JPS58500480A - 治療上活性な化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 治療上活性な化合物およびそ れを含有する薬学的組成物 る治療上活性な有機化合物に関する一本発明はまたａ、非ボリズプチド構造を有 する治療上活性な有機化合物を変更する方法、 ｂ、　ヒトを含めて哺乳動物の疾患を治療する方法、および Ｃ０構造−８’−８’−Ｒを含む基を少なくとも１個有する治療上活性な化合物 を含む薬学的組成物 に関する。

両方とも細胞成長阻害剤である６−メルカプトプリンおよび２−アミノ−６−メ ルカプトプリンの誘導体は米国特許第３．４０１１１２５号明細書に開示されて いる。この文献にはメルカプト基が一８′−ｓ’−Ｒ′（ただし式中、Ｒ′は低 級アルキル、アリール、アラルキル、ジー（低級アルキル）−アミノ、環状第２ 級アミノまたはトリクロロメチルである〕に誘導体化されることが記載されてい る。それらの誘導体中のジスルフィド結合はチオールジスルフィド交換反応に関 与することが予期される。この種の反応においてはチオール基を含む化合物はジ スルフィド誘導体と反応してそれぞれ６−メルカプトプリなおよび２−アミノ− ６−メルカプトプリン（それらは両方とも細胞成長阻害剤である）を遊離する。

それによシその化合物のチオール基の硫黄原子は残基−８−Ｒ’の硫黄原子と結 合する。

このように米国特許第３．４０Ｑ１２５号明細書の化合物はそれらのジスルフィ ド誘導体から治療上活性なチオール化合物を直接遊離せしめることができる。他 方本発明は治療上活性なチオール化合物の生体内での結合に基づくものである。

この結合形成はチオールジスルフィド交換反応によシ生起する。

本発明によればこのことは緒言部分に記載された化合物によシ達成される。その 化合物においては基−８’−ＲはＲがその構造中のジスルフィド橋−ｓ’−ｓ’ −を解裂することによシ得られる生理学的に許容しうる化合物Ｈ−９’−Ｒ中に 含まれる有機基であると定義され、その化合物Ｈ−８’−Ｈにおいて硫黄原子Ｓ ′は化合物Ｈ−８’−Ｒが生理学的許容性を保持しながら、主としてチオールジ スルフィド交換を含む反応から除外されるために、Ｒに結合している硫黄原子Ｓ ″を含む互変異性または共鳴によ）安定化されるような配置を有するＲ中の芳香 族複素環の炭素原子に結合しておシ、Ｓ′は脂肪族炭素原子に結合しておシ、そ してその化合物は構造−８’−８’−Ｒを含む基に加えてＳ′に結合している非 ポリにプチド構造を有する治療上活性な有機性基本化合物の残基を含有する。

（異なった硫黄原子には別の分子部分に直接結合して□いる硫黄原子と区別する ために「′」および「″」で印をつけである。） 従って基Ｒに対する一つの共通の特徴は、それらがチオールジスルフィド反応に おいてチオール化合物を生成し、そのチオール化合物は共鳴または互変異性によ り安定化されて不活性な化合物すなわち実質的にチオールジスルフィド交換反応 に関与しない化合物に変換されることである。しかしながら基本化合物の残基に 相当する分子の他の部分は新規なジスルフィドを形成し、従って別のそのような 反応に関与することができる。

ヒトを含めて哺乳動物においては蛋白質群に属する多数のチオール化合物が存在 する。これらのチオール化合物は本発明による誘導体とのチオールジスルフィド 交換反応に関与することができる。この方法でもう一つのジスルフィドが生成し 、それは別のそのような交換反応に関与して上記の基本化合物に関連している残 基をそのチオール化合物に移す。

哺乳動物特にヒトにおいてはチオール基の細胞外濃度は低い。概してその細胞内 濃度は本質的にさらに高い。

しかし々からある種の癌組織釦おいては細胞内におけると同様に特に高い濃度が 見い出された。さらに癌細胞におけるチオール基は正常な組織のそれと比較して 一層反応的であると仮定されている〔フリートマン代著「アミノ酸、破プチドお よび蛋白質におけるスルフヒドリル基の化学および生化学」（オックスフォード 、はルガモンプレス社発行）、ｉ４４２頁（Ｆｒｉｅｄｍａｎ氏著ｆ’−Ｔｈ代 著ＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　５ｕｌ ｆｈｙｄｒｙｌ　Ｇｒｏｕｐ　ｉｎ　Ａｍ１ｎ。

Ａｃ１ｄ、ｓ、Ｐｅ’ｐｔｉｄｅｓ　ａｎｄ　ＰｒｏｔｅｉｎｓＪ））。従って 本発明による誘導体に変更せしめられた細胞成長阻害剤の投与は、その阻害剤が 癌組織中に存在するチオ−ル基を含む化合物と結合することを招来する。この結 合形成はチオールジスルフィド交換反応によシ達成され、従って投与された阻害 剤が癌組織中によシ一層保持されることを意味する。

このように本発明による誘導体の活性はかなシ長期間持続する。このことはたと えば心臓毒性の細胞成長阻害剤が使用される場合に重要になるであろう。本発明 によりそのような阻害剤を投与すると毒作用に対する危険レベルを保持しながら 投与量を増加することが可能になる。

このことはそのような投与された阻害剤が癌組織のチオール基と結合することに よる。またこのことはたとえば細胞毒性の薬剤を腫瘍の部位に注射することによ シ腫瘍の局所的治療を可能にする。

通常はニジリン、セファロスポリンおよびテトラサイクリンのような抗生物質化 合物は哺乳動物において比較的迅速に排泄されるか、または他の方法で除去され る。

そのような化合物を本発明による誘導体に変更することによシそれらの活性の持 続を本質的に延長することができる。

生体内でのくり返されたチオールジスルフィド交換反応に基づく有利な作用は、 また本発明により変更された他の型の治療上活性な化合物によっても得ることが できる。

従って本発明はまた治療活性を保持しつつ交換することができる原子または基を 本来既知の方法にょシ構造−８’−３’−Ｒ（ただし式中、〜Ｓ’−ＲはＲがそ の構造中のジスルフィド橋−１３’−８’−を解裂することによシ得られる生理 学的に許容しつる化合物Ｈ−８’−Ｒ中に含まれる有機基であると定義され、そ の化合物Ｈ−８’−Ｈにおいて硫黄原子Ｓ′は化合物Ｈ−３’−Ｒが生理学的許 容性を保持しながら、主としてチオールジスルフィド交換を含む別の反応から除 外されるために、Ｒに結合している硫黄原子Ｓ″を含む互変異性または共鳴によ り安定化されるような配置を有するＲ中の芳香族複素環の炭素原子に結合してお シ、Ｓ′は脂肪族炭素原子に結合している）を含む基で置換することから成る、 非ボリハプチド構造を有する治療上活性な有機化合物を変更する方法に関する。

本発明はまた構造−ｓ′−ｓ’−Ｒ（ただし式中、−８’−ＲはＲがその構造中 のジスルフィド橋を解裂することによシ得られる生理学的に許容しうる化合物Ｈ −８″−Ｒ中に含まれる有機基であると定義され、その化合物Ｈ−８’−Ｈにお いて硫黄原子Ｓ′は化合物Ｈ−８’−Ｒが生理学的許容性を保持しながら、主と してチオールジスルフィド交換を含む別の反応から除外されるために、Ｒに結合 している硫黄原子Ｓ′を含む互変異性または共鳴により安定化されるような配置 を有するＲ中の芳香族複素環の炭素原子に結・合しており、Ｓ′は脂肪族炭素原 子に結合している）を含む少なくとも１個の基を有し、そして構造−８’−８’ −Ｒを含む基に加えてＳ′に結合している非ボリハプチド構造を有する治療上活 性な有機性基本化合物の残基をも含有する、非ポリハプチド構造を有する治療上 活性な化合物の治療上有効な景を哺乳動物に投与することから成る、ヒトを含め て哺乳動物の疾恵を治療する方法に関する。

一般的にただ１個の構造単位−８’−８’−Ｒが治療上活性な化合物中に存在す るが、これらの単位を２個、３個またはそれ以上有する化合物もある。

治療上活性な化合物における構造−８’−８’−Ｒは常に第１級、第２級または 第３級脂肪族炭素原子と結合しておシ、炭素および水素以外の他の原子はそれに 結合していない。

すなわち構造−８’−８’−Ｒは好ましくは式に従って結合している。一般的に 構造−８’−８’−Ｒは直鎖状、分枝鎖状または環状であシ、そしてまた置換さ れているかもしれない炭化水素鎖の脂肪族炭素に結合している。

構造−８’−８’−Ｒはたとえば式−Ａ−８’　−８’−Ｒ（ただし式中、Ａは たとえば１〜１０個の炭素原子を含む直鎖状、分校鎖状または環状の炭化水素鎖 である）による基の脂肪族炭素原子と結合することができる。その炭化水素鎖は たとえば場合によ９１〜３個のヒドロキシル基で置換されていてもよく、そして 場合によ９１〜３個の酸素または侃黄原子によシ中断されていてもよく、好まし くは最高１個の炭素および水素以外の原子が基Ａにおけるその同一炭素原子に結 合している。

治療上活性な化合物はたとえば式−Ｘ−Ａ−８’−８’−Ｈの基中に位置してい る構造−８’−８’−Ｒを有することができ、その基は一般式 ％式％（１） 〔ただし式中、 ａ）Ｒ，Ｓ’およびＳ′は上記に与えられた意味を有し、ｂ）　Ａは上記に与え られた意味を有し、ｃ）　Ｘは１）Ｔ１におけるアミノ−またはアミド窒素原子 または炭素原子との直接の場合、 ２）Ｔ１における窒素または酸素原子に結合している基−ａＯ− ３）Ｔ１における炭素または窒素原子に結合している基−ＣＯ−Ｏ− またｄ ４）Ｔ１における炭素原子に結合している原子−〇−であシ、そして ＋１）　Ｔ１は好ましくは非ボリハプチド構造を有する治療上活性な有機化合物 の残基、すなわル式Ｔ＝１　）　ＴＩ　−Ｘ−Ｈ（ＩＦ） ｉｉ）　ＴＩ−Ｘ−Ａ−ＨＱＩＤ または １ｉｉ）　Ｔ１−ｘ−Ａ−ｓ′−ＨＱＶ）（ただし式中、Ｘ、ＡおよびＳ′は上 記に与えられた意味を有する）の残基である〕 の化合物中に含まれる。

本発明による化合物はたとえばチオール基をジスルフィド基に変換するために本 来知られてい′る方法により合成することができる。

好ましくはたとえば上記■のチオール基を含有する化合物は式 ％式％（） （ただし式中、Ｒは上記に与えられた意味を有する）の対称ジスルフィドと反応 せしめられる。この反応においてはかなシ過剰のジスルフィドが使用される。

ポリＲプチド構造を有さす、そして本発明による化合物に変形することができる 多数の治療上活性なチオール５化合物（たとえば上記の構造■による化合物）は たとえば特許文献から以前に知られている。

そのような既知化合物の例は血圧調節剤、抗炎症性物質、抗リウマチ剤、抗菌剤 および細胞成長調節剤などである（たとえば米国特許第４，０４８，４３０号、 隈４，１４４，２７１号、同第４，１９９，５１２号、同第４，２１１，７８６ 号および同第４，２２０，７９１号各明細書、ドイツ特許出願公開公報束２．３ ３１５３号および同第２，９４１，２８８号およびヨーロツノク特許出願公告第 り、　００　ａｏ　５８号明細書を参照されたい）。

治療活性を示しつつアルキル化された形態で存在することができるアミン基また はアミド基中の窒素原子を含有する上記の式（Ｉｆ）による化合物で出発すると 、基−Ｘ−Ａ−６１’　−８’−Ｒ におけるＸはたとえば上記の窒素原子との直接の結合であシうる。

アミン基の窒素原子をアルキル化することにょ多形成される直接の結合はたとえ ば以下の方法によシ導入される。

ａ）ハロゲン化合物の助けによる置換、ｂ）たとえばα、β不飽和カルボン酸お よびそれらのエステルの場合のように特に極性を有する炭素−炭素二重結合への 付加、 Ｃ）アミンおよびカルボニル基との反応によシ生成された縮合生成物の還元たと えば水素添加による還元、および ｄ）マンニッヒの縮合すなわち第１級または第２級アミンと一緒にカルボニル化 合物が反応性の水素を有する炭素原子の位置で縮合する反応。一つの特定のカル ボニル化合物はホルムアルデヒドである。

アルキルハライドおよびアミド基の第１級または第２級窒素の間の直接の結合形 成はたとえばナトリウムアミドを含有する不活性溶媒中で行われる。−，０Ｏ− ＮＨ−、Ａのような構造は構造−Ｃ！０−ＮＨ２を有する化合物で出発する方法 と比較して、それらの対応するカルボン酸からさく１０） らに容易に生成される。カルボン酸は好ましくはブボー（Ｂｏｕｖｅａｕｌｔ） 氏による酸またはアルカリけん化によジアミドから製造することができる。カル ボン酸からアミドを合成するだめの種々の方法は以下に与えられる。

治療活性を示しつつアシル化された形態で存在することができるアミノ基中の窒 素原子を含有する上記式（ｆｆ）による化合物で出発すると、基−ｘ−ｈＬｓ′ −５−ＲにおけるＸはたとえばその窒素原子に結合している一〇〇−であυうる 。

この型の指向されたアシル−アミド結合は多種の方法で合成することができる。

通常反応性のカルボキシ基を有する化合物が使用される。そのような化合物の例 はエステルたとえばｐ−ニトロ−フェニルエステル、または酸無水物特に非対称 性のもの、たとえばカルボン酸およびクロロ蟻酸のイソブチルエステルとの反応 によシ生成された非対称酸無水物、またはアシルＩ・ライド（−ｃｏ−ｃｌ）お よびアシルアジド（−ａｏＮ５　）のような化合物である。特に好ましい活性化 された構造はカルボン酸およびカルボジイミド％にジシクロへキシルカルボジイ ミドとの反応にｘｂ生成される０−アシル−イソウレイド構造である。

ラクトンはもう一つの型の活性化されたカルボキシ化合物である。チオールラク トンは有用な型のラクトンを構成し、それはアミノ基を同時にアミド化し且つチ オール化することができる。よく知られている一つの試薬はＮ−アセチル−ホモ システィン−チオールラクトンである。

治療活性を示しつつアルキル化されたかまたはアシル（１１） 化された形態で存在することができるヒドロキシル基中の酸素原子を含有する上 記式（ｎ）の化合物で出発すると、上記の基−Ｘ−Ａ−８’−８’−Ｒ中のＸは たとえば上記の酸素原子との直接の結合またはそれに結合している一ＣＯ−であ りうる。

基Ａの炭素原子およびヒドロキシル基の酸素原子との直接の結合形成によジエー テル化が生起する。最も一般的な型のエーテル化はウィリアムソン（Ｗｉｌｌｉ ａｍｓｏｎ　）のエーテル合成である。この型はまたフェニルエーテルに対して も有用である。

これに関して適当な方法はエピクロロヒドリンのアルコキシドおよびフェルレー トとの縮合であシ、それはエポキシ構造を有する生成物を得るように制御される 。つぎにそのような構造は本発明に対して本質的である硫黄を導入するために使 用することができる。この硫黄の導入はたとえばチオ硫酸ナトリウムを用いる処 理、チオールへの還元そして最後に反応性の対称ジスルフィドとの反応のような 順次的反応によシ可能である。ビスエポキシドおよびポリエポキシドを同様に使 用することができる。

ある種の型のエーテルはアルコールのアルデヒドまたはケトンとの縮合によシ合 成されるアセタールおよびケタールである。この型の縮合では酸触媒たとえば塩 酸、ｐ−トルエンスルホン酸捷たは陽イオン交換樹脂が使用される。もう一つの 方法はアルコールおよびビニル基との結合形成である。一つの特に興味深い態様 においてはエポキシ経路によシ構造−Ｘ−Ａ−８’−８’−Ｒを形成するために ２．３−エボキシープロノξナールが使用される。

ヒドロキシル基をアシル化するために利用できる方法は多数ある。縮合剤として のジシクロへキシルカルボジイミドおよび適当な触媒としての４−ジメチルアミ ノピリジンによシ促進されたカルボン酸を用いるエステル化は穏和な反応条件を 与える方法である。Ｎ、Ｎ’−カルボニルジイミダゾールは穏和な条件を与える 縮合剤のもう一つの例である。これらの縮合剤はたとえば３−（２−ピリジンジ チオ）−プロピオン酸をカップリングするために使用することができる。アシル 化剤の他の例はカルボン酸のヒドロキシサクシンイミジルエステルである。上記 の試薬はたとえばグリシシン酸をエステル結合で結合せしめるために使用するこ とができる。その後そのエポキシ構造は上記に与えられたよう々硫黄を含有する 官能基を導入するために使用することができる。グリシジルエステル構造を導入 するための全く異なった方法はヒドロキシル化合物をＸ−ノ・口脂肪族アシルノ ・ライドたとえばクロロアセチルクロリドと反応させることである。単離したの ちそのＸ−・・口脂肪酸エステルをダルツエン（Ｄａｒｚｅｎ　）に従ってアル デヒドまたはケトンと反応させる。後者の反応はアルカリ性のｐＨで行われる。

たとえば酸化された形態のチオオクタン酸は上記のアシル化反応により結合する ことができ、その後そのジスルフィド基（１３） を２個の反応性のジスルフィドに変形することができる。

治療活性を示しつつエステル化された形態で存在することかできるカルボキシ基 を含有する上記式（Ｉｔ）の化合物で出発すると、生成された化合物はたとえば 構造−ＣＯ−Ｏ−Ａ−８’−８’−Ｒを含有することができる。エステル構造の 合成は上記に示されている。加アルコール分解による再度のエステル化反応もま だたとえばグリシドールを使用することによシ行われる。

基−Ｘ−Ａ−８’−８’−Ｒを含む治療上活性な化合物を得るためには、また数 種の官能基が一緒に−Ｘ−Ａ−の適当な構造に同時に結合することを意味するよ うな方法論を選ぶことができる。これに関して特に有用な合成法はインモニウム イオンおよびカルボキシレートイオンによるインシアニドへのアルファ付加、そ れに続くウギ（Ｕｇｉ）の転位である。このようにこの方法にはカルボニル基、 アミノ基、カルボキン基およびイソシアニド基の同時縮合が含まれる。

スルホン酸アミドはカルボン酸アミドに対して記載されたのと同様にして製造さ れる。

上記のすべての方法はしばしば保護基の選択的導入および除去を必要とする。さ もなければ不適当な官能基が誘導体化されるであろう。多数のそのような保護基 は有機化学者に知られている。

アミン基を含有する治療上活性な化合物は本発明による化合物に直接変形するこ とができる。このことは好ま（１４） しくに出発物質を式 ％式％（） 〔ただし式中、Ｒは上記に与えられたのと同一の意味を有するが、好ましくは２ −ピリジル、５−二トＯ−２−ピリジル、４−ピリジル、５−カルボキシ−２− ピリジル、これら４種の基のＮ−オキシド、特に２−ピリジル−Ｎ−オキシド、 または２−ベンゾチアゾリルであシ、Ａは上記に与えられたのと同一の意味を有 し、そして２は構造 （ただし式中、ｎは２または３であシ、Ｒは同一であって上記に与えられたのと 同様の意味を有し、そしてＹはメチルまたはエチルである）を有する〕の化合物 またはその酸付加塩と反応させることによシ行われる。好ましくはＡは−ｃａ２ ｃａ２−であシそして２はである。式ＣＶＤ（ただし式中、Ｒは２−ピリジル、 ５−二トロー２−ピリジル、４−ピリジルおよび５−カルボキシ−２−ピリジル である）による化合物の製造は米国特許第４，１４９！００３号明細書に記載さ れている。対応するＮ−オキシドおよび式■（ただし式中、Ｒは２−ペンゾチ（ １５） アゾリルである）の化合物の合成は同様にして行われる（ドイツ特許出願公開公 報筒２，９１ス００１号と比較されたい）。

出発アミン化合物および式（至）の化合物との反応は有機媒質中で好ましくは溶 媒としてのメタノールまたはエタノールおよび塩基触媒としてのトリエチルアミ ンを用いて行われる。

この反応は第１級アミン基を有する治療上活性な化合物（Ｔ２ＮＨ２）のＮ−サ クシンイミジル３−（２−ピリジル、ジチオ）プロピオネートとの反応によシ例 示することができる。この反応はつぎのようにして表わされる。

チオール基を有しないが、本発明による化合物に変形することができる治療上活 性な化合物の例は以下に与えられている。そのような例はつぎのとおシである。

１個または複数個の第１級または第２級アミノ基を含む既知の細胞増殖抑制性化 合物。そのような細胞増殖抑制剤の例はメルフアランおよびアントラサイクリン グリコシドたとえばダウノルビシンおよびＦキソルビシンである。

（１６）　１Ｎ負口Ｕ５８　５００４８０　（６）抗菌剤たとえばベニ／リン類 およびセファロスボリア類、両方の種類はアモキシシリン、アンピシリン、ノ； カンピシリン、ピバンピシリン、セファレキシン、セフラジンなどにおけるよう にアミノ基を有する。他の抗菌剤はテトラサイクリンたとえばクロロテトラサイ クリン、ドキシサイクリン、メタサイクリン、オキシテトラサイクリンおよびリ ンサイクリンである。さらにフラミセチン、カナマイシンおよびトブラマイシン を記載することができる。また弱い治療活性を有する既知化合物たとえば６−ア ミノはニジラン酸（６−ＡＰＡ）および７−アミノセファロスポラン酸（７−Ａ ＯＡ）および本来既知の方法によりそれらの２位および３位においてそれぞれ変 更されたそれらの類似体も存在する。６−ＡＰＡ、７−ＡＣＡおよび上記の類似 体はたとえば６−アミノまたは７−アミノ基をそれぞれ式（ロ）の化合物と反応 させることによシ本発明の誘導体に変形することができる。

本発明によシ第１級アミン基を有する硫黄化合物たとえばスルファメチゾール、 スルファメチゾール、スルファインシミジン、スルファメトオキサゾール、スル ファモキソール、スルファジメトキシン、スルファメトキシピリダジンおよびス ルファメトキシジアジンを変更することもまた興味深い。

また本発明に従って変更することができる多数の他の治療上活性な既知化合があ る。もちろんその場合には治療活性に多大な影響を有する構造単位において変更 を行（１７） うべきではない。

本発明はまた少なくとも１種の本発明による治療上活性な有機化合物を含有する 薬学的組成物に関する。

本発明による誘導体は治療上活性な基本化合物に対して有用であるそれらの形態 で投与することができる。しかしながらそれらの誘導体は好ましくは注射または 注入のだめの溶液または懸濁物の形態で使用される。

投与量は化合物の選択および所望される治療効果によシ変化する。上記に示され たように、本発明によシ新規な化合物が増大せしめられた耐容性を有するために 基本化合物の投与量と比較して（モル数に基づいて評価される）多種の誘導体の 投与量を増大せしめることができる。

他の場合には、分解速度がよシ遅いためにその投与量を基本化合物の投与量より も低減してもなお相当する治療効果が得られる。

遊離のチオール基はしばしば反応的であシ、分子中の他の基と反応する可能性が あシ、酸化されるかまたは別の方法で反応するかもしれないのでその化合物を不 安定にする。しかしながら本発明による誘導体碇おいては一８’−Ｒ基がチオー ル基−Ｅ！’−Ｈに対する保護基として作用ダウノルビシ／−２−ピリジルジス ルフィド誘導体製造 （１８） ダウノルビシン塩は塩（ダウノルビシン塩酸塩）１２０ｑをメタノール（９９５ チｖ／ｖ　）　２４−に溶解した。トリエチルアミン（１６Ｔｆｆ＃／メタノー ル１０ぜ）２．４−を加え、その後Ｎ〜サクシンイミジル−（２−ピリジルジチ オ）−プロピオネート〔ファルマシア・ファイン・ケミカルズ社（スエーデン国 つプスラ在）製の５ＰＤＰ〕（９９，５％ｖ／ｖメタノール中３２ミ中子２ミリ ６．　Ａ　Ｍｔを加えた。急激に攪拌したのちその反応混合物を＋２５℃で６０ 分間、そしてつぎに＋４℃で２０時間放置すると暗赤色の生成物が結晶化した。

その生成物を濾過によシ単離し、水冷（０℃）したメタノールで洗浄し、そして 乾燥した。

特に赤外線スＲクトル、マス７はクトル、元素分析によシ、その生成物は式 （ただし式中、ＤＩ−ＮＵはダウノルビシンの残基である）に相当する分析的に 純粋なダウノルビシン−２−ピリジルジスルフィド誘導体であることが示された 。

元素分析値（Ｃ５５０１１Ｈ３６Ｎ２Ｓ２として）計算値：０５７．９８％：Ｈ ５％；Ｎ３．８７％ｉ　Ｅ！８．８５％実測値：Ｃ５７，９８％；　Ｈ４，９６ ％；Ｎ３．８３％；Ｓ８．５５チ薬理学的特性に関する研究 ａ）ラットにおける抗腫瘍作用 体重２５０〜５００ノのＢＮ／ＮＦ系雌性ラットが試験動物と（１９） して使用された。「ＰＷ　１３−１ｌ−Ｔ１４　Ｊ型ウィルスにょシ誘発された 腎臓肉腫ｔ５Ｘ１０６個の細胞を含有する懸濁物０．５−を第０日にそれらのラ ットに腹腔内的に接種した（その腫瘍は共通遺伝子性ＷＦ系ラットにおいて一連 の移植の間実験室で生きた状態で保存された）。２４匹のラットがこの方法で処 理された。

処理後筒１臼目にそれらのラットをっぎのように処理した。

Ａ群＝６匹のラットを０．１Ｍ燐酸ナトリウムｐＨ７Ｑ４ｄで処理した。

Ｂ群：α１Ｍ燐酸ナトリウムｐＨ７Ｑ１ａｕあたシダウノルビシン塩酸塩０．２ ６ｇ９を溶解した溶液４ｄで６匹のラットを処理した。

０群：０．１Ｍ燐酸ナトリウムｐＨ７，０１−あたシ上記に従って製造されたダ ウノルビシン−２−ピリジルジスルフィド誘導体り、２６１Ｒｆを溶解したもの ４ｄで１２匹のラットを処理した。

結果は以下の表に与えられる。

Ａ群（６）（対照）　５０００００ ＢＲ６）（ダウノルビシン塩酸塩）　４　２　０　℃　００ｂ）マウスにおける 毒性 体重２５±２９のＮＭＲＩ系雄性マウスが試験動物として使用された。それぞれ ８匹のマウスから成る３群をつぎのように腹腔内注射によ逆処理した。

Ａ群：０．ｉＭ燐酸ナトリウムｐａ　７．０　０．〜。

Ｂ群：　０．　Ｉ　Ｍ燐酸ナトリウムｐＨ７１ｄあたシダウノルビシン塩酸塩０ ．６■を溶解したもの０．５　ｍ　（致死量）。

０群：　０．　Ｉ　Ｍ燐酸ナトリウムｐＨ７１ｍ／あたシ上記に従って製造され たダウノルビシン−２−ピリジルジスルフィド誘導体０．６　ｑを溶解したもの ０．５ｄ０Ａ群および０群ではすべてのマウスが生存していたが、Ｂ群の平均生 存比および中間生存比はそれぞれ８４日および８日であった。

例　２ ドキソルビシン−２−ピリジルジスルフィド誘導体合成 ドキンルビシン塩酸塩（アドリアマイシン”）１２ｏｑをメタノール（９９５チ ｖ／ｖ　）　２４−に溶解し、トリエチルアミン（９９，５％Ｖ／Ｖメタノール １〇−中に１６１■）２．４−を加え、ついで５ＰＤＰ（９９，５％メタノール 中３２ミリモル）６，５−を加えた。激しく攪拌したのちその混合物を＋２５℃ で６０分間、そしてつぎに＋４℃で２０時間放置すると暗赤色の生成物が結晶化 した。生成物を濾過によシ単離し、氷冷した（０℃）メタノールで洗浄し、そし て乾燥した。特に赤外線スペクトル、マススＲクトルおよ（２１） び元素分析によりその生成物は式 （ただし式中、Ｄ２−ＮＨはドキソルビシンの残基である）に相当する分析的に 純粋なドキソルビシン−２−ピリジルジスルフィドであることが示された。

ヒトの神経膠腫細胞に及はす作用に関する研究悪性の神経膠腫細胞（２５１ＭＧ 　）を４トリ皿中のイーグル（Ｅａｇｌｅｓ　）　ＭＫＭ培地（１０％ｖ／ｖ胎 児血清）（Ｒトリ皿あたシ３６０．０００個の細胞）５ｄ中＋３７℃で２４時間 インキュベートした。この後以下の表２による種々の溶液１００μｌをはトリ皿 に加え、それを＋３７℃でさらに４×２４時間インキュベートした。

トリプシン処理によシ細胞を遊離せしめ、そしてそれそしのはトリ皿においてセ ロスコープ（ｃｅｌｌｏｓｃｏｐｅ　）　ヲ使用することによシ別々に計数した 。以下の表２に結果が示される。

生理学的燐酸緩衝液（ｐＨ６，０）　７７６、ｏｏｏ　８４１１０００（２２） 例　３ ペニシリン−２−ピリジルジスルフィド誘導体合成 ６−アミノはニジリン酸５０岬をメタノール２−と混合した。トリエチルアミン ２５糧加え、そしてすべての物質が溶解するまでその混合物を振盪した。５ＰＤ Ｐ　７５■を加え、そしてその反応混合物を＋２５℃で９０分間攪拌した。この 生成物を以下の試験で使用した。

抗菌活性 スタフィロコッカス・アウレウス（５ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕ日ａｕｒｅｕｓ 　）　（スタム（ｓｔａｍｍ）８３２５−４　）を血液寒天上で培養した。少し 濁った溶液を与える量を接種針で１０１１１の滅菌された燐酸緩衝化食塩水に移 した。

血液寒天プレートを上記の細胞懸濁物で塗抹し、そして１０分間乾燥した。その 後そのプレートに５０μｌのくぼみをつけた。それぞれのくぼみに上記のはニジ リン誘導体（上記から）、ペニシリンＧ（対照として）または適当なブランクの 溶液５０μｌを加えた。ブランクは上記の反応混合物中に存在していた種々の化 合物であった。

添加された溶液は滅菌された燐酸緩衝化食塩水から製造された。種々の化合物の 溶液は１ゴあたシ１０．１．０．１および０．０１μノであった。それらのプレ ートを３７℃で２４時間インキュベートした。くほみのまわシの抑制ゾーンを可 視的に調べることによシ、はニジリン−２−ピリジルジスルフィド誘導体ははニ シリ／Ｇのそれに匹敵する（２ろ） 抗菌活性を有することが示された。

例　４ チオール化されたダウノルビシン 合成 ダウノルビシン塩酸塩（ダウンマイシン塩酸塩）１２０キをメタノール（９９５ チｖ／ｖ　）　２４　ｙｄに溶解した。トリエチルアミン（メタノール１０４中 １６ＵＰ）２．４．ｔ／を加え、ついでＮ−サクシンイミジル３−（２−ピリジ ルジチオ）−フロビオネート（７アルマシア・ファイン・ケミカルズ社（スエー デン国つプスラ在）製の５ＰＤＰＩ　９９．５％Ｖ／Ｖメタノール中３２ミ中上 ２ミリ、６−を加えた。急激に攪拌したのちこの反応混合物を＋２５℃で４ｏ分 間放置し、そして蒸留水中の０．２Ｍジチオスレイトール０．１ｄを加えた。そ の混合物を＋４℃でさらに１．２００分間放置すると赤色沈殿が生成した。その 生成物を流過によシ単離し、氷冷した（０℃）メタノールで洗浄し、そして乾燥 した。赤外線スＲクトル、マス７はクトル、元素分析（ただし式中、Ｄｌ−ＮＨ はダウノルビシンの残基である）の化合物と一致した。

このチオール化されたダウノルビシンはヒトの神経膠腫細胞において抗腫瘍活性 を有することが示された。この試験は例２の場合と同様にして行われた。チオー ル化されたダウノルビシンは例１の化合物が哺乳動物に投与（２４）　符長Ｉｌ ！Ｈ５８５００４８０（８）された場合に生体内で遊離されつる。

例　５ チオール化されたドキソルビシン 合成 ドキソルビシン塩酸塩（アドリアマイシン■）１２０ｑをメタノール（９９，５ ％ｖ／ｖ　）　２４　ｍｌに溶解した。トリエチルアミン〔メタノール（９９５ ％ｖ／ｖ　）　１０−あたシ１６１９）２．４ｄを加え、ついで５ＰＤＰ（９９ ，５％Ｖ／Ｖメタノール中３２ミ中上２ミリ、５−を加えた。急激に攪拌したの ちこの混合物を＋２５℃で４０分間放置し、そしてつぎに蒸留水中の０．２Ｍジ チオスレイトール０．１ｄを加えた。

その混合物を振盪し、そして＋４℃でさらにｉ、２００分間放置すると赤色沈殿 が生成した。この生成物を濾過によシ単離し、氷冷した（０℃）メタノールで洗 浄し、そして乾燥した。赤外線スはクトル、マス７はクトル、元素分析は式 （ただし式中、Ｄ２−ＮＨはドキソルビシンの残基である）の分析的に純粋なチ オール化されたドキソルビシンと一致した。

このチオール化されたドキソルビシンはヒトの神経膠腫細胞において抗腫瘍活性 を有することが示された。そのような試験は例２におけると同様にして行われた 。このチオール化されたドキソルビシンは例２の誘導体を補（２５） 乳動物に投与した場合に生体内で遊離されつる。

手続補正書（方式） ％式％ １・事件の表示　ＰＯＴ／８１８２１００１０９２、発明の名称 治療上活性な化合物およびその使用 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 電話（２６１）　２０２２ 昭和５７年１２月１７日（発送日　昭５７．１２．２１　）ｌ補正の内容 １）　国際出願日における発明の名称を記載し九特許法５１８４条の５第１項の 規定による書面を提出します。

２）　国際出願日における発明の名称を記載した願書翻訳文および明細書１は− ジ翻訳文を提出します。

以上 明　細　書 治療上活性な化合物およびその使用 本発明は構造−Ｓ／　Ｓ“−Ｒを濱ヲ基を少なくとも１個有する治東上活性な有 機化合物に関する。本発明はまた一５ａ、非ポリペプチド構造を有する治療上活 性な有機化合１　物を変更する方法、゛ ｂ、ヒトを含めて哺乳動物の疾患を治療する方法、および Ｃ１構造−８’−８’−Ｒを含む基を少なくとも１個有する治１０　蒸上活性な 化合物を含む薬学的組成物に関する。

両方とも細胞成長阻害剤である６−メルカプトプリンおよび２−アミノ−６−メ ルカプトプリンの誘導体は米国特許第３，４００，１２５号明細書に開示されて いる。この文１５　献にはメルカプト基が−ｓ’−ｓ“−Ｒ′〔ただし式中　Ｒ １は低級アルキル、アリール、アラルキル、ジー（低級アルキル）−アミノ、環 状第２級アミンまたはトリクロロメチルである〕に誘導体化されることが記載さ れている。それらの誘導体中のジスルフィド結合はチオールジスルフィド交換反 応に関与することが予期される。この種の反応においてはチオール基を含む化合 物はジスルフィド誘導体と反応してそれぞれ６−メルカプトプリンおよび２−ア ミノ−６−メルカプトプリン（それらは両方とも細、泡成長阻害剤である）を遊 離する。それによりその化合物の国　際　調　査　４ｉ４　失

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　構造−ｓ′−ｓ’−Ｒ（ただし式中、Ｓ−ＲはＲがその構造中のジスルフ ィド橋−ｓ’−ｓ’−を解裂することにより得られる生理学的に許容しうる化合 物ａ−ｓ’−Ｒ中に含まれる有機基であると定義され、その化合物Ｈ−Ｅ３’− Ｈにおいて髄黄原子Ｓ′は化合物Ｈ−８’−Ｒが生理学的許容性を保持しながら 、主としてチオールジスルフィド交換を含む反応から除外されるために、Ｒに結 合している硫黄原子Ｓ＃を含む互変異性または共鳴により安定化されるような配 置を有するＲ中の芳香族複素環の炭素原子に結合しておシ、ｆ！Ｊ′は脂肪族炭 素原子に結合している）を含む少なくとも１個の基を有し、そして構造−１３’ −８’−Ｒを含む基に加えてぎに結合している非ポリ／−？プチド構造を有する 治療上活性な有機性基本化合物の残基を含有する治療上活性な有機化合物。 ２、　治療上活性な化合物が式Ｔｊ　−Ｘ−Ａ−８’−８’−Ｒ〔ただし式中 ａ）Ｒ，Ｓ’およびｓ′は上記に与えられた意味を有し、ｂ）Ａは１〜１０個の 炭素原子を有する直鎖状、分枝鎖状または環状の炭化水素鎖であシ、それは場合 によ９１〜３個のヒドロキフル基で置換されておシそして場合によ９１〜３個の 酸素または硫黄原子によシ中断されており、好ましくは炭素および水素以外の最 高１個の原子がＡにおける一つのしかも同一つの炭素原子と結合しており、 Ｃ）　Ｘは （２７） １）Ｔ１におけるアミノまたはアミド窒素原子または炭素原子との直接の結合 ２）Ｔ１における窒素または酸素原子に結合している基３）Ｔ１における炭素ま たは望素原子に結合している基Ｃ０−０− ４）Ｔ１における炭素原子に結合している原子−〇−であシ、そして ｆＬ）　ｌ］１は好ましくは式Ｔ＝ ：ｉｉ）　７ｌ−Ｘ−Ａ−Ｈまたは １ｉｉｉ）　７１−ズーＡ−８’　−Ｈ（ただし式中、Ｘ、Ａおよびｓ′は上記 に与えられた意味を有する）の非ポリペプチド構造を有する治療上活性な有機化 合物の残基である〕 を含む請求の範囲第１項記載の治療上活性な有機化合物。”３、　治療上活性な 化合物Ｔが細胞増殖抑制性物質または抗菌性物質である、請求の範囲第２項記載 の治療上活性な有機化合物。 ４、　治療上活性な化合物Ｔがメルフアラン、アントラサイクリングリコシド、 はニジリン、セファロスホリン、テトラサイクリンまたは硫黄化合物である請求 の範囲第３項記載の治療上活性な化合物。 ５、　構造−８’−８’−ＨにおけるＲが２−ベンゾチアグリル、２−ピリジル 、５−ニトロ−２−ピリジル、４−ピリジ（２８） ル、５−カルホキツー２−ピリジルまたは最後に記載された４個の基のいずれか のＮ−オキシドである、請求の範囲第１〜４項記載の治療上活性な化合物。 ６、　治療活性を保持しつつ交換することができる原子または基を本来既知の方 法によシ構造−ｓ’−ｓ’−Ｒ（ただし式中、９　’−ＲはＲがその構造中のジ スルフィド橋−ｓ’　−ｓ−を解裂することによシ得られる生理学的に許容しう る化合物Ｈ−８’−Ｒ中に含まれる有機基であると定義され、その化合物Ｈ−８ ’−Ｈにおいて硫黄原子Ｓ′は化合物Ｈ−８’−Ｒが生理学的許容性を保持しな がら、主としてチオールジスルフィド交換を含む別の反応から除外されるために 、Ｒに結合している硫黄原子Ｓ′を含む互変異性または共鳴によシ安定化される ような配置を有するＲ中の芳香族複素環の炭素原子に結合しておシ、Ｓ′は脂肪 族炭素原子に結合している）を含む基で置換することから成る、非ボＩＪ　Ａプ チド構造を有する治療上活性な有機化合物を変更する方法。 Ｚ　構造−ｓ’−ｓ’−Ｒ（ただし式中、Ｓ’−ＲはＲがその構造のジスルフィ ド橋を解裂することにより得られる生理学的に許容しうる化合物Ｈ−８’−Ｒ中 に含まれる有機基であると定義され、その化合物Ｈ−８’−Ｈにおいて硫黄原子 Ｓ１は化合物Ｈ−８’−Ｒが生理学的許容性を保持しながら、主としてチオール ジスルフィド交換を含む別の反応から除外されるために、Ｒに結合している硫黄 原子Ｓ１を含。む互変異性または共鳴によシ安定化されるような配置を有するＲ 中の芳香族複素環の炭素原子に結合しており、Ｓ′は脂肪族炭素原子に結合して いる）を含む少なくとも１個の基を有し、そして構造−８’−３’−Ｒを含む基 に加えてＳ′に結合している非ボリハプチド構造を有する治療上活性な有機性基 本化合物の残基金も含有する、非ポリハプチド構造を有５　する治療上活性な化 合物の治療上有効な量を哺乳動物に投与することから成る、ヒトを含めて哺乳動 物の疾患を治療する方法。 ａ　請求の範囲第１〜６項記載の少なくとも１種の治療上活性な化合物を活性物 質として含有する薬学的組成物。