JPS60188083A - カルボン酸置換体の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、α、β−不飽和カルポン酸から有用なα−ハ
ローβ−ヒドロキシカルボン酸、α−ヒドロキシ−β−
ハロカルボン酸、α、β−ジヒドロキシカルボン酸、α
、β−エポキシカルボン酸、α−ケトカルボン酸、β−
ケトカルボン酸等のカルボン酸置換体を酵素反応を利用
して製造する方法に関するものである。

これらカルボン酸置換体は、医薬、染料、香料、ポリマ
ーの原料ならびに最終生成物としてきわめて有用である
。例えば、β−フェニル−α、β−エポキシプロピオン
酸は化学的な変換によりアミノ酸アナログ物質であるβ
−フェニルセリンの合成に利用されている（ジャーナル
　オブ　オルガニック　ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ
　ｏｆ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅ−ｍｉｓｔｒｙ）第３
１巻、１４０７頁（１９６６年）〕。

従来、α−ハローβ−ヒドロキシカルボン酸、α−ヒド
ロキシ−β−ハロカルボン酸、α、β−ジヒドロキシカ
ルボン酸、α、β−エポキシカルボン酸等の合成は、（
１１式で示されるようにα、β−不飽和カルボン酸に次
亜塩素酸あるいは次亜臭素酸を付加する方法、あるいは
（２）式で示されるように臭素あるいは塩素を付加し、
それらを加水分解する方法〔ジャーナル　オブ　ケミカ
ル　ソサイエテイ　パーキンＵ　（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏ
ｆ　ＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ　ＰｅｒｋｉｎＩ
Ｉ　）第６５３頁（１９７３年））等で製造されていた
。

（以下余白） しかしながら、こうした製造法は、有害な遊離の塩素、
臭素を使用すること、又副生成物がしばしば生産される
ことなど問題点が多く存在していた。そこで本発明者ら
は、こうしたハロヒドリン、ジオール又はケトン化合物
の生産に酵素反応を利用することにより、有害な遊離の
塩素ガス、臭素ガスを使用することなく、常温、常圧の
条件でこうした化合物を製造する方法をめたものである
。

これまでにも、化学的合成法によらず、酵素法による物
質の転換法は報告されている。即ち、ハロペルオキシダ
ーゼと呼ばれる一群のペルオキシダーゼを使用し、この
ペルオキシダーゼ存在下に過酸化物及びハライドイオン
を初発物質と反応させ目的とする物質を生成させる方法
であり、具体例を挙げれば、ハロペルオキシダーゼが活
性メチレン又はメチン基に作用することの報告〔サイエ
ンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ　）第２０２巻、１０９６頁（１
９７８年）及びアニュアル　オブ　ニューヨーク　アカ
デミツク　サイエンス（＾ｎｎｕａｌ　ｏｆ　Ｎｅｗ　
Ｙｏｒｋ　ＡｃａｄｅｍｉｃＳｃｉｅｎｃｅ　）第２４
４巻、８０頁（１９７５年）〕、又、ハロペルオキシダ
ーゼの存在下、アルケンにハライドイオンが作用してハ
ロヒドリン化合物を生成すること（特開昭５５−１３０
９７号）、更にアルキンにハライドイオンが作用してハ
ロゲン化ケトン及びアルデヒドを生成すること（特開昭
５７−１４６５８８号）等の報告がある。

そこで本発明者らはα−ハローβ−ヒドロキシカルボン
酸、α−ヒドロキシ−β−ハロカルボン酸、α、β−ジ
ヒドロキシカルボン酸等をハロペルオキシダーゼを使用
することによって化学合成法を用いることなく製造でき
るのではないがと考え鋭意検討を重ねた。

その結果、意外にもこれまで全く知られていなかったα
、β−不飽和カルボン酸のあるものがハロペルオキシダ
ーゼの存在下過酸化物及びハライドイオン化合物と容易
に反応し、目的とするα−ハローβ−ヒドロキシカルボ
ン酸、α−ヒドロキシ−β−ハロカルボン酸、α、β−
ジヒドロキシカルボン酸又はα−もしくはβ−ケトカル
ボン酸等を生成することを知り本発明を完成したもので
ある。

即ち、本発明は、α、β−不飽和カルポン酸にハロペル
オキシダーゼの存在下、過酸化物及びハライドイオン化
合物を作用させ、該α、β−不飽和カルボン酸をα、β
−ハロヒドリンカルボン酸、り、β−ジヒドロキシカル
ボン酸又はケトカルボン酸に変換することを特徴とする
カルボン酸置換体の製造法である。

本発明の反応は次の４つのモデルによって示される。

（１）又は（ｆｆ） 又は （ＩＩＩ） 侃下余白） （ＩＴ／） 式中Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の各には水素、飽和炭化水素、
不飽和炭化水素、芳香環又はへテロ原子を含む基より構
成され、かつ本酵素反応により作用を受番ノ゛ときには
反応生成物においてＲ３がＲ３”となり、そ態のみなら
ずナトリウム又はカリウム塩の形であれ、カルボン酸ア
ミドもしくはカルボン酸エステル等のカルボン酸の誘導
体であれ又は該カルボキシル基が゛還元されたアルデヒ
ド基であっても）史用されうる。

本発明に使用されうる代表的なα、β−不飽和不飽和カ
ルポン−１に例示する。

表−１ ■ ハロペルオキシダーゼの存在下これらα、β−不飽和カ
ルポン酸と反応する過酸化物及びハライドイオン化合物
の反応形式は上記のα、β−、β−カルボン酸（基質）
の種類に応じて種々の形式がとられうる。（しかしなが
ら現在のところ基質の相違によって何故様々の反応形式
がとられるかは不明である。） 例えば、α、β−不飽和カルボン酸がβ位にフェニル基
を有する場合、（１）又は（ＩＩ）の反応が進行してハ
ロヒドリンカルボン酸が生成し、β位にｐ−メトキシフ
ェニル基又はｐ−ヒドロキシフェニル基を有する場合、
（Ｉ［［）の反応が進行してジヒドロキジカルボン酸が
生成する。又、α位にアセトアミド基、又はα位にアセ
トアミド基及びβ位にフェニル基を有する場合（ＩＶ）
の反応が進行してα−又はβ−ケトカルボン酸が生成す
る。

なお、α、β−エポキシカルボン酸が（１）又は（Ｉ［
）の反応で得られるハロヒドリンカルボン酸をアルカリ
で処理することによって容易に得られることはいうまで
もないことである。

本発明で使用するペルオキシダーゼはハライドイオン化
合物との関係で特定化される。即ちクロルペルオキシダ
ーゼはＣＩ−％　Ｂｒ−及びＩ−のとき用いられ、ブロ
ムペルオキシダーゼはｌ１ｒ−及びＩ−のとき用いられ
、ヨードペルオキシダーゼあるいは西洋わさび等のペル
オキシダーゼはＩ−のとき用いられる。

しかし、ペルオキシダーゼはいずれの起源のものでも本
発明において使用されうる。即ち、微生物のカルダリオ
マイセス・フマゴから得られるクロルペルオキシダーゼ
、海草から得られるブロムペルオキシダーゼ、唾液腺又
は甲状腺から得られるヨードペルオキシダーゼ、西洋わ
さび、牛乳、細菌等から得られるペルオキシダーゼのい
ずれでも用いられうる（これらのあるものは市販されて
いる。）。なお本発明の実施例においてはカルダリオマ
イセス・フマゴから得られるクロルペルオキシダーゼを
用いているが、本酵素だけに限定されるわけではない。

カルダリオマイセス・ファゴからのクロルペルオキシダ
ーゼはカルダリオマイセス・フマゴ　ＣＭＩ　８９３６
２を〔カナディアンジャーナル　オブ　マイクロバイオ
ロジー（Ｃａｎａｄｔａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍ
ｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）第２７巻、１２９８頁（１９
８１年）〕の記載方法に準じて培養し、培養液中にクロ
ルペルオキシダーゼを生産蓄留せしめた後、培養液をろ
過し、濃縮後、エタノール分画（４５〜６５％）を行う
ことによって部分精製酵素標品として得られる。本発明
においてはこの部分精製された酵素標品を反応に使用し
た。酵素活性の測定は、〔ジャーナル　オブ　バイオロ
ジカル　ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏ
ｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍ−ｉ３ｔｒｙ　）第２４１巻
、１７６３頁（１９６６年）〕に従って行い、２５°Ｃ
においてモノクロルジメドンから１分間に１マイクロモ
ルのジクロルジメドンを生成する酵素量を１単位とした
。

本発明の酵素反応は、一般的に次のような条件で行われ
る。

まずｐＩＩに関しては、通常ｐＨ２〜８の範囲の緩衝液
中で行われるが、使用する酵素の至ｆｉｐ）ｌ付近であ
ることが好ましい。例えば、カルダリオマイセス・フマ
ゴのクロルペルオキシダーゼの場合は、ｐＨ２〜４付近
が好ましい。

使用する緩衝液は、反応を行わせるｐＨで緩衝能を有す
るものであればいずれのものも使用できるが、通常リン
酸塩を含む緩衝液が好適である。

反応温度は、使用する酵素が活性を有する温度範囲であ
ればいずれでもよいが、好ましくは２０〜４０°Ｃ付近
である。

使用する基質は、反応溶液中に溶解した状態であること
が望ましいが、水に不溶性の基質であっても少量のメタ
ノール、エタノール、ジメチルスルホキシド、ジメチル
ホルムアミドのような極性溶媒に溶解後、これを反応溶
液中に入れ、十分に分散させた状態で使用してもかまわ
ない。

使用するハライドイオン化合物の量は、添加した基質（
モル量）に対して任意の量添加できるが、通常は、基質
に対していくらか過剰のモル量存在すれば良い。

又添加する過酸化物もしくは過酸化水素は、反応が十分
に進行する量であれば任意の量添加できるが、一般的に
は存在する基質量に対してモル比で０．５〜５．０の割
合で添加することが好ましい。

なお過酸化水素を用いるときはその添加方法として、反
応液中にハライドイオン化合物、基質、酵素を添加した
後、除々に加えていくことが好ましい。

反応時間、添加する酵素量については基質が十分に変換
される条件であれば任意の時間、任意の酵素量が選択で
きる。

以上のようにして反応した結果、生成する反応生成物の
確認には、薄層クロマトグラフィー、ガスクロマトグラ
フィー等の電性を使用した。又反応生成物の分離は、反
応終了後、反応液を酢酸エチル、クロロホルム等の溶媒
で抽出するか、もしくはアンバーライト（登録商標）Ｉ
Ｒ−１００、ダウエックス（商標名）３０などのイオン
交換樹脂、アンバーライト（登録商標）ＸＡＤ−４など
の樹脂に吸着させ適当な溶媒で溶出させることにより分
離した。

勿論、本発明により得られた生成物の分離精製には他の
一般的な精製法を組み合わせても使用できる。更に又得
られた反応生成物の同定は、ＩＲスペクトル、質量スペ
クトル、ＮＭＲＭペクトル等の常法により行った。

以上述べたように本発明は、α、β−不飽和カルボン酸
にハロペルオキシダーゼ存在下でハライドイオン化合物
及び過酸化物を反応させることにより、常温、常圧下で
有害な遊離の塩素、臭素を存在させなくともα、β−ハ
ロヒドリンカルボン酸、α、β−ジヒドロキシカルボン
酸又はα−もしくはβ−ケトカルボン酸等のカルボン酸
置換体を収率良く生成する新規で産業上有益な製造法を
提供せんとするものである。

以下に実施例で本発明の内容をより具体的に説明する。

実施例１ ０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ３，０）　２８０ｍｅにｔ
ｒａｎｓ−ケイ皮酸２１０■を溶解した。この溶液に１
Ｍ臭化カリウム溶液７．２−、クロルペルオキシ夛−ゼ
溶液２．０ｍｌ　（６００単位）を添加し、次に１Ｍ過
酸化水素溶液を３．６−添加し、反応を開始した。反応
開始後、１５分後に更に１Ｍ過酸化水素溶液を３．６−
添加して反応を継続した。反応は３０℃で合計１時間行
った。反応終了後、反応液に６Ｎ塩酸を６ｄ添加し、酢
酸エチルで生成物を抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥
後減圧条件下で？ａ縮、乾固した。得られた生成物を少
量のエタノールに熔解し、調製用のシリカゲルプレート
で酢酸エチルとヘキサン（容量比８：２）に少量の酢酸
を含む展開溶媒で薄層クロマトグラフィーを行った。展
開後、Ｒｆ値が０．１５で紫外線吸収を示すバンドより
メタノールを用いて生成物を抽出した。

抽出液を減圧下で濃縮、乾固し、十分乾燥後、少量のメ
タノールで熔解し、更にクロロホルムを添加して白色沈
澱を得た。上記操作により３−フェニル−３−ヒドロキ
シ−２−ブロムプロピオン酸が２２０■得られた。

３−フェニル−３−ヒドロキシ−２−ブロムプロピオン
酸の同定： （１１’Ｈ−Ｎ　Ｍ　Ｒ−スペクトル（Ｃ１１３Ｃ０Ｉ
１３、　［１２０）τ＝５．５２　（ｄ、１１（）　＋
　Ｈ−１τ＝４．９４　（ｄ、１ｌｌ）　：　１１−２
τ−２，５〜２．６　（ｍ、５Ｈ）　：　Ｉｆ−＾ｒ（
２）ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）／質量スペクトル
（ＭＳ） サンプルをトリノチルシリル（ＴＭＳ）化後、ＧＣ−Ｍ
Ｓスペクトルを測定し下記イオンビークを認めた。

Ｍ”　−１５；　ｍ／ｅ　３７３．３７５（ピーク強度
１：１） Ｍ”　−７９；　ｗ＋／ｅ　３０９ Ｍ＋−２０９；　ｍ／ｅ　１７９ Ｍ”−２３９；＋ｗ／ｅ　１４７ 上記の結果は、本生成物が３−フェニル−３−ヒドロキ
シ−２−ブロムプロピオン酸であることを示している。

実施例２ ｔｒａｎｓ−ｐ−メトキシケイ皮酸１４３■を３ｍＥの
エタノールに熔解し、この溶液を３８０１ｎｅの０．１
ＭＩＪ７Ｍ緩衝液（ｐＨ３，０）に入れ、十分攪拌する
。この際、基質であるｐ−メトキシケイ皮酸は溶液中に
懸濁された状態である。

この溶液にＩＭ臭臭化カリウム液液１眞、酵素溶液３．
３ｍｅ　（１０００単位）を添加し、次にＩＭ過酸化水
素ｆ６液を５−添加し、３０”ｃで攪拌しながら反応を
行わせた。反応開始後、１５分後に更に上記過酸化水素
溶液５−を追加した。

１時間反応させた後、６Ｎ塩酸を８−添加し、生成物を
酢酸エチルで抽出した。減圧下で濃縮、乾固し、得られ
た生成物を調製用シリカゲルプレートで、酢酸エチルに
少量の酢酸を含む展開溶媒を用い薄層クロマトグラフィ
ーを行った。

展開後、Ｒｆ値が０．１６で紫外線吸収を示すバンドよ
り酢酸エチルとメタノール（容量比１　：　１）を含む
溶媒で生成物を抽出した。抽出液を減圧下で濃縮、乾固
し、少量のメタノールで溶解し、更にクロロボルムを添
加して３−（ｐ−メトキシフェニル）−２，３−ジヒド
ロキシプロピオン酸の白色結晶４０■を得た。

３−（ｐ−メトキシフェニル）−２；３−ジヒドロキシ
プロピオン酸の同定： （１１’Ｈ−Ｎ　Ｍ　Ｒ−スペクトル（ＤＭＳＯ）τ−
６．２９　（ｓ、３ｔ＋）　：　Ｈ−７τ−５，９２（
ｄｉｌＨ）　：　１１−１τ＝５．３３（ｄ、ｎｏ　：
　Ｈ−２ τ＝３．２０　（ｑ、２１１）　：　１（−３，５τ−
２，７４（ｑ、２１（）　：　Ｈ−４，６（２）質量ス
ペクトル （生成物を直接導入法で測定した。） Ｍ＋；　ｍ／ｅ　２１２ Ｍ＋−４５；　ｍ／ｅ　１６７ Ｍ”　−６２’；　ｍ／ｅ　１５０ Ｍ＋−７７；　ｍ／ｅ　１３５ Ｍ”　−９１；　ｍ／ｅ　１２１ Ｍ”　−１０５；　ｍ／ｅ　１０７ Ｍ”　４３５ｉ　ｍ／ｅ　７７ 上記の結果は、本生成物が３−（ｐ−メトキシ７、：ｃ
ニル）　−２，３−ジヒドロキシプロピオン酸であるこ
とを示している。

実施例３ ｔｒａｎｓ−ｐ−ヒドロキシケイ皮酸１６４■を２−の
エタノールに溶解し、これを実施例１と同様の緩衝液１
９０＋ｎｆに入れ溶解する。次に１Ｍ臭化カリウム溶液
４．師、酵素液３．３ｍｌ！（１０００単位）を添加し
１Ｍ過酸化水素溶液４．８ｍｌ！を実施例１と同様Ｇこ
２回に分は添加し反応させる。反応終了後、該反応物ヲ
クロロホルム処理し、クロロホルム抽出区分を除いた後
のクロロホルム抽出残液をアンノー−ライ）ＸＡＤ−４
のカラムにかけ、極性の高し）生成物を吸着させた。メ
タノールで溶出後、得られた生成物を酢酸エチルとメタ
ノール（容量比８：２）と少量の酢酸を含む展開溶媒を
用いて薄層クロマトグラフィーにかけた。Ｒｆ値が０．
２９を示す紫外線の吸収バンドよりメタノールで生成物
を抽出し、３−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−２，３−
ジヒドロキシプロピオン酸４５■を得た。

３−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−２，３−ジヒドロキ
シプロピオン酸の同定： ＋１．１　’＋１−　Ｎ　Ｍ　Ｒ−スペクトル（ＣＤ３
０Ｄ）τ−５，７７（ｄ、Ｉｌ＋）　：　Ｉ＋−１τ−
５，１８（ｄ、ｌ１１）　：　１１−２τ−３，２６（
ｑ、２Ｈ）　：　Ｈ−３，５τ−２，７７（ｑ、２Ｈ）
　：　Ｈ−４，６（２）質量スペクトル （生成物を直接導入法又はＦＤマススペクトル法で測定
した。） Ｍ＋；　…／ｅ　１９８ Ｍ＋−６２；　ｍ／ｅ　１３６ Ｍ”　−９１；　ｍ／ｅ　１０７ Ｍ”　−１２１；　ｍ／ｅ　７７ 上記結果は本生成物が３−（ｐ−ヒドロキシフェニル）
’−２．３−ジヒドロキシプロピオン酸であることを示
している。

実施例４ アセトアミドケイ皮酸２０４■を実施例１と同様の＠術
液１００−に溶解した。この溶液に１Ｍ臭化カリウム溶
液４ｍｆｆ１．クロルペルオキシダーゼ溶液３．０ｍｌ
！　（９００単位）を添加し、次に、１Ｍ過酸化水素溶
液４−を実施例１と同様に２回に分は添加し反応させる
。反応終了後、生成物を酢酸エチルで抽出し、得られた
生成物を酢酸エチルとメタノール（容量比７：３）を含
む展開溶媒を用いて薄層クロマトグラフィーにかけた。

Ｒｆ値が０．４５を示す紫外線の吸収バンドよりメタノ
ールで生成物を抽出した。この粗生成物を上記と同様の
条件下で再度薄層クロマトグラフィーを行い、３−フェ
ニル−３−オキソ−２−（ｏ−アセチル）プロピオン酸
９３曙を得た。

３−フェニル−３−オキソ−２−（０−アセチル）プロ
ピオン酸の同定： （１１’Ｈ−Ｎ　Ｍ　Ｒ−スペクトル（Ｄ２０）〇 τ−７．８３　（ｓ、３Ｈ）　：　Ｉｆ’−１τ−４，
１１（ｔ、１ｌｌ）　：　ｌｌ−２τ　＝　２．５〜２
．６５　（ｍ、５１１）　：　旧へｒ（２）質量スペク
トル （生成物を直接導入法又はＦＤマススペクトル法で測定
した。） Ｍ”；　ｍ／ｅ　２２２ Ｍ＋−４４；　ｍ／ｅ　１７８ Ｍ＋−１０４；　ｍ／ｅ　１１Ｂ Ｍ”　−１１７；　ｍ／ｅ　１０５ Ｍ＋−１４５；　ｍ／ｅ　７７ 上記結果は、本生成物が３−フェニル−３−一オキソー
２−（０−アセチル）プロピオン酸である特許出願人　
天野製薬株式会社 手続補正書（自発） 昭和５９年１２月ダ日 １、事件の表示 昭和５９年特許願第４４７６２号 ２、発明の名称 カルボン酸置換体の製造法 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 住所　愛知県名古屋市中区錦−丁目２番７号５、補正に
より増加する発明の数　なし６、？ｌｉ正の対象 明細書の「特許請求の範囲」の欄及び「発明の詳細な説
明」の欄 ７、補正の内容 ｆｉ＋特許請求の範囲を別紙のとおり訂正する。

（２）明細書第３頁第１４行〜第１６行の「ジャーナル
オブ　ケミカル　ソサイエテイ　パーキン■（Ｊｏｕｒ
ｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　５ｏｃｉｅｔｙ　Ｐ
ｅｒｋｉｎｎ）　ｊを「ジャーナル　オブ　ザ　ケミカ
ル　ソサイエテイ　パーキンＩＩ　（Ｊｏｕｒｎａｌ　
ｏｆ　ｔｈｅ　ＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ　Ｐｅ
ｒｋｉｎｌｌ）　Ｊと訂正する。

（３）明細書第５頁第１２行〜第１４行の「アニュアル
オブ　ニューヨーク　アカデミツク　サイエンス（Ａｎ
ｎｕａｌ　ｏｆ’Ｎｅｎ　Ｗｏｒｋ　Ａｃａｄｅｍｉｃ
　５ｃｉｅｎｃｅ　）　Ｊを「アンルズ　オブ　ザ　ニ
ューヨーク　アカデミ−オブ　サイエンシズ（Ａｎｎａ
ｌｓ　ｏｆ　ｔｈｅＮｅＩｌｌｙｏｒｋ　Ａｃａｄｅｍ
ｙ　ｏｆ　５ｃｉｅｎｃｅｓ）　Ｊと訂正する。

（４）明細書第９頁の表−１を下記の表と入れかえる。

（以下余白） 表−１ （５）明細書第１４頁第５行の「除々に」を「徐々にＪ
と訂正する。

（６）明細書第１６頁第２０行の’　（（：Ｄ３　Ｃ０
Ｄ３、　ｏ２　ｏ　）」を’　（ＣＤ３ＣＯＣＤ３．０
２０）Ｊと訂正する。

（７）明細書第１７頁第１２行〜第１４行に示した化学
構造（８）明細書第１９頁第８行の’　（ＤＭＳＯ）Ｊ
を「（ＤＭＳＯ−ｄ６）１と訂正する。

（９）明細書第２３頁第４行〜第７行に示した化学構造
式の「　０ １ （以卜発日ン る。

「実施例５ ｔｒａｎｓ−３＋４−ジメトキシケイ皮酸１６７■を実
施例２と同様の緩衝液３８０ｍ１！に溶解して、この溶
液にｌｔＩ臭化カリウム熔液１０ｍｆと酵素溶液３．３
ｍＣ（１０００単位）を添加し、次に１Ｍ過酸化水素溶
液１０−を実施例２と同様に２回に分は添加し反応させ
た。

反応終了後、クロロホルムで未反応の基質等を抽出除去
し、次に生成物を酢酸エチルで抽出した。

得られた生成物をメタノール：水（容量比４：１）を含
む展開溶媒を用い、ＨＰＴＬＣプレートを用いて薄層ク
ロマトグラフィーを行った。次にＲｆ値が０．７８を示
す紫外線の吸収バンドよりメタノールで生成物を抽出し
、抽出液を減圧下で濃縮、乾固した。上記操作により、
２−ブロム−３−ヒドロキシ−３−（３，４−ジメトキ
シフェニル）プロピオン酸２０■を得た。

２−ブロム−３−ヒドロキシ−３−（、３，４−ジメト
キシフェニル）プロピオン酸の同定 （ｉｔ’ｌｌ−ＮＭＲ−スペクトル（ＤＭｓＯ−ｄ６）
４ τ＝６．２５　（ｓ、３１１）　、６．２３　（ｓ、３
１１）　：　Ｉｆ−６，７τ＝５．７０　（ｄ、ｔ＋＋
＞　：　ｏ−ｔτ−５，２４（ｃ！、１ｌｌ）　：　Ｈ
−２τ−３，１１（ｍ、２１１）　：　Ｉｔ−３，５τ
−２，９７（ｍ、ｌ１１）　：　Ｈ−４（２）質量スペ
クトル （生成物を直接導入法又はＦＤマススペクトル法で測定
した。） Ｍ＋；　ｍ／ｅ　３Ｑ５．３０４（ピーク強度１：１）
Ｍ＋−４６；　ｍ／　ｅ　２６０．２５８（〃）Ｍ”　
−６１；　ｍ　／　ｅ　２４５．２４３（〃）上記結果
は、本生成物が２−ブロム−３−ヒドロキシー３−（３
，４−ジメトキシフェニル）プロピオン酸であることを
示している。

２、特許請求の範囲 １　α、β−、β−カルボン酸にハコペルオキシダーゼ
の存在下、過酸化物及びハライドイオン化合物を作用さ
せ、該α、β−不飽和カルホン酸をα、β−八ロヒドロ
ヒドリンカルボン酸β−ジヒドロキシカルボン酸又はケ
トカルボン酸に変換せしめることを特徴とするカルボン
酸置換体の製造法。

２　α、β−不飽和カルボン酸がα位にアセトアミド基
を有するか、β位に芳香環を有するか又はα、β位間の
二重結合と共役二重結合を形成しているかのいずれかで
ある特許請求の範囲第１項記載のカルボン酸置換体の製
造法。

３　β位に芳香環を有しているα、β−、β−カルポン
酸がケイ皮酸、ｐ−メトキシケイ皮酸、３．４−ジメト
キシケイ皮酸、ｐ−ヒドロキシケイ皮酸、ウロカニン酸
、β−（２−フリル）ケイ皮酸のいずれかである特許請
求の範囲第２項記載のカルボン酸置換体の製造法。

４　α位にアセトアミド基を有するα、β−、β−カル
ボン酸が、α−アセトアミドケイ皮酸、α−−７セ１〜
アミドアクリル酸のいずれかである特許請求の範囲第２
項記載のカルボン酸置換体の製造法。

５　α、β位間の二重結合と共役二重結合を形成してい
るα、β−、β−カルボン酸がソルビン酸又はムコン酸
である特許請求の範囲第２項記載のカルボン酸置換体の
製造法。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　α、β−不飽和カルボン酸にハロペルオキシダーゼ
   の存在下、過酸化物及びハライドイオン化合物を作用さ
   せ、該α、β−不飽和カルボン酸をα、β−ハロヒドリ
   ンカルボン酸、α、β−ジヒドロキシカルボン酸又はケ
   トカルボン酸に変換せしめることを特徴とするカルボン
   酸置換体の製造法。 ２　α、β−不飽和カルボン酸がα位にアセトアミド基
   を有するか、β位に芳香環を有するか又はα、β位間の
   二重結合と共役二重結合を形成しているかのいずれかで
   ある特許請求の範囲第１項記載のカルボン酸置換体の製
   造法。 ３　β位に芳香環を有しているα、β−不飽和カルボン
   酸がケイ皮酸、ｐ−メトキシケイ皮酸、ｐ−ヒドロキシ
   ケイ皮酸、ウロカニン酸、β−（２−フリル）ケイ皮酸
   のいずれかである特許請求の範囲第２項記載のカルボン
   酸置換体の製造法。 ４　α位にアセトアミド基を有するα、β−不飽和カル
   ボン酸が、α−アセトアミドケイ皮酸、α−アセトアミ
   ドアクリル酸のいずれがである特許請求の範囲第２項記
   載のカルボン酸置換体の製造法。 ５　α、β位間の二重結合と共役二重結合を形成してい
   るα、β−不飽和カルボン酸がソルビン酸又はムコン酸
   である特許請求の範囲第２項記載のカルボン酸置換体の
   製造法。