JPS6057833B2 - Ｌ−トリプトフアンの製造方法 - Google Patents
Ｌ−トリプトフアンの製造方法Info
- Publication number
- JPS6057833B2 JPS6057833B2 JP15926978A JP15926978A JPS6057833B2 JP S6057833 B2 JPS6057833 B2 JP S6057833B2 JP 15926978 A JP15926978 A JP 15926978A JP 15926978 A JP15926978 A JP 15926978A JP S6057833 B2 JPS6057833 B2 JP S6057833B2
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- Japan
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- tryptophan
- acylase
- culture
- producing
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、微生物の培養物およびアシラーゼを用いて
、トリプトファンを製造する方法に関するもので、その
目的とするところは、必須アミノ酸として重要なＬ−ト
リプトファンを工業的に安価に製造することにある。
、トリプトファンを製造する方法に関するもので、その
目的とするところは、必須アミノ酸として重要なＬ−ト
リプトファンを工業的に安価に製造することにある。
Ｌ−トリプトファンの製造法に関しては、合成法、発
酵法および酵素法などの種々の方法が知られているが、
工業的実施においては原料の経済面、収率面、工程面な
どで尚幾多の欠点が指摘される。
酵法および酵素法などの種々の方法が知られているが、
工業的実施においては原料の経済面、収率面、工程面な
どで尚幾多の欠点が指摘される。
本発明者等は、プロテウス、エシエリヒア、アエロバ
クター、クラブシエラおよびバチルス属に属する微生物
の培養物が、アシラーゼの存在下で、工業的に安価に製
造し得る原料であるインドールおよびα−アセトアミド
アクリル酸よりＬートリプトファンを生成することを見
出し、この知見に基づいて本発明を完成した。
クター、クラブシエラおよびバチルス属に属する微生物
の培養物が、アシラーゼの存在下で、工業的に安価に製
造し得る原料であるインドールおよびα−アセトアミド
アクリル酸よりＬートリプトファンを生成することを見
出し、この知見に基づいて本発明を完成した。
本発明を実施するに当つて、アシラーゼの存在下でイ
ンドールおよびα−アセトアミドアクリル酸からＬ−ト
リプトファンを生産する能力を有する微生物の培養物は
、たとえば、プロテウス・ブルガリスＩＦＯ３１６７、
エシエリヒア・コリＩＡＭ１２閏、アエロバクター・ア
エロゲネスＩＦＯ１２０１９、クラブシエラ・ニユーモ
ニアエＡπ℃８７２ホバチルス・アルベイＡπ℃６３４
時の菌株を、Ｌ−トリプトファンを少量含有する適当な
栄養培地に培養して調整される。
ンドールおよびα−アセトアミドアクリル酸からＬ−ト
リプトファンを生産する能力を有する微生物の培養物は
、たとえば、プロテウス・ブルガリスＩＦＯ３１６７、
エシエリヒア・コリＩＡＭ１２閏、アエロバクター・ア
エロゲネスＩＦＯ１２０１９、クラブシエラ・ニユーモ
ニアエＡπ℃８７２ホバチルス・アルベイＡπ℃６３４
時の菌株を、Ｌ−トリプトファンを少量含有する適当な
栄養培地に培養して調整される。
これらの微生物を培養するための培地組成としては、
炭素源、窒素源、無機物その他の栄養培地および少量の
トリプトファンを含有する培地ならば、合成培地または
天然培地の何れも使用可能である。
炭素源、窒素源、無機物その他の栄養培地および少量の
トリプトファンを含有する培地ならば、合成培地または
天然培地の何れも使用可能である。
培地に使用される炭素源および窒素源は使用菌の利用可
能なものならば何れの種類を用いてもよい。 即ち炭素
源としてはグルコース、グリセロール、フラグドーズ、
シユクロース、マルトース、マンノース、澱粉、澱粉加
水分解液、糖蜜などの炭水化物が使用出来る。
能なものならば何れの種類を用いてもよい。 即ち炭素
源としてはグルコース、グリセロール、フラグドーズ、
シユクロース、マルトース、マンノース、澱粉、澱粉加
水分解液、糖蜜などの炭水化物が使用出来る。
窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウムな
どの各種の無機および有機アンモニウム塩類あるいは肉
工キズ、酵母工キズ、コーン●スチープ●りカー、力テ
ィン加水分解物、フイツシユミールあるいはその消化物
、脱脂大豆粕あるいはその消化物などの天然有機窒素源
が使用可能である。
アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウムな
どの各種の無機および有機アンモニウム塩類あるいは肉
工キズ、酵母工キズ、コーン●スチープ●りカー、力テ
ィン加水分解物、フイツシユミールあるいはその消化物
、脱脂大豆粕あるいはその消化物などの天然有機窒素源
が使用可能である。
天然有機窒素源の多くの場合は、窒素源であるとともに
炭素源にもなり得る。而して培地に添加する栄養物質中
に充分な量のトリプトファンが存在しない場合は、培地
中にトリプトファンを添加する必要がある。トリプトフ
ァンの添加量は、使用する微生物によつても異なるが、
お）よそ、培地中に０．１〜０．５重量％になるような
量である。更に無機物として燐酸第一水素カリウム、燐
酸第二水素カリウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウ
ム、硫酸第一鉄なども必要に応じて使用すると好都合で
ある。
炭素源にもなり得る。而して培地に添加する栄養物質中
に充分な量のトリプトファンが存在しない場合は、培地
中にトリプトファンを添加する必要がある。トリプトフ
ァンの添加量は、使用する微生物によつても異なるが、
お）よそ、培地中に０．１〜０．５重量％になるような
量である。更に無機物として燐酸第一水素カリウム、燐
酸第二水素カリウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウ
ム、硫酸第一鉄なども必要に応じて使用すると好都合で
ある。
培養は振盪培養あるいは通気攪拌深部培養などの好気的
条件下で行う。
条件下で行う。
培養温度は通常２０〜５０Ｃの範囲である。培養中の培
地のＰＨは中性附近に維持することが望ましく、培養期
間は通常１〜５日間である。かくして得られた培養液は
、アシラーゼの存在下で、インドールおよびα−アセト
アミドアクリル酸からＬ−トリプトファンを生成する酵
素系を含有するものであり、従つて菌体を除去すること
なく、これにアシラーゼ、インドールおよびαーアセト
アミドアクリル酸を加えて反応せしめてよく、また、培
養液から遠心分離等により採取した生菌体、その乾燥菌
体あるいは生菌体を磨砕、自己消化、音波処理等の処理
を施して得られた菌体処理物、更にはこれらの菌体の抽
出物より得られる酵素区分、をアシラーゼ、インドール
およびアセトアミドアクリル酸を溶解もしくは懸濁せし
めた水性溶媒中に加えて反応せしめてよい。
地のＰＨは中性附近に維持することが望ましく、培養期
間は通常１〜５日間である。かくして得られた培養液は
、アシラーゼの存在下で、インドールおよびα−アセト
アミドアクリル酸からＬ−トリプトファンを生成する酵
素系を含有するものであり、従つて菌体を除去すること
なく、これにアシラーゼ、インドールおよびαーアセト
アミドアクリル酸を加えて反応せしめてよく、また、培
養液から遠心分離等により採取した生菌体、その乾燥菌
体あるいは生菌体を磨砕、自己消化、音波処理等の処理
を施して得られた菌体処理物、更にはこれらの菌体の抽
出物より得られる酵素区分、をアシラーゼ、インドール
およびアセトアミドアクリル酸を溶解もしくは懸濁せし
めた水性溶媒中に加えて反応せしめてよい。
本発明の方法において用いられるアシラーゼはα−アセ
トアミドアクリル酸を脱アセチル化作用を有する酵素で
あればよく、例えばアスペルギルス属由来のアシラーゼ
、豚の腎臓由来のアシラーゼなどでよい。
トアミドアクリル酸を脱アセチル化作用を有する酵素で
あればよく、例えばアスペルギルス属由来のアシラーゼ
、豚の腎臓由来のアシラーゼなどでよい。
アシラーゼの添加量は、反応時間内に添加したα−アセ
トアミドアクリル酸が脱アセチル化するに充分な量であ
ればよい。本反応に用いるインドールおよびα−アセト
アミドアクリル酸の使用量には特に制限がないが、反応
液中濃度として０．１〜１０％の間で適宜使用し得る。
反応を行なわせる際のＰＨは５〜１０の範囲、温度は１
０〜６０℃の範囲である。反応液中に生成したＬ−トリ
プトファンを単離するには、イオン交換樹脂、活性炭等
による吸脱着処理等の常法により行なうことが可能であ
り、その他の既知の濃縮法、沈澱法によつてもＬ−トリ
プトファンを回収することが出来る。
トアミドアクリル酸が脱アセチル化するに充分な量であ
ればよい。本反応に用いるインドールおよびα−アセト
アミドアクリル酸の使用量には特に制限がないが、反応
液中濃度として０．１〜１０％の間で適宜使用し得る。
反応を行なわせる際のＰＨは５〜１０の範囲、温度は１
０〜６０℃の範囲である。反応液中に生成したＬ−トリ
プトファンを単離するには、イオン交換樹脂、活性炭等
による吸脱着処理等の常法により行なうことが可能であ
り、その他の既知の濃縮法、沈澱法によつてもＬ−トリ
プトファンを回収することが出来る。
次に実施例により本発明を更に説明するが、実施例にお
ける生成したＬ−トリプトファンの安定確認は、ベーパ
ークロマトグラム上のＬ−トリプトファンのＲｆ値、紫
外部吸収値、エールリツヒ試薬による発色により行なつ
た。
ける生成したＬ−トリプトファンの安定確認は、ベーパ
ークロマトグラム上のＬ−トリプトファンのＲｆ値、紫
外部吸収値、エールリツヒ試薬による発色により行なつ
た。
また、定量はベーパークロマトグラム上のスポット抽出
液の２８０ｍμに於ける吸光値およびバイオアツセイに
より行なつた。猶、％はすべて重量％で示した。実施例
１〜５最初に次の培地組成を調整した。
液の２８０ｍμに於ける吸光値およびバイオアツセイに
より行なつた。猶、％はすべて重量％で示した。実施例
１〜５最初に次の培地組成を調整した。
トリプトファン ０．２０％燐酸一カ
リウム ０．５０％硫酸マグネシウム
・７水和物 ０．０５％コーン・スチープ・りカー
６．００％カザミノ酸
２．００％ 初期ＰＨ７．Ｏ次に上記培養５
０ｍ１を坂ロコルベンに分注し、１２０℃１紛間殺菌後
、第一表に示す如き菌株を１白金耳植菌し、３ｒＣで２
日間振盪培養を行つた。
リウム ０．５０％硫酸マグネシウム
・７水和物 ０．０５％コーン・スチープ・りカー
６．００％カザミノ酸
２．００％ 初期ＰＨ７．Ｏ次に上記培養５
０ｍ１を坂ロコルベンに分注し、１２０℃１紛間殺菌後
、第一表に示す如き菌株を１白金耳植菌し、３ｒＣで２
日間振盪培養を行つた。
Claims (1)
- １ プロテウス、エシエリヒア、アエロバクター、クラ
ブシエラおよびバチルスからなる群から選ばれた属に属
する微生物の培養物およびアシラーゼの存在下で、イン
ドールとα−アセトアミドアクリル酸とを反応させるこ
とを特徴とするＬ−トリプトファンの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15926978A JPS6057833B2 (ja) | 1978-12-26 | 1978-12-26 | Ｌ−トリプトフアンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15926978A JPS6057833B2 (ja) | 1978-12-26 | 1978-12-26 | Ｌ−トリプトフアンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5588698A JPS5588698A (en) | 1980-07-04 |
| JPS6057833B2 true JPS6057833B2 (ja) | 1985-12-17 |
Family
ID=15690072
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15926978A Expired JPS6057833B2 (ja) | 1978-12-26 | 1978-12-26 | Ｌ−トリプトフアンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6057833B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63154844U (ja) * | 1987-03-30 | 1988-10-12 | ||
| JPH01220771A (ja) * | 1988-02-29 | 1989-09-04 | Aisin Seiki Co Ltd | 自動変速機のレンジ切換装置 |
| JPH0241761U (ja) * | 1988-09-16 | 1990-03-22 |
-
1978
- 1978-12-26 JP JP15926978A patent/JPS6057833B2/ja not_active Expired
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63154844U (ja) * | 1987-03-30 | 1988-10-12 | ||
| JPH01220771A (ja) * | 1988-02-29 | 1989-09-04 | Aisin Seiki Co Ltd | 自動変速機のレンジ切換装置 |
| JPH0241761U (ja) * | 1988-09-16 | 1990-03-22 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5588698A (en) | 1980-07-04 |
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