JPH1045794A - 蛋白質の安定化方法および組成物 - Google Patents
蛋白質の安定化方法および組成物Info
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- JPH1045794A JPH1045794A JP8202367A JP20236796A JPH1045794A JP H1045794 A JPH1045794 A JP H1045794A JP 8202367 A JP8202367 A JP 8202367A JP 20236796 A JP20236796 A JP 20236796A JP H1045794 A JPH1045794 A JP H1045794A
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】臨床、臨床診断、メディカルデバイスなど用の
アルブミン製剤、血液凝固因子製剤、免疫グロブリン製
剤などの血漿製剤中の蛋白質；臨床診断用の酵素、抗体
（又は抗原）、標識抗体（又は標識抗原）；コンタクト
レンズ洗浄用の酵素などを、溶液、凍結、凍結乾燥など
の保存状態に関係なく安定化できる蛋白質の安定化方法
及びこの方法を利用した組成物を提供する。 【解決手段】同一系中において式１のホスホリルコリン
基を有する重合体と蛋白質とを共存させる蛋白質の安定
化方法、並びにホスホリルコリン基含有単量体を重合し
てなる重合体１．０×１０-4〜８０重量％と、血漿製剤
蛋白質、標識免疫学的活性物質又は酵素１．０×１０
-14〜２０重量％と、緩衝液０〜９９．９重量％とを含
んでなる安定化した組成物。
アルブミン製剤、血液凝固因子製剤、免疫グロブリン製
剤などの血漿製剤中の蛋白質；臨床診断用の酵素、抗体
（又は抗原）、標識抗体（又は標識抗原）；コンタクト
レンズ洗浄用の酵素などを、溶液、凍結、凍結乾燥など
の保存状態に関係なく安定化できる蛋白質の安定化方法
及びこの方法を利用した組成物を提供する。 【解決手段】同一系中において式１のホスホリルコリン
基を有する重合体と蛋白質とを共存させる蛋白質の安定
化方法、並びにホスホリルコリン基含有単量体を重合し
てなる重合体１．０×１０-4〜８０重量％と、血漿製剤
蛋白質、標識免疫学的活性物質又は酵素１．０×１０
-14〜２０重量％と、緩衝液０〜９９．９重量％とを含
んでなる安定化した組成物。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、臨床、臨床診断あ
るいはメディカルデバイスなどで用いられる各種蛋白質
の安定化方法及びこの方法を利用した組成物に関する。
更に詳しくは、アルブミン製剤、血液凝固因子製剤、免
疫グロブリン製剤などの血漿製剤に含まれる蛋白質の安
定化、臨床診断で用いられる酵素、抗体（あるいは抗
原）、標識抗体（あるいは標識抗原）などの安定化、コ
ンタクトレンズの洗浄に用いられる酵素などの安定化方
法および組成物に関する。
るいはメディカルデバイスなどで用いられる各種蛋白質
の安定化方法及びこの方法を利用した組成物に関する。
更に詳しくは、アルブミン製剤、血液凝固因子製剤、免
疫グロブリン製剤などの血漿製剤に含まれる蛋白質の安
定化、臨床診断で用いられる酵素、抗体（あるいは抗
原）、標識抗体（あるいは標識抗原）などの安定化、コ
ンタクトレンズの洗浄に用いられる酵素などの安定化方
法および組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】臨床に用いられるアルブミン製剤、血液
凝固因子製剤、免疫グロブリン製剤などの血漿製剤は、
新鮮凍結血漿、または期限切れ保存血液から回された血
漿を原料とし、溶液状態、凍結状態、凍結乾燥状態で保
存され、有効期限は１〜５年となっている。その中で免
疫グロブリン製剤の静注用製剤は、人免疫グロブリンの
中からＩｇＧだけを取り出して、静脈注射を可能にした
製剤であり、ＩｇＧをそのまま抽出すると会合体を形成
して機能しずらくなり、アナフィラキシー・ショックの
原因となる。そこで従来より、蛋白質分解酵素であるペ
プシンあるいはプラスミンで分子を分解する方法、Ｃ領
域はそのままにしてＶ領域との結合部位を化学変化させ
る方法、ｐＨ４の溶液で処理する方法あるいはイオン交
換樹脂で処理する方法が知られている。しかしながら、
酵素処理する方法は補体結合部位（Ｃ領域）が分かれる
ため半減期が短くなり、化学変化させる方法は注射直後
は天然のＩｇＧより免疫力はやや落ちる問題があり、ｐ
Ｈ４の溶液で処理する方法や、イオン交換樹脂で処理す
る方法は汎用性にやや欠ける問題がある（‘９５ 医療
用医薬品データブック下巻、富士経済（１９９５
年））。
凝固因子製剤、免疫グロブリン製剤などの血漿製剤は、
新鮮凍結血漿、または期限切れ保存血液から回された血
漿を原料とし、溶液状態、凍結状態、凍結乾燥状態で保
存され、有効期限は１〜５年となっている。その中で免
疫グロブリン製剤の静注用製剤は、人免疫グロブリンの
中からＩｇＧだけを取り出して、静脈注射を可能にした
製剤であり、ＩｇＧをそのまま抽出すると会合体を形成
して機能しずらくなり、アナフィラキシー・ショックの
原因となる。そこで従来より、蛋白質分解酵素であるペ
プシンあるいはプラスミンで分子を分解する方法、Ｃ領
域はそのままにしてＶ領域との結合部位を化学変化させ
る方法、ｐＨ４の溶液で処理する方法あるいはイオン交
換樹脂で処理する方法が知られている。しかしながら、
酵素処理する方法は補体結合部位（Ｃ領域）が分かれる
ため半減期が短くなり、化学変化させる方法は注射直後
は天然のＩｇＧより免疫力はやや落ちる問題があり、ｐ
Ｈ４の溶液で処理する方法や、イオン交換樹脂で処理す
る方法は汎用性にやや欠ける問題がある（‘９５ 医療
用医薬品データブック下巻、富士経済（１９９５
年））。
【０００３】また、臨床診断に用いられる抗体（あるい
は抗原）または、標識抗体（あるいは標識抗原）など
は、溶液状態、凍結状態、凍結乾燥状態でその活性（抗
体活性、抗原性、酵素活性など）を保持するために、サ
ッカロース、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡと略す）など
を添加する方法が一般に知られている。特に凍結乾燥す
る際、あるいは凍結乾燥状態でその活性（抗体活性、抗
原性、酵素活性など）を保持するために、サッカロー
ス、ＢＳＡ、ゼラチンなどを添加する方法が知られてい
る。しかしながら、上記の各種添加剤を用いる方法は２
５℃以上、数ヶ月間以上では、その抗体活性、抗原性あ
るいは酵素活性が低下するなどの問題があった。
は抗原）または、標識抗体（あるいは標識抗原）など
は、溶液状態、凍結状態、凍結乾燥状態でその活性（抗
体活性、抗原性、酵素活性など）を保持するために、サ
ッカロース、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡと略す）など
を添加する方法が一般に知られている。特に凍結乾燥す
る際、あるいは凍結乾燥状態でその活性（抗体活性、抗
原性、酵素活性など）を保持するために、サッカロー
ス、ＢＳＡ、ゼラチンなどを添加する方法が知られてい
る。しかしながら、上記の各種添加剤を用いる方法は２
５℃以上、数ヶ月間以上では、その抗体活性、抗原性あ
るいは酵素活性が低下するなどの問題があった。
【０００４】また、アクリジニウム誘導体で標識された
抗体または抗原を水溶液中にシクロデキストリン類を存
在させることを特徴とするアクリジニウム誘導体で標識
された抗原または抗体の安定化方法（特開平７−２７８
１８４号公報）、クリスタリンを生理活性蛋白質の溶液
に含有せしめることを特徴とする生理活性蛋白質の安定
化方法が知られている（特開平７−２３６４８３号公
報）。
抗体または抗原を水溶液中にシクロデキストリン類を存
在させることを特徴とするアクリジニウム誘導体で標識
された抗原または抗体の安定化方法（特開平７−２７８
１８４号公報）、クリスタリンを生理活性蛋白質の溶液
に含有せしめることを特徴とする生理活性蛋白質の安定
化方法が知られている（特開平７−２３６４８３号公
報）。
【０００５】更に、コンタクトレンズの洗浄に用いられ
る加水分解酵素溶液に安定化剤として、１）ゼラチンお
よび／またはカゼイン、２）多価アルコールおよび／ま
たは糖類、および３）エチルアルコールを添加する方法
も知られている（特開昭４１−１５２号公報）が、その
効果は十分ではない。ホスホリルコリン基含有重合体
は、抗血栓材料として優れることが知られているが、ホ
スホリルコリン基含有重合体を用いた蛋白質の安定化方
法は知られていない。また、ホスホリルコリン基含有重
合体と、抗体、標識免疫学的活性物質、加水分解酵素等
との組成物は知られていない。
る加水分解酵素溶液に安定化剤として、１）ゼラチンお
よび／またはカゼイン、２）多価アルコールおよび／ま
たは糖類、および３）エチルアルコールを添加する方法
も知られている（特開昭４１−１５２号公報）が、その
効果は十分ではない。ホスホリルコリン基含有重合体
は、抗血栓材料として優れることが知られているが、ホ
スホリルコリン基含有重合体を用いた蛋白質の安定化方
法は知られていない。また、ホスホリルコリン基含有重
合体と、抗体、標識免疫学的活性物質、加水分解酵素等
との組成物は知られていない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、臨
床、臨床診断あるいはメディカルデバイスなどで用いら
れる各種蛋白質、例えばアルブミン製剤、血液凝固因子
製剤、免疫グロブリン製剤などの血漿製剤に含まれる蛋
白質；臨床診断で用いられる酵素、抗体（あるいは抗
原）、標識抗体（あるいは標識抗原）；コンタクトレン
ズの洗浄に用いられる酵素などを、その保存状態、例え
ば溶液状態、凍結状態、凍結乾燥状態などに関係なく安
定化することができる蛋白質の安定化方法を提供するこ
とにある。本発明の別の目的は、血漿製剤蛋白質が保存
状態に関係なく安定化された組成物を提供することにあ
る。本発明の他の目的は、標識免疫学的活性物質が保存
状態に関係なく安定化された組成物を提供することにあ
る。本発明の更に別の目的は、酵素が保存状態に関係な
く安定化された組成物を提供することにある。
床、臨床診断あるいはメディカルデバイスなどで用いら
れる各種蛋白質、例えばアルブミン製剤、血液凝固因子
製剤、免疫グロブリン製剤などの血漿製剤に含まれる蛋
白質；臨床診断で用いられる酵素、抗体（あるいは抗
原）、標識抗体（あるいは標識抗原）；コンタクトレン
ズの洗浄に用いられる酵素などを、その保存状態、例え
ば溶液状態、凍結状態、凍結乾燥状態などに関係なく安
定化することができる蛋白質の安定化方法を提供するこ
とにある。本発明の別の目的は、血漿製剤蛋白質が保存
状態に関係なく安定化された組成物を提供することにあ
る。本発明の他の目的は、標識免疫学的活性物質が保存
状態に関係なく安定化された組成物を提供することにあ
る。本発明の更に別の目的は、酵素が保存状態に関係な
く安定化された組成物を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、特定のホ
スホリルコリン基含有重合体が、蛋白質を安定化するこ
とを見いだし、本発明を完成した。すなわち、本発明に
よれば、同一系中において、式（１）で示されるホスホ
リルコリン基を有する重合体（以下ＰＣ重合体と略記す
る）、例えば式（２）（式中Ｘは、水素原子またはメチ
ル基を示す）で示されるホスホリルコリン基含有単量体
を含む重合成分を重合してなる重合体等と、蛋白質とを
共存させることを特徴とする蛋白質の安定化方法が提供
される。
スホリルコリン基含有重合体が、蛋白質を安定化するこ
とを見いだし、本発明を完成した。すなわち、本発明に
よれば、同一系中において、式（１）で示されるホスホ
リルコリン基を有する重合体（以下ＰＣ重合体と略記す
る）、例えば式（２）（式中Ｘは、水素原子またはメチ
ル基を示す）で示されるホスホリルコリン基含有単量体
を含む重合成分を重合してなる重合体等と、蛋白質とを
共存させることを特徴とする蛋白質の安定化方法が提供
される。
【化６】 また本発明によれば、(A1)前記式（２）で示されるホス
ホリルコリン基含有単量体を重合してなる重合体１．０
×１０-4〜８０重量％と、(B1)血漿製剤蛋白質１．０×
１０-14〜２０重量％と、(C1)緩衝液０〜９９．９重量
％とを含んでなる安定化した血漿製剤蛋白質組成物が提
供される。更に本発明によれば、(A2)前記式（２）で示
されるホスホリルコリン基含有単量体を重合してなる重
合体１．０×１０-4〜８０重量％と、(B2)標識免疫学的
活性物質１．０×１０-14〜２０重量％と、(C2)緩衝液
０〜９９．９重量％とを含んでなる安定化した標識免疫
学的活性物質組成物が提供される。更にまた本発明によ
れば(A3)前記式（２）で示されるホスホリルコリン基含
有単量体を重合してなる重合体１．０×１０-4〜８０重
量％と、(B3)酵素１．０×１０-14〜２０重量％と、(C
3)緩衝液０〜９９．９重量％とを含んでなる安定化した
酵素組成物が提供される。
ホリルコリン基含有単量体を重合してなる重合体１．０
×１０-4〜８０重量％と、(B1)血漿製剤蛋白質１．０×
１０-14〜２０重量％と、(C1)緩衝液０〜９９．９重量
％とを含んでなる安定化した血漿製剤蛋白質組成物が提
供される。更に本発明によれば、(A2)前記式（２）で示
されるホスホリルコリン基含有単量体を重合してなる重
合体１．０×１０-4〜８０重量％と、(B2)標識免疫学的
活性物質１．０×１０-14〜２０重量％と、(C2)緩衝液
０〜９９．９重量％とを含んでなる安定化した標識免疫
学的活性物質組成物が提供される。更にまた本発明によ
れば(A3)前記式（２）で示されるホスホリルコリン基含
有単量体を重合してなる重合体１．０×１０-4〜８０重
量％と、(B3)酵素１．０×１０-14〜２０重量％と、(C
3)緩衝液０〜９９．９重量％とを含んでなる安定化した
酵素組成物が提供される。
【０００８】
【発明実施の形態】本発明の安定化方法では、安定化さ
せる蛋白質と、前記ＰＣ重合体とを、同一系中に共存さ
せる。ＰＣ重合体は、前記式（２）で示されるホスホリ
ルコリン基含有単量体などの分子内に前記式（１）で示
されるホスホリルコリン基を１つ以上有する単量体（以
下ＰＣ単量体と略記する）を含む重合成分の重合体であ
る。
せる蛋白質と、前記ＰＣ重合体とを、同一系中に共存さ
せる。ＰＣ重合体は、前記式（２）で示されるホスホリ
ルコリン基含有単量体などの分子内に前記式（１）で示
されるホスホリルコリン基を１つ以上有する単量体（以
下ＰＣ単量体と略記する）を含む重合成分の重合体であ
る。
【０００９】ＰＣ重合体中のＰＣ単量体の配合割合は、
ＰＣ重合体を構成する全単量体に対し、１〜１００モル
％が好ましく、特に５モル％以上が好ましい。前記配合
割合が１モル％未満の場合には、蛋白質の安定化作用が
得られ難いので好ましくない。ＰＣ重合体の分子量は、
調製時の重合温度、重合開始剤使用量、重合度調整剤の
使用の有無などによっても異なるが、好ましくは数平均
分子量１，０００〜２，０００，０００、特に好ましく
は２，０００〜１，０００，０００である。数平均分子
量が１，０００未満では蛋白質の安定化作用が得られ難
く、数平均分子量が１，０００，０００を超えると重合
体の粘性が高くなりすぎて、取り扱い難くなり好ましく
ない。
ＰＣ重合体を構成する全単量体に対し、１〜１００モル
％が好ましく、特に５モル％以上が好ましい。前記配合
割合が１モル％未満の場合には、蛋白質の安定化作用が
得られ難いので好ましくない。ＰＣ重合体の分子量は、
調製時の重合温度、重合開始剤使用量、重合度調整剤の
使用の有無などによっても異なるが、好ましくは数平均
分子量１，０００〜２，０００，０００、特に好ましく
は２，０００〜１，０００，０００である。数平均分子
量が１，０００未満では蛋白質の安定化作用が得られ難
く、数平均分子量が１，０００，０００を超えると重合
体の粘性が高くなりすぎて、取り扱い難くなり好ましく
ない。
【００１０】ＰＣ重合体を調製するには、前記ＰＣ単量
体を、ラジカル重合などの通常の方法で単独重合させる
方法あるいは、ＰＣ単量体等の単量体と共重合可能な他
のビニル系単量体とを共重合させる方法などによって容
易に得ることができる。
体を、ラジカル重合などの通常の方法で単独重合させる
方法あるいは、ＰＣ単量体等の単量体と共重合可能な他
のビニル系単量体とを共重合させる方法などによって容
易に得ることができる。
【００１１】前記ＰＣ単量体の具体例としては、例え
ば、２−（メタ）アクリロイルオキシエチル−２’−
（トリメチルアンモニオ）エチルホスフェート、２−
（メタ）アクリロイルオキシプロピル−２’−（トリメ
チルアンモニオ）エチルホスフェート、２−（メタ）ア
クリロイルオキシエトキシエチル−２’−（トリメチル
アンモニオ）エチルホスフェート、２−（メタ）アクリ
ロイルオキシジエトキシエチル−２’−（トリメチルア
ンモニオ）エチルホスフェート、２−（メタ）アクリロ
イルオキシトリエトキシエチル−２’−（トリメチルア
ンモニオ）エチルホスフェートなどが挙げられる。特に
入手性などの点から２−メタクリロイルオキシエチル−
２’−（トリメチルアンモニオ）エチルホスフェート
（（以下ＭＰＣと略記する）＝２−メタクリロイルオキ
シエチルホスホリルコリン）が好ましい。
ば、２−（メタ）アクリロイルオキシエチル−２’−
（トリメチルアンモニオ）エチルホスフェート、２−
（メタ）アクリロイルオキシプロピル−２’−（トリメ
チルアンモニオ）エチルホスフェート、２−（メタ）ア
クリロイルオキシエトキシエチル−２’−（トリメチル
アンモニオ）エチルホスフェート、２−（メタ）アクリ
ロイルオキシジエトキシエチル−２’−（トリメチルア
ンモニオ）エチルホスフェート、２−（メタ）アクリロ
イルオキシトリエトキシエチル−２’−（トリメチルア
ンモニオ）エチルホスフェートなどが挙げられる。特に
入手性などの点から２−メタクリロイルオキシエチル−
２’−（トリメチルアンモニオ）エチルホスフェート
（（以下ＭＰＣと略記する）＝２−メタクリロイルオキ
シエチルホスホリルコリン）が好ましい。
【００１２】前記ＰＣ単量体と共重合可能な他のビニル
系単量体（以下単量体Ａと略記する）としては、例えば
（メタ）アクリル酸−ｎ−ブチル、（メタ）アクリル酸
メチル、（メタ）アクリル酸エチル、（メタ）アクリル
酸ブチル、（メタ）アクリル酸ペンチル、（メタ）アク
リル酸ヘキシル、（メタ）アクリル酸ヘプチル、（メ
タ）アクリル酸オクチル、（メタ）アクリル酸トリデシ
ル、２−ヒドロキシエチルメタクリレート、（メタ）ア
クリレート等の（メタ）アクリル酸系単量体；スチレ
ン、α−メチルスチレン、メチル核置換スチレン、クロ
ロ核置換スチレン等のスチレン系単量体；塩化ビニル、
塩化ビニリデン、エチレン、プロピレン、イソブチレン
等の置換炭化水素系単量体；酢酸ビニル、プロピオン酸
ビニル等のビニルエステル系単量体；エチルビニルエー
テル、ｎ−ブチルビニルエーテル等のビニルエーテル系
単量体；ジエチルイタコネート、ジ−ｎ−ブチルイタコ
ネートなどの二価カルボン酸系単量体などが好ましく、
特にメタクリル酸エステル、スチレンなどを好ましく挙
げることができる。
系単量体（以下単量体Ａと略記する）としては、例えば
（メタ）アクリル酸−ｎ−ブチル、（メタ）アクリル酸
メチル、（メタ）アクリル酸エチル、（メタ）アクリル
酸ブチル、（メタ）アクリル酸ペンチル、（メタ）アク
リル酸ヘキシル、（メタ）アクリル酸ヘプチル、（メ
タ）アクリル酸オクチル、（メタ）アクリル酸トリデシ
ル、２−ヒドロキシエチルメタクリレート、（メタ）ア
クリレート等の（メタ）アクリル酸系単量体；スチレ
ン、α−メチルスチレン、メチル核置換スチレン、クロ
ロ核置換スチレン等のスチレン系単量体；塩化ビニル、
塩化ビニリデン、エチレン、プロピレン、イソブチレン
等の置換炭化水素系単量体；酢酸ビニル、プロピオン酸
ビニル等のビニルエステル系単量体；エチルビニルエー
テル、ｎ−ブチルビニルエーテル等のビニルエーテル系
単量体；ジエチルイタコネート、ジ−ｎ−ブチルイタコ
ネートなどの二価カルボン酸系単量体などが好ましく、
特にメタクリル酸エステル、スチレンなどを好ましく挙
げることができる。
【００１３】ＰＣ重合体の調製に用いる重合開始剤とし
ては、通常のラジカル重合開始剤であれば特に限定され
ず、例えば２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、過
酸化ベンゾイル、ジイソプロピルペルオキシジカーボネ
ート、ｔ−ブチルペルオキシ−２−エチルヘキサノエー
ト、ｔ−ブチルペルオキシピバレート、ｔ−ブチルペル
オキシジイソブチレートや、過硫酸カリウム、過硫酸ア
ンモニウム等の過硫酸塩などが挙げられる。これらの重
合開始剤は１種または２種以上を混合して用いてもよ
い。また、重合開始剤の使用にはレドックス系のラジカ
ル促進剤を併用してもよい。重合開始剤の使用量は、重
合させる全単量体１００重量部に対して０．０１〜１０
重量部が好ましく、特に好ましくは０．１〜５重量部で
ある。
ては、通常のラジカル重合開始剤であれば特に限定され
ず、例えば２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、過
酸化ベンゾイル、ジイソプロピルペルオキシジカーボネ
ート、ｔ−ブチルペルオキシ−２−エチルヘキサノエー
ト、ｔ−ブチルペルオキシピバレート、ｔ−ブチルペル
オキシジイソブチレートや、過硫酸カリウム、過硫酸ア
ンモニウム等の過硫酸塩などが挙げられる。これらの重
合開始剤は１種または２種以上を混合して用いてもよ
い。また、重合開始剤の使用にはレドックス系のラジカ
ル促進剤を併用してもよい。重合開始剤の使用量は、重
合させる全単量体１００重量部に対して０．０１〜１０
重量部が好ましく、特に好ましくは０．１〜５重量部で
ある。
【００１４】ＰＣ重合体を調製する際の重合条件は、好
ましくは３０〜８０℃、特に好ましくは４０〜７０℃に
おいて２〜７２時間重合させるのが望ましい。この際、
重合反応をより円滑に行なうために溶媒を用いてもよ
く、該溶媒としては、水、メタノール、エタノール、プ
ロパノール、ｔ−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ジ
メチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホル
ムまたはこれらの混合物などを挙げることができる。
ましくは３０〜８０℃、特に好ましくは４０〜７０℃に
おいて２〜７２時間重合させるのが望ましい。この際、
重合反応をより円滑に行なうために溶媒を用いてもよ
く、該溶媒としては、水、メタノール、エタノール、プ
ロパノール、ｔ−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ジ
メチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホル
ムまたはこれらの混合物などを挙げることができる。
【００１５】本発明の安定化方法に用いるＰＣ重合体の
形態は、粉末、懸濁液状態、溶液状態のいずれでもよ
く、好ましくは蛋白質を変性させることのない、リン酸
緩衝液、酢酸緩衝液、炭酸緩衝液、クエン酸緩衝液、各
種生理食塩水などの溶解液あるいは懸濁液が挙げられ
る。これら液にジメチルスルホオキシド、テトラヒドロ
フランあるいはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの有
機溶媒を０．０１〜２０重量％添加することもできる。
特に好ましくはリン酸緩衝液、各種生理食塩水などの溶
解液が挙げられる。
形態は、粉末、懸濁液状態、溶液状態のいずれでもよ
く、好ましくは蛋白質を変性させることのない、リン酸
緩衝液、酢酸緩衝液、炭酸緩衝液、クエン酸緩衝液、各
種生理食塩水などの溶解液あるいは懸濁液が挙げられ
る。これら液にジメチルスルホオキシド、テトラヒドロ
フランあるいはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの有
機溶媒を０．０１〜２０重量％添加することもできる。
特に好ましくはリン酸緩衝液、各種生理食塩水などの溶
解液が挙げられる。
【００１６】本発明の安定化方法に用いる蛋白質は、特
に限定されず、後述する血漿製剤蛋白質、標識免疫学的
活性物質、酵素等を挙げることができる。
に限定されず、後述する血漿製剤蛋白質、標識免疫学的
活性物質、酵素等を挙げることができる。
【００１７】本発明の安定化方法において、同一系中に
おいて、前記ＰＣ重合体と蛋白質とを共存させるとは、
例えば溶液状態の蛋白質溶液に前記液状のＰＣ重合体液
あるいはＰＣ重合体粉末を添加等して同一液中に共存さ
せる方法などにより実施できる。前記ＰＣ重合体粉末の
添加後に凍結あるいは添加後凍結乾燥などをしてもよ
い。前記同一液中にＰＣ重合体と蛋白質とを共存させた
場合のＰＣ重合体の濃度は、蛋白質の濃度および状態に
もよるが、好ましくはその下限値は１．０×１０-8重量
％、特に好ましくは１．０×１０-5重量％、更に好まし
くは１．０×１０-4であり、上限値は好ましくは８０重
量％、特に好ましくは７０重量％、更に好ましくは５０
重量％である。最も好ましいのは、液粘度が高くなら
ず、取り扱い易い１．０×１０-3〜４０重量％の範囲で
ある。ＰＣ重合体の濃度が８０重量％を超えると液粘度
が高くなり取り扱い性が低下するので好ましくない。一
方、前記同一液中の蛋白質の濃度は、その種類及び用途
によって異なるが、１．０×１０-8〜２０重量％が好ま
しく、特に１．０×１０-7〜１０重量％が望ましい。
おいて、前記ＰＣ重合体と蛋白質とを共存させるとは、
例えば溶液状態の蛋白質溶液に前記液状のＰＣ重合体液
あるいはＰＣ重合体粉末を添加等して同一液中に共存さ
せる方法などにより実施できる。前記ＰＣ重合体粉末の
添加後に凍結あるいは添加後凍結乾燥などをしてもよ
い。前記同一液中にＰＣ重合体と蛋白質とを共存させた
場合のＰＣ重合体の濃度は、蛋白質の濃度および状態に
もよるが、好ましくはその下限値は１．０×１０-8重量
％、特に好ましくは１．０×１０-5重量％、更に好まし
くは１．０×１０-4であり、上限値は好ましくは８０重
量％、特に好ましくは７０重量％、更に好ましくは５０
重量％である。最も好ましいのは、液粘度が高くなら
ず、取り扱い易い１．０×１０-3〜４０重量％の範囲で
ある。ＰＣ重合体の濃度が８０重量％を超えると液粘度
が高くなり取り扱い性が低下するので好ましくない。一
方、前記同一液中の蛋白質の濃度は、その種類及び用途
によって異なるが、１．０×１０-8〜２０重量％が好ま
しく、特に１．０×１０-7〜１０重量％が望ましい。
【００１８】本発明の血漿製剤蛋白質組成物は、(A1)前
記ＰＣ単量体のうち、式（２）で示されるホスホリルコ
リン基含有単量体を重合してなる重合体１．０×１０-4
〜８０重量％と、(B1)血漿製剤蛋白質１．０×１０-14
〜２０重量％と、(C1)緩衝液０〜９９．９重量％とを含
有する。(A1)の重合体は、前述の安定化方法で説明した
ＰＣ重合体のうち、式（２）で示されるホスホリルコリ
ン基含有単量体を重合して得た重合体を用いる。該重合
体の含有割合が、１．０×１０-4未満の場合には血漿製
剤蛋白質の安定化効果が十分でなく、８０重量％を超え
ると調製する際の液粘度が高くなり取り扱いが困難にな
る。(B1)の血漿製剤蛋白質とは、アルブミン製剤、血液
凝固因子製剤、免疫グロブリン製剤などに含まれる蛋白
質をいう。血液凝固因子製剤としては、第VIII因子製
剤、第IX因子製剤、第Ｉ因子製剤、アンチトロンビンII
I製剤、第II因子、第III因子IV、第Ｖ因子、第VII因
子、第Ｘ因子などが挙げられる。また、免疫グロブリン
製剤としては、筋注用製剤、静注用製剤などが挙げられ
る。血漿製剤蛋白質の含有割合が、１．０×１０-14重
量％未満では、血漿製剤蛋白質としての活性が低くなる
場合もあり、使用する際に好ましくない。２０重量％を
超えるとＰＣ重合体の含量を増やす必要があり、その
際、粘度が高く取り扱い難い。(C1)緩衝液としては、前
述の安定化方法で列挙したものを好ましく挙げることが
でき、水溶液でも、水溶性の少量の溶剤を含んでもよ
い。この緩衝液は、血漿製剤蛋白質を水溶液状で取り扱
い易くするために添加するので、必ずしも含有されてい
なくても良い。緩衝液の含有割合が９９．９重量％を超
える場合には、血漿製剤蛋白質、重合体の濃度が低くな
り、機能、効果を発揮しにくくなる。
記ＰＣ単量体のうち、式（２）で示されるホスホリルコ
リン基含有単量体を重合してなる重合体１．０×１０-4
〜８０重量％と、(B1)血漿製剤蛋白質１．０×１０-14
〜２０重量％と、(C1)緩衝液０〜９９．９重量％とを含
有する。(A1)の重合体は、前述の安定化方法で説明した
ＰＣ重合体のうち、式（２）で示されるホスホリルコリ
ン基含有単量体を重合して得た重合体を用いる。該重合
体の含有割合が、１．０×１０-4未満の場合には血漿製
剤蛋白質の安定化効果が十分でなく、８０重量％を超え
ると調製する際の液粘度が高くなり取り扱いが困難にな
る。(B1)の血漿製剤蛋白質とは、アルブミン製剤、血液
凝固因子製剤、免疫グロブリン製剤などに含まれる蛋白
質をいう。血液凝固因子製剤としては、第VIII因子製
剤、第IX因子製剤、第Ｉ因子製剤、アンチトロンビンII
I製剤、第II因子、第III因子IV、第Ｖ因子、第VII因
子、第Ｘ因子などが挙げられる。また、免疫グロブリン
製剤としては、筋注用製剤、静注用製剤などが挙げられ
る。血漿製剤蛋白質の含有割合が、１．０×１０-14重
量％未満では、血漿製剤蛋白質としての活性が低くなる
場合もあり、使用する際に好ましくない。２０重量％を
超えるとＰＣ重合体の含量を増やす必要があり、その
際、粘度が高く取り扱い難い。(C1)緩衝液としては、前
述の安定化方法で列挙したものを好ましく挙げることが
でき、水溶液でも、水溶性の少量の溶剤を含んでもよ
い。この緩衝液は、血漿製剤蛋白質を水溶液状で取り扱
い易くするために添加するので、必ずしも含有されてい
なくても良い。緩衝液の含有割合が９９．９重量％を超
える場合には、血漿製剤蛋白質、重合体の濃度が低くな
り、機能、効果を発揮しにくくなる。
【００１９】本発明の標識免疫学的活性物質組成物は、
(A2)前記ＰＣ重合体のうち、式（２）で示されるホスホ
リルコリン基含有単量体を重合してなる重合体１．０×
１０-4〜８０重量％と、(B2)標識免疫学的活性物質１．
０×１０-14〜２０重量％と、(C2)緩衝液０〜９９．９
重量％とを含有する。(A2)の重合体は、前述の安定化方
法で説明したＰＣ重合体のうち、式（２）で示されるホ
スホリルコリン基含有単量体を重合して得た重合体を用
いる。該重合体の含有割合が、１．０×１０-4未満の場
合には免疫学的活性物質の安定化効果が十分でなく、８
０重量％を超えると水溶液の粘度が高く取り扱い難い。
(A2)前記ＰＣ重合体のうち、式（２）で示されるホスホ
リルコリン基含有単量体を重合してなる重合体１．０×
１０-4〜８０重量％と、(B2)標識免疫学的活性物質１．
０×１０-14〜２０重量％と、(C2)緩衝液０〜９９．９
重量％とを含有する。(A2)の重合体は、前述の安定化方
法で説明したＰＣ重合体のうち、式（２）で示されるホ
スホリルコリン基含有単量体を重合して得た重合体を用
いる。該重合体の含有割合が、１．０×１０-4未満の場
合には免疫学的活性物質の安定化効果が十分でなく、８
０重量％を超えると水溶液の粘度が高く取り扱い難い。
【００２０】免疫学的活性物質とは、上記血漿製剤に含
まれる免疫グロブリンを除いて、例えば、Ｃ反応性蛋白
質（ＣＲＰ）、リューマチ因子（ＲＦ）、トランスフェ
リン等の血漿蛋白に対する抗体、甲状腺刺激ホルモン
（ＴＳＨ）、トリヨードサイロニン（Ｔ3）、サイロキ
シン（Ｔ4）、チロキシン結合性蛋白（ＴＢＧ）、サイ
ログロブリン、インスリン、エストリオール（Ｅ3）、
絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）、ヒト胎盤性ラクトー
ゲン（ＨＰＬ）等のホルモンに対する抗体、癌胎児性抗
原（ＣＥＡ）、β2−マイクログロブリン、α−フェト
プロテイン（ＡＦＰ）等の腫瘍関連物質に対する抗体、
ＨＢS抗原、ＨＢS抗体、ＨＢe抗原、ＨＢe抗体等のウイ
ルス肝炎の抗原および抗体に対する抗体または抗原、ム
ンプス、ヘルペス、麻疹、風疹、サイトメガロ等のウイ
ルス、抗エイズ抗体（ＨＩＶ）等の各種生体成分に対す
る抗体または抗原、フェノバルビタール、アセトアミノ
フェノン、サリチル酸、シクロスポリン等の各種薬剤に
対する抗体が挙げられる。また、上記抗体に対する抗原
あるいは上記抗原に対する抗体も挙げられる。更にま
た、上記抗体はＦａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ）'2フラ
グメントまたは還元型抗体であってもよい。(B2)の標識
免疫学的活性物質とは、上記免疫学的活性物質に酵素、
蛍光物質、発光物質などを化学結合的に結合させたもの
を示す。標識される酵素は特に限定されないが、アセチ
ルコリンエステラーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、β
−Ｄ−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、グルコー
スオキシダーゼ、グルコース−６−リン酸脱水素酵素、
ヘキソキナーゼ、ペニシリナーゼ、ペルオキシダーゼ、
リゾチームなどが挙げられ、好ましくは、酵素免疫測定
法にて汎用的に用いられるアルカリ性ホスファターゼ、
β−Ｄ−ガラクトシダーゼ、ペルオキシダーゼなどが挙
げられる。標識される蛍光物質は特に限定されず、フル
オレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、４−クロ
ロ−７−ニトロベンゾフラザン、４−フルオロ−７−ニ
トロベンゾフラザン、スルホローダミン１０１酸クロリ
ド、４−クロロ−７−スルホベンゾフラザン、アンモニ
ウム塩、Ｎ−（９−アクリジニル）マレイミドなどが挙
げられる。好ましくは、免疫学的活性物質の遊離のアミ
ノ基と混ぜるだけで反応するフルオレセインイソチオシ
アネート（ＦＩＴＣ）、４−クロロ−７−ニトロベンゾ
フラザン、４−フルオロ−７−ニトロベンゾフラザン、
スルホローダミン１０１酸クロリドなどが挙げられる。
また、免疫学的活性物質の遊離のアミノ基と容易に反応
する１０−メチル−９−（４−（２−（スクシンイミジ
ルオキシカルボニル）エチル）フェニルオキシカルボニ
ル）アクリジニウムフルオロサルフェートなどの化学発
光物質も用いることが可能である。標識免疫学的活性物
質の含有割合が、１．０×１０-14重量％未満では、標
識免疫学的活性物質の活性が低くなり使用する際に好ま
しくない。２０重量％を超えるとＰＣ重合体の含量を増
やす必要があり、その際、粘度が高く取り扱い難くな
る。
まれる免疫グロブリンを除いて、例えば、Ｃ反応性蛋白
質（ＣＲＰ）、リューマチ因子（ＲＦ）、トランスフェ
リン等の血漿蛋白に対する抗体、甲状腺刺激ホルモン
（ＴＳＨ）、トリヨードサイロニン（Ｔ3）、サイロキ
シン（Ｔ4）、チロキシン結合性蛋白（ＴＢＧ）、サイ
ログロブリン、インスリン、エストリオール（Ｅ3）、
絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）、ヒト胎盤性ラクトー
ゲン（ＨＰＬ）等のホルモンに対する抗体、癌胎児性抗
原（ＣＥＡ）、β2−マイクログロブリン、α−フェト
プロテイン（ＡＦＰ）等の腫瘍関連物質に対する抗体、
ＨＢS抗原、ＨＢS抗体、ＨＢe抗原、ＨＢe抗体等のウイ
ルス肝炎の抗原および抗体に対する抗体または抗原、ム
ンプス、ヘルペス、麻疹、風疹、サイトメガロ等のウイ
ルス、抗エイズ抗体（ＨＩＶ）等の各種生体成分に対す
る抗体または抗原、フェノバルビタール、アセトアミノ
フェノン、サリチル酸、シクロスポリン等の各種薬剤に
対する抗体が挙げられる。また、上記抗体に対する抗原
あるいは上記抗原に対する抗体も挙げられる。更にま
た、上記抗体はＦａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ）'2フラ
グメントまたは還元型抗体であってもよい。(B2)の標識
免疫学的活性物質とは、上記免疫学的活性物質に酵素、
蛍光物質、発光物質などを化学結合的に結合させたもの
を示す。標識される酵素は特に限定されないが、アセチ
ルコリンエステラーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、β
−Ｄ−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、グルコー
スオキシダーゼ、グルコース−６−リン酸脱水素酵素、
ヘキソキナーゼ、ペニシリナーゼ、ペルオキシダーゼ、
リゾチームなどが挙げられ、好ましくは、酵素免疫測定
法にて汎用的に用いられるアルカリ性ホスファターゼ、
β−Ｄ−ガラクトシダーゼ、ペルオキシダーゼなどが挙
げられる。標識される蛍光物質は特に限定されず、フル
オレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、４−クロ
ロ−７−ニトロベンゾフラザン、４−フルオロ−７−ニ
トロベンゾフラザン、スルホローダミン１０１酸クロリ
ド、４−クロロ−７−スルホベンゾフラザン、アンモニ
ウム塩、Ｎ−（９−アクリジニル）マレイミドなどが挙
げられる。好ましくは、免疫学的活性物質の遊離のアミ
ノ基と混ぜるだけで反応するフルオレセインイソチオシ
アネート（ＦＩＴＣ）、４−クロロ−７−ニトロベンゾ
フラザン、４−フルオロ−７−ニトロベンゾフラザン、
スルホローダミン１０１酸クロリドなどが挙げられる。
また、免疫学的活性物質の遊離のアミノ基と容易に反応
する１０−メチル−９−（４−（２−（スクシンイミジ
ルオキシカルボニル）エチル）フェニルオキシカルボニ
ル）アクリジニウムフルオロサルフェートなどの化学発
光物質も用いることが可能である。標識免疫学的活性物
質の含有割合が、１．０×１０-14重量％未満では、標
識免疫学的活性物質の活性が低くなり使用する際に好ま
しくない。２０重量％を超えるとＰＣ重合体の含量を増
やす必要があり、その際、粘度が高く取り扱い難くな
る。
【００２１】(C2)緩衝液としては、前述の安定化方法で
列挙したものを好ましく挙げることができ、水溶液で
も、水溶性の少量の溶剤を含んでもよい。この緩衝液
は、標識免疫学的活性物質を水溶液状で取り扱い易くす
るために添加するので、必ずしも含有されていなくても
良い。緩衝液の含有割合が、９９．９重量％を超える場
合には、標識免疫学的活性物質、重合体の濃度が低くな
り、機能、効果を発揮しにくくなる。
列挙したものを好ましく挙げることができ、水溶液で
も、水溶性の少量の溶剤を含んでもよい。この緩衝液
は、標識免疫学的活性物質を水溶液状で取り扱い易くす
るために添加するので、必ずしも含有されていなくても
良い。緩衝液の含有割合が、９９．９重量％を超える場
合には、標識免疫学的活性物質、重合体の濃度が低くな
り、機能、効果を発揮しにくくなる。
【００２２】本発明の酵素組成物は、(A3)前記ＰＣ重合
体のうち、式（２）で示されるホスホリルコリン基含有
単量体を重合してなる重合体１．０×１０-4〜８０重量
％と、(B3)酵素１．０×１０-14〜２０重量％と、(C3)
緩衝液０〜９９．９重量％とを含有する。(A3)の重合体
は、前述の安定化方法で説明したＰＣ重合体のうち、式
（２）で示されるホスホリルコリン基含有単量体を重合
して得た重合体を用いる。該重合体の含有割合が、１．
０×１０-4未満の場合には酵素の安定化効果が十分でな
く、８０重量％を超えると水溶液の粘度が高くなり取り
扱い難い。(B3)の酵素としては、特に限定されず、酸化
還元酵素、転移酵素、加水分解酵素、脱離酵素、異性化
酵素、合成酵素などが挙げられる。特に好ましくは臨床
診断あるいはメディカルデバイスなどに用いられる加水
分解酵素の一種であるグリコシル加水分解酵素（糖分解
酵素）のβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ、同じく加水分解酵
素の一種であるエステル加水分解酵素のコレステロール
エステラーゼ、アルカリフォスファターゼなど、あるい
は、酸化還元酵素の一種である過酸化酵素の西洋ワサビ
過酸化酵素などが挙げられる。これらの中で臨床診断に
用いる際は、好ましくは、コレステロールエステラー
ゼ、β−Ｄ−ガラクトシダーゼ、アルカリフォスファタ
ーゼ、西洋ワサビ過酸化酵素などが挙げられる。また、
加水分解酵素としては、例えばカルボヒドラーゼ、エス
テラーゼ、プロテアーゼ、アミダーゼ、ハロゲナーゼ、
ホスファターゼなどが挙げられる。一般には市販品が利
用できる。例えばビオプラーゼ（ナガセ生化学工業
（株）製、商標、ペプチド分解酵素）、リパーゼサイケ
ン（ナガセ生化学工業（株）製、商標、エステル加水分
解酵素）などが挙げられる。酵素の起源は限定されず、
バシルス（Bacillus）属などあらゆる起源のものが使用
できる。これらの中で、コンタクトレンズの洗浄あるい
は皮膚の美白などに用いる際は、好ましくは蛋白質分解
酵素、例えばビオプラーゼ（ナガセ生化学工業（株）
製、商標、ペプチド分解酵素）などが挙げられる。(B3)
の酵素の含有割合が、１．０×１０-14重量％未満では
酵素の活性が低くなり使用する際に好ましくない。２０
重量％を超えるとＰＣ重合体の含量を増やす必要があ
り、その際、粘度が高く取り扱い難い。(C3)緩衝液とし
ては、前述の安定化方法で列挙したものを好ましく挙げ
ることができ、水溶液でも、水溶性の少量の溶剤を含ん
でもよい。この緩衝液は、酵素を水溶液状で取り扱い易
くするために添加するので、必ずしも含有されていなく
ても良い。緩衝液の含有割合が、９９．９重量％を超え
る場合には、酵素、重合体の濃度が低くなり、機能、効
果を発揮しにくくなる。
体のうち、式（２）で示されるホスホリルコリン基含有
単量体を重合してなる重合体１．０×１０-4〜８０重量
％と、(B3)酵素１．０×１０-14〜２０重量％と、(C3)
緩衝液０〜９９．９重量％とを含有する。(A3)の重合体
は、前述の安定化方法で説明したＰＣ重合体のうち、式
（２）で示されるホスホリルコリン基含有単量体を重合
して得た重合体を用いる。該重合体の含有割合が、１．
０×１０-4未満の場合には酵素の安定化効果が十分でな
く、８０重量％を超えると水溶液の粘度が高くなり取り
扱い難い。(B3)の酵素としては、特に限定されず、酸化
還元酵素、転移酵素、加水分解酵素、脱離酵素、異性化
酵素、合成酵素などが挙げられる。特に好ましくは臨床
診断あるいはメディカルデバイスなどに用いられる加水
分解酵素の一種であるグリコシル加水分解酵素（糖分解
酵素）のβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ、同じく加水分解酵
素の一種であるエステル加水分解酵素のコレステロール
エステラーゼ、アルカリフォスファターゼなど、あるい
は、酸化還元酵素の一種である過酸化酵素の西洋ワサビ
過酸化酵素などが挙げられる。これらの中で臨床診断に
用いる際は、好ましくは、コレステロールエステラー
ゼ、β−Ｄ−ガラクトシダーゼ、アルカリフォスファタ
ーゼ、西洋ワサビ過酸化酵素などが挙げられる。また、
加水分解酵素としては、例えばカルボヒドラーゼ、エス
テラーゼ、プロテアーゼ、アミダーゼ、ハロゲナーゼ、
ホスファターゼなどが挙げられる。一般には市販品が利
用できる。例えばビオプラーゼ（ナガセ生化学工業
（株）製、商標、ペプチド分解酵素）、リパーゼサイケ
ン（ナガセ生化学工業（株）製、商標、エステル加水分
解酵素）などが挙げられる。酵素の起源は限定されず、
バシルス（Bacillus）属などあらゆる起源のものが使用
できる。これらの中で、コンタクトレンズの洗浄あるい
は皮膚の美白などに用いる際は、好ましくは蛋白質分解
酵素、例えばビオプラーゼ（ナガセ生化学工業（株）
製、商標、ペプチド分解酵素）などが挙げられる。(B3)
の酵素の含有割合が、１．０×１０-14重量％未満では
酵素の活性が低くなり使用する際に好ましくない。２０
重量％を超えるとＰＣ重合体の含量を増やす必要があ
り、その際、粘度が高く取り扱い難い。(C3)緩衝液とし
ては、前述の安定化方法で列挙したものを好ましく挙げ
ることができ、水溶液でも、水溶性の少量の溶剤を含ん
でもよい。この緩衝液は、酵素を水溶液状で取り扱い易
くするために添加するので、必ずしも含有されていなく
ても良い。緩衝液の含有割合が、９９．９重量％を超え
る場合には、酵素、重合体の濃度が低くなり、機能、効
果を発揮しにくくなる。
【００２３】
【発明の効果】本発明の蛋白質の安定化方法は、ＰＣ重
合体を同一系中に共存させるだけで容易に蛋白質の活性
が保持されて長期安定化が図れる。また、本発明の血漿
製剤、標識免疫学的活性物質あるいは酵素を配合した組
成物は、特定のＰＣ重合体を含有するので、各々の活性
が高く保持されており、長期安定化が可能となる。
合体を同一系中に共存させるだけで容易に蛋白質の活性
が保持されて長期安定化が図れる。また、本発明の血漿
製剤、標識免疫学的活性物質あるいは酵素を配合した組
成物は、特定のＰＣ重合体を含有するので、各々の活性
が高く保持されており、長期安定化が可能となる。
【００２４】
【実施例】以下実施例によりさらに詳細に説明するが本
発明はこれらに限定されるものではない。合成例１−１；重合体Ｂの合成 総単量体濃度が１．０ｍｏｌ／ｌおよび重合開始剤量が
単量体に対して１ｍｏｌ％となるように、ＭＰＣ５．９
０５ｇ（０．０２ｍｏｌ）を重合用ガラス反応管に秤取
し、これに重合開始剤として２，２’−アゾビスイソブ
チロニトリル（以下ＡＩＢＮと略記する）０．０３２８
ｇ（０．２ｍｍｏｌ）及び重合溶媒としてメタノール２
０ｍｌを加えた。反応管内を充分にアルゴン置換した
後、密封した。次いで、２４時間５０℃に加温すること
により重合反応を行なった。反応混合物を氷冷した後、
４００ｍｌのジエチルエーテルに滴下することによりポ
リマーを沈澱させた。沈澱物を瀘別し、充分にジエチル
エーテルにて洗浄した後減圧乾燥して白色粉末状の重合
体Ｂ３．６９１ｇを得た。収率は６２．５％であった。
分子量は重合体Ｂのリン酸緩衝溶液液をゲルパーミエー
ションクロマトグラフィー（ＧＰＣ）を用いて分析する
ことにより測定した結果、ポリエチレングリコール換算
で６８０００であった。
発明はこれらに限定されるものではない。合成例１−１；重合体Ｂの合成 総単量体濃度が１．０ｍｏｌ／ｌおよび重合開始剤量が
単量体に対して１ｍｏｌ％となるように、ＭＰＣ５．９
０５ｇ（０．０２ｍｏｌ）を重合用ガラス反応管に秤取
し、これに重合開始剤として２，２’−アゾビスイソブ
チロニトリル（以下ＡＩＢＮと略記する）０．０３２８
ｇ（０．２ｍｍｏｌ）及び重合溶媒としてメタノール２
０ｍｌを加えた。反応管内を充分にアルゴン置換した
後、密封した。次いで、２４時間５０℃に加温すること
により重合反応を行なった。反応混合物を氷冷した後、
４００ｍｌのジエチルエーテルに滴下することによりポ
リマーを沈澱させた。沈澱物を瀘別し、充分にジエチル
エーテルにて洗浄した後減圧乾燥して白色粉末状の重合
体Ｂ３．６９１ｇを得た。収率は６２．５％であった。
分子量は重合体Ｂのリン酸緩衝溶液液をゲルパーミエー
ションクロマトグラフィー（ＧＰＣ）を用いて分析する
ことにより測定した結果、ポリエチレングリコール換算
で６８０００であった。
【００２５】合成例１−２；重合体Ｃの合成 ＭＰＣとｎ−ブチルメタクリレート（以下、ＢＭＡと略
記する）との単量体の仕込みモル比がＭＰＣ／ＢＭＡ＝
４０／６０、総単量体濃度が１．０ｍｏｌ／ｌ及び重合
開始剤量が単量体に対して１ｍｏｌ％となるように、Ｍ
ＰＣ１．４３５ｇ（４．９ｍｍｏｌ）及びＢＭＡ２．１
５３ｇ（１５．１ｍｍｏｌ）を重合用ガラス反応管に秤
取し、これに重合開始剤としてＡＩＢＮ０．０３２８ｇ
（０．２ｍｍｏｌ）及び重合溶媒としてメタノール２０
ｍｌを加えた。反応管内を充分にアルゴン置換した後、
密封した。次いで、２４時間６０℃に加温することによ
り重合反応を行なった。反応混合物を氷冷した後、４０
０ｍｌのジエチルエーテルに滴下することによりポリマ
ーを沈澱させた。沈澱物を瀘別し、充分にジエチルエー
テルにて洗浄した後、減圧乾燥して白色粉末状の重合体
Ｃ２．０１９ｇを得た。収率は５６．３％であった。分
子量は重合体Ｃのテトラヒドロフラン溶液をＧＰＣを用
いて分析することにより測定した結果、ポリスチレン換
算で３２０００であった。モル組成比は元素分析の結果
より、ＭＰＣ／ＢＭＡ＝３８．５／６１．５であった。
記する）との単量体の仕込みモル比がＭＰＣ／ＢＭＡ＝
４０／６０、総単量体濃度が１．０ｍｏｌ／ｌ及び重合
開始剤量が単量体に対して１ｍｏｌ％となるように、Ｍ
ＰＣ１．４３５ｇ（４．９ｍｍｏｌ）及びＢＭＡ２．１
５３ｇ（１５．１ｍｍｏｌ）を重合用ガラス反応管に秤
取し、これに重合開始剤としてＡＩＢＮ０．０３２８ｇ
（０．２ｍｍｏｌ）及び重合溶媒としてメタノール２０
ｍｌを加えた。反応管内を充分にアルゴン置換した後、
密封した。次いで、２４時間６０℃に加温することによ
り重合反応を行なった。反応混合物を氷冷した後、４０
０ｍｌのジエチルエーテルに滴下することによりポリマ
ーを沈澱させた。沈澱物を瀘別し、充分にジエチルエー
テルにて洗浄した後、減圧乾燥して白色粉末状の重合体
Ｃ２．０１９ｇを得た。収率は５６．３％であった。分
子量は重合体Ｃのテトラヒドロフラン溶液をＧＰＣを用
いて分析することにより測定した結果、ポリスチレン換
算で３２０００であった。モル組成比は元素分析の結果
より、ＭＰＣ／ＢＭＡ＝３８．５／６１．５であった。
【００２６】合成例１−３；重合体Ｄの合成 ＢＭＡ２．１５３ｇ（１５．１ｍｍｏｌ）の代わりにス
チレン（以下、Ｓｔと略記する）１．５７３ｇ（１５．
１ｍｍｏｌ）を用いた以外は合成例１−２と同様に行
い、白色粉末状の重合体Ｄ１．９７２ｇを得た。収率は
５２．９％、分子量はポリスチレン換算で４２０００、
モル組成比は、ＭＰＣ／Ｓｔ＝３９．５／６０．５であ
った。以上合成例１−１〜１−３の単量体及び各結果を
表１に示す。
チレン（以下、Ｓｔと略記する）１．５７３ｇ（１５．
１ｍｍｏｌ）を用いた以外は合成例１−２と同様に行
い、白色粉末状の重合体Ｄ１．９７２ｇを得た。収率は
５２．９％、分子量はポリスチレン換算で４２０００、
モル組成比は、ＭＰＣ／Ｓｔ＝３９．５／６０．５であ
った。以上合成例１−１〜１−３の単量体及び各結果を
表１に示す。
【００２７】
【表１】
【００２８】参考例１；抗体固定化プレートの調製 タイタープレート（Ｍａｘｉｓｏｒｐ Ｆ９６；ＮＵＮ
Ｃ社製）の各ウェルに、１００ｍＭリン酸水素二ナトリ
ウム／リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）に
溶解した５．０μｇ／ｍｌの抗ヒト免疫グロブリンＧ１
００μＬを加えて、４℃で１２時間インキュベートし
た。インキュベート終了後、各ウェルを、１５０ｍＭ
ＮａＣｌを添加した１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／
リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）で３回洗
浄した。５．０重量％ＢＳＡを添加した１０ｍＭリン酸
水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐ
Ｈ７．５）溶液を各ウェルに３００μｌ加えて、２５
℃、２時間インキュベートした。インキュベート終了
後、各ウェルの溶液をデカンテーションにより除去し
た。その後、−８０℃のフリーザーにて凍結させた後に
乾燥させて凍結乾燥済み抗体固定化プレートを調製し
た。
Ｃ社製）の各ウェルに、１００ｍＭリン酸水素二ナトリ
ウム／リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）に
溶解した５．０μｇ／ｍｌの抗ヒト免疫グロブリンＧ１
００μＬを加えて、４℃で１２時間インキュベートし
た。インキュベート終了後、各ウェルを、１５０ｍＭ
ＮａＣｌを添加した１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／
リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）で３回洗
浄した。５．０重量％ＢＳＡを添加した１０ｍＭリン酸
水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐ
Ｈ７．５）溶液を各ウェルに３００μｌ加えて、２５
℃、２時間インキュベートした。インキュベート終了
後、各ウェルの溶液をデカンテーションにより除去し
た。その後、−８０℃のフリーザーにて凍結させた後に
乾燥させて凍結乾燥済み抗体固定化プレートを調製し
た。
【００２９】実施例１−１：血漿製剤蛋白質の安定化試
験１ １００ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナト
リウム緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した、５μｇ／ｍｌ
ヒト免疫グロブリンＧ溶液（５．０×１０-4重量％）
に、合成例１−１で合成した重合体Ｂを２．０重量％と
なるように添加した。その後に４０℃インキュベートし
た。尚、添加した日を０日後とした。
験１ １００ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナト
リウム緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した、５μｇ／ｍｌ
ヒト免疫グロブリンＧ溶液（５．０×１０-4重量％）
に、合成例１−１で合成した重合体Ｂを２．０重量％と
なるように添加した。その後に４０℃インキュベートし
た。尚、添加した日を０日後とした。
【００３０】０日後、２週間後、１カ月後、２カ月後、
３カ月後および４カ月後の各ヒト免疫グロブリンＧ溶液
を、参考例１で調製した抗体固定化プレートの８ウェル
に１００μＬ／ウェルになるように添加した後、２５
℃、１時間インキュベートした。インキュベート終了
後、各ウェルを、１５０ｍＭ ＮａＣｌを添加した１０
ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリウム
緩衝液（ｐＨ７．５）で３回洗浄した。その後、５．０
重量％ＢＳＡ及び１５０ｍＭ ＮａＣｌを添加した１０
ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリウム
緩衝液（ｐＨ７．５）で１００００倍希釈したHorserad
ish Peroxidase標識抗ヒト免疫グロブリンＧを各ウェル
に１００μＬ加えて、２５℃、１時間インキュベートし
た。インキュベート終了後、各ウェルを、１５０ｍＭ
ＮａＣｌを添加した１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／
リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）で３回洗
浄した。和光純薬社製の商品名「ＯＰＤ錠」１錠を０．
００６％の過酸化水素を含むリン酸／クエン酸緩衝液１
２ｍｌに溶解した溶液を、１００μＬ／ウェル添加した
後、２５℃、１０分間インキュベートした。続いて、２
Ｎの硫酸溶液を５０μＬ／ウェル加えた後に、東ソー製
マイクロプレートリーダー「ＭＰＲ−Ａ４ｉ」を用い
て、各ウェルの４９２ｎｍの吸光度を測定し、０日後の
吸光度を１００％として、各日後の％を求めた。なお、
組成を表２に示し、測定結果を表３に示す。
３カ月後および４カ月後の各ヒト免疫グロブリンＧ溶液
を、参考例１で調製した抗体固定化プレートの８ウェル
に１００μＬ／ウェルになるように添加した後、２５
℃、１時間インキュベートした。インキュベート終了
後、各ウェルを、１５０ｍＭ ＮａＣｌを添加した１０
ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリウム
緩衝液（ｐＨ７．５）で３回洗浄した。その後、５．０
重量％ＢＳＡ及び１５０ｍＭ ＮａＣｌを添加した１０
ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリウム
緩衝液（ｐＨ７．５）で１００００倍希釈したHorserad
ish Peroxidase標識抗ヒト免疫グロブリンＧを各ウェル
に１００μＬ加えて、２５℃、１時間インキュベートし
た。インキュベート終了後、各ウェルを、１５０ｍＭ
ＮａＣｌを添加した１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／
リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）で３回洗
浄した。和光純薬社製の商品名「ＯＰＤ錠」１錠を０．
００６％の過酸化水素を含むリン酸／クエン酸緩衝液１
２ｍｌに溶解した溶液を、１００μＬ／ウェル添加した
後、２５℃、１０分間インキュベートした。続いて、２
Ｎの硫酸溶液を５０μＬ／ウェル加えた後に、東ソー製
マイクロプレートリーダー「ＭＰＲ−Ａ４ｉ」を用い
て、各ウェルの４９２ｎｍの吸光度を測定し、０日後の
吸光度を１００％として、各日後の％を求めた。なお、
組成を表２に示し、測定結果を表３に示す。
【００３１】
【表２】
【００３２】
【表３】
【００３３】実施例１−２及び１−３：血漿製剤蛋白質
の安定化試験２，３ 実施例１−１で用いた重合体Ｂの代わりに、合成例１−
２及び合成例１−３で合成した重合体Ｃ（実施例１−
２）及び重合体Ｄ（実施例１−３）を用いた以外は実施
例１−１と同様に行った。測定結果を表３に示す。
の安定化試験２，３ 実施例１−１で用いた重合体Ｂの代わりに、合成例１−
２及び合成例１−３で合成した重合体Ｃ（実施例１−
２）及び重合体Ｄ（実施例１−３）を用いた以外は実施
例１−１と同様に行った。測定結果を表３に示す。
【００３４】比較例１−１ 合成例１−１で合成した重合体Ｂの代わりに、２重量％
のＢＳＡを添加した以外は、実施例１−１と同様に行っ
た。測定結果を表３に示す。
のＢＳＡを添加した以外は、実施例１−１と同様に行っ
た。測定結果を表３に示す。
【００３５】比較例１−２ １００ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナト
リウム緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した、５μｇ／ｍｌ
ヒト免疫グロブリンＧ溶液に何も添加しなかった以外は
実施例１−１と同様に行った。測定結果を表３に示す。
リウム緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した、５μｇ／ｍｌ
ヒト免疫グロブリンＧ溶液に何も添加しなかった以外は
実施例１−１と同様に行った。測定結果を表３に示す。
【００３６】実施例２−１；標識抗体免疫学的活性物質
の安定化試験１ １０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリ
ウム緩衝液（ｐＨ７．５）で２００００倍希釈した Hor
seradish Peroxidase 標識抗ヒト免疫グロブリンＧ溶液
（約１．０×１０-7重量％）に、合成例１−１で合成し
た重合体Ｂを２．０重量％となるように添加した。その
後に４０℃インキュベートした。なお、添加した日を０
日後とした。
の安定化試験１ １０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリ
ウム緩衝液（ｐＨ７．５）で２００００倍希釈した Hor
seradish Peroxidase 標識抗ヒト免疫グロブリンＧ溶液
（約１．０×１０-7重量％）に、合成例１−１で合成し
た重合体Ｂを２．０重量％となるように添加した。その
後に４０℃インキュベートした。なお、添加した日を０
日後とした。
【００３７】参考例１で調製した抗体固定化プレートの
８ウェルに、１．０μｇ／ｍｌのヒト免疫グロブリンを
１００μＬ／ウェルになるように添加した後、２５℃、
１時間インキュベートした。インキュベート終了後、各
ウェルを、１５０ｍＭ ＮａＣｌを添加した１０ｍＭリ
ン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリウム緩衝液
（ｐＨ７．５）で３回洗浄した。洗浄終了後更に、０日
後、３日後、１週後、２週後、３週間後、４週間後の２
００００倍希釈した Horseradish Peroxidase標識抗ヒ
ト免疫グロブリンＧ溶液を、８ウェルに１００μＬ／ウ
ェルになるように添加した後に、２５℃、２時間インキ
ュベートした。インキュベート終了後、各ウェルを、１
５０ｍＭ ＮａＣｌを添加した１０ｍＭリン酸水素二ナ
トリウム／リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．
５）で３回洗浄した。和光純薬社製の商品名「ＯＰＤ
錠」１錠を、０．００６％の過酸化水素を含むリン酸／
クエン酸緩衝液１２ｍｌに溶解した溶液を、１００μＬ
／ウェル添加した後、２５℃、１０分間インキュベート
した。続いて、２Ｎの硫酸溶液を５０μＬ／ウェル加え
た後に、東ソー社製マイクロプレートリーダー「ＭＰＲ
−Ａ４ｉ」を用いて、各ウェルの４９２ｎｍの吸光度を
測定し、０日後の吸光度を１００％として、各日後の％
を求めた。組成を表２、測定結果を表４に示す。
８ウェルに、１．０μｇ／ｍｌのヒト免疫グロブリンを
１００μＬ／ウェルになるように添加した後、２５℃、
１時間インキュベートした。インキュベート終了後、各
ウェルを、１５０ｍＭ ＮａＣｌを添加した１０ｍＭリ
ン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリウム緩衝液
（ｐＨ７．５）で３回洗浄した。洗浄終了後更に、０日
後、３日後、１週後、２週後、３週間後、４週間後の２
００００倍希釈した Horseradish Peroxidase標識抗ヒ
ト免疫グロブリンＧ溶液を、８ウェルに１００μＬ／ウ
ェルになるように添加した後に、２５℃、２時間インキ
ュベートした。インキュベート終了後、各ウェルを、１
５０ｍＭ ＮａＣｌを添加した１０ｍＭリン酸水素二ナ
トリウム／リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．
５）で３回洗浄した。和光純薬社製の商品名「ＯＰＤ
錠」１錠を、０．００６％の過酸化水素を含むリン酸／
クエン酸緩衝液１２ｍｌに溶解した溶液を、１００μＬ
／ウェル添加した後、２５℃、１０分間インキュベート
した。続いて、２Ｎの硫酸溶液を５０μＬ／ウェル加え
た後に、東ソー社製マイクロプレートリーダー「ＭＰＲ
−Ａ４ｉ」を用いて、各ウェルの４９２ｎｍの吸光度を
測定し、０日後の吸光度を１００％として、各日後の％
を求めた。組成を表２、測定結果を表４に示す。
【００３８】実施例２−２及び２−３：標識抗体免疫学
的活性物質の安定化試験２，３ 合成例１−１で合成した重合体Ｂの代わりに、合成例１
−２及び合成例１−３で合成した重合体Ｃ（実施例２−
２）及び重合体Ｄ（実施例２−３）を用いた以外は実施
例２−１と同様に行った。測定結果を表４に示す。
的活性物質の安定化試験２，３ 合成例１−１で合成した重合体Ｂの代わりに、合成例１
−２及び合成例１−３で合成した重合体Ｃ（実施例２−
２）及び重合体Ｄ（実施例２−３）を用いた以外は実施
例２−１と同様に行った。測定結果を表４に示す。
【００３９】比較例２−１ 合成例１−１で合成した重合体Ｂの代わりに、２重量％
のＢＳＡを添加した以外は、実施例２−１と同様に行っ
た。測定結果を表４に示す。
のＢＳＡを添加した以外は、実施例２−１と同様に行っ
た。測定結果を表４に示す。
【００４０】比較例２−２ １００ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナト
リウム緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した、５μｇ／ｍｌ
ヒト免疫グロブリンＧ溶液に何も添加しなかった以外は
実施例２−１と同様に行った。測定結果を表４に示す。
リウム緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解した、５μｇ／ｍｌ
ヒト免疫グロブリンＧ溶液に何も添加しなかった以外は
実施例２−１と同様に行った。測定結果を表４に示す。
【００４１】
【表４】
【００４２】実施例３−１；酵素の安定化１−１ １００ｍＭ ＮａＣｌ及び１ｍＭ ＭｇＣｌ2を添加し
た１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナト
リウム緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解した５ｆｍｏｌ／ｍ
ｌ（１０-15ｍｏｌ／ｍｌ）のβ−Ｄ−ガラクトシダー
ゼ溶液（１．０×１０-13重量％）に合成例１−１で合
成した重合体を２．０重量％となるように添加した。そ
の後に４０℃でインキュベートした。なお、添加した日
を０日後とした。
た１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナト
リウム緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解した５ｆｍｏｌ／ｍ
ｌ（１０-15ｍｏｌ／ｍｌ）のβ−Ｄ−ガラクトシダー
ゼ溶液（１．０×１０-13重量％）に合成例１−１で合
成した重合体を２．０重量％となるように添加した。そ
の後に４０℃でインキュベートした。なお、添加した日
を０日後とした。
【００４３】０日後、３日後、１週後、２週後、３週間
後および４週間後の各β−Ｄ−ガラクトシダーゼ溶液
０．４ｍｌに、１００ｍＭ ＮａＣｌ及び１ｍＭ塩化マ
グネシウムを添加した１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム
／リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解
した５０ｍｍｏｌ／Ｌの２−ニトロフェニル・β−Ｄ−
ガラクトシド溶液０．２ｍｌを加えて、３０℃、１０分
間インキュベートした。インキュベート終了後、０．１
ｍｏｌ／Ｌ炭酸ナトリウム２ｍｌを加えた後に、日本分
光社製ＵＶ／ＶＩＳ測定機「Ｕｂｅｓｔ−５０」を用い
て、４２０ｎｍの吸光度を測定した。０日後の吸光度を
１００％として、各日後の％を求めた。測定結果を表５
に示す。
後および４週間後の各β−Ｄ−ガラクトシダーゼ溶液
０．４ｍｌに、１００ｍＭ ＮａＣｌ及び１ｍＭ塩化マ
グネシウムを添加した１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム
／リン酸二水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解
した５０ｍｍｏｌ／Ｌの２−ニトロフェニル・β−Ｄ−
ガラクトシド溶液０．２ｍｌを加えて、３０℃、１０分
間インキュベートした。インキュベート終了後、０．１
ｍｏｌ／Ｌ炭酸ナトリウム２ｍｌを加えた後に、日本分
光社製ＵＶ／ＶＩＳ測定機「Ｕｂｅｓｔ−５０」を用い
て、４２０ｎｍの吸光度を測定した。０日後の吸光度を
１００％として、各日後の％を求めた。測定結果を表５
に示す。
【００４４】実施例３−２及び３−３；酵素の安定化１
−２、１−３ 合成例１−１の重合体Ｂの代わりに、合成例１−２及び
合成例１−３で合成した重合体Ｃ（実施例３−２）及び
重合体Ｄ（実施例３−３）を用いた以外は実施例３−１
と同様に行った。測定結果を表５に示す。
−２、１−３ 合成例１−１の重合体Ｂの代わりに、合成例１−２及び
合成例１−３で合成した重合体Ｃ（実施例３−２）及び
重合体Ｄ（実施例３−３）を用いた以外は実施例３−１
と同様に行った。測定結果を表５に示す。
【００４５】比較例３−１ 合成例１−１で合成した重合体Ｂの代わりに、２重量％
のＢＳＡを添加した以外は、実施例３−１と同様に行っ
た。測定結果を表５に示す。
のＢＳＡを添加した以外は、実施例３−１と同様に行っ
た。測定結果を表５に示す。
【００４６】比較例３−２ １００ｍＭ ＮａＣｌ及び１ｍＭ ＭｇＣｌ2を添加し
た１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナト
リウム緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解した５ｆｍｏｌ／ｍ
ｌβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ溶液に何も添加しなかった
以外は実施例３−１と同様に行った。測定結果は表５に
示す。
た１０ｍＭリン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナト
リウム緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解した５ｆｍｏｌ／ｍ
ｌβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ溶液に何も添加しなかった
以外は実施例３−１と同様に行った。測定結果は表５に
示す。
【００４７】
【表５】
【００４８】参考例２；蛋白質付着レンズの調製 人工涙液（アルブミン０．６ｇ、グロブリン０．３ｇ、
リゾチーム０．２ｇ及びムチン０．１ｇを生理食塩水に
溶解させ１００ｍｌとした）にコンタクトレンズ（セイ
コー社製コンタクトレンズ 「スーパーＥＸ１」）を浸
し、６５℃に加熱して蛋白質を付着させた。
リゾチーム０．２ｇ及びムチン０．１ｇを生理食塩水に
溶解させ１００ｍｌとした）にコンタクトレンズ（セイ
コー社製コンタクトレンズ 「スーパーＥＸ１」）を浸
し、６５℃に加熱して蛋白質を付着させた。
【００４９】実施例４−１ 生理食塩水に溶解した４．０ｍｇ／ｍｌ ビオプラーゼ
（ナガセ生化学工業（株）製、商標、ペプチド分解酵
素）溶液（０．４重量％）に合成例１−１で合成した重
合体Ｂを２．０重量％となるように添加した。その後に
４０℃にてインキュベートした。なお、添加した日を０
日後とした。０日後、１ヶ月後、２ヶ月後、３ヶ月後、
４ヶ月後の各ビオプラーゼ溶液の蛋白質分解酵素活性
は、カゼイン−フォリン法により測定した。０日後の活
性を１００％として各月後の活性を求めた。組成を表２
に、測定結果を表６に示す。
（ナガセ生化学工業（株）製、商標、ペプチド分解酵
素）溶液（０．４重量％）に合成例１−１で合成した重
合体Ｂを２．０重量％となるように添加した。その後に
４０℃にてインキュベートした。なお、添加した日を０
日後とした。０日後、１ヶ月後、２ヶ月後、３ヶ月後、
４ヶ月後の各ビオプラーゼ溶液の蛋白質分解酵素活性
は、カゼイン−フォリン法により測定した。０日後の活
性を１００％として各月後の活性を求めた。組成を表２
に、測定結果を表６に示す。
【００５０】また、０日後、１ヶ月後、２ヶ月後、３ヶ
月後、４ヶ月後の各ビオプラーゼ溶液に参考例２で調製
した蛋白質付着レンズを入れ、静置した状態で洗浄し
た。洗浄効果は目視にて行い、付着蛋白質がほとんど除
かれている場合を良好、それ以外を不良として判定し
た。測定結果を表７に示す。
月後、４ヶ月後の各ビオプラーゼ溶液に参考例２で調製
した蛋白質付着レンズを入れ、静置した状態で洗浄し
た。洗浄効果は目視にて行い、付着蛋白質がほとんど除
かれている場合を良好、それ以外を不良として判定し
た。測定結果を表７に示す。
【００５１】実施例４−２及び４−３ 合成例１−１で合成した重合体Ｂの代わりに、合成例１
−２及び合成例１−３で合成した重合体Ｃ（実施例４−
２）及び重合体Ｄ（実施例４−３）を用いた以外は実施
例４−１と同様に行った。測定結果を表６および７に示
す。
−２及び合成例１−３で合成した重合体Ｃ（実施例４−
２）及び重合体Ｄ（実施例４−３）を用いた以外は実施
例４−１と同様に行った。測定結果を表６および７に示
す。
【００５２】比較例４−１ 合成例１−１で合成した重合体Ｂの代わりに、２．０重
量％のＢＳＡを添加した以外は実施例４−１と同様に行
った。測定結果を表６および７に示す。
量％のＢＳＡを添加した以外は実施例４−１と同様に行
った。測定結果を表６および７に示す。
【００５３】比較例４−２ 生理食塩水に溶解した４．０ｍｇ／ｍｌ ビオプラーゼ
（ナガセ生化学工業（株）製、商標、ペプチド分解酵
素）溶液に何も添加しなかった以外は実施例４−１と同
様に行った。測定結果を表６および７に示す。以上の結
果、本発明の実施例は比較例に比べ安定性に優れている
ことがわかる。
（ナガセ生化学工業（株）製、商標、ペプチド分解酵
素）溶液に何も添加しなかった以外は実施例４−１と同
様に行った。測定結果を表６および７に示す。以上の結
果、本発明の実施例は比較例に比べ安定性に優れている
ことがわかる。
【００５４】
【表６】
【００５５】
【表７】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｎ 9/96 Ｃ１２Ｎ 9/96 Ｃ１２Ｑ 1/25 9452−4Ｂ Ｃ１２Ｑ 1/25 // Ａ６１Ｋ 38/00 Ｃ０８Ｆ 30/02 ＭＮＳ 38/16 Ｃ０８Ｌ 43/02 ＬＫＡ 38/43 Ａ６１Ｋ 37/02 Ｃ０８Ｆ 30/02 ＭＮＳ 37/04 Ｃ０８Ｌ 43/02 ＬＫＡ 37/465 (72)発明者 榊 秀次郎 茨城県つくば市春日２−20−３ (72)発明者 首藤 健志郎 茨城県つくば市花畑３−７−１ (72)発明者 山田 智 茨城県つくば市春日２−20−３ (72)発明者 安藤 亮太 茨城県つくば市春日２−26−２ (72)発明者 松山 一夫 茨城県つくば市春日２−17−14 (72)発明者 鯉沼 康美 茨城県つくば市東新井32−16 (72)発明者 中林 宣男 千葉県松戸市小金原５−６−20 (72)発明者 石原 一彦 東京都小平市上水本町３−16−37
Claims (5)
- 【請求項１】 同一系中において、式（１）で示される
ホスホリルコリン基を有する重合体と、蛋白質とを共存
させることを特徴とする蛋白質の安定化方法。 【化１】 - 【請求項２】 式（１）で示されるホスホリルコリン基
を有する重合体が、式（２）（式中Ｘは、水素原子また
はメチル基を示す）で示されるホスホリルコリン基含有
単量体を含む重合成分を重合してなる重合体である請求
項１記載の蛋白質の安定化方法。 【化２】 - 【請求項３】 (A1)式（２）（式中Ｘは、水素原子また
はメチル基を示す）で示されるホスホリルコリン基含有
単量体を重合してなる重合体１．０×１０-4〜８０重量
％と、 【化３】 (B1)血漿製剤蛋白質１．０×１０-14〜２０重量％と、
(C1)緩衝液０〜９９．９重量％とを含んでなる安定化し
た血漿製剤蛋白質組成物。 - 【請求項４】 (A2)式（２）（式中Ｘは、水素原子また
はメチル基を示す）で示されるホスホリルコリン基含有
単量体を重合してなる重合体１．０×１０-4〜８０重量
％と、 【化４】 (B2)標識免疫学的活性物質１．０×１０-14〜２０重量
％と、(C2)緩衝液０〜９９．９重量％とを含んでなる安
定化した標識免疫学的活性物質組成物。 - 【請求項５】 (A3)式（２）（式中Ｘは、水素原子また
はメチル基を示す）で示されるホスホリルコリン基含有
単量体を重合してなる重合体１．０×１０-4〜８０重量
％と、 【化５】 (B3)酵素１．０×１０-14〜２０重量％と、(C3)緩衝液
０〜９９．９重量％とを含んでなる安定化した酵素組成
物。
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