、サンプル中の細胞を分離し、識別する自動計測システムであって、蛍光サイトメトリ分析装置と完全に一体化した従来の血液分析装置を備えている。両分析装置は、各分析装置から得られる分析結果を利用する制御装置によって制御し、試験結果の絶対値報告、すなわち定量報告を行う。さらに、全血液サンプルを分析する方法も提供する。このような分析方法には、サンプルに対して従来の血液分析と蛍光サイトメトリ分析の両方を自動的に実施する段階を含む方法もある。データを収集して利用し、適宜、結果を定量報告する。さらに別の実施の形態では、サンプル容器を受け取り、サンプルを吸引して、分与するサンプルハンドラ、多角度光散乱および蛍光信号検出を行うサンプル分析装置、および分析装置を完全に一体化した制御装置を備える自動化計測システムを提供し、この計測システムにより、従来の血液分析結果と蛍光サイトメトリ結果の両方を定量報告できるようにするものである。さらにこの計測システムによれば、一旦、報告メニューから、実施予定の一連の試験を選択すると、必要な場合には順次以上の機能を実行することができ、オペレータが作業に介入する必要がなく、また分析のある段階でサンプルから細胞を分離する必要もない。図面の簡単な説明第１図は、本発明の趣旨にしたがって構成した細胞分析システムのブロック線図である。第２図は、第１図に示した細胞分析システムと併用するソフトウェアサブシステムの実施の形態のブロック線図である。第３図は、第１図に示した細胞分析システムのサンプル処理領域の実施の形態を示す図である。第４図は、第３図に示したサンプル処理領域のさらに詳細な図である。第４Ａ図は、第４図に示したシステムの通気／吸引アセンブリの正面図である。第４Ｂ図は、第４図のシステムに使用する保温プローブアセンブリの見取図である。第５図は、第１図に示した細胞分析システムの液体分与システムの実施の形態を示す図である。第６Ａ図、第６Ｂ図、および第６Ｃ図は、沈殿、洗浄、および吸引時の細胞分析システムの保温プローブを示す図である。第７図は、第１図に示した細胞分析装置の吸引／沈殿システムの実施の形態を示す線図である。第８図は、第１図に示した細胞分析システムの保温移動システムの実施の形態を示す線図である。第９図は、第１図に示した細胞分析システムの網赤血球染料供給システムの実施の形態を示す線図である。第１０Ａ図は、第１図に示した細胞分析システムのインピーダンスサンプル供給システムの実施の形態を示す線図である。図中、バルブは開いた状態になっており、多量のサンプルがポンプ２２０を経由してインピーダンストランスデューサの近傍に移動中である。第１０Ｂ図は、第１０Ａ図に示したインピーダンスサンプル供給システムの線図である。図中、バルブは閉じており、一定量のサンプルが計量され、インピーダンストランスデューサに移動中である。第１１Ａ図は、第１図に示した細胞分析システムの光サンプル供給システムの実施の形態を示す線図である。図中、バルブは開いた状態になっており、多量のサンプルがポンプ２３２を経由して流動セル近傍に移動中である。第１１Ｂ図は、第１１Ａ図に示した光サンプル供給システムの線図である。図中、バルブは閉じた状態になっており、一定量のサンプルを計量し、光流動セルトランスデューサに移動中である。第１２図は、第１図に示した細胞分析システムのＨＧＢサンプル供給システムの実施の形態を示す線図である。第１３Ａ図から第１３Ｆ図は、第１図に示した細胞分析システムの一体自動血液／免疫サンプル処理法の実施の形態を示すタイミング線図である。第１４Ａ図および第１４Ｂ図は、以下の第４節に述べる網赤血球の分離作業の説明用の図である。第１５図は、第１図に示した細胞分析システムの光流動セルトランスデューサの実施の形態を示す線図である。第１６図は、第１５図に示した光流動セルの断面図である。第１７図は、第１図の細胞分析システムのインピーダンストランスデューサの実施の形態を示す線図である。第１８図は、第１図に示した細胞分析システムのＨＧＢトランスデューサの実施の形態を示す線図である。第１９図は、第１図に示した細胞分析システムの光ベンチ（optics bench）の実施の形態を示す線図である。第２０図は、第１９図に示した光ベンチの順方向経路収集システムを示す線図である。第２１図は、第１９図に示した光ベンチの側方散乱収集システムを示す線図である。第２２図は、第１９図に示した光ベンチのコンデンサ(condenser)の線図である。第２３図は、第１９図に示した光ベンチの、流動セルからカソードに至る光線の広がり（ray fan）の線図である。第２４図は、第１９図に示した光ベンチのＰＭＴレンズ構成を示す線図である。第２５図は、第１図に示した細胞分析システムの分析装置モジュールの実施の形態を示すブロック線図である。第２６図は、第２５図に示したデータ収集モジュールの実施の形態を示すブロック線図である。第２７図は、第２５図に示した分析装置モジュールの詳細を示すブロック線図である。第２８図は、第１図に示した細胞分析システムのデータ保存場所を示す線図である。第２９図および第３０図は、第２８図に示したソフトウェアアーキテクチャの実施の形態を示す状態線図である。第３１図は、液体を導入するノズルを備えた装置の全体正面図である。第３２図は、第３１図のノズルの見取図である。第３３図は、第３２図に示したノズルの一部の断面図であり、第３２図に示したコンジットを相互に平行に配設して明瞭化をはかっている。第３４図は、第３２図に示したノズルの一部の断面図であり、液体の導入状態を示す図である。第３５図は、第３４図にほぼ類似した断面図であり、液体の導入状態を示す図である。第３６図は、第３５図にほぼ類似した断面図であり、液体の導入状態を示す図である。第３７図は、本明細書に述べるサンプル作成装置の略図である。第３８図は、第３７図の装置の一部の部分断面図である。第３９図は、第３７図の装置のさらに別の一部の部分断面図である。第４０Ａ図から第４０Ｃ図は、細胞分析システムの実施の形態により得られたＮＲＢＣの報告データを示す図である。第４１Ａ図および第４１Ｂ図は、細胞分析システムの実施の形態により得られたＮＲＢＣの報告データを示す図である。第４２図は、以下の第２節に述べる三重トリガ回路の略ブロック線図である。第４３図は、レーザビームおよび液体流動の構成および相互作用を示す図である。第４４Ａ図から第４４Ｆ図は、第１図の細胞分析システムの実施の形態の一部を示す正面図である。第４５Ａ図から第４５Ｆ図は、細胞分析システムの実施の形態によって得られた報告データを示す図である。第４６図は、細胞分析システムの実施の形態によって得られたＲＢＣ体積ヒストグラムを示す図である。第４７図および第４８図は、細胞分析システムの実施の形態により得られた血小板の撒布図（scattergram）である。第４９Ａ図および第４９Ｂ図は、細胞分析システムの実施の形態により検出した事象区分を示す図である。第５０Ａ図および第５０Ｂ図は、細胞分析システムの実施の形態によって検出した高ＦＬ３細胞のＡＬＬ値を示す図である。第５１Ａ図および第５１Ｂ図は、細胞分析システムの実施の形態で引いた、顆粒球と単核細胞との分割線の例である。第５２Ａ図および第５２Ｂ図は、細胞分析システムの実施の形態により作成したヒストグラムおよび角分割線の例を示す図である。第５３図は、細胞分析システムの実施の形態により得られたＡＬＬヒストグラムおよび分割線の例を示す図である。第５４図は、細胞分析システムの実施の形態によるＩＡＳ値の平均値にＩＡＳ値の標準偏差の２．５倍を加えた値の所で引いた区分線を示す図である。第５５図は、細胞分析システムの実施の形態により作成したリンパ球−基質分離線およびリンパ球−単球分離線からの距離の１／４と３／４の間で引いた区分線を示す図である。第５６図は、細胞分析システムの実施の形態により作成したヒストグラムおよび分割線を示す図である。第５７図は、細胞分析システムの実施の形態により作成した、さらに別のヒストグラムおよび分割線を示す図である。第５８図は、細胞分析システムの実施の形態によって引いた網赤血球の撒布図の例を示す図である。第５９図は、細胞分析システムの実施の形態により引いた網赤血球のヒストグラムの例を示す図である。第６０Ａ図から第６０Ｆ図は、例６に示すデータ処理の例を示す図である。第６１Ａ図から第６１Ｇ図は、細胞分析システムの実施の形態によって集積されたデータの例を示す図である。第６２Ａ図から第６２Ｄ図は、ＣＤ３、ＣＤ４の両方について陽性であるリンパ球分画（fraction）、ＣＤ３、ＣＤ８の両方について陽性であるリンパ球分画、ＣＤ１９について陽性であるリンパ球分画、およびＣＤ３についてのみ陽性であるリンパ球分画の間の相関を示す図である。第６３Ａ図から第６３Ｆ図は、第１３節Ｆに述べるバルブおよびその機能を示す表である。好ましい実施の形態の詳細な説明本発明の実施の形態は、分析装置システムおよび液体サンプルの分析方法を含む。一般に、このような自動化計測システムは、制御装置および蛍光サイトメータと完全に一体化された従来の血液分析装置を備えている。計測システムは、細胞の識別および分類を行うことができ、血液分析装置で収集したデータを蛍光サイトメータで自動的に利用してサンプルの処理、分析およびサンプル中の細胞の分類を行い、定量的な結果と定性的な結果を報告する。本明細書で開示する自動測定システムでは、一つの分析装置プラットフォーム（platform）上で従来の血液分析と蛍光サイトメトリとを組み合わせて実施する。本発明以前には、従来の血液分析と蛍光サイトメトリとを組み合わせることは不可能であった。このようにして従来の血液分析と蛍光サイトメトリとを組み合わせることは、双方にとって好都合である。蛍光サイトメトリによって得られる情報は、完全な自動化および絶対濃度の採用により向上する。血液分析によって得られる情報は、熱量測定、インピーダンス、および多角光散乱の技術に蛍光サイトメトリを追加することによってより向上し、すぐれた血液分析、および現在、手作業または独立した分析装置で行っている試験の完全自動化が可能となる。本明細書による自動化には、サンプル、すなわち全血、尿、唾液などを一度装置に導入してしまうと、オペレータはサンプル作成作業やサンプル分析作業に介入する必要がないという特徴がある。さらに、サンプルの取り扱い、処理、および分析の手順および機能は、オペレータが選択した試験にしたがって、測定装置が自動的に実施する。各初期試験サンプルに関連したデータ、その他の情報については、計測器の制御装置によりモニタリング、収集、および処理が行われる。一般に、本発明の実施の形態は、自動血液分析装置と、流動サイトメトリ分析装置とを備え、この流動サイトメトリ分析装置は、分析装置の監視および制御、分析装置からのデータ収集および分析結果の報告を行う制御装置と一体化されている。例示するように、分析装置と制御装置とを一体化してあるので、オペレータは、全血サンプルに関するデータを制御装置に入力することができる。制御装置により、オペレータは、サンプル、一般的には全血サンプルに対して行う一連の試験を選択する。オペレータは、集中サンプル取り扱い領域、すなわち処理領域にある総合分析装置（integratedanalyzer）に全血サンプルをかける。制御装置により分析装置が起動し、制御装置の指示にしたがって自動的に全血サンプルの分析を行う。制御装置は、分析装置から得られたデータを利用して分析結果を算出し、オペレータに対して分析結果を報告する。全血サンプルを総合分析装置に導入した後は、オペレータが分析作業を行う必要はない点に注意されたい。好ましい実施の形態では、全血サンプルの作成が完全に自動化されているので、従来の血液分析試験が最初に行われ、続いて保温サンプル試験が行われる。分析装置は制御装置と一体化されているため、制御装置は、血液分析装置と、流動サイトメトリ分析装置の両方からデータを受け取る。したがって、制御装置は、両装置の患者の血液分析結果を組み合わせてオペレータに報告することができる。さらに、希釈、サンプル作成、および分析の精度が高く、これらの作業を自動的に繰り返し行うことができるため、絶対濃度も報告可能である。オペレータが測定装置のプログラムを行い、サンプルを装置に導入した後は、測定装置だけがサンプルに触れることになるので、人為的ミスは完全に払拭されている。本発明の具体的な実施の形態については、詳細な説明を行い内容を明らかにするが、その他の実施の形態も可能であることを銘記されたい。また、記載した実施の形態の要素を適宜組み合わせることもできる。１．システムの概要第１図は、細胞分析システム６０のブロック線図である。このシステム６０は、分析装置モジュール６４、データステーション（data station）ジュール６８、および圧縮空気ユニット７２を備えている。分析装置モジュール６４は、ＨＤＬＣ（高レベルデータリンク）プロトコルを実行するシリアルデータリンク(lin k)７６により、データステーションモジュール６８と作動可能に接続されている。圧縮空気ユニット７２は、シリアルデータリンク８４および管路ネットワーク８０により、分析装置モジュール６４と作動可能に接続されている。分析装置モジュール６４が行う作業としては、サンプル、希釈液、および試薬の吸引、サンプルの希釈、データの測定、収集、データステーションモジュール６８への測定データの送信、試薬の管理、不要物の廃棄がある。典型的な分析装置モジュール６４が備えている要素としては、専用電源、インピーダンストランスデューサ、ＨＧＢトランスデューサ、光流動セルトランスデューサ（光散乱および蛍光）、光検出装置、電子装置、試薬槽、フルイディクス（fluidics）システム、血液分析試験および蛍光サイトメトリ試験用の全自動総合サンプルプロセッサ、保温システムまたは冷却システムあるいはその両方などがある。代表的な分析装置モジュールは、Ｍｏｔｏｒｏｌａ製６８３０２型マイクロコンピュータなどを含み、分析装置６４の機械要素の制御および分析装置のフローシーケンスの実行を行う。圧縮空気ユニット７２は、液体を分析装置モジュール６４に移動する空気源を内蔵している。圧縮空気ユニット７２は、シリアルデータリンク８４を介して分析装置モジュール６４から指示を受ける。データステーションモジュール６８は、分析装置モジュール６４の全般的制御を行い、測定データを有意味な試験結果に変換し、測定データおよび試験結果を保存するとともに、報告値をプリントし、オフラインのホストコンピュータ（図示せず）と双方向の通信を行う。代表的なデータステーションモジュール６８の構成要素には、８０３８６型または８０４８６型のマイクロコンピュータ、カラーディスプレイ、３．５インチディスクドライブ、少なくとも５４０メガバイトのハードディスク、パソコン型キーボード、ポインティング装置、およびＬＡＮ接続などがある。データステーション６８は、ＲＡＭ、ＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、ＳＲＡＭなどのメモリを含み、測定データの操作、パラメータの計算、およびヒストグラム、撒布図、その他の多次元プロットを含め、各種フォーマットによる計算結果の報告を行えるだけのソフトウェアアルゴリズムを備えている。２．迅速溶解多目的試薬システム細胞分析システム６０では、白血球（ＷＢＣ）や有核赤血球（ＮＲＢＣ）を初めとする有核末梢血球の迅速な分析に適した多目的試薬システムを採用している。多目的試薬システムは、ほぼ完全かつ迅速に赤血球を溶解すると同時に、白血球の構造およびリンパ球表面抗原の抗原性を実質上保存する。多目的試薬システムについては、本出願の譲受人が所有する１９９４年８月２９日出願の「ＭｕｌｔｉｐｕｒｐｏｓｅＲｅａｇｅｎｔＳｙｓｔｅｍＦｏｒＲａｐｉｄＬｙｓｉｓｏｆＷｈｏｌｅＢｌｏｏｄＳａｍｐｌｅｓ（全血サンプルの迅速溶解を目的とした多目的試薬システム）」と題する米国特許出願第０８／２９７６６２号に詳細な記載がある。この出願の開示全体を、参照により本明細書に組み込む。多目的試薬システムの一つの実施の形態は、１リットル当たり約３〜約７グラムの非第四アンモニウム塩、炭素原子１個ないし４個を備えた脂肪族アルデヒド（aliphatic aldehyde）約０．０４〜約０．１重量体積％（すなわち、グラム／１００ｍｌ）、脂肪族アルデヒドに対してほぼ不活性な非リン酸塩緩衝液約１０〜２０ｍＭ、および水を含む。試薬システムのｐＨは、約５．５〜約７．５の範囲にあり、試薬システムの浸透圧モル濃度（osmolality）は、約１６０から約３１０（ｍＯｓｍ／Ｌ）である。試薬システムの屈折率は生理食塩水と同じであり、約１．３３３から約１．３３６の範囲にあることが好ましい。非リン酸塩緩衝液は、脂肪酸アルデヒドに対して不活性である。すなわち、非リン酸塩緩衝液は脂肪族アルデヒドと反応しない。したがって、一般に、非リン酸塩緩衝液は一級アミノ基を含有しないはずである。多目的試薬システムのさらに別の実施の形態は、塩化アンモニウム約１３５ｍＭ、ホルムアルデヒド約０．０７５体積％、酢酸塩緩衝液約２０ｍＭ、重炭酸カリウム約１０ｍＭ、サポニン（saponin）約０．０１重量体積％（すなわち、グラム／１００ｍｌ）などを含む。試薬システムのｐＨは、約６．２に調整し、試薬システムの浸透圧モル濃度は、約２６７ないし約２７０ｍＯｓｍ／Ｌに調整する。白血球の鑑別カウント、有核赤血球、リンパ球の免疫表現型(immunophenotypi ng)の自動決定には多目的試薬システムを使用する。有核末梢全血球の迅速分析法は手順として、前記多目的試薬システムと抗凝固化(anticoagulated)全血サンプルとを混合（血液を１０倍から１００倍に希釈）する段階、温度２５〜４６℃ において希釈液と血液との混合物を少なくとも１０秒間撹拌する段階、および本発明による自動化細胞分析システムにより有核末梢血球を分析する段階を含む。末梢白血球の鑑別分析で多目的試薬システムを使用する方法は、試薬１種類により赤血球の溶解と白血球の固定とを並行して迅速に行う方法であり、この方法では、白血球が光散乱特性を維持する。一般に、細胞は光学的な観測チャンバを通過する。このチャンバでは、所定の角度で各細胞が吸収または散乱した光の種類を光電測定により記録する。多目的試薬システムの最初の構成要素は、非第四アンモニウム塩である。ジアンモニウム塩およびトリアンモニウム塩は使用しないことが好ましい。各種モノアンモニウム塩、特にハロゲン化塩を、１リットル当たり約３グラムから約７グラム使用することができ、好ましくは１リットル当たり約５グラムとする。このような非第四アンモニウム塩の例としては、ＮＨ₄Ｘがある。式中、Ｘはハロゲン元素を示す。例えば、ＮＨ₄Ｃｌなどが非第四アンモニウム塩に当たる。多目的試薬システムの第二の構成要素として、短鎖脂肪族アルデヒドがある。このような脂肪族アルデヒドは、炭素原子を１個から４個有することが好ましい。代表的なアルデヒドとしては、ホルムアルデヒドおよびポリマのパラホルムアルデヒドがある。比と濃度が適切な場合、アルデヒドは、非第四モノアンモニウム塩および緩衝液と一体となって、迅速かつほぼ完全に赤血球を溶解する。さらに、アルデヒドは、白血球を固定し、白血球の薄膜をほぼ完全に保護する。ホルムアルデヒド、またこれに匹敵するアルデヒドの含有量は、約０．０４〜約０．１０体積％、好ましくは０．０８〜０．１体積％である。多目的試薬システムの第三の構成要素は、非リン酸塩緩衝液であり、この液は試薬システムの構成要素であるアルデヒドに対してほぼ不活性である。したがって、緩衝液は、一次アミノ基を含有しない。緩衝液は、有効緩衝力がｐＨ約６．０から約７．５、浸透圧モル濃度が約２３０から約３１０（ｍＯｓｍ／Ｌ）となるのがよい。効果的な有機緩衝液の例としては、酢酸塩緩衝液、琥珀酸塩緩衝液、マレイン酸塩緩衝液、およびクエン酸塩緩衝液などがある。効果的な生物緩衝液の例としては、２−（Ｎ−モルホリン）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）緩衝液、３−（Ｎ−モルホリン）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）緩衝液、Ｎ−（２−ヒドロキシル）ピペラジン−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸）ＨＥＰＥＳ緩衝液などがある。酢酸塩緩衝液、またはその他の適当な緩衝液の濃度は、約１０ｍＭから約２０ｍＭ、好ましくは約２０ｍＭである。多目的血液希釈液の選択可能成分として、表面活性剤がある。表面活性剤としては、サポニンが好ましく、これはｑｕｉｌｌａｊａの木の皮などの抽出源から分離され、パウダとして製品化されている植物抽出物である。製品化されているサポニンの化学的純度は、ロットごとに異なるが、サポニンは第四アンモニウム塩よりも赤血球に対して選択的に作用する傾向が強い。サポニンなどの表面活性剤の含有量は約１０〜約２００ｍｇ／Ｌ、好ましくは約１００ｍｇ／Ｌである。サポニンは、多目的試薬システムのその他の成分と一体となって、全血中の赤血球をほぼ完全に溶解する。通常の血液サンプルの赤血球部分は、周囲温度で約２０秒以内に溶解される。ところが、溶解が困難な血液サンプル（例えば、嬰児、腎臓透析患者、多発性骨髄腫患者、糖尿病患者、尿毒症患者などから採取した血液サンプル）は、試薬システムとともに最長約２０秒、約３８℃から約４０℃の温度に保ち、完全に赤血球を溶解する必要がある。血液サンプルを多目的試薬システムとあわせて、この程度の温度に保温しても、白血球の薄膜が効果的に保護され、リンパ球表面の抗原の働きが維持される。一方、サポニンだけを赤血球の溶解に使用した場合、上記の濃度の約１０倍から２０倍の濃度で使用する必要がある。このような濃度になると、白血球が損傷を受ける可能性があるため、試薬の溶解作用を素早く抑制して白血球の構造を保護しなければならない。多目的試薬システムの構成成分が一体となって、赤血球を溶解すると同時に白血球を穏やかに固定するのが、この試薬システムの実施の形態の特徴である。したがって、比較的長い保温時間でも、白血球はほぼ完全に保護される。実際、例えば慢性リンパ球白血病患者などに見られる、損傷しやすい白血球が、最長約２０分の保温期間中、多目的試薬システム内で安定化される。多目的試薬システムの任意の追加成分としては、アルカリ塩があり、重炭酸塩の一価のアルカリ塩が好ましい。重炭酸塩の一価のアルカリ塩は、希釈液の不可欠な要素ではないが、このアルカリ塩を希釈液に添加すると、試薬システムの赤血球溶解性を低下させることなく浸透圧モル濃度を高めることができる。その他多数の化合物、例えば、塩化ナトリウム緩衝液、塩化カリウム緩衝液、リン酸塩緩衝液などは、試薬システムの浸透圧モル濃度を上昇させるのに使用した場合、試薬システムの溶解性を低下させる。重炭酸塩の代表的な一価のアルカリ塩には、重炭酸カリウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸リチウムなどがある。重炭酸カリウム、その他のアルカリ重炭酸塩の含有量は、約０．００５〜約０．０１５重量体積％、好ましくは、約０．０１重量体積％である。多目的試薬システムの、さらに別の任意成分として、血小板抗凝集（anti-clu mping）剤がある。例えば、エチレンジアミン四酢酸塩（ＥＤＴＡ）を試薬システムに添加してサンプル／試薬混合物内での血小板の凝集を弱めることができる。ＥＤＴＡ四ナトリウム、またはその他のＥＤＴＡ塩の含有量は、１リットル当たり約２０〜約２００ｍｇ、好ましくは、１リットル当たり約１００ｍｇである。多目的試薬システムのさらに別の実施の形態では、リンパ球の部分母集団（su bpopulation）の定量分析についても配慮している。多目的試薬システムまたは血液希釈液を添加する前に、（特定のリンパ球表面抗原を対象とした）フルオロクロム共役モノクロナール（fluorochrome-conjugated monoclonal）抗体を全血サンプルと混合して、リンパ球の下位分類を行う。血液サンプルに添加した標識済み抗体部分の濃度は、個々の抗体製剤によって異なるが、一般に、市販の抗体製剤については、血液の体積の１／２から１／１０である。試薬システムを添加し、赤血球を溶解した後、リンパ球− 抗体反応の生成物を自動流動サイトメトリシステムにかけて分析する。当技術分野で一般的になっている遠心分離および洗浄により、溶解済み細胞からリンパ球を「分離」する必要はない。本明細書に開示する試薬システムは、イソチオシアン酸フルオレッセン(fluor escein isothiocyanate)（ＦＩＴＣ）およびフィコエリトリン(phycoerythrin) （ＰＥ）など、抗体にフルオロクロム標識を付ける蛍光マーカを「抑制(quench) 」することはない。リンパ球の下位分類は、ＡＩＤＳなどの疾病の治療における診断手段となっている。リンパ球の部分母集団や単球や好中球など、その他の白血球部分の表面要素や特性を把握することと併せて、血球母集団に付着した表面マーカを識別できる能力が重要である。３．有核赤血球の識別と試薬細胞分析システム６０では、先に述べた迅速溶解試薬システムなど、溶解試薬による独自の三重トリガ法(triple triggeringmethod)を利用した、全血サンプル中のＷＢＣ／ＤｉｆｆおよびＮＲＢＣの自動同時分析法を採用している。１９９４年１２月１５日出願の「ＭｅｔｈｏｄｆｏｒＲａｐｉｄａｎｄＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＮｕｃｌｅａｔｅｄＲｅｄＢｌｏｏｄＣｅｌｌｓ（有核赤血球の迅速同時分析法）」と題する米国特許出願第０８／３５６９３２号に記載されている前記方法によれば、ＮＲＢＣを含む全血サンプルからＮＲＢＣの正確なカウントおよびＷＢＣ／Ｄｉｆｆデータを同時に求めることが可能になる。米国特許出願第０８／３５６９３２号の内容をすべて参照により本明細書に組み込むものとする。ＮＲＢＣ法の要点は、堆積物（蛍光および非蛍光堆積物）から発生する信号を三重トリガ法によって阻止し、ＡＬＬトリガ以下でＦＬ３トリガ以上の信号を識別し、ＮＲＢＣとしてカウントすることができる点である。したがって、蛍光核堆積物の影響がほとんどない正確なＮＲＢＣカウントを求めることができる。本発明の方法を利用すれば、損傷を受けやすい芽細胞（blast cell）および死細胞（非発芽可能細胞）も検出することができる。三重トリガ法では、ＮＲＢＣの裸核を染色する適切な核染料を添加した血液希釈液と血液サンプルとを混合することによって、ＷＢＣ／ＤｉｆｆおよびＮＲＢＣのカウントを同時に行うことが可能である。前記の血液希釈液は、迅速にＲＢＣを分解し、ＷＢＣを保護する。このような希釈液については、上に述べた。照明を施した光流動セルに、一度にほぼ細胞１個ずつの割合で希釈液／サンプル混合物を通す。この操作により、細胞が照明光を散乱し、染色されている核は蛍光を発する。散乱光信号および蛍光信号は既知の手段で検出する。検出信号の処理に三重トリガ法を併用して、ＷＢＣ、ＷＢＣ／Ｄｉｆｆ、およびＮＲＢＣの識別および定量を行うことができる。三重トリガ法の他に類を見ない特徴は、溶解済みの網赤血球から出たＲＮＡ、ハウエル−ジョリー小体(HowellJollyBody)、網状血小板、大型血小板、ＷＢＣと巨核球の断片（Megakaryocytic fragment）から出たＤＮＡ、パラサイト（par asite）、ＲＢＣの断片など、その他の細胞堆積物の干渉を受けずに、ＷＢＣ／Ｄｉｆｆ／ＮＲＢＣの自動同時分析を正確、迅速に行える点である。三重トリガ法によれば、ＮＲＢＣとして特定された信号からＷＢＣ／Ｄｉｆｆ分析前にＷＢＣ信号全体を差し引くことにより、ＮＲＢＣを含む血液サンプル中のＷＢＣ／Ｄｉｆｆ分析を正確に行うことができる。ＮＲＢＣを染色するには、染料が１種類だけ必要である。ＷＢＣの下位分類の光散乱特性の違いにより、ＷＢＣ／Ｄｉｆｆ分析を行うことができる。ＮＲＢＣ法では、軸光損失(Axial Light Loss)（ＡＬＬ）、中間角散乱(Inter mediate Angle Scatter)（ＩＡＳ）、赤色蛍光（ＦＬ３）の３次元空間内において、独自の三重トリガ法により、土記の目的をすべて達成する。ＮＲＢＣ法を行うには、順方向中間角散乱（ＩＡＳ）３８４と、微小角順方向散乱（ＳＡＳ）または軸光損失（ＡＬＬ、別名、順方向吸光(forward extinctio n)）３８２とを測定するために、１基または複数基の検出器３８０（第１９図、第２０図、および第２１図）を順方向光路に配置することが好ましい。レーザビームの前方を通過し、フォトダイオードによって検出される細胞に起因する光エネルギーの減少が、通常、ＡＬＬである。光損失は、一般に散乱が原因で起こり、その定義は、「レーザビーム内を細胞が通過するために生じる、レーザビームの光路内の検出器に到達する光エネルギーの減少」である（一般にＡＬＬは、約０°ないし約１°の角度で検出される）。一方、微小角順方向散乱（ＳＡＳ）は、レーザビームを通過する細胞による散乱によって、入射レーザビームの外側（ただし、１°ないし３°の微小角の範囲内）の検出器に達する光エネルギーである。レーザビームが検出器に進入しないようにするには、一般に、ビームストップを設ける。ＡＬＬ測定システムは、レーザ照明の入射円錐内の光を集光するのに対して、微小角散乱システムは、前記円錐外の光を集光する。ＡＬＬ測定システムでは、対象とする信号が、定常状態のレーザ信号から差し引かれる負の信号であるのに対して、微小角順方向散乱測定の信号は、非常に低い背景光レベルにおける微小な正の信号である。中間角順方向散乱（ＩＡＳ）は、微小角順方向散乱に類似しているが、光が入射レーザビームから大きな角度で散乱される点が異なる。さらに具体的に述べると、ＩＡＳは、レーザビームの入射線すなわち中心線から約３°ないし１０°のリング内で散乱される光に関係している。好ましい実施の形態では、レーザの軸から水平方向約０．３°未満、垂直方向約１．２°末満の角度の範囲内でＡＬＬが集光され、レーザの軸から約３°ないし約１０°の角度でＩＡＳが集光される。ＮＲＢＣの細胞質が完全に溶解されるため、核が染色されやすくなり、そのため、ＮＲＢＣを効果的かつ迅速に染色して正確な検出およびカウントを行うのに、きわめて濃度の低い染料で済む点が、本明細書に開示するシステムのその他の技術的特徴である。このため、ＮＲＢＣ検出で、Ｓ／Ｎ比を１００以上という高い値にすることができる。このシステムが、迅速にＷＢＣ／Ｄｉｆｆ／ＮＲＢＣの同時分析を行うのに必要な活性染料の濃度は、わずかに１ないし２μg／ｍｌであり、従来の技術に比べて少なくとも１／５０の濃度になっている。本発明で使用する活性染料（死細胞または損傷細胞だけを染色する核染料）は、核酸と結合しない場合、吸光率が比較的高く、蛍光強度が低い活性染料である。活性染料のスペクトル特性、すなわち、最大吸光（ＥＸ）（ｎｍ）／最大放出（ＥＭ）（ｎｍ）は、本システムで使用するレーザ光源に適合していなければならない。本明細書に開示するシステムの活性染料は、以下の特性を備えていることが望ましい。吸光率が高い。量子収量が高い。核酸との結合性が高い。核酸と結合しない場合の蛍光強度が低い。スペクトル特性と光源との適合性（例えば、アルゴンレーザ光源で最大ＥＸが〜４８８ｎｍ、最大ＥＭが〜６３０ｎｍ）本明細書に開示するシステムで適当な光源と併用するのに適した核染料は多数ある。本明細書で述べるシステムに使用できる市販染料としては、ＹＯＹＯ−１、ＹＯＹＯ−３、ＴＯＴＯ−１、ＴＯＴＯ−３、ＢＯ−ＰＲＯ−１、ＹＯ−ＰＲＯ−１、ＴＯ−ＰＲＯ−１、その他種々の染料がある。最大ＥＸが異なる染料が、Ｈｅ−Ｎｅランプ、キセノンランプ、水銀ランプなど、適切な光源により活性化できることは、当業者にとって周知の事実である。市販の染料でアルゴンレーザと併用できる適当な染料には、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）、臭化エチジウム（ＥＢｒ）、エチジウムホモダイマ−１（ＥｔｈＤ −１）、エチジウムホモダイマ−２（ＥｔｈＤ−２）、ジエチレントリアミン（ＤＴＡ）がある。ＮＲＢＣ法のある用途では、ＰＩを生体染料として使用する。サンプル吸入プローブで、等張性溶解試薬、約８５０マイクロリットルが入ったＷＢＣカップ１３８に全血サンプルの一部、約２５マイクロリットルを移す。上に述べた溶解試薬を用いて、血液サンプルの赤血球分画およびＮＲＢＣの細胞質を溶解し、ＮＲＢＣの核を露出させる。この試薬システムの特徴は、多目的を達成する１試薬／１操作段階の作業を実現できることである。この試薬は、損傷しやすいすべての白血球の構造を保護できる程度に作用が穏やかであるとともに、赤血球をすべて効果的に溶解する。白血球の構造保護と赤血球の溶解という二つの目標を、溶解時間の延長が必要になる場合もあるヘモグロビン異常のサンプル中でも達成できる。三重トリガ法と併用する溶解剤の組成とは無関係に、この試薬は、低濃度の生体核染料をさらに含むか、または低濃度の生体核染料と結合しており、この染料は、末梢血液中に存在するＮＲＢＣに効果的な標識付けを行う。本明細書で述べる分析装置と併用するために、屈折率が、ほぼ０．１％未満の誤差でシース（sh eath）溶液の屈折率と一致するように溶解作用を調整することが好ましい。通常、溶解試薬とサンプルの混合液は、ＷＢＣカップ１３８に約１１秒間だけ入れておく。混合物をＷＢＣカップ内で溶解し、４２°±３℃で混合する。この時点で、ＷＢＣカップの内容物をパイプで光流動セル１７０に直接導き、検出を行う。細胞の流れが流動セル１７０を通過し、溶解剤の添加により希釈されて、レーザに照射された単一体積（volumesingle）のファイルを希釈液／シース溶液に囲まれたサンプル流の層流となって通過すると同時に、測定が始まる。ここで、軸光損失（ＡＬＬ）および中間角散乱（ＩＡＳ）を検出する複合フォトダイオード３８０と、赤色蛍光を検出するフォトマルチプライア（photomulti plier）管と、ＡＬＬ、ＩＡＳ、およびＦＬ３（赤色蛍光）で構成される三次元特性空間にあり、第２図に示した独自の三重トリガ回路によって細胞の存在が検出される。三重トリガ回路では、ＡＮＤ／ＯＲ論理により、デジタル化信号の適合性の判定を行う。適合していると判断された信号は、ＩＡＳトリガよりも大きく、さらにはＡＬＬトリガまたはＦＬ３トリガのいずれか一方よりも大きくなっている必要がある。この独自のトリガ回路と、バランスのとれた固定剤を含む溶解特性とを組み合わせると、露出したＮＲＢＣ核を短時間で染色し、その数を正確に数え、さらにはＷＢＣの鑑別細胞カウントから除外することができ、この場合にＤＮＡの断片、ＲＢＣの基質、および血小板などの背景に起因する、蛍光、非蛍光両方の一般的な干渉を受けることがない。以上のようにしてトリガした細胞が、前記の照明領域内を通過する際、検出器３８０、４００、４０１、および４０４でパルスが発生する。このパルスをフィルタにかけ、増幅し、デジタル化し、さらにＡＬＬ、ＩＡＳ、ＦＬ３、ＰＳＳ（偏光側方散乱）、およびＤＳＳ（復偏光側方散乱）から成る対応５次元特性空間にリストモード（list mode）で保存する。流動セル１７０による通常のカウント時間は、１０秒である。通常のＷＢＣカウント７０００個／血液容量１マイクロリットルの場合、先に述べた流量および希釈比において得られる事象カウント率は５０００となる。カウントが低いサンプルでは、このカウント時間を自動的に延長して、測定の統計データを向上させることができる。測定時間の終了時に、サンプルの流れをパイプで排出し、プローブの洗浄、乾燥を行って、次のサンプル測定に備える。ＡＬＬ、ＩＡＳ、ＦＬ３、ＰＳＳ、およびＤＳＳより成る前記特性空間のリストモードデータにアルゴリズムを適用し、３０秒未満の処理時間で以下の種類の細胞のカウントまたはフラグ付けあるいはその両方を行う。以下で説明するように、ＡＬＬ信号およびＩＡＳ信号は、ＷＢＣ／Ｄｉｆｆ分析を行う目的で検出、収集し、染色済みＮＲＢＣ核から生成するＦＬ３信号は、ＮＲＢＣ分析を目的として検出、収集する。第４２図に示す三重トリガ回路は、ＡＮＤ／ＯＲ論理を利用して、前記の信号がデジタル化に適しているかどうかを判断する。ＩＡＳトリガよりも大きく、さらにはＡＬＬトリガまたはＦＬ３トリガのいずれか一方よりも大きくなければ、デジタル化に適した信号だとは判断されない。様々な構成要素および第４２図で識別した発生信号または利用信号は、以下の標識に対応している。９００−ＡＬＬ電圧コンパレータ９０２−ＡＬＬ信号９０４−ＡＬＬしきい電圧（Ｖｔｈ１）９０６−ＡＬＬ電圧コンパレータ出力９１０−ＦＬ３信号９１２−ＦＬ３しきい電圧（Ｖｔｈ２）９１４−ＦＬ３電圧コンパレータ９１６−ＦＬ３電圧コンパレータ出力９１８−ＩＡＳ信号９２０−ＩＡＳしきい電圧（Ｖｔｈ３）９２２−ＩＡＳ電圧コンパレータ９２４−ＩＡＳ電圧コンパレータ出力９２６−ＯＲゲート９２８−ＯＲゲート出力９３０−ＡＮＤゲート９３２−有効トリガ出力各チャンネルから生成するリアルタイム信号は、電圧コンパレータの入力端子にある。電圧コンパレータ９００、９１４、および９２２は、「＋入力」（９０２、９１０、および９１８）を「−入力」（９０４、９１２、および９２０）および合成出力（９０６、９１６、および９２４）と比較する機能を果たす。「＋入力」の電圧が「−入力」よりも高い場合は、出力が高くなる。「＋入力」の電圧が「−入力」よりも低い場合は、出力が低くなる。しきい電圧は、システムのパラメータによって決まる独立の電圧である。コンパレータ９００および９１４の出力は、ＯＲゲート９２６に入力され、その結果、ＯＲゲート出力９２８が発生する。ＯＲゲートは、入力を比較する機能を果たす。入力の一方、または双方が高い場合、出力も高くなる。ＯＲゲート９２８の出力およびコンパレータ９２２および９２４の出力は、ＡＮＤゲート９３０に入力される。ＡＮＤゲートは、入力を比較し、やはり有効トリガ出力である出力９３２を生成する働きをする。両方の入力が高い場合に限って、出力は高くなる。ＩＡＳ信号９１８がしきい電圧９２０よりも大きく、ＡＬＬ信号９０２がしきい電圧９０４より大きいか、またはＦＬ３信号９１０がしきい電圧９１２より大きいか、あるいはＡＬＬ信号９０２、ＦＬ３信号９１０ともしきい電圧９０４、９１２よりそれぞれ大きい場合に限り、有効トリガ出力９３２が高くなる。上記のトリガ回路を利用して、ＮＲＢＣは、先に述べた三次元空間内に独自にクラスタ（cluster）を形成する（第４０Ａ図から第４０Ｃ図、第４１Ａ図、および第４１Ｂ図を参照）。このＮＲＢＣは、光ＷＢＣ鑑別分析中に簡単に数を数えることができ、しかもＷＢＣのカウントから的確に除外できる。このようにして、ＷＢＣ１００個当たりのＮＲＢＣのカウント、および血液１μｌ中の絶対ＮＲＢＣ数が報告される。したがって、ＮＲＢＣの数がＷＢＣの総数から差し引かれ、血液サンプル中にＮＲＢＣが存在する場合でも、ＷＢＣの正確なカウントおよび鑑別分析を行うことができる。ＤＮＡの断片、ＲＢＣの基質、血小板、ハウエル−ジョリー小体、好塩基性斑点（BasophilicStippling）、溶解網赤血球から出たＲＮＡ、ＷＢＣおよび巨核球の断片から出たＤＮＡに起因する蛍光および非蛍光の背景ノイズは、ほぼ排除される。染色したＮＲＢＣの核は、本明細書に開示する（ＡＬＬ、ＩＡＳ、ＦＬ３上の）三重トリガ法により、各種背景ノイズ信号から分離される。ＮＲＢＣ核から生成し、ＡＬＬとＦＬ３との関係を表わすグラフ上でＦＬ３トリガ以上のＦＬ３＋信号だけが、ＮＲＢＣとしてのカウントの対象となる（第４０Ａ図から第４０Ｃ図、第４１Ａ図、および第４１Ｂ図）。４．網赤血球法と試薬安定した水性試薬成分を利用して網赤血球の検出およびカウントを行うのが、細胞分析システム６０の特徴の一つである。この試薬は、網赤血球を染色することができる非対称シアニン（cyanine）染料と、イミダゾール緩衝液、４−（２ −ヒドロキシル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（「ヘペス(Hepes)」）緩衝液、ビス（２−ヒドロキシル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（「ビス− トリス(Bis-Tris」）緩衝液、トリスヒドロキシルメチルアミノメタン（「トリス(Tris)」）緩衝液から選択し、１価または２価のアルカリ塩で浸透圧モル濃度を約２３０から約３４０（ｍＯｓｍ／Ｌ）に調整した、ｐＨ約６．０から８．０の緩衝液約２０ｍＭから約５０ｍＭと、薄膜への浸透を促進し、等張性水溶液中のシアニン染料を安定させる非イオン性表面活性剤（表面活性剤に応じて約５ｍｇ／ｄｌから約１．０ｇ／ｄｌ）とを含む。染料は、ＤＮＡやＲＮＡと結合した場合に、周期的に置換され、強力な蛍光を発することが好ましい。試薬は、周期的置換非対称シアニン染料、約０．１μｇ／ｍｌから約０．３μｇ／ｍｌを含むことがさらに好ましい。網赤血球およびＣＢＣ差を迅速かつ連続的に検出し、計数を行う方法では、本発明に試薬システムを利用している。このような方法では、保温段階を別に設ける必要がないという特徴がある。最小、１０秒から６０秒の保温時間があれば十分である。本明細書に開示する方法および試薬は、１９９５年４月２１日出願の米国特許出願第０８／４２６４０８号、標題「網赤血球の迅速分析の構成および方法（ＣｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄＭｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅＲａｐｉｄＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＲｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅｓ）」の主題になっている。この出願は、本発明の譲受人の所有にかかる。参照により、前記出願の内容をすべて本明細書に組み込むものとする。前記の方法によれば、全血サンプル中の網赤血球の数を数え上げると同時に、サンプルの独立したアリコート（aliquot）を区別して、全血球（ＣＢＣ）分析を行うことができる。この方法は、サンプルの網赤血球アリコートを染色試薬と結合させながら、サンプルの一つまたは複数のアリコートを自動分析装置内の様々な位置に導いて分析および区別を行う段階を含む。試薬／網赤血球アリコートを組み合わせて、自動分析装置６０の光流動セル１７０に導く。次に、試薬／網赤血球アリコートを、照明を施した感知ゾーン３００に、ほぼ一度に細胞一つずつの割合で通し、蛍光および光の事象の散乱を発生させる。この事象を検出し、前記サンプル中に存在する網赤血球の数を事象から求める。試薬システムを併用できる非対称染料は、以下の特性を備えている。１．最大吸収：４８８＋２０ｎｍ２．核酸との結合性が高い。３．量子収量が高い。：≧０．１４．モル吸光係数：≧１０，０００５．ＲＮＡおよびＤＮＡとの結合時の蛍光増加：≧２０６．薄膜透過率：＜２分通常、本明細書で開示する水性試薬および網赤血球カウント法は、水性環境では非常に不安定である。しかし、本明細書に開示する試薬の組成によれば、完成した試薬の安定性および貯蔵寿命が向上する。試薬システムの好ましい実施の形態では、成分として、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）の専売染料であるＳｙｂｒ１１を約０．０５〜０．５μｇ／ｍｌ、イミダゾール緩衝液を約２０ｍＭ〜５０ｍＭ、Ｎ，Ｎ−ビス（３−Ｄ−グルコンアミドプロピル）コルアミド３００（５−クロロ−２−メチル−４−イソシアゾリン−３−オン（one）＋２ −メチル−４−イソシアゾリン−３−オン）を約０．０２〜０．０５５％含む。１Ｎの塩酸でｐＨを約６．８〜７．２に調整し、塩化ナトリウムで浸透圧モル濃度を約２７０〜３１０（ｍＯｓｍ／Ｌ）に調整する。試薬システムの主成分は染料である。試薬システムの主要成分となるような染料としては、参照により本明細書に組み込んだ「CYCLIC-SUBSTITUTED UNSYMMETR IC DYES（環式置換非対称染料）」と題するＷＯ９４／２４２１３号に開示されている非対称シアニン染料などがある。さらに、本発明で使用する染料は、ＤＮＡやＲＮＡとの結合時に強力な蛍光を発する。このような有用な染料は、ＲＮＡおよびＤＮＡとの結合性および量子収量が高くなければならない。本明細書で開示し、特許請求を行う特性を示す各種非対称シアニン染料を、試薬システムの主成分として使用できるものと思われる。このような染料の例としては、やはりＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．（米国オレゴン州Ｅｕｇｅｎｅ）（ＭＰＩ）から市販されているＳｙｂｒｌｌ、Ｓｙｂｒ１４、Ｓｙｂｒ１６などがあるが、これに限定されるものではない。Ｓｙｔｏ１２など、その他の非対称シアニン染料もＭＰＩから市販され、本発明を実施するのに有用である。Ｓｙｔｏ１２は、中性の非対称シアニン染料であり、ピリジン環構造またはキノリン環構造に至るメチン橋に結合された置換ベンザゾリム環構造を含む。試薬システムの成分としては、その他に、ｐＫａが約６．０〜８．０で、（ＲＮＡやＤＮＡを染色するのに）必要な、水溶液中のシアニン染料濃度を長時間維持することができる緩衝液がある。このような緩衝液は、シアニン染料や、シアニン染料を安定させるために本発明で使用する非イオン性表面活性剤と反応してはならない。代表的な緩衝液としては、イミダゾール、ヘペス、ビス−トリス、トリスなどがある。試薬システムのさらに別の成分として、非イオン性表面活性剤がある。使用する表面活性剤の種類、または非イオン性表面活性剤の組み合わせにより、その濃度は約５ｍｇ／ｄｌから約１ｇ／ｄｌとなる。表面活性剤は、シアニン染料の細胞膜への浸透速度（３０秒以内）を増大させるものと考えられる。さらに、等張性水溶液中のシアニン染料の溶解度および安定性も、表面活性剤によって増大する。ただし、このような表面活性剤は、低濃度であっても、沈殿したり、シアニン染料と反応したり、ＲＢＣを溶解することがあってはならない。このような表面活性剤の例としては、ＢＩＧＣＨＡＰ、ｎ−ドデシル−Ｄ−マルトシド、ポリオキシプロピレン−ポリオキシエチレンブロシル−Ｄ−マルトシド、デカノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−ドデシル−Ｄ −グルコピラノシド、およびｎ−デシル−Ｄ−グルコピラノシドなどがある。試薬システムのさらに別の成分として、試薬の浸透圧モル濃度を約２３０（ｍＯｓｍ／Ｌ）から約３４０（ｍＯｓｍ／Ｌ）に調整し、網赤血球を含む赤血球や白血球の溶解を防止する１価または２価のアルカリ塩がある。このような塩は、シアニン染料と反応したり、溶液中に沈殿したりしてはならない。塩の例としては、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＬｉＣｌ、ＣａＣｌ₂、ＭｇＣｌ₂、ＺｎＣｌ₂、その他がある。任意の成分として、試薬内の細菌の生育を防止する保存料がある。このような保存料により、細胞や、染色済み細胞の光散乱特性や蛍光放出特性が変化してはならない。保存料の例としウムアジド、その他がある。しかし、本発明を実施する方法は、一般に、全血サンプルを試薬と混合して網赤血球のＲＮＡを染色する段階と、照明を施した光流動セルに、ほぼ一度に細胞１個の割合で混合物を通す段階と、混合物の光散乱と放出蛍光を検出する段階と、サンプル／試薬混合物を独立した保温段階にかける或は保温期間をかけることなくサンプル中の網赤血球の量を判定する段階とを備えている。上に述べた複数パラメータ血液分析装置で、全血サンプルを分析して網赤血球の百分率および絶対カウントを求めるには、サンプル吸引プローブにより、希釈液／シース溶液（等張性食塩水）約７８５６μｌが入ったＲＢＣカップ１３４に全血サンプル約１８．７５μｌを加えて、液体を混合する。希釈したサンプルを、次にシース付きインピーダンスアパチャ１７４に移動し、電気的にサンプル中の絶対ＲＢＣカウントを求める。標準時間で、希釈サンプル約２００μｌを、本明細書に開示する試薬が６００μｌ入ったＲｅｔｉｃカップ１３６に移し、カップ内でサンプルを混合する。作成した（混合）サンプルを、次にシース付光流動セル１７０に移して検出を行う。細胞の流れが、後述する希釈液−シース溶液に囲まれたサンプル層流となって、ほぼ一度に細胞１個の割合で流動セルを通過すると同時に測定が開始される。第１４Ａ図および第１４Ｂ図のサイトグラム（cytogram）の、ＩＡＳおよびＦＬ１で構成される二次元特性空間内に示すように、この時点で、３°から１０° の円錐内で光を検出する中間角散乱フォトダイオード３８０と、グリーンの蛍光ＦＬ１を検出するフォトマルチプライア管（ＰＭＴ）４００で細胞を検出する。細胞が照明を施した前記の部分を通過する際、パルスが生成され、このパルスは検出器で検出される。このパルスをフィルタにかけ、増幅し、デジタル化して、ＩＡＳおよびＦＬ１で構成される対応二次元特性空間にリストモードで保存する。細胞のカウントは８秒間実施する。血液１マイクロリットル当たりのＲＢＣカウントが５，０００，０００個と正常である場合、上に述べた流量および希釈率で得られる事象カウント率は、１秒当たり５９５０となる。次に、ＩＡＳおよびＦＬ１で構成される前記の特性空間のリストモードデータにアルゴリズムを適用し、以下のパラメータを２０秒の計算時間内に測定する。１．ＲＢＣゲート：ＲＢＣ母集団をゲートにかけてＷＢＣおよび血小板を除外する。網赤血球は残すが、ＷＢＣおよび血小板は除く。２．網赤血球の百分率：ゲートにかけたＲＢＣ母集団を、そのＦＬ１信号の大きさにしたがって再分析する。ＦＬ１のヒストグラムに対数フィットを行い、成熟ＲＢＣに属する領域を画定し、ＦＬ１信号が前記領域上にくる細胞を、網赤血球として標識する。網赤血球の百分率は、網赤血球のカウントをＲＢＣの総数で割って求める。３．網赤血球の絶対カウント：網赤血球の百分率に、ＣＢＣモードから得られた、サンプルのＲＢＣ絶対数を掛けて求める。４．網赤血球の成熟指標（ＲＭＩ）：ＲＭＩは、ＦＬ１信号の標準偏差（Ｓ．Ｄ．）が、通常の網赤血球母集団の平均蛍光を１以上上回る網赤血球の百分率として表わされる。この説明は、あくまで便宜上のものであって、本発明のＲＭＩの表現報告は、本明細書に述べるアルゴリズムにのみ限定されるものではない。５．その他の網赤血球染料および分析本明細書で開示するその他の網赤血球染料は、周囲温度で光に対して安定であり、非結合染料よりも結合染料の蛍光増進が改善され、ＤＮＡよりもＲＮＡに対して選択性を示し、網赤血球細胞のゲーティング（gating）を向上させ、細胞の薄膜への浸透が早く、最大光吸収波長がアルゴンレーザ（約４８８ｎｍ）の最大放出波長にほぼ一致している。好ましい染料は、以下の一般構造式を有する分子クラスに属する。上式中、ｘ＝Ｏ、Ｓ、Ｓｅ、またはＣ（ＣＨ₃）₂２Ｒ₁＝炭素原子１個ないし６個を有するアルキルＲ₂＝炭素原子１個ないし６個を有するアルキルＲ₃＝縮合ベンゼン、（炭素原子１個ないし６個を有する）アルキルメトキシ、または水素Ｒ₄＝炭素原子１個ないし６個を有するアルキルメトキシ、または水素ｎ＝０または１から６の整数この種の染料を、本明細書では「２，２’−染料」と称する。上に示した網赤血球染料の好ましい実施の形態において、ｘは硫黄Ｒ₃およびＲ₄は両方とも水素ｎ＝０Ｒ₁およびＲ₂は両方ともエチルであることが好ましい。この染料は、Ｋｏｃｈ−ｌｉｇｈｔＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＣａｔａｌｏｇｕｅ１９８５，１９８８／８９の５３ページに、ヨウ化物の塩として記載され、１，３’−ジエチル−２，２’−キノリルチアシアニンヨーダイドと呼ばれている。また、日本感光色素研究所のカタログの７ページにも記載されている。便宜上、以下、特に好ましい実施の形態であるこの染料を「ＤＥ２２ＱＴＣ」と呼び、上に述べた染料タラス全体を「２，２’−染料」と呼ぶ。一般に、以上の染料は塩の形で使用する。塩としては、特にヨウ化物が便利である。本明細書で上記の染料に言及する場合、塩の形の染料をかならず含むものと理解されたい。一つの実施の形態において、ＲＮＡを含有する物質の染色に便利な試薬は、ＲＮＡ含有物質を染色することができる２，２’−染料を含む。別の実施の形態で明らかにしているＲＮＡ含有物染色法では、ＲＮＡ含有物を染色することができる２，２’−染料の染色水溶液を、染色溶液の染料がＲＮＡ含有物に浸透するのに十分な時間だけ前記ＲＮＡ含有物に接触させる。さらに別の実施の形態で明らかにしている、流動サイトメトリを利用した全血サンプル中の網赤血球のカウント法では、ＲＮＡ含有物を染色することができる２，２’−染料の染色水溶液を、染色溶液の染料がＲＮＡ含有物と平衡状態になるのに十分な時間だけ前記ＲＮＡ含有物に接触させる。染色したサンプルを次に流動サイトメトリ分析装置の光感知領域に通し、光感知領域内で入射光ビームによる照明を行う。サンプル溶液中の網赤血球の蛍光が光感知領域を通過する際に、測定される。２，２’−染料は、チアゾールオレンジ中よりも水溶液中の方が安定性が高いのがこの染料の重要な利点である。この特性は、４℃の暗所および周囲温度（約２５℃）の明るい場所で５日間保存した、ＤＥ２２ＱＴＣ、チアゾールオレンジ（双方とも等張性希釈液に０．１μｇ／ｍｌの濃度で溶解）、および「Ｒｅｔｉｃ−ＣＯＵＮＴ」を利用して調べたものである。ＤＮＡよりもＲＮＡが結合物質である場合、２，２’−染料は、非常に強い蛍光を発し、ＤＥ２２ＱＴＣを使用すれば、これまで網赤血球分析には採用されていなかった方法により、重量／重量ベースで赤血球を血小板および白血球と分離することが容易になる。染料は、３０分の通常の試験中に血小板を強力に染色し、かつ同時に白血球を予想通り染色することによって、蛍光と順方向散乱との関係を示すグラフ中で両グループの細胞をすべての赤血球から画然と区別する。迅速染色は、その他多数の染料が示さない特性である。例えば、チアゾールオレンジでは、数時間後には染色が行われるが、血小板は３０分間ではさほど染色されない。ＤＥ２２ＱＴＣは、ＲＮＡやＤＮＡと結合した場合の最大吸収がほぼ４８８ｎｍ、ストークスシフト（Stokes shift）が約３３ｎｍである。したがって、この染料は標準的なアルゴンイオンレーザと併用することができ、きわめて都合がよい。さらに、容易に入手できる蛍光分析用光フィルタを使用することができ、装置を改造する必要がない。２，２’−染料は、網赤血球を蛍光マーカで染色する必要がある従来のどんな分析方法とも併用可能である。特に、２，２’−染料は、アルゴンイオンレーザ流動サイトメトリにおける網赤血球の検出およびカウントなど、現在、チアゾールオレンジを使用するのが望ましいとされている分析に使用することができる。２，２’−染料を使用して網赤血球を検出、識別する場合、保温装置、関連温度制御装置、およびサンプルハンドラを装置内に設け、分析装置と作動可能に接続して、本明細書に開示する測定システムの自動化を図る必要がある。６．ＨＧＢ試薬本明細書で述べるヘモグロビン（ＨＧＢ）試薬は、１９９４年３月１１日出願の「Ｃｙａｎｉｄｅ−ｆｒｅｅＲｅａｇｅｎｔａｎｄＭｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＨｅｍｏｇｌｏｂｉｎ（シアンを含有しないヘモグロビン検出用試薬および検出方法）」と題する米国特許出願第０８／２１２６２６号に開示されている。前記出願は、本出願の所有者との共有になっており、前記出願を参照により本明細書にその全体を組み込む。シアンを含有しない試薬は、検出可能な色原体（chromogenic）構造が形成され、検出、測定が行えるように、迅速に赤血球を溶解し、かつヘモグロビンと結合して錯体を作る必要がある。試薬の作用によって生じる色原体が、その他の血液成分の干渉を受けないと考えられるとともに、すでに実用化されている自動血液分析装置のスペクトル範囲の波長で測定可能なため、本明細書に開示する試薬は、数週間にわたって安定性があり、特に好都合である。比較のために、シアン結合ヘモグロビン法では、通常、５４０ｎｍにおける吸収を測定する。約５４４ｎｍで吸収が最大となる本発明によれば、赤褐色の色原体が形成される。本発明において有用なＨＧＢ試薬は、イミダゾールやイミダゾールの誘導体など、配位子形成（ligand-forming）化合物の水溶液である。配位子形成化合物は、濃度０．１Ｍから２．０Ｍのイミダゾールで存在する。本発明の試薬から出たイミダゾールは、サンプル中の赤血球から放出されたヘモグロビンと結合する。本発明で有用なその他の配位子形成化合物としては、Ｎ−ヒドロキシアセトアミド、Ｎ−ヒドロキシルアミン、ピリジン、オキサゾール、チオゾール、ピラゾール、ピリミジン、プリン、キノリン、イソキノリンなどがある。酸化鉄ヘム（oxidized iron heme）を拘束できる負イオンには、シアン酸塩、フッ化物、アジ化合物、亜硝酸塩、水酸化物、酢酸塩、蟻酸塩などがあり、こららの負イオンの塩として許容できるものには、ナトリウム，カリウム、アンモニウムなどがある。また、試薬は、強力な赤血球溶解力を備えた表面活性剤を含有している。酸化ラウリルジメチルアミンオキシド（米国イリノイ州ＮｏｒｔｈｆｉｅｌｄのＳｔｅｐａｎＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙ製ＡｍｍｏｎｉｘＬ．Ｏ．）、オクチルフェノキシポリエトキシエタノール（ＴｒｉｔｏｎＸ１００）、およびその他の強力な洗剤を溶解試薬の表面活性剤成分として使用することができる。表面活性剤の濃度は、約０．１％から１．０％（重量／体積）とする。試薬のｐＨは、１１から１４、好ましくは１２．５に調整する。ｐＨの調整には、水酸化ナトリウムや水酸化カリウムなど、１価の塩基を使用する。ＨＧＢの検出法（本明細書の第８Ｅ節および例２で詳述）によれば、溶解試薬と全血サンプルを約５０：１から１０００：１の割合で混合する。サンプルと試薬を迅速に混合して、赤血球溶解を行い、ヘモグロビンを色原体に変換することができる。次にサンプルと試薬の混合物を吸光分光光度計にかけ、この装置で色原体の光学濃度を測定する。配位子がイミダゾールの場合、５４０ｎｍから５５０ｎｍで測定を行うことができる。サンプル中のヘモグロビンの総濃度は、変換した色原体の光学濃度に関係する。７．等張性希釈−シース試薬本発明の細胞分析システム６０では、シース流の表面張力を最小限に抑えるとともに、赤血球および血小板の迅速分析を行うのに適した非イオン性表面活性剤を含む緩衝処理済み等張性溶液を使用する。試薬システムは、ほぼ完全に気泡の発生を抑え、インピーダンスおよび光流動セルの両方のシース流の流れを円滑にする。本明細書に開示する希釈−シース試薬は、小赤血球と血小板との分離を促進すると同時に、赤血球および血小板の母集団の構造をほぼ完全に保護するので、正確なカウントおよび体積測定ができる。一つの実施の形態においては、ｐＫａが約６．０から８．０である緩衝処理済み等張性塩溶液、約１０ｍＭから約５０ｍＭにより、試薬のｐＨを約７．０から約７．６の範囲に維持することができる。また、血小板の集合を防止するため、濃度が約０．１ｇ／ｌから約０．４ｇ／ｌであるＥＤＴＡの１価の塩が存在する。さらに、表面張力を低下させる非イオン性表面活性剤のほか、試薬の浸透圧モル濃度を約２７０ｍＯｓｍ／Ｌから３２０ｍＯｓｍ／Ｌの範囲に調整するのに十分な１価の塩も利用して、気泡の形成を防止し、小赤血球と血小板との分離を促進する。この塩は、ｎ−ドデシル−Ｄ−マルトシド、ｎ−テトラデシル−Ｄ−マルトシド、デカノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−ドデシル−Ｄ−グルコピラノシド、およびｎ−デシル−Ｄ−グルコピラノシドのうちから選択する。そのほか、細菌の成長および水の脱イオン化を防止する保存料も存在する。好ましい実施の形態では、試薬の成分として、二塩基性リン酸ナトリウムが約２．４５ｇ／ｌ、−塩基性リン酸カリウムが約０．４０ｇ／ｌ、ＥＤＴＡ二ナトリウムが約０．２０ｇ／ｌ、塩化ナトリウムが約８．０５ｇ／ｌ、塩化カリウムが約０．４０ｇ／ｌ、ｎ−ドデシル−Ｄ−マルトシドが約０．０１２ｇ／ｌ、プロクリン（proclin）３００が約０．０３ｇ／ｌを含み、ｐＨを７．４に、また浸透圧モル濃度を３１５ｍＯｓｍ／Ｌに調整してある。最も好ましい実施の形態では、血液サンプル１７．５マイクロリットルを希釈シース試薬７４００マイクロリットルと迅速に混合し（希釈率１：４２０）、流体力学的に焦点を絞った（シースした）インピーダンストランスデューサに希釈したサンプル０．５マイクロリットルを１２秒間通して赤血球のカウント、体積測定、および血小板のカウントを行い、さらにシース光流動セルに希釈したサンプル２．５マイクロリットルを６秒間通して、正確に血小板の数を数える。損傷しやすい異常細胞の断片から発生するノイズ信号は、細胞分析システム６０の血小板アルゴリズムにより血小板母集団を無視して、光血小板カウントから除く。細胞分析システム６０が対象とする正常および異常血液サンプルの赤血球および血小板の分布の代表例を、第４５Ａ図から第４５Ｆ図および第４６図、第４７図に示す。８．分析装置のモジュールＡ．自動サンプル移送分析装置６４には、処理を行うために、サンプル試験管を自動的に分析装置６４に移送するオートローダ（図示せず）が設けられている。このようなオートローダは、各種サイズのサンプル試験管最高１００個を保持するホルダを備えている。サンプルの吸引を目的として、サンプル試験管を順次分析装置６４にかけるプレゼンタ（presenter）が、オートローダと作動可能に連結されている。サンプルの吸引直前にサンプルを混合するミキサも、オートローダと作動可能に連結されている。各試験管のバーコードラベルを読み取るバーコードリーダも作動可能にオートローダおよびシステム制御装置と連結され、サンプルに関する情報をシステム制御装置に入力する。Ｂ．自動サンプル処理および測定第３図は、第１図に示した細胞分析システム６０で使用する自動サンプル処理領域１１０の実施の形態の平面図を示す図である。処理領域１１０は、細胞分析システム６０の分析装置部分６４の一部である。処理領域１１０は、サンプルカップ領域１１４および保温領域１１８を備えている。第３図に示すように、保温領域１１８は、試薬モジュール１２２およびサブセット／表現型分類（subset/phenotyping）保温トレイ１２４を収容する温度調整ブロック１２０を備えている。温度調整ブロック１２０は、温度調整ブロック１２０上にある保温トレイ１２４および試薬モジュール１２２の加熱または冷却あるいはその両方を行う温度制御装置（図示せず）を備えている。試薬モジュール１２２は、抗体試薬が入る凹部１２８を備えている。図示した実施の形態では、各試薬モジュール１２２が、試薬凹部１２８がついたハウジングを備えており、前記凹部の数は６つが好ましく、特定の試薬パネル包装される。各パネルの試薬は、各パネルに関連した試験に関して、ほぼ等量の試薬が各凹部１２８から使用されるように選択される。パネルに関連した試験に６種未満の試薬が必要である場合には、余分な凹部１２８を栓（図示せず）でふさぐ。また、各試薬モジュール１２２には、不揮発性ＲＡＭなどの、メモリが対応させてあり、モジュールのＩＤ番号と使用情報を保存するようになっている。試薬モジュール１２２は、温度調整ブロック１２０内に所定の方向に向けて配置した開口部（図示せず）に収まるように調整することが好ましい。これにより、分析装置６４の中央処理装置（ＣＰＵ）は、各試薬モジュール１２２内の各凹部１２８の位置と、使用情報からわかる内容物の体積とを保存することができる。図示した実施の形態において、サブセット／表現型分類保温トレイ１２４は、形状がほぼ矩形であり、その上に数列の保温サイト１３２が形成されている。各保温サイト１３２は、血液サンプルと抗体との混合物を保持することができ、免疫／表現型試験に備えて混合物を保温する。サブセット／表現型分類トレイ１２４は、着脱可能に温度調整ブロック１２０内の開口部（図示せず）に収まっており、温度調整ブロック１２０の温度制御装置によりトレイの温度が制御される。サンプルカップ領域１１４は、１列になったサンプルカップを備えている。好ましい実施の形態では、これらのカップに、“ＲＢＣ”カップ１３４、“ＲＥＴＩＣ”カップ１３６、“ＷＢＣ”カップ１３８、“移動”カップ１４０、“ＨＧＢ”カップ１４２、および“洗浄”カップ１４４が設けられている。各サンプルカップは、液体を受けるために、上部が開いている。サンプルを測定流動セル／トランスデューサに移動するために、ＲＢＣカップ１３４、ＲＥＴＩＣカップ１３６、ＷＢＣカップ１３８、およびＨＧＢカップ１４２の底部は、チューブ網１８２（第５図に図示）に接続されている。希釈液、試薬、溶解液などの流体をチューブ網１８２を介してカップに流し込むことも可能であり、これは、各種カップの壁部に形成したポート（図示せず）にチューブ網１８２を接続すれば行うことができる。このポートの位置およびポート内径を適切に設定すると、供給機構により流体が運動する結果、混合が行われる。供給機構は、チューブ網１８２と連結した希釈用注射器であることが好ましい。ＲＢＣは、例えば先に述べた迅速溶解多目的試薬システムを使用してＷＢＣ１３８カップ内で溶解される。したがって、ＷＢＣカップ１３８は、迅速溶解液とサンプルとの混合物を、好ましくは約４０℃に加熱する温度制御装置またはヒータを備えている。さらに、ＷＢＣカップ１３８は、溶解液と全血の組合せとをモータ駆動により渦混合するボルテクサ（vortexer）６１０（第３７図）を備えている。説明を明瞭にするために、第３７図から第３９図を参照してサンプル作成の実施の形態について述べる。第３７図に示した実施の形態は、装置６１０である。一般に、装置６１０は、混合装置６１２、流体分与装置６１４、および混合制御装置６１６を備えている。前記混合装置については、１９９４年１２月１５日出願の米国特許出願第０８／３５６４１２号に詳しい説明、および特許請求が行われており、この出願の内容をすべて参照により本明細書に組み込むものとする。混合装置６１２は、流体分与装置（dispenser）６１４に作動可能に結合され、流体分与装置６１４が全血サンプルや細胞懸濁液など、第一の流体を混合装置６１２に導入できるようになっている。流体分与装置６１４は、導体６１８により混合制御装置６１６と電気的に接続されており、混合制御装置６１６が、流体分与装置６１４の作動を監視および調整できるようになっている。混合制御装置６１６に電気エネルギーを供給するために、混合制御装置６１６は、コンジット（conduit）６２２により電気エネルギー源６２０と電気的に接続されている。実施の形態において、ピペッタである流体分与装置６１４は、装置６１０が提供する適当な流体の供給源と作動可能に接続されている。混合制御装置６１６は、例えばコンピュータであって、メモリを内蔵し、装置６１０の作動を制御する適切なルーチンを実行する。混合装置６１２の図示した実施の形態は、第一のハウジング、すなわち内部ハウジング６２４、第二のハウジング、すなわち外部ハウジング６２６、および結合部材６２７を備えている。内部ハウジング６２４および外部ハウジング６２６は、ほぼ円筒形状であって、流体分与装置６１４から内部ハウジング６２４の内部６２８に流体を導入しやすくするために、開放端部を備えている。内部ハウジング６２４と外部ハウジング６２６は、ほぼ同軸状に配設されており、内部ハウジング６２４は外部ハウジング６２６のほぼ内部に配設されている。第３７図および第３９図に示す結合部材６２７は、内部部材６２４および外部部材６２６の開放端部をほぼ取り囲み、作動可能に両者を連結している。結合部材６２７は、第一のほぼ環状な突起６３０および第二のほぼ環状な突起６３４を備え、突起６３０は、内部部材６２４にあって、その開放端部に隣接するほぼ環状なノッチ（notch）６３２と掛合し、突起６３４は、外部部材６２６にあって、その開放端部に隣接するほぼ環状なノッチ６３６と掛合する。突起６３０をノッチ６３２の内部に保持しやすくするために、ほぼ環状な突起６３０の外径面をほぼ取り囲むＯリング６３８を設けてある。Ｏリング６３８は、基本的にスプリングクランプとしての働きをし、突起６３０をノッチ６３２の内部にほぼ固定する。装置６１０の作動中、Ｏリング６３８は、内部ハウジング６２４の開放端部を外部ハウジング６２６の開放端部に対してほぼ固定する。内部ハウジング６２４は、内部ハウジング６２４の内部６２８に流体を導入し、かつ内部６２８から流体を排出する構造を備えている。具体的に述べると、内部ハウジング６２４は、流体流入口６４２および流体流出口６４４を備えている。一つの実施の形態において、流体流入口６４２および流体流出口６４４は、例えば、ステンレス製チューブでできている。また、別の実施の形態においては、流体流入口６４２が、内部ハウジング６２４に隣接した、コイルなどのコンジットを備えており、熱エネルギーが、内部ハウジング６２４からコンジットに伝達されて、内部ハウジング６２４の内部６２８に流体が導入される前に、流体に熱が加えられるようになっている。実施の形態における流体流入口６４２は、内部ハウジング６２４の遠端部から軸方向に約１．４３インチ片寄っている。流体流出口６４４は、内部ハウジング６２４の近端部６４６のほぼ中央に配設されている。流体が内部ハウジング６２４の内部６２８から流体流出口６４４に流れ込むのを容易にするために、近端部６４６は内部ハウジングの軸方向壁部から流体流出口６４４に向かって傾斜させてある。流体流入口６４２は、適当なコンジット６４８で、溶解液や希釈液など、内部ハウジング６２４の内部６２８に導入される第二の流体の供給源６５０に流体接続されている。供給源６５０からコンジット６４８を経由して流体流入口６４２および内部ハウジング６２４の内部６２８まで流体を積極的に流すように、供給源６５０には、注射器ポンプなどの機構を設けてある。流体流出口６４４は、適切なコンジット６５２でタンク６５４に流体接続されている。タンク６５４も、装置６１０を作動可能に接続した分析装置の他の一部になっている。その他の実施の形態において、タンク６５４は、内部ハウジング６２４の内部６２８から流出する流体を、処理作業にその流体が必要となるまで蓄える。内部ハウジング６２４の内部６２８の流体を希望の温度に保持することが望ましい実施の形態もある。この流体は、流体分与装置６１４から供給される流体、または供給源６５０から供給される流体、あるいはその両方から供給される流体を混合した流体である。内部ハウジング内部の流体を希望の温度に保つために、加熱要素６５６を作動可能に内部ハウジング６２４に取り付けてある。図示した実施の形態では、加熱要素６５６は、電気式加熱要素であり、内部ハウジング６２４の外径面の一部をほぼ取り囲み、これに接触している。加熱要素６５６が発生する熱エネルギーは、このようにして、内部ハウジング６２４に伝達され、さらに内部ハウジング６２４から内容物、すなわち内部ハウジング６２４の内部６２８の流体に伝達される。加熱要素６５６は、導体６５８により、ヒータ制御装置６６０に電気的に接続されている。加熱要素６５６により所望量の熱エネルギーが生成され、内部ハウジング６２４に加えられるように、ヒータ制御装置６６０は、加熱要素６５６に適切な電気エネルギーを供給する。加熱要素６５６および内部ハウジング６２４に関連した温度を監視するために、センサ６６４が、加熱要素６５６および内部ハウジング６２４に作動可能に熱接続されている。実施の形態においては、内部ハウジング６２４の外部形状がほぼ一定かつ滑らかになるように内部ハウジング６２４に凹部を形成して、センサ６６４を収容している。実施の形態において、センサ６６４は、抵抗温度検出器である。一般に、ヒータ制御装置６６０は、内部ハウジング６２４と関連した温度を示す電気信号と基準信号とを比較し、比較結果を利用して加熱要素６５６を駆動させる働きをする。内部ハウジング６２４は、内部ハウジングの内部６２８の流体を希望の熱エネルギーレベルに維持するだけでなく、流体分与装置６１４から供給される第一の流体と、供給源６５０から供給される第二の流体とを、必要があれば混合する操作も行う。流体の混合を容易にするために、内部ハウジング６２４の近端部は原動機６８６（primemover）に作動可能に接続され、内部ハウジング６２４が原動機６８６の動きに応答して動くようになっている。外部ハウジング６２６の近端部は、締結具６８７により原動機６８６に固定されている。実施の形態では、原動機６８６が、カリフォルニア、ＣｕｌｖｅｒＣｉｔｙ所在のＳＫＣシナノケンシ（Shinano Kenshi Corp.）が発売しているモデルＮｏ．ＬＣ２２−１０７などの直流電動モータになっている。この実施の形態の原動機６８６の回転数は、約３，０００ｒｐｍである。リンケージ（linkage）アセンブリ６８８により、原動機６８６は、作動可能に、すなわち駆動可能に内部ハウジング６２４と接続されている。リンケージアセンブリ６８８は、駆動部材６９０（第３８図）およびベアリング６９２を備えている。駆動部材６９０のシャフト６９６は、シャフト６９６の溝の周囲に保持したロックワッシャなど、適当な手段により、ベアリング６９２と接続されている。ベアリング６９２は、比較的柔軟なエラストマ製（elastomeric）Ｏリング６９４により、内部ハウジング６２４の近端部と比較的柔軟に弾性的、機械的に結合されている。エラストマ製Ｏリング６９４は、内部ハウジング６２４の近端部の運動（例えば、偏心運動）によって発生する中心線の角変位を弾性的に補償する。第３８図に示すように、シャフト６９６は、駆動部材６９０の中心線からずれている。駆動部材６９０は、駆動シャフトを収容する孔６９８を備えている。この駆動シャフトは、原動機６８６の駆動シャフトの動きにより、駆動部材６９０が相補的に運動するように、原動機６８６と連動して回転することができる。孔６９８にほぼ直角に位置するもう一つの孔７００が、締結具を収容する駆動部材６９０に設けられており、この締結具は、駆動部材６９０が原動機６８６の駆動シャフトと連動するように、原動機６８６の駆動シャフトに支持される。内部ハウジング６２４は、原動機６８６の作動に応答して作動する。内部ハウジング６２４の動作は、原動機６８６の駆動シャフトの回転運動と異なる。シャフト６９６の配置の片寄りと、結合部材６２７により形成される、内部ハウジング６２４の開放端部と外部ハウジング６２６の開放端部との間の接合箇所とによって、内部ハウジング６２４の動作が部分的に決まる。したがって、内部ハウジング６２４および外部ハウジング６２６の開放端部は、ほぼ静止したままであり、結合部材６２７のエラストマ的性質によって柔軟性に対応する相対運動が得られる。しかし、内部ハウジング６２４の近端部は、原動機６８６の駆動シャフトの動作に応答して動作する駆動部材のシャフト６９６と自由に連動する。シャフト６９６は、駆動部材６９０上に片寄って配設されているため、一般にシャフト６９６の動作は、ほぼ偏心した経路を経る。したがって、一般に、内部ハウジング６２４は原動機６８６の動作に応答して「振動」する。内部ハウジング６２４は、原動機６８６に応答して、外部ハウジング６２６に対して相対的に自由に回転することはない点に注意されたい。原動機６８６の作動を制御し、したがって、内部ハウジング６２４の動作を制御するために、制御装置７０２を設けている。具体的には、導体７０４により制御装置７０２は原動機６８６に電気的に接続されている。センサ７０６が内部ハウジング６２４と作動可能に接続されており、また導体７０８により制御装置７０２と電気的に接続されており、制御装置７０２に内部ハウジング６２４の動作を示すフィードバック信号を供給する。制御装置７０２は、導体７０１により混合制御装置６１６と、また導体７０３により供給源６２０と電気的に接続されている。したがって、制御装置７０２および混合制御装置６１６は、原動機６８６の作動を積極的に調整して、内部ハウジング６２４に所期の動作をさせる。本実施の形態では、磁界を発生させてセンサ７０６との相互作用を起こすために、駆動部材６９０に磁石７１０（第３８図）を設けている。一つの実施の形態において磁石７１０は、エポキシ樹脂接着剤をはじめとする接着剤など、適切な手段により駆動部材６９０の凹部内７１２に保持されている。磁石７１０は、そのＳ極がセンサ７０６に対向するように、凹部７１２内で方向を定めてある。したがって、駆動部材６９０が、原動機６８６の作動に応答して作動すると、磁石７１０は、センサ７０６内に周期的電気信号を発生させる。電気信号はほぼ周期的で、その周波数は、原動機６８６の駆動シャフトの回転周波数にほぼ等しい。装置６１０の動作例を示す。以下の記述は説明のみを目的とするものであることに注意されたい。説明を明瞭にするために、装置６１０は、停止しているものとする（すなわち、どこにも通電されていない）。オペレータが混合制御装置６１６を操作して、装置６１０の運転を開始する。全血、生物的サンプルなど、適当な第一の流体が流体分与装置６１４に供給される。血液希釈液、溶解液など、適当な第二の流体が、供給源６５０から供給される。ヒータ制御装置６６０が、電気エネルギーの供給源６２０を加熱要素６５６に接続するように、混合制御装置６１６は、導体６６２を介してヒータ制御装置６６０に電気信号を送信する。供給源６２０から供給される電気的エネルギーは、導体６６８および６５８にそって加熱要素６５６まで流れる。加熱要素６５６により、電気的エネルギーは熱エネルギーに変換される。加熱要素６５６内の熱エネルギーは、内部ハウジング６２４に伝達される。一つの実施の形態では、センサ６６４が、内部ハウジング６２４に関連した温度が約４３℃（±１．５℃）であることを検出するまで、加熱要素６５６に電気エネルギーが供給される。第一の流体が全血である場合、約４５℃未満の温度レベルで、血球表面の抗原は、実質的に変成することはなく、また血液のタンパク質は、実質的に疑固しない。多量の血球表面抗原が変成したり、多量の血液タンパタ質が疑固したりすると、抗原やタンパク質が、装置６１０と、その関連機器を部分的に覆うことになる。装置と関連機器を覆った抗原やタンパク質は、不規則に移動し、装置６１０および関連機器の作動を阻害する。ヒータ制御装置６６０は、電気エネルギーの供給源６２０から加熱要素６５６まで流れる電気エネルギーを調整して、内部ハウジング６２４に関連した希望温度を維持する。したがって、ヒータ制御装置６６０、したがって加熱要素６５６は、装置６１０や、その関連機器の作動中、ほぼ連続して作動する。内部ハウジング６２４が、これに関連する所望温度になると、混合制御装置６１６は、導体７０１にそって制御装置７０２に電気信号を送信する。この電気信号に応答して、制御装置７０２は、原動機６８６を電気エネルギーの供給源６２０に電気的に接続し、原動機６８６への通電を行う。原動機６８６は、内部ハウジング６２４を作動、すなわち振動させる。所定体積の第二の流体、たとえば溶解液約１２７５マイクロリットル（μｌ）が、注射器ポンプなど、適当な機構により、供給源６５０からコンジット６４８に供給される。第二の流体は、内部ハウジング６２４の流体流入口６４２を通過して内部ハウジング６２４の内部６２８に向かう。必要な場合には、所定体積の第二の流体が内部ハウジング６２４の内部６２８に供給される前または後に、原動機６８６への通電を行うこともある点に注意されたい。所定体積の第二の流体は、原動機６８６の作動に応答し、第一の所定時間、すなわち約５秒間内部ハウジング６２４の動きに合わせて移動する。第一の所定時間経過後、第二の流体の熱エネルギーは、内部ハウジング６２４とほぼ同じになる。混合制御装置６１６は、導体６１８にそって流体分与装置６１４に電気信号を送信する。流体分与装置６１４は、所定体積の第一の流体、例えば全血約３７．５μｌを内部ハウジング６２４の内部６２８に導入する働きをする。一つの実施の形態において、流体分与装置６１４は、結合部材６２７の開口部６４０に向かって移動する排出ノズルを備えたピペッタである。排出ノズルが開口部に対して適切な位置にくると、所定体積の第一の流体が内部ハウジング６２４の内部６２８に供給される。所定体積の第一の流体が内部ハウジング６２４の内部６２８に導入されると、原動機６８６の作動に応答して、第二の所定時間、すなわち約１１秒間、第一の流体および第二の流体が内部ハウジング６２４内に供給される。原動機６８６は、装置６１０に関連した共振周波数とは異なる周波数で作動するのが好ましい。実施の形態では、上に述べたように、第一の流体は全血、第二の流体は溶解液であり、原動機６８６の作動に応答して、内部ハウジング６２４内で流体が動くことにより、第一および第二の流体はほぼ完全に混合される。第一の流体と第二の流体との比は、約１：３５である。全血中の赤血球は、比較的迅速に溶解され、白血球は比較的すみやかに固定される。すなわち、白血球の構造がほぼ保護される。第二の流体と内部ハウジング６２４は、ほぼ同じ熱エネルギーレベルにあるので、第二の所定時間経過後、第一の流体も、ほぼ同じ熱エネルギーレベルに達する。第一および第二の流体が、適切な時間、内部ハウジング６２４の内部６２８に供給された後、原動機６８６が停止する。第一および第二の流体の混合物は、流体流出口６４４およびコンジット６５２を介して、タンク６５４に供給される。前記混合物の移動は、注射器ポンプなど、流体流出口６４４と作動可能に接続した適切な手段により行われる。混合物は、さらに処理を施されるか、必要になるまでタンク６５４に蓄えられる。装置６１０は、いつでも運転を継続できる状態になっている。第４図は、第３図に示したサンプル処理領域１１０のさらに詳細な図である。第４図に示すように、サンプル処理領域１１０は、通気／吸引（vent/aspirate ）プローブアセンブリ１４８および保温プローブアセンブリ１５２を備えている。通気／吸引プローブアセンブリ１４８（第４Ａ図に図示）は、通気ニードル１５４、吸引プローブ１５６、吸引プローブアセンブリ１４８をスライドアセンブリ１６０にそって移動させる駆動アセンブリ１５８、通気ニードル１５４を同じスライドアセンブリ１６０にそって移動させる駆動アセンブリ１５９、および垂直駆動アセンブリ１６１を備えている。通気ニードル１５４および吸引プローブ１５６がサンプル試験管およびサンプルカップの直上に配置できるように、スライドアセンブリ１６０をサンプルカップの上部に配置してある。吸引プローブ１５６が、サンプル試験管やサンプルカップ内に入り、流体の吸引、注入を行えるように、吸引プローブ１５６は、吸引プローブ駆動アセンブリ１５８によりサンプルカップやサンプル試験管上を移動する。吸引プローブ１５６が、あらかじめ内容物を排出してある容器や、その他の封止してあるサンプル試験管（図示せず）に接近すると、まず通気駆動アセンブリ１５９がサンプル試験管上の通気ニードル１５４を移動させる。ピストンアセンブリ（図示せず）により、通気／吸引プローブアセンブリ１４８を下方に移動させ、その結果、通気ニードル１５４がサンプル試験管のキャップを突き破る。通気ニードル１５４がキャップに挿入されたままになっている間に、垂直駆動アセンブリ１６１により、吸引プローブ１５６が通気ニードル１５４を通ってサンプル試験管内に進入し、サンプルを吸引する。細胞分析システム６０は、様々なサイズのサンプル試験管から流体を吸引し、また各種の封止を施した試験管に対応できる柔軟性を備えていることが好ましい。したがって、垂直駆動アセンブリ１６１には、吸引プローブ１５６が試験管の底部に達したことを感知し、吸引プローブ１５６を停止させて、それ以上降下させないスイッチを設けてある。次に、垂直駆動アセンブリ１６１が吸引プローブ１５６を上昇させ、血液の吸引を開始する。保温プローブアセンブリ１５２（第４Ｂ図に図示）は、保温プローブ１６０、第二の駆動アセンブリ１６８を第一のスライドアセンブリ１６６にそって移動させる第一の保温プローブ駆動アセンブリ１６４、垂直駆動アセンブリ１６９および保温プローブ１６０を第二のスライドアセンブリ１７０にそって移動させる第二の保温プローブ駆動アセンブリ１６８を備えている。以上の構成により、保温プローブ１６０は、直交方向に移動し、サンプル処理領域１１０にある当該のサンプル処理カップの直上に配置される。またサブセット／表現型分類トレイ１２４にある保温サイト１３２のいずれか、または各試薬モジュール１２２にある６つの試薬凹部１２８のいずれか、または保温洗浄カップ１４４の上部に保温プローブ１６０を配置することができる。垂直駆動アセンブリ１６９により、保温プローブ１６０は垂直に移動し、その結果、保温プローブ１６０は、サンプルカップ、保温サイト１３２、あるいは試薬凹部１２８内に進入し、流体の吸引、注入を行う。第５図は、分析装置によるサンプルの処理をさらに詳細に示す図である。第５図に示すように、サンプル処理カップ１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２が移動チューブ１８２のネットワークを介して流動セル／トランスデューサ１７０、１７４、１７８に接続されている。ＲＢＣカップ１３４、ＲＥＴＩＣカップ１３６、およびＷＢＣカップ１３８は、それぞれインピーダンストランスデューサ１７４および光流動セル１７０と連絡し、流体が流れるようになっている。ＨＧＢカップ１４２は、ＨＧＢトランスデューサ１７８と連絡し、流体が流れるようになっている。第６Ａ図、第６Ｂ図、および第６Ｃ図は、それぞれ注入、洗浄、吸引操作中の保温プローブ１６０を示す図である。プローブ１６０は、中央チューブ１８４と、外部チューブ１８６で構成されている。保温プローブ１６０は、中央チューブ１８４を介して流体の吸引、注入を行う。保温プローブ１６０は、中央チューブ１８４で吸引を行いながら、中央チューブ１８４と外部チューブ１８６との間に形成される環状領域を介して洗浄流体を噴き出し、サンプルカップまたは保温サイトあるいはその両方を洗浄するのにも使用する。開示した実施の形態においては、希釈液、モノクロナール（monoclonal）抗体（ＭＡｂ）試薬、数種の溶解試薬、および網赤血球染料を分析装置モジュール６４に供給する。ただし、モノクロナール抗体試薬は必要な場合に供給する。希釈液、溶解試薬、および網赤血球染料は、分析装置６４に接続した溜め（reservoi r）１９２および１９６（第７図、第８図、および第９図に図示）を介して供給する。希釈液および溶解試薬用の溜め１９２は、バルク保存容器１９３にも接続する。流動スクリプト（flowscript）から、溜めを満たす要求があった場合、溜め１９２のレベル感知スイッチ（図示せず）が、溜めに流体が満たされているかどうかを確認する。制御装置が、この時点で溜めに流体を注入できると判断した場合、圧縮空気制御ライン１８９は、正圧から水銀柱約１５インチの真空状態に切り替わる。溜め１９２が一杯になっていることをレベル感知スイッチが感知するまで、前記真空状態によって、バルク保存容器１９３から溜め１９２に流体が流れる。溜め１９２が一杯になっていることをレベル感知スイッチが感知すると、圧縮空気制御ライン１８９は正圧にもどり、バルク保存容器１９３から溜め１９２への流体の流れが止まる。Ｍａｂ試薬は、使い捨てのパッケージ済み試薬モジュール１２２（第３図および第４図に図示）から供給される。分析装置６４には、バルク容器のいずれかが空になったことを判断する流体センサ（図示せず）が設けられている。このセンサは、バルク保存容器１９３と溜め１９２との間のチューブに入り込んだ気泡を検知する。分析装置６４は、データステーションモジュール６８にバルク保存容器が空になったことを知らせ、次にこのモジュールがオペレータに対して空容器についての信号を出す。続いてオペレータは、空容器を充填済み容器と交換し、次に容器交換が済んだことをユーザインタフェースを介してデータステーション６８に知らせる。すでに開始されているサンプル処理は、溜めに十分試薬が残っている状態で継続するが、容器交換が済むまで、分析装置６４は、サンプル試験管からそれ以上サンプルを吸引しない。吸引プローブ１５６および保温プローブ１６０による吸引および分与は、複数のピストンポンプ１９０によって行われる。第７図および第８図は、吸引プローブ１５６および保温プローブ１６０が、ピストンポンプ１９０および試薬溜め１９２に接続されている様子を示す図である。流体の移動量および流量は、分析装置６４およびデータステーション１９８によって制御される。第７図に示すように、吸引プローブ１５６は、バルブ１９４およびピストンポンプ１９０を介して希釈液溜め１９２に接続されている。第８図は、保温プローブ１６０が、バルブ２００およびピストンポンプ１９０を介して希釈液溜め１９２に接続されている状態を示す図である。ピストンポンプ１９０は回転可能であって、各ピストンが回転するごとに、所定体積の流体を吸引することができる逆転可能ポンプであることが好ましい。各ピストンポンプ１９０は、ピストンが一定方向に回転するにしたがって流体を吸引し、逆方向に回転すると流体を注入する。米国特許出願第４９４１８０９号公報、第５０１５１５７号公報、第５０２０９８０号公報、および第５０４４８８９号公報に適切なピストンポンプが開示されている。参照により、これら特許の開示をすべて本明細書に組み込むものとする。第９図は、網赤血球染料溜め１９６がバルブ２０２、２０３および網赤血球染料注射器１９１を介して網赤血球カップ１３６に接続されている様子を示す図である。計量した希釈液も、希釈液注射器（図示せず）およびチューブ網１８２を介してサンプルカップに供給される。希釈液注射器および網赤血球染料注射器１９１は、第１０Ａ図、第１０Ｂ図、第１１Ａ図、第１１Ｂ図、および第１２図に示す供給注射器２０４、２０６、２０８とほぼ同じものである。希釈液注射器は、チューブ網１８２に接続されてもよい。第１０Ａ図、第１０Ｂ図、第１１Ａ図、第１１Ｂ図、および第１２図は、いつでも測定が行えるようになっているサンプルをサンプルカップから流動セル／トランスデューサ１７０、１７４、１７８に供給する様子を示す図である。第１０Ａ図は、ポンプ２２０を介してサンプルをサンプルカップ２１６からインピーダンストランスデューサ１７４の近くにバルク移動（bulk transfer）する様子を示す図である。第１０Ｂ図は、ＲＢＣ供給注射器２０４からインピーダンストランスデューサ１７４にサンプルを計量供給する様子を示す図である。サンプルカップ２１６は、チューブ１８２によりＲＢＣ注射器２０４、インピーダンストランスデューサ１７４、および蠕動ポンプ２２０に接続されている。第一のバルブ２１０は、サンプルカップ２１６より下流のチューブ１８２に配置され、第二のバルブ２１２は、蠕動ポンプ２２０より上流のチューブ１８２に配置されている。ＲＢＣ注射器２０４から流れる流体の流量および前記注射器の一般的な動作は、分析装置の電子機器およびソフトウェアによって自動的に制御されている。第１０Ａ図に示すように第一および第二のバルブ２１０、２１２が開いている状態で、蠕動ポンプ２２０が作動すると、サンプルカップ２１６からインピーダンストランスデューサ１７４の近くへサンプルがバルク移動する。第１０Ｂ図に示すように第一および第二のバルブ２１０、２１２が閉じた状態でＲＢＣ注射器２０４のプランジャ２２４が規定速度で所定距離だけ移動すると、ＲＢＣ注射器２０４からインピーダンストランスデューサ１７４にサンプルが計量供給される。第１１Ａ図は、ポンプ２３２を介して、サンプルカップ２３０から光流動セル１７０の近くにサンプルがバルク移動する様子を示す図である。ポンプ２３２は、ポンプ２２０とほぼ同じものである。第１１Ｂ図は、ＷＢＣ供給注射器２０６によりサンプルが光流動セル１７０に計量供給される様子を示す図である。サンプルカップ２３０は、チューブ１８２により、ＷＢＣ注射器２０６、光流動セル１７０、および蠕動ポンプ２３２に接続されている。第一のバルブ２３６は、サンプルカップ２３０より下流のチューブ１８２に配置され、第二のバルブ２３８は、蠕動ポンプ２３２より上流のチューブ１８２に配置されている。第１１Ａ図に示すように第一および第二のバルブ２３６、２３８が開いている状態で、ポンプ２３２が作動して、ある量のサンプルを光流動セル１７０の近くに移動させると、サンプルカップ２３０から光トランスデューサ１７０の近くへサンプルがバルク移動する。第１１Ｂ図に示すように第一および第二のバルブ２３６、２３８が閉じた状態でＷＢＣ注射器２０６のプランジャ２４０が規定速度で所定距離だけ移動すると、ＷＢＣ注射器２０６から光流動セル１７０にサンプルが計量供給される。第１２図は、ＨＧＢサンプルカップ１４２からＨＧＢトランスデューサ１７８にサンプルがバルク移動する様子を示す図である。チューブ１８２により、ＨＧＢサンプルカップ１４２は、ＨＧＢトランスデューサ１７８およびポンプ２４６に接続されている。ポンプ２４６は、ポンプ２２０とほぼ同じものである。バルブ２４８は、ＨＧＢサンプルカップ１４２より下流のチューブ１８２に配置されている。バルブ２４８が開いた状態で蠕動ポンプ２４６が作動すると、ＨＧＢサンプルカップ１４２からＨＧＢトランスデューサ１７８にサンプルがバルク移動する。Ｃ．光流動セル／トランスデューサ各細胞の光学的特性を検出し、有意味な情報に変換するために、流動している流体内で光流動セル１７０により細胞は相互に分離される。第１５図および第１６図は、細胞分析システム６０と併用する流動セル１７０を示す図である。一つの実施の形態において（第４３図に図示）、光流動セル１７０は、無色透明な水晶ブロックであって、断面寸法が約１６０μｍ×４００μｍで、薄く細長い矩形の内部流動チャンバ３００（第１６図）を備えている。約３０°の角度を持つ、ほぼ円錐型の経路が、流動チャンバ３００の一端から当該流動チャンバ内に収束している。希釈されたサンプル流は、移動するシース流３０４の中心に位置するノズル２７０から流動チャンバ３００に注入される。サンプルは、サンプルの流れの軸に直交する、約５μｍ×８０μｍの微小断面に集束し、流動チャンバ３００の中心に限って流れるようになっており、この方法をハイドロダイナミック（hydro-dynamic）または流体集束法（fluid f ocusing）と呼ぶ。集束させたサンプルの流れの軸の所定位置で、サンプルの流れに直交するように、レーザビームを流動チャンバ３００に入射させる。以下の第８節、Ｆに述べるように、レーザビームがサンプルの流れと交差する箇所で、レーザビームは、流れの軸に平行な長さ約１７μｍの部分に集束する。したがって、サンプルの流れとレーザビームが集束する、流動チャンバ３００の中心部にサンプル照明領域ができ、この領域の縦、横、高さの寸法の内、二つがサンプルの流れによって決まり、三つ目がレーザビームの程度によって決まる。この照明領域は、寸法が、約５μｍ×８０μｍ×１７μｍであって、流動セル１７０の感知領域になっている。各細胞は、この領域を通過する際に検出され、制御装置がデータを収集、処理し、結果を報告する。第４３図を参照。第３１図から第３６図を参照して、以下、ノズル２７０の詳細について述べる。第３２図に示すように、本明細書に開示する実施の形態は、流体ノズル２７０と、分析装置で使用する流体８１２の導入方法に関する。第３１図に示す実施の形態では、流体ノズル２７０は、コンジット、すなわち流体８１２の流動ガイド８１４と、流体８１２内にある細胞、粒子などの対象物を検出する流動セル１７０とに動作可能に接続されている。図示した実施の形態では、流動ガイド８１４は、アクリルを初めとするポリマーなど、適切な材料から形成されたコンジットを備え、流体ノズル２７０を収容する孔８１８が設けられている。流体ノズル２７０は、流動ガイド８１４とほぼ同心に配置し、流体８１２を流体ノズル２７０から孔８１８に導きやすくしてある。適切な供給源から供給される所望の流体８４４が、コンジット８２０を介して孔８１８に注入できるように、コンジット８２０は、孔８１８と流体が流れるように接続されている。流動セル１７０は、上に述べたような光流動セルであって、流体８１２が流動セル１７０を介して流体ノズル２７０から流れる際に、流体８１２に含まれる対象物の測定を行う。白血球の鑑別分析、血小板分析、または網赤血球分析あるいはこれらすべてを行うのに、流動セル１７０を利用する実施の形態もある。このような実施の形態では、相互に独立した処理経路内で各分析の準備操作を行い、一つの流動セル１７０で分析を実施する。第３２図および第３３図に、流体ノズル２７０の構造をさらに明瞭に図示する。一般に、流体ノズル２７０は、マニフォールド８２２と、流体が流れるようにマニフォールド(manifold)８２２と接続された複数のコンジットとを備えている。コンジットの数を選択して、特定の流体ノズル２７０を利用しやすくすることができる。具体的にいえば、実施の形態では、第一のコンジット２６２、第二のコンジット２６４、および第三のコンジット２６６を、流体が流れるようにマニフォールド８２２の一部と接続されている。コンジット２６２、２６４、および２６６は流体８１２の入口として使用できる。したがって、コンジット２６２、２６４、および２６６は、流体が流れるように所望の流体８１２の適当な供給源と接続されている。ある実施の形態において、マニフォールド８２２は、アクリルなど、適切なポリマーで作製されており、長さが約０．７インチある。コンジット２６２、２６４、および２６６は３１６ステンレス鋼など、適当な金属でできている。コンジット２６２は、軸方向長さが約１．１４インチ、内径が約０．０２３インチ、外径が約０．０６２５インチある。コンジット２６４および２６６は、軸方向長さが約０．５インチ、内径が約０．０１９インチ、外径が約０．０６２５インチある。コンジット２６２、２６４、および２６６の外面は、エポキシ樹脂などの接着剤で被覆され、マニフォールド８２２に設けた補助孔８３０、８３２、および８３４にそれぞれ挿入されている。図示した実施の形態では、コンジット２６２、２６４、および２６６が、マニフォールド８２２上で軸方向および円周方向にずれている。コンジット２６６は、マニフォールド８２２の端部８３１から約０．０７インチだけ軸方向に逸れている。コンジット２６４は、端部８３１から約０．２６インチ逸れており、コンジット２６６は、端部８３１から軸方向に約０．４５インチ逸れている。円周方向には、コンジット２６２および２６６が、それぞれコンジット２６４から約６０°逸れている。したがって、コンジット２６２は、コンジット２６６から約１２０°逸れている。マニフォールド８２２は、コンジット２６２、２６４、および２６６をそれぞれコンジット２７２、２７４、および２７６と流体が流れるように接続している。コンジット２７２、２７４、および２７６は、やはりマニフォールド８２２と作動可能に接続されている。マニフォールド８２２により、コンジット２７２、２７４、および２７６の内いずれか一本を、ある流体専用とするか、またはノズル２７０と接続した装置で前記一本のコンジットの試験を行うことができる。コンジット２７２、２７４、および２７６は、流動ガイド８１４とほぼ同軸状にかつほぼ同心状に配設されている。ノズル２７０から流動セル１７０への流体８１２の流れの位置精度が所期の値になるように、流動ガイド８１４および流動セル１７０に対するコンジット２７２、２７４、および２７６の配置を選択することができる。マニフォールド８２２は、ほぼ同軸状に配設したコンジット２７２、２７４、および２７６を収容する孔４２を備えている。コンジット２６２、２６４、および２６６内の流体８１２は、マニフォールド８２２を流れて、それぞれコンジット２７２、２７４、および２７６に入る。コンジット２７２、２７４、および２７６は、全体がほぼ直線になっている。ところで、コンジット２７２、２７４、および２７６の同軸状の配置を保つために、コンジット２７２と２７４の間、およびコンジット２７４と２７６の間に半径方向のスペーサ（図示せず）を設けた実施の形態もある。このスペーサは、流体８１２の動きがコンジット２７２、２７４、および２７６内の流体８１２の動きに干渉しないように、例えば外径面の逃げや経路を設けて構成されている。図示した実施の形態では、コンジット２７２、２７４、および２７６の遠端部が軸方向に相互に逸れているが、必ずしもそうなっている必要はない。実施の形態において、コンジット２７２は、３０４ステンレス鋼、＃３（総硬質）焼戻し皮下注射針など、適切な金属でできている。コンジット２７２は、軸方向の長さが約２．５５インチ、内径が約０．０１３インチ、外径が約０．０２５インチある。コンジット２７４も３０４ステンレス鋼、＃３（総硬質）焼戻し皮下注射針など、適切な金属でできており、軸方向の長さが約２．２６インチ、内径が約０．０３８インチ、外径が約０．０５０インチある。コンジット２７６もやはり３０４ステンレス鋼、皮下注射針など、適切な金属でできており、軸方向の長さが約１．９７インチ、内径が約０．０６２インチ、外径が約０．０７８インチある。一つの実施の形態において、流動ガイド８１４は、点Ａの内径が約０．２５インチ、点Ｂの内径が約０．１１８インチあるテーパ付部分を備えている。第３１図に点Ａおよび点Ｂを示してある。例えば、流体８１２を希望通りに流体集束させ、流動ガイド８１４と流体８１２が接触の可能性を減少させ、流動セル１７０の光学系や作動を最適化するために、関連コンジット２７２、２７４、２７６と、流動ガイド８１４の対応寸法の間の関係をあらかじめ定めておく。寸法の関係が、流量の差に関係する実施の形態もある。具体的にいえば、実施の形態において、流動ガイド８１４の関連部分の縦方向断面は、関連流量差に比例する。例示的実施の形態では、テーパ付部分が約６０°の傾きを画定する。また、流体ノズル２７０の遠端部に隣接した流動セル１７０の流体搬送部分が、内径約０．１１８インチで約３０°の傾きを画定する。流動セル１７０に対する、流体８１２の流動の位置精度が希望通りになるように、寸法を選択することができる。流体ノズル２７０の構造について詳細に説明したので、以下、流体ノズル２７０で流体を導入する方法について詳しく述べる。血液、血液成分など、流動セル１７０で処理を行う流体８１２の供給源は、流体が流れるようにコンジット２６２、２６４、または２６６と接続され、流体８１２が供給源から選択されたコンジット２６２、２６４、または２６６に流れる。コンジット２６２、２６４、２６６のうち、残りのコンジットは、流体８１２の供給源と流体が流れるように接続されておらず、したがって、これら残りのコンジットには、流体８１２が供給されない。流体８１２は、粒子、細胞など、流動セル１７０で検出可能な対象物を含む。水、緩衝液、希釈液、その他、流体８１２と反応して悪影響を及ぼさない流体など、別の流体８４４の供給源が、コンジット８２０と接続されており、他の流体８４４が供給源からコンジット８２０および流動ガイド８１４に流れるようになっている。コンジット８２０から流動ガイド８１４に流入する流体８４４は、第３４図から第３６図に示すように、コンジット２７２、２７４、および２７６の一部を取り囲む。コンジット２７２、２７４、および２７６が片寄って配置されているため、流体８４４の流れが途切れることが少なくなる。流動ガイド８１４を貫通する流路の縦方向断面が徐々に狭くなっているため、流動ガイド８１４内部で流体が拡散する可能性は低くなる。必要な場合には、流体８１２が、コンジット２７２、２７４、および２７６の内、いずれか一本を流れる際に、例えば、比較的低い適当な圧力をコンジット２７２、２７４、および２７６の残り二本のコンジットに加えて、前記二本のコンジットを流体８４４で洗浄、すなわち「バッタフラッシュ(back-flushed)」することができる。あるいは、各コンジット２７２、２７４、および２７６を介して流体８１２を連続的に導入した後、コンジット２７２、２７４、および２７６に適当な流体を通して、この三つのコンジットをすべて同時に洗浄することも可能である。したがって、コンジット２７２、２７４、および２７６をほぼ同時に洗浄できるため、流体８１２を迅速に導入する準備をするとともに、ノズル２７０の洗浄に必要な損失時間を短縮することによって、流動セル１７０のスループット(throughput)を増大させることができる。また、流動セル１７０に接続した分析装置のスループットも、これに相応して増大させることができる。実施の形態では、流体８４４の流量が、流体８１２の流量よりも大きい。例えば、一つの実施の形態では、流体８１２の流量が、約２．５μ ｌ／秒、流体８４４の流量が、約３００μｌ／秒となっている。この流量の差により、流体８１２の流れは、流動セル１７０に向かって導かれる。すなわち、流動セル１７０に集束することになる。一般に、流動セル１７０による流体８１２内の対象物の検出が容易になるように、流量差をあらかじめ定めることが可能である。コンジット２７２、２７４、２７６のいずれかで導入した流体８１２は、流動セル１７０に対してほぼ同じ位置に集束されるため、流体８１２を導入するのに、コンジット２７２、２７４、または２７６のいずれを選択するかにかかわらず、流量差を利用して流体の集束させる点に変わりはない。このため、同一の流動セル１７０を利用して、各コンジット２７２、２７４、２７６から別々の流体８１２を供給することができ、また流体ノズル２７０を接続した分析装置で実施する各種試験でも同じ流動セル１７０を使用することができる。したがって、各コンジット２７２、２７４、２７６は、流体が流れるように、流体８１２の、それぞれ独立した供給源に接続され、ある供給源から供給される流体８１２が、別の供給源から供給される流体８１２と混ざりあうことかないようになっている。これにより、流体８１２の混合または汚れあるいはその両方が発生する確率を低くすることができる。各コンジット２７２、２７４、２７６から供給される流体８１２を流動セル１７０でほぼ並行して処理し、流体ノズル２７０、およびこのノズルを接続した分析装置のスループットを向上させることができる。流体ノズル２７０のこの特徴は、実験的に確認されている。第３４図から第３６図に図示した実験において、流体ノズル２７０の実施の形態を有限要素法によって解析し、ノズル２７０に関連した流体の特性を明らかにした。この実施の形態では、コンジット２７２の内径が約０．０１３インチになっている。コンジット２７４の遠端部は、コンジット２７２の遠端部から約０．２９インチ逸れている。コンジット２７２および２７４は、内径が約０．０２５インチ、外径が約０．０３７インチの、ほぼ環状の流路を画定する。コンジット２７６の遠端部は、コンジット２７４の遠端部から約０．２９インチ逸れている。コンジット２７４および２７６は、内径が約０．０４９インチ、外径が約０．０６１インチの、ほぼ環状の流路を画定する。米国イリノイ州のＦｌｕｉｄＤｙｎａｍｉｃｓＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｏｆＥｖａｎｓｔｏｎから市販のＦＩＤＡＰコンピュータプリグラム、バージョン６．０１を使用して、有限要素解析を行った。コンジット２７２、２７４、２７６を流れる流体の定常線対称モデル、および流動セル１７０を流れる流体の定常三次元モデルを解析して、流動セル１７０に対して流体的に集束させた流体８１２の位置が、流体８１２の導入に使用するコンジット２７２、２７４、２７６とは無関係であることを明らかにした。流体８４４の流量は、常に約３００μｌ／秒であり、選択したコンジット２７２、２７４、または２７６を流れる流体８１２の流量は、約２．５μｌ／秒から約２．０μｌ／秒の範囲にあった。流体はニュートン流体であり、固体表面でのすべりはないという境界条件を仮定して、解析を行った。一つの実施の形態において、白血球の鑑別分析、血小板の分析、および網赤血球の分析のシミュレーションを行うために、個別の流体分析を３度行った。第３４図に示すように、白血球鑑別分析用流体８１２をコンジット２７２を介して流量約２．５μｌ／秒で導入する。また、第３５図に示すように、血小板分析用流体８１２をコンジット２７４を介して流量約２．５μｌ／秒で導入する。さらに、第３６図に示すように、網赤血球分析用流体８１２をコンジット２７６を介して流量約２．０μｌ／秒で導入する。第３４図から第３６図を比較してみると、流体分析により得られた各コンジット２７２、２７４、２７６の流線から明らかなように、流体８１２の前の流れにより流体８１２は汚染されず、また流動セル１７０に対する流体８１２の流体的な集束位置は、コンジット２７２、２７４、２７６のいずれを選択しても影響を受けない。コンジット２７２、２７４、２７６のいずれを選択しても流動セル１７０に対する流体８１２の流体的な集束位置に影響がないことは、コンジット２７２、２７４、２７６を順次流れる、直径７μｍの小球を含んだ流体８１２の流れを光学的に測定しても、実験的に確認できる。小球を含む流体８１２は、流量約２μｌ／秒で導入する。上記の変動係数から明らかなように、測定した三つの光学特性（ＡＬＬ：軸光損失、ＩＡＳ：中間角光散乱、ＤＳＳ：復偏光側方散乱）の変動係数は（ＣＶ）、コンジット２７２、２７４、２７６すべてについてほぼ同じであった。光学的応答がこのように類似していることから、流体ノズル２７０を、洗浄前に流体８１２の複数の測定に使用し、流動セル１７０、および流動セル１７０と接続した分析装置のスループット、すなわち分析能力を向上させることが可能であることが確認できる。洗浄前に行う流体８１２の測定の回数または流体８１２の導入の回数は、流体ノズル２７０を設けたコンジットの数に対応する。本明細書に述べた実施の形態では、必要なコンジットの数にかかわらず、ほぼすべてのコンジットをほぼ同時に洗浄することが可能である。流体８１２が、コンジット２７２、２７４、および２７６の一部と作用する特性、すなわち前記一部に付着する特性を十分備えている場合、コンジット２７２、２７４、または２７６内の第一の流体の残りが、同じコンジット２７２、２７４、または２７６を通過した第二の流体と混じる。コンジット２６２、２６４、および２６６についても、同じことが考えられる。第一の流体の残りと第二の流体とが混じると、流動セル１７０の精度が低下する恐れがある。特定のコンジット２７２、２７４、または２７６を、特定の流体８１２や流動セル１７０で行う試験の専用として、以上のような問題を解決することが可能である。専用とするコンジット２７２、２７４、２７６の数は、流体ノズル２７０によって導入する流体８１２の特性によって決まる。コンジット２７２、２７４、２７６のうち少なくとも一つを分離することによって、ある流体８１２の残りが別の流体８１２と混じりにくくすることができる。例えば、あるコンジット２７２、２７４、または２７６を、オーラミンＯ（auramine O）など、比較的明るい蛍光マーカを含む流体８１２を使用した試験専用とし、別のコンジット２７２、２７４、または２７６を、比較的暗い蛍光マーカを含む流体を使用した試験専用とすることができる。コンジット２７２、２７４、または２７６内に流体が存在すると、流体ガイド８１４を通って流れる流体８４４は、共通の流動セル１７０に向かって流体８１２の流れを集束させるのと並行して流体８１２の拡散の可能性を低下させられるだけの体積および流れを確保できる。したがって、流動セル１７０の精度や感度を損なうことなく、同一の流動セル１７０によって、２種類の試験を順次行うことができる。流体が上昇して矩形断面の流動セル１７０に入ると、その速度が迅速に増大し、その結果、サンプルの流れは、流体力学的に、断面積の約５μｍ×８０μｍの中心部分に集束する。第２２図に示す広角コンデンサレンズの焦点方向の寸法が５μｍと小さいため、焦点のぼけが最小限度に抑えられ、したがって、流れの中の異なる位置になる蛍光細胞の明るさが等しくなる。また、流動チャンバ３００の幅が、サンプルのながれよりはるかに大きいため、流動チャンバ３００は、簡単には詰まらず、さらに狭小な感知領域によって得られる解像度に匹敵する解像度が得られる。集束レンズ（第１９図に図示）は、レーザビームを流動チャンバ３００に集束させ、検出器（第２０図および第２１図に図示）は、流動チャンバ３００を通過する細胞の光散乱特性または蛍光特性あるいはその両方を検出する。これらの特性は、本明細書の第８節、Ｆで詳細に説明する。Ｄ．インピーダンストランスデューサ細胞分析装置６０では、赤血球および血小板のカウントを行うのに、インピーダンストランスデューサ１７４を使用する。第１７図に示すのは、流体力学的集束を利用し、インピーダンスに基づいて細胞のカウントおよび細胞のサイズ分けを行うインピーダンストランスデューサ１７４の好適な実施の形態である。インピーダンスに基づく細胞のカウントの基本は、粒子が小さなオリフィス３１４を通過する際に示す電気抵抗の変化を検出することである。インピーダンストランスデューサ１７４の二つのチャンバ３１０および３１２内の電解液（緩衝食塩水など）によって、伝導が行われる。サンプル導入ノズル３１６および流体力学的集束によって、細胞は、インピーダンストランスデューサ１７４のオリフィス３１４まで導かれる。各細胞がオリフィス３１４を通過する際、チャンバ３１０、３１２およびオリフィス３１４内の流路の電気抵抗が増大する。オリフィス３１４のどちらかの側のチャンバ３１０および３１２の内部に、後述する二本の電極を配設し、この二本の電極に電流源３１７を接続してあるため、上に述べた抵抗の増大が電圧パルスとして現われる。サンプル導入ノズル３１６は、上流側電極の役目を兼ねている。第二の電極３１８は、オリフィス３１４の下流側に配置されている。パルスの数は、細胞のカウントを示し、各パルスの振幅は、細胞の体積と関係する。パルスの振幅の周波数分布をグラフ化して、体積のヒストグラムを作成する。このヒストグラムを利用して、ＭＣＶ（平均細胞体積）やＲＤＷ（赤血球分布幅）など、ＲＢＣやＰＬＴのパラメータを求める。インピーダンストランスデューサ１７４は、アクリルや類似のポリマーなど、非導電性かつ無色透明な材料で作製することが好ましい。トランスデューサ１７４内の第二の電極３１８の極性で電解液が腐食性ガスを発生し、なんらかの電極材料を溶解するため、第二の電極は、プラチナ製にすることが好ましい。電極３１８には、耐腐食性抵抗を備えたその他の材料を使用してもよい。本明細書のトランスデューサ１７４の作動に影響を与えることなく、トランスデューサ１７４の上流側のチャンバ３１０の容積を小さくすることもできる。サンプル導入ノズル３１６は、オリフィス３１４から約１．５ｍｍ以内に配置することが好ましい。作動中、シース流速度（オリフィス通過時に約１０ｍ／秒）を比較的高く保つとともに、ノズル３１６とオリフィス３１４との間の距離を維持する必要がある。非流体力学的に焦点を合わせたインピーダンストランスデューサを通過する細胞の約３０％は、流動セルのオリフィスの中心ではなく、オリフィスの縁部近くを通過する。これにより、オリフィスが詰まり、測定値が狂う場合がある。細胞分析装置６０のインピーダンストランスデューサ１７４内で流体力学的集束を行い、オリフィスの閉塞を抑え、測定精度を向上させることができる。インピーダンストランスデューサ１７４内での流体力学的集束は、以下のような手順で行う。ＲＢＣ供給注射器２０４（第１０Ａ図および第１０Ｂ図に図示）が、約０．３３３μｌ／秒の割合で、インピーダンストランスデューサ１７４のノズル３１６にサンプルを供給する。サンプル流は、インピーサンストランスデューサのノズル３１６から流出する際、ＲＢＣシース流３１５により速度約１０ｍ／秒まで加速される。サンプルの体積流量は、速度と断面積との積であるため、サンプルが加速するにつれて、断面積は減少するが、約０．３３３μｌ／秒で一定していることが好ましい。好ましい実施の形態では、１０m／秒まで加速すると、サンプルの流れの直径が約６．５μｍまで減少する。赤血球がオリフィスを出たと同時に赤血球を「捕捉(catch)」するために、インピーダンストランスデューサ１７４には、オリフィス３１４のすぐ下流に排出チューブ３１４ａが設けられている。オリフィス３１４から出た後で廃棄されない赤血球は、オリフィスの近くに戻る場合がある。このような赤血球は、血小板の測定に悪影響を与える信号、さらには赤血球の測定にもわずかながら障害を与える信号を発生する。測定済み細胞の捕捉を促すために、細胞が排出チューブ３１４ａ内を流れやすくするだけの目的で、（ポートＥを介して）第二の流れを生成する。インピーダンストランスデューサ１７４には、数箇所のポート（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ）も設けられている。ポートＡは、オリフィス３１４の上流側から空気（またはその他のガス）を逃がす通気口である。ポートＢは、トランスデューサ１７４の上流側の流体を排出させるためにチャンバ３１０に空気を注入する注入口である。シース流入ポートとともに、ポートＤは、トランスデューサの上流側の排出口である。ポートＣは、トランスデューサ１７４の下流側の流体を排出させるためにチャンバ３１２に空気を注入する注入口である。また、ポートＣは、トランスデューサ１７４の下流側からガスを逃がす通気口ともなる。ポートＥは、第二の流れの排出口および流入口である。ポートＧは、廃棄流体の流出口である。本実施の形態では使用しないが、ポートＨは、トランスデューサ１７４の上流側に追加の流体を流入させる接線方向流入点を設けるために使用する。Ｅ．ＨＧＢトランスデューサＨＧＢトランスデューサ１７８は、血液サンプル中の細胞の吸光を測定して、血液サンプルのＨＧＢレベルを決定する。第１８図に、ＨＧＢトランスデューサ１７８から出る分析信号を検出する回路のブロック線図とともに、ＨＧＢトランスデューサ１７８を示す。一つの実施の形態において、ＨＧＢ濃度は、ｇ／ｄｌ単位で測定する。前記濃度は、グリーンの波長領域（約５４０ｎｍ）にあるサンプルが吸収する光の量に比例する。ＨＧＢトランスデューサ１７８は、ＨＧＢトランスデューサチャンバ３３８内の液体の吸光に関連した電気信号を生成する。吸光量は、ヘモグロビンを含む準備されたサンプルおよび無色透明な基準液について、ＨＧＢトランスデューサ１７８内で測定する。前記２種類の液体の吸光測定中にトランスデューサから生成した電気信号の差は、準備されたサンプル中のヘモグロビン含有量にほぼ比例する。例えば、透明なＨＧＢトランスデューサチャンバ３３８を、発光ダイオードなどの光源３２２と、フォトダイオードなどの検出器３２６との間に配置する（第１８図）。好ましくは、定格約５４０ｎｍの干渉フィルタ３２６を、ＨＧＢトランスデューサ３３８と検出器３２４との間に配置する。検出器３２４の出力電流は、吸収した光エネルギーにほぼ比例し、電流／電圧増幅器３３２で増幅される。ＨＧＢ信号のアナログ信号処理については、電子システムと関連させて、本明細書の第８節、Ｆで述べる。流入してくるＨＧＢ溶解試薬の速度を利用して、ＨＧＢカップ１４２内で全血を混合し、好ましくは、希釈比を１９０：１とする。例えば、蠕動性のポンプ２４６を使用し、ＨＧＢカップ１４２に接続したチューブ網１８２を介してＨＧＢカップ１４２からサンプルを吸引し、ＨＧＢトランスデューサチャンバ３３８に注入する。ＨＧＢカップ１４２をＨＧＢ溶解試薬で洗浄し、サンプルの残りが、以後処理されるサンプルと極力混じらないようにする。ＨＧＢ試薬をＨＧＢトランスデューサに直接入れて、ＨＧＢの基準値を求める。Ｆ．光ベンチ第１９図に、光ベンチ３５０の平面図を示す。光ベンチ３５０は、分析装置モジュール６４に搭載されており、レーザ光源３５２、ミラー３５４および３５６、レンズ３５８および３６０、流動セル１７０（実施の形態では溶融シリカ）、複数の検出器４００、４０２、および４０４を備えている。レーザビーム３６８は、後部ミラー３５４、前部ミラー３５６、ビーム調整器３７０によって導かれ、一対の円筒状レンズ３５８およびレーザ集束レンズ３６０により成形され集束される。レーザ３５２は、ＴＥＭ（ｔｒａｎｓｖｅｒｓｅｅｌｅｃｔｒｏｍａｇｎｅｔｉｃ）モードで作動する、垂直方向に偏光された４８８ｎｍの光フィードバック装備空冷アルゴンレーザ（単相２１１４Ｂ-１２５ＬＡＢまたは同等品）であることが好ましい。このモードでは、光の強度がガウス分布になっており、同位相である。レーザビーム３６８は、レーザ回路内の光フィードバックシステムにより、約１０ｍＷに保持される。レーザ３５２と光流動セル１７０との間の光学要素は、光流動セル１７０の流動チャンバ３００におけるガウス焦点ビームの腰部（waist）は、ほぼ楕円形で、高さが約１７μｍ、幅が約６４μｍある。ビームの腰部とは、軸に直交する所与の方向でビーム断面寸法が最小になる、レーザビームの軸に沿った位置で画定される。第１９図に示す好ましい実施の形態では、直交する二つの対称な平面、すなわち垂直面と水平面を特徴とし、この両面はレーザビームの光軸を含む。したがって、ビームの軸に沿ったどの位置でも、ビームの程度は、直交する二つの寸法、すなわち、水平方向の寸法と垂直方向の寸法によって規定される。垂直方向の寸法は、光軸に直交する垂直面内にあって、強度が、ビーム中心で発生する最大強度の１／ｅ²倍になる点の間の直線距離となる。対応する水平寸法は、水平寸法と同様に定義されるが、水平面内にある点が異なる。このようなビームは、垂直ビーム拡張子(expander)の働きをする一対の円筒状レンズ３５８によって実現される。上流側レンズの焦点距離は、約−１８．８ｍｍ、下流側レンズの焦点距離は、約＋７５．４ｍｍであることが好ましい。垂直腰部および水平腰部が流動チャンバ３００で一致するように、レンズ３５８は、共焦状態からわずかにずれている。集束レンズ３６０は球状で、焦点距離が約７９．５ｍｍあることが好ましい。ビーム微調整機構３７０は、レーザ集束レンズ３６０と流動セル１７０との間に位置する。この機構は、角度が１０°と小さい一対の楔で構成され、サンプルの流れに対してレーザビームをわずかに横方向に移動させるのに使用する調整可能な空気スペースを設けてある。この楔は、レーザビームの軸に対して直角な入り口面および出口面により、その方向が定められている。空気スペースは、３２ピッチのネジで、レーザの軸と平行な方向に調整することができる。楔の材料としてＢＫ７ガラスを使用した場合、空気スペースと横方向のビームの変位との比は、１０．５／１である。３２ピッチのネジを完全に一回転させた場合、照明光の入射角は変化することなく、サンプルの流れに対してレーザビームが横方向に ±７５μｍ移動する。横方向ビーム変位の解像度は、±１μｍ末満である。このシステムを、順方向および側方角集光光学系と併せて使用すれば、以後の光学系の調整状態に影響を及ぼすことなく、レーザビームとサンプルの流れとを最適かつ容易に調整することができる。流動セル１７０の流動チャンバ３００の縦横比は、約２．５ｘであることが好ましい。光流動セル１７０内での流体力学集束により、縦横比が約１５ｘである、ほぼ楕円形のサンプル中心流ができる。サンプルの流量が約２．０μｌ／秒である場合、その結果生じるサンプルの流れは、ほぼ楕円形の円筒状になる。サンプルの流れの長さおよび幅は、約８０μｍ×５．０μｍとなる。約５．０μｍの流れの幅は、約８０μｍの水平焦点腰部に対応する。したがって、流れの内部の最大強度変動は、約１％となる。細胞が公称流速、約８ｍ／秒でレーザビーム３６８内を通過する場合、垂直焦点腰部が約１７μｍであるため、常にパルス幅は、細胞の大きさにしたがって、約２．０〜３．５マイクロ秒の範囲となる。検出器３８０、４００、４０２、および４０４は、流動セル１７０を通過する細胞の影響を測定する。検出器３８０、４００、４０２、および４０４は、少なくとも７つの光学パラメータを測定できることが好ましい。１基または複数基の検出器を順方向光路に配置して、順方向中間角散乱と、微小角順方向散乱または軸光損失（ＡＬＬ、別名、順方向吸光）とを測定することが好ましい。一般に、ＡＬＬは、レーザビームの前方を通過する細胞による光エネルギーの減少であり、フォトダイオードによって測定する。光損失は、一般に散乱が原因で生じる。ビーム内を細胞が通過することによって起こる、レーザビームの光路内にある検出器に到達する光エネルギーの減少であるＡＬＬを、測定対象パラメータの一つにすることが好ましい。一方、微小角順方向散乱は、ビーム内を通過する細胞が光を散乱するために、入射レーザビーム外（ただし、１°〜３°の微小角の範囲内）の検出器に到達する光エネルギーである。レーザビームが検出器内に入らないようにするためには、一般に、ビームストップを設ける。ＡＬＬの測定システムは、レーザ光の入射円錐内の光を集光し、微小角散乱システムは、前記円錐外部の光を集光する。ＡＬＬ測定システムで対象となる信号は、定常状態のレーザ信号から差し引かれる負の信号であるが、微小角順方向散乱測定では、非常に低い背景光レベルに負荷される微小な正の信号である。中間角順方向散乱（ＩＡＳ）は、微小角順方向散乱に類似しているが、光が、入射レーザビームから大きな角度で散乱される点が異なる。さらに具体的に述べると、ＩＡＳは、レーザビームの入射線または中心線から約３°ないし１０°の範囲内にあるリング内で散乱される光に関係する。好ましい実施の形態では、ＡＬＬは、レーザの軸から水平方向に約０．３°未満、垂直方向に約１．２°未満の角度の範囲内で集光される。また、ＩＡＳは、レーザの軸から約３°ないし１０ °の範囲内の角度で集光される。第１９図および第２０図に示す好ましい順方向路光学システムは、球形の平凸レンズ３７６と、レンズの後部焦点面にある２要素フォトダイオード３８０とを備えている。この好ましい構成では、２要素フォトダイオード３８０内の各点が、細胞の位置には関わりなく、流動チャンバ３００内を通過する細胞から出る光の特定の集光角度に写像される。したがって、内部要素３８２は、ほぼ矩形であることが好ましく、したがって、レーザビームの発散の非対称度に写像され、ＡＬＬの測定を行う。外部要素３８４は、ほぼ円形のリングであることが好ましく、したがって、ＩＡＳの測定に必要な順方向散乱の集光角度の範囲に写像される。このような順方向路の構成は、光流動セル１７０およびレーザビームの微調整とは無関係である。所望の集光構成を実現するために、２要素検出器の横方向位置を集光レンズ３７６と合わせる。要素３７０によって光流動セル１７０を変化させるか、または入射レーザビーム３６８を再調整しても、検出器３８０の角度受容は影響を受けず、したがって、順方向路の光学系を再調整する必要もない。要素３７０は、角度の再分布を行わずにビームを再配置するだけである。あるいは、２要素シングルユニット検出器３８０を、２基の独立した検出器に替えることもできる。この場合には、適切な直径の中心穴が付いたミラーをレンズ３７６の背面に配置する。このミラーは、ＩＡＳを検出器のいずれかに向けて反射する。ミラーの中心穴と一致し、レーザビームだけを通過させるような形状になったスリットが、ミラーの裏側にある第二の検出器にＡＬＬ測定用の光を伝える。以上述べた構成は、どちらも微小角集光システムの変形である。この構成では、オブスキュレーション（obscuration）バーが不必要であり、このバーと関連した調整も不必要である。好ましい第一の実施の形態の場合、検出器は両方とも、一つのチップに組み込むことができる。ミラーは必要ない。ＡＬＬ信号によって内部ＡＬＬ要素３８２が飽和するのを防止するには、第２０図に示すような中性濃度（neutral density）フィルタ３８６を組み込むことが望ましい。フィルタ３８６は、内部ＡＬＬ要素３８２を中性濃度２．０のコーティング（入射光の約１％を伝えるコーティング）で被覆して設けることが好ましい。外部ＩＡＳ要素３８４は、反射防止コーティングで被覆することができる。一つの実施の形態においては、第１９図および第２１図に示すように、残りの検出器４００、４０２、４０４は、三個のフォトマルチプライヤ管(photomultip lier)（ＰＭＴ）で、側方散乱（入射レーザビームにほぼ垂直な軸を備えた円錐内で発生する散乱光）または蛍光（入射レーザビームとは異なる波長で細胞から放出される光）を検出する。ＰＭＴ４００の光路に配置した移動可能な偏光子４３６は、復偏光側方散乱（ＤＳＳ）および偏光側方散乱（ＰＳＳ）をそれぞれ検出するＰＭＴ４００および４０１を構成するのに対して、移動可能なフィルタ（４３０、４３２、４３４）では、細胞からの規定波長の蛍光放出を検出することができる。グリーンの蛍光ＦＬ１は、約５１５〜５４５ｎｍの範囲で検出される。また、黄色の蛍光ＦＬ２は、約５６５〜５９５ｎｍの範囲で検出される。さらに、赤の蛍光ＦＬ３は、約６１５〜６４５ｎｍの範囲で検出される。必要な波長の光を効率的に伝達、反射し、効率的な検出を可能にする二色性ビームスプリッタ４０１および４０３により、側方散乱および蛍光放出は、前記のＰＭＴまで導かれる。第２２図に示すような浸漬集光（immersion collection）システムを利用すると、蛍光を測定する場合、ＰＭＴ４００、４０２、４０４の感度が、向上する。この例では、浸漬集光システムは、屈折率整合層４１６により、第一のレンズ４１４を流動セル１７０に光学的に接続する。したがって、広角度にわたる集光が可能になる。好ましい実施の形態において、この集光角は、サンプルの流れの場合、約１３０°であり、開口数０．５の代表的な空気スペースコンデンサシステムでは、約４４°に相当する。蛍光を発する粒子から収集した蛍光エネルギーが、（１−ｃｏｓＵ）に比例することは、数学的に証明することができる。前式中、Ｕは、収集円錐角の１／２である。したがって、好ましい実施の形態の、集光角１３０°のシステムは、集光角４４°のシステムに比べてほぼ８倍のエネルギーを収集する。出力が低いレーザまたは弱い蛍光マーカあるいはその両方により蛍光検出が可能になるだけの差がある。また、再度一点に光を集束させずに、大きく異なる波長で所与の光路を利用することができるように、前記集光角１３０°のシステムには、色補正も行われている。したがって、光学フィルタ４３０、４３２、４３４を挿入するか、または取り外すかすることによって、一つのＰＭＴで、数種の波長を検出することができる。第２１図、第２２図、および第２４図に示した浸漬集光システムは、所与のＰＭＴのカソード面が、対物アパチャストップ４１０（第２２図に図示）に接し、流動セル１７０の流動チャンバ３００に対して無限遠に位置するように、端部動原体型（telocentric）になっている。この構成により、ＰＭＴが相互にかつ、流動チャンバ３００に対して正確に整列する必要が軽減される。第２２図に示すように、コンデンサ４１２は、屈折率整合ゲル層４１６によって水晶流動セル１７０に光学的に接続した平半球（plano-hemispherical）型の第一の要素４１４を備えていることが好ましい。一般に、コンデンサ４１２は、光学レンズシステムであり、広角度集光については、収差補正（aberrationcorr ection）が十分であるが、高解像度顕微鏡観察で利用する回折限界撮像（diffraction limited imaging）については収差補正が不十分である。手頃なゲルは、ＤｏｗＣｏｒｎｉｎｇから発売されている（確認番号＃０２−３０６７）。表１に、コンデンサの好ましい実施の形態の仕様を示す。ＰＭＴ光学システムは、モジュール形式になっていることが好ましい。第２３図および２４図に、ＰＭＴ光学システムを示す。各ＰＭＴモジュールは、ＰＭＴを一つまたは二つと、スリット／フィールド（slit/field）レンズアセンブリ４２０を備え、このアセンブリは、スリット４２２およびフィールドレンズ４２４、４２５を備えている（第２３図および第２４図）。スリット４２２は、流動チャンバ３００と接しており、ＰＭＴ４００のカソードの背景光を最小限に抑える。フィールドレンズ４２４（焦点距離が約−１２．０ｍｍであることが好ましい）および４２５（焦点距離が約１５．０ｍｍであることが好ましい）は、先に述べた端部動原体型を構成する。光学フィルタ４３０、４３２、４３４および偏光子４３６は、ＰＭＴの光路に挿入して、検出した光の波長または偏光あるいはその両方を変化させる。また、以下の寸法は、第２４図に関するものである。Ａ＝４６．０Ｂ＝２０．６１Ｃ＝２２．９８Ｄ＝＋１４．９７６Ｅ＝１３．２９２Ｆ＝０．５２２Ｇ＝２．０Ｈ＝６．７Ｉ＝３．８Ｊ＝３．７８Ｋ＝２２．９８Ｌ＝Ｆ₅₃₀＝−１２．０２５Ｒ₁＝−６．２４８ Φ＝５．０ｔ₁＝２．０（ＢＫ７）Ｒ₂−＞∞ Ｑ₂＝１０．０Ｍ＝６．４３システムは、第三のＰＭＴモジュールが簡単に追加できるように設計されている点に一言触れておく。この第三のモジュールを利用すると、適当な二色ミラーおよびバンドパスフィルタを追加することにより、ＰＭＴを６つもシステムに組み込むことができる。例えば、四つの蛍光検出器ならびに偏光側方散乱（ＰＳＳ）および復偏光側方散乱（ＤＳＳ）の同時測定を必要とする精密な分析を考えることができる。例示的な一つの実施の形態においては、ＡＬＬは実質上方形のフォトダイオードとＮ．Ｄ．２．０フィルタによって測定される（第２０図参照）。ＩＡＳは、フィルタなしの外側リングフォトダイオードで測定される。ＰＳＳはフィルタなしのＨａｍａｍａｔｚｕＲ９２８ＰＭＴ（４０２）で測定される。ＤＳＳはＲ９２８ＰＭＴ（４００）と水平偏光器（４３６）で測定される。ＦＬＩはＲ９２８ＰＭＴ（４００）と５３０／３０フィルタ（約５３０ｎｍに中心をもつ帯域が約３０ｎｍの帯域フィルタ、４３０）。ＦＬ２はＲ９２８ＰＭＴ４０２と５８０／３０帯域フィルタ（４３２）で測定される。ＦＬ３はＲ９２８ＰＭＴ（４０４）と６３０／３０帯域フィルタ（４３４）で測定される。９．空気圧ユニット細胞分析システム６０の好ましい実施の形態では、空気圧ユニット７２は専用の電源をもつ独立のユニットである。この構造により、分析装置モジュール６４とデータステーションモジュール６８の重量と寸法と消費電力が低下する。空気圧ユニット７２は、圧力ポンプと真空ポンプを含んでいる。このユニットは、約８．５ｐｓｉの調節済み圧力、約１２から１５ｐｓｉの別の圧力、約４０ｐｓｉの高い圧力、および約１５インチ水銀柱の真空を提供する。真空圧は、ＲＡＭ、ＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、ＳＲＡＭなど適切なメモリ内に存在する分析装置ソフトウェアによって制御される。１０．データステーション／コンピュータデータステーションモジュール６８は、ディスプレイ端末、ディスクドライブ、ハードディスク、キーボード、ポインティング装置、およびＬＡＮ接続を含む８０３８６または８０４８６ベースのＰＣ互換コンピュータであることが好ましい。一つの実施の形態において、ディスプレイ端末は、カラーであり、ディスクドライブは、３．５インチ、ハードディスクのメモリは少なくとも５４０メガバイト、キーボードは、パソコン形式になっている。データステーション６８は、ＲＡＭ、ＲＯＭ、ＳＲＡＭ、ＥＰＲＯＭなどのメモリを備えており、測定データの処理、パラメータの計算、ヒストグラム、撒布図、その他多次元のグラフを含め、各種フォーマットによる処理結果の報告を行えるだけのソフトウェアアルゴリズムを内蔵している。細胞分析システム６０のデータステーション６８は、様々な細胞分析にアルゴリズムを適用するメモリやその他のデバイスを備えている。このアルゴリズムは、分析モジュール６４が生成する多数のデータ点を分析し、臨床関連情報を得るために利用する。本明細書に開示する血液／免疫総合分析装置は、ソフトウェアを実行するプラットフォームを一つだけ提供し、血液および免疫サンプル処理および測定だけでなく、データ解析も自動化する分析装置となる。データステーション６８は、関連サンプル記録の集まりであるデータ保存場所となる。第２８図は、好ましいデータ保存場所を示すもので、データ記録、患者病歴、品質管理（ＱＣ）ファイル、標準基準粒子ファイル、組み合わせ複写ファイル、バル（Ｂｕｌｌ）のアルゴリズム（Ｘ−Ｂ）バッチ、移動平均ファイル、および較正ファイルを含んでいる。１１．電子システム分析装置モジュール６４、データステーションモジュール６８、圧縮空気ユニット７２には、電子装置がある。分析装置６４は、データ収集、フルイディクス、動作制御のハードウェアプラットフォームとなる。一つの実施の形態では、データステーション６８は、汎用コンピュータであって、ユーザインタフェースの働きをするとともに、収集データの処理、報告、保存を行う。圧縮空気ユニット７２は、真空源および圧力源を制御する。好ましい実施の形態では、分析装置モジュール、データステーションモジュール、および圧縮空気ユニットが物理的に独立しており、各ユニットへの電力供給は、別々のＡＣ電源から行われる。データステーション６８および圧縮空気ユニット７２は、独立したシリアル通信チャンネル７６および８４を介して、分析装置６４と連絡している。第２５図は、分析装置６４の電子ハードウェアコンポーネントの一部を示すブロック線図である。これらのコンポーネントには、中央処理モジュール５００（ＣＰＭ）、データ収集システム５０２、および動作制御サブシステム５０４などがある。ＣＰＭ５００は、データ収集サブシステム５０２、動作制御サブシステム５０４、および通信機能を制御する。ＣＰＭ５００の好ましい実施の形態の仕様を、以下に示す。＊Ｍｏｔｏｒｏｌａ６８３０２インテグラルマルチプロトコルプロセッサ、２０ＭＨｚクロック＊１ＭＢダイナミックＲＡＭ、４ＭＢまでＩＭＢ刻みで拡張可能＊１２８ＫＢＥＰＲＯＭ＊２ＫＢ不揮発性ＲＡＭ＊ＤＭＡコントローラ、収集したパルスデータをアナログ／デジタルコンバータからＣＰＭＲＡＭに高速１６ビット転送＊バッファ付８ビットバス、データ収集制御および診断機能＊モータプロセッシングモジュール（ＭＰＭ）シリアルリンク二本＊周辺シリアンルリンク一本＊圧縮空気ユニットシリアルリンク一本＊ＨＤＬＣシリアルリンク一本＊ＨＤＬＣシリアルリンク専用ダイレクトメモリアクセス（ＤＭＡ）チャンネル＊バーコードリーダ用ＲＳ−２３２ポート１個＊診断端末用ＲＳ−２３２ポート１個第２６図は、第２５図に示したデータ収集サブシステム５０２の詳細を示すブロック線図である。細胞、すなわちサンプルの特性は、ＨＧＢトランスデューサ１７８、インピーダンストランスデューサ１７４、光流動セル１７０で電気信号に変換される。一般に、インピーダンストランスデューサ１７４および光流動セル１７０は、出力信号として電気パルスを生成する。また、ＨＧＢトランスデューサ１７６は低周波信号を出力する。各流動セル／トランスデューサの出力は、データ収集サブシステム５０２によって別々に処理される。インピーダンストランスデューサ１７４および光流動セル１７０から出力される出力信号は、複数の検出器５１０から出力される。この検出器は、光ベンチ３５０のＰＭＴおよびフォトダイオードまたはインピーダンストランスデューサ１７４の電気回路で構成されている。各検出器出力は、前置増幅器（preamplifier ）モジュール５１２および信号処理モジュール５１４を介してアナログ／デジタルコンバータ（ＡＤＣ）モジュール５１６に供給される。信号処理モジュール５１４は、パルスの高さなど、パルスの特性を測定する回路を備えている。ＡＤＣコンバータ５１６は、マルチプレクスコンバータであって、信号処理モジュール５１４から出るアナログ出力を、パルスの特性を表わすデジタル値に変換する。デジタル値は、ディレクトメモリアクセス（ＤＭＡ）５１８を介してＣＰＭ５００に転送される。ＣＰＭ５００は、情報を処理し、高レベルデータリンク制御（ＨＤＬＣ、すなわち通信プロトコル）データリンク７６を介してデータをデータステーション６８に送る。データ収集サブシステム５０２は、トリガレベル、ゲーティングレベル、レーザ出力など、様々なパラメータ設定に必要なアナログ電圧も生成する。ＨＧＢトランスデューサ１７８から出る出力は、ＨＧＢ検出器／アナログ多重化基板３２８を介して直接ＡＤＣモジュール５１６に供給される。一般に、ＨＧＢ基板３２８は、トランスレジスタンス増幅器３３２および電流源３３４を備えている（第１８図）。ＨＧＢ基板３２８およびそのコンポーネントについては、本明細書の第８節、Ｆでさらに詳細に説明する。Ａ．ＡＤＣモジュールＡＤＣモジュール５１６は、アナログ／デジタルコンバータを内蔵している。ＡＤＣモジュール５１６は、信号処理モジュール５１４から出力されるアナログ電圧、およびＡＤＣモジュール５１６自体の内部の補助電圧を測定するために多重化されている。各電圧測定値のデジタル報告は、関連識別タグを有している。データの流れの中で、このタグは、タグに後続する特定の測定値を識別する。タグはすべて７ビットの長さがあり、最大１２８個のパラメータを見込んでいる。信号処理モジュール５１４は、前置増幅器５１２から出力される各信号ごとに一つずつ割り当てられたピークホールド回路を内蔵している。ピークホールド回路は、入力信号として電気パルスを受信し、パルス発生中に検出された最大電圧に等しい定電圧を発生する。ＡＤＣモジュール５１６内のプログラム可能なタグシーケンサは、一度に一つずつピータホールド回路を指定し、測定対象値（定出力電圧）をＡＤＣモジュールに伝達する。ＡＤＣモジュールは、前記特殊信号をアナログ形（電圧）からデジタル値に変換する。この変換に十分な時間をとってから、タグシーケンサは、次の測定対象値を保持する次のピークホールド回路を指定する。測定信号を識別する対応タグが、変換が終了毎にデータに付加される。このようにして、タグシーケンサは、各入力に時間スロットを割り当てることによって、ＡＤＣモジュールを時分割する。この変換の結果は、ＤＭＡ５１８を介してＣＰＭ５００上の主メモリに転送される。ＤＭＡを利用して、ＣＰＵが介入することなく、高速でデータを転送する。Ｂ．インピーダンストランスデューサ前置増幅器前置増幅器５１２は、プログラム可能な低ノイズ定電流源を内蔵している。この電流源から発生する定電流は、２つの経路に分割される。一方の電流経路は、インピーダンストランスデューサ内の電極を通り、もう一方の経路は、前置増幅器５１２につながっている。両電流の和は一定なため、前記電極を流れる電流の変化（インピーダンストランスデューサ１７４を細胞が通過することに起因する変化）は、前置増幅器５１２の出力電圧の変化として反映される。Ｃ．インピーダンストランスデューサによる信号処理インピーダンストランスデューサ前置増幅器から出る出力は、それぞれプログラム可能な１２ビットのゲインを有する、二つのそれぞれ独立した経路、基線リストアラ(baselinerestorer)、パルス検出器、およびピータホールド回路を通る。一方の経路は、ＲＢＣパルスの検出用であり、もう一方の経路は、ＰＬＴパルスの検出用である。したがって、同じパルスが、以下のような異なる二つの基準にしたがって同時に選別にかけられる。パルスのピーク値が、所与のしきい値を超えている場合、そのパルスは有効であると見なされる。データ収集サブシステム５０２は、レベルしきい値および傾きしきい値（slopethreshold）を認識する。傾きしきい値は、時間的に非常に接近して到着した二つのパルスを数えることによって、ハードウェアカウンタのデッドタイムを短縮する。細胞には種類ごとに識別基準が必要である。ＲＢＣパルスは、あるレベルおよび傾きを超えなければならない。次のパルスに備えて検出器をリセットするには、ＲＢＣパルスが、ある負の傾き以上になっている必要がある。ＰＬＴパルスは、ＲＢＣパルスと同じ順序で発生する。ただし、ＰＬＴのほうが小さいので、ＰＬＴをＲＢＣと区別することができる。パルスが下位レベルのしきい値以上であって、上位レベルのしきい値以下である場合、そのパルスは、検出済みＰＬＴとして分類される。さらに、パルスが有効ＰＬＴと見なされるためには、所定の正の傾きを超えている必要がある。次のパルスに備えて検出器をリセットするには、ＲＢＣパルスが、ある負の傾き以上になっている必要がある。パルスが検定基準を満たしている場合、トリガ信号が、ピークホールド回路に送られ、続いてＡＤＣ変換が始まる。インピーダンストランスデューサ１７４から出るトリガパルスのカウントは、１６ビット専用カウンタ２基で行われる。一方のカウンタは、ＲＢＣ用であり、もう一方のカウンタはＰＬＴ用である。背景ＤＣ要素を増幅済み信号から除くために、インピーダンストランスデューサの前置増幅器から出ている各出力経路には、基線保持回路が含まれている。この回路によって生成されるオフセット電圧をモニタして、診断手段とする。Ｄ．光前置増幅器検出器５１０により、光流動セル１７０から放出される光は、様々な角度で収集される。この検出器は、フォトダイオード（ＰＤ１およびＰＤ２）とフォトマルチプライヤ（ＰＭＴ１、ＰＭＴ２、およびＰＭＴ３）とを備えている。このような信号のダイナミックレンジはきわめて広く、したがって、広い範囲にわたってゲイン調整を行うことができる。ＰＭＴについては、ＰＭＴ自体にかかるダイノード電圧（約２００V〜１１００Ｖ）を制御して、ゲイン調整を行うことが好ましい。このような操作により、約１０５の範囲にわたってゲインを調整することができる。ＰＭＴの光前置増幅器は、ＰＭＴから電流出力をゲインが固定した電圧に変換する。前置増幅器を使用すると、２の累乗刻みで各フォトダイオード（ＰＤ）のゲインをプログラムすることができる。ＰＤ前置増幅器は、ＰＤ出力電流を電圧に変換する。Ｅ．光信号処理前置増幅器の光出力は、別々の５つの経路すなわちチャンネルを通る。各チャンネルは、基線リストアラ、パルス検出器、ピークホールド回路、および１２ビットのプログラム可能なゲイン（ピーク補足後）を含む。ピータ値が所定のプログラム可能しきい値を超えた場合、「光」パルスは、有効であると見なされる。有効なパルスは、デジタルトリガパルスを生成する。トリガパルスは、チャンネル（ＰＤ１、ＰＤ２、ＰＭＴ１、ＰＭＴ２、ＰＭＴ３）を選択して論理的に組み合わせたものの一つとなるようにプログラムすることができる。各チャンネルには、独自のプログラム可能下位しきい値がある。５つのチャンネルについて、トリガパルスは、ピーク補足、および後続する補足ピーク値のＡＤＣ変換を開始する。ゲーティング基準を要求して、トリガを判定する。例えば、ＰＤ１、ＰＤ２、またはＰＭＴ２の信号が所定のゲートしきい値を超えた場合、トリガは無効となる。パルス信号からＤＣ成分を除いてＤＣ背景オフセットを低下させるために、基線リストアラ回路が設けられている。この回路の応答時間は、平均パルスの幅よりも遅い。前記回路が生成するオフセット電圧をモニタして、診断手段とする。光流動セル１７０から出るトリガパルスのカウントは、１６ビットの専用カウンタ２基で行う。一方のカウンタは、ゲート済み細胞（ゲーティング基準により排除されなかった細胞）用であり、もう一方は、下位しきい値要件を満たす細胞の総数を数えるカウンタである。Ｆ．ＨＧＢ信号の処理第１８図は、単純化したヘモグロビン（ＨＧＢ）検出システムのブロック線図である。作成したサンプル中に含まれるヘモグロビンの濃度は、例えば、ｇ／ｄｌ単位で測定される。この濃度は、サンプルによる、グリーンの波長域（約５４０ｎｍ）にある光の吸光量に比例する。光路は電流制御光ダイオード３２２、トランスデューサチャンバ３３８、フィルタ３２６（約５４０ｎｍ）、およびフォトダイオード３２４で構成されている。フォトダイオードの出力電流は、受光された光エネルギーに比例し、トランスレジスタンス増幅器３３２で増幅される。トランスレジスタンス増幅器３３２の出力は、ＡＤＣモジュール５１６に送られる。トランスデューサチャンバ３３８で透明な基準溶液を測定する場合に発生する電圧と、ヘモグロビンを含む調製サンプルを測定する場合に発生する電圧との差が、ヘモグロビンの濃度を表わす。Ｇ．タイムスタンプ信号処理モジュール５１４では１６ビットのカウンタ（図示せず）を利用して、分解能が約０．５ｍｓのタイムスタンプを生成する。タイムスタンプ値は、各自動シーケンス反復により発生し、ＡＤＣモジュール５１６で得られる有効データとともに保存する。Ｈ．動作制御第２７図は、動作制御サブシステム５０４の実施の形態を示すブロック線図である。分析装置６４の流れシーケンスおよび自動サンプル処理操作は、動作制御サブシステム５０４により制御される。図示したように、動作制御サブシステム５０４は、モータ処理モジュール５２０（ＭＰＭ）、バルブ制御モジュール５２２（ＶＣＭ）、流体センサモジュール５２４（ＦＳＭ）、およびデジタル入力モジュール５２６（ＤＩＭ）を備えている。ＭＰＭ５２０は、二つの独立したシリアルリンク５３０、５３２（５００ＫＢ）を介してＣＰＭ５００と通信を行う。各ＭＰＭ５２０は、ステッパモータ５３４を最大１２基、制御することが好ましい。ＶＣＭ５２２は、分析装置６４のバルブすべてを制御する。ＤＩＭ５２６は、デジタル入力（スイッチ、光センサ、および磁気センサ）をすべて監視する。ＦＳＭ５２４は、流体センサをすべて監視する。ＶＣＭ５２２、ＤＩＭ５２６、およびＦＳＭ５２４は、好ましくは半二重差分（half-duplex differential）シリアル周辺バスを介してＣＰＭ５００と通信を行うインテリジェントモジュールである。このバスには、さらに周辺モジュールを追加することができる。１２．ソフトウェアソフトウェアは、分析装置の流れシーケンス、事象のタイミングおよびシーケンス、データ収集、および測定データの有意味な数値への変換など、細胞分析装置６０の主な動作を制御する。ソフトウェアは、ＲＡＭ、ＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、ＳＲＡＭなど、分析装置６０内の適当なメモリに存在している。第２図に円で示すように、ソフトウェアの要素は、６つのドメイン（domain）に分割されていることが好ましい。オペレータインタフェースドメイン９０は、データステーションに取り付けたすべてのオペレータ制御入力装置、データステーションの報告すべての定義および生成、およびプリント出力すべての定義を初めとする、データステーション６８とユーザとの相互作用を調整する。データステーションの操作ソフトウェア９２は、サンプル処理、データ管理、セキュリティ、分析装置モジュールおよび実験室情報システム（ＬＩＳ）との通信、およびプリント出力の生成を制御する。アルゴリズムソフトウェア９６は、所望の組み合わせの応用数学的演算手順を内蔵している。アルゴリズムは、サンプルデータの解析、グラフィックデータや数値データへのリストモードデータの変換、およびグループ分けした数値結果の統計解析に応用される。このアルゴリズムは、個々の細胞の種類や状態を特定するクラスタリング（clustering）技法を備えていることが好ましい。分析装置操作ソフトウェア（ＡＯＳ）９８は、分析装置のモジュールの電子装置（ハードウェア）、データ収集、およびデータステーションモジュールへの通信を制御する。また、ＡＯＳ９８は、分析装置の流れシーケンスなど、分析装置の作動のタイミング設定およびスケジュール設定も制御する。流れシーケンス（ＦＳＱ）ソフトウェア１００は、自動サンプル処理プロトコルおよび血液／免疫総合試験の実行を含み、分析装置６４に流体を流す役目をする機械要素を制御する。ファームウェア１０２は、分析装置６４や圧縮空気ユニット７２の各種ハードウェアモジュールのＥＰＲＯＭ常駐デバイスコントローラ網を備えている。オペレータインタフェース（ＯＩ）、データステーション操作ソフトウェア（ＤＳＯＳ）、およびアルゴリズムでは、プラットフォームとしてデータステーションモジュール６８を使用する。ＡＯＳ９８、ＦＳＱソフトウェア１００、およびファームウェア１０２は、分析装置６４に常駐し、プラットフォームとして使用する。好ましいソフトウェアは、多重タスク、マルチスレッド（multithreade d）のアプリケーションである。ＡＯＳ９８は、ＣＰＭ５００内に常駐し、分析装置６４の作動の詳細を制御する主制御装置になっている。ＡＯＳ９８は、ステッパモータのタイミング設定、アナログ／デジタル変換、真空／圧力閉ループのモニタ／制御、バルブ制御、およびデジタルセンサ入力の役目を果たすスレーブ（slave）マイクロコントローラのいくつかと通信を行う。さらに、ＡＯＳは、接続相手であるデータステーション６８との、データ、ステータス、および制御に関する通信も行う。ＡＯＳ９８は、Ｍｏｔｏｒｏｌａ６８３０２ＣＰＵチップ上で実行することが好ましい。ＡＯＳのファームウェアは、外部ＥＰＲＯＭに保存されており、ダウンロードされたＡＯＳと流れシーケンスは、オンボードＲＡＭに保存されている。第２９図および第３０図に、ＡＯＳ操作の実施の形態を示す。ＡＯＳ９８は、流れシーケンスを実行する多重タスク特性を備えている。ＡＯＳは、データステーションから流れシーケンスをダウンロードし、メモリに保存する。データステーション６８からの指示により、ＡＯＳは、所望のサンプル試験に必要な流れシーケンスを実行する。各流れシーケンスには、スケジュールにしたがった、複数のアナライザ要素の作業が必要になる。第１３Ａ図から第１３Ｆ図は、一つのユニットで血液分析サンプルおよび免疫サンプルの作成および測定を統合、自動化する流れシーケンスの例のタイミング線図である。最上部の水平軸は、図を見るとわかるように秒単位で時間を表し、左端の垂直軸には、分析装置６４のサンプル処理および測定要素を示してある。線図の桝目は分析装置要素の作動を示すものである。第１３Ａ図から第１３Ｆ図の左側垂直軸に沿って示した各要素は、流れシーケンスにしたがって特定の作業を行う。要素は、作業を終了すると下流の要素が現在のサンプルに対する作業を終了するのを待たずに、次の指示を探し始める。ＡＯＳは、一組のカウント関連ハードウェア設定点およびパラメータを維持する。カウントの種類（ＣＢＣＷＢＣ、ＣＢＣＯＰＬＴなど）ごとに、一組を対応させる。また、診断目的ごとに一組を対応させる。ＡＯＳは、データステーション６８からダウンロードした、このカウント関連ハードウェア設定点およびパラメータの組のいずれかを収容する。データステーション６８または流れシーケンスソフトウェアから出るコマンドにしたがって、いずれかの組が起動される（すなわち、ハードウェアを構成するのに使用される）。カウント関連ハードウェア設定点およびパラメータのほか、ＡＯＳは、カウントとは無関係な事象パラメータの集合を維持する。ＡＯＳは、データステーション６８から供給されるこのパラメータを修正したパラメータを収容する。カウント関連のパラメータの場合とは対照的に、ＡＯＳは、この値を直接ロードする。流れシーケンスを開始する際、ＡＯＳ９８は、サンプルを吸引できることを明らかにする。これは、オペレータによるプッシュボタン操作またはオートローダ機構から出るコマンドに基づいて行われる。サンプルについて、分析装置６４が収集している情報は、すべてデータステーション６８に送付される。データステーション６８は、サンプルに対して実施すべき測定に関する情報に応答する。この応答に従い、さらには分析装置６４の状態（すなわち、試薬、保温、流れシーケンス吸引可能／不可能フラグ）と関連して、ＡＯＳは、サンプルの吸引を進めるかどうか判断する。吸引が行われるかどうかにかかわらず、ＡＯＳは、データステーション６８にサンプルの状態を知らせる。流れシーケンスに保温段階が必要な場合は、ＡＯＳにより、流れシーケンスは、サンプル処理領域１１０の未使用サイト１３２を保温用として「割り当てる(a llocate)」ことができるようになる。サンプルの種類（したがって、保温終了時に作動する適切な流れシーケンス）が、割り当て作業の一部として規定される。保温が開始されると、ＡＯＳは保温サイト１３２に関連した保温タイマを始動する。サンプル識別子、サンプルの種類、および保温時間も、各保温サイト１３２と関連している。ＡＯＳは、作動している保温タイマを定期的に更新し、保温時間の終了を認識する。保温時間が終了すると、ＡＯＳは、その試験の流れシーケンスを引き続き実行する。ＡＯＳは、各保温サンプルの総保温時間および保温サイト番号（位置）を各サンプルに対する各試験の蓄積データの一部として報告する。保温サンプルを処理し、保温サイトを洗浄、乾燥した後、サイトに再びサンプルを配分できることが流れシーケンスによりＡＯＳに対して通知される。適切な保温トレイ１２４がない場合、ＡＯＳ９８は保温領域１１８へのサンプルの吸引を阻止する。保温トレイ１２４または試薬モジュール１２２での変更は、データステーション６８に伝達される。吸引が不可能な場合は、ＡＯＳはデータステーション６８に注意メッセージを送る。データステーションの要求の際、ＡＯＳは、分析装置６４のすべてのサイトの現在の保温状態を通知する。この情報には、保温時間、サイトの状態（清潔／汚損）、サイトの使用回数が含まれる。流れシーケンスインタプリタ（interpreter）１００は、複数の流れシーケンスを同時に実行することができる。流れシーケンスインタプリタの働きにより、流れシーケンスは様々な「フラグ」の設定および試験中の作動を調整する。流れシーケンスのロジックは、同時に進行しているその他の流れシーケンスにより設定、解除されるフラグの状態に基づいて決定を行う。流れシーケンスインタプリタは、固定または可変のサンプル事象のカウント時間をサポートする。可変事象のカウント時間は、ソフトウェアまたはハードウェアの設定点により設定される。可変事象のカウント時間は、流れシーケンスにより規定される上限を設けることが好ましい。流れシーケンスインタプリタの働きにより、流れシーケンスは事象カウントおよびデータ収集時間を開始する。データ収集時間中に生成されたデータは、ＡＯＳにより自動的にデータステーション６８に送付される。データステーション６８に送付されたデータには、少なくともサンプル識別子、ハードウェアカウンタ、リストモードデータ、および保温時間（ない場合もある）を含むことが好ましい。カウントの種類には、以下のものがあることが好ましい。 −ＣＢＣ網赤血球に関連した測定値を除くあらゆる血液分析測定値を含む完全血液カウント −ＲＥＴＩＣＳ −ＳＵＢＳＥＴ／ＰＨＥＮＯＴＹＰＥＡＯＳにより、分析装置６４は、流動セル／トランスデューサ１７０、１７４、１７８でカウントを重複して行うことができる。したがって、分析装置の作動を多重化およびパイプライン化すると、装置のスループットが最大になる。分析装置６４を廃棄物（図示せず）およびバルク試薬保存（１９３）用の外部容器に接続する。ＡＯＳは廃棄物容器が一杯になる時期やバルク試薬保存容器１９３が空になる時期を検出するセンサをモニタする。状態が改善されるまで、ＡＯＳ９８は、さらにサンプルが吸引されるのを防止する。ＡＯＳは、各抗体試薬モジュール１２２内の不揮発性シリアルアクセスメモリの読み出し、修正を行う。各抗体試薬モジュールメモリには、少なくとも以下の情報が保存されている。 − ロット番号 − 使用期限 − 試験の種類（パネル番号） − モジュール番号 − モジュールで使用する凹部の数 − モジュールの用途 − 初期化済みフラグ − 冗長／エラー制御抗体試薬モジュール１２２からの読み取りは、通常の分析装置の初期化の一部として行われる。読み取り後、モジュール１２２の状態に影響を及ぼす操作は、モジュールのメモリに記録される。ＡＯＳ９８は、分析装置のステッパモータ５３４の制御を行うモータプロセッサモジュール５２０と通信を行う。初期化の際に、ＡＯＳは、モータプロセッサモジュール５２０をリセットする。ＡＯＳは、分析装置６４の各モータの位置を追跡し、制御モータプロセッサモジュール５２０でこの情報を確認する。位置の食い違いは、データステーション６８に通知される。電源投入自己試験が問題なく終了すると、分析装置６４は、データステーション６８からダウンロードされたＡＯＳ操作ソフトウェアを受け入れる。ソフトウェアのダウンロードの終了時点で、スタートアドレスが、実行を開始するアドレスを指定するデータステーション６８から供給される。１３．サンプル処理の例Ａ．一般的なサンプル処理以下のパラグラフでは、細胞分析システム６０の作動例を詳細に説明する。以下の説明を参照することにより、システム６０の詳細の理解が深まる。理解を助けるために具体例について述べるが、システム６０は、本発明の趣旨から逸脱することなく、その他の方法を実行する場合もあることを忘れないようにしていただきたい。細胞分析システム６０の自動サンプル処理プロトコルは、サンプル作成、サンプル測定、およびサンプル分析の３段階にわけて考えることができる。各段階のプロトコルは、試験に左右される。例えば、ＷＢＣ差の準備、測定、および分析は、血小板、網赤血球、リンパ球サブセットなどの作成、測定、および分析とは異なる。ただし、一般的は手順は、各段階に共通である。第一の段階である自動サンプル作成では、分析装置６４が、サンプルを吸引し、指定のカップにサンプルを移し、必要に応じて希釈液または試薬あるいはその両方とサンプルを混合して測定用のサンプルを作成する。サンプルの作成には、サンプルを希釈することだけが必要であり、希釈手段は、ＲＢＣを溶解する溶解液でもある。網赤血球試験の場合と同様に、サンプル作成段階には、二つの操作を伴う。すなわち、第一の操作である希釈液／シース試薬による予備希釈と、既知の量の蛍光染料を添加する第二の希釈操作を伴う。リンパ球サブセット試験など、その他の試験では、作成段階に多数の操作を伴い、試薬による保温延長が必要である。保温延長を行う場合、吸引プローブアセンブリ１４８は、サンプルを移動カップ１４０に注入し、そのあと、次のサンプルを吸引する準備位置に戻る。作成作業の残りの操作は、保温プローブアセンブリ１５２が実行する。これらの操作には、保温サイト１３２で、サンプルを一つまたは複数の部分に分割する操作、分割した各部分に特定のＭａｂ試薬を添加する操作、および保温操作などがある。このような操作の大半は、通気／吸引プローブアセンブリ１４８が後続するサンプルの処理を行っている間に、保温プローブ１５２によって行われる。保温が完了すると、保温プローブアセンブリ１５２は、保温したサンプルの一部と溶解試薬を混合してサンプル作成段階を終了し、前記サンプルの一部をいつでも光流動セルに送って測定が行えるように赤血球を除去する。いつでも測定を行えるようになっているサンプルがサンプルカップに入っている場合に、第二段階である測定段階が始まる。次にサンプルは、サンプルカップの底部から所望の測定トランスデューサ１７０、１７４、および１７８に接続されたチューブ網１８２を介して送られる。トランスデューサを出たサンプルは、廃棄物容器（図示せず）に送られる。各試験ごとに、適切な検出器で信号を感知し、さらに増幅、処理、デジタル化を行って、当該試験に対応するリストモードファイルに保存する。第三の段階である分析段階は、リストモードデータによって始まる。様々な粒子および細胞の種類を、各試験に適した検出器に対応する軸を備えた特性空間に写像するアルゴリズムをデータに適用し、特有の母集団クラスタを特定して各クラスタ内の細胞数を数える。最終的な出力は、グラフィック報告または数値報告あるいはその両方となり、細胞の体積、ヘモグロビン含有量、母集団の種類、または細胞のその他の特性の尺度、または関数となる。通常、出力は、絶対値と百分率の両方で定量される。例えば、細胞のサブタイプの母集団は、親細胞に対する百分率として報告され、また、血液１マイクロリットル当たりの事象としてカウントが行われる。保温したサンプルの分析を行う場合、必ず、最初に従来の血液分析試験の分析が行われる。保温したサンプルの測定が終了すると、保温サンプルの分析が行われ、総合分析が終了する。サンプル処理におけるサンプル作成段階および測定段階の試験プロトコルは、複雑さが異なる各種流れシーケンスによって自動的に実行される。保温の延長を伴う試験では、流れシーケンスにより、保温試験と非保温試験が一体となり、その結果、分析装置６４は、サンプル保温時には、後続する試験を必ず行うことができる。保温サンプルがいつでも測定できる状態にある場合、サンプルの処理はそれ以上行われず、保温サンプルの測定および分析が実施される。Ｂ．ヘモグロビンサンプルの処理第５図および第１２図を参照すれば、以下の説明の理解が、なお一層深まる。例えば、サンプル１６６の一部、約１８．７５マイクロリットルを、吸引プローブ１５６によりＨＧＢカップ１４２に注入し、このカップでサンプルは、多量のＨＧＢ溶解試薬と混合され、希釈率は、約２００：１となる。溶解時間約２０秒の経過後、カップ内には希釈されたヘモグロビンだけが残り、このヘモグロビンは、蠕動ポンプ２４６により、ライン１８２を通ってヘモグロビントランスデューサ１７８に送られ、測定が行われる。トランスデューサチャンバ３３８内のへモグロビンサンプルの光透過率は、発光ダイオード光源１２２およびフォトダイオード３２４により測定される。Ｔで表わされる透過率は、増幅、処理、デジタル化され、保存される。この透過率は、次に分析段階でアルゴリズムＡ＝ｌｏｇ（１／Ｔ）により、吸光量に変換され、さらに、所定の較正器により、ヘモグロビン濃度ＨＧＢ、すなわちサンプル１デシリットル当たりのグラム数に変換される。ＲＢＣインピーダンス試験の結果とヘモグロビン試験を併せて利用すると、以下の測定パラメータおよび較正パラメータを決定することができる。ＨＧＢ＝（ヘモグロビン濃度）ＭＣＨ＝ＨＧＢ×１０／ＲＢＣ（平均細胞ヘモグロビン）ＭＣＨＣ＝ＨＧＢ×１００／ＨＣＴ（平均細胞ヘモグロビン濃度）上式中、ＲＢＣは、赤血球のカウント（１μｌ当たりのＲＢＣ数）、ＨＣＴは、ヘマトクリット（hematocrit）値（赤血球から成る血液サンプルの体積百分率）であり、両方ともインピーダンストランスデューサ１７４で測定する。Ｃ．ＲＢＣおよび血小板サンプルの処理第４図および第５図を参照されたい。サンプル１６６の一部、約１８．７５マイクロリットルを、吸引プローブ１５６によりカップ１３４に注入し、このカップでサンプルは、希釈液／シース試薬と混合され、希釈率は、約４２０：１となる。希釈液／シース試薬は、インピーダンス流動セル１７４および光流動セル１７０内の層流システムにおけるシースキャリアとしても、またサンプル希釈液としても妥当であり、その結果、ＲＢＣおよび血小板は、各トランスデューサ内の一つのファイルを移動する。成分には、小さい赤血球と大きな血小板との明確な区別が可能になる表面活性剤などがある。ＲＢＣカップ１３４内での混合が終了した後、希釈サンプルは、ポンプ２２０、バルブ２１０、２１２、注射器アセンブリ２０４、２２４によりインピーダンストランスデューサ１７４（第１０Ａ図および第１０Ｂ図）に送られる。インピーダンストランスデューサ１７４（第１７図）で、血小板のサイズ分類およびカウントが行われる。また、血小板は、光トランスデューサ１７０にも送られ、ここでカウントが行われる（第１６図）。光トランスデューサ内の照明領域が小さく、またノイズが低いため、光による血小板のカウントは精度が高い。光トランスデューサ１７０での血小板のカウント値は、患者データとして報告され、インピーダンストランスデューサでのカウントは、装置の性能をモニタする診断ツールとして使用される。インピーダンストランスデューサ１７４は、血小板の大きさのパラメータを報告するために使用される。血小板をノイズと区別する下位しきい値、および血小板をＲＢＣと区別する上位しきい値を設定する。パルスの振幅をフィルタにかけ、増幅、デジタル化して、リストモード事象として保存する。このデータから、以下の血小板の大きさのパラメータの計算、および血小板のヒストグラムの報告にアルゴリズムを適用する。血小板カウント（ＰＬＴ）平均血小板体積（ＭＰＶ）血小板分布幅（ＰＤＷ）血小板ｃｒｉｔ（ＰＣＴ＝ＭＰＶ×ＰＬＴ）血小板濃度（装置の診断に使用）希釈サンプルは、ＲＢＣカップ１３４から、バルブ２３６、２３８、ポンプ２３２、および注射器２４０、２０６により、光トランスデューサに送られる。血小板は、ＰＳＳ（偏光側方散乱）光パラメータおよびＩＡＳ（中間角散乱）光パラメータを利用して、二次元特性空間で判定される。検出器３８４および４０２から生成するパルスは、処理、デジタル化され、アルゴリズムによる処理を目的としてリストモードファイルに保存される。血小板測定のサンプル流量は、約２．５マイクロリットル／秒であり、流動セルによるカウント時間は、通常の患者の場合、約６秒である。カウントの統計値を向上させるため、このカウント時間は、低カウントサンプルについては自動的に延長される。光トランスデューサから得られるカウントは、血小板濃度（ＰＬＴ）である。インピーダンストランスデューサ１７４は、ＲＢＣの大きさおよびカウントのパラメータを決定するのにも利用される。インピーダンストランスデューサ１７４内で血小板を検出するのに使用する上位しきい値は、ＲＢＣカウント用の下位しきい値ともなる。このしきい値を超えるパルスを処理、デジタル化し、ＲＢＣリストモードファイルに保存する。以下のＲＢＣパラメータの計算、およびＲＢＣのヒストグラムの報告にアルゴリズムを適用する。赤血球濃度（ＲＢＣ）平均細胞体積（ＭＣＶ）赤血球分布幅（ＲＤＷ）ヘマトクリット（ＨＣＴ）Ｄ．ＷＢＣ示差サンプルの処理第４図および第５図を参照して説明すると、患者サンプル１６６の一部、約３７．５マイクロリットルを、サンプル吸引プローブ１５６により、ＷＢＣ溶解液約８５０マイクロリットルが入ったＷＢＣカップ１３８に注入する。溶解は、多目的を達成する一試薬／一段階操作であり、損傷しやすい白血球の構造を保護し、同時に赤血球をほぼすべて効率的に溶解するには、十分である。この二つの目的は、溶解時間を１１秒以上に延長しなければならないヘモグロビン異常のサンプルでも達成できる。好ましい実施の形態において、溶解液は、末梢血液に含まれることがある有核赤血球（ＮＲＢＣ）を効果的に標識する、低濃度の活性核染料を含有している。屈折率がシースの屈折率に適合して約０．１％朱満となるように、溶解の化学作用をあらかじめ定めてある。通常、溶解液とサンプルとの混合物は、カップ１３８内に約１１秒間とどまり、カップ内でサンプルは溶解され、高温で撹拌される。好ましい実施の形態では、溶温度を４２℃±３℃に制御する。ここで、カップ１３８の内容物を、パイプで直接光流動セル１７０に送る。第１９図および第２０図を参照して説明すると、細胞が希釈液／シース３０４（第１６図に図示）に取り囲まれたサンプル層流になって一つのファイル内のレーザ照明を通過するように、溶解液の添加により希釈された細胞の流れが、光トランスデューサ１７０を通過すると同時に測定が始まる。照明領域は、流体力学的に一点に集束させた細胞の流れにより、流れの軸に対して垂直な２方向を取り囲まれ、また約１７ミクロンのレーザビームの垂直ビーム腰部により、流れの軸に平行な１方向を取り囲まれている。この試験時のサンプルの流量は、約２．５マイクロリットル／秒であり、ＷＢＣおよびＮＲＢＣ細胞の対応照明感知体積は、寸法が約８０μｍ×５μｍ×１７μｍの楕円形の円柱に近い。約１７μｍの寸法は、円柱の軸にそって測定したものである。照明領域内にある細胞は、フォトダイオード３８２および３８４、フォトマルチプライヤ管４０４、および三次元の特性空間内で作動する独自の三重しきい値トリガ回路によって検出される。すなわち、前記回路は、三つのパラメータＡＬＬ（軸光損失）、ＩＡＳ（中間角散乱）、およびＦＬ３（赤色蛍光）を処理し、ＡＮＤ／ＯＲ論理を利用して信号を検定し、デジタル化を行う。検定に通った信号は、ＩＡＳしきい値よりも大きく、かつＡＬＬしきい値またはＦＬ３しきい値よりも大きくなければならない。この独自のトリガ回路と溶解特性（ＮＲＢＣ核を迅速に染色させる平衡固定剤を含む）を組み合わせると、ＷＢＣ示差細胞のカウントを正確に行い、ＮＲＢＣのカウントを前記カウントから除外することができる。この試験では、ＤＮＡの断片、ＲＢＣの基質、および血小板から放出される背景信号など、通常よくある蛍光、非蛍光両方の背景信号の干渉を受けずに、ＷＢＣ母集団およびＮＢＲＣのカウントを行う。三重しきい値についての基準を満たす細胞が照明領域を通過する場合、検出器３８２、３８４、４００、４０２、４０４からパルスが生成される。このパルスの振幅をフィルタにかけ、増幅し、デジタル化し、さらにＡＬＬ、ＩＡＳ、ＦＬ３、ＰＳＳ（偏光側方散乱）、およびＤＳＳ（復偏光側方散乱）からなる対応五次元特性空間にリストモードで保存する。流動セル１７０による通常のカウント時間は、約１０秒である。上記の流量および希釈率で、血液１マイクロリットル中のＷＢＣの通常のカウントが約７０００の場合、得られる事象カウント率は、約５０００となる。カウントが低いサンプルの場合、このカウント時間を自動的に延長して、測定の統計的精度を向上させることができる。測定時間の終了時に、サンプルの流れをパイプで廃棄物に導き、プローブ１５６の汚れを除去し、乾燥させて次のサンプルを処理する準備をする。リストモードデータ（ＡＬＬ、ＩＡＳ、ＦＬ３、ＰＳＳ、およびＤＳＳ）の内、検定を通った５つのパラメータにアルゴリズムが適用され、約３０秒未満の処理時間内に、以下のタイプの細胞の定量化またはフラグ付けあるいはその両方が行われる。その対象となるものには、白血球濃度（ＷＢＣ）、好中球濃度（ＮＥＵ）および百分率（％Ｎ）、リンパ球濃度（ＬＹＭＰＨ）および百分率（％Ｌ）、単核細胞濃度（ＭＯＮＯ）および百分率（％Ｍ）、好酸球濃度（ＥＯＳ）および百分率（％Ｅ）、好塩基球濃度（ＢＡＳＯ）および百分率（％Ｂ）、有核赤血球（ＮＲＢＣ）およびＷＢＣの百分率（％ＮＲＢＣ）、ブラスト濃度（ＢＬＳＴ）、未成熟顆粒球濃度（ＩＧ）、変異リンパ球濃度（ＶＡＲＬ）、バンド濃度（ＢＡＮＤ）がある。Ｅ．リンパ球サブセットサンプルの処理第３図、第４図、および第５図に示すように、好ましい実施の形態では、リンパ球サブセット試験のサンプル処理には、以下の手順が必要である。まず、吸引プローブ１５６が、サブセット試験に足りるだけの量の全血サンプルを吸引し、移動カップ１４０に注入する。必要な血液量は、約５０Ｎマイクロリットルである。ここでＮは、試験に必要なＭａｂ（モノクローナル抗体）対の数である。標準パネルでは、Ｎは５となり、したがって、カップ１４０への必要注入量は、約２５０マイタロリットルである。次に吸引プローブ１５６は洗浄され、以後のサンプルを処理するために、サンプルステーション１６６に戻される。一方、保温プローブアセンブリ１５２が、引き続きサブセットサンプルの処理を行う。保温プローブ１６０は、移動カップ１４０から血液を吸引し、保温トレイ１２４にある５つのシーケンスカップ１３２にそれぞれ約４０マイクロリットルずつを注入する。次に保温プローブ１６０は洗浄されて試薬モジュール１２２に移動され、第一のＭａｂ対１２８を約２０マイクロリットル排出し、第一の対応する保温カップ１３２に注入する。保温プローブ１６０は再度洗浄を受けた後、試薬モジュール１２２に戻され、第二のＭａｂ対１２８から別に試薬約２０マイクロリットルを第二の対応する保温カップ１３２に移す。必要な保温カップのそれぞれに、保温用の血液とＭａｂとの混合物が注入されるまで、上記の操作が継続される。次に保温プローブ１６０は、洗浄、乾燥され、第一のＭａｂ／血液サンプルの保温が終了するのを待つ。保温されたサブセットサンプルが以下述べる処理を受けるまで、サンプル吸引アセンブリ１４８の作動はすべて一時中止される。保温プローブ１６０は、ＷＢＣ溶解試薬、約６７０マイクロリットルが入ったＷＢＣカップ１３８に、第一の保温サブセット１３２を約３０マイクロリットルを注入する。保温サンプルを約４２℃±３℃で約１１秒間溶解し、撹拌すると、第一の保温Ｍａｂ／血液対は、いつでも測定できる状態になる。この時点で、カップ１３８の内容物をパイプで直接光流動セル１７０に送る。細胞の流れが、流動セル１７０のレーザに照らされた領域とぶつかると、測定が始まる。データは、システムの電子装置および分析装置のソフトウェアを介して、光検出器３８２、３８４、４００、および４０２から得られる。このデータは、各Ｍａｂ／血液試薬混合物ごとに、リストモードで保存される。サンプルは、流れの中の細胞が、一つのファイルのレーザ照明領域を通過するように希釈されている。各細胞は、四つの特性、すなわちＡＬＬ（軸光損失）、ＩＡＳ（中間角散乱）、ＦＬ１（グリーンの蛍光）、およびＦＬ２（オレンジの蛍光）を示すパルスによって検出される。各パルスの振幅を増幅し、デジタル化し、適切な空間軸上にリストモードで保存する。分析は、サブセットの百分率の計算に使用する保存四次元データにアルゴリズムを適用することから始まる。第一のサブセット測定のカウント時間が経過した後、プローブ１６０は、洗浄、乾燥され、次の保温サブセット１３２に戻り、サブセットの測定、分析がすべて終了するまで処理を繰り返す。百分率および血液１マイクロリットル当たりの絶対カウントが得られる最終分析は、上記のサブセット測定およびＷＢＣ示差血液分析測定がすべて一体になったものである。流動セル１７０による通常のカウント時間は、約１０秒である。カウントの小さいサンプルの場合、このカウント時間を自動的に延長して、測定の統計的精度を向上させることができる。サンプルの測定が終了した後、サンプル吸引アセンブリ１４８は再度作動し、いつでも次のサンプルの処理が行えるようになる。本明細書に開示する自動サンプル作成では、各種の免疫および表現形分類試験に使用する様々な抗体パネルを採用している。リンパ球サブセットについては、各パネルが、２色抗体セットを５つ備えていることが好ましい。各抗体セットは、ＦＩＴＣ（蛍光イソチオシアネート）などで標識した抗体（Ｍａｂ）、およびＰＥ（フィコエリトリン）などで標識した第二のＭａｂを備えている。抗体は、クラスタ指定（ＣＤ）番号で識別される。例をあげると、パネルには、少なくとも以下のリンパ球サブセットＭａｂが含まれている。ＨＩＶ患者のＣＤ４陽性細胞をモニタするのに使用できる簡略化したパネルも提案されている。このパネルには、少なくとも以下のＭａｂが含まれている。Ｍａｂの組み合わせ数えられる細胞の種類 CD45/CD14+CD13 リンパ球 CD3/CD4 Ｔ−ヘルパーサブセットその他の表現型分類Ｍａｂ試験では、Ｍａｂ対の数Ｎは、１でもよく、したがって、必要なサンプル量は、約５０マイクロリットルである。Ｍａｂはどんな組み合わせでも使用できる。必要なＭａｂ試薬の量が、サンプルに対して行った血液分析測定から得られるＷＢＣカウントの推定値に基づいている試験もある。例えば、白血球増加症や白血球減少症の極端な症例の場合、Ｍａｂ抗体の血液に対する割合を調整して、十分な抗体結合を確保するか、または過剰な脱抗体背景を防止する必要がある。血液分析測定には、保温が不必要なため、リンパ球サブセットサンプルの調整が終了するより前に、サンプルは流動セルトランスデューサの凹部を通過する。したがって、データステーションは、血液分析の推定カウントを計算し、分析装置６４が、これらの試験を実施するために、当該サンプルにより必要に応じてＭａｂのと血液との比を調整できるようにすることができる。Ｆ．網赤血球サンプルの処理網赤血球の試験の実施に関する第４ａ図および第５図を参照して説明すると、吸引プローブ１５６は、ＲＢＣカップ１３４内でＲＢＣと血小板希釈液との混合を終了すると、約４２０：１に希釈した血液約２００マイクロリットルを吸引し、ｒｅｔｉｃカップ１３６に注入する。ｒｅｔｉｃカップ１３６には、ｒｅｔｉｃ試薬が約６００μｌ入っていおり、その結果、希釈率は約１６８０：１となる。好ましい実施の形態の試薬は、アルゴンレーザの最大吸光波長が４８０ｎｍに近く、量子収量が高い蛍光染料を含有している。好ましい試薬は、迅速かつ一次元の蛍光ヒストグラムでＷＢＣとの混同が防止されるように、ＤＮＡおよびＲＮＡを迅速に染色する。前記染料は非常に感度が高く、分析装置６４で細胞内のＲＮＡの断片二つを検出することができる。この方法は、網赤血球カウント、約９０％まで線形である。適切な保温時間（上に述べた好ましい試薬の場合約２５秒）の経過後、または混合の終了直後、希釈血液とｒｅｔｉｃ試薬との混合物は、光流動セル１７０に送られる。別々の保温操作が必要でない場合、この移動操作の時期は、網赤血球を染色する十分な保温時間、すなわち２５秒の保温時間が得られるように設定できる。成熟赤血球および網赤血球を含む母集団が、流動セル１７０のレーザ照明領域を通過する際に、フォトダイオード３８４、およびグリーンの蛍光フィルタ４３０でＦＬ１向けに構成したフォトマルチプライヤ管４００により、サンプルの散乱特性および蛍光特性を測定する。パルスの振幅をフィルタにかけ、増幅、デジタル化し、さらにＩＡＳおよびＦＬ１で構成される二次元特性空間にリストモードデータとして保存する。流動セルによる測定時間は、約８秒であり、サンプルの流量は、約２マイクロリットル／秒である。血液１マイクロリットル当たりのＲＢＣが約５，０００，０００個である場合、好ましい実施の形態での測定値は、約５０，０００事象となり、これは、網赤血球濃度１％の場合の網赤血球事象５００個に相当する。適用するアルゴリズムは、ＷＢＣおよび血小板を除外し、負のＲＢＣヒストグラムに重ねた正の蛍光事象によって網赤血球のカウントを行う。この方法では、蛍光の強度により、網赤血球成熟指数（maturity index）ＲＭＩを特徴づける。好ましい実施の形態において、標準血液分析試験および網赤血球に関連したサンプルの処理時間は、約４５秒である。網赤血球試験の場合、以下のパラメータ、すなわち、網赤血球濃度（ＲＥＴＣ）、網赤血球百分率（ＲＢＣの％Ｒ）網赤血球の成熟指数（ＲＭＩ）が報告される。核染色の保温時間を延長する別の方法でも、先に述べたリンパ球サブセットの処理で使用したのと同様に保温プローブ１６０および吸引プローブ１５６を両方使用して、網赤血球の測定を行うことができる。本明細書で述べた実施の形態の用途を、例示のため多数掲げる。以下の記載は例示を目的として行うが、網羅的なものではない。特に以下で述べるのは、本明細書に開示した実施の形態を利用して行う、総合血球分析、ヘモグロビン分析、赤血球および血小板分析、白血球示差分析、網赤血球分析、リンパ球免疫表現型分類分析、Ｔヘルパーセットの測定、Ｔサプレッササブセットの分析、ＴおよびＢリンパ球の測定の方法である。ＲＡＭ、ＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、ＳＲＡＭ、またはその他の適切なメモリデバイス上にあり、記載した手順を実行するのに使用するソフトウェアを適当に参照する。ソフトウェアのソースコードは、請求項の記載の直前にあるアペンデックス（APPENDIX）ＡおよびアペンデックスＢに示してある。例で触れるステップ番号は、ソフトウェアのソースコードの適切な行にある「ステップ」番号としてもう一度掲げてある。第４４Ａ図から第４４Ｆ図、および第６３Ａ図から第６３Ｆ図を併せて参照すれば、ソフトウェアの諸部分についてより容易に理解できよう。実施の形態１：統合血液細胞分析本発明の一つの実施の形態を用いて全血サンプルの細胞分析を行うことができる。かかる分析手順の一例はこの通りである。このサンプル処理の諸段階はアペンデックスＡにあるようなソフトウェアによって制御される。データ分析の諸段階はアペンデックスＢにあるようなソフトウェアによって制御される。１ − オペレータが全血サンプルを入れたサンプル管をサンプル管ホルダに入れる。２ − 通気アセンブリが下がってサンプル管のキャップを貫く（ステップＡ１）。３ − 吸引プローブを下げてサンプル管内に入れる（ステップＡ２）。４ − ７５μｌの血液を吸引プローブ内に吸引する（ステップＡ３）。５ − 吸引プローブを管から引き上げ、上げる途中で清掃する（ステップＡ４）。６ − 吸入プローブが完全に引き上げられたかどうかを識別する（ステップＡ５）。７ − 吸入プローブがＨＧＢカップの真上の点に移動する（ステップＡ６）。８ − 通気アセンブリが上昇してサンプル管キャップから引っ込む（ステップＡ７の完了）。９ − 吸入プローブをＨＧＢカップに向かって少し下げる（ステップＡ８）。１０ − １８．７５μｌの血液をＨＧＢ分析のためＨＧＢカップ中に入れる（ステップＡ９）。１１ − 吸入プローブがＷＢＣカップの真上の位置に移動する（ステップＡ１０）。１２ − １８．７５μｌの血液をＷＢＣ分析のためＷＢＣカップ中に入れる（ステップＡ１１）。１３ − 吸入プローブがＲＢＣカップの真上の位置に移動する（ステップＡ１２）。１４ − 吸入プローブを下げてＲＢＣカップ内に入れる（ステップＡ１３）。１５ − 吸入プローブに希釈液を供給する弁を開く（ステップＡ１４）。１６ − ２０００μｌの希釈液を残りの１８．７５μｌの血液とともにＲＢＣ分析と血小板分析のため吸入プローブを通してＲＢＣカップ中に入れる（ステップＡ１５）。１７ − １０００μｌの血液／希釈液混合物をＲＢＣカップから吸入プローブ中へ吸入する（ステップＡ１６）。１８ − 吸入プローブを持ち上げ清掃にする（ステップＡ１７）。１９ − 吸入プローブをＲＥＴＩＣカップの真上の位置に移動させる（ステップＡ１８）。２０ − 吸入プローブをＲＥＴＩＣカップに向かって少し下降させる（ステップＡ１９）。２１ − 網赤血球分析のため２００μｌの血液／希釈液混合物を吸入プローブからＲＥＴＩＣカップ中へ入れる（ステップＡ２０）。６００μｌのｒｅｔｉｃ試薬を同時に固定ポートからＲＥＴＩＣカップ中に入れる。１８ − 通気アセンブリをそのホーム位置に戻す（ステップＡ２１）。１９ − 吸入プローブを洗浄カップに移動する（ステップＡ２２）。２０ − 吸入プローブを下げて洗浄カップ中に入れる（スプＡ２３）２１ − 吸入プローブを洗う（ステップＡ２４）。２２ − 吸入プローブを持ち上げる（ステップＡ２５）。２３ − 吸入プローブをそのホーム位置に戻す（ステップＡ２６）。２４ − この計器は以下の例（トップレベルアルゴリズムファイルｍｃＣＢＣＡｌｇｏｒｉｔｈｍ．ｃｃ）において詳述するように、ＨＧＢ、ＷＢＣ、ＲＢＣ、血小板および網赤血球分析のためのサンプル処理とデータ分析を行う。２５ − 分析の結果は第４５Ａ図から第４５Ｆ図に示すように記憶し報告される。実施の形態２：ヘモグロビン（ＨＧＢ）分析本発明の一つの実施の形態を用いて全血サンプルのヘモグロビン分析を行うことができる。かかる分析手順の一例は次の通りである。このサンプル処理の諸段階はアペンデックスＡにあるようなソフトウェアによって制御される。データ分析の諸段階はアペンデックスＢにあるようなソフトウェアによって制御される。１ − １５９０μｌのＨＧＢ溶解物をＨＧＢカップ中に入れる（ステップＨ１）。２ − １８．７５μｌの全血を実施の形態１の手順の一部として吸引プローブからＨＧＢカップ中に入れる（ステップＡ９）。３ − ４２７３μｌのＨＧＢ溶解物を流体の混合が起きるようにＨＧＢカップ中に入れる（ステップＨ２）。４ − 細胞が溶解するまで約７秒待つ。５ − 溶解したＨＧＢサンプルを計器配管中を移動させてＨＧＢトランスデューサへの移動を容易にする（ステップＨ３）。６ − 溶解したＨＧＢサンプルをＨＧＢトランスデューサにポンプで送る（ステップＨ４）。７ − ＨＧＢカップを排出して洗浄する（ステップＨ５）。８ − ＨＧＢカップをＨＧＢ溶解物で充填して基準サンプルを形成する（ステップＨ６）。９ − ＨＧＢトランスデューサ中の透光率を読み取る（ステップＨ７）。トランスデューサは溶解ＨＧＢサンプルを含み、この段階は血液サンプルと溶解物との混合の約１５−２０秒後に起こる。１０ − 基準サンプルを計器配管中を移動させてＨＧＢトランスデューサへの移動を容易にする（ステップＨ８）。１１ − 基準サンプルをＨＧＢトランスデューサ中に押し込む（ステップＨ９）。１２ − ＨＧＢ溶解物を注入するのに使用したシリンジポンプをリセットする（ステップＨ１０）。１３ − ＨＧＢカップを空にする（ステップＨ１１）。１４ − ＨＧＢ溶解物シリンジポンプのバックラッシュ（backlash）を除去する（ステップＨ１２）。１５ − ＨＧＢトランスデューサ内の基準サンプルの透光率を読み取る。（ステップＨ１３）。１６ − サンプルと基準サンプルからのデータをステップ１７−２２で記述する。後続の分析のためにファイルに記憶し、アルゴリズムファイルｍｃＲＢＣＡｌｇｏｒｉｔｈｍ．ｃｃによって実行する。１７ − 分析変数およびフラグを初期化する（サブルーチンＰａｒａｍＤｅｆａｕｌｔｓおよびサブルーチンＣｌａｓｓＦｌａｇＤｅｆａｕｌｔｓ）。１８ − ＨＧＢデータをデータファイルからローカルメモリに転送する。（サブルーチンＧｅｔＨＧＢＤａｔａ）。１９ − ヘモグロビン濃度を次式によって計算する。ＨＧＢ＝ｌｏｇ（基準測定値／サンプル測定値）×０．６４×（較正係数）（サブルーチンＤｏＨＧＢＡｎａｌｙｓｉｓ）。２０ − 後述するＲＢＣ分析によって求めたパラメータＲＢＣ（赤血球細胞濃度）およびＨＣＴ（ヘマトクリット値）を用いて細胞ＨＧＢパラメータを計算する（サブルーチンＤｏＨＧＢＡｎａｌｙｓｉｓ）。平均細胞ヘモグロビンＭＣＨ＝ＨＧＢ／ＲＢＣ×（単位変換係数）平均細胞ヘモグロビン濃度ＭＣＨＣ＝ＨＧＢ×（単位変換係数）／ＨＣＴ２１ − 異常なあるいは疑わしい結果がある場合、ＨＧＢフラグをたてる（サブルーチンＳｅｔＨｇｂＦｌａｇｓ）。２２ − 分析結果とフラグをメモリへ戻し（サブルーチンＳｅｎｄＮｕｍＲｅｓｕｌｔｓおよびサブルーチンＳｅｎｄＡｌｅｒｔＲｅｓｕｌｔｓ）、表示装置に報告する。実施の形態３：赤血球（ＲＢＣ）および血小板（ＰＬＴ）分析１７.５μｌの血液サンプルを本発明の試薬７４００μｌ（１：４２０希釈溶液）と迅速に混合し、０．５μｌの希釈サンプルを赤血球のカウントと容積測定および血小板のカウントのため１２秒間流体力学的に集束された（シースされた）インピーダンストランスデューサ１７４を通過させる。さらに、２．５μｌの希釈サンプルは正確で精密な血小板カウントのため６秒間シースされた光学的流動セル１７０を通過させる。血小板アルゴリズムで血小板母集団の境界を正確に定めることにより、脆い異常細胞の分画からのノイズ信号を光学的血小板カウントから除外する。本発明の一つの実施の形態を使用して全血サンプルの赤血球（ＲＢＣ）および血小板（ＰＬＴ）分析を上述のように行った。かかる分析手順の一例は次の通りである。サンプル処理の諸段階はアペンデックスＡに述べられているようなソフトウエアで制御される。データ分析の諸段階はアペンデックスＢに述べられているようなソフトウエアによって制御される。１ − ＲＢＣカップを空にする（ステップＲＢＣ１）。２ − ２．２ｍｌのＲＢＣ希釈液をＲＢＣ希釈液シリンジでＲＢＣカップに入れる（ステップＲＢＣ２）。３ − １８．７５μｌの全血と２０００μｌのＲＢＣ希釈液を、第一の実施の形態で述べたように吸引プローブでＲＢＣカップ中に入れる（ステップＡ１５）。４ − ３．２ｍｌの希釈液をＲＢＣ希釈液シリンジでＲＢＣカップ中に入れる（ステップＲＢＣ３）。５ − 血液と希釈液の混合物をＲＢＣ蠕動性ポンプでインピーダンストランスデューサの近傍へ移動させる（ステップＲＢＣ４）。６ − ＲＢＣ供給シリンジを充填する（ステップＲＢＣ５）。７ − 希釈液を光学トランスデューサ中に流し始める（ステップＲＢＣ６）。８ − 血液と希釈液の混合物を光学的蠕動ポンプで光学トランスデューサの近傍に移動させる（ステップＲＢＣ７）。９ − 血液と希釈液の混合物をＲＢＣ配送（delivery）シリンジでインピーダンストランスデューサに向かって進める（ステップＲＢＣ８）。１０ − 血液と希釈液の混合物を光学的配送シリンジを使用して約５２マイクロリットル／秒で光学トランスデューサ中に送る（ステップＲＢＣ９）。１１ − 光学トランスデューサ中の流速を約２．５マイクロリットル／秒に減速する（ステップＲＢＣ１０）。１２ − 血液と希釈液の混合物をＲＢＣ配送シリンジを使用してインピーダンストランスデューサ中に約０．５マイクロリットル／秒で送る（ステップＲＢＣ１１）。１３ − 光学トランスデューサからデータを収集する（ステップＲＢＣ１２）。ハードウエアゲートを設けて血小板に対応するデータのみを収集する。１４ − インピーダンストランスデューサからデータを収集する（ステップＲＢＣ１３）。ハードウエアゲートを使用して、血小板に関するデータ（＜３５ｆＬ）および赤血球に関するデータ（＞３０ｆＬ）を収集し、インピーダンススパイクの大きさに基づいて分離する。１５ − ＲＢＣカップを空にする（ステップＲＢＣ１４）。１６ − ＲＢＣ希釈液シリンジをリセットする（ステップＲＢＣ１５）。１７ − ＲＢＣカップを希釈液で充填する（ステップＲＢＣ１６）。１８ − ＲＢＣカップを空にする（ステップＲＢＣ１７）。１９ − ＲＢＣ希釈液シリンジからバックラッシュを除去する（ステップＲＢＣ１８）。２０ − 光学トランスデューサへのＲＢＣ管路を洗浄する（ステップＲＢＣ１９）。２１ − インピーダンストランスデューサを逆流水洗する（ステップＲＢＣ２０）。２２ − 他のＲＢＣ管路を水洗する（ステップＲＢＣ２１）。２３ − ＲＢＣ配送シリンジをリセットする（ステップＲＢＣ２２）。２４ − ＲＢＣ配送シリンジからバックラッシュを除去する。２５ − インピーダンストランスデューサおよび光学トランスデューサからのデータを、後続の赤血球分析（ステップ２６−３４、アルゴリズムファイルｍｃＲＢＣＡｌｇｏｒｉｔｈｍ．ｃｃによって実行）および血小板分析（ステップ３５−５０、アルゴリズムファイルｍｃＰＬＴＡｌｇｏｒｉｔｈｍ．ｃｃ）に使用するためファイルにセーブする。２６ − フラグとパラメータを初期化する（サブルーチンＰａｒａｍＤｅｆａｕｌｔｓおよびサブルーチンＣｌａｓｓＦｌａｇＤｅｆａｕｌｔｓ）。２７ − 赤血球インピーダンスデータをファイルから取り出し、局所記憶する（サブルーチンＧｅｔＲＢＣＤａｔａ）。２８ − 赤血球インピーダンス値の２５６区域（bin）ヒストグラム（度数プロット）を作成する（サブルーチンｍｍＨｉｓｔ２５６）。２９ − このヒストグラムのための区域しきい値を次のように設定する（サブルーチンＢｉｎＣｕｔ）：ａ．ヒストグラムモードを決定する。ｂ．そのモードのどちらかの側で、母集団がそのモードの母集団の０．０４倍より小さい第一の区域を識別する。これらの境界を判別値（ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｎｔ）と呼び、その間の値のみを分布パラメータＲＤＷ（赤血球分布幅）およびＭＣＶ（平均細胞体積）の計算に使用する。ｃ．低い方の区域しきい値の左（即ち赤血球体積のより低い値にたいして）に最初の谷あるいはゼロカウント区域が存在する場合は、それを識別し、カウントしきい値として設定する。このしきい値より大きい値は赤血球によるものと見なす。３０− ＲＢＣ（赤血球濃度）を計算する（サブルーチンＣａｌｃＲｅｄＣｏｎｃ）。ＲＢＣ＝（事象数）×（ＲＢＣである部分）×（希釈率）×（一致補正係数）× （較正係数）／（流量×測定時間）；ここで事象数は、ステップ１４においてハードウエアゲートによって検出された細胞数、ＲＢＣである比率は、カウントしきい値の右のヒストグラムカウントを全ヒストグラムカウントで割った商である。一致補正係数は細胞の二重カウントを補正するものであり、２−exp（未補正ＲＢＣ濃度×トランスデューサ体積／希釈率）に等しい。３１ − ＭＣＶとＲＤＷを計算する（サブルーチンＣａｌｃＲｅｄＤｉｓｔ）：ＭＣＶ＝（判別値間のヒストグラムの平均）×（区域あたり０．８ｆＬ）×（較正係数）ＲＤＷ＝ＲＢＣ体積の標準偏差／平均細胞体積（判別内の）３２ −ＲＢＣ関連のフラグを異常分析結果を示すように設定する（サブルーチンＳｅｔＲｂｃＦｌａｇｓ）。３３ − 数値結果とフラグＲＢＣ結果を記憶及び報告のためシステムに戻す（サブルーチンＳｅｎｄＮｕｍＲｅｓｕｌｔｓおよびＳｅｎｄＡｌｅｒｔＲｅｓｕｌｔｓ）。ＲＢＣの数値結果の例を第４５Ａ図から第４５Ｆ図に示す。３４ − ＲＢＣ体積値を記憶し報告するためヒストグラムを生成する（サブルーチンＭａｋｅＤｉｓｐｌａｙＨｉｓｔ）。ＲＢＣ体積ヒストグラムの例を第４５Ａ図から第４５Ｆ図および第４６図に示す。３５ − フラグとパラメータを初期化する（サブルーチンＰａｒａｍＤｅｆａｕｌｔｓおよびＣｌａｓｓＦｌａｇＤｅｆａｕｌｔｓ）。３６ − 光学的データおよびインピーダンス血小板データをファイルから取り出し局所に記憶する（サブルーチンＧｅｔＰＬＴｉＤａｔａおよびサブルーチンＧｅｔＰＬＴｏＤａｔａ）。インピーダンスデータは血小板体積を表すインピーダンス値からなる。光学的データは偏光側方散乱（ＰＳＳ）光学値および中間角散乱（ＩＡＳ）光学値からなる。３７ − インピーダンス血小板データの２６５区域ヒストグラムを生成する（サブルーチンｍｍＨｉｓｔ２５６）。これは０から３５ｆＬまでに及ぶ体積値を表す。３８ − ヒストグラムモードの両側に次のように区域しきい値を設定する（サブルーチンＢｉｎＣｕｔ）：ａ：モードの両側でモードのカウントの０．０４倍より小さいカウントの第一の区域を識別する。ｂ：元のしきい値より先にある第二のピークが存在するならば、それをそのピークとそのモードの間の谷と共に識別する。ｃ：第二のピークが存在し、谷の中のカウントがそのモードのカウントの０．０２倍より小さいならば、しきい値をその谷に移動させる。３９ − ＰＬＴｉ、インピーダンス値に基づいた血小板濃度（サブルーチンＣａｌｃＰＬＴｉＣｏｎｃ）：ＰＬＴｉ＝（事象数）×（血小板である比率）×（希釈率）×（較正係数）／（流量×測定時間）；ここで事象数は、ステップ１４においてハードウエアゲートで検出された細胞数、血小板である比率とは、左しきい値より右のヒストグラムカウントを全ヒストグラムカウントで割った商である。４０ − 血小板分布パラメータＭＰＶ（平均血小板体積）とＰＤＷ（血小板分布幅）を計算する（サブルーチンＣａｌｃＰＬＴＤｉｓｔ）：ＭＰＶ＝（しきい値間のヒストグラム値の平均区域数）×（区域あたり０．１３７ｆＬ）×（較正係数）ＰＤＷ＝（しきい値間の血小板体積値の標準偏差）／（平均血小板体積）４１ − インピーダンス関連の血小板フラグを異常分析結果に設定する（サブルーチンＳｅｔＰＬＴｉＦｌａｇｓ）。４２ − 光学的血小板データにｌｏｇ（ＰＳＳ）＝８．０のノイズゲートを適用する（サブルーチンＰＬＴｏＮｏｉｓｅＧａｔｅ）。４３ − 残りの光学的血小板データに次のように回帰帯域ゲートを適用する（サブルーチンＰＬＴｏＲｅｇｒｅｓｓＢａｎｄＧａｔｅ）：ａ．分析平面ｌｏｇ（ＩＡＳ）対ｌｏｇ（ＰＳＳ）においてノイズゲートより上の光学的血小板データに対し線形回帰およびこの回帰の標準誤差推定値を計算する。ｂ．上方回帰帯域ゲートを回帰線に平行に２．０標準誤差だけ上に引く。ｃ．下方回帰帯域ゲートを回帰線に平行に２．５標準誤差だけ下に引く。４４ − ノイズゲートより上で回帰帯域ゲート間の光学的血小板データを上方母集団があるかどうか検査する（サブルーチンＰＬＴｏＦｉｎｄＵｐｐｅｒＰｏｐｕｌａｔｉｏｎ）：ａ．残りの点をステップ４３の回帰線上に投影する。ｂ．２５６区域ヒストグラムを生成し、平均化により６４区域に減らし、７ピンボックスカー（boxcar）フィルタで濾過し、補間によって２５６区域に拡張する。ｃ．ヒストグラムの下部２／３中でモードを識別する。ｄ．第二のピークを求めてヒストグラムの上部１／４を探す。ｅ．ヒストグラムの上部１／４に第二のピークが存在するならば、このモードと第二のピークの間の谷に上方母集団ゲートを設定する。そうでなければ、上方母集団ゲートはヒストグラムの右端に設定する。このゲートより上にあるあらかじめ除外されなかった細胞が「上方母集団」である。このゲートより下にあるあらかじめ除外されなかった細胞が「下方母集団」である。ｆ．この上方母集団を一組の基準と比較して小赤血球を含むかどうか判定する。含むならば、警告フラグが設定される。４５ − 光学的に決定された血小板濃度（ＰＬＴｏ）を計算する（サブルーチンＣａｌｃＰＬＴｏＰａｒａｍｓ）：ＰＬＴｏ＝（事象数）×（血小板である比率）×（希釈度）／（流量×測定時間）ここで事象数は、ｌｏｇ（ＩＡＳ）対ｌｏｇ（ＰＳＳ）平面中の四角のハードウエアゲート内のハードウエアによってカウントされた光学的事象数である、血小板である比率は、上方母集団のカウントを上方母集団と下方母集団のカウントの合計で割った商である。４６ − ｐｌａｔｅｌｅｔｃｒｉｔ（ＰＣＴ、あるいは全血の血小板からなる分画）を計算する（サブルーチンＣａｌｃＰＣＴ）：ＰＣＴ＝ＰＬＴｏＸＭＰＶ×（単位変換係数）４７ − 光学的に決定された血小板パラメータに関連するフラグを異常結果を示すように設定する(サブルーチンＳｅｔＰＬＴｏＦｌｇｓ)。４８ − 光学的に決定された血小板パラメータに関連する数値結果とフラグを記憶及び報告のためシステムに戻す（サブルーチンＳｅｎｄＮｕｍＲｅｓｕｌｔｓおよびＳｅｎｄＡｌｅｒｔＲｅｓｕｌｔｓ）。血小板の数値結果の例を第４５Ａ図から第４５Ｆ図、第４７図および第４８図に示す。４９− 血小板インピーダンス値のヒストグラムを記憶及び報告のため生成する（サブルーチンＭａｋｅＤｉｓｐｌａｙＨｉｓｔ）。血小板インピーダンスヒストグラムの例を第４７図に示す。５０− 血小板光学値とゲートの撒布図を記憶及び報告のため生成する（サブルーチンＳｅｎｄＳｃａｔＲｅｓｕｌｔｓ）。血小板撒布図の例を第４５Ａ図から第４５Ｆ図、第４７図および第４８図に示す。実施の形態４：白血球（ＷＢＣ）の示差分析本発明の一つの実施の形態を用いて全血サンプルの白血球（ＷＢＣ）示差分析を行うことができる。かかる分析手順の一例は次の通りである。サンプル処理の諸段階はアペンデックスＡにあるようなソフトウエアで制御される。データ分析の諸段階はアペンデックスＢにあるようなソフトウエアで制御される。１− ＷＢＣカップモータがカップの混合運動を開始する（ステップＷ１）。２− １２７５マイクロリットルのＷＢＣ溶解液をＷＢＣ希釈シリンジでＷＢＣカップ中に入れる（ステップＷ２）。３− ３７．５マイクロリットルの全血を吸引プローブでＷＢＣカップ中に入れる（実施の形態１のステップＡ９）。４− ＷＢＣ希釈シリンジをリセットする（ステップＷ３）。５− ＷＢＣ希釈シリンジを移動させてバックラッシュを除去する（ステップＷ４）。６− 血液サンプルとＷＢＣ溶解液の混合の後約９．４秒待つ。７− 光学トランスデューサ中のシース流を開始化する（実施の形態３のステップＲＢＣ６）。８− 血液と溶解液の混合物をＨＧＢ蠕動ポンプを使用して光学トランスデューサ管へ移動させる（ステップＷ５）。９− ＷＢＣカップを空にして洗浄する（ステップＷ６）。１０− ＷＢＣサンプルが光学トランスデューサ中を通って流れるように弁を再調整する（ステップＷ７）。１１− 光学的配送シリンジを使用して約２７．６マイクロリットル／秒でＷＢＣサンプルが光学トランスデューサを通って流れ始める（ステップＷ８）。１２− ＷＢＣサンプルの流量を約２．５マイクロリットル／秒まで減少させる（ステップＷ９）。１３− 光学的ＷＢＣデータを光学トランスデューサで収集する（ステップＷ１０）。１４− 光学的配送シリンジをリセットする（ステップＷ１１）。１５− 光学的配送シリンジからバックラッシュを除去する（ステップＷ１２）。１６− 光学トランスデューサからのデータを後続のＷＢＣ示差分析に使用するためにファイルにセーブする（ステップ１７−ＸＸ、アルゴリズムファイルｍｃＷＢＣＡｌｇｏｒｉｔｈｍ．ｃｃによって実行される）。１７− ＷＢＣデータをファイルから取り出し、局所に記憶する（サブルーチンＧｅｔＷＢＣＤａｔａ）。このデータは各検出事象について、軸光損失（ＡＬＬ）値、中間角散乱（ＩＡＳ）値、偏光側方散乱（ＰＳＳ）値、復偏光側方散乱（ＤＳＳ）値および赤色蛍光（ＦＬ３）値からなる。ステップ１８−２２有核赤血球（ＮＲＢＣ）を識別する１８− ＦＬ３値の２５６区域ヒストグラムを生成する（サブルーチンｍｍＨｉｓｔ２５６）。１９− ｌｏｇ（ＦＬ３）＝１００の近傍の谷を識別することによって事象を「高ＦＬ３」と「低ＦＬ３」に分割する（サブルーチンＦｉｎｄＦｌ３Ｃｅｌｌｓ）。この分割の一例を第４９Ａ図と第４９Ｂ図に示す。２０− 高ＦＬ３細胞のＡＬＬ値のヒストグラムを生成する（サブルーチンｍｍＨｉｓｔ２５６）。このヒストグラムの一例を第５０Ａ図と第５０Ｂ図に示す。２１− ＡＬＬ＝７５より小さい値にピークが存在するなら識別する（サブルーチンＡｎａｌｙｚｅＦｌ３Ｃｅｌｌｓ）。存在しないならばＮＲＢＣは報告されない。２２− ＡＬＬ＜７５でピークが存在するならＰＳＳしきい値（約４５）より大きいＰＳＳ値を有する事象はＮＲＢＣに分類され、それ以上の分析を受けない。ステップ２３−２６好中球と好酸球を識別する２３− ＰＳＳ対ＡＬＬ面上の全事象のプロットを使用して好中性球ピークと単核細胞ピークである二つの最大ピークを識別する（サブルーチンＦｉｎｄＭＧＬｉｎｅ）。２４− この二つのピークの間に一本の線を引く。この線に沿った最小値から出発して、果粒細胞（線の上）と単核細胞（線の下）の間に分割線を引く（サブルーチンＦｉｎｄＭＧＬｉｎｅ、続き）。この分割線の一例を第５１Ａ図と第５１Ｂ図に示す。２５− 顆粒細胞（線の上）について、アークタンゼント（ＤＳＳ／ＰＳＳ）値のヒストグラムを生成する（サブルーチンＦｉｎｄＮＥＬｉｎｅ）。２６− ステップ２５のヒストグラムを検索して角度１０°と３１°の値の間の谷を求める（サブルーチンＦｉｎｄＮＥＬｉｎｅ続き）。角の値がこの谷より大きいアークタンゼント（ＤＳＳ／ＰＳＳ）の細胞は好酸球に分類され、角の値がこの谷より小さいアークタンゼント（ＤＳＳ／ＰＳＳ）の有する細胞は好中性球に分類される。このヒストグラムと角分割線の一例を第５２Ａ図と第５２Ｂ図に示す。サブルーチン２７−２８単核細胞と間質細胞（stroma）を識別する２７− 残りの細胞からＡＬＬ値の２５６区域ヒストグラムを生成する（サブルーチンｍｍＨｉｓｔ２５６）。２８− ＡＬＬヒストグラムを検索して、高領域（区域１００−１６０）と低領域（区域４５−７５）に二つの谷を探す。上の谷より上にある細胞は単核細胞に分類される。下の谷より下にある細胞は間質細胞に分類される（サブルーチンＦｉｎｄＬｙｍｐｈＬｉｎｅｓ）。ＡＬＬヒストグラムと分割線の一例を第５３図に示す。ステップ２９−３０リンパ球を識別するのに使用する。２９− 残りの細胞から、ＩＡＳ値の２５６区域ヒストグラムを生成する（サブルーチンｍｍＨｉｓｔ２５６）。３０− 区域７０と１１０の間に谷があるならそれを識別する。そのような谷が存在しないなら、ＩＡＳ値の平均値とＩＡＳ値の標準偏差の２．５倍との和に等しい値のところに分割線を引く。この谷または線の左側にある細胞はリンパ球に分類される。この分割の一例を第５４図に示す。ステップ３１−３２好塩基球を識別するのに使用する。３１− 残りの細胞から、ＡＬＬ値の２５６区域ヒストグラムを生成する（サブルーチンｍｍＨｉｓｔ２５６）。３２− ＡＬＬヒストグラムに谷があるなら、ステップ２８で決定されたリンパ球−間質細胞とリンパ球−単核球分離線からの距離の１／４と３／４の間でそれを識別する。そのような谷が存在しないなら、この距離の半分のところにデフォールト（default）の分割線を引く。ＡＬＬ値がこの線より上の細胞は好塩基球に分類される。ＡＬＬ値がこの線より下の事象はノイズに分類される（サブルーチンＦｉｎｄＢａｓｏＬｉｎｅｓ）。この分割の一例を第５５図に示す。３３− 分類された各母集団についてヒストグラムと統計を生成する（サブルーチンＤｏＰｏｐＳｔａｔｓ）。３４− 異常分析結果に対する警告フラグを設定する（サブルーチンＳｅｔＦｌａｇｓ）。具体的には、このステップは溶解抵抗性を有するＲＢＣの存在と芽細胞に対する統計学的チェックを実行することが含まれる。以下の統計の加重組合せがしきい値より高い（約３．８７４）ならば芽細胞警告フラグが設定される。３５− 全数値結果と警告フラグが、記憶及び報告のためシステムに戻される（サブルーチンＳｅｎｄＮｕｍＲｅｓｕｌｔｓおよびサブルーチンＳｅｎｄＦｌａｇＲｅｓｕｌｔｓ）。３６−撒布図のセットを生成し記憶及び報告のためシステムに送る（サブルーチンＳｅｎｄＳｃａｔＲｅｓｕｌｔｓ）。典型的報告は、第４５Ａ図から第４５Ｆ図に示すようにＡＬＬ対ＩＡＳ、ＤＳＳ対ＰＳＳおよびＡＬＬ対ＦＬ３である。実施の形態５：網赤血球分析本発明の一つの実施の形態を使用して全血サンプルの網赤血球分析を行うことができる。かかる分析手順の一例は次の通りである。サンプル処理の諸段階はアペンデックスＡに示すようなソフトウエアによって制御される。データ分析の諸段階はアペンデックスＢに示すようなソフトウエアによって制御される。この分析によって生成された分散プロットを第１４Ａ図と第１４Ｂ図に示す。１− 分析は空のＲＢＣカップから始める。２− ２２００マイクロリットルのＲＢＣ希釈液をＲＢＣ希釈液シリンジを用いてＲＢＣカップ中に入れる（ステップＲＢＣ２）。３− １８．７５マイクロリットルの全血と２０００マイクロリットルのＲＢＣ希釈液とを吸引プローブを通して実施の形態１に記述したようにＲＢＣカップ中に入れる（ステップＡ１５）。４− ３６５６マイクロリットルの希釈液をＲＢＣ希釈液シリンジでＲＢＣカップ中に入れる（ステップＲＢＣ３）。約４２０：１の希釈率が得られる。５− ５００マイクロリットルの血液／希釈液混合物をＲＢＣカップから吸引プローブ中に吸引する（ステップＡ１６）。６− 吸引プローブを引き上げて清掃する（ステップＡ１７）。７− 吸引プローブをＲＥＴＩＣカップの真上の位置に移動する（ステップＡ１８）。８− 吸引プローブをＲＥＴＩＣカップの方へ少し下げる（ステップＡ１９）。９− ２００マイクロリットルの血液／希釈液混合物を網赤血球分析のため吸引プローブからＲＥＴＩＣカップ中に入れる（ステップＡ２０）。１０− ６００マイクロリットルの網赤血球着色剤を網赤血球希釈液シリンジを用いて固定ポートを通してＲＥＴＩＣカップ中に入れる（ステップＲ１）。約１６８０：１の希釈率が得られる。１１− 網赤血球希釈液シリンジをリセットする（ステップＲ２）。１２− 網赤血球サンプルをＲＢＣ蠕動ポンプを使用して光学的流動セルの近傍へ送る（ステップＲ３）。１３− キャリーオーバ（carryover）を防止するためＷＢＣサンプル管中に光学的流動セルへの逆流を短時間開始する（ステップＲ４）。１４− ＲＥＴＩＣカップを空にする（ステップＲ５）。１５− 液体管死容積（deadvolume）を除去するため光学的配送シリンジを使用して７８マイクロリットル／秒で光学的流動セル中に網赤血球サンプルを流し始める（ステップＲ６）。１６− 光学的フローセルを通る網赤血球サンプルの流れを約２．０マイクロリットル／秒の速さまで減少させる（ステップＲ７）。１７− ＲＥＴＩＣカップを希釈液で充填して洗浄する（ステップＲ８）。１８− 光学トランスデューサ中で網赤血球データを収集する（ステップＲ９）。ハードウエアゲートが、中間角散乱（ＩＡＳ）値が特定のしきい値より大きい各光学的事象に対するデータを収集する。１９− ＲＥＴＩＣカップを空にして洗浄し再び空にする（ステップＲ１０）。２０− 光学的配送シリンジをリセットする（ステップＲ１１）。２１− 網赤血球サンプル供給管を洗浄する（ステップＲ１２）。２２− 光学的配送シリンジからバックラッシュを除去する（ステップＲ１３）。２３− 後続の分析のため網赤血球光学データをファイルに記憶する。ステップ２４−３３の分析はアルゴリズムファイルｍｒＲＥＴＣＡｌｇｏｒｉｔｈｍ．ｃｃで制御される。２４− ファイルからデータを取り出して局所に記憶する（サブルーチンＧｅｔＲＥＴＣＤａｔａ）。このデータは中間角散乱（ＩＡＳ）値と緑色蛍光（ＦＬ１）値からなる。２５− ｌｏｇ（ＩＡＳ）値の２５６区域ヒストグラムを生成する（サブルーチンｍｍＨｉｓｔ２５６）。２６− チャネル１５０と１９０の間に谷があるならそれを識別する。この谷（谷がないならば１７０）より低いｌｏｇ（ＴＡＳ）値を有する細胞は血小板と考えられ、その後の分析から除外される（サブルーチンＦｉｎｄＰＬＴｓ）。このヒストグラムと分割線の一例を第５６図に示す。２７− 残りの細胞から、ｌｏｇ（ＦＬ１）値の２５６区域ヒストグラムを生成する（サブルーチンｍｍＨｉｓｔ２５６）。２８− 谷が存在するなら、このヒストグラムの上部領域内でそれを識別する（区域１７５と２２５の間に）。この谷（谷が存在しないときは２００）よりも大きいｌｏｇ（ＦＬ１）値を有する細胞はＷＢＣと見られ、分析から除外される（サブルーチンＦｉｎｄＷＢＣｓ）。２９− 大きい（ＲＢＣ）ピークの右の谷を探してｌｏｇ（ＦＬ１）ヒストグラムを検索する。そのような谷が存在するなら、その右の細胞を網赤血球として分類する。谷がないならば、チャネル１２０（デフォールト網赤血球カーソル）に分割線をおく。この分割線より右の細胞は網赤血球として分類される（サブルーチンＦｉｎｄＲＥＴＣｓ）。このヒストグラムと分割線の例を第４５Ｆ図と第５７図に示す。３０− 網赤血球成熟指数（ＲＭＩ）を計算する。この値は、「高ＦＬ１」領域にあり、網赤血球下限（ステップ２９で確立）に一定値（約２４）を加えた値よりも高いｌｏｇ（ＦＬ１）ヒストグラム区域を有するものとして定義された網赤血球の百分率に等しい（サブルーチンＧｅｔＦｉｏｎａｌＣｏｕｎｔｓ）。３１− 数値結果を記憶及び報告のためシステムに戻す（サブルーチンＳｅｎｄＮｕｍＲｅｓｕｌｔｓ）。３２− 記憶及び報告のため撒布図を生成する（サブルーチンＳｅｎｄＳｃａｔＲｅｓｕｌｔｓ）。網赤血球撒布図の一例を第１４Ａ図および第５８図に示す。３３− ｌｏｇ（ＦＬ１）値のヒストグラムを記憶及び報告のため生成する（サブルーチンＳｅｎｄＨｉｓｔＲｅｓｕｌｔｓ）。網赤血球ヒストグラムの例を第１４Ｂ図、第４５Ｆ図および第５９図に示す。実施の形態６：リンパ球免疫表現型分析本発明の一つの実施の形態を用いて全血サンプルのリンパ球免疫表現型分析を行うことができる。かかる分析手順の一例は次の通りである。サンプル処理の諸段階はアペンデックスＡに示すようなソフトウエアによって制御される。１．１００マイクロリットルの全血を吸引プローブで吸引し移動カップ中に入れる（サブルーチンｓｕｂａｓｐ．ｆ）。この量は、必要ならそのサンプルについて所望の免疫表現型検定をすべて実行するのに十分な血液を供給するように調節できる。２．保温プローブは移動カップから約７０マイクロリットルを吸引して適当な数の保温カップ中に入れる（サブルーチンｓｕｂｐｒｅｐ．ｆ）。３．免疫表現型抗体試薬などの試薬を保温プローブで吸引し適当な保温カップ中に入れる（サブルーチンｓｕｂｉｎｃ．ｆ）。４．保温のため適当な時間待つ。５．約６７０マイクロリットルのｗｂｃ希釈液をＷＢＣカップに加える。この段階とこれに続くサンプル処理の諸段階（５から８）はサブルーチンｓｕｂｖｕ．ｆにあるようなソフトウエアによって制御される。６．保温後に、約３０マイクロリットルのサンプルを保温プローブで吸引しＷＢＣカップ中に入れる。７．サンプルと希釈液の混合物をＷＢＣカップで約５秒間混合する。８．この混合物を光学的性質を測定するため光学トランスデューサ中に送る。測定された特性としては軸光損失（ＡＬＬ）、中間角散乱（ＩＡＳ）、および二つの蛍光値（ＦＬ１とＦＬ２）が含まれる。９．データを後続の分析のために記憶する。一般の分析段階にはここに挙げたものが含まれる。１０．ＡＬＬ値対ＩＡＳ値のプロットを作成し、極座標二変量領域（polar bi variate region）に分割する。それらの領域は原点から派生する半径と円弧で境界付けられる。原点は変更しても良いが、通常は最大ＡＬＬ限界及びゼロＩＡＳ点に位置する。第６０Ａ図参照。１１．ｌｏｇ（ＦＬ２）対ｌｏｇ（ＦＬ１）の第二ののプロットを作成し、極座標二変量領域に分割する。この分割の原点は通常（０、０）にある。ＡＬＬ対ＴＡＳプロットとｌｏｇ（ＦＬ２）対ｌｏｇ（ＦＬ１）プロットの両方を第６０Ａ図と第６０Ｄ図に示す。１２．リンパ球ピークを探して両方のプロットを反時計回りに次いで半径方向外側に検索する。しきい値はピークの高さの１／１０に設定される。関連のデータポイントがこのしきい値内にある細胞はリンパ球であると見なされる。１３．各プロットのリンパ球事象数をカウントし、相互に及び血液内リンパ球カウントと比較して可能な誤差を検出する。第６０Ｂ図、第６０Ｃ図、第６０Ｅ図および第６０Ｆ図参照。１４．統計分析で、最も特異的にリンパ球を識別するＩＡＳ値とＡＬＬ値の限界が更に精密にするであろう。この輪郭で、ＡＬＬ対ＩＡＳ分析空間内に楕円面、多角形または他の幾何領域を形成することができる。１５．異なる抗体試薬で処理した同じサンプルの分析を続けることができる。そのＩＡＳ値およびＡＬＬ値がリンパ球識別によって決定された限界内にある場合のみ、細胞は分析の対象と見なされる（ステップ１０から１４）。実施の形態６Ａ：Ｔヘルパーサブセットの測定本発明の一つの実施の形態を用いて以下と同様の手続きに従ってＴヘルパー細胞であるリンパ球の比率を測定する。１．全血サンプルの一部分を、ＷＢＣ上のＣＤ４５レセプタに結合して、二つの蛍光検出器（ＦＬ１あるいはＦＬ２）の一方によって検出可能な蛍光を発する、蛍光標識された抗体と、ＷＢＣ上のＣＤ１３とＣＤ１４レセプタの両方に結合して二つの蛍光検出器のもう一方の検出器で検出可能な蛍光を発する、蛍光標識された抗体を含む試薬混合物と共に保温する。この実施の形態においては、ＣＤ４５抗体がフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）に結合し、ＣＤ１３とＣＤ１４抗体がヒコエリスリン（ＰＥ）に結合する。通常の保温は周囲温度で約１５分行われる。２．同じ全血サンプルの第二の部分を、ＷＢＣ上のＣＤ３レセプタに結合して二つの蛍光検出器（ＦＬ１あるいはＦＬ２）の一方によって検出可能な蛍光を発する、蛍光標識された抗体と、ＷＢＣ上のＣＤ４レセプタに結合して二つの蛍光検出器のもう一方によって検出可能な蛍光を発する蛍光標識された抗体とを含む試薬混合物と共に保温する。この実施の形態においては、ＣＤ３抗体はＦＩＴＣと結合し、ＣＤ４抗体はＰＥと結合する。３．最初に保温した全血サンプルを実施の形態６に記述したのと同じ方法で分析する。この分析で、ＣＤ４５レセプタの存在とＣＤ１３とＣＤ１４レセプタの不在を特徴とするリンパ球に対応するＩＡＳ値およびＡＬＬ値の領域（リンパ球ゲート）が得られる。ＣＤ１３／ＣＤ１４活性およびＣＤ４５活性に対応する蛍光レベルのプロットとその結果得られるリンパ球の名称を第６１Ａ図に示す。同じ細胞に対するＩＡＳ値とＡＬＬ値のプロツトおよびその結果得られるリンパ球ゲートを第６１Ｂ図に示す。４．リンパ球ゲート手順の純度は、リンパ球ゲート内の全細胞のうち、ＦＬ１とＦＬ２検出器で検出された蛍光のレベルによって示されるように、ＣＤ４５レセプタの存在とＣＤ１３及びＣＤ１４レセプタの不在を証明する分画を計算することによって決定することができる。リンパ球ゲート内の細胞に対するＣＤ１３／ＣＤ１４活性およびＣＤ４５活性に対応する蛍光レベルのプロットを第６１Ｃ図に示す。５．第二の保温血液サンプルを実施の形態６の段階１から８に記述したのと同様な方法で分析する。そのＩＡＳ値及びＡＬＬ値がリンパ球ゲート内にある各細胞は、ＦＬ１とＦＬ２の検出レベルと、非結合性でＰＥとＦＩＴＣで標識されたと見なされる抗体混合物と共に保温された対照細胞の蛍光レベルとの比較に基づいて、試薬混合物（ＣＤ３とＣＤ４）内の二つの抗体のそれぞれについて正あるいは負として特徴づけられる。この対照細胞（負反応を示す）の蛍光レベルを第６１Ｄ図に示す。６．Ｔヘルパー細胞であるリンパ球の分画はＣＤ３に対して正、ＣＤ４に対して正であるリンパ球ゲート内の細胞の分画として決定される。両方に対して正である分画を示すリンパ球ゲート内の細胞のＣＤ３活性及びＣＤ４活性に対応する蛍光レベルのプロットを第６１Ｅ図に示す。７．Ｔヘルパー細胞の濃度は、ＣＤ３に対して正、ＣＤ４に対して正である（ステップ６で決定）リンパ球の分画に、実施の形態４で記述したＷＢＣ示差分析で求められたリンパ球カウントを乗じた値として判定できる。実施の形態６Ｂ：Ｔサプレッササブセットの測定同様な手順を用いて、ＣＤ３とＣＤ８の両方に対して正であることを特徴とするＴサプレッサ細胞のリンパ球サブセットを定量することができる。１．全血サンプルの一部分を、実施の形態６Ａのステップ１におけると同様に、ＷＢＣ上のＣＤ４５レセプタに結合する蛍光標識された抗体と、ＷＢＣ上のＣＤ１３及びＣＤ１４の両方のレセプタに結合する蛍光標識された抗体とを含む試薬混合物と共に保温する。この保温されたサンプルの分析は、実施の形態６Ａのステップ３及び４に記述したように行われ、リンパ球ゲートが得られる。典型的保温は周囲温度で約１５分間行われる。２．同じ全血サンプルの第二の部分を、ＷＢＣ上のＣＤ３レセプタに結合して二つの蛍光検出器（ＦＬ１またはＦＬ２）の一方で検出可能な蛍光を発する蛍光標識された抗体と、ＷＢＣ上のＣＤ８レセプタに結合してこの二つの蛍光検出器のもう一方で検出可能な蛍光を発する蛍光標識された抗体とを含む試薬混合物と共に保温する。この実施の形態では、ＣＤ３抗体がＦＩＴＣに、ＣＤ８抗体がＰＥに結合する。３．第二の保温血液サンプルを実施の形態６のステップ１から８に記述したのと同様な方法で分析する。そのＩＡＳ値とＡＬＬ値がリンパ球ゲート内にある各細胞は、検出されたＦＬ１とＦＬ２のレベルの比較に基づいて蛍光レベルを制御するように試薬混合物（ＣＤ３とＣＤ８）内の二つの抗体の各々について正または負として特徴づけられる。４．Ｔサプレッサ細胞であるリンパ球の分画はＣＤ３に対して正、ＣＤ８に対して正であるリンパ球ゲート内の細胞の分画として決定される。リンパ球ゲート内の細胞のＣＤ３活性及びＣＤ８活性に対応し、両方が正である分画を示す蛍光レベルのプロットを第６１Ｆ図に示す。５．Ｔサプレッサ細胞の濃度はＣＤ３に対して正、ＣＤ８に対して正であるリンパ球の分画数（ステップ５で決定）に実施の形態４で記述したＷＢＣ示差分析で求められたリンパ球カウントを乗じた値として決定することができる。実施の形態６Ｃ：ＴおよびＢリンパ球の測定ＴおよびＢリンパ球の数は実施の形態６Ａおよび６Ｂで記述したのと同様な手順を用いて測定することができる。リンパ球ゲートを作成するのに使用した第一の保温サンプルは、実施の形態６Ａおよび６Ｂと同じＣＤ４５標識抗体とＣＤ１３／ＣＤ１４標識抗体の混合物である。血液サンプルの第二の部分はＣＤ３抗体（ＦＩＴＣで標識された）とＣＤ１９抗体（ＰＥで標識された）の混合物と共に保温される。Ｔ細胞とＢ細胞の分画は、ＣＤ３に対して正、ＣＤ１９に対して負である細胞の分画（Ｔ細胞）と、ＣＤ３に対して負、ＣＤ１９に対して正である細胞の分画（Ｂ細胞）から決定される。Ｔ細胞とＢ細胞を示すＣＤ３活性およびＣＤ１９活性に対応する蛍光レベルのプロットを第６１Ｇ図に示す。これら実施の形態に述べたリンパ球サブセット測定の有効性は、本発明の実施の形態を用いた分析結果を従来の手動フローサイトメトリ検定の結果と比較することで実証される。本発明の実施の形態（ＢＢ３と名付ける）とＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎＩｍｍｕｎｏｃｙｔｏｍｅｔｒｙＳｙｓｔｅｍｓによるＦＡＣＳｃａｎｓｙｓｔｅｍによる従来の分析のそのような比較の結果を第６２Ａ図から第６２Ｄ図に示す。第６２Ａ図から第６２Ｄ図中のプロットはＣＤ３とＣＤ４の両方に対して正（第６２Ａ図）、ＣＤ３とＣＤ８の両方に対して正（第６２Ｂ図）、ＣＤ１９に対して正（第６２Ｃ図）およびＣＤ３のみに対して正（第６２Ｄ図）であるリンパ球の分画間の相関関係を示す。実施の形態７：ＮＲＢＣ分析２５μｌの全血臨床サンプルを、上記で開示した細胞分析計器システム内で、ＷＢＣカップ１３８内で４２℃に予熱した６７５マイクロリットルの多目的試薬と、オンラインで混合する。このサンプル／試薬を混合し１１秒間保温する。この混合物を次いで流動セル１７０に移し、そこで約８秒半かけてＷＢＣ／Ｄｉｆｆ／ＮＲＢＣ分析を行う。第４０Ａ図から第４０Ｃ図および第４１Ａ図と第４１Ｂ図にそれぞれ５６ＮＲＢＣ／１００ＷＢＣと１４０ＮＲＢＣ／１００ＷＢＣを含むサンプルに対するこの分析の結果を示す。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９６年２月２９日【補正内容】請求の範囲１．サンプル中の細胞を識別し区別する自動化計器システムであって、ａ．サンプル容器を受け取り、サンプルの吸引および分与を行うサンプルハンドラと、ｂ．前記サンプルハンドラと作動可能に互いに接続され、サンプルの希釈および分析を自動的に行い、検出した多角光散乱信号および蛍光信号を含む、サンプル中の細胞に関連したデータを検出、収集するサンプル分析装置と、ｃ．前記サンプルハンドラおよび前記分析装置と作動可能に接続され、選択した試験プロトコルに応答して、前記ハンドラと前記分析装置の作動を自動的に制御し、前記分析装置が収集した多角光散乱データおよび蛍光データを保存し、サンプル中の細胞に関する報告可能な情報を生成するシステム制御装置とを備え、サンプルを前記サンプルハンドラで注入し、前記試験プロトコルを選択した後は、物理的にサンプルから細胞を分離したり、オペレータが介入したりすることなく、少なくとも一つのサンプルを自動的に処理し、赤血球（ＲＢＣ）、白血球（ＷＢＣ）、および蛍光細胞または細胞体に関する定量情報を含む試験結果を報告する自動化計器システム。２．蛍光細胞または細胞体が蛍光標識済み表面抗原を含む請求の範囲第１項に記載の計器システム。３．オペレータインタフェースによって試験プロトコルを選択する請求の範囲第１項に記載の自動化計器システム。４．収集データが、さらにインピーダンスデータを含む請求の範囲第１項に記載の自動化計器システム。５．報告結果が、さらに血小板に関する定量データを含む請求の範囲第１項に記載の自動化計器システム。６．蛍光細胞または細胞体が、有核赤血球（ＮＲＢＣ）をさらに含む請求の範囲第１項に記載の自動化計器システム。７．蛍光細胞または細胞体が、網赤血球をさらに含む請求の範囲第１項に記載の自動化計器システム。８．光散乱および蛍光信号から生成したデータを処理することにより、報告される定量的なＷＢＣ情報を得る請求の範囲第２項に記載の自動化計器システム。９．ＷＢＣ情報が、五区分差を含む請求の範囲第１項から第８項のいずれか一項に記載の自動化計器システム。１０．試験プロトコルが、分析装置が以前に生成したデータの一部に基づく分析装置操作指示を含む請求の範囲第１項に記載の自動化計器システム。１１．ＷＢＣ鑑別分析が、リンパ球サブセット分析を含む請求の範囲第９項に記載の自動化計器システム。１２．蛍光標識済みモノクロナール抗体を利用して、リンパ球サブセット分析を行う請求の範囲第１１項に記載の自動化計器システム。１３．分析装置が、さらに少なくとも一つの温度制御保温サイトを備える請求の範囲第２項に記載の自動化計器システム。１４．サンプル中の細胞を識別し区別する自動化方法であって、全血サンプルを供給することと、前記サンプルに対して実施する１回または複数回の一連の試験を選択し、実施する試験をサンプルと関連付けることと、前記サンプルを吸引し、サンプルに対して従来の血液分析と蛍光サイトメトリ分析とを実施できる自動化計器システムに前記吸引サンプルを供給することと、前記計器か少なくとも三つのサンプル容器に、サンプルのアリコートを分与することと、前記計器が一つまたは複数のサンプルアリコートを希釈試薬で希釈することと、前記計器が少なくとも一つのサンプルアリコートを溶解試薬で溶解することと、前記計器が少なくとも一つの希釈サンプルアリコートを流動トランスデューサを介して移動させることと、流動トランスデューサ計器が希釈サンプルアリコートから赤血球（ＲＢＣ）を検出し、カウントを行うことと、前記計器が溶解サンプルアリコートを少なくとも一つを光流動トランスデューサシステムを介して移動させることと、前記光流動トランスデューサシステムが溶解サンプルアリコートから多角光散乱を検出し、白血球（ＷＢＣ）をカウントし識別することと、前記流動トランスデューサシステムが溶解サンプルまたは希釈サンプルから多角光散乱および蛍光を検出し、サンプル内の有核赤血球（ＮＲＢＣ）または網赤血球または細胞表面抗原をカウントし識別することと、前記計器がサンプルのアリコートに対して実施した試験のデータを保存することと、前記計器が要求があった場合、サンプルに対して実施した試験の結果を定量的に報告することとを備える方法において、細胞を物理的にサンプルまたはサンプルアリコートから分離することなく、前記計器システムが自動的に試験機能をすべて果たし、少なくとも蛍光サイトメトリ試験の結果の報告に、従来の血液分析結果を利用する方法。１５．第三のアリコートをシステム内で蛍光標識済みモノクロナール抗体と結合させ、前記標識済み抗体が前記アリコート中の細胞の表面抗原に付着するのに十分な時間を取ることと、前記標識済みサンプルを溶解試薬により溶解し、その後前記サンプルから未溶解細胞を分離する処理を実施しないことと、前記溶解済みのモノクロナール抗体標識サンプルを光流動トランスデューサを介して移動させることと、多角度光散乱および蛍光を検出することと、前記サンプル中のリンパ球の部分母集団を数え、識別することとをさらに含む請求の範囲第１４項に記載の方法。１６．希釈サンプルのアリコートを染色する段階と、前記染色したアリコートを流動トランスデューサシステムを介して移動する段階とをさらに含む、網赤血球のカウントを行い、前記染色したアリコートから網赤血球を分離する請求の範囲第１４項に記載の方法。１７．希釈サンプルのアリコートを計器により光流動セルトランスデューサシステムを介して移動し、多角光散乱を検出して、前記アリコート中の血小板のカウントを行い、血小板を識別する請求の範囲第１４項に記載の方法。１８．ＮＲＢＣおよびＷＢＣのカウントを行い、ＮＲＢＣおよびＷＢＣを同一の溶解サンプルアリコートから区別する請求の範囲第１４項に記載の方法。１９．全血サンプル中の細胞を識別し区別する自動化計器システムであってａ．操作／指示処理ステーションと、ｂ．サンプルの処理、吸引、分与装置と、ｃ．サンプルおよび試薬の搬送装置と多角光散乱および蛍光検出装置とを備えるサンプル処理分析装置と、ｄ．データ収集およびデータ処理ステーションと、ｅ．前記操作／指示処理ステーションと、サンプルの搬送、吸引、分与装置と、サンプルの処理分析装置と、前記データ収集処理ステーションとに動作可能に接続され、サンプル中の細胞に関する報告可能な定量的情報を生成することができる制御装置であって、前記情報が、赤血球（ＲＢＣ）、白血球（ＷＢＣ）、および蛍光細胞、細胞体または細胞表面抗原に関する情報を含む制御装置とを備えるシステム。２０．サンプル処理分析装置で以前に作成されたサンプル中の細胞のデータの少なくとも一部に基づいて、前記サンプル処理分析装置が制御装置に応答する請求の範囲第１９項に記載の自動化計器システム。２１．サンプル処理分析装置が、さらに自動リンパ球サブセット分析を行う請求の範囲第２０項に記載の自動化計器システム。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＧ０１Ｎ 35/02 0271−2ＪＧ０１Ｎ 35/02 Ｚ (31)優先権主張番号０８／４８８，５３２ (32)優先日 1995年６月７日 (33)優先権主張国米国（ＵＳ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＡＵ，ＣＡ，ＪＰ (72)発明者キム，ヤング・ランアメリカ合衆国、カリフオルニア・94086、サニーベール、ラ・メサ・テラス・934・ジー (72)発明者ラルー，ロデリツク・ウオルトンアメリカ合衆国、カリフオルニア・95472、セバストポル、フイオリ・レーン・12322 (72)発明者スチユアート，ジヨン・ポールアメリカ合衆国、カリフオルニア・94040、マウント・ビユー、オーテガ・アベニユー・215

Claims

【特許請求の範囲】１．全血サンプル中の細胞を識別し区別する自動化方法であって、ａ．サンプル容器からサンプルを吸引する段階とｂ．サンプルのアリコートを少なくとも二つ分与する段階とｃ．一度にほぼ細胞一つの割合でアリコートを分析し、少なくとも一つのアリコートから発生する多角度光散乱信号および蛍光信号を検出する段階と、ｃ．信号を検出することによって発生するデータを収集する段階と、ｄ．データを処理する段階と、ｅ．サンプル中の赤血球（ＲＢＣ）、白血球（ＷＢＣ）、および蛍光細胞または細胞体に関する情報を含む分析結果を報告する段階とを含む自動化方法。２．データ収集段階が、インピーダンス検出器、多角度光散乱検出器、および多波長蛍光検出器からデータを収集する作業を含む請求の範囲第１項に記載の自動化方法。３．第三のアリコートを分与し、血小板について光学的に分析する請求の範囲第１項に記載の自動化方法。４．少なくとも二つのアリコートのうちの一方を、ＷＢＣ、および蛍光細胞または細胞体について分析する請求の範囲第１項に記載の自動化方法。５．蛍光細胞または細胞体が、有核赤血球（ＮＲＢＣ）である請求の範囲第４項に記載の自動化方法。６．アリコートまたは前記少なくとも二つのアリコートのうちの一方を分与し、多角度光散乱蛍光について分析する請求の範囲第１項に記載の自動化方法。７．サンプル中の蛍光細胞または細胞体に関する情報を報告するためのデータをアリコートが提供し、細胞または細胞体が網赤血球である請求の範囲第６項に記載の自動化方法。８．前記少なくとも二つのアリコートのうちの一方をインピーダンスにより分析する請求の範囲第１項に記載の自動化方法。９．インピーダンスデータの少なくとも一部を処理し、報告されるＲＢＣ情報を生成する請求の範囲第８項に記載の自動化方法。１０．光散乱および蛍光信号の処理によって生成したデータを処理することにより、報告される定量的なＷＢＣ情報を得る請求の範囲第１項に記載の自動化方法。１１．ＷＢＣ情報が、五区分差を含む請求の範囲第１０項に記載の自動化方法。１２．ＷＢＣ差がさらにＮＲＢＣ百分率を含む請求の範囲第１１項に記載の自動化方法。１３．一つまたは複数のサンプルアリコートから発生するデータの選択によって影響を受ける試験プロトコルに基づいて、一つまたは複数のサンプルアリコートの分析およびデータ処理を行う請求の範囲第１項に記載の自動化方法。１４．少なくとも一つのアリコートを分析して、サンプル中の細胞の活力に関する情報を提供する請求の範囲第１項に記載の自動化方法。１５．第三のサンプルアリコートを分析装置のサンプル容器に入れること、ならびにアリコートを蛍光標識済みモノクロナール抗体と結合させ、標識済み抗体がアリコート中の細胞の表面抗原に付着するのに十分な時間を取る段階と、標識済みサンプルを溶解試薬により溶解し、その後サンプルから未溶解細胞を分離する処理を実施しない段階と、溶解済みのモノクロナール抗体標識サンプルを光流動トランスデューサを介して移動させる段階と、多角度光散乱および蛍光を検出する段階と、サンプル中のリンパ球の部分母集団を数え、識別する段階とをさらに含む請求の範囲第１項に記載の方法。１６．全血サンプル中の細胞を識別する自動化計器システムであってａ．操作／指示処理ステーションと、ｂ．サンプルの処理、吸引、分与装置と、ｃ．サンプルおよび試薬の搬送装置と多角光散乱および蛍光検出装置とを備えるサンプル処理分析装置と、ｄ．データ収集およびデータ処理ステーションと、ｅ．前記操作／指示処理ステーションと、サンプルの搬送、吸引、分与装置と、サンプルの処理分析装置と、データ収集処理ステーションとに動作可能に接続され、サンプル中の細胞に関する報告可能な定量的情報を生成することができる制御装置であって、前記情報が、赤血球（ＲＢＣ）、白血球（ＷＢＣ）、および蛍光細胞または細胞体に関する情報を含む制御装置とを備えるシステム。１７．データ収集ステーションが、インピーダンス検出器、多角光散乱検出器、および多波長蛍光検出器を備える請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。１８．蛍光細胞または細胞体が有核赤血球（ＮＲＢＣ）である請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。１９．蛍光細胞または細胞体が網赤血球である請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。２０．少なくとも一部、インピーダンスを利用して報告されるＲＢＣ情報を生成する請求の範囲第１７項に記載の自動化計器システム。２１．ＷＢＣ情報が、五区分差を含む請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。２２．ＷＢＣ差がさらにＮＲＢＣ百分率を含む請求の範囲第２１項に記載の自動化計器システム。２３．操作／指示処理ステーションが、オペレータが選択できる試験手順メニューを備える請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。２４．サンプル処理分析装置で以前に作成されたサンプル中の細胞のデータの少なくとも一部に基づいて、サンプル処理分析装置が制御装置に応答する請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。２５．移動可能な情報がさらにサンプルに関する細胞活力情報を備える請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。２６．蛍光細胞または細胞体が、蛍光染料で染色したＤＮＡまたはＲＮＡを含む請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。２７．蛍光細胞または細胞体が、蛍光標識済み細胞表面抗原を含む請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。２８．サンプル処理分析装置が、さらに自動リンパ球サブセット分析を行う請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。２９．サンプル処理分析装置が、さらに少なくとも一つの温度制御保温サイトを含む請求の範囲第１６項に記載の自動化計器システム。