JPS5826818A - ６，８−置換リボフラノシルプリン−３，５−環状ホスフエ−トを用いて増殖性皮膚病を治療する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業分野 本発明は、或種の６．♂−置換りＩフラノシルプリン−
３’、！；’　−１１式ホスフェートを用いて増殖性皮
膚病を治療する方法に関するものである。

背景技術 乾留（鱗癖）は多分最も多い増殖性皮膚病であるＯｒＪ
、Ｉｎｖ＊ｍｔ、Ｄ＠ｒｍ、Ｊ第７３巻第Ｖ０．２頁−
第４ｔ／３頁（／７７り年）に掲載された論文「リサー
チ、ニーズ、イン、／／、メージャ、エアリアズ、イン
、ダーマトロジー」には、米国の国民の≠俤までの数の
人々が乾留にかかっていると推定されると記載されてい
る。乾留は要因性発生病または遺伝性の病気であると信
じられる。遺伝学的に乾留にかかシ易い素質をもつ人々
は、この病気に自然にかかったり、または皮膚の損傷部
からこの病気になったシする。この病気の特徴は表皮が
無制御条件下に良性の生長を続けることである。

乾留にかかった表皮では、（１）増殖率が著しく高くな
り、かつ（２）末端分化度の低下が認められる。したが
って乾癖の病原学的研究や治療法の研究の多くは、表皮
の生長や分化を制御する因子の究明、およびこれらの因
子のうちの／またはそれ以上を薬理学的に変調（ｍｏｄ
ｕｌａｔｉｏｎ）させる方法の開発に重点が置かれてい
た。

乾留治療のために種々の治療法が現在用いられているが
、その例には次のものがあげられる：透析、光化学的療
法、システミック（ｓｙｓｔ＠ｍ１ｅ）化学療法、局所
的化学療法。最も広く用いられているものは多分局所的
化学療法であろう。乾留治療のために現在使用されてい
る薬剤のうちで主なものは、タール、レチノイド、アン
スラリンコルチコステロイド、代謝拮抗物質（アンチメ
タゲライト）である。環式アデノシンモノホスフェート
（ＣＡＭＰ　）は、細砲の生理学的性質の臨界的制御因
子の７つであり、そしてこれに関連して、表皮のＣＡＭ
Ｐ系の乱れ（ｄｅｒａｎｇ＠ｍ＠ｎｔ）が乾留と関係が
あると信じられている。したがって、ｃＡＭＰおよびそ
の多くの誘導体が乾留治療薬として有用であろうと考え
られていた。この点についてさらに詳しく述べれば、米
国特許第１１−００７．２１．１号および第≠、２０７
３／ｊ−号明細書には、乾留の如き増殖性皮膚病の治療
のために、或種の２−β−Ｄ−リゲフラノシルアデニン
−３’Ｊ’　−１１１式ホスフェ−トラ用することが開
示されている。この化合物は、本発明において使用され
る環式ヌクレオチドに化学的に類似のものである。この
類似化合物のうちの若干のものと、本発明に使用される
ヌクレオチドとの両者について比較試験を行ったところ
、このヌクレオチドは前記類似化合物に比較して予想外
に高度の乾留治療効果を奏するものであることが確認さ
れた。

米国特許第≠Ｏｊどぶｊり号明細書には、７群の乙、了
−置換−７−β−Ｄ−リゲフラノシルプリンー３′、タ
′−壌式ホスフエートが記載されており、本発明に使用
される環式ヌクレオチドのうちの若干のものも上記の範
囲内に入る。この７群の化合物は天然産のノリンヌクレ
オチドに類似のものであって、そしてこれは天然産化合
物のものよりもホスホジェステラーゼ耐性が一層大きい
といわれている。この米国特許明細書には、この７群の
化合物は特にホスホジェステラーゼ抑制作用、蛋白質キ
ナーゼ（ゾロナインキナーゼ）活性化作用およびアデニ
ルシクラーゼ抑制活性を有するものであると記載されて
いる。この点に関し一層ｉＷ８＃ｌに述べれば、最初の
２つの作用（活性）、すなわちホスホジェステラーゼ抑
制作用および蛋白質キナーゼ活性化作用は、一般に転置
治療のために有用な化合物の特性であると思われる。し
かしながら本出願人の研究によれば、上記の如き種類の
活性から局所的な抗乾留活性（乾癖抑制活性）の有無を
推論することは不可能である。なぜならば、上記の活性
を有する化合物がすべて、実用的な乾癖治療薬であると
は限らないからである。上記米国特許明細書に記載の第
３番目の活性、すなわちアデニルシクラーゼ抑制活性は
、装置治療薬が有する活性ではなくて、むしろ実際には
、増殖性皮膚病の進行促進作用を有する化合物に一層よ
くみられる活性である。

後で詳細に説明するように、本出願人の研究によれば、
局所的乾癖治療薬として本発明に用いられる或特定のＣ
ＡＭＰ　＠像化合物の薬効は、決してこの類似化合物の
化学構造から容易に予期できるものではないのである。

本発明の開示 本出願人は、或選ばれた７群のＣＡＭＰ類似化合物は、
それを局所用薬剤として施用したときに予期以上の乾留
治療効果を奏するものであることを見出し、そしてこの
発見に基いて本発明が完成されたのである。

したがって本発明は、 次　　式 〔ここに８６は次の基を表わし、すなわち、（り　−Ｎ
ＲＩＲＺを表わしくここにＲ１およびＲ２は、水素、／
−！；個の炭素原子を有するアルキル基およびシクロ−
ｅ／メチル基らなる群から選択された基をそれぞれ独立
的に表わし、あるいはＲ１とＲ２とは窒素原子と一緒に
なって、環員炭素原子を≠−ｊ個有する複素環式基を表
わし、ただし啄この−ＮＲｌＲ，基中の全炭素原子数は
≠−！個である）、または （ｉｉ）　−ＸＲを表わしくここにＸは原子番号♂また
は／乙のカルコゲン原子であり、Ｒは炭素原子≠−ｊ個
のアルキル基である）； Ｒ８は次の基を表わし、すなわち （＊）−ｘ　−＜ｃＨ２＞ｆｌＲ，を表わしくここにＸ
は既述の意味を有し、ｎは／−３の範囲内の整数であり
、Ｒ６は水素、炭素原子／−７個のアルキル基、または
置換基をθ−１個有するフェニル基であシ、ただしこの
置換基はニトロ基、原子番号ター３夕のハロダン原子、
メトキシ基、ヒドロキシ基またはメチル基であシ、また
は （！り　−ＮＲ４”５を表わしくここにＲ４およびＲ５
は、水素、炭素原子／−ｒ個のアルキル基、および炭素
原子７一タ個のフェナルキル基からなる群から選ばれた
基をそれぞれ独立的に表わし、ただしＲ４およびＲ５の
うちの１つだけが水素であシ得、そして−ＮＲ４Ｒ５基
中の全炭素原子数は／−タ個である）、ｚは水素、アル
カリ金属カチオンまたはアンモニウム基である〕 を有する化合物の治療学的有効量を患者の皮膚の患部に
局所的に適用することを特徴とする増殖性皮膚病の治療
方法に関するものである。

また本発明は、式（１）の化合物の少なくとも／様の治
療学的有効量を、薬学的に許容され得る局所的担体（１
ｏｐ１ｅａｌ　ｅａｒｒｌｓｒ　）との混合物の形で含
有することを特徴とする、増殖性皮膚病治療用の局所施
用製剤にも関する。

本発明の実施態様 ここに使用された用語「増殖性皮膚病」は、表皮細胞増
殖または不完全細胞分化によって特徴づけられる非悪性
状態の皮膚病を意味する。このような皮膚病は、人体へ
の光線照射または薬品との接触の如き外部からの刺戟が
誘因となって生ずることもあり、あるいは自然に生ずる
こともあシ得る。このような皮膚病の例には次のものが
あけられる：乾癖、弛緩性（ａｔｏｐｌｅ）皮膚炎、非
特異性皮膚炎、−次刺戟物接触皮膚炎、アレルギー性接
触皮膚炎、魚鱗症、エビデルモリチ、クハイパーケラト
チス、グレマリグナント性光線誘起ケラトチス、非悪性
ケラトチス、皮脂漏性皮膚炎。

さらに、人体でなく動物に特有なメインソ（犬、牛等の
、がいせん）の如き皮膚病もある。この治療法は、人お
よび他の動物たとえば家畜、ペット、競技用動物の皮膚
病の治療のために利用できるものである。

本発明に従えば、増殖性皮膚病は、式（１）の環式ヌク
レオチ１フ種またはそれ以上の治療学的有効量を患部に
局所的に施用することにより治療できる。このヌクレオ
チドは一般に慣用の局所施用製剤たとえば軟膏、クリー
ム、ゼリー、（−スト、ローシ曹ン、シャングーまた蝶
噴霧剤の形で皮膚の像部に適用できる。このような施用
製剤は、薬学的に許容され得る７種またはそれ以上の局
所用ベヒクルたとえばペトロラタム（ワセリン）、ポリ
エチレングリコール、ゼラチン、イソプロピルミリステ
ート、Ｉリビニルアルコール等と共に前記ヌクレオチド
を含有してなる製剤である。この製剤はまた添加剤も含
有でき、その例には緩和剤、安定剤、表面活性剤、皮膚
浸透性変改剤および顔料があげられる。このヌクレオチ
ドを局所に、制御された条件下に連続的に施用すること
が所望される場合には、たとえば当該ヌクレオチドが短
い生体内半減期を有するものである場合には、該ヌクレ
オチドを、制御された放出をなし得る製剤の中に配合で
きる。このような製剤は、皮膚上への薬剤の放出速度を
拡散、浸透、溶解、電気泳動または腐蝕等の現象を利用
して制御できるように作られたものである。式（１）の
ヌクレオチドは一般に一約３−タにおいて安定であるか
ら、これを含む製剤は上記の範囲内の−を有するもので
おるべきである。皮膚に対して実質的に無刺戟性のもの
にするために、製剤の−は大体中性であることが好ｔＬ
い。このヌクレオチドをベヒクルに溶かしてなる慣用の
施用製剤を使用する場合には、該製剤中のヌクレオチド
の最高濃度は該ベヒクル中における該ヌクレオチドの溶
解度に勿論左右されるであろう。この点についてさらに
述べれば、このヌクレオチドは一般に水に可溶であり、
したがって、水を基剤とせるベヒクルを製剤中で使用す
ることにより、ヌクレオチドの濃度を広い範囲内で種々
変えることができる。慣用の局所施用製剤中のヌクレオ
チドの濃度は一般に０．０００／−／重ｉｔ係、好まし
くはＱｏ　０　／　−０，／重量４（施用製剤重量基準
）。

患者への式（１）のヌクレオチドを施用するときの施用
量は、ヌクレオチドの種類に応じて種々変わるであろう
。これらのヌクレオチドのうちの少なくとも数種は、或
限られた施用量の範囲を越えた施用量で施用したときに
増殖性抑制活性を現わすものであることが動物試験によ
って判明した。その理由として、この施用量は、夏型蛋
白質キナーゼまたは■型置白質キナーゼの選択的活性化
に要する量に左右されるものであるということが考えら
れる。■型蛋白質中テーゼの選択的活性化に伴って表皮
増殖が減少し、一方、夏型蛋白質キナーゼの選択的活性
化は、どちらかといえば病状の悪化をもたらすものと思
われる。したがってこれを専門用語で述べれば、患者の
治療のときの前記の施用量は、■型置白質キナーゼを選
択的に顕著に活性化させるような施用量である。或特定
のヌクレオチド９の治療学的施用量は、後記実施例に記
賊の如く動物実験によシ決定できる。試験動物以外の動
物への施用量は、試験動物への施用量と大体同様な量で
あり得る。なぜならば、施用態様がシステミック的よシ
もむしろ局所的であるからであシ、そのために施用量は
動物の体重または血清の体積（ｓｅｒｕｍ　ｖｏｌｕｍ
ｅ　）に実質的に左右されないものであるからである。

動物実験の結果、このヌクレオチドの治療学的施用量は
一般に約ｏ、ｏｉ−／θｍｃｙ′ｃＮ１好ましくは約０
．　／　−／　ｍｅｙ’ｃｙｓ　　（治療すべき皮膚の
面積）である。制御された速度で長時間にわたってヌク
レオチドを皮膚面に放出し得るような製剤ではない慣用
製剤は、一般に７日当り約λ回患部に施用することがで
きる。一方、制御された速度で薬剤を放出し得る製剤は
、皮膚内のヌクレオチド濃度を治療学的濃度値に維持で
きるような放出速度でヌクレオチドを皮膚上に放出し得
るように構成されたものであることが好ましい。Ｂ型置
白質キナーゼを選択的に活性化するに必要であると思わ
れるヌクレオチド濃度を基準として考えれば、この濃度
は約ａＯθ、？　ｊ　−０，Ｊ　ｊｍｅｇ／ｌ：ｇ　　
（皮膚の面積）であると見積られる。

既述の如く、このヌクレオチドの！リン基の６位置の置
換基〔式（１）中のＲ６］は、アルキル置換アミノ基、
Ｎ−複素環式基、アルキルチオ基またはアル；キシ基で
あり得る。このアミノ基はモノ−またはジアルキル置換
アミノ基であシ得るが、このアミノ基中の全炭素原子数
は≠−ｊ個であるべきである。好ましくは該アルキル基
は直鎖状の基である（シクロ（ンチル基を除く）。この
ような基の例には次のものがあげられる：ｎｎ−グチル
アミノ、ｎ−−ｅｙメチルアミノ基イソグチルアミノ基
、イソ（メチルアミノ基、シクロペンチルアミノ基、メ
チルゾロピルアミノ基、メチルイソゾロピルアミノ基、
ジエチルアミノ基、エチルグロピルアき）基、エチルイ
ソゾロピルアミノ基６　Ｒ６が表わし得るＮ−複素環式
基は飽和基である。この基の例にはＮ−ピペリジル基お
よびＮ−ピロリジル基があげられる。Ｒ６で示されるア
ルキルチオ基またはアルコキシ基の中のアルキル基は分
校状または直鎖状の基でおってよい。これらのアルキル
基含有基の中のアルキル基は好ましくは直鎖状の基であ
る。このような基の例には次のものがあげられる：ｎ−
！チルチオ基、インブチルチオ基、ｎ−ペンチルチオ基
、イン（メチルチオ基、ｎ−メトキシ基、インブトキシ
基、ｎ−（メトキシ基、イソペントキシ基。Ｒ６は好ま
しくはｎ−グチルアミノ基である。

このヌクレオチドの！リン基の？位置の置換基〔式（２
）中の８８〕はアルキルチオ基、フェニルアルキルチオ
基、アルコキシ基、フェニルアルコキシ基、七ノーまた
はシアル中ルアミノ基またはフェナルキルアミノ基であ
る。これらの基の中のアルキル基は好ましくは直鎖状の
基である。このような基の例には次のものがあげられる
：メチルチオ基、エチルチオ基、ｎ−へキシルチオ基、
３−メチルへキシルチオ基、ｎ−デシルチオ基、メトキ
シ基、グロポキシ基、ｎ−へメトキシ基、ｎ−ツノキシ
基、ペンシルチオ基、ｐ−クロロベンジルチオ基、ｍ−
フルオロベンジルチオ基、ｐ−ニトロベンジルチオ基、
Ｏ−クロロベンジルチオ基、ｐ−メトキシベンジルチオ
基、ｐ−メチルペンシルチオ基、フェネチルチオ基、フ
エンゾロビルチオ基、ペンジキシ基、フェンプロポキシ
基、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ
基、ジエチルアミノ基、ｎ−プロピルアミノ基、ジ−ｎ
−ゾロピルアミノ基、ヘキシルアミノ基、オクチルアミ
ノ基、ベンジルアミノ基、フェネチルアミノ基、フェナ
ルキルアミノ基。Ｒ８は好ましくはベンジルチオ基であ
る。

式（１）中に示されているように、このヌクレオチドは
遊離塩基の形もしくはアルカリ金属塩またはアンモニウ
ム塩の形のものであり得る。

式（１）の環式ヌクレオチドは、米国特許第≠ｏｓｇｔ
ｒり号明細書記載の反応式に従って製造できる。このヌ
クレオチドの合成法の具体例社下記製造例中に記載され
ている。製造側中の「係」は、特に断わらない限９「重
量係」である。

例　　／ ♂−（ペンツルチオ）ｉ−（ｎ−グチルアミノ）−ター
（β−Ｄ−９？フラノシル）−グリンー壌式３’Ｊ’−
ホスフェート 製法Ａ Ｒ２０ｊ　Ｏ−およびｎ−グチルアミン１０ゴ中に２′
−〇−アセチルー♂−（ペンノルチオ）−２−クロロ−
５’−（β−Ｄ−リボフラノシル）−ｆ’）ン−環式３
’Ｊ’−ホスフェートのナトリウム塩（３，ｚｇ；ｓ、
ｘｓミリモル）を溶かしてなる溶液を室温において／晩
中攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をエーテルの存在
下にすりつぶす操作を２回行い、Ｒ２０に溶解し、／Ｎ
−ＨＣｌでｐＨ／に酸性化した。この粗製固体を濾過し
、ＥｔＯＨに溶解した。このＥｔＯＨＩＩＣｆ倍容量の
エーテルを添加し、沈澱した固体を集め、ＥｔＯＨ−Ｒ
２０（／　：　／　）混合液から再結晶させた。収量を
乙♂ｐ＜ｔｉ％）（２乙）、Ｕｖ：　λｍａｘ　Ｘ　ｐ
Ｈ／、２１１　ｎｍ　（ｇ、２２３００）、ｐＨ／／、
、２９／（ｔ／ｌ１００）：分析値：計算値（Ｃ２，Ｈ
２６Ｎ５０ＰＳ−Ｈ２Ｏトして）：ｃ、≠２タタ；Ｈ２
よ３２　：Ｎ　、　／３．３．２；Ｓ　、　１ｂ１０　
：計算値：Ｃ，１１−７，７７；ｆ（、ｊ、’＋ｆ　　
；Ｎ　、　／３．２’ｌ　　：Ｓ　、乙３０゜ 製法Ｂ 温度計、乾燥管および還流冷却器を備えた三ロフラスコ
（容量２１）に、アデノシン−環式３’、ｊ’−＊スｙ
エート（，２３０ｇ；０７０モル）および／Ｊ−ジアザ
ビシクロ−（１、≠、０〕−ウンデクーｊ−エンｃｉｉ
ｚｉ：ｏ、ｙｓモル）の懸濁液〔媒質はジメチルホルム
アミド（ＤＭＦ　）乙００−〕を、溶液が得られるまで
６０℃（内部温度）において攪拌した。λ、６−ルチジ
ン（３７，≠ｙ；２≠Ｏｄ）’ｉｉｉ下し、次いでクロ
チルブロマイド（１３３ｇ；１モル）を徐々に添加した
。反応混合物を６０℃においてさらに５時間攪拌した。

溶液から徐々に晶出した生成物を戸別し、少量（容量）
のＤＭＦおよびＭ・ＯＨで洗浄し、乾燥した。Ｎ　−ク
ロチル−ＣＡＭＰが得られた。収量／≠乙ｙＯＮ１−オ
クチル−ＣＡＭＰ　＜１ｐｏｙ　；　ｏ、３乙ｊモル）
を／　Ｎ−ＮａＯＨｆ　００　ｍｌに溶解し、７５℃に
２時間加熱した。反応混合物を冷却し、氷酢酸２≠ゴを
添加した。炭素上にｐｔ’６ｔｌ担持させてなる触媒４
Ａｏ　ｉを添加した後に、反応混合物をＨ２の存在下に
しんとうさせ、この操作を、Ｈ２がど７ポンド（理論値
り／ポンド）吸収されてしまうまで続けた（　Ｈ２：４
’０ｐｓｉ：ｊ時間）。触媒を戸別し、熱いＨ２Ｏ２０
０−で洗浄した。Ｆ液および洗液を集め（ｏｎｅ　／　
’）、Ｂｒ２（乙／ｇ；０．３♂モル）を２つの部分に
分けて３０分間隔で添加した。Ｎ畠０＾Ｓを≠Ｏｇ添加
し、溶液を室温において攪拌した。

弘時間後にＢｒ２　／　ＯＮｔを追加し、攪拌を３日間
続けた。

この溶液にＮ２を用いて・（−ソングを行い、ＮａＢＨ
４を、この溶液がＫＩ−澱粉試験において（−）になる
まで添加した。３０　％−ＮａＯＨで−を／、２ＫＪ１
節し、ペンジルメル力！タンｌ／−０Ｗ１ｔを添加した
。その結果得られた溶液を７０℃に７時間加熱し、濃塩
酸で一４♂に酸性化した。この酸性溶液を攪拌し、ゆっ
くり放冷した。粗生成物を戸別し、Ｈ２Ｏで洗浄し、次
いでＥｔＯＨで洗浄した。この粗製物をＣＨＣｌ、中に
入れ、トリエチルアミンの添加によ＃）ｃＨｃｌ、中に
溶解させた。このＣＨＣｌ、溶液を、乾燥シリカダル２
００９の入ったコラムに入れた。。このコラムをＣＨＣ
ｌ５で洗浄し、生成物を、ＣＨＣｌ、中にＦｉｔＯＨを
！１含む溶液を用いて溶離した。適当なコラムフラクシ
盲ンをゾールし、蒸発させた。得られたトリエチルアン
モニウム塩を暖かい、２　Ｎ−ＮＨ４ＯＨ／　００　ｒ
ａｔに溶解し、ＭｅＯＨｊ　００−を添加し、この溶液
を濃塩酸で声λに酸性化した。該溶液を冷却し、生じた
固体を戸別し、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＨで洗浄し、乾燥し
た。♂−（ベンジルチオ）−６−（ｎ−ジチルアミノ）
−５’−（β−〇−リＩフラノシル）−ゾリン−環式！
’、Ｊ−’−ホスフェートが得られた。収量／θ／ｇ。

これは、製法Ａにより製造されたものと同じものであっ
た。

例λ ｇ−（ベンジルチオ）−６−ピペリジノ−ター（β−Ｄ
−リゾフラノシル）−ゾリン−ｊＪｉ　式３’Ｊ’−ホ
スフェート ２′−〇−アセチルー了−（ベンジルチオ）−乙−クロ
ロ−ター（β−Ｄ−リざフラノシル）−クリンー壌式３
’Ｊ’−ホスフェートのナトリウム塩（／、３１１）を
水２０ｙｄおよびピにリノン１０−に溶解してなる溶液
を室温において／晩中攪拌した。

溶媒を蒸発させ、残留物にエーテルの存在下で、すりつ
ぶし操作を２回行った。最終残留物を水に溶解し、ダウ
エックス−！；０（Ｈ九１ｏｏ−ｘｏ。

メッシユ）の入った寸法２．！；　Ｘ／　（７ｃＩＩＭ
（７）：ｆｆ？ＡＫ入れた。このコラムは、前もってメ
タノール−水（／：／）混合液で洗浄してから使用した
。このコラムを水洗し、次いでメタノール−水（／：／
）混合液で洗浄し、最後にメタノール−水（ｊ：／）混
合液で洗浄したが、この操作は、すべての生成物が溶離
されるまで行った。生成物を含有するフラクシ目ンを集
め、混合し、乾状体になるまで蒸発させた。残留物を沸
騰エタノールに溶解し、５倍量（容量）の水を添加し、
溶液を、その体積がからざ−（ベンジルチオ）−６−ピ
ペリジノーター（β−Ｄ〜リゾフラノシル）−ノリンー
壌式３’Ｊ’−ホスフェートの白色結晶が７００η得ら
れた（収率ｊ９％）。分析値：計算値（ｃ２２Ｈ２６Ｎ
５ｏ、ｐｓとして）　：Ｃ、ｊｊ、０／　：Ｈ、よ／／
；Ｎ　、／３．ｊ２　　：　Ｓ　　、＆Ｏｊ。

例３ ♂−（ベンジルチオ）−６−ピロリジン−ター（β−Ｄ
−リゲフ２ノシル）−ゾリン−環式３’、ｊ’−ホスフ
ェ〜トの製造 ピロリジ：／３ｄを含むＨ２Ｏ，２０−中に２’　−０
−アセチル−♂−（ベンジルチオ）　−１，−／ロロー
ター（β−Ｄ−リＩフラノシル）−！リンー壌式３’Ｊ
’−ホスフェー）　（，１１）を溶かしてなる溶液を、
例λ記載の化合物の合成の場合と同様に処理した。コラ
ムから得られた残留物に水を加え、その結果生じた結晶
を戸別し、乾燥した。♂−（ベンジルチオ）−Ａ−（ピ
ロリジノ）−ター（β−Ｄ−リゲフラノシル）−グリン
ー壌式３’、ｊ’−ホスフェートが７≠７〜（収率ｊ／
％）得られた。分析値二計算値（Ｃ２，Ｈ２４Ｎ５０６
ＰＳ・／、ｊ　Ｈ２Ｏとして）：Ｃ，’１７．３乙：ｆ
（、！；、／／　；Ｎ　、　／３．／！ｉ’　；測定値
：Ｃ２≠７．Ｏｊ’、Ｈ，！；、２乙；Ｎ、／、２Ｊ≠
。

例≠づ 例／−３に記載の操作と同様な操作を行うことにより、
式（１）を有する下記の各ヌクレオチドを製造し、単離
し、精製した。

（４）・・・（４−（ｎ−ｆチルアミノ）−ｇ−（メチ
ルチオ）−ター（β−Ｄ−りがフラノシル）−グリンー
環式３　’、ｔ’−ホスフェート：Ｕｖλｍ１ｘＰ１″
１／、２１２ｎｍ　（＃　／り乙００　）　：ｐＨ／　
／。

２？Ｏｎｍ（ｚ／７ざ００）：元素分析値二計算値（Ｃ
１５”２□Ｎ５０６Ｐ　Ｓとして）：Ｃ２≠／、７３；
Ｈｌふｉｓ’、Ｎ、ｉ乙２４ｔ；測定値：Ｃ１弘／、３
７：Ｈ，ふ２３；Ｎ、／ふ了／。

（５）・・・６−（ジエチルアミノ）−、ｒ−（ジエチ
ルアミノ）−ター（β−Ｄ−リゲフラノシル）−ゾリン
−環式３’Ｊ’−ホスフェート：ＵＶλｍａｘ　ｐＨ／
　、　２♂りｎｍ　（ｔ　／　Ｉり０θ）：ｐＨ／　／
　、２１Ａ　ｎｍ　（ａ２００００　）；元素分析値：
計算値（Ｃｌ８Ｈ２９Ｎ６ｏ６Ｐとしテ）二〇、弘７．
３４１’、Ｈ，乙≠コ；Ｎ、／１４ｔ、２：ｉｍｙ値：
Ｃ，４４７，Ｏり；ｆ（，４ｊｏ；Ｎ、／１３３゜ （６）・・・サー（ベンジルチオ）−１，−（ｎ−ペン
チルアミノ）−Ｐ−（β−Ｄ−９？フラノシル）−ノリ
ンー壌式３　’、Ｊ−’−ホスフェート；ＵＶλｎａｇ
　Ｐ）ｉ／　、　、２♂♂ｎｍ（ｇ、２／り□ｏ）；Ｐ
Ｊ（／／、、！り／　ｎｒｎ　（ｔ　／　７りｏｏ）：
元素分析値二計算値（ｃ２２Ｈ２８Ｎ５ｏＰｓトシテ）
：Ｃ，ＳＯ，夕３’、Ｈ，！；、’１．２’、Ｎ、／３
．≠ｐ−測定値：ｃ、ｓｏ、とり：Ｈ９ふ／７：Ｎ、１
３．ｊｊ （７）・・弓−（ｎ−ｆチルメチルアミノ）４−（ベン
ジルチオ）−５’−（β−Ｄ−リボフラノシル）−ノリ
ンー環式、３’、ｊ’−ホスフェート：ＵＶλｍａｘｐ
）１／、、２♂♂ａｍ（＃、２／’ｊθｏ）：ＰＨ／／
２．２りＯｎｍ　（ｔ　／　ｊｒ　７００　）　；　元
１分析値二計算値（Ｃ２□Ｎ２８Ｎ５０Ｐ８　（！：　
Ｌ、テ）　：Ｃ，ｊＯ，！；３：Ｈ，左ＩＡ２”、Ｎ、
／３．≠≠　；測定値：ｃ、ｓｉ、０２；ＨｌふＩ、／
：Ｎ、／３．ｌＩ３゜ 例／および例３−７のヌクレオチド、種々の同族体、お
よびそれに類似の公知ヌクレオチド（抗乾癖活性を有す
ることが知られているヌクレオチド）の抗乾癖活性を、
「ノリティッシュ、ジャーナル、オグ、ダーマ′トロジ
ー」、第し？≠巻、１１第７百−第乙頁（／り７ｚ年）
に記載の試験方法に従って動物を用いて試験した。この
試験方法について簡単に説明する。この試験は無毛マウ
ス（ｈａｌｒＪ＊ｓｓ　ｍｏｕｓ・）を用いて行う。活
性測定の基本は、表皮中でのＤＮＡ合成反応の抑制率１
４べることである（この抑制率は、増殖抑制の度合を示
す尺度と考えられる）。このＤＮＡ合成反応の抑制率は
、表皮細胞のＤＮＡ中へのトリチェート化チミジンの混
入率の低下により知ることができる。この試験ではマウ
スの背中７ｃｓｍに或特定のＩＩｉ！量の紫外線を照射
する（ＵＶ照射）。このＵＶ照射が原因となって、照射
後ｌＩ−ｇ時間にわたって、表皮が過増殖性（ｈｙｐｓ
ｒｐｒｏｌｉｆ＊ｒａｔｉｏｎ　）のものになることが
判った（この過増殖性はＤＮＡ合成量の増加によシ知る
ことができる）。ＵＶ照射を行ってから／。

ｉｇ、、：ｚｔｉおよび≠７時間後に所定量の試験用ヌ
クレオチドを、光線照射を行った皮膚に施用した。

そして、≠７時間後にはマウスにトリチェート化チミジ
ンを注射し、４ｔｔｉ間後に死亡させた。前記、の処置
を施した表皮を死体から除去し、ライズした（　ｌｙｓ
＠ｄ　）。表皮線抱のライゼートから、ヒドロキシルア
・臂タイトを用いてＤＮＡを抽出した。

ＤＮＡ　中へのトリチェート化チミジンの混入率を、ラ
ジェータ１ンーシンチレーシ１７−カウンターを用いて
測定した。比較のために、ヌクレオチドのみで処理した
対照動物、ベヒクル（水−ポリビニルアルコール混合物
）のみで処理した対照動物、ＵＶ照射を行いそしてヌク
レオチドを含まないベヒクルのみで処理した対照動物も
、ＵＶ照射およびヌクレオチド処理を行った試験動物と
一緒に調べた。ヌクレオチドは水−ポリビニルアルコー
ル含有製剤の形で施用した（ヌクレオチド含有量０、０
００００　／　−０，／重量幅）。

例／記載のヌクレオチドを前記の試験方法に従って、施
用量を種々変えて試験した。添附図面のグラフは、この
結果を表示したものである。このグラフの底部の斜線の
入った部分は、ベヒクルのみで処理した対照動物の試験
結果を示すものであシ：該グラフの最上部の斜線の入っ
た部分は、ＵＶ照射とベヒクル処理を行った対照動物の
実験結果を示すものであり；黒丸は、ＵＶ照射およびヌ
クレオチド処理を行った試験動物の試験結果を示すもの
であり、黒い三角はヌクレオチド処理のみを行った対照
動物の試験結果を示すものである。

この試験結果から明らかなように、ヌクレオチドの全施
用量が約０．　／　−／夕ｍｅｇであるときに（面積を
標準化したときには約ａθ／　−／、　！；　ｍｅｉｙ
ｔ　）効果が認められ、最高の効果は全施用量が約２−
ｊ　ｍａｙ　（Ｉｆｉ積を標準化したときには約０．　
／　ｊ　−０、２ｊ　ｒｎｅｉｔｓ　）であるときに認
められた。このグラフの図面中の曲線部の試験結果は、
ヌクレオチドの全施用量が約２−　Ｊ　ｍｌ！ｙを越え
る量であるために、この多量のヌクレオチドにより夏型
蛋白質キナーゼが刺戟されたために生じたものであると
思われる。このグラフに示された試験結果は、各施用量
毎の試験を、少なくとも７５匹の動物を用いて行ったと
きに得られた結果を示すものである。

実際の効果からみた場合、増殖抑制剤は、治療を受けた
多くの人々（ｔたは動物）において、それらの人々の全
部ではないにせよ、そのうちの大多数の人々に治療効果
を奏するものであることが好ましい。この目的のために
、試験動物（各施用量毎に少なくとも５匹の動物）の１
００％に治療効果を確実に与えるという面からみた化合
物の抗乾癖性効果を、次の試験方法に従って、各施用量
毎に調べた。

各群の動物（ＵＶ照射せず（ベヒクル施用）：ＵＶ照射
（ベヒクル施用）；ＵＶ照射（薬剤施用）の各群の動物
〕についてのＤＮＡ合成率（合成速度）を最初に「平均
値上標準誤差」として表わした。

すなわち、ＤＮＡ合成抑制率を、（１）ｒＵＶ照射、ベ
ヒクル施用対照群」および（２）　ｒ　Ｕ　Ｖ施用、薬
剤施用群」から、「Ｕｖ無照射、ベヒクル処理対照制を
差引くことにより算出した。（１）の正味値と（２）の
正味値との差を、（１）の正味値を基準とした６分率（
チ）として表示した。各抑制率の値（憾）に伴う誤差は
、（１）または（２）（グロス値）に伴う標準誤差の大
きい方の値をとり、これを百分率値（係）に換算した。

例／および例３−７の化合物ならびに式（１）の範囲内
に入らない類似化合物（対照化合物）の試験結果および
その標準誤差を次表に示す〔測定値より大きい標準誤差
がある場合には（すなわち治療率は〈１００係）、ゼロ
として表に記載した〕。

ｒ　Ｒ６Ｊおよび「Ｒ８」の欄は、このヌクレオチドの
６位置および♂位置の置換基をそれぞれ示す欄でおる。

ここに記載の化合物は、すべて遊離塩基の形で試験され
たものである。

上表のｒ−ターは、乙、♂−置換りデフラノシルノリン
−３’、ｊ’　−３７式ホスフェートの局所的な抗乾癖
活性に関するいくつかの因子（ファクター）を示してい
る。先ず第１に、表中の類似化合物のうちの第２査目の
化合物（Ｒｂ　＝＝　ｎ−！チルアミノ基：Ｒ８＝Ｈ）
は、プリン基のｔ位置の置換基が必須であることを示し
ている。このことは、他の若干の♂−非置換の類似化合
物の試験結果により確認された。すなわちこれらの類似
化合物は全部、抗乾癖活性がゼロであった。第２に、表
中の類似化合物のうちの第１査目の化合物（Ｒ６＝　Ｎ
ｌ２；Ｒ８＝ベンジルチオ基）は、ゾリン基の乙位置に
結合した窒素は置換基を有するものでなければならない
ことを示している。試験された類似化合物のうちの残り
の化合物は、乙位置の置換基の炭素原子数は４個または
５個でなければならないことを示している。また、第１
番目の類似化合物は、米国特許第ダ００７．２乙に号お
よび第≠２０７３／ｊ号明細書に記載の化合物群の範囲
内に入るものであるが、前記の表中のビータ−は、式（
１）の化合物は前記の類似化合物よシも局所的な抗乾癖
活性がはるかにすぐれていることを示している。

本明細書中の種々の記載から化学、生物化学、薬学およ
び／または医学分野の専門家には明らかなように、本発
明は抛々の態様で実施できるものであるが、これらの態
様は全部本発明の範囲内に入るものでめる。

【図面の簡単な説明】

添附図面は、式（１）のヌクレオチドの７種の抗乾癖活
性の試験結果を示すグラフであって、このグラフの横軸
は全施用賞（μｇ）を示し、縦軸の左側の数字は、表皮
のＤＮＡ中への〔メナルー　Ｈ）−チミジンの混入量（
ｃｐｍ／／θμｇ　（ＤＮＡ）　）を示し、右側の数字
はＤＮＡ合成抑制率（％）を示す。 代理人の氏名　　川原１）−穂

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）次式 〔ここにＲ６は次の基を表わし、すなわち、（Ｈ）　−
   ＮＲ，Ｒ２を表わしくここにＲ１およびＲ２は、水素、
   ／−Ｊ−個の炭素原子を有するアルキル基およびシクロ
   （メチル基からなる群から選択された基をそれぞれ独立
   的に表わし、あるいはＲ１とＲ２とは窒累原子と一緒に
   なって、環員炭素原子を≠ｉ個有する複素環式基を表わ
   し、ただしこの−ＮＲ１Ｒ２基中の全炭素原子数は弘−
   ｊ個である）、または （ｉｌ）　−ＸＲを表わしくここにＸは原子番号どまた
   はｌ乙のカルコダン原子であり、Ｒは炭素原子≠−ｊ個
   のアルキル基である）： Ｒ８は次の基を表わし、すなわち （ｉ）　−Ｘ　−（ＣＨ２）ｎＲ，を表わしくここにＸ
   は既述の意味を有し、ｎは／−３の範囲内の整数であり
   、Ｒ３は水素、炭素原子／−７個のアルキル基、または
   置換基を０−／個有するフェニル基であり、ただしこの
   置換基はニトロ基、原子番号ター３５のハロダン原子、
   メトキシ基、ヒドロキシル基またはメチル基である）、
   また唸 （！ｉ）　−ＮＲ４Ｒ５を表わしくここに８４およびＲ
   ５は、水素、炭素原子／−ｇ個のアルキル基、および炭
   素原子７一タ個のフェナルキル基からなる群から選ばれ
   た基をそれぞれ独立的に表わし、ただしＲ４およびＲ５
   のうちの１つだけが水素であり得、そして−ＮＲ４Ｒ５
   基中の全炭素原子数は／−７個である）、２は水素、ア
   ルカリ金属カチオンまたはアンモニウム基である〕 を有する化合物の治療学的有効量を患者の皮膚の患部に
   局所的に適用することを特徴とする増殖性皮膚病の治療
   方法。
2. （２）　　Ｒ６がｎ−ｆチルアミノ基、ｎ−ペンチルア
   ミノ基、ｎ−グチルメチルアミノ基またはピロリジル基
   であり、Ｒ８がベンジルチオ基であり、２が水素である
   特許請求の範囲第１項記載の方法。
3. （３）　　Ｒ６がｎ−ｆチルアミノ基であｊｏ、Ｒ，が
   メチルチオ基であり、２が水素である特許請求の範囲第
   １項記載の方法。
4. （４）　　Ｒ６がジエチルアミノ基であシ、Ｒ８がジエ
   チルアミノ基であシ、２が水素である特許請求の範囲第
   １項記載の方法。
5. （５）　　Ｒ６がｎ−！チルアミノ基であり、Ｒ８がベ
   ンジルチオ基であり、２が水素である特許請求の範囲第
   １項記載の方法。
6. （６）　　病気が乾僻（鱗ＩＩ）である特許請求の範囲
   第１項、第２項、第３項、第≠項または第５項に記載の
   方法。
7. （７）施用量が■型蛋白質キナーゼを選択的に著しく活
   性化させるのに充分な量であることを特徴とする特許請
   求の範囲第１項、第２項、第３項。 第≠項または第５項に記載の方法。
8. （８）施用量が約０．０　／　−／　Ｏｍａｇ／ＩＩ＆
   （治療すべき皮膚の面積）であることを特徴とする特許
   請求の範囲第１項、第２項、第３項、第≠項または第５
   項に記載の方法。
9. （９）施用量が０．　／　−／　ｍｅｆｃｎｓ　　（治
   療すべき皮膚の面積）であることを特徴とする特許請求
   の範囲第ｊ項記載の方法。 叫　表皮内での化合物の濃度を治療学的に有効な濃度値
   に維持できるような放出速度で化合物を皮膚上に放出し
   得るような制御された放出の可能な投与剤の形で化合物
   を患部に施用することを特徴とする特許請求の範囲第１
   項記載の方法。 ０υ　次式 ％式％ 〔ここに８６は次の基を表わし、すなわち、（Ｉ）　−
   ＮＲ１Ｒ２を表わしくここにＲ１およびＲ２は、水素、
   ／−５個の炭素原子を有するアルキル基およびシクロペ
   ンチル基からなる群から選択された基をそれぞれ独立的
   に表わし、あるいはＲ１とＲ２とは窒素原子と一緒にな
   って、環員炭素原子をμｍｊ個有する複素環式基を表わ
   し、ただしこの−ＮＲ１Ｒ２基中の全炭素原子数は≠−
   ｊ個である）、または （１０−ＸＲを表わしくここにＸは原子番号ｒまたは／
   ６のカルコダン原子であシ、Ｒは炭素原子≠−ｊ個のア
   ルキル基である）： Ｒ８は次の基を表わし、すなわち （Ｄ　−ｘ　−（ＣＨ２）ｎＲ５を表わしくここにＸは
   既述の筆法を有し、ｎは／−３の範囲内の整数であり、
   Ｒ５は水素、炭素原子／−７（Ｉｌのアルキル基、また
   は置換基をＯ−／個有するフェニル基であり、ただしこ
   の置換基はニトロ基、原子番号シー３５のハロダン原子
   、メトキシ基、ヒドロキシル基またはメチル基であり、
   または （巾−ＮＲ４Ｒ５を表わしくここにＲ４およびＲ５は、
   水素、炭素原子ｉ−を個のアルキル基、および炭素原子
   ７−２個のフェナルキル基からなる群から選ばれた基を
   それぞれ独立的に表わし、ただしＲ４およびＲ５のうち
   の７つだけが水素であり得、そして−ＮＲ４Ｒ５基中の
   全炭素原子数は／−タ個である）、ｚは水素、アルカリ
   金属カチオンまたはアンモニウム基である〕 の少なくとも７種の化合物の治療学的有効蓋を、薬学的
   に許容され得る局所用担体との混合物の形で含有するこ
   とを特徴とする、増殖性皮膚病の患者を治療するための
   局所施用製剤。 ジル基であり、Ｒ８がベンジルチオ基であり、ｚが水素
   である特許請求の範囲第１／項記載の施用製剤。 ０３Ｒ６がｎ−ブチルアミノ基であｆｉ、Ｒ８がメチル
   チオ基であシ、２が水素である特許請求の範囲第１／項
   記載の施用製剤。 ０４Ｒ６がジエチルアミノ基であり、Ｒ８がジエチルア
   ミノ基であり、２が水素である特許請求の範囲第１／項
   記載の施用製剤。 （１５Ｒ６がｎ−ブチルアミノ基であり、Ｒ８がベンジ
   ルチオ基であり、２が水素である特許請求の範囲第１／
   項記載の施用製剤。