JPH11501022A

JPH11501022A - ピラゾロテトラサイクリン

Info

Publication number: JPH11501022A
Application number: JP8526020A
Authority: JP
Inventors: コル，マルコダ; ダッラスタ，レオーネ; レスタ，イレーネ; セゲッティ，エンニオ
Original assignee: ビオキミカオポスソシエタペルアチオニ
Priority date: 1995-02-28
Filing date: 1996-02-27
Publication date: 1999-01-26
Also published as: ITMI950376A1; IT1274653B; WO1996026926A1; AU4831396A; ITMI950376A0; EP0812315A1

Abstract

(57)【要約】式（Ｉ）［式中、Ｒは、水素、置換されているかまたは置換されていない（Ｃ₁−Ｃ₆）のアルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）のアルケニルまたは（Ｃ₂−Ｃ₆）のアルキニル基、置換されているかまたは置換されていないアリールまたはヘテロアリール基、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキル、シクロアルケニルまたはシクロアルカジエニル基であり、そしてＲ′はアミノ、ジメチルアミノ、（Ｃ₁−Ｃ₃）のアルキルアミノまたはホルミルアミノ基を表す］を有する新規なピラゾロテトラサイクリンが開示される。このピラゾロテトラサイクリンは、感染症の治療に有用な抗生物質である。

Description

【発明の詳細な説明】ピラゾロテトラサイクリン本発明は、新規なテトラサイクリン誘導体、より詳細には、新規なピラゾロテトラサイクリン、その製造方法、およびそれを含有する医薬組成物に関する。テトラサイクリンは、１９４０年代末に発見されて以来、最も研究されている抗生物質のひとつである。この物質の化学的性質や活性、より詳細には、その化学的構造と抗菌活性との関係について書かれた本は多い。テトラサイクリンについての詳細な構造／活性研究の結果、ケミカル・アブストラクト（Chemical Abstract）命名（ＣＡＳ登録番号６０−５４−８）によれば［４Ｓ，（４α，４ａα，５ａα，６β，１２ａα）］−４−（ジメチルアミノ）−１，４，４ａ，５，５ａ，６，１１，１２ａ−オクタヒドロ−３，６，１０，１２，１２ａ−ペンタヒドロキシ−６−メチル−１，１１−ジオクソ−２ −ナフタセンカルボキサミド｛［４Ｓ，（４α，４ａα，５ａα，６β，１２ａ α）］-4-(dimethylamino)-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-octahydro-3,6,10,12,12a-pe ntahydroxy-6-methyl-1,11-dioxo-2-naphthacenecarboxamide｝というナフタセンカルボキサミド誘導体である、式Ａで表される天然のテトラサイクリンの基本構造：について、不可逆的にしかし適切な方法で４ａから９位を修飾して、抗菌活性がなお賦与されている化合物を得てもよいが、一方、１、２、３、４および１０から１２ａ位のいずれの不可逆的な修飾も抗菌活性の低下を伴う、ということがわかった。したがって、これらの位置は「不可侵」であると見なされている［医療研究集、第９巻、レスター・Ａ・ミッチャー、テトラサイクリン抗生物質の化学、マーセル・デッカー株式会社(Medical Research Series，Vol．9，Lester A． Mitscher，The Chemistry of the Tetracycline Antibiotics，Marcel Dekker， Inc.)、１９７８年］。実際、ヴァルカビら(Valcavi et al.，Gazz．Chim．Ital.，1963，93，916-92 8)は、あるピラゾロテトラサイクリン、即ちテトラサイクリンおよびクロロテトラサイクリンの構造の１１位と１２位をヒドラジンの作用により修飾して得られる化合物、について記載しており、そしてこれらの化合物がその活性を失うか、または出発物質のテトラサイクリンより低活性になったと結論している。テトラサイクリン部分の７位に任意にアミノ基を置換したピラゾロテトラサイクリンが、少なくとも親のテトラサイクリンと同じくらい活性であり、またいっそう活性であることが知見された。より詳細には、テトラサイクリン構造の１１位および１２位の修飾にも関わらず、この新規な化合物は親のテトラサイクリンと同じ特性を賦与されており、またある微生物に対してはよりいっそう活性であることが知見された。したがって、本発明の目的は、式Ｉ：［式中、Ｒは、水素、置換されているかまたは置換されていない（Ｃ₁−Ｃ₆）のアルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）のアルケニルまたは（Ｃ₂−Ｃ₆）のアルキニル基、置換されているかまたは置換されていないアリールまたはヘテロアリール基、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキル、シクロアルケニルまたはシクロアルカジエニル基であり、そしてＲ′は塩基性基、好ましくはアミノ、ジメチルアミノ、（Ｃ₁−Ｃ₃）のアルキルアミノまたはホルミルアミノ基を表す。］の新規なピラゾロテトラサイクリン、ならびにその酸付加塩、溶媒和物、およびその錯体、を提供することである。これらの塩、溶媒和物、および錯体の中では、製薬的に許容できるかまたはその中のピラゾロテトラサイクリンを容易に分離できるものが特に好ましい。好ましい塩は、塩酸塩、硫酸水素塩、硫酸塩である。溶媒和物は、遊離塩基または塩の溶媒和物でよく、水和物が好ましい。錯体は、一般にピラゾロテトラサイクリンを容易に単離できるものであり、塩化カルシウム二水和物との錯体が特に好ましい。本発明による化合物の下位分類には、上記式Ｉのピラゾロテトラサイクリン［式中、Ｒ′は前記した通りであり、Ｒは、水素、置換されているかまたは置換されていない（Ｃ₁−Ｃ₆）のアルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）のアルケニルまたは（Ｃ₂− Ｃ₆）のアルキニル基；炭素原子３〜８個のシクロアルキル基；シクロヘキセニル、より詳細には１−シクロヘキセニルのような、炭素原子４〜８個のシクロアルケニル基；ハロゲン、特にフッ素、塩素およびヨウ素置換基、（Ｃ₁−Ｃ₃）のアルキル、（Ｃ₁−Ｃ₃）のアルコキシ、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、アミノ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、メトキシまたはエトキシカルボニル、フェニル、クロロフェニル、ブロモフェニル、フルオロフェニル、（Ｃ₁− Ｃ₃）のアルコキシフェニルからなる群より選ばれる一種またはそれ以上の置換基により置換されているかまたは置換されていないフェニル基；１個または２個のメトキシ基により置換されているかまたは置換されていないナフチル基；好ましくは、１Ｈ−ピロリル、１−（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルピロリル、フリル、チエニル、ピリジル、オキサゾリル、１Ｈ−イミダゾリル、１−（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルイミダゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピリミジル、ピラジニル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、フラザニル、１，３，５ −トリアジニル、２−、３−、４−、５−、６−および７−ベンゾフラニルまたはベンゾチエニル、１Ｈ−および１−（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル−２−、３−、４− 、５−、６−、および７−インドリル、２−、３−、４−、５−、６−、７−および８−キノリル、１−、３−、４−、５−、６−、７−および８−イソキノリル、２−ベンゾチアゾリル、キノキサリニル、フタラジニル、カルバゾリルからなる群より選ばれる、一、二、または三環式ヘテロアリール基である。］、ならびに、製薬的に許容できるかまたはその中のピラゾロテトラサイクリンを容易に分離できるものが好ましい、前記ピラゾロテトラサイクリンの塩、溶媒和物、および錯体、が含まれる。本発明による化合物の別の有利な下位分類には、式Ｉにおいて、Ｒが水素または上記した基であり、そしてＲ′がホルミルアミノ、メチルアミノ、イソプロピルアミノおよびジメチルアミノからなる群より選ばれることを特徴とするもの、ならびにその、製薬的に許容できるかまたはその中のピラゾロテトラサイクリンを容易に分離できる塩、溶媒和物、および錯体、が含まれる。これら後に述べた化合物のうち、式ＩにおいてＲが水素であり、Ｒ′がジメチルアミノであるもの［（７−ジメチルアミノ−６−ジメチル−６−デオキシテトラサイクリンまたはミノサイクリンの配置）］、ならびにその、製薬的に許容できるかまたはピラゾロテトラサイクリンを容易に分離できる塩、溶媒和物、および錯体（塩化カルシウム二水和物との錯体が特に好ましい）を、以下、「ピラゾロミノサイクリン」と称する。本発明の化合物の場合においても、以下の記載および実施例は、一般に、ピラゾロテトラサイクリンを参照する。実際には、これらの化合物の正しい命名は、［９ｓ（７ａα，８ａα，９α−１２ａα）］２ａ，７，７ａ，８，８ａ，９，１２，１２ａ−オクタヒドロ（１Ｈ）ベンゾ［ｇ］ナフタ［１，２，３−ｃｄ］インダゾール｛［９Ｓ（７ａα，８ａα，９α−１２ａα）］２ａ，７，７ａ，８，８ａ，９，１２，１２ａ−octahydro(1H)benzo［g］napth［1,2,3-cd］inda zole｝であり、その構造（Ｂ）は次の通りである：本発明の別の態様によれば、式II （式中、Ｒ′は前述した通りである）の、対応するテトラサイクリン、あるいはその塩または溶媒和物と、式III （式中、Ｒは前述した通りである）のヒドラジンとを反応させ、得られるピラゾロテトラサイクリンを塩基または錯体の形で単離し、必要であれば、その遊離塩基をピラゾロテトラサイクリンの酸付加塩に変換する工程を具えることを特徴とする、ピラゾロテトラサイクリンの製造方法が提供される。式IIのテトラサイクリン、あるいはその塩または溶媒和物と、式IIIのヒドラジンとの反応は、簡単かつ速い。この反応は、有機または水性有機溶媒、好ましくはアルコール系またはヒドロアルコール系、好ましくはメタノール中で起きる。反応温度は、置換していないヒドラジン（III、Ｒ＝Ｈ）を用いた場合は室温（２０〜３０℃）であり、式ＩのＲが水素以外であるピラゾロテトラサイクリンを得るため置換したヒドラジンを用いた場合は２５〜９０℃である。反応は一般に１〜５時間後に終了し、得られる化合物Ｉは、テトラサイクリン化学における慣用の工程、例えば、反応混合物を酸化し、水性酸性媒体中で、得られる化合物とカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウム二水和物とで錯体を形成することにより単離する。次いで、不溶なカルシウム塩を形成することの可能な有機または無機酸によりカルシウムを沈殿させ、不溶なカルシウム塩を分離し、ｐＨを約８に調整し、そしてピラゾロテトラサイクリンを塩基の形で単離することにより、所望の最終生成物をその錯体から回収する。一般に、最終生成物の回収は、シュウ酸での処理、シュウ酸カルシウムの除去、およびｐＨのアルカリ値（７．５〜９．０）への調整によるピラゾロテトラサイクリンの単離、により行う。最終生成物の単離はまた、カルシウム錯体を用いずに、溶媒をただ蒸発させ、水相のｐＨを約８に調整することにより行うこともできる。ピラゾロテトラサイクリン塩基は、無機または有機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、または２−ナフタレンスルホン酸で処理することにより、その酸付加塩に変換してもよい。基本構造Ｂを有する本発明のピラゾロテトラサイクリンは、以下の構造により表される三種の理論的互変異性体Ｉ、Ｉ′、Ｉ″：として存在することができる。出願人が行った研究によれば、式Ｉの化合物のみが薬理学的に活性であり、満足できる結果をもたらすことが示されている。本発明の新規なテトラサイクリンは、ある場合には親のテトラサイクリンよりも優れた特性を示す抗生物質として有用である。より詳細には、式Ｉの化合物（Ｒ＝Ｈ、Ｒ′＝ジメチルアミノ）の黄色ブドウ球菌(Staphilococcus aureus、ＡＴＣＣ寄託番号第２９７３７番)に対する最小阻止濃度（Ｍ．Ｉ．Ｃ．）は、ミノサイクリンに対してわかっている０．７５ｍｃｇ／ｍｌに対して、０．４ｍｃｇ／ｍｌである。更に、これらの新規なテトラサイクリンは、公知の親テトラサイクリンに較べて低い毒性を有する。例えば、ピラゾロミノサイクリンのラットにおけるＤＬ₅₀ は、同じ条件でのミノサイクリンの値３３００ｍｇ／ｋｇに較べ、４０００ｍｇ／ｋｇを越えている。したがって、本発明の新規なピラゾロテトラサイクリンは、投与単位当たり５０〜５００ｍｇの活性成分を１日１〜４回投与する、医薬組成物の活性成分として用いてもよい。本発明の新規なピラゾロテトラサイクリンは、そのままかまたは通常の製薬的担体と共に、例えばゼラチンのカプセル、錠剤、顆粒剤といった経口投与用の医薬組成物の調製に用いてもよい。このような医薬組成物は、本発明のピラゾロテトラサイクリンを、無水ピラゾロテトラサイクリン５０〜５００ｍｇに相当する量含んでいる。好ましい活性成分は、ピラゾロミノサイクリンか、もしくはその製薬的に許容できる塩または溶媒和物のいずれかである。以下の実施例は本発明を説明するものであるが、本発明を限定するものではない。実施例１ミノサイクリンの塩酸塩二水和物２５ｇの５００ｍｌメタノール溶液に、１０ｍｌのヒドラジン水和物を加え、次いで反応混合物を撹拌下２０〜２５℃で３時間放置する。その後、３７％の塩酸を加えることによりｐＨを約１に調整し、混合物を真空濃縮する。残留物を、塩化カルシウム二水和物４ｇの１００ｍｌ水溶液および３７％の塩酸５ｍｌに溶解した後、１５％の水酸化ナトリウムを加えることによりこの溶液のｐＨを３．５にする。得られる沈殿物を濾別、水洗し、真空乾燥して、ピラゾロミノサイクリンと塩化カルシウム二水和物との錯体１７ｇを得る。純度（ＨＰＬＣ）：９６．９％。元素分析：ファウンド(Found) Ｃ＝５０．７４％；Ｈ＝５．２４％；Ｎ＝１２．５０％；Ｃｌ＝９．７６％；Ｃａ＝２．０４％。Ｈ₂Ｏ（Ｋ．Ｆ．）＝６．３３％。このようにして得られる錯体を、シュウ酸を含有するエタノール／水混合物に懸濁し、次いで懸濁液のｐＨを約０．７に調整する。次いでディカリテ(Dicalit e(登録商標))［Dicalite；イタリア国ミラノ市コルシコ所在のユーロパ・スド・エス・ピー・エイ(Europa Sud S.p.A.)社］を加え、ｐＨを１．８とし、１０分間撹拌の後、混合物を濾過して透明な溶液を得る。この溶液に１５％の水酸化ナトリウムを加えてｐＨを約８とし、次いで沈殿を濾別により回収し、水洗、真空乾燥して、式ＩＶに対応するピラゾロミノサイクリン塩基１３ｇを得る。かくして得られる生成物をエタノールに溶解し、３７％塩酸で酸化してｐＨを約４としたのち、混合物を冷却し、固形分を濾別、水洗して真空乾燥する。こうして、７ｇの［９ｓ−（７ａα，８ａα，９α，１２ａα）］−６，９−（ビス −ジメチルアミノ）−２ａ，７，７ａ，８，８ａ，９，１２，１２ａ−オクタヒドロ−３，１０，１２ａ−トリヒドロキシ−１２−オクソ（１Ｈ）ベンゾ［ｇ］ナフタ［１，２，３−ｃｄ］インダゾール−１１−カルボキサミドの塩酸塩（ピラゾロミノサイクリンの塩酸塩）を得る。 ¹Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）δ（ｐ．ｐ．ｍ．）：１．２１（ｍ，２Ｈ）；２．１０（ｍ，１Ｈ）；２．７〜３．０（ｓ＋ｍ，９Ｈ）；３．３０（ｓ，６Ｈ）；３．６３（ｄ，１Ｈ）；６．９３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．４１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）。 ¹³Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ＋ＨＣｌ）δ（ｐ．ｐ．ｍ．）：２７．５；３０．７；３６．７；４０．０；４３．０；４８．０；７３．３；７４．２；１０３．３；１１６．６；１１６．７；１１９．７；１２１．１；１３０．７；１３３．８；１３８．２；１４２．３；１５３．６；１７２．０；１８６．５；１９１．３。質量スペクトル（ＦＡＢ＋）：ｍ／ｅ４５４分子イオン（Ｍ＋Ｈ）⁺；主なフラグメント：ｍ／ｅ４３７、４１９、３９１、３４８、２８９、２５９、２４６、２０７。実施例２ミノサイクリンの塩酸塩二水和物２０ｇの４００（ｍｌ）メタノール溶液に、８ｍｌのヒドラジン水和物を加え、混合物を撹拌下２０〜２５℃で３時間放置した後、真空濃縮する。残留物を水に溶解し、１５％の水酸化ナトリウムを加えることにより溶液のｐＨを８にした後、固形分を濾別、水洗、真空乾燥する。こうして、純度８５．３％（ＨＰＬＣ）のピラゾロミノサイクリン塩基１８ｇを得る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者レスタ，イレーネイタリアアイ−20133 ミラノヴィアヴァリスネリ８ (72)発明者セゲッティ，エンニオイタリアアイ−20092 シニセッロバルサーモヴィアサンパオロ 15

Claims

【特許請求の範囲】１．式Ｉ：［式中、Ｒは、水素、置換されているかまたは置換されていない（Ｃ₁−Ｃ₆）のアルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）のアルケニルまたは（Ｃ₂−Ｃ₆）のアルキニル基、置換されているかまたは置換されていないアリールまたはヘテロアリール基、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキル、シクロアルケニルまたはシクロアルカジエニル基であり、そしてＲ′は塩基性基を表す］のピラゾロテトラサイクリン、その酸付加塩、溶媒和物、および錯体。２．前記塩基性基が、アミノ、ジメチルアミノ、（Ｃ₁−Ｃ₃）のアルキルアミノまたはホルミルアミノからなる群より選ばれることを特徴とする請求項１に記載の式Ｉのピラゾロテトラサイクリン。３．Ｒ′が前記した通りであり、Ｒが、水素、置換されているかまたは置換されていない（Ｃ₁−Ｃ₆）のアルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）のアルケニルまたは（Ｃ₂−Ｃ₆ ）のアルキニル基；炭素原子３〜８個のシクロアルキル基；炭素原子４〜８個のシクロアルケニル基；ハロゲン、特にフッ素、塩素およびヨウ素置換基、（Ｃ₁ −Ｃ₃）のアルキル、（Ｃ₁−Ｃ₃）のアルコキシ、トリフルオロメチル、ペタフルオロエチル、アミノ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、メトキシまたはエトキシカルボニル、フェニル、クロロフェニル、ブロモフェニル、フルオロフェニル、（Ｃ₁−Ｃ₃）のアルコキシフェニルからなる群より選ばれる一種またはそれ以上の置換基により置換されるかまたは置換されていないフェニル基；１個または２個のメトキシ基により置換されているかまたは置換されていないナフチル基；１Ｈ−ピロリル、１−（Ｃ₁−Ｃ₃）のアルキルピロリル、フリル、チエニル、ピリジル、オキサゾリル、１Ｈ−イミダゾリル、１−（Ｃ₁−Ｃ₃ ）のアルキルイミダゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピリミジル、ピラジニル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、フラザニル、１，３，５−トリアジニル、２−、３−、４−、５−、６−および７−ベンゾフラニルまたはベンゾチエニル、１Ｈ−または１−（Ｃ₁−Ｃ₃）のアルキル−２ −、３−、４−、５−、６−、７−インドリル、２−、３−、４−、５−、６− 、７−および８−キノリル、１−、３−、４−、５−、６−、７−および８−イソキノリル、２−ベンゾチアゾリル、キノキサリニル、フタラジニル、カルバゾリルからなる群より選ばれる、一、二、または三環式ヘテロアリール基であることを特徴とする請求項１に記載の式Ｉのピラゾロテトラサイクリン、その塩、溶媒和物、および錯体。４．Ｒが水素または請求項３に定義した基であり、Ｒ′がホルミルアミノ、メチルアミノ、イソプロピルアミノおよびジメチルアミノからなる群より選ばれることを特徴とする請求項１に記載の式Ｉのピラゾロテトラサイクリン、その、製薬的に許容できるかまたは前記ピラゾロテトラサイクリンを容易に分離できる塩、溶媒和物、および錯体。５．Ｒが水素であり、Ｒ′がジメチルアミノであることを特徴とする請求項１に記載の式Ｉのピラゾロテトラサイクリン、その塩、溶媒和物、および錯体。６．式IV の［９ｓ−（７ａα，８ａα，９α，１２ａα）］−６，９−（ビス−ジメチルアミノ）−２ａ，７，７ａ，８，８ａ，９，１２，１２ａ−オクタヒドロ−３，１０，１２ａ−トリヒドロキシ−１２−オクソ（１Ｈ）ベンゾ［ｇ］ナフタ［１，２，３−ｃｄ］インダゾール−１１−カルボキサミド、ならびにその、製薬的に許容できるかまたは前記［９ｓ−（７ａα，ａα，９α，１２ａα）］−６，９−（ビス−ジメチルアミノ）−２ａ，７，７ａ，８，８ａ，９，１２，１２ａ −オクタヒドロ−３，１０，１２ａ−トリヒドロキシ−１２−オクソ（１Ｈ）ベンゾ［ｇ］ナフタ［１，２，３−ｃｄ］インダゾール−１１−カルボキサミドを容易に分離できる塩、溶媒和物および錯体。７．［９ｓ−（７ａα，８ａα，９α，１２ａα）］−６，９−（ビス−ジメチルアミノ）−２ａ，７，７ａ，８，８ａ，９，１２，１２ａ−オクタヒドロ−３，１０，１２ａ−トリヒドロキシ−１２−オクソ（１Ｈ）ベンゾ［ｇ］ナフタ［１，２，３−ｃｄ］インダゾール−１１−カルボキサミドと、塩化カルシウム二水和物との錯体。８．［９ｓ−（７ａα，８ａα，９α，１２ａα）］−６，９−（ビス−ジメチルアミノ）−２ａ，７，７ａ，８，８ａ，９，１２，１２ａ−オクタヒドロ−３，１０，１２ａ−トリヒドロキシ−１２−オクソ（１Ｈ）ベンゾ［ｇ］ナフタ［１，２，３−ｃｄ］インダゾール−１１−カルボキサミドの塩酸塩。９．式II （式中、Ｒ′は請求項１に定義した通りである）の、対応するテトラサイクリン、あるいはその塩または溶媒和物と、式III （式中、Ｒは請求項１に定義した通りである）のヒドラジンとを反応させる工程を具えることを特徴とする請求項１に記載のピラゾロテトラサイクリンの製造方法。１０．反応を、アルコール溶媒中２０〜９０℃の温度で、ピラゾロテトラサイクリンを錯体の形にするための塩化カルシウムの存在下で行うことを特徴とする請求項９に記載の製造方法。１１．ピラゾロテトラサイクリンの錯体を、不溶なカルシウム塩を形成することができる無機または有機酸によりｐＨ１．８で処理して、ｐＨを約８に調整し、そしてピラゾロテトラサイクリンを塩基として単離することを特徴とする請求項１０に記載の製造方法。１２．前記酸が、しゅう酸であることを特徴とする請求項１１に記載の製造方法。１３．投与単位当たり、請求項１に記載のピラゾロテトラサイクリンを５０〜５００ｍｇの量、そのままかまたは製薬的担体との混合物として含有することを特徴とする経口投与用の医薬組成物。１４．前記ピラゾロテトラサイクリンが、［９ｓ−（７ａα，８ａα，９α，１２ａα）］−６，９−（ビス−ジメチルアミノ）−２ａ，７，７ａ，８，８ａ，９，１２，１２ａ−オクタヒドロ−３，１０，１２ａ−トリヒドロキシ−１２− オクソ（１Ｈ）ベンゾ［ｇ］ナフタ［１，２，３−ｃｄ］インダゾール−１１− カルボキサミド、もしくはその製薬的に許容できる塩、溶媒和物または錯体であることを特徴とする請求項１３に記載の医薬組成物。１５．前記ピラゾロテトラサイクリンが、［９ｓ−（７ａα，８ａα，９α，１２ａα）］−６，９−（ビス−ジメチルアミノ）−２ａ，７，７ａ，８，８ａ，９，１２，１２ａ−オクタヒドロ−３，１０，１２ａ−トリヒドロキシ−１２− オクソ（１Ｈ）ベンゾ［ｇ］ナフタ［１，２，３−ｃｄ］インダゾール−１１− カルボキサミドの塩酸塩であることを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。