JPS6071699A

JPS6071699A - 精油の製造方法

Info

Publication number: JPS6071699A
Application number: JP58179655A
Authority: JP
Inventors: 樫木　博昭; 中尾　一夫; 井田　越子; 平竹本; 乾　全良
Original assignee: Kanebo Ltd
Current assignee: Kanebo Ltd
Priority date: 1983-09-27
Filing date: 1983-09-27
Publication date: 1985-04-23
Also published as: JPH0446320B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、イｌ１１物の組織を培養し分化誘導した不定
根から精油成分を取得する方法に係り、更に詳細には、
イリス属に属する植物（以下本発明に係る植物と略記す
る）の組織を培養し、培養物から不定根を分化誘導せし
め、該不定根中に産生蓄積された精油成分を取得する精
油の製造方法に関する。

精油成分は、通常土中に播いた種子から栽培するか或は
球根挿木等植物体の一部の栄養繁殖によって栽培した植
物の全草又は花から溶媒抽出、水蒸気蒸留等の方法によ
シ取得されており、かかる精油成分は高級化粧品、′香
粧品、石鹸用香料、更には食品用フレーバーとして広く
実用に供されている。

しかし、　Ａｖｉ物を栽培しそれからＹ３３成分を取得
するに際しては温度、気候、雨量、土質等による植生分
布の局在化に基づく制約を受ける他、ＡＷｉ物の生育は
、年毎の気＆栄件によって大きく左右されるため、特定
の精油を一定量計画的に生Δ（することが極めて困難で
ある等の問題があった。

かかる問題を解決する方法として、植物組織を培養し、
得られた無定形、の培養物、所釦−カルスから、精油を
製造する方法が提案されている。

しかし、かかる方法はカルス中の精油有効成分が殆んど
絶無に近いことから、到底実用に供されないことが判明
している。（文献、日本農芸化学会昭和５２年度大会購
演要旨集Ｐ、７９．恵沢ら）本発明者らは、精油の製造におけるかかる現状に鑑み、
鉄量研究を続けた結果、前記本発明に係る植物にδって
は、Ｉｔ１１販を培養し、培会物から誘導した不定根中
に、自然栽培下の起椋植物と同様の精油有効成分が産生
蓄積されていること全見出し、本発明を完成したもので
ある。

本発明の目的は、自然環境の影舎を受けること々く、元
金に制御された環境下で植物の組織を培養し、分化誘導
せしめた不定根から容易且つ収率よく精油を製造する方
法を提供するにある。他の目的は、植物の組織を培養し
、培養物から短時間で再現性よく不定根を分化誘導せし
め、該不定根から随時精油成分を取得する方法を提供す
るにある。更に他の目的及び効果は以下の説明から明ら
かにされよう。

上述の目的は−イリス属に属する植物の組織を培養し、
培養物から不定根を誘導せしめ該不定機中に産生蓄積さ
れた精油成分を取得することにより達成される。

本明細書において「不定根」とは、植物の組織を培養す
ることによって該培養組織あるいは二次的だ派生した脱
分化細胞から誘導された根や根茎の形状を備えた組織を
意味する。本発明に係る植物にあっては、組織を培養し
て得たカルス中に実質的に含有されていない精油成分が
、不定根中ＶＣ並生蓄積されている。ががるオ青油成分
が不定機中に産生蓄積されていると云う事実は不発明者
らが新規に知得したものであり、本発明に係る植物の組
織を培介し、誘導して得られた不定根から精油成分を取
得することが本発明の最も重要な点である。

かかる本発明が適用される植物としては、イリスネルチ
ンスキ７　（Ｉｒ１ｓ　ｎｅｒｔｓｃｈｉｎ　５ｋｉａ
　）　。

イリスバリダ（１，ａｉｂｉｒｉｃａ　）　、イリスエ
ンサタ／（Ｉ　、　ｅｎｓａｔａ　）　、イリスブシュ−ドア　
コルス（Ｉ　−ｐｓｅｕｄｏａｃｏｒｕｓ　）イリスラ
エグイガタ（１，ｌａｅｖｉｇａｔａ　）　。

イリスジャポニカ（１，ｊａｐｏｎｉｃａ　）　、イリ
スカロリアナ（ｌ４ｒａｃｉｌｉｐｅｓ　）　、イリス
セトーサ（工、５ｅｔｏｓａ’）イリスブシュ（１，ｒ
ｏｓｓｉｉ　）　、イリステクトルム（１，ｔｅｃｔｏ
ｒｕｍ　）　、イリスバリダ（１，ｐａｌｌｉｄａ　）
　、イリスフロレンティナ（ｘ、ｒ工ｏｒｅｎｔｉｎａ
　）　＊イリスジャポニカ（Ｉ＋ｇｅｒｍａｎｉｃａ　
）　、イリスヴｚ　／ｌ／　シコＯ−ル（１，ｖｅｒｓ
ｉｃｏｌｏｒ　）およびイリスカロリアナ（１，ｃａｒ
ｏｌｉｎｉａｎａ　）　等が４げられるが、かかる植物
中、就中、１゛リスバリダ、イリスフロレンティナ、イ
リスケルマニカ、イリスヴエルシコロール、およびイリ
スカロリアナを使用すると、好適な結果が得られた。か
かる植物の組織の培養を行５に際しその一例を示すと次
の通シである。

例えば、上記植物を流水下でよく水洗後、葉、裏、根部
に切り分け、エタノール、塩化ベンザルコニウム、次亜
塩素酸ソーダ等を用いて殺菌し、引き続いて滅菌水で洗
Ｗし、培地を入れた試験管又は三角フラスコ中にｅａ−
ｒ−る。

使用する培地は植物組織培養において通常使用されるも
のであれば適用可能でおル、特に限定されるものではな
く、例えばリンスマイヤースクープ、ムラシゲ　スクー
プ、Ｂ５．ニッチ＆ニッチ、ホワイト等の培地が挙げら
れる。そして実際に培養するに際してはこれら基本培地
に糖い、ビタミン類及び必要に応じて生長調節物質等を
配合したものを用いる。止置Ｌ１η節物質としては、例
えばインドール−３−酢酸（ＩＡＡ’）−インドール−
６−酪酸（ＩＢＡ）、α−ナフタレ；／酵配（ＮＡＡ）
、２，４−ジクロロフェノキシ酢酸（２，４−ｐ）ｅの
オーキシン類、カイネチン（Ｋｎ）、６−ベンジルアデ
ニン（６−１３Ａ）等のサイトカイニン類等が誉げられ
、これら１ＬｉＡ独で、又は適宜組合わせて使用される
。

かかる培地中で大略２２〜６０℃で培養を続けると、約
１週間から４週間程度で培養物から不定根の分化が起こ
る。この際、不定根の発生量は、生長調質物質であるオ
ーオシン顛とサイトカイニン類との配合量、及び培養に
供した組織に主として依存する。

例えば培養組織として墨を使用する場合には１０−５〜
１０−６Ｍのオーキシンと、１０−６Ｍ以下の濃度のサ
イトカイニンを用いるのが、また根茎を使用した場合に
は、１０−５〜１０−６Ｍのオーキシンのみを用いるの
が効果的であった。

不定根の分化に際しては、上記の壷ヲつけた（を用いた
場合にカルス化が先行してのち不定根が分化した場合も
あった。

再分化した不定根は切り取って培地に植えつぐと根元の
部分から分枝して、多くの不定根となり、それら自身も
伸長していた。

この様にして得られた不定根は２年間乾燥貯ら不定根か
ら例えば石油エーテル等の溶媒を用いて抽出する方法、
水蒸気蒸留法等、通常使用される公知の方法により精油
成分が容易に取得できる。

以下実施例を誉げて本発明を具体的に説明する。

なお、実施例中、不定根の増殖度、香気の宵祭評価、及
び精油成分の分析は次の方法により行　っ　ｌと　。

（１）　不定根の増殖度植え緬き時の不定根の夏［解重と椙養６遍間後の新／１
１．重を秤量し次式によシ算出した。

（２）香気の官能評価転線貯蔵したづ＼定根を手指で押し潰し、原植物（根茎
）を対照として、る気を臭気により、−１（１足した。

２０人の専門員によって行いそのコト均値【以てＬ能評
価とした。評価基準は次のとおりである。

１、　原（凪！ｌ勿特イｊのギ自γ山戚分の臭し）なし
Ｚ　かすかにイｊす６　イ」　シ４・　強し５、　非常に強しく６）　精油成分の分析ガスクロマトグラフィー及びＪＡ皿分析計を用いて、標
準物質との保持時間及びマススペクトルの一致から主成
分を同定した。クロマトグラムのピークの高さからの成
分量をめ′；ｆ５油成分のクロマトグラムに表れた精油
全景に対する百分率で表示したつな卦、２年間乾緻貯蔵した不定根からの精油の抽出は、
溶媒として塩化メチレン？用い、粉砕、塩析、遠心分離
、溶媒月分取、ト１；縮という常法によシ行った。

測定条件ニー１）ガスクロマトグラフィー機　１）１：島ど１ｔｃｃ−６Ａ：、４ガスクロマトグ
ラフカラム：　ＦＦ−ＡＰ　コーティング　沼を独　シ
リカ　キャピラリー　カラム（０，２５ａｚ　ｘ　５０　ｍ　）イ〕′ジエクンヨン温度　：　２５０℃オープン温度　
＝　７０〜１８０℃（昇温２℃／分Ｎ２流量　：１１戊
／分スゲリット比　：　１／１５０２）質量分析機種　：　ＪＥＯＬ　ＪＭＳ−Ｄ３００質量分析計（Ｊ
ＥＯＬ　ＪＧＣ−２０Ｋ及び　ＪＭＡ−２０００データ
システム装備）イオン化電圧：　７ＱｅＶイオン源温度：　２００℃ 疋〃工例１〜２充分水洗したイリスバリダの癒をつけた茎のの上部（−
に近いところ）を切り出して７０係アルコールで表面殺
菌後、０１チ塩化ペンザルコニウノ・水溶液で１０分間
、更に１チ次亜塩素敲す）　ＩＪウム水ｌシ液で１５分
間殺菌した。滅菌、：↓留水で薬剤を完全に除去しての
ち、組織を細切し、培地に載＋１１　した。培地として
インドール酪酸（ＩＢＡ）１０　Ｍ　と６−ベンジルア
デニン（６−ＢＡ）１０　Ｍを添加し、３％蔗糖と、１
チの寒天を含むｐＨ５ｊに調節したリンスマイヤー）ス
クーグ培地を用いた。２５℃で昼間６００〜８００ルク
ス夜間暗所の比較的暗所で培養すると、６〜４週間後カ
ルス化が生じた。

壜らに数日間培養を続け、不定根の発生を見た。

不定根は根元から切プロ取って　ＩＢＡ　１０−”　Ｍ
、６−ＢＡｌｏ−８Ｍとしたリンスマイヤースクーグ培
地へ移すとその根元から不定根を派生し、増殖した。一
方、カルスはＩＢＡｌｏ−５Ｍとしたリンスマイヤース
クーグ培地へ移すと、増殖が良くなった。

得られた不定根は２年間転炉貯蔵してのち評価したが結
果を実施例１とし、一方、カルスのうち、培養直後に評
価したものを比較例１とし、址だ２帽間乾変り３貯蔵し
たのを比較例２として第１表に示した。原植物の根茎を
２年間乾燥貯蔵さぜｆｃス、のについてもで１わせて評
価し、これを比股例５とした。

きらに、イリスフロレンティナの根茎（いわゆる球根）
を水６を後出芽点（父は出根臓）を中心としてコルクｙ
：、゛ウラーで円往混に打ち抜いたものを上記同１采に
段菌し、伐菌水で洗浄後約５＃！６−加し、６襲庶据と
、１慢寒天を含むｐＨ５，７に調節したホワイト培地を
用いた。上記同様の培養条件下で培辞すると、３−４週
間後不定根が出り。めた。この不定ＡΔ冑ｌ■同じ培地
へ移し替えると、根元から枝分り、　Ｌ、増殖した。得
られた不定根は２年間乾燥貯蔵してのち評価したが、紬
呆を実Ｌ２例２として第１表に示す。

又、涼植！：勿の根茎も同４′ｋに２年間乾燥させて評
価した。言果を比！レニ倒４２してイ）１せて第１表に
示す。　い−１以上余白第　１　表第１表から、本発明に係るイリスバリダの会から組織培
養により得られた不定根（実施例１）は、カルス（比較
例１および２）と比べて官能評価においてはっきシと差
が認められ、原種物体の根茎（比較例３）とはｙ組成の
等しい精油が得られた。

また、イリス　フロレンティナの根茎から得られた不定
根（実施例２）も同様に原種物体の根茎（比較例４）と
はソ組成の等しい精油が得られたことがわかる。

実施例３植物としてイリス　ゲルマニ力の根杢を用い実施例２と
同様の材料調製殺菌処理を施してのちインドール酢酸（
ＩＡＡ）５Ｘ１０　Ｍを含み３饅蔗糖と、１％寒天を含
むＢ５培地へ置くと６週間後、不定根を生じた。実施例
２と同様にして増殖させた不定根を２年間乾燥貯蔵して
のち評価した結果を実施例６として紀２表に示す。

又、原植物の根音も同様に２年間乾燥させて評価した。

比較例５として併せて第２表に示す。

第２表からも明らかなように１本発明に係るイリス　ゲ
ルマニ力の根ｉから得られた不定根（実施例５）は、原
種物体の根茎（比較例５）とはソ組成の等しい精油が得
られたことがわかる。　メー以ナー余７１′３一ユ、′ 第　２　表実施例４イリスグエル７：１０−ルの根茎について、実施例２と
同様の方法で材４＝＋調製殺菌処理を飽し培地に置いた
。培地としてはナノタレン酢酸、。−咄を添加し、３チ
蔗糖と１多寒天を含む。

ＰＨ５，７に調節したムラシゲ−スクープ培地を用いた
。実施例１と同様の条件下で培養して６週間後、不定根
を生じた。

この不定根は同じ培地へ移し替えると、根元から枝分れ
し、増殖した。得られた不定根は２年間乾燥貯蔵しく　
２．８＃）、水蒸気蒸留ののち、黄褐色のコンクリート
状蒸留物を得た（　１．２２ｇ）。

原植物根甚からも同様にして得たコンクリート状蒸留物
と並べて専門員による官能評価に供した結果は以下のと
おりであった。

原種物根茎（２年貯蔵物）と同一の香りがする　２０／
２０と類似の香シがする　０／２０と相違する香りがする　０７２ａ実施例５植物としてイリス　カロリアナの事を使い、培地として
２．４−ＤｌｏＭを〃口え、３チ蔗糖と１多寒天を含む
ニッチ＆ニッチ培地（ＰＨ５，７）を用いた場合、６〜
４週間後、不定根のみを生じた゛。実施例４と同様にし
て増殖させた不定根を２年間貯蔵乾燥しく　２．０ｋｇ
）、水蒸気蒸留ののち黄褐色のコンクリート状蒸留物を
得た（２．１５ｇ）。

実施例４と同様に、２年間乾燥貯蔵した原種物の根Ｙか
らのコンクリート状蒸留物とともに専門員による官能評
価に供した結果は以下のとおりであった。

Ｊｇ植物根茎（２年貯蔵物）　と同一の香りがする　１
９／２０と類似の香りがする　１／２０と相違する香りがする　Ｏ／２０

Claims

【特許請求の範囲】

（１）　イリス属に１４する植物の組織を培養し、培養
物から不定根を分化誘導せしめ、該不定根中に産生蓄積
された右り油成分を取得することを特徴とする精油の製
造方法。
（２）　イリス属に属する植物がイリスバリダ、イリス
フロレンティナ、イリスゲルマニカ、イリスグエルシコ
ロール又はイリスカロリアナである特許請求の範匹第１
駒に記載の精油の製造方法。