JPS5978151A - 新規ペプチド及びこれを含有する抗精神分裂病薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なペプチド及びこれを含有する抗精神分裂
病薬剤に関する。

本明細書において、アミノ酸、ペプチド、保護基、活性
基、その他に関し略号で表示する場合ＩＵＰＡＣＸＩＵ
Ｂの規定或いは当該分野における慣用記号に従うものと
し、その例を次に挙げる。但し、Ｌｓｐ・・・アスパラ
ギン酸 Ｔｙｒ・・・チロシン Ｍｅｔ・・・メチオニン Ｇｌｙ・・・グリシン Ｔｒｐ・・・トリプトファン Ｐｈｅ・・・フェニルアラニン ｐＧｌｕ・・・ピログルタミン酸 本発明のペプチドは新規であって、下記一般式％式％ 〔式中ＲはＨＯＯＣ（ＣＨ２）　ａ　ＣＯ−又はｐＧｌ
ｕを示す。〕本発明のペプチドは、優れた中枢神経抑制
作用を有している。即ち、本発明のペプチドは、甲状腺
刺激ホルモン放出ホルモン及びメタアンフェタミン投与
によるマウスの自発運動亢進作用に対して抑制作用を示
し、ベンドパルビタール及びハロタン投与によるマウス
の麻酔時間を有意に延長し、マウスのアポモルフインに
よる登撃行動やメタアンフェタミンによる雷同症を抑制
し、ラットのある脳部位においてドーパミン代謝を亢進
する。また、モノアミン酸化酵素阻害剤であるパルギリ
ンとＬ−ドーパ投与によって生じる興奮反応に対する試
験、所謂Ｌ−ドーパ増強試験において、本発明のペプチ
ドはマウスのし一ドーパ増強反応を抑制する。従って本
発明のペプチドは抗ドーパミン作用を有することは明ら
かである。本発明のペプチドに類似するペプチドとして
は、例えば下記式（２）で表わされるペプチド（以下こ
れを「ＣＣＫ−８」という）が知られている。

Ａｓｐ−Ｔｙｒ（ＳＯ３Ｈ）−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ　−Ｔｒ
ｐ　−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ２ｆ２）しかしな
がら、（イ）本発明のペプチドはマウスのアポモルフイ
ンによる登撃行動を抑制するが、ＣＣＫ−８はそれを抑
制しない点、（ロ）ＣＣＫ−８は本発明のペプチドのよ
うにラット脳内ドーパミン代謝を亢進しない点、（ハ）
ドーパミン放出量の減少によって惹起されると考えられ
ているあくび行動の実験において、ＣＣＫ−８は全くあ
くび行動を惹起しないのに対して、本発明のペプチドは
あくび行動を惹起する点及びに）ドーパミン受容体刺激
剤であるアポモルフイン投与によって生じるあくび行動
を本発明のペプチドは抑制するが、ＣＣＫ−８は抑制し
ない点より、本発明のペプチドはＣＣＫ−８に比しより
強い抗ドーパミン作用を有するものである。それ数本発
明のペプチドは、従来の抗精神分裂病薬では効果の見ら
れない慢性患者の諸症状特に自閉的な症状に対してＣＣ
Ｋ−８に比し効力が強いものと期待される。また副作用
の点においても、ＣＣＫ−８は動物実験においてカタレ
プシー惹起作用を発現するのに対し、本発明のペプチド
は８− カタレプシー惹起作用が認められないことから、従来の
抗精神分裂病薬の副作用として問題となっている錐体外
路性の副作用は発現しないと考えられる。従って本発明
のペプチドは、精神分裂病の治療薬として極めて有効で
ある。

上記一般式ｆｌ）で表わされるペプチドは、ペプチド合
成に通常用いられる方法、具体的には、［ザペプチド（
Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　）　ｊ第１巻（１９６６年
）［５ｃｈｒ２ｉｄｅｒ　ａｎｄ　Ｌｕｈｋｅ著、　Ａ
ｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ　。

Ｎ６ｗ　Ｙｏｒｋ　、　Ｕ、　Ｓ、　Ａ、　］あるいは
「ペプチド合成」し東屋ら著、丸善株式会社（１９７５
年）〕に記載される如き方法に従い、たとえばアジド法
、クロライド法、酸無水物法、混酸無水物法、ＤＣＣ法
、活性エステルＦｆｉ（Ｐ−ニトロフェニルエステル法
、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル法、シアノメ
チルエステル法等）、ウッドワード試薬Ｋを用いる方法
、カルボジイミダゾール法、酸化還元法、ＤＤＣ／アデ
ィティブ（ＨＯＮＢ、　ＨＯＢｔＸＨＯ５ｕ　’）４− 通常一般式＋１）のペプチドは、上記した一般のポリペ
プチドの合成法に従い、例えば末端アミノ酸に順次１個
づつアミノ酸を縮合させる所謂ステップワイズ法によっ
て、又は数個のフラグメントに分けてカップリングさせ
ていく方法によって製造される。より詳細には上記ペプ
チドは、その結合の任意の位置で２分される２種のフラ
グメントの一方に相当する反応性カルボキシル基を有す
る原料と、他方のフラグメントに相当する反応性アミノ
基を有する原料をペプチド合成の常套手段で縮合させ、
生成する縮合物が保護基を有する場合、その保護基を常
套手段で脱離させることにより製造し得る。尚一般式＋
１１のペプチドを製造する反応工程でアスパラギン酸を
用いる場合、これは通常保護しておくのが望ましい場合
が多く、最終工程では、通常ペプチドの構成アミノ酸残
基の少なくとも一つが保護された保護ペプチドからすべ
ての保護基を脱離する。

また上記一般式ｆ１）のペプチドの合成反応工程では、
反応に関与すべきでない官能基は、通常の保護基により
保護され、反応終了後該保護基は脱離される。更に反応
に関与する官能基は通常活性化される。之等各反応方法
は公知であり、それに用いられる試薬等も公知のものか
ら適宜選択し得る。

アミノ基の保護基としては、例えばカルボベンゾキシ、
ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（以下「Ｂｏｃｊと
略す）、ｔｅｒｔ−アミルオキシカルボニル、インボル
ニルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカ
ルボニル、２−クロル−ベンジルオキシカルボニル、ア
ダマンチルオキシカルボニル、トリフルオロアセチル、
フタリル、ホルミル、０−ニトロフェニルスルフェニル
、ジフェニルホスフィノチオイルなどが挙げられる。カ
ルボキシル基の保護基としては、例えばアルキルエステ
ル（例メチル、エチル、プロピル、ブチル、ｔｅｒｔ−
ブチルなどのエステル基）、ベンジルエステル、ｐ−ニ
トロベンジルエステル、ｐ−メトキシベンジルエステル
、ｐ−クロルベンジルエステル、ベンズヒドリルエステ
ル、カルボベンゾキシヒドラジド、ｔｅｒｔ−ブチルオ
キシカルボニルヒドラジド、トリチルヒドラジド等が挙
げられる。

カルボキシル基の活性化されたものとしては、例えば対
応する酸クロライド、酸無水物又は混合酸無水物、アジ
ド、活性エステル（メチルアルコール、エチルアルコー
ル、ベンジルアルコール、ペンタクロロフェノール、ｐ
−二トロフェノール、Ｎ−ヒドロキシサクシンイミド、
Ｎ−ヒドロキシベンズトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシ−
５−ノルボルネン−２，３−ジカルボキシイミド等との
エステル）等が挙げられる。尚ペプチド結合形成反応は
、縮合剤例えばジシクロへキシルカルボジイミド、カル
ボジイミダゾール等のカルボジイミド試薬やテトラエチ
ルピロホスフィト等の存在下に実７− 施し得る場合もある。

上記一般式ｆｔ）のペプチドの好ましい製造例を示せば
以下の通りである。

一般式ｆ１＋の化合物は一般式（３） Ｒ−Ａｓｐ　−Ｔｙｒ　−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　
−Ｍｅｔ−Ａｓｐ　−Ｐｈｅ　−ＮＦＴ２　　ｆ３１〔
式中Ｒは前記に同じ］ で表わされるペプチドにピリジン−無水硫酸複合体を反
応せしめ硫酸エステル化し、更に脱塩・精製することに
より製造される。

本発明のごとき、一般式（１）で示されるように、アシ
ル基（ＨＯＯＣ（ＣＨ２’）　ａｃＯ−’）又はｐＧｌ
ｕがＮ末端に位置し、α−アミノ基がマスクされている
化合物に詔いては、硫酸エステル化反応は、最終段階で
行うのが好ましい。すなわち一般式（３）のペプチドに
直接硫酸エステル化反応を行い、反応後速かに精製して
一般式ｆｌ）のペプチドを得る方法が、保護基の付いた
中間物質に硫酸エステル化反応を行い、その後脱保護、
さらにアシル化又はペプチド鎖延８− 長する既知の方法に比べ、硫酸エステル結合の分解を最
少に押え、副産物を少なくする利点があり、より高い収
率とよい純度の製品が得られる。

一般式（３）のペプチドは公知のペプチド合成法に従っ
て製造されうる。例えば、保護へキサペプチドＢｏＣ−
Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ　−Ｐ
ｈｅ　−ＮＨ２（Ｍ、　Ａ。

０ｎｄｅｔｔｉ　　　ｅｔ、ａｌ、　　　　Ｊｏｕｒｎ
ａ／　　ｏｆ　　　ｔｈｅ　　Ａｍｅｒｉｃａｎ　　Ｃ
ｈａｎｉｃａ／５ｏｃｉｅｔｙ　　９−２．１９５　（
１９７０））をトリフルオロ酢酸等の酸で脱保護し、Ｒ
Ａｓｐ’ｈｒ　−ＮＨＮＨ２［Ｒは前記に同じ１をアジ
ド法により縮合することにより製造される。またオクタ
ペプチドＨ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ　−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ−Ｔ
ｒｐ　−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＭＨ２−（Ｍ、Ａ
、０ｎｄｅｔｔＩ　ｅｔ、　ａｔ。

Ｊｏｕｒｎａ／　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｃ
ｈｅｍｉｃａ／　５ｏｃｉｅｔｙ　９２．　１９５（１
９７０））に、無水グルタル酸もしくはピログルタミン
酸の活性エステルを反応させることにより製造される。

硫酸エステル化の反応は既に公知であり、例えば一般式
（３）のペプチドをジメチルホルムアミド、ピリジン等
の不活性溶媒中に溶解し、これに約１０倍量のピリジン
無水硫酸複合体を添加し反応させる方法によって行われ
る。反応は最初低温で行い、その後室温にて１５〜２０
時間行うのが好ましい。

この硫酸エステル化ペプチドの精製法としては、ＤＥＡ
Ｅ−セルロース等のイオン交換クロマトグラフィー、セ
ファデックスＬＨ−２０，セファデックスＧ−２５等の
分配クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー
等により容易に行われる。

また特許出願公開昭５６−４９５３号で示される方法、
すなわち硫酸エステル化反応液を濃縮し、その残査にメ
タノール、ブタノール、エタノール、ジメチルホルムア
ミド、水等の溶媒およびカルシウム、亜鉛等の二価金属
水溶性塩の水溶液を加えて、ペプチドアミドスルフェー
トエステルを二価金属塩として安定化し、同時に未反応
ピリジン・無水硫酸複合体より生ずる硫酸を不溶性の硫
酸二価金属塩として沈殿除去した後、精製する方法も好
適である。

斯くして得られた一般式＋１１の化合物は、必要により
医薬的に許容され得る、例えばナトリウム、カリウム等
のアルカリ金属塩、カルシウム等のアルカリ土類金属塩
、トリエチルアミン、アンモニウム等のアミン塩等とす
ることができる。

本発明の上記一般式（１）で表わされるペプチドを有効
成分とする抗精神分裂病薬剤は、通常公知の製剤的担体
と共に製剤組成物の形態とされる。担体としては使用形
態に応じた薬剤を調製するのに通常使用される充填剤、
増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤
等の稀釈剤あるいは賦形剤を例示できる。

上記抗精神分裂病薬剤の投与単位形態としては各種の形
態を治療目的に応じて選択でき、その代表的なものとし
て錠剤、乳剤、散剤、液剤、懸濁１１− の形態に成形するに際しては、担体として例えば乳糖、
白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖液、尿素、デンプン、
炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等
の賦形剤、水、エタノール、プロパツール、単シロップ
、ブドウ糖、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメ
チルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸
カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤、乾燥デン
プン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナリア
末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ツウイン、
ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド
、デンプン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン、カカ
オバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、第四級アンモニ
ウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グ
リセリン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオ
リン、ベントナイト、コロイド゛状ケイ酸等の吸着剤、
精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、マクロゴール
、１２一 固体ポリエチレングリコール等の滑沢剤等を使用できる
。乳剤の形態に成形するに際しては、担体として例えば
ブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カ
オリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガン
ト末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナリア、
カンテン等の崩壊剤等を使用できる。更に錠剤は必要に
応じ通常の剤皮を施した錠剤例えば糖衣錠、ゼラチン被
包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重
錠、多層錠とすることができる。坐剤の形態に成形する
に際しては、担体として例えばポリエチレングリコール
、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステ
ル類、ゼラチン、半合成グリセライド等を使用できる。

注射剤として調製される場合には液剤、乳剤及び懸濁剤
は殺菌され且つ血液と等張であるのが好ましく、これら
液剤、乳剤及び懸濁剤の形態に成形するのに際しては、
稀釈剤としてこの分野に於いて慣用されているもの例え
ば水、エチルアルコール、プロピレングリコール、エト
キシ化インステアリルアルコール、ポリオキシ化イソス
テアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビット、
ソルビタンエステル等を使用できる。なおこの場合等張
性の溶液を調製するに充分な量の食塩、ブドウ糖あるい
はグリセリンを薬剤中に含有せしめてもよく、また通常
の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤、保存剤等を更に必要
に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他
の医薬品を本発明薬剤中に含有せしめてもよい。

本発明の抗精神分裂病薬剤中に含有させるべき一般式＋
１）のペプチドの量は特に限定されず広範囲に適宜選択
されるが、通常全組成物中１〜７０重量％とするのがよ
い。

また上記抗精神分裂病薬剤は、その使用に際し特に制限
はなく各種形態に応じた方法で投与される。例えば錠剤
、乳剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤の
場合には経口投与され、注射剤の場合には単独であるい
はブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内
投与され、さらに必要に応じて単独で筋肉内、皮肉、皮
下若しくは腹腔内投与され、坐剤の場合には直腸内投与
される。また鼻腔投与剤の場合には鼻腔に投与される。

本発明の抗精神分裂病薬剤としての投与量は使用目的、
症状等により適宜選択され、通常一般式ｆｉｌのペプチ
ドを１日当り４０　ｆｔ９〜２ｔｚＬｙ／ｋ　ｆ／程度
含有する製剤組成物を３〜４回に分けて投与すればよい
。

製造例Ｉ ＨＯＯＣ（ＣＨｇ　）　ａα）−Ａｓｌ）　ＴＶｒ　（
ＳＯａＨ）−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ　−Ａ
ｓｐ　−Ｐｂｅ−ＮＩ２の製造法。

１）　　Ｈ−Ａｓｐ　−Ｔｙｒ　−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　
−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ　−（’ｈｅ−Ｎ）Ｉ２
１６．５ｙをトリエチルアミン４．４　ｍ　ｌを含むジ
メチル１６− ホルムアミド２００７７ＬＡ’に溶解し、水冷下無水グ
ルタル酸８．５５ｙを添加する。４°Ｃで１７時間撹拌
後溶媒を減圧留去し、ＩＮクエン酸で同化、水洗する。

メタノール”ｌｏｏｍｌより再結晶し、Ｇｌ　ｔ　−Ａ
ｓｐ　−Ｔ’ｌｒ　−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−
Ｍｅｔ　−Ａｓｐ　−Ｐｈｅ　−ＮＩ２１７．２６　ｙ
を得る。収率９４．６％ ■）上記１）で得られたアシル化ペプチド１．１８ｙを
ジメチルホルムアミド２０ｍ１およびピリジン２ｍｌに
溶解し、水冷下ピリジン無水硫酸複合体１．５９ｙを添
加し、０°Ｃで３０分、更に室温で２０時間撹拌する。

反応液を減圧濃縮し、残液に０．０５Ｍ炭酸アンモニウ
ム水溶液（５０ｍＪ’）を加え、アンモニア水によりｐ
Ｈを８．５に調製する。その溶液をＤＥＡＥ−セルロー
スカラム（４Ｘ１２）クロマトグラフィーにより精製す
る。０．０５Ｍ炭酸アンモニウム−重炭酸アンモニウム
緩衝液（ｐＨ８，５）　１．５１で吸着・洗浄し、０．
２Ｍ同緩衝液（ｐ）Ｈ８，５）２　Ｉ！で溶出する。活
性画分を集め、溶媒を濃縮し、凍結乾燥ｌ　６− することにより、ＨＯＯＣ（ＣＨ２）８　Ｃｏ　−Ａｓ
ｐ−Ｔｈｒ（ＳＯＢＨ）−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ
　−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ　−Ｐｈｅ−ＮＩ（２（以下「ペ
プチドＡ」という）を８０１ｍｙ（収率６６．４％）を
得る。

元素分析値　（ｃｓ４　Ｈ６８ＮＩＯｏｌｏ　ｓａ　−
［１８・４Ｈ２０として）計算値：　　Ｃ，４８，１７
％ｉＨ，５，９１％ｉＮ、１１．４４％測定値：　　Ｃ
，４７，９７％；Ｈ，５，６８％ｉＮ、１１．７３％酸
分解によるアミノ酸分析値 Ａｓｐ　１．９８（２）、　　Ｇｌｙ　１．０５ｆｌ）
、　　Ｍｅｔ　２．０８（２）Ｔｙｒ　Ｏ，９８ｆｌ）
、　　Ｐｈｅ　Ｏ，９４ｆｌ）赤外吸収スペクトルより
１０５０　ｃｔｒｘ’に硫酸エステルに特異的な強いピ
ークが見られる。

製造例２ ｐＧｌｕ　−Ａｓｐ　−Ｔｙｒ　（ＳＯｇＨ）−Ｍｅｔ
　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ　−Ｐｈｅ−
Ｎｔ（２の製造法。

１）　　Ｂｏｃ　−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ｍ
ｅｔ　−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＩ２１０．２７ｙをエタン
ジチオール０．２ｍｌ存在下トリフルオロ酢酸３０ｍ１
に溶解し、室温で３０分間処理する。無水エーテル２０
０ｍｊ’を加え固化し、濾取乾燥する。

このへキサペプチドのトリエチルアミン１．６３ｍ１を
含むジメチルホルムアミド（１００ｍｌり溶液に、ｐＧ
ｌｕ　−Ａｓｐ−４ｙｒ　−ＮＨＮＨ２（ｍｐ　２１３
−２１５°２元素分析ｃｔａ　Ｈ２８Ｎ５０７　Ｈ２Ｏ
として、計算値：　Ｃ，４９，２０％；Ｈ，５，７３％
；　Ｎ、　１５．９４％測定値：　Ｃ，４９，０８％；
Ｈ，５，５１％ｉ　Ｎ、　１５．９４％）７．３２ｙを
亜硝酸イソアミルによりアジド体として反応する所謂ア
ジド法により縮合する。溶媒を減圧留去し、残液にＩＮ
クエン酸を加え固化し、水洗する。ジメチルホルムアミ
ド−メタノールより再結晶して、ｐＧｌｕ　−Ａｓｐ−
Ｔｙｒ　−Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｔｒｐ　−Ｍｅｔ　−
Ａｓｐ　−Ｐｈｅ−Ｎｌ２を９．６６ｙ得る。収率７０
．９％ ＩＩ）　上記１）で得られたノナペプチド４．７０ｙを
ジメチルホルムアミド１００ｙｒｔｌ及びピリジン１０
１ｎｌに溶解し、水冷下ピリジン無水硫酸複合体６．３
７ｙを添加し、０°Ｃで３０分間、さらに室温で１７時
間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、残渣に０．０５Ｍ炭
酸アンモニウム２００ｍ１！を加え、アンモニア水を添
加してｐＨを８．５に調製する。その溶液を製造例１と
同様にＤＥＡＥ−セルロースカラム（５Ｃ７７ＺＸ２５
　ｃｍ　）イオン交換クロマトグラフィーにより精製す
る。活性画分を集め溶媒を濃縮し、凍結乾燥することに
よりｐＧｌｕ　−Ａｓｐ　−’Ｉ７ｒ　（ＳＯａＨ）−
Ｍｅｔ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ　−Ａｓｐ　−Ｐｈ
ｅ−Ｎ）１２　（以下「ペプチドＢ」という）８．３０
９ｙ（収率６６．０％）得る。

元素分析値　Ｃ５４）Ｔａ’ｒ　！’Ｊｏ　ｏｔｓ　ｓ
ａ・ＮＨＢ・４Ｈ２０として計算値：　Ｃ，４８，２８
％；Ｈ，５，８５％ｉ　Ｎ、　１２．５１％測定値：　
Ｃ，４８，２３％ｉＨ，５，４５％ｉ　Ｎ、　１２．３
９％酸分解によるアミノ酸分析値 Ａｓｐ　１−９７　＋２１．　　Ｇｌｕ　Ｏ，９８（１
）＋　　Ｇｌｙ　１．０４　ｆｌ）Ｍｅｔ　２．１５（
２１，Ｔｙｒ　０．９７ｆｌＬ　　Ｐｈｅ　Ｏ，９４ｆ
ｌ）赤外吸収スペクトル：　１０５０　ｃｍ−”薬理試
験 ＋１１　　甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）
の自発運動亢進作用に対する効果 ｄｄｙ系雄性マウス（１８〜２４．５ｙ）を使用する。

１９− マウスをアニメツクス・メーターの上に設置した透明な
アクリル製ケージ（２６Ｘ３７Ｘ１１ｃｍ）内に入れる
。マウスをそのまま２時間馴化させることによって、マ
ウスの自発運動活性を十分に低下させた状態で実験を行
なう。馴化終了後、マウスにペプチドＡ１ペプチドＢ又
は溶媒（１ｍ？／ｍｌの炭酸水素ナトリウムを含む生理
食塩水）を皮下投与し、３０分経過後にＴＲＨ５ｍ？Ａ
ｆ／を腹腔内投与する。ＴＲＨ投与後６０分間の運動量
を測定する。

尚統計学的処理にはスチューデントのｔ試験を使用する
。結果を下記第１表に示す。

第　　１ 投与量　　　運動量 供試化合物　　　　（−ｙ／ｋｙ）　　６０分当りの回
数０、１　　　　　　９３６±１１５ ペプチドＡ　　　　　Ｏ，３６１３±１１４１　　　　
　　　１４８±　３４ ０．０３　　　　１００９±１６５ ペプチドＢ　　　　　０．１　　　　　６０１±　７８
０、３　　　　　　６２６±１４３ −２　〇− 第１表からペプチドＡ及びペプチドＢは、ＴＲＨによる
自発運動の元通を抑制することがわかる。

（２）　　アポモルフインによる登撃行動に対する効果
ｄｄｙ系雄性マウス（２０〜３０ｙ）を用い、一群１０
匹として実験を行なう。直径２ｍｍの棒を１０ｔｒＬｔ
ｎの間隔で垂直にはりめぐらした直径１２ｃｔｒＬ、高
さ１４ｃｍの円筒形の個別ケージにマウスを入れ２時間
放置する。ペプチドＡ１ペプチドＢＸＣＣＫ−８及び前
記溶媒を皮下投与し、３０分後にアポモルフイン０．７
５ｍｙ／ｋｙを皮下投与する。アポモルフイン投与後１
０分、１５分、２０分、２５分、３０分、３５分及び４
０分目からそれぞれ１分間観察し、この７つのスコアを
合計する。尚実験はすべて防音室内で行ない、スコアは
次のようにしてつけた。

０：四肢とも床につけている １：前肢を棒にかけている ２：三本以上の肢が棒にかかつている また統計学的処理にはスチューデントのｔ試験を使用す
る。結果を下記第２表に示す。

第　　２　　表 第２表からペプチドＡ及びペプチドＢは登拳行（３）　
　脳内アミン代謝に及ぼす効果ウィスター系雄性ラット
（１８０〜２２０ｙ）を非絶食で使用する。ペプチドＡ
及びペプチドＢを１　ｍ　ｙ／ｋｙの投与量で皮下投与
し、１時間後に頭部にマイクロウェーブを照射し、脳内
アミン代謝物を抽出する。まず組織を１Ｍギ酸でホモゲ
ナイズし、２０．０００Ｘｐにて２０分間遠心分離後、
上清１ｆｎｌを酢酸エチル５ｍ／と共に振とうし、酢酸
エチル層中の３，４−ジヒドロキシフェニル酢酸（ＤＯ
ＰＡＣ）、ホモバニリツクアシツド（ＨＶＡ　）及び５
−ヒドロキシインドール酢酸（５−ＨＩＡＡ）をＨＰＬ
Ｃで分析する。

分析条件は次の通りである。即ち、分離用カラムにＣｈ
ｅｍｃｏｓｏｒｂ　、　５−０ＤＳ、　２０　ｃｍ×４
．６　ｍｍ　ｌ　、　Ｄ、を用い、移動相（０，１Ｍ　
ＫＨ２ＰＯ４（ｐＨ５，０）−５ｍＭＥＤＴＡ−２Ｎａ
　−５％アセトニトリル）を１ｍ１１分の流速で流した
。電気化学検出器の酸化電位を十〇、８ｖに設定した。

２８− ペプチド人及びペプチドＢのいずれも、前頭葉皮質、辺
縁前脳及び線状体（Ｓｔｒｌａｔｕｍ）においてはこれ
らの代謝物含量に影響を及ぼさなかったが、視床下部に
おいてはＤＯＰＡＣ含量を約６０％有意に増加させた。

（４）あくび行動に対する効果 ウィスター系雄性ラット（２００〜ａｏｏｙ）を実Ｌｈ
に供する。１群を１０匹とする。ラットを床敷きを敷い
たプラスチック製のケージ（１７Ｘ２４Ｘ１２ｃｍ）に
入れ、そのまま３０分間馴化する。ペプチドＡ１ペプチ
ドＢ、ＣＣＫ−８及び前記溶媒を皮下投与し、３０分経
過後にアポモルフイン０．０３　ｍｙ／ｋ　ｆ’を皮下
投与する。投与後３０分間におけるアポモルフインによ
りｍ発されるあくびの回数を測定する。

尚実馳はすべて防音室内で行い、また総計学的処理には
ウイルコクソン・ランク−サム・テスト（Ｗｉｌｃｏｘ
ｏｎ　ｒａｎｋ　−ｓｕｍ　ｔｅｓｔ）を使用する。

結果を下記館３表に示す。

２４− 第　　３　　表 上記第３表からペプチドＡ及びペプチドＢはアポモルフ
イン投与によるあくび行動を抑制することがわかる。

（以上）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ■　一般式 ％式％ 〔式中ＲはＨＯＯＣ（ＣＨ２）ａ　ｃｏ−又はｐＧｌｕ
   を示す。〕で表わされるペプチド及びその塩。 ■　一般式 ％式％ 〔式中ＲはＨＯＯＣ（ＣＨ２）８　Ｃｏ−又はｐＧｌｕ
   を示す。〕で表わされるペプチド又はその塩を有効成分
   として含有することを特徴とする抗精神分裂病薬剤。