JPS5946219A - 制癌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、｛１１♂ｔ」古式： ％式％ （ただし、式中、Ｒ　ｌ：　ｔ−＋ま／ＣけＣＨ，、　
’｛！：ー示ず）で表わさｔｌるビエリザイノンｉ　Ｐ
ｉｅｒｉｃｉｄｉｎ　Ｉ類を有効成分として含有するこ
とを’ｌｌＩ”　（ｉ”ｔ．とする′ＩＪｒ現なｉｌｉ
ｌｌ　１：Ｉ／ノ剤に関するものである。 従来、Ｊｉ’ｉ’ｉ化学療法剤として、アルキル化剤（
ナイトレノエンマスタード類、エチレンイミン１，自、
スルホン酸エステル類）、代謝拮抗物質Ｃ葉酸拮抗剤、
プリン拮抗剤．ビＩＪ　ミノン拮抗剤）、ｌＩｔＬ物性
Ｍ　分裂毒（コルセミド，ビンプラスチン等）、抗生物
ｆｉｔ　（ザルコマイシン、カルチノフイリ７。 マイトマイシン等）、ホルモン類（副腎ステロイド、男
性ホルモン．女性ホルモン）　Ｍ　ヒ，ｌｒルフィリン
錯１語（マーフィリン、ｃｏｐｐ）等が用いられている
。しかしながら、その殆んどは、６１１１胞毒帖の物’
Ｉ’■であり、重大な副作用を呈するため、低毒性でｔ
、ｅ　７また開局活性を有する制御＋ｖｉ剤の開発が強
く望−まれでいる。 そこで、本発明者ら（は、上記のＪＪ’ｑ旨に鑑み、１
（（４ｉｊ性で１ｌｉｌｌ　Ｊ＋’ｌ’ｉ活性を有する
物質について探索し、鋭；（ｊ冒１ノＦ究の結果、前記
一般式を有するピエリザイジン（Ｐｉｅｒｉｃｉｄｉｎ
　ｌ類が、動物の肺癌細胞に対して分化誘導活性を有す
ることを新たに見出し、且つ該物′肖が著Ｌ　＜低濃度
且つ広い濃度範囲で映れた制ｈＶ＋活性を有することの
新た々知見をイ！ｔて、本発明の制癌剤を完成するに至
った。本発明の１ｌｉｌｌ癌剤の有効成分け、人、家畜
、犬、ねこ等の混血動物に対する僕ねた熱化学療法剤と
なり得るものである。 ピエリサイノノ類は、放ＩＩＪｉｌ菌ストしブトミセス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　）　　属に属するストレ
プトミセスｕ・モパラエンンスＬ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ　ｍｏｂａｒａｅｎｓｉｓ１２　７　、　　５　
７　６　（　１　９　６　３　）　、　　Ｙｏｓｈｉｄ
ａ　Ｓ．、　ａｎｄ本発明のｉｌｉｌｌ　Ｊ・、？ｉ削
Ｑ丁１、経［１及び非経Ｉ’ｌｌジＩＪのいずＪｌも使
用可能であり、経「１没υする」↓↓合Ｑー１，軟・映
カプセル剤又け１６１：削、！Ｉｌｌ′１粒剤、純朴゛
を削、散剤と１、て投与され、非経口役すする場合に１
１水溶性！ｔＸ！′濁液、油性製剤などの皮下ゆ、いに
静脈汀射削、点滴剤及び固体状父＆：Ｉ：懸濁枯（１．
′，Ｉ液状と［７て持ｈ°１；的々粘膜吸収がイ［１持
できるように坐−１，眩のようｔｃ削）１□すで投与き
れ得る。 本発明の有効成分の製剤化し１，、！／’Ｉ’　＋／Ｉ
ｌ活性剤、賦形剤、滑沢剤、佐剤、及び必要に応じて腸
溶性製剤とするために医薬的に１ｊ′１芥１，イ！）る
皮１漠形成物゛Ｌ′ｆ、コーティング助剤等を用いて適
宜行うことができ、その貝．体側を挙げ，１１ば、次の
とも・りである。 本発明の組成物の崩壊、溶出を１す好々ら１，めるため
に、界面活性剤、例えばアルコール、エステル類、ポリ
エチレングリコール誘導体，ソルビタンの脂肪酸エステ
ル力’ｊ　ｓ　（＋ｉｆｆｆ酸化脂肪アルコール頻等の
１種父は２４重重上上添力１１することかで°きる。 寸だ、賦形剤として、例えば蔗糖，乳糖、デンチン、結
晶セルロース、マンニット、軽質無水珪ｆｉｉ９、−γ
ルミン酸マダネ／ウム、メタ珪酸アルミン酸マダイ・シ
ラノ、、合成珪酸アルミニウム、炭酸カル／ラム、炭酸
水素ナトリウム、リン酸水素カル／ラム、カル＋ｌ’ギ
／メチルセルロースカルンウム舌の１種又は２　ｆ］Ｉ
ｉ　、１″ｌ上を糾合せて添加することができる。 滑ｄ

【削としては、例えばステアリン酸マグネシウム、
タルク、硬化油等を１神又は２，（Φ以上添加すること
ができ、−また矯味剤及び矯臭剤として、Ｈ　ｔＢ７　
、サッカリン、藺、７ノニツト、オレンソ油カンゾウエ
ギス、クエン酸、ブドウ糖、メントール、ユーカリ油、
リンゴ酸等の１１°味剤、香料、着色料、ｌ呆存伺等を
含有させてもよい。 懸メｈ６剤、７！φ潤剤の如き佐剤としては，例えばコ
コナンド油、刈りーブ油、ゴマ油、落花生油、乳酸カル
シウム、ベニバナ油、大ヴリノ脂質等を含有させること
ができる。 捷だ皮膜形成物Ｔｒとして＋ＴＩ：　、セルロース、υ
ｒ’ｆ　”Ｊｌ等の炭水化物誘導体と［７て酢酸フタル
酸セルロースｆｃＡＰ）、捷だアクリル酸系共重合体，
ー塩基酸モノエステル類等の・ぎリビニル誘導体と（７
てアクリル酸メチル・メタアクリル酸共１１ｉ合体、メ
゛タアクリル酸メチル・メタアクリル酸共重合体が挙げ
られる。 捷だ、上記皮膜形成物質をコーティングするＶこ際し、
通常使月１されるコーティング助剤、例えば可塑剤の他
、コーディング操作時の架剤（１互のｔ１７７１防市の
だめの各，陣姫ツノ１］剤を添加することによって皮膜
形成剤の性″ａを改良（７たり、コーディング操作をよ
り容易なら（７めることができる。なお、有効成分を皮
膜形成物質を月１いてマイクロカブ七ル化してから賦形
剤等と１１八合１，た剤型と１７でも良い。 特に代表的な剤型における配合化は下ＳＦ２の通りであ
る。 特に好捷しい範囲 有効成分　０．１〜９０重量係　０　、３　＝　ｉ　５
重侶循賦　　形　　剤　　１０〜９９．８　　　ｌ　　
　　８５〜９９．４　　　〃滑　　（Ｊぐ　　剤　　　
　　０〜５０　　〃　　　　　　０〜２０　　　〃界面
活性剤　　　Ｏ〜５０　〃　　　　０〜２０〃皮膜形成
物’Ｅｆ０．１〜５０　　〃　　　０．３〜２０　〃’
）−’ｒに好ましい賦形剤は、乳糖、結晶セルローズ、
カルボギノメチルセルロースカルシウムである。 捷だ、投ム量は、対象肺癌を有効に治療するに十分な川
であり、腫瘍の症状、投与経路、剤型などによって左右
されるが、一般に、経口投与の場合、大人では１日当り
、約０　、０１〜１００１ｎｇ／に９体重（小人では、
ｏ　、　０１〜６０　＃Ｉｇ／に、ｐ体重）の範囲で、
その上限は好ましくは約５０１ノ！７／　ｋｇ体重、更
に好捷しくに約１０７ｎり／　ｋｇ体重程度であり、非
経口投与の場合、その上限は約１　Ｏｎｒｇ／　ｋｙ体
重程度であり、好ましくは５１１１！７　／　ｋｇ体重
、更に好ましくは２１１Ｉり／　ｋｇ一体重が適当であ
る。 次に、ビエリサイジン類の制癌活性を確認した制癌性試
験について述べる。 〔１〕フレンド白血病細胞（ｍｏｕｓｅ　ｅｒｙｔｈｒ
ｏｉｄｌｅｕｋｓｍｉａ　ｃｅｌ　ｌ、　８　Ｂ細胞）
に対する試験ＧＩＢＣＯＩＭＨＡＭのＦ−１２培地に、
１５係の牛胎児血清及び６　Ｑ　ｍ９　／　ｌのカナマ
イシンを加えたものに、２゜５　Ｘ　１０　ｃｅｌ　Ｉ
　／ｍｅと々るＪ：うにＢ８細胞を接柚し、これに所定
＊ｔの被験化合物を加える（最終容ｊｌ　５　ｍｅ　）
。 ７．５％ｃｏｚ中、３７℃７日間培養１．た後、それぞ
れオルキン（０ｒｋｉｎ　’）のベンツジン染色性によ
り染色し、染色された細胞数、す斤わち、赤血球への分
化により−＼モグロビンを・生成するようＫなった細胞
数を測定Ｉ７、分化誘導率を求める。 〔２〕マウス奇形腫細胞（ｍｏｕｓｅ　ｔｅｒａｔＯｃ
ａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌ）　　に対する試験 テラトーマ細胞をマウスの腹腔から腹腔へ移■直後、１
ヶ月経】尚したものを用いた。テラ）　−マπＩＩ＋胞
しｌ、腹腔中では初期胚に似た胚様体（ｅｍｂｒｏｉｄ
　ｂｏｄｙ　）　　という細胞塊として存在し、そハ、
らをトリプシン処理などを行うことなく用いた。採取し
た腹水中で自然沈下させて得られる胚様体をダルベコ−
変法培地、あるいはノ・ンクス液で３度洗浄後、１０係
牛脂児血清を含む培地に接オＩロシ、所定量の被験化合
物を加え、３７℃でｃｏ２７．５〜８係を含む水蒸気を
飽和して、空気中で１週間培養する。遠心分離（２００
０ｒ、ｐ、ｍ、　１０分）して得た胚様体を０．８６％
ＮａＣｔ溶液で洗浄後、ナフトールＡＳ−ＭＸホスフェ
ートとジアゾ試薬（Ｆａｓｔ１ｏｌｅｔ　Ｂ　５ａｌｔ
　）を加えて１時間室温で放置する。これを遠心分離（
２００Ｏｒ、ｐ、ｍ、　１（１分）して胚様体を分離し
、エタノールを加えて１時間室温で放置する。（未分化
の細胞は、赤く着色する）。 これを、５３５ｎｍの吸収を４１１１定し、アルカする
。 ヘキサメチレンビスアセトアミド（ＨＭＢＡ）５　ｍＭ
　　を加えた場合（アルカリホスファターゼ活性を全く
示さない。）を「４升」　とし、ＨＭＢＡを加えない場
合（アルカリホスファターゼ活性を極めて強く示す。）
を「−一」とし、分化誘導の根石を次の段階で示Ｉ７た
。 ＋十：アルカリホスファターゼ活性を全く示さない。 −１−二アルカリポスファターゼ活性’（Ｉ−ｔ−ｉと
んど示さない。 ±：アルカリホスファターゼ活性ｋ・若干示すＯ −二アルカリボスフ′アターゼ活４（ｌ・を強く示す。 一−：アルカリホスファターゼ活性を極めて強く示す。 々お、［］Ｌ　［２］についての後述の試験例では、分
化誘導作用をもって制癌活性を示（また。 動物実験として、４〜５週令のマウス（１２９系マウス
）１０匹を用い、腹腔内にマウス奇形ｌｌ１ｌｊ　、１
１１１胞約１０６ｃｅｌ　ｌ　／ｌｎｅ　ｋ接種［〜、
その後２４時間」：す８７　ｔｔｆｌ／ｋｇとなる１う
ビエリザイノノＡ　を、　２　リーン゛？山：リ　）酸
緩ｆ市縮ＭｆｐＨ７，０）＋８　：　２）とＴｗｅｅｎ
　＋　８０　（Ｄ　、　０５　％　ｌ　（界１ｒ１１活
件剤）を含む溶液で調製（７て／θ（］間投り（、。 で、その延命効果を調べる。延＠率に、次の６１′Ｃ′
１式」：す２１（め／こ。 ■ 延命率＝　−Ｘ　１００ Ｔ：処」【１１群の平均生存日数 Ｃ：対照群の平均生存日数 〔４〕マウスを用いたマウス白血病（ｍｏｕｓｅ　ｅｒ
ｙｔｈ−ｒｏｉｄ　ｌｅｕｋｅｍｉａ　Ｐ　３８’８１
１１＋物試験マウス白［ｒｌ［病、’＋、ｌｌｌ　Ｉｌ
ｌ　Ｐ　３８８　Ｓ：　［：４〕ト同様ＶＣ４〜５７ノ
ｉ令のマウス＋ＢＤＰ　Ｉ　＋に接イリ■、ビエリザイ
ノノＡを同様にｊ　日間投与Ｅ−で、その延命効果を求
めた。なお、延命率は〔３〕で用いたｉ−１算式を１１
４いた。 以下に、本発明を製剤例及び試験例によって具体的に説
明する。 製剤例１（注射・点を商剤） ピエリサイノンＡ　１０　ＩＩＩりを含有するようＶこ
粉末ぶどう糖５ｙ、ン、加えてバイアルに無菌的に外配
置７、密封した」−１窒素、ヘリウム等の不活（％ガス
を旧人して冷暗所Ｃ（保存する。使用ｒＥｆｌにエタノ
ールに溶解し、０．８５係生理的食塩水１００　ｍｅを
添加シテ静脈内注射剤と［２，１日、１０〜１０　Ｄ　
ＩＩＩｅ　召−症状に応じて静脈内注射又に１点滴で投
与する。 製剤例２（注射・点滴剤） ピエリザイノン８２　ｍ！／を用いて、製剤例１と同様
の方法に」：り軽拝用静脈内注射剤とし、１日、１０〜
１００　ｌｎｅを症状に応じて静脈内注射又は点滴で投
与する。 製剤例３（腸溶性カプセル剤） ピエリザイノンＡ５１、乳糖２．４６ｇ及びヒドロキシ
ゾロピルセルロース０．０４ｇ’ｉ−各々とり、よく混
合した後、常法に従って粒状に成形し、これをよく乾燥
して篩別してビン、ヒートンール包装々とに適した顆粒
剤を製造する。次に、酢酸フタル凸２セルロース０．５
９−及びヒドロ上シフ０ロピルメチルセルロースフタレ
ート０．５９を溶解して彼覆基拐となし、前記顆粒を浮
遊流動させつＸこの一！ｌ１１．月を被覆して腸溶性の
顆粒剤とする。この、ｔ１１成物をカプセルに充填して
腸溶性カプセル製剤１００個を製造する。 試験例１〜２ ピエリザイソノＡを用い、前記試験法〔１〕及び〔２〕
より、フレンド白血病細胞の分化誘導率及びマウス奇形
肺細胞の分化誘導活性を調べたところ、それぞノｔ１第
１表及び第２表に示す結果が得らノｔた０ 試レッジ　［列　３〜ＩＩ− ヒ１ニリリ゛イノノＡの代わりにピエリザイジ７Ｂを用
いたほかは試験例／〜）と同様に試ＩＩＩ＞を行ったｋ
ころ、そＪｌぞ、ｔ１ピエリザイノンへの場合とほぼ同
等の結果力質ＩＪらねた。 第１表 被験化合物　　　濃　　度　　　分化誘導率（μｇ−／
　！ｌｔｅ　）　　　　　（循）ピエリザイノンＡ　　
　　　４０　　　　　　　　　−４　　　　　　　５９ Ｘ１０−１ ０ ＸＩＱ−２ ０ Ｘ１０−６ ５ ４×１０−４ ５ ４ＸＩＱ−”　　　　　　（５ エタノール　　　　２５／ｌｔ〈１ １．５係ＤＭＳＯ＊ ４０ 対　　　　　照　　　　　　　　　　　　　　　　　　
〈１１比較例（Ｐｏ５ｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　）
第２表 被験化合物　　　濃　　度　　　分化誘導活性（μゾ　
／　）ｎｅ　　）　　　　　　　　　７　　　日　　目
ピエリーリ′イジンＡ　　　　　　　　　　４０　　　
　　　　　　　　　　士４　　　　　　　　　　　　　
」− ４Ｘ１０’　　　　　　＋」− ４Ｘ１０−２　　　　＋＋ ４Ｘ１０−５　　　　　＋＋ ４Ｘ　１０＝　　　　　十−１− ５ ４Ｘ１０士 エタノール　　　　１Ｑａｌ−− ＨＭ８Ａ　　　　　　　　５ｍＭ　　　　　＋十対　　
　　　照　　　　　　　　− ＊比較例（Ｐｏ５ｉｔｉｖｅ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　）　＝
ｚギサメチレンビスアセトアミド 試験例５ ピエリザイノンＡｆ用い、前記試験法〔３〕より、マウ
ス奇形肺に対する動物実験ンー行ったところ、■＝２１
．３日、Ｃ二１８　、０　Ｅｌであり、Ｔ／ＣＸ１００
＝１１８．３　（循）の延命効果がイＨらｉｌ。 た。 試験例６ ビエリサイノンへを用い、前記試験法〔４〕より、マウ
ス白血病（ｍｏｕｓｅ　ｅｒｙｔｈｒｏｉｃｌ　ｌｅｕ
ｋｅｍｉａＰ３″′８８）に対する動物実験を行ったと
ころ、■＝１２．０日、Ｃ＝１０．６日であり、Ｔ／Ｃ
Ｘ１００＝１１３．２（係）の延命効果が得らノ１．た
。 上記試験例の結果から明らかなように、ピエリザイソノ
類は試験管内試験（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｔｅｓｔ　）に
おいて癌細胞に対して、極めて低濃度、目つ広範囲の濃
度で正常細胞への分化誘導作用を示すことから、毒性の
少ない優れたｆ１７１１　＃ｔ？ｉ活性を示し、υｙに
マウスを用いた動物試験（ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｔｅｓｔ　
）　　においても同様に極めて低濃度で優ハ、た延命効
果を示したので、本発明の制癌剤は、！ｎ　ｖｉｔｒｏ
　　及びｉｎ　ｖｉｖｏとの相関１つにに優れた制癌剤
であることが立証された。 特許出願人　理化学研究所

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）　　１ｆ’ｊ造１（５： １４ １　　２３４　　５　　６７８９１０１１１２　　１６
   （た、たし、式中、ＲはＨまたはＣＨを示す）５ で表わさＩ］るピエリサイノン（Ｐｉｅｒｉｃｉｄｉｎ
   　Ｉ類を有効成分と１−で含有することを！ｔ−ｂ”徴
   とする１ｌｉｌｌ癌剤１、
2. （２）非経口投与形態による特許請求の範囲第１項記載
   の制癌剤。
3. （３）経口投与形態による特許請求の範囲第１項記、Ｉ
   夕の制り＋’ｈ剤。