JPS5938657A - 前立腺疾患診断用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、前立腺疾患診断用組成物に閃し、更に詳しく
は少なくとも抗β−Ｍ８Ｆ抗体を含む免疫学的反応にハ
づく前立腺疾患診断用組成物に閥する。

前立腺疾患は老年者に非常に多く、中でも前立腺肥大症
および前立腺癌は最近増加の傾向が見られる。これらの
前立腺疾患の診断は、直腸内触診。

尿道造影法、超音波診断法、バイオプシー等により行な
われているが、いずれも患者に苦痛の負担を強いる方法
である。最近これらの方法に加えて、血清中の前立Ｉ！
！ｆＦ性ホスファターゼ（以下ｒＰＡＰ」という）が前
立腺疾患診断のマーカーとし”Ｃ注目されている。これ
はＰＡＰが前立腺疾患において血清中に増加するという
Ｇｕｔｍａｎ等の報告（Ｊ。

０１ｉｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　１ユ、４７３（１９３［
１））に基づくものでそれ以来、前・立・ｎｌ？］悴や
前立１１１Ｐ肥大症の診断への応用がなされてきた。し
かし、Ｇｕｔｍａｎ等の方法はＦＡＩ’の活性を測定す
ることによって、ぞの存在貝を求めようとするものであ
り、これは、前立腺疾患以外の他の疾患においで前立；
即に由来しない血清酸性ホスファターゼが土Ｚ／、する
こ七から、このような場合には測定された酸性ホスファ
ターゼ活性値が前立腺疾患に起因するのか、あるいは他
の疾患に起因するのかを判断することをイ’Ｔｆｉめて
困難なものとし、このことが前立腺疾患の正確な臨床的
診断をなし難いものとしている。Ｏｈ　＋、＋等は特許
出願公表昭５５−５０００３４号明細書においてＰＡＰ
を抽出精製し、それに対する抗体を得て、それを用いた
免疫化学的方法により血清中のＰＡｐｈａｄｅｘ）　Ｇ
　　１００ゲルろ過、トヨバール（Ｔｏｙｏ−ｐｅａｒ
ｌ　）　ＨＷ　−５５Ｆゲルろ過およびカラ本等重点電
気泳動法により、等電点５．６、分子量約１０゜４００
、アミノ０数約８３個の糖を含有しない蛋白質を分子厘
、精ツｖしてβ−Ｍｉｃｒｏｓｅｍｉｎ＄ｏｐｒｏｔｅ
ｉｎ（以下「β−ＭｓＰ」という。）と命名した。

このβ−Ｍ　８　Ｐについて各種体液および胛器浸出液
との交ｆ差を倹Ｅ、１シた結果、そのいずれとも交差し
ないことから、β−間８Ｐは前立腺由来の精漿特異抗原
の一つであることが確認された。本発明者らは更に１０
例の精液について、重層沈降反応による定ｈ′を法にて
、精漿中のβ−Ｍ　Ｓ　Ｐ含有Ｊ、？ｔをｆ！１定した
ところ、６０〜９０ＦＷ／ｄであった。

つぎに抗β−Ｍ　Ｓ　Ｐ抗体とペルオキシダーゼを標識
した第２抗体を用いて酵素抗体法により、男性生殖器の
組織片について、β−Δｉｓｐの局在を検索した結果、
前立腺上皮細胞、前立腺分泌液の部分に特異染色が認め
られた。また同様にして原発性前立腺癌細胞にも特異染
色が屈められた。これに対し、膀胱粘膜、尿道粘膜、精
Ｎ上皮、精管上皮、墨九、尿道球腺などの組織において
は、全く特異染色が認められなかった。これらの結果か
ら、β−ＭＳＰは前立腺特異抗原であることが示唆され
た。このことからβ−ＭＳＰを前立腺疾患の診断におり
る特異的マーカーとして、血清中のβ−間８Ｐを検出す
ることにより、前立ハ♀疾患の臨床的Ｈｈ　ｌｒ＃が可
能と考え更に研究をずずめた。

本発明者等は、β−Ｍ　Ｓ　Ｐのラジオイムノアッセイ
法を確立しそれを用いて種々の疾患における血清中のβ
−間８Ｐの定量を行なった。この１１７！、同一患者の
血清についてラジオイムノアッセイ法によりＰＡＰも合
わせて測定した。この結果、β−Ｍ　Ｓ　Ｐは女性の血
清中から１検出されながった。

また前立腺疾患における血清中のβ−ＭＳＰのｒ″を度
は正常ヒト血清のそれに比べ高い値を示した。

Ｉ庁に前立腺肥大症において血清中のＰＡＰは正常常で
あるが、β−Ｍ８Ｆは増加している例が認められた。こ
の結果は箔１図に示す。この結果はβ−Ｍ　Ｓ　Ｐが前
立腺疾患を診断する上での特異的マーカーとしてＰ　Ａ
　Ｐ　Ｊ：りも優れているということを示ｌ１５ｆＴ’
するものである。

本発明は以上の事実に（臀みなされたものである。

即ち、本発明にｒ１少′／、「、くども抗β−ＭＳＰ抗
体を含むことを特徴とする前立Ｈｙｐ疾患診断用組成物
である。尚１．該抗β−Ｍ　Ｓ　Ｐ抗体はラジオイムノ
アッセイ、ｒ１γ素イムノアッセイあるいはｔイ光イム
ノアッセイのための標隅物質でＰＡ識されていてもよく
また水不溶性の担体に結合されていてもよい。

本発明の前立腺疾患診断用組成物を用いて血清中のβ−
Ｍ　８　Ｐ濃度を測定することにより、ＰＡＰを測定す
る方法では検出されなかった前立腺疾患が高い精度をも
って検出できることから、本発明は前立腺疾患の診断に
極めて有用なものであるといえる。

検出する手段であれば足り、下記に制限されるも標識し
たβ−Ｍ　Ｓ　Ｐ　、抗β−Ｍ　Ｓ　Ｐ抗体お上びＢ／
Ｆ分離用の第二抗体から４％７　ｈ’ｃされる組Ｑ　’
ｌ’ｆｆｎこれは血清中のβ−Ｍ　Ｓ　Ｐと几Ｉで標識
したβ−ＭＳＰが抗β−ＭＳＰ抗体の結合におい゛Ｃ競
合することを利用した方法に姑づくものである。抗β−
ＭＳＰ抗体に結合した几ＩＪａ　什’、）β−間８Ｐと
遊〃の８工標識β−ＭＳｒを第二抗体等で分ＰＡ（Ｂ／
’Ｆ分離）し、抗β−Ｍ　Ｓ　Ｐ抗体と結合したＲ、Ｉ
標識β−Ｍ　Ｓ　Ｐの放射ｔ１ｔシを１１１１１宇する
ことにより血清中のβ−Ｉｔ、（８Ｐ　ｆ＆が求められ
、その結果から前立腺疾患の有無を診トｈすることがで
きる。

（２）ＲＩ、ｒ１ｆ素又はケイ光物質で標語したβ−ト
、４８Ｐおよび固相に結合した抗β−ＭＳＰ抗体がら構
成される組Ｊ７する物。

これは、血清中のβ−Ｍ８ＰとＲ１，酵素またはケイ光
物質でセＡ　％％したβ−Ｍ　Ｓ　Ｐが同相に＃：’を
合した抗β−へ［ｌ］Ｐ抗体への結合において競合する
ことを利用した方法に基づくもので、同相の放射能、酵
素活性またはケイ光５１ｉ１度を測定することにより血
清中のβ−Ｍ　Ｓ　Ｐ　量が求められ、その結果から前
立腺疾患の有無を診ｊ″ｌＲすることができる。

（３）同相に結合させたβ−Ｍ　Ｓ　ＰとＲＩ、酵素ま
た番ツ、ケイ光物質で標識した抗７！／　−Ｍ　８　Ｐ
抗体から＋ｉ、￥成される組Ｉ九物。

これは血清中のβ−ＭＳＰと固相に結合さぜたβ−Ｍ　
Ｓ　Ｐが標よ１とした抗β−Ｍ　８　Ｐ抗体への結合に
おいて競合することを利用した方法に基づくもので、固
４’ＦＪのβ−？Ｊ　Ｒ３Ｆに結合した標識抗β−ＭＳ
Ｐ抗体の放射能、酵素活性またはケイ光強度をｉ！ｔ’
ｌ定することにより、血清中のβ−Ｍ　Ｓ　Ｐ、Ｊ＝ｉ
が求められ、その結果から前立腺疾患の有無をａｈ　Ｉ
：ｊｉすることができる、。

（４）／−ＭＳｒ感作ラテックスと抗β−Ｍ　Ｓ　Ｐ抗
体から構成される組成物。

これはβ−Ｍ８１Ｅ’感作ラテックスと抗β−ＮＳＰ抗
体の凝集が血清中のβ−ＭＳＩ’の存在によってその凝
集度合を阻止されることを利用した方法に基づくもので
、凝集像の観で）？またｕ泊度を測定することにより、
血清中のβ−ＭＳＰ供が求められ、その結果から前立腺
疾患のイｆチ１しを診断することができる。

（５）抗β−Ｍ　Ｓ　Ｐ抗体感作ラテックスを含む絹Ｊ
ｙ”ｉ。

物。

これは、血清中のβ−ＭＳＰと抗β−）、ｆ　Ｓ　Ｐ抗
体感作ラテックスがｌｆ％　（ｆ＆することを利用し１
３一方法に基づくもので、凝集像として観察するか、濁
度を測定することにより、ＩＩＪ＋清中のＩ−Ｒ４，Ｂ
Ｐ爪が求められ、その結果から前立１ｌｉｉｌ疾患の有
無を診断することができる。

（６）ＲＩ、酵素またはケイ光物質で標識した抗β−Δ
（ＳＰ抗体および同相に結合させた抗β−Ｐ４８Ｆ抗体
から構成される。

これは、いわゆるサンドイツチ法に基づくもので血清中
の７；’　−Ｍａ　ｒ’を同相に結合した抗β−ＭＳＰ
抗体ど結合さゼ、次いでそのβ−Ｍ８１１に更にｆ’Ｎ
　ＩＩＭ抗β−ＭＳＰ抗体を結合させることにより、固
４１７に結合した標識抗β−ΔＩｓＰ抗体の放射能、酵
素活性またはケイ光強度を１（ＩＩＪ定し、血清中のβ
−ｈ、ｉ　８　Ｐ　ｆ−’ｔを求めその結果から前立Ｉ
Ｉ＋￥！疾患の有偕を診断するものである。

このｆ・Ｈの診断用組成物においては２つの抗β−Ｍ　
８　Ｐ抗体を用いるが、これらの抗体は、同一動物種」
；すｉ′、）られたものあるいは２つの異なる動物ｆｉ
ｔ（（例えばヤギとウサギ）から得られたもののいずれ
でも使用することができる。後者の抗体を用い、その一
つを同相に結合させ、他の一つを標識したものは、β−
ＭＳＰの測定に際し、単一インキュベーション中、固相
に結合さゼた抗体および標識抗体とβ−Ｍ　８　Ｆとの
免疫学的反応を同時に行うことができるので特に好まし
い。

上記の如き本発明の具体的Ｒ１様において、抗原または
抗体に標識する物質としては放射性同位元素、酵素、ク
イ光物質、ラテックス等がその代表例として挙げられる
。放射性同位元素としては、リンゴ酸脱水緊酵素、グル
コース−６−リン［・２脱水２Ｆ？！、グルコースオキ
シダーゼ、グルコアミラーゼ、ガラクトシダーゼ、アセ
チルコリンエステラーゼ等が用いられ、竹に西洋ワサビ
から？’）られるペルオキシダーゼは好ましい。ケイ光
物Ｆｌとしてはフルメレッセインイソチオシアネ−１・
、ダンクＡｌクロライド、ローダミン■３イソチオシア
オ、−ト等が用いられる。

これらの標識の抗原または抗体への結合（ｊ１棒識物質
が放射性同位元素の場合は、クロラミンＴ法、酵素法お
よびポルトン−フンター（Ｂｏｌｔｏｎ　−）Ｉｕｎｔ
ｅｒ）法等、酵素の場合はグルタル′フルデヒド。

Ｎ、Ｎ’−０−フェニレンマレンイミド、費５−マレン
イミドベンゾイル−Ｎ−ヒドνキシサクシンイミドエス
テルなどの架橋剤を用いる方法あるいは縮合剤を用いる
方法、また酵素がペルオキシダーゼの場合にはぞのに２
ｉ部分をＱ化してアルデヒドとし、抗原あるいは抗体の
アミノ基に結合させる方法、更にケイ光物質の場合には
、抗原あるいは抗体にケイ光物質を加えて混合する方法
等、いずれもこの分野における公知の方法によって行う
ことができる。

抗原または抗ｆドを結合さゼる固相としては、有償およ
び無口重合体（アミラーゼ、デキストラン。

天然］３よび変１１ミ七ルロース、ポリアクリルアミド
。

アガロースｒ　？＋棉鉄鋏、多孔質ガラス粉末、ラテッ
クス等）、試！−９容器の内壁（試験管、タイタープレ
ートまたは、ガラスあるいは人工材料のセル等）これら
の同相の抗原または抗体の結合は、物理化学的に吸着さ
せる方法、固相に７ミノ基、カルボキシル基、ハ四ゲン
基などの官能基を導入し、これに抗原または抗体のアミ
ノ基あるいはカルボキシル基などを化学的に結合させる
方法など、この分野における公知の方法によって行なう
ことができる。

本発明の前立腺疾患診断用組成物を用いて柱体４Ｎ 中のβ−Ｍ８Ｆを測定する場合、検メは直接用いること
ができ、また適当な方法で希釈または前処理を施しから
用いてもよい。ｎｌす定における免Ｉ１２学的反応は最
適ｐＨ（４〜９）を保つように適当な緩衝液中で行なう
。適当な緩衝液としては、例えばリンら９塩緩衝液、ト
リス−塩酸緩手！ｔｔ液、トリエタノ・−ルアミリー塩
俊ｒ受ｌｋｉ液、ホ１ン１１印ｊ奮Ｎす老や１ｆｉ液が
ｇけられる。また免疫学的反応は０℃〜５５′Ｃの間で
行うのがよい。免疫学的反応の指示薬としての標識が酵
素の場合、その酵素活性は固相で公知の方法により測定
され、測定すべき物質（β−Ｒ４８Ｐ）の量に対する尺
度となる。６．２崇が西洋ワーリビからのペルオキシダ
ーゼである場合、酵素の罎”！■は存在する触媒活性に
基づいて測定するのがよく、そしてこれは過酸化水素お
よび酸化還元指示桑としての０−フェニレンジアミン、
０−ジアニシジン、ホモバニリン＃１　＊　ｐ−クレゾ
ール、ｐ−ヒドロキシフェニルエチルアルコールなどの
助けにより測定される。

以下の実施例により本発明を説明する。

実施例１゜ β−ＭＳ　Ｐの１’ｒ７　ｔ、’！ ｚ′に名の混合精忰を精製水にて十分透析し、その遠心
上清をセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ　）　Ｇ−１
００（ファルマシア社ｒ！り（カラム２．６　Ｘ　１０
０　ａｎ　）にて０．２　Ｍ　Ｎｎ（ＨＡを含む０．１
　Ｍ　）リス塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）を用いてゲルろ
過を行い、β−Ｍ８Ｐを含有する分子ｊ；ｌ　Ｂ、　０
００から１５．０００の分画を隼めｒ／、ｉ　ｋｒｉす
る。次いでトヨバール”（Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ）ＨＷ−
５５ＦＣ東洋９’ｊ達工朶株式会社製）（カラム１．６
　Ｘ　１００　ａｎ　）にて０．５％炭酸水素アンモニ
ウム１ｔ′ｉ液でゲルろ過しβ−Ｍ８Ｆを含有する分子
７１８．０００から１５．０００の分画を集め濃縮した
後ｐＨ４〜６のアンホライン（Ａｍｐｈｏ　ｌ　ｉ　ｎ
ｅ　）　（Ｌ、に、　Ｂ社ｉｊ＋！　）を用いて等電点
電気泳動（カラム１１０ＷＩ／＋）を行いβ−Ｍ　Ｓ　
Ｐを得た。

この標品について、常法に従い７．５％ポリアクリルア
ミドゲルディスク電気泳動を行なりた結果、単一のバン
ドが示された。また該標品を開法によりつ・す°ギに免
疫して得た抗体と精漿を同じく常法によりウサギに免疫
して得た抗精Ｉ！π而清直情いて免疫電気泳動を行なっ
た結果、βノ内にそれぞれ一本の沈降線のみを詔めた。

このことから、該標品がβ−ＭＳＰであることを確ＮＵ
　Ｌ、た。

実施例２゜ 抗β−ＭＳＰ抗体 β−ＭＳ　Ｐ　（１ｍ！？／Ｆｌ（り　１ｒｐｅと同ｈ
ｔ　（１）　７　ｏインドの完全アジュバントをよく混
合し、その２ｍ／！をウサギのフットパッド（Ｆｏｏｔ
　ｐｉｄ　）に分注免ノ史した後、約１０日間隔で第２
回Ｖｌ　、　第３回目の免疫を背面、大腿皮下にそれぞ
れ行なった。免疫後７日目に採血し、その直情をオフタ
ロニー法にて８１を門 べた結果、抗β−メＳＦ抗体の存在を確詔した。

実＆Ｉｊ例３゜ β−ＭＳＩ’の１２５■橢識 （１２５Ｉ　）ポルトン・７ンター（Ｂｏｌｔｏｎ　−
Ｈｕｎｔｅｒ）試薬（アマージャム礼県、ベンゼン溶液
）５００μＣ１から窒素ガスを用いてベンゼンを留去す
る。

一方０．１Ｍホウ削塩紐街液（ｐｉ（８，５）にβ−Ｍ
ｉｓＰを０．５■／　ｍｅになるように溶解し、その溶
液５μβを前記ポルトン−７ンター試桑に加え、水浴中
（０℃）で反応さする。過剰の試葵が後で加えるｔ、７
ｅ加えて反応させる（０℃、５分間）。反応混合液をセ
ファデックス（８ｅｐｂａｄｅｘ　）　Ｇ　−２５（７
フルマシア社製）（カラムＩ　Ｘ　２０　ｃｍ　）で０
．９％塩化ナトリウムおよび０．１％ゼラチンを含む０
．０５Ｍリン贈塩緩術液前液１１７．４　）を用いて溶
出し、１″５■で標識されたβ−Ｍ　Ｓ　Ｐを分画する
。

実施例４゜ 血清中のβ−ＭＳＰの定量 検体血清０．２　ｍｌ　、希釈抗β−Ｍｓ　ｐ　Ｊ１１
ｘ清ｏ、　ｉ　ｙＩｅ１１２５Ｉ標識β−Ｍ８Ｆ（約２
０．０００ｃｐｍ　／　０．１ｔｉｒｅ　）　０．１　
ｍｇおよび０．０９％塩化ナトリウム、０．ＩＮゼラチ
ン、０．０５Ｍエチレンジアミン四Ｇ’ｈ　ｍ　Ｉ！ナ
トリウム塩をそれぞれ含有する０、　０５　Ｍリンｌ′
：＞＠緩朽液０．５　ｍｅを混合し、４℃にて１６〜２
４時間Ｐｃ　ｍ　後、ｍ＝抗体（イムノビーズ；バイメ
・ラッド社製）　０．２　Ｆｅを加えて３７℃で約２時
間ｉｔ胃する。次いで０．９％塩化ナトリウム水４゛ス
液３．　Ｏｒ、・ｒを加え１０００Ｆで１０分間遠心し
てＢ／Ｆ分部した後、沈殿の放射能をｒ−カウンターで
測定し、β−Ｍ　８　Ｆの標準溶液を用いて作成した検
員線から検体血清中のβ−Ｍ　Ｓ　Ｐの量を求める１、
実施例５゜ 血清中のβ−Ｍ　Ｓ　Ｐ　９度 正常ヒト血清中のβ−Ｍ　Ｓ　Ｐを測定した。この結果
を表に示す。

実施例６゜ 酵素標識抗β−Ｐ１１ｓ　ｐ抗体 Ｎａｋａｎｅらの方法（Ｊ、　Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ、　
Ｏｙｔｏｃｈｅｍ、　。

２２．１０８４　、（１９７４））に従ってペルオキシ
ダーゼ標識抗β−Ｍ　Ｓ　Ｐ抗体を作製した。

ノーなわち、ペルオキシダーゼ（シグマ社製。

Ｔｙｐｅｄ）　１０　ｍｇを、０．３　Ｍ炭０２水素ナ
トリウム２ｒｅにＭｉＰｆｉ後、１χフルオロジニトロ
ベンゼン（エタノール溶液）を０．２　ｍｅ加え、室温
で６０分間帽拌した。その後、０．０８　Ｎ４の過ヨウ
素酸ナトリウム、２　ｍｅを添加し３０分間（１゛Ｊ拌
、さらに０．．１　ｎ　Ｍ　エチレングリコールを２ｒ
／！加え、６ｏ分間反応さ′Ｕた。次いでこの反応液を
１．０００　ｆで１ｏ分間速心し、その上清をｏ、　ｏ
　ｉ　ｐ、を炭酌ナトリウム綬備液（ｐｌ＋　９．５）
で４℃にて２０時間透析し、活性化ベルメキシダーゼを
得た。

一方、抗β−ＭＳＰ血清がらＩ）ＥＡＥアフィゲルフル
ー（バイオ拳ラッド社製）を用いて、ＩｇＧを分画し、
そのＩｇＧ１０〜を１　ｍｅの炭酸ナトリウ＾ａｍ液（
０，０１Ｍ　、　ＰＩ（９，５＞に溶解し、同じ紛衝液
で４℃、２０時間透析したのち、これを前記活性化ペル
オキシダーゼ溶液と混合し、室温にて３時間反応させた
。さらに、ｉｔ’ｂこのペルオキシダーゼとペルオキシ
ダーゼ標餉抗β−Δ１８Ｐ抗体とを公序するため、セフ
ァデックスＧ　−２００、（７アルマシア社１’Ｊ、カ
ラム２　ｘ　８０　ｃｔｎ　）にて浴出液としてｏ、　
ｏ　ｉ　）、４リンｉ？」１液（ｐａｌ　７．４　）を
用いゲルろ過し、ペルオキシダーゼ標識抗β−Ｍ　Ｓ　
Ｐ抗体を得た。

実施例７゜ 抗体付着ポリスチレンボール 抗β−Ｍ　Ｓ　Ｐ　Ｉ’ｌｌ　ｉ’ｉ’Ｊから得たＩｇ
Ｇを１７’ｌＳｌ　／　ｍｅになるように０．０１心、
１リン酸塩緩衝液（ｐｉｔ　７．４　）に溶解した。こ
のＩＩＴＯ１？Ｆ液２０　ｖｔｅに、エタノールおよび
０．　ＯＩ　ＩＩＪ　！Ｊ　ンｆｅｅ　ｉＲ緩狸ｓ　Ｎ
’ｌ　（ｐＨ７，４）　テ洗浄シタポリスチレンボール
（１／４インチ）５０個を浸し、４℃で１８時間反応さ
せた。その後０．０１　Ｍリン酸塩緩衝液（ｐＨ４７，
４）で４回洗浄し、１％ウシアルブミン（シグマ社製）
および０．０５％チッ化ナトリウムを含む０．０１Ｍリ
ン峻塩緩街液（声１ＭリンＯ塩縫前液（ｐｔｌ　７．４
　）で洗浄したのち用いる。

実施例８゜ 酵素免疫反応による血清中のβ−ｂ＋　Ｓ　Ｐ　４ｑ度
測定 プラスチックチューブに０．１％ウシアルブミン（シグ
マ社Ｎ）および０．０５％トライトン−Ｘ１００（和光
純桑製）を含む０．０１　Ｍリン【：セ塩紗１１ｉ液Ｑ
、　５　＊（！と血清０．１　ｒｎ、ｅを加え１１′）
拌後、抗体イ”Ｉ’　ｉｆｆポリスチレンボール１個を
入れ、３７℃で１時間反応させる。次いでポリスチレン
ボールる一上記ＰＡ″９ｈ液で洗浄した後、更に上記緩
衝液０．５　ｍ、ｅとベルメキシダーゼ標識抗β−ＭＳ
Ｐ抗体０．１１ノ＋４を加え３７℃で１時間反応させる
。次いでポリスチレンボールを上記緩衝液で洗浄後、別
のプラスデックチューブに入れ、０．ｌ５Ｏ−７二二レ
ンジアミンＷ酸塩を含む０．０５　Ｍリン酸塩緩ｆｉｆ
ｆｉ液（ｐＨ７，２）　０５　ｙｔｌ！と０．００３％
過酸化水素溶液（１５７を加え、３７℃で１時間反応さ
せる。その後０．　Ｉ　Ｎ　（：ｉｆｔ、　酸２ｒｙｅ
を加えて反ｈ１メを停止させた後、４９２ｎｒｎ、にお
ける吸光度をｉ別室しイ３量綿からβ−Ｍ　Ｓ　Ｐ濃度
を求める。

【図面の簡単な説明】

第１図は、前立腺疾患患者２６例の血清中ＰＡＰとβ−
Ｍｓ　ｐ　（７）ｇ：’ｉ度を測定した結果を示す。図
中のけＩ）　Ａ　Ｐの正′帛値の上限を示ず。また■は
β−Ｍ　８　Ｐの正常値の上限を示ず。 １゛、“ｒ　ｉｉ’ｌ’出ｐｆｉ’ｊ人　　原　　　三
　部（はか１名） 図面の浄書（内容會こ変更なし） 笛　−図 ・−ｍ−前立月蝦月巴大ル堵、遜 ｏ−−−罰立謀Ａ患者（泊庫釣） 手続補正ＩＦ　（方式） 昭和５７年１２月）Ｉｆ日 特許庁長官　　若　杉　和　夫　　殿 １、事件の表示 昭和５７年特許願第１４７７３１号 ２、発明の名称 前立腺疾患診断用組成物 ３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 福岡県太宰府市太宰府３４ｏ６の３０ 脂　　　　　　三　　部 （ほか１名） ４、代理人 ；σ〉１−１株式会、１２戊 昭和５７年１１月１２０ （発送日　昭和５７年１１月３０日） 図　　面 ７、補正の内容 別紙のとおり

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）少なくとも抗β−Ｍｆ９ｒ抗体を含むことを特徴
   とする前立腺疾患診断用組成物。
2. （２）前記抗β−Ｍ　８　Ｐ抗体が、ラジオイムノアッ
   セイ、ｆ’ｌ￥　’Ｎイムノアッセイまたはティ光イム
   ノアッセイのための標識物質で標識されている特れてい
   る特許請求の範囲毎１項≠耕記載の組成物。