JPS584796A - 抗腫瘍性物質デオキシペンタレニルグルクロンおよびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本梶明は新規な抗Ｍ傷性物質デオギシベンタレニルグル
クロンおよびその製造法に関する。

本発明者らは埼玉県用越市の土壌から分離した放醒菌Ｎ
α１３０６１珠が新抗腫瘍性物質デオキシペンタレニル
グルクロンを生産することを見い出した。

デオキシペンタレニルグルクロンは、式を有し、優れた
抗腫瘍性を示す。

デオキシペンタレニルグルクロンを生産する放線菌Ｎ［
１１３０６１株の形態学的特徴および生理学的性質は以
下に示す通りである。

１、形態学的特徴 本菌株ＮＩＬ　１３０６１株の同定はｌ５Ｐ（インター
ナショナルΦストレプトミセス・プロジェクト（Ｉｎｔ
ｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　Ｐ
ｒｏｊｅｃｔ　）　）基準、応用微生物工業審査基準、
バージニー・マニアル（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａ
ｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａａｔｅｒ
ｉｏ−１ｏｇｙ）第ｓｉ、ニスエイ・ワックスママ（Ｓ
、Ａ。

Ｗａｋｓｍａｎ　）著［ザ・アクチノミセーテス（Ｔｈ
ｅＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔ＊ａ　）　］　オよひ放勝−
１に関する。Ｍ近の文献によって行った。

本菌株の特徴は次の通りであった。

本菌株の胞子柄は直状ないし曲状を呈し、１゜ないし５
０ある囚はそれ以上の胞子の連鎖が観察された。胞子の
表面は平滑であり、各種培地上で気菌糸は明るい茶白色
ないし灰色を呈し、単純分枝であった。メラニン様色素
および可溶性色素の産生は認められなかった。また、細
胞壁型は主成分として、ＬＬ−ジアミノピメリン酸およ
びグリシンを含む１型であった。

これらの諸性質から本菌株はストレプトミセス・オオミ
ャエンシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　０ｍ１ｙａｅ
ｎｓｉｓ）（３） に近縁の性質を有していることが判明した。そこで、ス
トレプトミセス・オオミャエンシスＮＲＲＬ　Ｂ−１５
８７株と比較観察した結果を次に示す。

１）平板培地上で２８℃、１４日間培養後の各種培地上
での性状は第１表に示した通りである。

（４） （７） ２．生理学的性質 漱１３０６１株およびＮＲＲＬ　Ｂ−１５８７株の生理
学的性質は第２表に示した通シである。

第　２　表 ゼラチンの液化能（２４℃）　　陽性　　　　陽性スタ
ーチの水屏能（２８℃）　　　　ｌ′Ｍ性　　　　陽性
ミルクの凝固能（２６℃）　　　　陰性　　　　陰性〃
（３７℃）　　　　陰性　　　　陰性〃 （３７℃）　　　　　　　　　　陽性　　　　１易性〃 ２　　　　　　　　　　　　　　　　　〃　　　　　　
　　　〃〃 ３” 〃　　　　　　　　　　　　〃 １”ニドリフ゛トン・イーストエキスフ゛ロス（ＩＳＰ
〜１） （８） ｔ；ペプトン魯イーストエキス拳ＩＣＩＩＥ天（ＩＳＰ
−６） ♂：チロシン寒天（ＩＳＰ−７） まだ、プ１１トノ・ム・ゴド１１−ブ寒天（ＩＳＰ−９
）培地を使用１．て、２８℃、１４日間培養後に１−察
した陽１３０６１株およびＮＲＲＬ　Ｂ−１５８７株の
炭素源の資化性は第３表に示しだ通りである。

Ｄ−グルコース　　　　　」（せ Ｌ−アラビノース　　　　士　　　　　±Ｄ−キシロー
ス　　　　　＋　　　　　丑り−フルクトース　　　　
−− Ｌ−ラムノース　　　　　士　　　　　＋ｉミーイノシ
トール　　　−− シュクロース　　　　　　−　　　　　−ラフイノース
　　　　　　−　　　　　−〇−マンニトール　　　　
− 什；良く資化する　　＋：賢化する ±：弱く変化する　　−：資化（２カい以上の記載をま
とめると、Ｎ［１１３０６１株と標化性において高い伸
似性を示したので、Ｎｌ１１３０６１、株はストレプト
ミセス・オオミャエンシス（Ｓｔ−ｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ　０ｒｎｉｙａｅｎａｉｓ　Ｕｍｅｚａｗａ　ｅｔ　
Ｏｋａｍｉ　）　Ｎα１３０６１　（＝ＳＡＮＫ　６０
５８１　）と同定した。

本菌株は通産省工業技術院微生物工業技術研究所に寄託
されており、その微生物受託番号は微工研艷寄第６０４
４号である。

以上、デオキシペンタレニルグルクロンの生産菌につい
て説明しだが、放線菌の諸性質は一定したものではなく
、自然的、人工的に容易に変化する仁とは周知の通りで
あり、本発明で使用し得る画情・はストレプトミセス属
に属する、デオキシペンタレニルグルクロンを生産する
菌株すべてを包含するものである。

本発明の方法における培養は一般放線菌における培養方
法に準じて行われ、液体培地で振盪培養、あるいは通気
攪拌培養によるのが好ましい。培地成分としては放線菌
の栄養源とり、て公知のものが使用され、たとえば炭素
源としてブドウ■古、アラビノース、ガラクトース、マ
ンノース、シュクロース、マルトース、テキストリン、
澱粉、グリセリンなど、又は大豆油、トウモロコシ油、
綿実油などの植物性油脂、チキンオイル、ラード、魚油
などの動物性油脂も用いられる。窒素源としては、大豆
粉、箔化生粉、綿実粉、魚粉、コーン・スチーブ・リッ
カー、オートミール、スキムミルク、ペプトン、肉エキ
ス、生イースト、イーストエキス、カザミノ酸、硝酸ソ
ーダ、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウムなどが、又
無機塩としては、食塩、塩化カリ、燐酸塩、炭酸マグネ
シウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウムが使用される
。更に必要に応じて硫酸第一鉄、硫酸銅、硫酸マグネシ
ウム、硫酸亜鉛、塩化コバルトなどの微量金属塩が添加
される。液体培養に際してはシリコン油、植物油、界面
活性剤などが消泡斉Ｉ］として適宜使用される。培地の
ｐＨは中性附近、培養温度は２０〜３５℃、特に２８℃
前後か好ましい。

油気攪拌培養では、２乃至４日培養でチオキシペンタレ
ニルグルクロンの生産馳は最高に達する。

デオキシペンタレニルグルクロンはＭＷ液液中主として
液体部分に存在する。培養終了後、自体その他の固形部
分をけいそう土を沖過助剤とするＹ濾過操作、あるいけ
遠心分離によって液体部分と分離する。そのＰ液あるい
は上澄中に存在するチオキシペンタレニルグルクロンは
その理化学的性質を利用することにより抽出、精製する
ことが出来る。

例工ば、デオキシペンタレニルグルクロンの溶媒抽出性
を利用して、最初に培養Ｆ液に戻粉を加えて吸着させた
後、５０係アセトン水溶液を用いて溶出する。溶出液よ
りアセトンを留去し、得られた濃縮液を塩酸、硫酸また
は燐酸等を用いてｐＨ２，０にＩＡ＋整する。酢酸エチ
ルで抽出し、抽出液を再び炭酸す）　＋１ウム水溶液で
抽出する。

水溶液を酸で再びｐＨ２，０に調整鐘、次いで酢酸エチ
ルで抽出することによって得られる。

更にこのデオキシペンタレニルグルクロンを精製する方
法としては、このような埋イヒ学的性質を有する物質を
精製するのに用いられるすべての方法が適用されるが、
吸着剤を用いる方法、向流分配を行う方法あるいは再結
晶法が好ましい。吸ｆ剤としては、アルミナ、シリカゲ
ル、セファデックス、セルロースなどが使われる。

特にシリカゲルを担体とするカラムクロマトグラフィー
が好適であシ、溶媒としては、ベンゼン、酢酸エチル、
クロロホルムなどを適当な割合で混合して用いられる。

又、更に純度の高いデオキシペンタレニルグルクロンを
ｍるためにはシ１）カゲルまたは各種逆相カラムクロマ
トグラフィー用担体を利用した高速液体クロマトグラフ
ィーあるいは再結晶法が効果的である。

このようにして得られたデオキシペンタレニルグルクロ
ンは次の特性を有する。

１）物質の色と形状：無色針状結晶 ２）融点：１８６〜１８７℃ ３）元素分析値：Ｃ２□Ｈ３ｏ０８として計算イｉａ：
　　：　　Ｃ、６１，４５９ｇ　　　Ｈ，７，３５９ｂ
実副値：Ｃ，６０６４係　Ｈ，７，１５％４）　　分子
ｕ　：　４１０　［モノメチルエステル体（Ｃ２□Ｈ３
２０，）の高分解能質量スペクトルでｒｒ／ｅ４２４．
２０４１が得られた〕５）＃、外線吸収スペクトル　ν
ＫＢｒ　ｃｒ、７１　。

３４５０、１７８０．１７２０．１６２５．１４６０゜
１３６０、１２６５．１２４０．１０７０このようにし
７て得られたデオキシペンタレニルグルクロンは優り、
た抗ｒｐｒｒ瘍活性を示す。

以下に、その試験方法および試験結果を述べる。

試験方法 マウス各５匹づつを用いて、これにザルコ−マ（Ｓａｒ
ｃｏｍａ　）　１８０を５×１０細胞／マウス腹腔内投
与した。次いでデオキシペンタレニルグルクロンのｉｔ
だは０．２　ｍｇ　／　Ｉ（９／　ｄａｙをアカシア）
静濁液としてｊ復）路内に毎日１回７日間投４した。

マウスの生存日数は次の通りであつノζ。

以上の結果から、無投与の場合’ｔ　１００としたとき
に、１　”Ｑ　／　Ｋｒ　／　ｄａｙ投与では１８４以
上、０．２１衿ｇ／　ｈ　／　ｄａｙ投与では１３９の
延命効果（係）を示した。

以上の如く、本発明の化合物は優れた抗Ｉｍｍ作用を有
し、種々の）厘賜の治療に有効な化合物である。

本化合物の投与形態として（ｄ１紅口投与、非経口投与
のいずれでもよい。経口投与の場合には錠剤、カプセル
剤等があげられ、非経口投与の場合には注射剤があけら
れる。

本化合物の投与針は症状、年令、体重等によって異なる
が、通常は成人に対し１日約１０〃り〜１０００〜を３
〜４回に分けて投与するのが好ましい。なお、必要に応
じてそれ以上の寒を１吏用することもできる。

次ニテオキシベンタレニルグルクロンの製造法を実施例
を挙げて説明するが、本発明はこの方法によって製造さ
れたデオキシペンタレニルグルクロンに限定されるもの
ではない。

実施例１ 麦芽エキス・イースト寒天培順に斜面培養したストレプ
トミセス・オオミャエンシスＳ　Ａ　Ｎ　Ｋ６０５８０
の一白金耳をグルコース５％、イーイトエキス０．１％
、大豆粉１．ＯＬＩＩ、ボ１１ペプトン０．４係、肉エ
キス（極東（株）１品）０．４％、食塩０．２５％およ
び炭１波カルシウム０５％（殺菌前ｐＨ７，０）からな
る組成培地（１２０℃、５０分滅菌）８０ｄを含む三角
フラスコに接種し、次いで２８℃で３日間回転振盪培養
（２１Ｏｒ、ｐ、ｍ、）を行なって種培養液とした。こ
の独培養液８０−を柚培養と同一組成の培地１５ｔを含
む３０１容ジャーファーメンタ−に接種し、温度２８＋
１℃、通気＃　１５　ｔ／ｒｎｉｎ　。

内圧１．０　Ｋ９／ｃｔＡ　、攪拌回転１４０　ｒ、ｐ
、ｍ、の培養条件で６７時間培養を行なった。このジャ
ーファーメンタ−２基分の培養液３０１をセライ）５４
５（米国ジョンズマンビルプロダクトコーポレーション
製）５係を濾過助剤として用いて濾過し、Ｐ液２４ｔを
得た。クロマト用戻粉２９０　ｒを使用し九カラムにこ
のろ液を吸着させ水洗後、５０％アセトンを用いて溶出
した。溶出液よりアセトンを留去し、濃縮液４ｔを得た
。得られだ嬢に４液を塩酸を用いてｐＨ２，０に調整後
、酢酸エチル３ｔで３回抽出した。次いで酢酸エチル層
を１０％炭ｔＷす）　ＩＩウム水溶液で抽出し酸性物質
を水層に集めた。次いでこの水層を塩酸を用いてｐＨ２
０に調整後、酢酸エチル３ｔで再び抽出し酸性物質を集
めた。酢酸エチル層全無水硫酸ナト１１ウムで脱水後、
濃縮すると油状物が得られた。

１衿ら九た油状物をシリカゲル（７１ｊンクロシド社吸
）ｓｏｒｅ用−てカラムクロマトグラフィー［：６Ｈ１
［＋１；ベンゼン−１昨緻エチル（９：１）ｉ溶剤〕で
溶出した。活性部分を含む溶出液から溶剤を留去すると
油状物が得られた。得られた油状物を更にセファデック
スＬＭ−２０（ファルマシア社Ｗ　）１００　？を用い
てカラムクロマトグラフィー［溶出剤：クロロホルムー
酢酸エチル（１：ｔ＞系溶剤〕で溶出した。油性部分を
含む溶出液より溶剤を留去し、イイられた残留物を酢１
翼エチルを用いて再結晶すると無色針状晶のチオキシペ
ンタレニルグルクロン れだ。

喘許出願人　三−１１−株式会社 代理人井埋士　樫出庄治 第１頁の続き ０発　明　者　瀬戸油力 八王子市上野町１００ 特開昭５８−４７９６＋（８）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 を有するデオキシペンタレニルグルクロン。 ２、　ストレプトミセス属に属するデオキシペンタレニ
   ルグルクロン生産菌を培養して、その培養物より前記式
   （１）を有するデオキシペンタレニルグルクロンを単離
   することを％徴とするデオキシペンタレニルグルクロン
   の製造法。 ３　チオキシペンタレニルグルクロン生産菌がストレプ
   トミセス・オオミャエンシスＳ　ＡＮＫ６０５８１　　
   （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　　ｏｒｎｉｙａｅｎｓｉ
   ｓ　　５ＡＮＫ６０５８１　、倣工研菌寄第６０４４号
   ）である特許請求の範囲第２項記載の製造法。