JPS5928537B2 - フアクタ−８高濃縮物の製造方法 - Google Patents
フアクタ−８高濃縮物の製造方法Info
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- JPS5928537B2 JPS5928537B2 JP56134808A JP13480881A JPS5928537B2 JP S5928537 B2 JPS5928537 B2 JP S5928537B2 JP 56134808 A JP56134808 A JP 56134808A JP 13480881 A JP13480881 A JP 13480881A JP S5928537 B2 JPS5928537 B2 JP S5928537B2
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- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
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- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
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- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
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-
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、血漿を多段分画法により、特に凍結沈澱）お
よびポリエチレングリコールの如き蛋白質沈殿剤を用い
た精製を行なうことにより、比活性が少な（とも２．５
単位ＡＨＦでありフィブリノーゲン含量が０．２５〜／
ｍ９蛋白質以下であるファクター■（ＡＨＦ）−高濃縮
物をヒトまたは動物血漿から製造する方法に関する。
よびポリエチレングリコールの如き蛋白質沈殿剤を用い
た精製を行なうことにより、比活性が少な（とも２．５
単位ＡＨＦでありフィブリノーゲン含量が０．２５〜／
ｍ９蛋白質以下であるファクター■（ＡＨＦ）−高濃縮
物をヒトまたは動物血漿から製造する方法に関する。
ヒトまたは動物から製造され、通常の血漿と比べてファ
クター■活性が増加したファクター■（ＡＨＦ）−高濃
縮物は既に知られている。
クター■活性が増加したファクター■（ＡＨＦ）−高濃
縮物は既に知られている。
分画法による既知のファクター■−濃縮物製造法は、血
漿をエタノール、エーテル、ポリエチレンクリコールお
よび／またはグリシンで処理することからなる。
漿をエタノール、エーテル、ポリエチレンクリコールお
よび／またはグリシンで処理することからなる。
その他、Ｐｏｏｌの血漿の凍結沈殿法（Ｔｈｅ Ｎｅｗ
Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉ
ｎｅ ；２７３．１４４３（１９６５年）参照）および
Ｊ ｏｈｎｓｏｎの血漿の凍結エタノール沈殿法（Ｃｏ
ｎｇｒ。
Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉ
ｎｅ ；２７３．１４４３（１９６５年）参照）および
Ｊ ｏｈｎｓｏｎの血漿の凍結エタノール沈殿法（Ｃｏ
ｎｇｒ。
Ｉ ｎｔ 、 Ｓ ｏｃ 、 Ｂ １ｏｏｄ Ｔｒａｎ
ｓｆ 、、Ｓ ｙｄｎｅｙ 。
ｓｆ 、、Ｓ ｙｄｎｅｙ 。
Ａｕ５ｔｒａｌｉａ、 Ａｂｓｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ｐ
ａｐｅｒ、 ｐ。
ａｐｅｒ、 ｐ。
１１０９（１９６６）参照）が知られている。
その他、ファクター■濃縮物の製造法として、血漿を吸
着剤、例えばフロリゲル（ｆｌｏｒｉｇｅｌ ）、ベン
トナイト、イオン交換体で処理する方法及び浸透クロマ
トグラフ法などがある。
着剤、例えばフロリゲル（ｆｌｏｒｉｇｅｌ ）、ベン
トナイト、イオン交換体で処理する方法及び浸透クロマ
トグラフ法などがある。
先行技術において、血漿をエタノールで処理する方法は
Ｃｏｈｎによって初めて報告された（Ｊ。
Ｃｏｈｎによって初めて報告された（Ｊ。
Ａｍｅｒ、Ｃｈｅｍ、５ｏｃ−６８４５９（１９４６）
）。
）。
血漿をエタノールで処理すると、いわゆるＣ ｏｈｎ−
フラクション■が得られるが、このファクター■活性は
比較的低い。
フラクション■が得られるが、このファクター■活性は
比較的低い。
Ｃｏｈｎの方法はＢｌｏｍｂｕｃｋ により改良され（
Ａｒｋｉｖ ｆｉｉｒＫｅｍｉ、１２ ３８７（１９５
８）参照）、Ｃｏｈｎ−フラクション■はエタノール−
グリシン−シトレート緩衝液で抽出することにより、更
に精製された。
Ａｒｋｉｖ ｆｉｉｒＫｅｍｉ、１２ ３８７（１９５
８）参照）、Ｃｏｈｎ−フラクション■はエタノール−
グリシン−シトレート緩衝液で抽出することにより、更
に精製された。
これによって、いわゆるＩ −０−フラクションが得ら
れた。
れた。
Ｓｉｍｏｎｅｔｔｉらによって報告されている様に（Ｈ
ｅｍｏｓｔａｓｅ １．５７（１９６１）参照）、こ
のフラクションは更にタンニン酸で精製することができ
る。
ｅｍｏｓｔａｓｅ １．５７（１９６１）参照）、こ
のフラクションは更にタンニン酸で精製することができ
る。
しかし、これらの改良された濃縮物も、比較的低いファ
クター■活性しか持っていない。
クター■活性しか持っていない。
これらの濃縮物はまた、夾雑蛋白質、即ちファクター■
非活性蛋白質含量が高いという欠点を有する。
非活性蛋白質含量が高いという欠点を有する。
即ち、Ｃｏｈｎ−フラクション■には６０％以上の蛋白
質フィブリノーゲンが含まれており、Ｂｌｏｍｂａｃｋ
−フラクションＩ−０には８０％以上のフィブリノ
ーゲンが含まれている。
質フィブリノーゲンが含まれており、Ｂｌｏｍｂａｃｋ
−フラクションＩ−０には８０％以上のフィブリノ
ーゲンが含まれている。
凍結沈殿による既知の分画法は、ヒトまたは動物の血漿
を超低温冷蔵し、これを解凍することにより行なわれて
来た。
を超低温冷蔵し、これを解凍することにより行なわれて
来た。
この凍結沈殿物を緩衝液に溶解し、所望により、これを
ポリエチレングリコール、グリシンなどの蛋白質沈殿剤
で更に精製する。
ポリエチレングリコール、グリシンなどの蛋白質沈殿剤
で更に精製する。
この凍結沈殿法で、実質的にファクター■活性を高める
ことには成功していない。
ことには成功していない。
もとの血漿と比べてファクター■活性は僅かに約１０倍
はど高（なっているに過ぎず、また、これまでこの凍結
沈殿と組み合せて用いられた方法も、得られた生成物の
活性を所望の程度にまで高めることに成功していない。
はど高（なっているに過ぎず、また、これまでこの凍結
沈殿と組み合せて用いられた方法も、得られた生成物の
活性を所望の程度にまで高めることに成功していない。
最初の凍結沈殿工程について、多段分画法が米国特許第
３６５２５３０号、第３６３１０１８号、３６８２８８
１号およびオーストリア特許第３４９６３９号に記載さ
れている。
３６５２５３０号、第３６３１０１８号、３６８２８８
１号およびオーストリア特許第３４９６３９号に記載さ
れている。
このような生成物は「高度に純化したＡＨＦＪまたは「
高純度ＡＨＦＩと呼ばれている。
高純度ＡＨＦＩと呼ばれている。
しかしそのファクター■活性はもとの血漿より僅かに９
０〜１００倍高いだけであり、一方、ファクター■非活
性蛋白質（フィブリノーゲン）の含量は依然として総蛋
白質の３５％に達する。
０〜１００倍高いだけであり、一方、ファクター■非活
性蛋白質（フィブリノーゲン）の含量は依然として総蛋
白質の３５％に達する。
本発明は上記の欠点や不都合を避けるためになされたも
のであ゛す、その目的は、多量の不活性なファクター■
非活性蛋白質が除かれており、フィブリノーゲンの含量
が可能な限り低められており、濃縮物中に存在する蛋白
質を基礎とした場合のファクター■活性が従来の医療に
使用されている製剤よりも高いという、ファクター■−
高濃縮物を提供することにある。
のであ゛す、その目的は、多量の不活性なファクター■
非活性蛋白質が除かれており、フィブリノーゲンの含量
が可能な限り低められており、濃縮物中に存在する蛋白
質を基礎とした場合のファクター■活性が従来の医療に
使用されている製剤よりも高いという、ファクター■−
高濃縮物を提供することにある。
特に本発明は、比活性が少な（とも２．５単位ＡＨＦで
あり、フィブリノーゲン含量が０．２５〜／〜蛋白質以
下であるファクター■（ＡＨＦ）−高濃縮物を製造する
方法であって、工業的規模でも経済的に実施し得る方法
を提供するものである。
あり、フィブリノーゲン含量が０．２５〜／〜蛋白質以
下であるファクター■（ＡＨＦ）−高濃縮物を製造する
方法であって、工業的規模でも経済的に実施し得る方法
を提供するものである。
本発明の上記の目的は、第１段階として凍結沈殿を行な
うのが好ましいとされている従来の多段分画法を用いて
精製しファクター■（ＡＨＦ）を豊富化したフラクショ
ンを、凍結アルコール沈殿法（ｃｒｙｏａｌ ｃｏｈｏ
ｌ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ）にかけ、得られた沈
殿を安定した形に加工することにより達成される。
うのが好ましいとされている従来の多段分画法を用いて
精製しファクター■（ＡＨＦ）を豊富化したフラクショ
ンを、凍結アルコール沈殿法（ｃｒｙｏａｌ ｃｏｈｏ
ｌ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ）にかけ、得られた沈
殿を安定した形に加工することにより達成される。
本明細書において、「凍結アルコール沈殿」とは、アル
コールの存在下で冷凍操作および解凍操作を行なうこと
を意味する。
コールの存在下で冷凍操作および解凍操作を行なうこと
を意味する。
本発明の好ましい実施型式によれば、１価または多価ア
ルコール、例えばメチルアルコール、エチルアルコール
、ポリエチレングリコールまたはポリエステルグリコー
ル例えば ＰＬＵＲＯＮＩＣ■の登録商標で知られている製品を、
精製され、ファクター■（ＡＨＦ）が豊富化したフラク
ションに、ｐＨ５，９〜６，３、温度Ｏ〜−３℃で添加
し、この混合物を冷凍し、０〜４℃の温度で解凍する。
ルコール、例えばメチルアルコール、エチルアルコール
、ポリエチレングリコールまたはポリエステルグリコー
ル例えば ＰＬＵＲＯＮＩＣ■の登録商標で知られている製品を、
精製され、ファクター■（ＡＨＦ）が豊富化したフラク
ションに、ｐＨ５，９〜６，３、温度Ｏ〜−３℃で添加
し、この混合物を冷凍し、０〜４℃の温度で解凍する。
ここにおいてＡＨＦ−高濃縮物を含有する沈殿が生成す
るのでこれを生理緩衝液に溶解し、冷凍および凍結乾燥
により安定な形に加工する。
るのでこれを生理緩衝液に溶解し、冷凍および凍結乾燥
により安定な形に加工する。
本発明の好ましい実施型式は、以下の工程の組み合わせ
からなるニ ーヒトまたは動物の血漿を最初の凍結沈殿に付す。
からなるニ ーヒトまたは動物の血漿を最初の凍結沈殿に付す。
一凍結沈殿物を水性緩衝液に溶解し、ｐＨを６１５〜６
．２５に調節し、この溶液をポリエチレングリコールを
用いて最初の精製沈殿に付す。
．２５に調節し、この溶液をポリエチレングリコールを
用いて最初の精製沈殿に付す。
−沈殿物を除いた後に得られる上澄液をポリエチレング
リコールを用いて少な（とももう１回精製沈殿に付す。
リコールを用いて少な（とももう１回精製沈殿に付す。
一沈殿を捨てた後に最終的に得られる精製された、ファ
クター■（ＡＨＦ）に富んだフラクションに１価または
多価アルコール、例えばメチルアルコール、エチルアル
コール、ポリエチレングリコールまたはポリエステルグ
リコール （ＰＬＵＲＯＮＩＣ■）を添加し、凍結アルコール沈殿
に付して混合物を冷凍し、０〜４°Ｃの温度で解凍し、
この際ＡＨＦ−高濃縮物が生成するのでこれを生理緩衝
液に溶解し、冷凍および凍結乾燥により安定な形に加工
する。
クター■（ＡＨＦ）に富んだフラクションに１価または
多価アルコール、例えばメチルアルコール、エチルアル
コール、ポリエチレングリコールまたはポリエステルグ
リコール （ＰＬＵＲＯＮＩＣ■）を添加し、凍結アルコール沈殿
に付して混合物を冷凍し、０〜４°Ｃの温度で解凍し、
この際ＡＨＦ−高濃縮物が生成するのでこれを生理緩衝
液に溶解し、冷凍および凍結乾燥により安定な形に加工
する。
最初のポリエチレングリコール沈殿工程では３Ｗ／Ｖ％
のポリエチレングリコールを使用し、第２回目以降のポ
リエチレングリコール沈殿では８Ｗ／Ｖ％のポリエチレ
ングリコールを使用するのが好ましい。
のポリエチレングリコールを使用し、第２回目以降のポ
リエチレングリコール沈殿では８Ｗ／Ｖ％のポリエチレ
ングリコールを使用するのが好ましい。
ファクター■濃縮物を沈殿させるには、約１０Ｗ／Ｖ％
のＰＬＵＲＯＮＩＣ■溶液を使用するのが好ましい。
のＰＬＵＲＯＮＩＣ■溶液を使用するのが好ましい。
蛋白質沈殿剤としてのポリエチレングリコールの代りに
ＰＬＵＲＯＮＩＣ■を使用することもでき、この場合、
工程は以下の特徴的な組み合わせからなる。
ＰＬＵＲＯＮＩＣ■を使用することもでき、この場合、
工程は以下の特徴的な組み合わせからなる。
一ヒトまたは動物の血漿を最初の凍結沈殿に付す。
一凍結沈殿物を水性緩衝液に溶解し、ｐＨ６，２５に調
節し、この溶液をＰＬＵＲＯＮＩＣ■を用いて最初の精
製沈殿に付す。
節し、この溶液をＰＬＵＲＯＮＩＣ■を用いて最初の精
製沈殿に付す。
一沈殿を除去した後に得られる上澄液を、ＰＬＵＲＯＮ
ＩＣ■を用いて少なくとももう１回精製沈殿に付す。
ＩＣ■を用いて少なくとももう１回精製沈殿に付す。
一沈殿を捨てた後に最終的に得られる精製された、ファ
クター■（ＡＨＦ）に富んだフラクションに１価または
多価アルコール、例えばメチルアルコール、エチルアル
コール、ポリエチレングリコールまたはポリエステルグ
リコール （ＰＬＵＲＯＮＩＣ■）を添加し、凍結アルコール沈殿
に付して混合物を冷凍し、０〜４℃の温度で解凍し、こ
の際ＡＨＦ−高濃縮物が生成するのでこれを生理緩衝液
に溶解し、冷凍および凍結乾燥により保存可能な形にす
る。
クター■（ＡＨＦ）に富んだフラクションに１価または
多価アルコール、例えばメチルアルコール、エチルアル
コール、ポリエチレングリコールまたはポリエステルグ
リコール （ＰＬＵＲＯＮＩＣ■）を添加し、凍結アルコール沈殿
に付して混合物を冷凍し、０〜４℃の温度で解凍し、こ
の際ＡＨＦ−高濃縮物が生成するのでこれを生理緩衝液
に溶解し、冷凍および凍結乾燥により保存可能な形にす
る。
以下に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明する。
実施例 １
新たに凍結した血漿４６０１を００および＋４℃で解凍
する。
する。
生成した凍結沈殿物を遠心分離し、３７℃で９．６１の
クエン酸三ナトリウムに溶解する。
クエン酸三ナトリウムに溶解する。
溶液のｐＨを６．２に調節し、３Ｗ／Ｖ％のポリエチレ
ングリコール２０００を加える。
ングリコール２０００を加える。
沈殿が生成するので遠心分離して捨てる。
ファクター■（ＡＨＦ）を含有する上澄液にクエン酸三
ナトリウムを添加することにより、イオン強度を上げる
。
ナトリウムを添加することにより、イオン強度を上げる
。
ポリエチレングリコール２０００の濃度を８Ｗ／Ｖ％に
上げることにより、残存している夾雑蛋白質を沈殿させ
、遠心分離して捨てる。
上げることにより、残存している夾雑蛋白質を沈殿させ
、遠心分離して捨てる。
一２℃、ｐＨ６，１で８Ｗ／Ｖ％のエタノールを加える
ことによりファクター■濃縮物を沈殿させる。
ことによりファクター■濃縮物を沈殿させる。
この懸濁液を冷凍し、＋４℃で解凍した後ファクター■
を含有する凍結アルコール沈殿物を生理緩衝液に溶解し
、濾過滅菌し、最終容器に充填して凍結乾燥する。
を含有する凍結アルコール沈殿物を生理緩衝液に溶解し
、濾過滅菌し、最終容器に充填して凍結乾燥する。
実施例 ２
新鮮な凍結血漿９６００ｍ１を０〜＋４℃で解凍する。
遠心分離した凍結沈殿物を３７℃で２４０ｍ１．のクエ
ン酸三ナトリウムに溶解する。
ン酸三ナトリウムに溶解する。
溶液のｐＨを６．２に調節し、３Ｗ／Ｖ％のポリエチレ
ングリコール２０００を添加する。
ングリコール２０００を添加する。
生成した沈殿を分離して捨てる。
クエン酸三ナトリウムを添加してイオン強度を上げ、さ
らにポリエチレングリコール２０００を濃度８Ｗ／Ｖ％
まで添加して夾雑蛋白質を沈殿させ、これを分離して除
去する。
らにポリエチレングリコール２０００を濃度８Ｗ／Ｖ％
まで添加して夾雑蛋白質を沈殿させ、これを分離して除
去する。
ｐＨ６，０、温度−２〜−３℃において、１０Ｗ／Ｖ％
メタノールによりファクター■濃縮物を沈殿させる。
メタノールによりファクター■濃縮物を沈殿させる。
この懸濁液を凍結し、解凍した後凍結アルコール沈殿物
を等張緩両液に溶解し、濾過滅菌し、最終容器に充填し
、凍結乾燥する。
を等張緩両液に溶解し、濾過滅菌し、最終容器に充填し
、凍結乾燥する。
実施例 ３
ファクター■濃縮物を沈殿させるのに、１０Ｗ／Ｖ％メ
タノールを使用する代りに濃度１２Ｗ／Ｖ％のポリエチ
レングリコールを使用するほかは実施例２と同じ操作を
行なう。
タノールを使用する代りに濃度１２Ｗ／Ｖ％のポリエチ
レングリコールを使用するほかは実施例２と同じ操作を
行なう。
実施例 ４
ファクター■濃縮物を沈殿させるのに、１０Ｗ／Ｖ％の
メタノールを使用する代りに、濃度１０Ｗ／Ｖ％のＰＬ
ＵＲＯＮＩＣ■を使用するほかは実施例２と同じ操作を
行なう。
メタノールを使用する代りに、濃度１０Ｗ／Ｖ％のＰＬ
ＵＲＯＮＩＣ■を使用するほかは実施例２と同じ操作を
行なう。
実施例 ５
新たに凍結した血漿１０．４１を０〜４℃で解凍する。
凍結沈殿物をクエン酸三ナトリウム緩衝液２５０ｍ１に
溶解する。
溶解する。
この溶液のｐＨを６．３に調節し、２．５Ｗ／Ｖ％のＰ
ＬＵＲＯＮＩＣ■を添加する。
ＬＵＲＯＮＩＣ■を添加する。
沈殿を捨て、イオン強度を高めた後ＰＬＵＲＯＮ：［Ｃ
■濃度を７．５ Ｗ／ Ｖ％に上げ、もう一度沈殿を捨
てる。
■濃度を７．５ Ｗ／ Ｖ％に上げ、もう一度沈殿を捨
てる。
ｐＨ６，０、温度−２℃で上澄液を８Ｗ／Ｖ％エタノー
ルで処理し、ファクター■濃縮物を沈殿させる。
ルで処理し、ファクター■濃縮物を沈殿させる。
この懸濁液を冷凍し、＋４℃で解凍した後凍結アルコー
ル沈殿を分離する。
ル沈殿を分離する。
本発明方法によって得られる高濃縮物は、その比活性が
実質的に上昇していること、および出発物質の血漿と比
較してＡＨＦが２００倍以上も豊富化していることを市
販のＡＨＦ濃縮物と比較して表■に示す。
実質的に上昇していること、および出発物質の血漿と比
較してＡＨＦが２００倍以上も豊富化していることを市
販のＡＨＦ濃縮物と比較して表■に示す。
本発明方法によって得られる高濃縮物は、既知の濃縮物
と比較してフィブリノーゲン含量が低いことを表■に示
す。
と比較してフィブリノーゲン含量が低いことを表■に示
す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 凍結沈殿および蛋白質沈殿剤による精製を適宜組み
合せることからなる血漿の多段階分画により、ヒトまた
は動物の血漿から比活性が少なくとも２．５単位ＡＨＦ
でありフィブリノーゲン含量がｏ、２５ｍｔｉ／ｍ９蛋
白質以下であるファクターｖｎｔ（ＡＨＦ）高濃縮物を
製造する方法であって、最終段階として、これらの多段
階分画によって精製され、ファクター■（ＡＨＦ）に富
んだフラクションにアルコールを添加し、次いで冷凍お
よび解凍し、得られた沈殿を安定な形に加工することを
特徴とする方法。 ２ 精製され、ファクター■（ＡＨＦ）に富んだフラク
ションにメチルアルコール、エチルアルコール、ポリエ
チレングリコールまたはポリエステルグリコールの如き
１価または多価アルコールをｐＨ５，９〜６．３、温度
Ｏ〜−３℃で添加し、得られた混合物を冷凍し、次いで
０〜４℃で解凍し、その結果ＡＨＦ高濃縮物を含有する
沈殿が生成するのでこれを生理緩衝液に溶解し、冷凍お
よび凍結乾燥によって安定な形に加工する第１項に記載
の方法。 ３ 以下の工程： （ａ） ヒトまたは動物の血漿を最初の凍結沈殿に付
す工程、 （ｂ） 凍結沈殿物を水性緩衝液に溶解してｐＨを６
．１５〜６，２５に調節し、この溶液を、蛋白質沈殿剤
としてのポリエチレングリコールを用いて最初の精製沈
殿に付す工程、 （ｃ） 沈殿物を除いた後に得られる上澄液を、蛋白
質沈殿剤としてのポリエチレングリコールを用いて少な
くとももう１回精製沈殿に付す工程、（ｄ） 沈殿を
捨てた後に最終的に得られる精製された、ファクター■
（ＡＨＦ）に富んだフラクションにメチルアルコール、
エチルアルコール、ポリエチレングリコールまたはポリ
エステルグリコールの如き１価または多価アルコールを
添加し、次いで冷凍し、０〜４℃で解凍し、その結果Ａ
ＨＦ高濃縮物を含有する沈殿が生成するのでこれを生理
緩衝液に溶解し、冷凍および凍結乾燥によって安定な形
に加工する工程、の組み合わせからなる第１項または第
２項のいずれかに記載の方法。 ４ 最初のポリエチレングリコールによる沈殿を３Ｗ／
Ｖ％ポリエチレングリコールを用いて行ない、２回目お
よびそれ以降の沈殿を８Ｗ／Ｖ％ポリエチレングリコー
ルを用いて行なう第３項に記載の方法。 ５ ファクター■濃縮物を沈殿させるのにほぼ１０Ｗ／
Ｖ％のポリエステルグリコール溶液を使用する第４項に
記載の方法。 ６ 以下の工程： （ａ） ヒトまたは動物の血漿を最初の凍結沈殿に付
す工程、 （ｂ） 凍結沈殿物を水性緩衝液に溶解してｐＨを６
．２５に調節し、この溶液を、蛋白質沈殿剤としてのポ
リエステルグリコールを用いて最初の精製沈殿に付す工
程、 （ｃ） 沈殿物を除いた後に得られる上澄液を、蛋白
質沈殿剤としてのポリエステルグリコール溶液いて少な
くとももう１回精製沈殿に付す工程、（ｄ） 沈殿を
捨てた後に最終的に得られる精製された、ファクター■
（ＡＨＦ）に富んだフラクションニメチルアルコール、
エチルアルコール、ポリエチレングリコールまたはポリ
エステルグＩＪ コールの如き１価または多価アルコー
ルヲ添加し、次いで冷凍し、０〜４℃で解凍し、その結
果ＡＨＦ高濃縮物を含有する沈殿が生成するのでこれを
生理緩衝液に溶解し、冷凍および凍結乾燥によって安定
な形に加工する工程、 の組み合わせからなる第１項に記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
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| AT4338/80 | 1980-08-27 |
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