JPS59187779A - ウロキナ−ゼ精製用吸着体 - Google Patents
ウロキナ−ゼ精製用吸着体Info
- Publication number
- JPS59187779A JPS59187779A JP58061028A JP6102883A JPS59187779A JP S59187779 A JPS59187779 A JP S59187779A JP 58061028 A JP58061028 A JP 58061028A JP 6102883 A JP6102883 A JP 6102883A JP S59187779 A JPS59187779 A JP S59187779A
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- JP
- Japan
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- urokinase
- adsorbent
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、酵素、特にウロキナーゼを高純度高収率に精
製するための７フイニテイークロマトグラフイー用の新
規吸着体に関する。
製するための７フイニテイークロマトグラフイー用の新
規吸着体に関する。
ウロキナーゼは人尿中に微量存在する酵素であり、これ
を分離し、高度に精製した裂創は人間に投与した時優れ
た血栓溶解促進作用を示し、また、制癌剤と併用するこ
とによりその制癌作用を著るしく増強するなど独特の作
用により医薬品として広く利用されている。
を分離し、高度に精製した裂創は人間に投与した時優れ
た血栓溶解促進作用を示し、また、制癌剤と併用するこ
とによりその制癌作用を著るしく増強するなど独特の作
用により医薬品として広く利用されている。
ウロキナーゼ精製用の吸着体は従来より多数報告されて
おり、例えば、燐酸カルシウムゲル、シリカゲル等の無
機質担体や、アンバーライｌ−ＯＧ５０ 、 ＤＥＡＢ
−セファデックス、 ＯＭ−セファデックス等のイオン
交換体などが広く用いられている。
おり、例えば、燐酸カルシウムゲル、シリカゲル等の無
機質担体や、アンバーライｌ−ＯＧ５０ 、 ＤＥＡＢ
−セファデックス、 ＯＭ−セファデックス等のイオン
交換体などが広く用いられている。
また、近年、アフィニティークロマトグラフィーによる
ウロキナーゼの精製法も多数報告されておシ、側光ば、
アルギニン、リジン、ベンザミジンあるいはベンズグア
ニジン等をリガンドとする方法が知られている。
ウロキナーゼの精製法も多数報告されておシ、側光ば、
アルギニン、リジン、ベンザミジンあるいはベンズグア
ニジン等をリガンドとする方法が知られている。
しかしながら、これら従来法では、比活性約１万国際単
位／ツ蚤白程度以下の粗ウロキナーゼから１工程で発熱
性物質を除去して比活性約１０万国際単位／ツ蚤白前後
の高純麻ウロキナーゼを得ることは出来ない。
位／ツ蚤白程度以下の粗ウロキナーゼから１工程で発熱
性物質を除去して比活性約１０万国際単位／ツ蚤白前後
の高純麻ウロキナーゼを得ることは出来ない。
本発明者等は、高度に純化されたウロキナーゼを高収率
で簡便且つ経済的に取得する方法を種々検討し、精製効
果の著しく高い新規なアフィニティークロマトグラフィ
ー用吸着体の創製に成功した。
で簡便且つ経済的に取得する方法を種々検討し、精製効
果の著しく高い新規なアフィニティークロマトグラフィ
ー用吸着体の創製に成功した。
即ち、本発明は、
「（１） 水不溶性の担体に式（Ａ）で示される基及
び式（Ｂ）で示される基を、（Ａ）基＝（Ｂ）基のモル
比が７５ ： ２５乃至３５：６５の範囲になるように
化学結合させてなる酵素精製用吸着体。
び式（Ｂ）で示される基を、（Ａ）基＝（Ｂ）基のモル
比が７５ ： ２５乃至３５：６５の範囲になるように
化学結合させてなる酵素精製用吸着体。
−ＮＵ（ＯＨ） ０ＯＯＨ・・・（Ａ）（但し、式中Ｒ
はアミジス繕又はグアニジノ基を示す） （２） 水不溶性の担体に式（Ａ）で示される基及び
式（Ｂ）で示される基を、（Ａ）基：（Ｂ）基のモル比
が７５：２５乃至３５ ： ６５の範囲になるように化
学結合させてなる酵素精製用吸着体にウロキナーゼを吸
着させ、吸着したウロキナーゼを溶出することを特徴と
するウロキナーゼの精製法。
はアミジス繕又はグアニジノ基を示す） （２） 水不溶性の担体に式（Ａ）で示される基及び
式（Ｂ）で示される基を、（Ａ）基：（Ｂ）基のモル比
が７５：２５乃至３５ ： ６５の範囲になるように化
学結合させてなる酵素精製用吸着体にウロキナーゼを吸
着させ、吸着したウロキナーゼを溶出することを特徴と
するウロキナーゼの精製法。
−ＮＨ（０Ｈ２）、０ＯＯＨ・・・（Ａ）−ＮＨ（０Ｈ
２）、０ＯＮＨ○）１１．・・（Ｂ）入 （但し、式中Ｒはアミジス基又はグアニジノ基を示す）
Ｊに関するものである
。
２）、０ＯＮＨ○）１１．・・（Ｂ）入 （但し、式中Ｒはアミジス基又はグアニジノ基を示す）
Ｊに関するものである
。
すでに、６−アミノカプロン酸をスペーサーとし、バラ
アミノベンザミジンをリガンドとした吸着体及びそれを
用いるウロキナーゼの精製法は特公昭５７−１３２６６
号公報及びＢｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙ
ｓｉｃａＡｃｔａ４４５，２１５〜２２２（１９７６）
、により公知である。
アミノベンザミジンをリガンドとした吸着体及びそれを
用いるウロキナーゼの精製法は特公昭５７−１３２６６
号公報及びＢｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙ
ｓｉｃａＡｃｔａ４４５，２１５〜２２２（１９７６）
、により公知である。
しかしながら、それら刊行物に記載されている吸着体は
不溶性担体にスペーサーとして６−アミノカプロン酸を
結合させ、その末端のカルボキシ基の全部にバラアミノ
ベンザミジンを結合させた基は存在していない。
不溶性担体にスペーサーとして６−アミノカプロン酸を
結合させ、その末端のカルボキシ基の全部にバラアミノ
ベンザミジンを結合させた基は存在していない。
本発明者等は不溶性担体に６−アミノカプロン酸を結合
させ、その末端のカルボキシ基に対して糧々の割合でリ
ガンドを結合させた物を作シ、その結合割合と祖ウロキ
ナーゼの精製効果との関係を種々検討した結果、カルボ
キシ基の２５〜６５チ、好丑しくは２５〜４５チをリガ
ンドと結合させた吸着体が極めて顕著なウロキナーゼの
Ａ′Ｎ製効果を発揮するという予想外の効果を見出した
。
させ、その末端のカルボキシ基に対して糧々の割合でリ
ガンドを結合させた物を作シ、その結合割合と祖ウロキ
ナーゼの精製効果との関係を種々検討した結果、カルボ
キシ基の２５〜６５チ、好丑しくは２５〜４５チをリガ
ンドと結合させた吸着体が極めて顕著なウロキナーゼの
Ａ′Ｎ製効果を発揮するという予想外の効果を見出した
。
本発明によれば、吸着体をカラムに充填し、該カラムに
粗ウロキナーゼ含有液を通塔してウロキナーゼを吸着さ
せ、吸着したウロキナーゼを中性 ５− 水溶液で洗浄後、内隻ノドの塩類水溶液で溶出すると発
熱性物質を含まない比活性５ｏｏｏｏ〜１３００００国
際単位／シ蚤白のウロキナーゼを８ｍ％以上の収率で得
ることが出来る。粗ウロキナーゼは通常の方法で人尿か
ら得られた比活性５００〜１ｏｏｏｏ国際単位／’／蚤
白のものを用い、これを食塩０．２〜０．４Ｍ含む０．
１ Ｍ燐酵緩衡液（］’ＩＩ ＝ ６〜８）に４０００
０〜１０００００国際ヰ位／ ｍＡの濃度に溶解して通
塔吸着させる。洗浄浴は通常粗ウロキナーゼの溶解に使
用した緩衝液を使用する。緩衝液中の塩濃度は０．０５
〜０．５Ｍ、好捷しくけ０．２〜０．４ Ｍがよい。ウ
ロキナーゼの浴出液は食塩濃１＆０．０５〜０．５Ｍ、
好オしくけ０．２〜０．４ Ｍを含′Ｇ−二・０１Ｍ酢
酸緩衡緩衝液Ｈ＝３−・５）が好ましい。不発明の吸着
体は、それ自体公知の反応を適宜組合わせることにより
容易に製造することが出来る。即ち、前記式（Ａ）で示
される基を水不溶性の担体に結合させるにはＣＤＩ （
Ｎ、Ｎ’−カルボニノ・ジ・「ミダゾール）活性化法、
臭化シアン活性化法等の通常の方法を利用することが出
来る。
粗ウロキナーゼ含有液を通塔してウロキナーゼを吸着さ
せ、吸着したウロキナーゼを中性 ５− 水溶液で洗浄後、内隻ノドの塩類水溶液で溶出すると発
熱性物質を含まない比活性５ｏｏｏｏ〜１３００００国
際単位／シ蚤白のウロキナーゼを８ｍ％以上の収率で得
ることが出来る。粗ウロキナーゼは通常の方法で人尿か
ら得られた比活性５００〜１ｏｏｏｏ国際単位／’／蚤
白のものを用い、これを食塩０．２〜０．４Ｍ含む０．
１ Ｍ燐酵緩衡液（］’ＩＩ ＝ ６〜８）に４０００
０〜１０００００国際ヰ位／ ｍＡの濃度に溶解して通
塔吸着させる。洗浄浴は通常粗ウロキナーゼの溶解に使
用した緩衝液を使用する。緩衝液中の塩濃度は０．０５
〜０．５Ｍ、好捷しくけ０．２〜０．４ Ｍがよい。ウ
ロキナーゼの浴出液は食塩濃１＆０．０５〜０．５Ｍ、
好オしくけ０．２〜０．４ Ｍを含′Ｇ−二・０１Ｍ酢
酸緩衡緩衝液Ｈ＝３−・５）が好ましい。不発明の吸着
体は、それ自体公知の反応を適宜組合わせることにより
容易に製造することが出来る。即ち、前記式（Ａ）で示
される基を水不溶性の担体に結合させるにはＣＤＩ （
Ｎ、Ｎ’−カルボニノ・ジ・「ミダゾール）活性化法、
臭化シアン活性化法等の通常の方法を利用することが出
来る。
６−
また、式（、Ａ、）の基の末端にリガンドを縮合させて
式（Ｂ）の基（で変換するためにはＯＭＯ（１−シクロ
ヘキシル−３−（２−モル７オリノエチル）カルホシイ
ミト・メＩ−−Ｐ −）ルエンスル７オン酸〕、 ＥＤ
ＯＣ１−エチル−・３−（３−ジメチルアミンプロピル
）カルボジイミド〕等の通常の縮合剤を用いることがで
きる。
式（Ｂ）の基（で変換するためにはＯＭＯ（１−シクロ
ヘキシル−３−（２−モル７オリノエチル）カルホシイ
ミト・メＩ−−Ｐ −）ルエンスル７オン酸〕、 ＥＤ
ＯＣ１−エチル−・３−（３−ジメチルアミンプロピル
）カルボジイミド〕等の通常の縮合剤を用いることがで
きる。
水不溶性担体としては前記式（Ａ）で示される基を結合
１７得るものであればよく、例えばアガロース、架橋化
デキスト２ン、セルロースｉ％ｌｘ天等の多１．ｉ類、
ポリアクリルアマイド等の高分子が用いられる。
１７得るものであればよく、例えばアガロース、架橋化
デキスト２ン、セルロースｉ％ｌｘ天等の多１．ｉ類、
ポリアクリルアマイド等の高分子が用いられる。
次に本発明の効果を試、検測で示す。
試験例
セファロース０Ｌ−６Ｂ （ファルマシア・ファインケ
ミカルズ社製）を活性化して６−アミノカズロン酸をゲ
ル１罰当り７７６μｍｏｌｅ結合させ、これにバラアミ
ノベンザミジンを種々の割合で縮合させた吸着体を作り
、そねら吸着体６ ｍｌをそれぞれカラムに充填し、相
ウロキナーゼ（比活性３４００国際単位／ ”／蚤白）
をゲルに吸着させ、０．４ Ｍ食塩含有０．１Ｍ燐酸縁
衡液（ＰＩＴ ＝ ７．０ ）で洗浄後、０．４Ｍ食塩
含有０．ＩＭ酢酸緩衡液（ＰＴｉ＝４）で溶出し、溶出
されたウロキナーゼについて、比活性、収率及び発熱性
物質の試験毛・行った。
ミカルズ社製）を活性化して６−アミノカズロン酸をゲ
ル１罰当り７７６μｍｏｌｅ結合させ、これにバラアミ
ノベンザミジンを種々の割合で縮合させた吸着体を作り
、そねら吸着体６ ｍｌをそれぞれカラムに充填し、相
ウロキナーゼ（比活性３４００国際単位／ ”／蚤白）
をゲルに吸着させ、０．４ Ｍ食塩含有０．１Ｍ燐酸縁
衡液（ＰＩＴ ＝ ７．０ ）で洗浄後、０．４Ｍ食塩
含有０．ＩＭ酢酸緩衡液（ＰＴｉ＝４）で溶出し、溶出
されたウロキナーゼについて、比活性、収率及び発熱性
物質の試験毛・行った。
本試験の結果は第１表に示す通りである。
第１表の試験成績から明らかなように、バラアミノベン
ザミジンの結合割合が多くなるにしたがって溶出液中の
ウロキナーゼの比活性が低下し、また発熱性物質も除去
されにくくなる。一方バラアミノベンザミジンの結合割
合が２５チ以下の場合にはウロキナーゼの収率が極端に
低下した。
ザミジンの結合割合が多くなるにしたがって溶出液中の
ウロキナーゼの比活性が低下し、また発熱性物質も除去
されにくくなる。一方バラアミノベンザミジンの結合割
合が２５チ以下の場合にはウロキナーゼの収率が極端に
低下した。
一方麦１のＡ９に示したようにバラアミノベンザミジン
の縮合量が煮１の１６３μｍｏｌ 、／ｌａ１． Ｇｅ
ｌより少なくても結合割合が２５〜６５チの範囲内にあ
れば８ｍ％以上の収率が得られることを発見した。
の縮合量が煮１の１６３μｍｏｌ 、／ｌａ１． Ｇｅ
ｌより少なくても結合割合が２５〜６５チの範囲内にあ
れば８ｍ％以上の収率が得られることを発見した。
またバラアミノベンザミジンの結合割合が４５〜６５％
の範囲では発熱性物質試験が縦隔性になることもある。
の範囲では発熱性物質試験が縦隔性になることもある。
これはバラアミノベンザミジンの結合量によるものでは
なく、結合割合によることも明らかである。
なく、結合割合によることも明らかである。
人お、本発明に於いて、ウロキナーゼの活性はフィブリ
ン平板法［： ＢｌｏｃＭｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔ
ａ ２４，２７Ｂ（１９５７）、）により測定し、スペ
ーサー及びリガンドのゲルへの結合量はケルメール法に
よる窒素の定量値から算出した。
ン平板法［： ＢｌｏｃＭｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔ
ａ ２４，２７Ｂ（１９５７）、）により測定し、スペ
ーサー及びリガンドのゲルへの結合量はケルメール法に
よる窒素の定量値から算出した。
以下実施例により本発明の詳細な説明する。
実施例１
セファロース０Ｌ−６Ｂ （７アルマシアψフアインケ
ミ力ルズ社％）２０ａ／！をｐＨ１１において臭化シア
ン３ｙで活性化し、つき゛て６−アミノカプロン酸２５
ｙと２０℃で１０時間反応させセファロースＯＬ −６
Ｂ−アミノカプロン酸結合体を合成した。
ミ力ルズ社％）２０ａ／！をｐＨ１１において臭化シア
ン３ｙで活性化し、つき゛て６−アミノカプロン酸２５
ｙと２０℃で１０時間反応させセファロースＯＬ −６
Ｂ−アミノカプロン酸結合体を合成した。
この反応で、ゲル１情ｌ当り、６−アミノカプロン酸は
８０μｍｏｌｅ結合した。このゲル２０耐にＣＭＯ３２
を加えた後、バラアミノベンザミジン１８０Ｍ１Ｉを添
加し、ＰＨ４，２〜４６で１２萌間反応さぜ、バラアミ
ノベンザミジンを縮合させた。結合したバラアミノベン
ザミジンはゲルｌ ｍＡ尚シ２４μｍｏｌｅｓ Ｌ／た
がってスペーサーに対する結合率は３０係であった。
８０μｍｏｌｅ結合した。このゲル２０耐にＣＭＯ３２
を加えた後、バラアミノベンザミジン１８０Ｍ１Ｉを添
加し、ＰＨ４，２〜４６で１２萌間反応さぜ、バラアミ
ノベンザミジンを縮合させた。結合したバラアミノベン
ザミジンはゲルｌ ｍＡ尚シ２４μｍｏｌｅｓ Ｌ／た
がってスペーサーに対する結合率は３０係であった。
この吸着体５ ｍｌをカラムに充填し、０．４Ｍ食塩含
有０．１Ｍ燐酸緩衝液（ＰＨ７２）で平衡化し、発熱性
物質試験陽性の粗ウロキナーゼ５，１００，０００国際
年位（比活性３５００国際単国際年ｆ蚤白）を８０１１
＋７！の同じ緩衝液に溶解して、不溶物を除去後、カラ
ムに通塔した。カラムを０．４ Ｍ食塩含有０．１ Ｍ
燐酸緩衝液（ＰＨ７，０）で洗液の２８０ ｎｒｎの吸
光値が０．０２以下になるまで充分洗浄した。洗浄終了
後０．４Ｍ食塩含有０．１ Ｍ酢酸緩衝液（ＰＨ４，０
）で吸着しているウロキナーゼを溶出した。かくして得
られたウロキナーゼは比活性１１５．０００国際国際年
グ蚤白、収率８５チで、発熱性物質試験の結果、１５．
０００国際乍位／ Ｋｆ家兎体重で、陰性であった。
有０．１Ｍ燐酸緩衝液（ＰＨ７２）で平衡化し、発熱性
物質試験陽性の粗ウロキナーゼ５，１００，０００国際
年位（比活性３５００国際単国際年ｆ蚤白）を８０１１
＋７！の同じ緩衝液に溶解して、不溶物を除去後、カラ
ムに通塔した。カラムを０．４ Ｍ食塩含有０．１ Ｍ
燐酸緩衝液（ＰＨ７，０）で洗液の２８０ ｎｒｎの吸
光値が０．０２以下になるまで充分洗浄した。洗浄終了
後０．４Ｍ食塩含有０．１ Ｍ酢酸緩衝液（ＰＨ４，０
）で吸着しているウロキナーゼを溶出した。かくして得
られたウロキナーゼは比活性１１５．０００国際国際年
グ蚤白、収率８５チで、発熱性物質試験の結果、１５．
０００国際乍位／ Ｋｆ家兎体重で、陰性であった。
実施例２
セファロースＯＩ、−４Ｂ ２０ ｍｌを円（１１に
おいて臭化シアン３２で１０分間活性比し、実施例１と
同様にしてセファロースＯＴ、 −４Ｂ−アミノカプロ
ン酸結合体を合成した。得られたゲルはｌ ｍｅ当り６
−アミノカプロン酸が７０μｍ ｏ ｌ ｅ結合してい
た。
おいて臭化シアン３２で１０分間活性比し、実施例１と
同様にしてセファロースＯＴ、 −４Ｂ−アミノカプロ
ン酸結合体を合成した。得られたゲルはｌ ｍｅ当り６
−アミノカプロン酸が７０μｍ ｏ ｌ ｅ結合してい
た。
コノゲ＃ ２０ ｍｅ Ｋ ＢＤＯ３５０ｑを添加した
後バラアミノンエニルグアニジン２５０ ｑを加Ａ−、
Ｐ）］： ４．５〜４．７に保持しながら室温で５時間
攪拌した。得られタケル（ハ）ｌ ｍｅ当！１１７．５
μｍ ｏ ｌ ｅのバラアミノンエニルグアニジンを結
合１７ていた。し、／こがつでリガンドのスペーツーー
に対する結′冶率ｈ２５ｔｃでちる。
後バラアミノンエニルグアニジン２５０ ｑを加Ａ−、
Ｐ）］： ４．５〜４．７に保持しながら室温で５時間
攪拌した。得られタケル（ハ）ｌ ｍｅ当！１１７．５
μｍ ｏ ｌ ｅのバラアミノンエニルグアニジンを結
合１７ていた。し、／こがつでリガンドのスペーツーー
に対する結′冶率ｈ２５ｔｃでちる。
この吸着体６１１／をカラムに充填し、０．３ Ｍ食塩
を含む０．１ Ｍ燐酸緩衝液＜ ＰＨ７−２）で平衡化
し、発熱比物質試験陽性の粗ウロキナーゼ２，７００，
０００国際年位（比活性６００国際国際年ｑ蚤白）を５
０献の０．３Ｍ食塩含有燐Ｑ緩価液（ＰＨ７，２）に溶
解し不溶物を除去した後、カラムに通塔して、ウロキナ
ーゼを吸着させ、続いて同じ緩衝液で洗液の２８０ｎｍ
の吸光（＋＆が０．０１以下になる壕でカラムを洗浄し
た。洗浄終了後０．４Ｍ＊塩を含む０．１ Ｍ酢酸緩衝
液（ＰＨ４，０）で吸着しているウロキナーゼを溶出し
た。
を含む０．１ Ｍ燐酸緩衝液＜ ＰＨ７−２）で平衡化
し、発熱比物質試験陽性の粗ウロキナーゼ２，７００，
０００国際年位（比活性６００国際国際年ｑ蚤白）を５
０献の０．３Ｍ食塩含有燐Ｑ緩価液（ＰＨ７，２）に溶
解し不溶物を除去した後、カラムに通塔して、ウロキナ
ーゼを吸着させ、続いて同じ緩衝液で洗液の２８０ｎｍ
の吸光（＋＆が０．０１以下になる壕でカラムを洗浄し
た。洗浄終了後０．４Ｍ＊塩を含む０．１ Ｍ酢酸緩衝
液（ＰＨ４，０）で吸着しているウロキナーゼを溶出し
た。
かくして得られ六ウロキナーゼは比活性８０，０００国
際国際年グ蚤白、収率８３チで、発熱性物質試験の結果
１５．０００国際琳位／ Ｋｔｉ家兎体重で陰性でおっ
た。
際国際年グ蚤白、収率８３チで、発熱性物質試験の結果
１５．０００国際琳位／ Ｋｔｉ家兎体重で陰性でおっ
た。
特許出願人 わかもと製薬株式会社
１３−
Claims (2)
- （１）水不溶性の担体に式（Ａ）で示される基及び式（
Ｂ）で示される基を、（Ａ）基＝（Ｂ）基のモル比が７
５：２５乃至３５：６５の範囲になるように化学結合さ
せてなる酵素精製用吸着体。 −ＮＨ（０Ｈ２） 、 ０ＯＯＨ曲・・（Ａ）（但し７
、式中Ｒけアミジノ基又はグアニジノ基を示す。） - （２） 水不溶性の担体に式（Ａ）で示される基及び
式（Ｂ）で示される基を、（Ａ）基：（Ｂ）基のモル比
が７５ ： ２５乃至３５ ： ６５の範囲になるよう
に化学結合させてなる酵素精製用吸着体につｒ＋キナー
ゼを吸着させ、吸着したウロキナーゼを溶出することを
特徴とするウロキナーゼの精製法。 −ＮＨ（ＯＴ（） ０ＯＯＨ・・・ （Ａ） ６ （但し、式中ｎはアミジノ基又はグアニジノ基を示す。 ）
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58061028A JPS59187779A (ja) | 1983-04-08 | 1983-04-08 | ウロキナ−ゼ精製用吸着体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58061028A JPS59187779A (ja) | 1983-04-08 | 1983-04-08 | ウロキナ−ゼ精製用吸着体 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59187779A true JPS59187779A (ja) | 1984-10-24 |
| JPS6148918B2 JPS6148918B2 (ja) | 1986-10-27 |
Family
ID=13159432
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58061028A Granted JPS59187779A (ja) | 1983-04-08 | 1983-04-08 | ウロキナ−ゼ精製用吸着体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59187779A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5132214A (en) * | 1986-04-09 | 1992-07-21 | Monsanto Company | Large scale production of plasminogen activator from normal human colon cells |
| US11666888B2 (en) | 2018-02-05 | 2023-06-06 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Chromatography resin having an anionic exchange-hydrophobic mixed mode ligand |
-
1983
- 1983-04-08 JP JP58061028A patent/JPS59187779A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5132214A (en) * | 1986-04-09 | 1992-07-21 | Monsanto Company | Large scale production of plasminogen activator from normal human colon cells |
| US11666888B2 (en) | 2018-02-05 | 2023-06-06 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Chromatography resin having an anionic exchange-hydrophobic mixed mode ligand |
| US12194432B2 (en) | 2018-02-05 | 2025-01-14 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Chromatography resin having an anionic exchange-hydrophobic mixed mode ligand |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6148918B2 (ja) | 1986-10-27 |
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