JPH10310599A - フェベスチン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 アミノペプチダーゼＮに対し阻害活性を有す
る新規化合物が望まれている。 【解決手段】 式（１） 【化１】 〔式中、Ｒは置換基があってもよい飽和または不飽和の
低級炭化水素基、ＸおよびＹはアミノ酸残基を示す。た
だし、Ｒがフェニル基でありＸがバリン残基でＹがフェ
ニルアラニン残基である組合せの場合を除く。〕で表わ
される新規フェベスチン誘導体またはその薬理学的に許
容される塩はアミノペプチダーゼＮに対して優れた阻害
活性を示し、抗癌剤あるいは免疫賦活剤としての用途が
期待される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はアミノペプチダーゼ
Ｎに対して阻害活性を有する新規合成ぺプチドに関す
る。アミノペプチダーゼＮは癌の転移あるいは免疫系に
関与することから、アミノペプチダーゼＮの阻害活性を
有する本発明のペプチドは、抗癌剤あるいは免疫賦活剤
としての用途が期待される。更には、鎮痛持続および増
強剤としての用途が期待される。

【０００２】

【従来の技術】アミノペプチダーゼＮを阻害する天然物
由来の低分子のぺプチドとしては、プロベスチン、ベス
タチンおよびロイヒスチンなどが知られている。これら
はＮ末端に３−アミノ−２−ヒドロキシ脂肪酸をもつモ
ノアミノ酸、ジぺプチドおよびテトラぺプチドである。
また、ストレプトミセス属に属する菌株からフェベスチ
ン、すなわち（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロ
キシ−４−フェニルブタン酸−Ｖａｌ−Ｐｈｅが単離さ
れ、フェベスタチンはアミノペプチダーゼＮの阻害活性
を有すことが知られている（特開平９−２０７９４号公
報）。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】プロベスチン、ベスタ
チンおよびロイヒスチン等のアミノペプチダーゼＮの阻
害物質は、アミノペプチダーゼＮに対する特異性が低い
こと、アミノペプチダーゼＮに対する阻害活性の強さが
未だ十分でないこと等の問題点を有していた。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは鋭意検討の
結果、一般式（１）で表わされるフェベスタチン誘導体
またはその薬理学的に許容される塩が、アミノペプチダ
ーゼＮに対する優れた阻害活性を有することを見いだし
た。すなわち、本発明は、 １．式（１）

【０００５】

【化２】 〔式中、Ｒは置換基があってもよい飽和または不飽和の
低級炭化水素基を、ＸおよびＹはアミノ酸残基を示す。
ただし、Ｒがフェニル基でありＸがバリン残基でＹがフ
ェニルアラニン残基である組合せの場合を除く。〕で表
わされる新規フェベスチン誘導体またはその薬理学的に
許容される塩； ２．Ｒが、置換基があってもよいフェニル基、置換基が
あってもよい炭素数３〜９のシクロアルキル基、置換基
があってもよい炭素数１〜８のアルキル基、または置換
基があってもよい炭素数２〜８のアルケニル基である上
記１記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩； ３．Ｒが、フェニル基、シクロヘキシル基、または炭素
数１〜４の低級アルキル基である上記１記載の化合物ま
たはその薬理学的に許容される塩； ４．Ｘが塩基性の側鎖をもつアミノ酸残基である上記２
または３に記載の化合物またはその薬理学的に許容され
る塩； ５．Ｒがシクロヘキシル基、Ｘがバリン、ヒスチジン、
アルギニンまたはフェニルアラニンの残基、Ｙがフェニ
ルアラニン、ヒスチジンまたはプロリンの残基である上
記１記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩； ６．上記１から５のいずれかに記載の化合物またはその
薬理学的に許容される塩を有効成分とする医薬； ７．上記１から５のいずれかに記載の化合物またはその
薬理学的に許容される塩を有効成分とするアミノペプチ
ダーゼＮ阻害剤；に関するものである。更には、本発明
化合物はアミノペプチダーゼＮに阻害活性を有すことに
より、抗癌剤、免疫賦活剤、あるいは鎮痛持続および増
強剤としての用途が期待されるものである。

【０００６】

【発明の実施の形態】本発明において、置換基があって
もよい飽和または不飽和の低級炭化水素基とは好ましく
は、置換基があってもよいフェニル、置換基があっても
よい炭素数３〜９のシクロアルキル基、置換基があって
もよい炭素数１〜８のアルキル基、または炭素数２〜８
のアルケニル基を示す。これらの置換基としては、例え
ば炭素数１〜５のアルキル基、炭素数１〜５のアルコキ
シ基、フェニル基、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨ
ウ素）、アミノ基、ニトロ、水酸基、メルカプト基等が
挙げられる。本発明において具体的な置換基があっても
よい飽和または不飽和の低級炭化水素基の例としては、
たとえば、メチル、エチル、 n- プロピル、イソプロピ
ル、n- ブチル、 s- ブチル、 t- ブチル、 n- ペンチ
ル、3-メチルブチル、2-メチルブチル、2,2-ジメチルプ
ロピル、 n- ヘキシル、2-メチルヘプチル、3-メチルヘ
プチル、3-エチルヘプチル、クロロメチル、ジクロロメ
チル、1-ブロモエチル、2-ブロモエチル、2-アミノエチ
ル、3-ヒドロキシプロピル、2-ヒドロキシプロピル、1-
ヒドロキシプロピル、2-ニトロヘキシル、2-メルカプト
エチル、ベンジル、２−フェニルエチル、１−フェニル
エチルなどの置換基があってもよい炭素数１〜８のアル
キル基；シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチ
ル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、4-メチルシクロ
ヘキシル、3-クロロシクロヘキシル、シクロヘキシルメ
チルなどの置換基があってもよい炭素数３〜９のシクロ
アルキル基；フェニル、4-イソプロピルフェニル、2,6-
ジメチルフェニル、3,5-ジメチルフェニル、2-メトキシ
フェニル、3-メトキシフェニル、4-メトキシフェニル、
2-クロロフェニル、3-クロロフェニル、4-クロロフェニ
ル、2-ブロモフェニル、3-ブロモ-2- クロロフェニル、
4-ブロモフェニル、2-ヒドロキシフェニル、3-ヒドロキ
シフェニル、4-ヒドロキシフェニル、2-ニトロフェニ
ル、3-ニトロフェニル、4-ニトロフェニル、4-ヨードフ
ェニルなどの置換基があってもよいフェニル基；ビニ
ル、１−ブテニル、１−ペンテニル、２−ヘキセニルな
どの置換基があってもよい炭素数２〜８のアルケニル基
などが挙げられる。本発明においては、特に無置換のフ
ェニル基、シクロヘキシル基、炭素数１〜４の低級アル
キル基が好ましい。式（１）の３−アミノ−２−ヒドロ
キシ脂肪酸部分のＲＣＨ₂ −が置換した２位の炭素原
子、並びに−ＯＨが置換した３位の炭素原子の立体配置
はＳ、ＲまたはＳＲいずれでもよいが、（２Ｓ，３Ｒ）
配置が好ましい。

【０００７】式（１）のＸまたはＹにおけるアミノ酸残
基としては、一般的にはα−アミノ酸類の残基があげら
れるが必ずしもα−アミノ酸である必要性はない。β−
アラニン等のβ−アミノ酸等でもよい。これらのアミノ
酸としては具体的には、グリシン（Ｇly）、アラニン
（Ａla）、バリン( Ｖal）、ロイシン（Ｌeu）、イソロ
イシン（Ｉle）、セリン（Ｓer）、トレオニン（Ｔh
r）、システイン（Ｃys）、メチオニン（Ｍet）、アス
パラギン酸（Ａsp）、グルタミン酸（Ｇlu）、リジン
（Ｌys）、アルギニン（Ａrg）、フェニルアラニン（Ｐ
he）、チロシン（Ｔyr）、ヒスチジン（Ｈis）、トリプ
トファン（Ｔry）、ホモフェニルアラニン（Ｈph）、プ
ロリン（Ｐro）、オキシプロリン（Ｈypro）、シクロヘ
キシルアラニン（Ｃha）などがあげられる。これらのア
ミノ酸の立体配置はＤ、ＬまたはＤＬのいずれでもよい
が、Ｌ体が好ましい。

【０００８】Ｘにおけるアミノ酸残基としては、好まし
くはアルギニン、リジン、ヒドロキシリジン、ヒスチジ
ン等の塩基性の側鎖をもつアミノ酸残基、及びバリン、
フェニルアラニンの残基が好ましい。特に本発明におい
ては、Ｘにおけるアミノ酸残基として好ましいものとし
ては、バリン（Ｖal）、フェニルアラニン（Ｐhe）、ヒ
スチジン（Ｈis）またはアルギニン（Ａrg）が、より好
ましくはヒスチジン（Ｈis）またはアルギニン（Ａrg）
の残基があげられる。Ｙにおけるアミノ酸残基として好
ましいものとしては、フェニルアラニン（Ｐhe）、ヒス
チジン（Ｈis）またはプロリン（Ｐro）の残基が、より
好ましくはフェニルアラニン（Ｐhe）の残基があげられ
る。本発明のフェベスチン誘導体は酸との薬理学的に許
容される塩として用いることも可能であり、これらの塩
としては、塩酸、硫酸、硝酸などの無機酸；ｐ−トルエ
ンスルホン酸などの有機酸等との塩が挙げられる。

【０００９】上記のアミノ酸以外で、本明細書中のアミ
ノ酸残基、保護基およびその他で用いられている略号は
以下の通りである。 ＡＰ−Ｎ：アミノペプチダーゼＮ Ｌｅｕ−ＡＰ：ロイシンアミノペプチダーゼ ＡＰ−Ａ：アミノペプチダーゼＡ ＡＰ−Ｂ：アミノペプチダーゼＢ ＡＨＰＡ：（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロキ
シ−４−フェニルブタン酸 ＡＨＣＡ：（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−４−シクロヘ
キシル−２−ヒドロキシブタン酸 ＰｅｎＡｈｐ：（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒド
ロキシオクタン酸 ＥｔＡｈｐ：（２Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−２−ヒドロ
キシペンタン酸 Ｂｏｃ：ｔ−ブトキシカルボニル Ｂｚｌ：ベンジル Ｍｅ：メチル Ｚ：ベンジルオキシカルボニル Ｐｈ：フェニル ｃＨｘ：シクロヘキシル ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド

【００１０】式（１）

【化３】 で示される化合物のうち代表的な化合物について具体例
を以下の表に示す。

【００１１】

【表１】

【００１２】

【表２】

【００１３】

【表３】 注：各々のアミノ酸の立体配置はＤ、Ｌ又はＤＬのいず
れでもよい。

【００１４】式（１）で表される本発明化合物は、ぺプ
チド化学の分野において一般的に使用される方法を用い
て製造される。例えば下記反応式（Ａ）及び反応式
（Ｂ）の方法により製造することができる。

【００１５】反応式（Ａ）

【化４】

【００１６】なお上記反応式中Ｒ、ＸおよびＹは前記と
同じ意味を有する。Ｐ３はアミノ基の保護基を示す。反
応式（Ａ）で示される工程をより詳しく説明する。原料
化合物である式（Ａ１）で示される化合物は公知の方法
により製造することができる。例えば、ＡＨＰＡ（Ｒ＝
フェニル基に相当）は、Ｚ−フェニルアラニンより、文
献記載の方法〔Ｊ．Ｍed．Ｃhem., ２０，５１３（１９
７７）〕により製造することができる。ＡＨＣＡ（Ｒ＝
シクロヘキシル基に相当）、ＰｅｎＡｈｐ（Ｒ＝ｎ−ブ
チル基に相当）またはＥｔＡｈｐは、アスパラギン酸よ
り、文献記載の方法〔Ｔetrahedron Ｌett., ３４，７
５５７（１９９３）〕により製造することができる。ま
た、上記のＰｅｎＡｈｐおよびＥｔＡｈｐは、他の文献
記載の方法〔Ｊ．Ａntibiotics，４９，２８１（１９９
６）またはＰeptide Ｃhemistry １９９５，１４５
（１９９６）〕によっても製造することができる。式
（Ａ１）で示される他の化合物も同様にして製造するこ
とができる。

【００１７】式（Ａ２）で示される化合物は、式（Ａ
１）で示される化合物のアミノ基を常法に従って、保護
基Ｐ３で保護すればよく、例えばＰ３がＢｏｃ基のとき
は、トリエチルアミン存在下にジ−ｔ−ブチルジカルボ
ナートと反応すれば良く、Ｐ３がＺ基のときは、トリエ
チルアミン存在下にＳ−ベンジルオキシカルボニル−
４，６−ジメチル−２−チオピリミジンと反応すれば良
い。他の保護基を有する式（Ａ２）の化合物も常法によ
って製造することができる。

【００１８】反応式（Ｂ）

【化５】

【００１９】上記反応式中Ｒ、ＸおよびＹは前記と同じ
意味を有する。Ｐ１はカルボキシル基の保護基を示し、
Ｐ２およびＰ３はアミノ基の保護基を示す。Ｘ（Ｐｓ）
およびＹ（Ｐｓ）は、アミノ酸残基ＸおよびＹの側鎖の
官能基が必要に応じて保護基（Ｐｓ）で保護されている
ことを示す。反応式（Ｂ）で示される工程をより詳しく
説明する。他方の原料化合物である式（Ｂ１）で示され
る化合物から式（Ｂ２）で示される化合物を製造するに
は、式（Ｂ１）で示される化合物と保護アミノ酸（Ｐ２
−Ｘ（Ｐｓ）−ＯＨ）をぺプチド結合形成反応により縮
合すればよい。ぺプチド結合形成反応には、酸ハライド
法、ヒドロキシコハク酸イミドエステル、置換および無
置換フェニルエステル、チオフェニルエステル等を用い
た活性エステル法、ジシクロヘキシルカルボジイミド、
１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カル
ボジイミドまたはそれらと縮合補助剤、例えば１−ヒド
ロキシベンゾトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イ
ミドを用いる方法、ジフェニルリン酸アジド、Ｂｏｐ試
薬、ＰｙＢｏｐ試薬、１−エトキシカルボニル−２−エ
トキシ−１，２−ジヒドロキシキノリン等の縮合剤を用
いる方法、クロロギ酸エチル、クロロギ酸イソブチル等
を用いる混合酸無水物法、さらにはアジド法等ペプチド
化学において使用されるアミド形成反応の中から適宜選
択すればよい。

【００２０】また、反応において使用される溶媒として
も、通常のぺプチド化学において用いられる溶媒が使用
できる。例えば、テトラヒドロフラン、ジオキサン等の
エーテル類、ジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲ
ン化炭化水素、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセト
アミド等のアミド類、アセトニトリル等のニトリル類、
酢酸エチル等のエステル類、アセトン、メチルエチルケ
トン等のケトン類の中から単独あるいは混合溶媒として
使用すればよい。次に、式（Ｂ２）で示される化合物の
アミノ基の保護基Ｐ２を除去し、式（Ｂ３）で示される
化合物を製造する。保護基Ｐ２の除去は常法で行えばよ
く、例えば保護基Ｐ２がＢｏｃ基のときは、塩酸−ジオ
キサン溶液あるいはトリフルオロ酢酸等の脱保護試薬を
用いて除去すればよいし、保護基Ｐ２がＺ基のときは、
Ｐｄ触媒の存在下に接触水素化して除去すればよい。他
の保護基の場合にも常法により除去できる。

【００２１】次いで、式（Ｂ２）で示される化合物を得
るときと同様のぺプチド結合形成法を用いて、反応式
（Ａ）で製造される式（Ａ２）で示される化合物と式
（Ｂ３）の化合物とを反応させ、式（Ｂ４）で示される
化合物を得る。式（１）で示される化合物は、常法に従
って式（Ｂ４）で示される化合物の保護基Ｐ１、Ｐ３お
よびＰｓを除去することで製造することができる。例え
ば、保護基Ｐ３およびＰｓがＺ基で、保護基Ｐ１がベン
ジルエステルの時は、Ｐｄ触媒の存在下に接触水素化し
てすべての保護基を一度に除去すればよいし、Ｐ３がＢ
ｏｃ基、Ｘ（Ｐｓ）＝ＸおよびＹ（Ｐｓ）＝Ｙ（即ち、
アミノ酸残基ＸおよびＹの側鎖の官能基を保護する必要
のないとき）、保護基Ｐ１がベンジルエステルの時は、
Ｐｄ触媒の存在下に接触水素化して保護基Ｐ１を除去
し、塩酸−ジオキサン溶液あるいはトリフルオロ酢酸等
の脱保護試薬を用いて保護基Ｐ３のＢｏｃ基を除去すれ
ばよい。また、Ｐ１が低級アルキルエステル型保護基の
時は、１Ｍ程度の水酸化ナトリウム溶液を用いてアルカ
リけん化することで除去すればよい。他の保護基の場合
にも常法により除去することができる。かくして得られ
る式（１）の化合物は、必要に応じて薬理学的に許容さ
れる塩に変換しても良い。塩への変換は、式（１）の化
合物を、例えば塩酸、硝酸などの無機酸、あるいはｐ−
トルエンスルホン酸などの有機酸で常法により処理する
ことによって実施できる。

【００２２】本発明の式（１）のフェベスチン誘導体ま
たはその薬理学的に許容される塩は、酵素阻害活性、特
にアミノペプチダーゼＮに対して優れた阻害活性を示
し、抗癌剤あるいは免疫賦活剤としての用途が期待され
る。従って本発明の更なる発明は、フェベスチン誘導体
またはその薬理学的に許容される塩及び医薬用添加剤と
からなる医薬、特にアミノペプチダーゼＮ阻害剤であ
る。医薬用添加剤は特に制限はなく、一般的に使用され
るのが使用できる。上記医薬、特に阻害剤組成物中の有
効成分（フェベスチン誘導体またはその塩）の割合はそ
の剤形などにより異なるので一概にはいえないが、０．
０５〜９９重量％程度まで広範囲に使用することがで
き、通常注射剤では０．１〜５０重量％程度であり、そ
れ以外の製剤では１〜６０重量％程度である。残部は医
薬用添加剤である。

【００２３】フェベスチン誘導体またはその薬理学的に
許容される塩を、通常、人を含む温血動物に経口投与あ
るいは静脈、皮内、筋肉内投与などの非経口投与でその
有効量を投与することにより生体中のアミノペプチダー
ゼＮを阻害することができる。投与量は投与する対象、
投与ルートなどによって変動するが通常、０．０５〜１
５０mg/Kg/日、好ましくは０．５〜１００mg/Kg/日、よ
り好ましくは１〜５０mg/Kg/日である。

【００２４】投与する際の製剤としては慣用的に用いら
れている剤形が挙げられる。経口投与の場合には、医薬
用添加剤例えばデンプンなどの通常の賦形剤などととも
に成型された錠剤、顆粒剤、カプセル剤などが用いられ
る。非経口投与の場合には医薬用添加剤例えば生理食塩
水、溶解剤などを用いて製剤化された通常の注射剤など
が用いられる。

【００２５】

【発明の効果】本発明により、酵素特異性を有する酵素
阻害剤、特にアミノペプチダーゼＮ阻害作用を有し、抗
癌剤あるいは免疫賦活剤の活性成分としての用途が期待
される式（１）で表されフェベスチンおよびその誘導体
が得られる。

【００２６】

【実施例】以下、実施例及び試験例により本発明を具体
的に説明するが、本発明はこれにより限定されるもので
はない。 参考例１Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエ
ステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−バリン358.4mg(1.65mmol) 、フェニルアラ
ニンベンジルエステル・ｐ−トルエンスルホン酸塩642.
2mg(1.5mmol)及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール・
１水和物252.5mg(1.65mmol）をＤＭＦ6.5ml に溶解し、
氷冷下でトリエチルアミン0.235ml(1.65mmol）及び水溶
性カルボジイミド・１塩酸塩317.8mg(1.65mmol）を加え
２時間撹拌後、室温でさらに20時間撹拌した。反応終了
後、10％クエン酸水溶液50mlを加え、酢酸エチル50mlで
２回抽出した。有機層を10％クエン酸水溶液50mlで１
回、４％炭酸水素ナトリウム水溶液50mlで２回及び飽和
食塩水50mlで１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥
後、溶媒留去することで、粗Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−Ｌ−
フェニルアラニンベンジルエステル684.7mg を得た。こ
の粗体にクロロホルムを加えて溶解し、これにヘキサン
を加え、低温で結晶化させた。結晶を濾取し、ヘキサン
で洗浄後、乾燥することで、白色結晶のＢｏｃ−Ｌ−バ
リル−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル644.0mg
を得た。収率94.7％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ４５５（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００２７】参考例２Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニン
ベンジルエステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエ
ステル530.0mg(1.17mmol) に４Ｎ塩酸−ジオキサン5ml
を加え、室温で１時間撹拌後、溶媒を留去することで、
白色粉末のＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニンベンジル
エステル塩酸塩を得た。このうちの250mg(0.64mmol)
に、Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ 207.7mg(0.70mmol) 、１−ヒド
ロキシベンゾトリアゾール・１水和物107.8mg(0.70mmo
l）及びＤＭＦ 2.5mlを加えて溶解し、氷冷下でトリエ
チルアミン0.0985ml(0.70mmol)及び水溶性カルボジイミ
ド・１塩酸塩147.6mg(0.77mmol）を加え２時間撹拌後、
室温でさらに16時間撹拌した。反応終了後、10％クエン
酸水溶液50mlを加え、酢酸エチル50mlで２回抽出した。
有機層を10％クエン酸水溶液50mlで１回、４％炭酸水素
ナトリウム水溶液50mlで２回及び飽和食塩水50mlで１回
洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去するこ
とで、粗Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニル
アラニンベンジルエステル414.6mg を得た。この粗体に
クロロホルムを加えて溶解し、これにヘキサンを加え、
低温で結晶化させた。結晶を濾取し、ヘキサンで洗浄
後、乾燥することで、白色結晶のＢｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ
−バリル−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル380.
8mg を得た。収率94.3％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ６３２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００２８】参考例３ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニン（フェベ
スチン）の合成 Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニン
ベンジルエステ337.1mg(0.53mmol) にパラジウム黒50m
g、酢酸3ml 及びメタノール3ml を加え、系内を水素置
換後、室温で１時間接触還元した。触媒を濾別後、濾液
を溶媒留去することで、白色粉末のＢｏｃ−ＡＨＰＡ−
Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニン270.8mg を得た。こ
れに、トリフルオロ酢酸2.5ml を加え、室温で１時間撹
拌後、溶媒留去し、ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニ
ルアラニン204.9mg を得た。これを高速液体クロマトグ
ラフィー（ＨＰＬＣ）精製（カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ
ＰＡＫ Ｃ１８、SHISEIDO社、20×250mm 、溶離液：ア
セトニトリル：0.1 ％トリフルオロ酢酸＝６：１９、流
速：８ml／min.、検出波長：210nm)し、ＡＨＰＡ−Ｌ−
バリル−Ｌ−フェニルアラニンを含むフラクションを濃
縮乾固した。これをメタノール3ml に溶解し、メタノー
ルで膨潤させたセファデックスＬＨ−２０(550ml）のカ
ラムに付し、メタノールで展開した。ＡＨＰＡ−Ｌ−バ
リル−Ｌ−フェニルアラニンを含むフラクションを減圧
濃縮し、190.1mg の白色粉末を得た。収率88.5％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ４４２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００２９】実施例１Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリンベンジルエステルの
合成 Ｂｏｃ−Ｌ−バリン478.0mg(2.2mmol)、Ｌ−プロリンベ
ンジルエステル・1 塩酸塩439.4mg(1.82mmol）及び１−
ヒドロキシベンゾトリアゾール・１水和物337.6mg(2.2m
mol)にＤＭＦ４mlを加えて溶解し、氷冷下でトリエチル
アミン0.308ml(2.2mmol)及び水溶性カルボジイミド・１
塩酸塩421.7mg(2.2mmol)を加え２時間撹拌後、室温でさ
らに20時間撹拌した。反応終了後、10％クエン酸水溶液
50mlを加え、酢酸エチル50mlで２回抽出した。有機層を
10％クエン酸水溶液50mlで１回、４％炭酸水素ナトリウ
ム水溶液50mlで２回及び飽和食塩水50mlで１回洗浄し、
無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去することで、ア
メ状の粗Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリンベンジルエ
ステル788.0mg を得た。この粗体をカラムクロマトグラ
フィー精製（シリカゲル、クロロホルム：メタノール
（100 ：１））することで、アメ状のＬ−プロリンベン
ジルエステル710.9mg を得た。収率96.7％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ４０５（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３０】実施例２Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリンベンジル
エステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリンベンジルエステル34
3.8mg(0.85mmol）に４Ｎ塩酸−ジオキサン3.5ml を加
え、室温で１時間撹拌後、溶媒を留去することで、白色
粉末のＬ−バリル−Ｌ−プロリンベンジルエステル塩酸
塩を得た。このＬ−バリル−Ｌ−プロリンベンジルエス
テル塩酸塩140.4mg(0.41mmol) に、Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ 1
33.4mg(0.45mmol)及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾー
ル・１水和物68.9mg(0.45mmol)にＤＭＦ 1.5mlを加えて
溶解し、氷冷下で水溶性カルボジイミド・１塩酸塩86.3
mg(0.45mmol)を加え、15分撹拌後、トリエチルアミン0.
063ml(0.45mmol）を加えて２時間撹拌した。さらに、室
温で16時間撹拌した。反応終了後、10％クエン酸水溶液
50mlを加え、酢酸エチル50mlで２回抽出した。有機層を
10％クエン酸水溶液50mlで１回、４％炭酸水素ナトリウ
ム水溶液50mlで２回及び飽和食塩水50mlで１回洗浄し、
無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去することで、粗
Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリンベンジル
エステル231.3mg を得た。この粗体をカラムクロマトグ
ラフィー精製（シリカゲル、クロロホルム：メタノール
（100 ：１））することで、白色粉末のＢｏｃ−ＡＨＰ
Ａ−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリンベンジルエステル203.3m
g を得た。収率85.1％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ５８２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３１】実施例３ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリンの合成 Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリンベンジル
エステル150.2mg にパラジウム黒25mg、酢酸1.5mg 及び
メタノール1.5ml を加え、系内を水素置換後、室温で１
時間接触還元した。触媒を濾別後、濾液を溶媒留去する
ことで、白色粉末Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−
プロリン134.4mg を得た。これにトリフルオロ酢酸１ml
を加え、室温で１時間撹拌後、溶媒留去することで、粗
ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリン109.1mg を得た。
この粗体をＨＰＬＣ精製（カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ Ｐ
ＡＫ Ｃ１８、SHISEIDO社、20×250mm 、溶離液：アセ
トニトリル：0.1 ％トリフルオロ酢酸= ４：２１、流
速：8ml ／min.、検出波長：210nm)し、ＡＨＰＡ−Ｌ−
バリル−Ｌ−プロリンを含むフラクションを濃縮乾固し
た。これをメタノール２mlに溶解し、メタノールで膨潤
させたセファデックスＬＨ−２０(550ml）のカラムに付
し、メタノールで展開した。ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ
−プロリンを含むフラクションを減圧濃縮し、90.4mgの
白色粉末を得た。収率89.1％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ３９２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３２】実施例４Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジンメチルエステルの
合成 Ｂｏｃ−Ｌ−バリン521.5mg(2.4mmol)、Ｌ−ヒスチジン
メチルエステル・２塩酸塩518.4mg(2.0mmol)、１−ヒド
ロキシベンゾトリアゾール・１水和物367.8mg(2.4mmol)
及びベンゾトリアゾリル−Ｎ−ヒドロキシトリスジメチ
ルアミノホスホニウムヘキサフルオロリン化物塩（Bop
試薬）1063.2mg(2.4mmol) をＤＭＦ7mlに溶解し、氷冷
下でトリエチルアミン0.98ml(7.0mmol）を加え１時間撹
拌後、室温でさらに１６時間撹拌した。反応終了後、４
％炭酸水素ナトリウム50mlを加え、酢酸エチル50mlで２
回抽出した。有機層を４％炭酸水素ナトリウム水溶液50
mlで２回、水50mlで１回及び飽和食塩水50mlで１回洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去すること
で、粗Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジンメチルエス
テル774.3mg を得た。この粗体をカラムクロマトグラフ
ィー精製（シリカゲル、クロロホルム：メタノール（10
0 ：3 ））することで、白色粉末のＢｏｃ−Ｌ−バリル
−Ｌ−ヒスチジンメチルエステル553.0mg を得た。収率
75.0％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ３６９（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３３】実施例５Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジンメチル
エステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジンメチルエステル51
3.6mg(1.39mmol) に４Ｎ塩酸−ジオキサン７mlを加え、
室温で１時間撹拌後、溶媒を留去することで、白色粉の
Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジンメチルエステル・２塩酸塩
を得た。このうちの178.9mg(0.52mmol) にＢｏｃ−ＡＨ
ＰＡ 177.5mg(0.60mmol) 、１−ヒドロキシベンゾトリ
アゾール・１水和物92.1mg(0.6mmol）、ベンゾトリアゾ
リル−Ｎ−ヒドロキシトリスジメチルアミノホスホニウ
ムヘキサフルオロリン化物塩266.8mg(0.6mmol)及びＤＭ
Ｆ 2mlを加えて溶解し、氷冷下でトリエチルアミン0.24
5ml(1.75mmol）を加え１時間撹拌後、室温でさらに１６
時間撹拌した。反応終了後、４％炭酸水素ナトリウム50
mlを加え、酢酸エチル50mlで２回抽出した。有機層を４
％炭酸水素ナトリウム水溶液50mlで１回、及び飽和食塩
水50mlで１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶
媒留去することで、粗Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−
Ｌ−ヒスチジンメチルエステル299.2mg を得た。この粗
体をカラムクロマトグラフィー精製（シリカゲル、クロ
ロホルム：メタノール（１００：６））することで、白
色粉末のＢｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジ
ンメチルエステル230.6mg を得た。収率81.1％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ５４６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３４】実施例６ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジンの合成 Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジンメチル
エステル216.4mg(0.40mmol) にメタノール3.96mlを加え
て溶解し、１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液0.87ml(0.79m
mol)を加え室温で3.5 時間撹拌後、トリフルオロ酢酸0.
083ml を加え、溶媒留去することで、粗Ｂｏｃ−ＡＨＰ
Ａ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジン350.2mg を得た。これ
にトリフルオロ酢酸2.5ml を加え、室温で１時間撹拌
後、溶媒留去し、粗ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチ
ジン・１トリフルオロ酢酸塩を得た。この粗体をＨＰＬ
Ｃ精製（カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８、SH
ISEIDO社、20×250mm 、溶離液：アセトニトリル：0.1
％トリフルオロ酢酸＝９：９１、流速：8ml ／min.、検
出波長：210nm)し、ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチ
ジンを含むフラクションを濃縮乾固した。これをメタノ
ール２mlに溶解し、メタノールで膨潤させたセファデッ
クスＬＨ−２０(550ml）のカラムに付し、メタノールで
展開した。ＡＨＰＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−ヒスチジン・１
トリフルオロ酢酸塩を含むフラクションを減圧濃縮し、
166.8mg の白色粉末を得た。収率78.3％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ４３２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３５】実施例７Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジンメチル
エステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニン636.5mg(2.4mmol)、Ｌ−
ヒスチジンメチルエステル・２塩酸塩518.3mg(2.0mmo
l)、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール・１水和物367.
6mg(2.4mmol)及びベンゾトリアゾリル−Ｎ−ヒドロキシ
トリスジメチルアミノホスホニウムヘキサフルオロリン
化物塩1063.2mg(2.4mmol) をＤＭＦ7ml に溶解し、氷冷
下でトリエチルアミン0.98ml(7.0mmol）を加え１時間撹
拌後、室温でさらに１６時間撹拌した。反応終了後、４
％炭酸水素ナトリウム50mlを加え、酢酸エチル50mlで２
回抽出した。有機層を４％炭酸水素ナトリウム水溶液50
mlで２回、水50mlで１回及び飽和食塩水50mlで１回洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去すること
で、粗Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジン
メチルエステル854.4mg を得た。この粗体をカラムクロ
マトグラフィー精製（シリカゲル、クロロホルム：メタ
ノール（100 ：３））することで、白色粉末のＢｏｃ−
Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジンメチルエステル
779.3mg を得た。収率93.6％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ４１７（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３６】実施例８Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチ
ジンメチルエステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジンメチル
エステル735.8mg(1.77mmol) に４Ｎ塩酸−ジオキサン10
mlを加え、室温で１時間撹拌後、溶媒を留去すること
で、白色粉末のＬ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジン
メチルエステル・２塩酸塩を得た。このうちの194.6mg
(0.5mmol)にＢｏｃ−ＡＨＰＡ 177.4mg(0.6mmol)、１
−ヒドロキシベンゾトリアゾール・１水和物92.3mg(0.6
mmol）、ベンゾトリアゾリル−Ｎ−ヒドロキシトリスジ
メチルアミノホスホニウムヘキサフルオロリン化物塩26
5.9mg(0.6mmol)及びＤＭＦ 2.5ml を加えて溶解し、氷
冷下でトリエチルアミン0.245ml(1.75mmol）を加え１時
間撹拌後、室温でさらに１６時間撹拌した。反応終了
後、４％炭酸水素ナトリウム50mlを加え、酢酸エチル50
mlで２回抽出した。有機層を４％炭酸水素ナトリウム水
溶液50mlで１回、及び飽和食塩水50mlで１回洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去することで、粗Ｂ
ｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ヒスチジ
ンメチルエステル321.4mg を得た。この粗体をカラムク
ロマトグラフィー精製（シリカゲル、クロロホルム：メ
タノール（１００：５））することで、白色粉末のＢｏ
ｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジン
メチルエステル262.5mg を得た。収率88.3％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ５９４（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３７】実施例９ＡＨＰＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジンの合
成 Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチ
ジンメチルエステル225.2mg(0.38mmol) にメタノール3.
8ml を加えて溶解し、１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液0.
834ml(0.83mmol) を加え室温で3.5 時間撹拌後、トリフ
ルオロ酢酸0.078ml を加え、溶媒留去することで、粗Ｂ
ｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジ
ン351.3mg を得た。これにトリフルオロ酢酸2.5ml を加
え、室温で１時間撹拌後、溶媒留去し、粗ＡＨＰＡ−Ｌ
−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジン・１トリフルオロ
酢酸塩を得た。この粗体をＨＰＬＣ精製（カラム：ＣＡ
ＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８、SHISEIDO社、20×250mm
、溶離液：アセトニトリル：0.1 ％トリフルオロ酢酸
＝３：２２、流速：8ml ／min.、検出波長：210nm)し、
ＡＨＰＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジンを含
むフラクションを濃縮乾固した。これをメタノール２ml
に溶解し、メタノールで膨潤させたセファデックスＬＨ
−２０(550ml）のカラムに付し、メタノールで展開し
た。ＡＨＰＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−ヒスチジン
・１トリフルオロ酢酸塩を含むフラクションを減圧濃縮
し、165.2mg の白色粉末を得た。収率73.4％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ４８０（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３８】実施例１０Ｂｏｃ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオキシメチ
ル）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオキシメチ
ル）・１水和物592.1mg(1.5mmol)、Ｌ−フェニルアラニ
ンベンジルエステル・ｐ−トルエンスルホン酸塩705.7m
g(1.65mmol) 及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール・
１水和物254.5mg(1.66mmol) をＤＭＦ 6.5mlに溶解し、
氷冷下でトリエチルアミン0.235ml(1.65mmol）を加えて
15分撹拌後、水溶性カルボジイミド・１塩酸塩318.4mg
(1.65mmol)を加え、２時間撹拌した。さらに、室温で16
時間撹拌した。反応終了後、10％クエン酸水溶液50mlを
加え、酢酸エチル50mlで２回抽出した。有機層を10％ク
エン酸水溶液50mlで１回、４％炭酸水素ナトリウム水溶
液50mlで２回及び飽和食塩水50mlで１回洗浄し、無水硫
酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去することで、粗Ｂｏｃ
−Ｌ−ヒスチジール（Ｎπ−ベンジルオキシメチル）−
Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル937.1mg を得
た。この粗体に酢酸エチルを加えて溶解し、これにヘキ
サンを加え、低温で結晶化させた。結晶を濾取し、ヘキ
サンで洗浄後、乾燥することで白色結晶のＢｏｃ−Ｌ−
ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオキシメチル）−Ｌ−フェ
ニルアラニンベンジルエステル838.8mg を得た。収率9
1.3％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ６１３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００３９】実施例１１Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオ
キシメチル）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル
の合成 Ｂｏｃ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオキシメチ
ル）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル805.1mg
(1.31mmol) に４Ｎ塩酸−ジオキサン8ml を加え、室温
で１時間撹拌後、溶媒を留去することで、白色粉末のＬ
−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオキシメチル）−Ｌ−フ
ェニルアラニンベンジルエステル・２塩酸塩・１ジオキ
サン877.8mg を得た。このうちの335.8mg(0.50mmol) に
Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ 164.8mg(0.56mmol) 、１−ヒドロキ
シベンゾトリアゾール・１水和物86.0mg(0.56mmol)及び
ＤＭＦ 3.5ml を加えて溶解し、氷冷下でトリエチルア
ミン0.154ml(1.1mmol)を加えて15分撹拌後、水溶性カル
ボジイミド・１塩酸塩108.3mg(0.56mmol) を加え、２時
間撹拌した。さらに、室温で16時間撹拌した。反応終了
後、10％クエン酸水溶液50mlを加え、酢酸エチル50mlで
２回抽出した。有機層を10％クエン酸水溶液50mlで１
回、４％炭酸水素ナトリウム水溶液50mlで２回及び飽和
食塩水50mlで１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥
後、溶媒留去することで、粗Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−ヒ
スチジル（Ｎπ−ベンジルオキシメチル）−Ｌ−フェニ
ルアラニンベンジルエステル425.4mg を得た。この粗体
をカラムクロマトグラフィー精製（シリカゲル、クロロ
ホルム：メタノール（１００：３））することで、白色
粉末のＢｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎπ−ベン
ジルオキシメチル）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエ
ステル348.1mg(0.44mmol) を得た。収率88.0％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ７９０（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００４０】実施例１２ＡＨＰＡ−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニンの合
成 Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオ
キシメチル）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル
242.0mg(0.31mmol) にパラジウム黒50mg、酢酸2m及びメ
タノール2ml を加え、系内を水素置換後、室温で２７時
間接触還元した。さらにパラジウム黒50mg及び酢酸3ml
を加え、室温で２０時間接触還元した。触媒を濾別後、
濾液を溶媒留去することで、白色粉末Ｂｏｃ−ＡＨＰＡ
−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニン206.0mg を得
た。これに、トリフルオロ酢酸１mlを加え、室温で１時
間撹拌後、溶媒留去し、粗ＡＨＰＡ−Ｌ−ヒスチジル−
Ｌ−フェニルアラニン・１トリフルオロ酢酸塩266.7mg
を得た。この粗体をＨＰＬＣ精製（カラム：ＣＡＰＣＥ
ＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８、SHISEIDO社、20×250mm 、溶離
液：アセトニトリル：0.1 ％トリフルオロ酢酸＝９：４
１、流速：８ml／min.、検出波長：210nm)し、ＡＨＰＡ
−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニンを含むフラク
ションを濃縮乾固した。これをメタノール２mlに溶解
し、メタノールで膨潤させたセファデックスＬＨ−２０
(550ml）のカラムに付し、メタノールで展開した。ＡＨ
ＰＡ−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニン・１トリ
フルオロ酢酸塩を含むフラクションを減圧濃縮し、151.
8mg(0.256mmol)の白色粉末を得た。収率83.7％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ４８０（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００４１】実施例１３Ｂｏｃ−ＡＨＣＡの合成 ＡＨＣＡ 2.38g(10.0mmol)にジ−ｔ−ブチルジカルボナ
ート2.42g(11.1mmol)、水20mlおよびジオキサン40mlを
加えて溶解し、氷冷下でトリエチルアミン2.94ml(21.0m
mol)を加えて30分間撹拌した。室温でさらに16時間撹拌
後、溶媒留去した。次いで、反応混合物を水10mlで希釈
し、５％硫酸水素カリウム水溶液でｐＨ２に調整後、酢
酸エチル30mlで３回抽出した。油層を飽和食塩水30mlで
洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去するこ
とで、Ｂｏｃ−ＡＨＣＡ3.00g を得た。収率99.4％。 Ｒｆ ０．５２（クロロホルム：メタノール：酢酸＝9
0：10：５）。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ３２４（Ｍ＋Ｎａ）＋。

【００４２】実施例１４Ｂｏｃ−ＡＨＣＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニン
ベンジルエステルの合成 実施例２で得られたＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニン
ベンジルエステル・１塩酸塩100.4mg(0.26mmol) にＢｏ
ｃ−ＡＨＣＡ 86.8mg(0.29mmol) 、１−ヒドロキシベン
ゾトリアゾール・1 水和物44.2mg(0.29mmol)及びＤＭＦ
１mlを加えて溶解し、氷冷下でトリエチルアミン0.04ml
(0.29mmol)及び水溶性カルボジイミド・１塩酸塩55.3mg
(0.767mmol）を加え２時間撹拌後、室温でさらに16時間
撹拌した。反応終了後、10％クエン酸水溶液50mlを加
え、酢酸エチル50mlで２回抽出した。有機層を10％クエ
ン酸水溶液50mlで１回、４％炭酸水素ナトリウム水溶液
50mlで２回及び飽和食塩水50mlで１回洗浄し、無水硫酸
ナトリウムで乾燥後、溶媒留去することで、粗Ｂｏｃ−
ＡＨＣＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニンベンジル
エステル165.1mg を得た。この粗体にクロロホルムを加
えて溶解し、これにヘキサンを加え、低温で結晶化させ
た。結晶を濾取し、ヘキサンで洗浄後、乾燥することで
白色結晶のＢｏｃ−ＡＨＣＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニ
ルアラニンベンジルエステル148.2mg を得た。収率89.4
％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ６３８（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００４３】実施例１５ＡＨＣＡ−Ｌ−バリルーＬ−フェニルアラニンの合成 Ｂｏｃ−ＡＨＣＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニン
ベンジルエステル109.4mg(0.17mmol) にパラジウム黒15
mg、酢酸１ml及びメタノール１mlを加え、系内を水素置
換後、室温で１時間接触還元した。触媒を濾別後、濾液
を溶媒留去することで、白色粉末のＢｏｃ−ＡＨＣＡ−
Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニン106.1mg を得た。こ
れにトリフルオロ酢酸１mlを加え、室温で１時間撹拌
後、溶媒留去し、粗ＡＨＣＡ−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニ
ルアラニン72.9mg得た。この粗体にメタノールを加え溶
解し、これにイソプロピルエーテルを加え、結晶化させ
た。結晶を濾取し、イソプロピルエーテルで洗浄後、乾
燥した。さらにメタノール１mlに溶解し、メタノールで
膨潤させたセファデックスＬＨ−２０(550ml）のカラム
に付し、メタノールで展開した。ＡＨＣＡ−Ｌ−バリル
−Ｌ−フェニルアラニンを含むフラクションを減圧濃縮
し、59.6mgの白色粉末を得た。収率78.3％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ４４８（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００４４】実施例１６Ｂｏｃ−ＡＨＣＡ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオ
キシメチル）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル
の合成 実施例１４で得られたＬ−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジル
オキシメチル）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステ
ル・２塩酸塩・１ジオキサン236.4mg(0.35mmol) にＢｏ
ｃ−ＡＨＣＡ 117.4mg(0.39mmol) 、１−ヒドロキシベ
ンゾトリアゾール・１水和物61.7mg(0.39mmol)及びＤＭ
Ｆ 2.5mlを加えて溶解し、氷冷下でトリエチルアミン0.
108ml(0.77mmol）を加えて15分撹拌後、水溶性カルボジ
イミド・１塩酸塩74.6mg(0.39mmol)を加え、２時間撹拌
した。さらに室温で16時間撹拌した。反応終了後、10％
クエン酸水溶液50mlを加え、酢酸エチル50mlで２回抽出
した。有機層を10％クエン酸水溶液50mlで１回、４％炭
酸水素ナトリウム水溶液50mlで２回及び飽和食塩水50ml
で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去
することで、粗Ｂｏｃ−ＡＨＣＡ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎ
π−ベンジルオキシメチル）−Ｌ−フェニルアラニンベ
ンジルエステル272.0mg を得た。この粗体をカラムクロ
マトグラフィー精製（シリカゲル、クロロホルム：メタ
ノール（１００：２））することで、白色粉末のＢｏｃ
−ＡＨＣＡ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオキシメ
チル）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル240.1m
g(0.30mmol) を得た。収率86.3％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ７９６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００４５】実施例１７ＡＨＣＡ−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニンの合
成 Ｂｏｃ−ＡＨＣＡ−Ｌ−ヒスチジル（Ｎπ−ベンジルオ
キシメチル）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル
240.1mg(0.30mmol) にパラジウム黒60mg、酢酸2.5ml 及
びメタノール2.5ml を加え、系内を水素置換後、室温で
２５時間接触還元した。さらに、パラジウム黒60mg及び
酢酸１mlを加え、室温で２８時間接触還元した。触媒を
濾別後、濾液を溶媒留去することで、白色粉末のＢｏｃ
−ＡＨＣＡ−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニアラニン223.
5mg を得た。これにトリフルオロ酢酸１.5mlを加え、室
温で１時間撹拌後、溶媒留去し、粗ＡＨＣＡ−Ｌ−ヒス
チジル−Ｌ−フェニルアラニン・１トリフルオロ酢酸塩
271.3mg を得た。この粗体をＨＰＬＣ精製（カラム：Ｃ
ＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８、SHISEIDO社、20×250m
m 、溶離液：アセトニトリル：0.1 ％トリフルオロ酢酸
= １１：３９、流速：８ml／min.、検出波長：210nm)
し、ＡＨＣＡ−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニン
を含むフラクションを濃縮乾固した。これをメタノール
２mlに溶解し、メタノールで膨潤させたセファデックス
ＬＨ−２０(550ml）のカラムに付し、メタノールで展開
した。ＡＨＣＡ−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−フェニルアラニ
ン・１トリフルオロ酢酸塩を含むフラクションを減圧濃
縮し、125.4mg(0.21mmol) の白色粉末を得た。収率59.7
％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／Ｚ ４８６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００４６】実施例１８Ｚ−ＡＨＣＡの合成 ＡＨＣＡ 2.38g(10.0mmol)にＳ−ベンジルオキシカルボ
ニル−４，６−ジメチル−２−チオピリミジン3.30g(1
2.0mmol) 、水 9.0ml、ジオキサン 9.0ml及びトリエチ
ルアミン3.50ml(25.0mmol)を加え、室温で20時間撹拌し
た。反応終了後、水45mlを加え、酢酸エチル40mlで２回
洗浄後、水層を氷浴で冷却した。水層に６Ｎ塩酸 3.5ml
を加えｐＨ２に調整後、酢酸エチル30mlで３回抽出し
た。油層を１Ｎ塩酸30mlで３回及び飽和食塩水30mlで 2
回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去する
ことで、Ｚ−ＡＨＣＡ1.48g を得た。一方、先の酢酸エ
チル洗浄液より回収した粗Ｚ−ＡＨＣＡをカラムクロマ
トグラフィー精製（シリカゲル、クロロホルム：メタノ
ール：酢酸＝200:2:1 〜50:2:1）することで、Ｚ−ＡＨ
ＣＡ1.68g を得た。収率94.1％。

【００４７】融点 １２４〜１２５°Ｃ ［α］２４／Ｄ＋５１．３°（ｃ１．０，メタノール） ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ３３４（Ｍ−１）− 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ） δ：０．７５−１．３７（ｍ，６Ｈ） １．３８−１．９０（ｍ，７Ｈ） ４．１５ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．５Ｈｚ） ４．２７ （ｍ，１Ｈ） ５．０６，５．２１（ＡＢｑ，２Ｈ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ） ５．１５ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ） ６．０９ （ｂｒ ｄ） ７．２３−７．４０（ｍ，５Ｈ）

【００４８】実施例１９Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェニルアラニ
ンベンジルエステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニン（Ｚ２）352.7mg(0.650mmol)、
Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル・ｐ−トルエン
スルホン酸塩292.2mg(0.683mmol)及び１−ヒドロキシベ
ンゾトリアゾール175.9mg(1.302mmol)をＤＭＦ 3.0mlに
溶解し、氷冷化でトリエチルアミン 0.096ml(0.686mmo
l) 及び１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピ
ル）カルボジイミド・塩酸塩162.0mg(0.845mmol)を加え
２時間撹拌後、室温でさらに６時間撹拌した。反応終了
後、反応液を酢酸エチル30mlで希釈したのち、飽和炭酸
水素ナトリウム水溶液、10％クエン酸水溶液および飽和
食塩水各15mlで順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥
後、溶媒留去することで、粗体の白色固体を得た。次い
で、この白色固体をカラムクロマトグラフィー精製（シ
リカゲル、クロロホルム：メタノール（１００：１））
することで、白色粉末状のＢｏｃ−Ｌ−アルギニル（Ｚ
２）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエステル492.9mg
を得た。収率97.2％。

【００４９】融点 １３８．５〜１３９．５°Ｃ ［α］２６／Ｄ＋６．６°（ｃ１．０，クロロホルム） ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ７８０（Ｍ＋Ｈ）＋ 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ） δ：１．４０ （ｓ，９Ｈ） １．４５−１．７８（ｍ，４Ｈ） ２．８１ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．８，１４．０Ｈｚ） ３．００ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９，１４．０Ｈｚ） ３．７０−３．９４（ｍ，２Ｈ） ４．１９ （ｍ，１Ｈ） ４．７７ （ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９，６．８，７．８Ｈｚ） ５．０５，５．０９（ＡＢｑ，２Ｈ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ） ５．０５，５．１４（ＡＢｑ，２Ｈ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ） ５．２１，５．２３（ＡＢｑ，２Ｈ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ） ５．５５ （ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ） ６．７４ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ） ６．９４ （ｍ，２Ｈ） ７．０２−７．４７（ｍ，１８Ｈ） ９．２４ （ｂｒ ｓ，１Ｈ） ９．４２ （ｂｒ ｓ，１Ｈ）

【００５０】実施例２０Ｚ−ＡＨＣＡ−Ｌ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェニル
アラニンベンジルエステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェニルアラニ
ンベンジルエステル253.4mg(0.325mmol)にトリフルオロ
酢酸 2mlを加え、室温で40分間撹拌後、溶媒留去し、さ
らにトルエン 2mlを加えて溶媒留去する操作を２回行う
ことでシロップ状のＬ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェ
ニルアラニンベンジルエステル・トリフルオロ酢酸塩を
得た。この塩にＺ−ＡＨＣＡ118.3mg(0.353mmol)、１−
ヒドロキシベンゾトリアゾール 88.5mg(0.655mmol)及び
ＤＭＦ 2.5mlを加えて溶解し、氷冷下でトリエチルアミ
ン0.050ml(0.357mmol)及び１−エチル−３−（３−ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩 87.2mg
(0.455mmol)を加え２時間撹拌後、室温でさらに６時間
撹拌した。反応終了後、反応混合物を酢酸エチル25mlで
希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、10％クエン酸
水溶液及び飽和食塩水各10mlで順次洗浄した。油層を無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去することで、油状
の粗体を得た。この粗体をカラムクロマトグラフィー精
製（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル：メタノール
（70：30：１〜60：40：２））することで、白色固体と
してＺ−ＡＨＣＡ−Ｌ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェ
ニルアラニンベンジルエステル85.7mgを得た。収率57.3
％。次いで、この白色固体をクロロホルム−ヘキサン系
で結晶化させた。

【００５１】融点 １３１〜１３３°Ｃ ［α］２６／Ｄ＋３．４°（ｃ１．１，クロロホルム） ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ９９７（Ｍ＋Ｈ）＋ 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ） δ：０．７２−０．９９（ｍ，２Ｈ） １．００−１．８８（ｍ，１５Ｈ） ２．９５ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３，１３．８Ｈｚ） ３．０６ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．１，１３．８Ｈｚ） ３．８５ （ｍ，３Ｈ） ３．９５ （ｍ，１Ｈ） ４．１０ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ） ４．４５ （ｂｒ ｄｄｄ，１Ｈ） ４．７６ （ｂｒ ｄｄｄ，１Ｈ） ４．９６，５．０３（ＡＢｑ，２Ｈ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ） ５．０４，５．１０（ＡＢｑ，２Ｈ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ） ５．０５，５．１０（ＡＢｑ，２Ｈ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ） ５．１９，５．２２（ＡＢｑ，２Ｈ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ） ５．３２ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ） ６．９４−７．０５（ｍ，３Ｈ） ７．０６−７．１９（ｍ，３Ｈ） ７．２０−７．４３（ｍ，２１Ｈ） ９．２７ （ｂｒ ｓ，１Ｈ） ９．３９ （ｂｒ ｓ，１Ｈ）

【００５２】実施例２１ＡＨＣＡ−Ｌ−アルギニル−Ｌ−フェニルアラニンの合
成 Ｚ−ＡＨＣＡ−Ｌ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェニル
アラニンベンジルエステル183.5mg(0.184mmol)をメタノ
ール−酢酸−水（７：２：３）溶液６mlに溶解し、Ｐｄ
−ブラック触媒の存在下に、水素雰囲気下で２日間撹拌
した。触媒を濾別後、濾液を溶媒留去することで得られ
た粗体をカラムクロマトグラフィー精製（セファデック
スＬＨ−20、１％酢酸−メタノール展開、次いでＯＤ
Ｓ、水−メタノール−酢酸（50：50：１））すること
で、白色粉末としてＡＨＣＡ−Ｌ−アルギニル−Ｌ−フ
ェニルアラニン・3/2 酢酸塩92.4mgを得た。

【００５３】融点 １４１〜１４８°Ｃ ［α］２６／Ｄ＋８．３°（ｃ０．７２，メタノール） ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ５０５（Ｍ−酢酸＋１）＋ 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ） δ：０．８６−１．０６（ｍ，２Ｈ） １．１４−１．９２（ｍ，１５Ｈ） １．９３ （ｓ，４．５Ｈ） ２．９４ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，１３．９Ｈｚ） ３．１３ （ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ） ３．２２ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．４，１３．９Ｈｚ） ３．５４ （ｍ，１Ｈ） ４．１５ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ） ４．３３ （ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ） ４．４９ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．４，８．３Ｈｚ） ７．１０−７．３０（ｍ，５Ｈ）

【００５４】実施例２２Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニン
ベンジルエステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニン132.9mg(0.501mmol)、Ｌ
−フェニルアラニンベンジルエステル・ｐ−トルエンス
ルホン酸塩224.6mg(0.525mmol)及び１−ヒドロキシベン
ゾトリアゾール135.4mg(1.002mmol)をＤＭＦ1.5ml に溶
解し、氷冷化でトリエチルアミン 0.074ml(0.529mmol)
及び１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）
カルボジイミド・塩酸塩124.6mg(0.650mmol)を加え２時
間撹拌後、室温でさらに19時間撹拌した。反応終了後、
反応液を酢酸エチル15mlで希釈したのち、４％炭酸水素
ナトリウム水溶液、10％クエン酸水溶液および飽和食塩
水各10mlで順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、
溶媒留去することで、粗体の結晶を得た。次いで、この
白色固体をカラムクロマトグラフィー精製（セファデッ
クスＬＨ−20、メタノール展開）することで、Ｂｏｃ−
Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニンベンジル
エステル251.2mg を得た。収率99.8％。

【００５５】融点 １２７°Ｃ ［α］２３／Ｄ＋８．８°（ｃ１．０，クロロホルム） ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ５０３（Ｍ＋Ｈ）＋ 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ） δ：１．３９ （ｓ，９Ｈ） ２．９４−３．１０（ｍ，４Ｈ） ４．３１ （ｍ，１Ｈ） ４．８１ （ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．４，６．８Ｈｚ） ４．９３ （ｂｒ ｓ，１Ｈ） ５．０９ （ｓ，２Ｈ） ６．２７ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ） ６．８９ （ｍ，２Ｈ） ７．１０−７．４０（ｍ，１３Ｈ）

【００５６】実施例２３Ｚ−ＡＨＣＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルア
ラニンベンジルエステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニン
ベンジルエステル250.2mg(0.498mmol)にトリフルオロ酢
酸 2mlを加え、室温で40分間撹拌後、溶媒留去し、さら
にトルエン 2mlを加えて溶媒留去する操作を２回行うこ
とで白色固体のＬ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルア
ラニンベンジルエステル・トリフルオロ酢酸塩を得た。
この塩にＺ−ＡＨＣＡＬ175.4mg(0.523mmol)、１−ヒド
ロキシベンゾトリアゾール135.1mg(1.000mmol)及びＤＭ
Ｆ 2.0mlを加えて溶解し、氷冷下でトリエチルアミン0.
074ml(0.529mmol)及び１−エチル−３−（３−ジメチル
アミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩124.1mg(0.64
7mmol)を加え２時間撹拌後、室温でさらに17時間撹拌し
た。反応終了後、反応混合物を酢酸エチル20mlで希釈
し、４％炭酸水素ナトリウム水溶液、10％クエン酸水溶
液10ml、飽和食塩水各15mlで順次洗浄した。油層を無水
硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去することで、白色固
体の粗体を得た。この粗体をカラムクロマトグラフィー
精製（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル：メタノール
（60：40：１〜60：40：２））することで、白色固体と
してＺ−ＡＨＣＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニ
ルアラニンベンジルエステル 316.9mgを得た。収率88.4
％。次いで、この白色固体をクロロホルム−ヘキサン系
で結晶化させた。

【００５７】融点 １２７〜１２８°Ｃ ［α］２８／Ｄ−３．７°（ｃ１．０，クロロホルム） ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ７２０（Ｍ＋Ｈ）＋ 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ） δ：０．７３−１．００（ｍ，２Ｈ） １．０２−１．４８（ｍ，５Ｈ） １．５２−１．８４（ｍ，６Ｈ） ２．８５−３．１２（ｍ，４Ｈ） ３．９３ （ｍ，１Ｈ） ３．９８ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．９，５．９Ｈｚ） ４．５３ （ｂｒ ｄ，１Ｈ） ４．６１ （ｂｒ ｄｄｄ，１Ｈ） ４．７８ （ｂｒ ｄｄｄ，１Ｈ） ４．９４−５．１３（ｍ，４Ｈ） ５．３５ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ） ６．６１ （ｂｒ ｄ，１Ｈ） ６．９２ （ｍ，２Ｈ） ７．０５−７．３９（ｍ，１９Ｈ）

【００５８】実施例２４ＡＨＣＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニ
ンの合成 Ｚ−ＡＨＣＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルア
ラニンベンジルエステル316.5mg(0.440mmol)をメタノー
ル−酢酸−水（６：２：１）溶液６mlに溶解し、Ｐｄ−
ブラック触媒の存在下に、水素雰囲気下で24時間撹拌し
た。触媒を濾別後、濾液を溶媒留去することで得られた
粗体をカラムクロマトグラフィー精製（セファデックス
ＬＨ−20、５％酢酸−メタノール展開することで、ＡＨ
ＣＡ−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニン21
7.0mg を得た。収率99.6％。

【００５９】 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ４９６（Ｍ＋Ｈ）＋ 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ） δ：０．７７−１．００（ｍ，２Ｈ） １．１３−１．４０（ｍ，５Ｈ） １．４８ （ｍ，１Ｈ） １．６０−１．７９（ｍ，５Ｈ） ２．９６ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．６，１３．４Ｈｚ） ３．０３ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．４，１３．４Ｈｚ） ３．１６ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８，１３．４Ｈｚ） ３．２１ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８，１３．４Ｈｚ） ４．４２ （ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４，７．０，７．０Ｈｚ） ４．１０ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ） ４．４５ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８，６．４Ｈｚ） ４．５３ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８，９．６Ｈｚ） ７．１０−７．３２（ｍ，１０Ｈ）

【００６０】実施例２５Ｚ−ＥｔＡｈｐの合成 ＥｔＡｈｐ・トリフルオロ酢酸塩5.99mmol相当にＳ−ベ
ンジルオキシカルボニル−４，６−ジメチル−２−チオ
ピリミジン1.97g(7.18mmol) 、水 6.0ml、ジオキサン
6.0ml及びトリエチルアミン2.10ml(15.0mmol)を加え、
室温で24時間撹拌した。次いで、水40mlを加えて反応混
合物を希釈したのち、１Ｎ塩酸14mlを加えｐＨ 2に調整
し、酢酸エチル20mlで３回抽出した。油層を１Ｎ塩酸30
mlで２回及び飽和食塩水30mlで１回洗浄し、無水硫酸ナ
トリウムで乾燥後、溶媒留去することで、粗Ｚ−ＥｔＡ
ｈｐを得た。この粗体をカラムクロマトグラフィー精製
（シリカゲル、クロロホルム：メタノール：酢酸＝96：
３：１）することで、Ｚ−ＥｔＡｈｐ1.18g を得た。収
率73.7％。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ２６８（Ｍ＋Ｈ）＋。

【００６１】実施例２６Ｚ−ＥｔＡｈｐ−Ｌ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェニ
ルアラニンベンジルエステルの合成 Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェニルアラニ
ンベンジルエステル239.1mg(0.307mmol)にトリフルオロ
酢酸 2mlを加え、室温で１時間撹拌後、溶媒留去し、さ
らにトルエン 2mlを加えて溶媒留去する操作を３回行う
ことでＬ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェニルアラニン
ベンジルエステル・トリフルオロ酢酸塩を得た。この塩
にＺ−ＥｔＡｈｐ86.2mg(0.323mmol) 、Ｂｏｐ試薬142.
7mg(0.323mmol)及びクロロホルム 3.0mlを加えて溶解
し、トリエチルアミン0.129ml(0.921mmol)を加え、室温
で24時間撹拌した。反応混合物より溶媒留去した後、酢
酸エチル15mlで希釈し、４％炭酸水素ナトリウム水溶
液、10％クエン酸水溶液及び飽和食塩水各10mlで順次洗
浄した。油層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒留去
することで、油状の粗体を得た。この粗体をカラムクロ
マトグラフィー精製（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチ
ル：メタノール（50：50：１））することで、アモルフ
ァス状の固体192.9mg を得た。収率67.7％。この固体の
一部を物性測定用にさらにカラムクロマトグラフィー精
製（シリカゲル、クロロホルム：アセトニトリル（100
：１〜10：１））することで、Ｚ−ＥｔＡｈｐ−Ｌ−
アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェニルアラニンベンジルエ
ステルを得た。

【００６２】 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ９２９（Ｍ＋Ｈ）＋ 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ） δ：０．８８ （ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ） １．３０−１．９５ （ｍ，６Ｈ） ２．９５ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３，１３．９Ｈｚ） ３．０７ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９，１３．９Ｈｚ） ３．７４ （ｍ，１Ｈ） ３．７９−３．９８ （ｍ，３Ｈ） ４．０９ （ｂｒ，１Ｈ） ４．４５ （ｂｒ ｄｄｄ，１Ｈ） ４．７６ （ｂｒ ｄｄｄ，１Ｈ） ４．８８−５．１６ （ｍ，６Ｈ） ５．１９，５．２１ （ＡＢｑ，２Ｈ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ） ５．３７ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．３Ｈｚ） ６．９１−ｃａ．７．４１（ｍ，２６Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ） ７．４２ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ） ９．２８ （ｂｒ ｓ，１Ｈ） ９．４０ （ｂｒ ｓ，１Ｈ）

【００６３】実施例２７ＥｔＡｈｐ−Ｌ−アルギニル−Ｌ−フェニルアラニンの
合成 Ｚ−ＥｔＡｈｐ−Ｌ−アルギニル（Ｚ２）−Ｌ−フェニ
ルアラニンベンジルエステル84.9mg(0.440mmol) をメタ
ノール−酢酸−水（７：２：１）溶液10mlに溶解し、Ｐ
ｄ−ブラック触媒の存在下に、水素雰囲気中で24時間撹
拌した。触媒を濾別後、濾液を溶媒留去することで、Ｅ
ｔＡｈｐ−Ｌ−アルギニル−Ｌ−フェニルアラニン・酢
酸塩４９．５mgを得た。収率１００％（但し１．７５酢
酸塩として）。

【００６４】 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ４３７（Ｍ−酢酸＋１）＋ 1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ） δ：１．０４ （ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ） １．４６−ｃａ．１．８７（ｍ，６Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ） ２．９５ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，１３．７Ｈｚ） ３．０３−ｃａ．３．１７（ｍ，２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ） ３．２２ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．０，１３．７Ｈｚ） ３．３７ （ｍ，１Ｈ） ４．２２ （ｂｒ ｓ） ４．３２ （ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ） ４．４８ （ｍ，１Ｈ） ７．０７−７．３０ （ｍ，５Ｈ） 但しδ１．９５に酢酸由来のシングレットピークあり。

【００６５】試験例 抗アミノペプチダーゼＮ活性は、J. Antibiotics，38，
1629〜1630 (1985）に記載の方法の改良法で行った。即
ち、2mＭのＬ−ロイシン−β−ナフチルアミド0.05ml、
0.1 Ｍのトリス−塩酸緩衝液（pH7.0 ）0.1ml 、検体を
含む溶液0.035ml を加えた混合溶液を37℃で、３分間加
温した後、アミノペプチダーゼＮ（ベーリンガ・マンハ
イム社製）溶液0.015ml を加え、37℃で１時間反応させ
た。10％ポリオキシエチレン（20）ソルビタンモノラウ
レート（和光純薬工業製）および0.2 ％ファーストガー
ネットGBC 塩（Sigma Chemical Company) を含む0.5 Ｍ
クエン酸ナトリウム緩衝液（pH3.78）を加えて反応を停
止し、525nm における吸光度(a) を測定した。同時に検
体を含まない緩衝液のみを用いた盲検の吸光度(b)を測
定し、アミノペプチダーゼＮ（ＡＰ−Ｎ）阻害率を
［（b-a)/b］×100 の式により計算した。50％阻害率を
示す検体の濃度をIC50の値とした。抗ロイシンアミノペ
プチダーゼ（Ｌｅｕ−ＡＰ）及び抗アミノペプチダーゼ
Ａ（ＡＰ−Ａ）阻害活性はAoyagiらの方法［J. Antibio
tics，31，636 （1978）］、抗アミノペプチダーゼＢ
（ＡＰ−Ｂ）阻害活性はUmezawa らの方法［J. Antibio
tics，29，97（1976）］によって行った。結果を表４に
示す。表４の結果から明らかなように、本発明化合物
は、特にアミノペプチダーゼＮに対して優れた阻害活性
を示す。

【００６６】

【表４】 表４ ──────────────────────────────────── 酵素阻害活性ＩＣ50（μｇ／ml） 化合物 ─────────────────────────── ＡＰ−Ｎ Ｌｅｕ−ＡＰ ＡＰ−Ａ ＡＰ−Ｂ ──────────────────────────────────── 参考例３ ０．１８ ０．０３０ ９．０ ９．０ （フェヘ゛スチン） 実施例３ ０．１８ ０．０３１ １１ １００ 実施例６ ０．６０ ０．０７０ ４０ ５５ 実施例９ １．１ ０．２９ ＞１００ ＞１００ 実施例12 ０．１０ ０．３８ １９ ２．３ 実施例15 ０．１２ ０．１６ １５ １１ 実施例17 ０．００７０ １２．５ １００ ４０ 実施例21 ０．０２２ １７ １３５ ３．５ 実施例24 ０．０６０ ３．０ − − ────────────────────────────────────

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/00 ＡＥＤ Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＥＤ (72)発明者 津田 誠 東京都北区岩淵町40−３−908

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（１） 【化１】 〔式中、Ｒは置換基があってもよい飽和または不飽和の
   低級炭化水素基、ＸおよびＹはアミノ酸残基を示す。た
   だし、Ｒがフェニル基でありＸがバリン残基でＹがフェ
   ニルアラニン残基である組合せの場合を除く。〕で表わ
   される新規フェベスチン誘導体またはその薬理学的に許
   容される塩。
2. 【請求項２】 Ｒが、置換基があってもよいフェニル
   基、置換基があってもよい炭素数３〜９のシクロアルキ
   ル基、置換基があってもよい炭素数１〜８のアルキル
   基、または置換基があってもよい炭素数２〜８のアルケ
   ニル基である請求項１の化合物またはその薬理学的に許
   容される塩。
3. 【請求項３】 Ｒが、フェニル基、シクロヘキシル基、
   または炭素数１〜４の低級アルキル基である請求項１の
   化合物またはその薬理学的に許容される塩。
4. 【請求項４】 Ｘが塩基性の側鎖をもつアミノ酸残基で
   ある請求項２または３の化合物またはその薬理学的に許
   容される塩。
5. 【請求項５】 Ｒがシクロヘキシル基、Ｘがバリン、ヒ
   スチジン、アルギニンまたはフェニルアラニンの残基、
   Ｙがフェニルアラニン、ヒスチジンまたはプロリンの残
   基である請求項１の化合物またはその薬理学的に許容さ
   れる塩。
6. 【請求項６】 請求項１から５のいずれかに記載の化合
   物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする
   医薬。
7. 【請求項７】 請求項１から５のいずれかに記載の化合
   物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする
   アミノペプチダーゼＮ阻害剤。