JPS61280285A - 新規抗生物質ｍｇ８０２−ａｆ１−ａ及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔並業上の利用分野〕 本発明は新規抗生物質ＭＧ８０２−ＡＦ１−Ａ及びその
製造法に関する。

〔従来の技術〕

微生物の生産する抗生物質に、こ′ｎまでに約ｓ、ｏｏ
ｏ種類報告さｎており、感染症の治療に広く用いられて
いる。このうちカイニア（Ｏｈａｉｎｉａ　）属に属す
る微生物からは１８種類の抗生物質の坐座が報告さｎて
いる〔昭和５９年ユサコ株式会社発行、インデックス　
オブ　アクチノマイスイーテス　アンチバイオティクス
（工ｎ−６ｅｘ　ｏｆ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　
Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）　３゜〔発明が解決しようと
する問題点〕 抗生物質の使用においてはその抗生物質に耐性な菌の出
現が避けられず、耐性菌に有効な新規抗生物質は絶えず
望まれている。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明を概説すれば、本発明の第１の発明は新規抗生物
質ＭＧ８０２−ＡＦ１−ムに関する発明であって、 下記の特性： 形状：黄褐色飴状 元素分析（実測値）：炭素６１゜４ａ　％ｓ水素６．４
１％、窒素α００％、酸素１６．３１％、塩素１５．１
６チ 分子量：４８α１４８７（質量分析による）分子式：　
Ｃｚｓ　Ｈｓｏ　Ｏｓ　ＯＬｚ比旋元度：〔α〕蟹＝　
＋４０．６°（ｃｍ０．５、エタノール〕 紫外部吸収スペクトル（メタノール中）：吸収極大２０
５ｎｍ（ｌｏｇａ　４２５）、２５１ｎｍ（ｌｏｇ　ｇ
　４．１４　）、２７０　ｎｍ　（ａｈ、　Ｌｏｇｍ　
４．０４χ２９５ｎｍ（ｓＬ　１ａｇｓｉ８７）、Ｓ　
６０　ｎｍ（ｌｏｇ８　五８０） 赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）：３４００．２９２
ヨ１６４０．１６１０．１２５０．１０７０　ｃｍ−’
溶解性：メタノール、アセトン、クロロホルム、　酢！
エチル、エチルエーテル、ベンゼンによく溶ける。水、
ベキサンに難溶呈色反応：ギブス反応及びアニスアルデ
ヒド反応は共に陽性 酸性、塩基性、中性の区別：弱酸性物質を有することを
特徴とする。

そして、本発明の第２の発明は新規抗生物質ＭＧ８０２
−ＡＦ１−Ａの製造法に関する発明であって、カイニア
属に属するＭＧ８０２−ＡＦｌ−Ａ生産菌を培養し、そ
の培養物から新規抗生物質ＭＧ８０２−ＡＦ１−Ａｔ−
分離採取すること全特徴とする。

本発明者等にカイニア属に属するＭＧ８０２−ＡＦｌ−
Ａ生理菌株を培養し、ＭＧ８０２−ＡＰＩ−Ａｉ蓄積せ
しめ、この培養物からＭＧ８０２−ＡＦＭ−Ａ’ｉ採取
した。ＭＧ８０２−ＡＩＰｌ−ムはグラム陽性菌及び多
剤耐性のグラム陽性菌に同等の抗菌活性を示すので、耐
性菌にも有効なグラム陽性菌に対する抗生物質として使
用され得るものである。

カイニア属に属するＭＧ８０２−ＡＦｌ−Ａの生産菌の
１例としては、本発明者らによって昭和５８年２月新潟
県住渡郡佐和田町で採取し次土壌試料よシ分離した菌株
カイニア・ルブラ（Ｏｈａｉｎｉａ　ｒｕｂｒａ）　Ｍ
　Ｇ　８０２−　Ａ　Ｆ　１　（微工研薗寄第８０２２
号）がある。この菌株の菌学的性状は次のとおシである
。

［ＭＧ８０２−ＡＦｌ株の菌学的性状〕１、形態 ＭＧ８０２−ＡＦｌ株は、顕微鏡下で分枝した基中菌糸
より、かぎ状からら旋状の気菌糸を形成し、輪生枝は認
めらｎない。成熟した胞子鎖は１０個以上の胞子の連鎖
を認め、胞子の大きさは、α４〜α５Ｘα６〜α７μｍ
位である。

なお、胞子の表面には、短かいとげ状の突起を有する。

− また菌核様構造が認められ、その直径は約５〜１０μｍ
である。

２　各種培地における生育状態 色の記載について括弧に示す標準は、コンテイナー−コ
ーポレーション・オブ・アメリカ（Ｃｏｎｔａｉｎｅｒ
　ｃｏｒｐｏｒａｔｔｏｎ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ）　
　のカラー〇ハーモニイｅマニュアル（Ｃｏ１ｏｒ、ｈ
ａｒｍｏｎｙｍａｎｕａｌ）を用いた。

（１）　　シュクロース・硝酸塩寒天培地（２７℃培養
） うす黄だいだい（２ｇｃ、　ＢａｍｂｏｏＪ　〜うす茶
１ｊｉｃ、　Ｌｔ　Ａｍｂｅｒコの発育上に、白〜茶白
［：３ｂａ。

Ｐｅａｒｌ　〜３ｃ’ｂ、　８ａｎｄＪの気菌糸を着生
し、溶解性色累は黄茶色を帯びる程度である。

（２）　　グルコース・アスパラギン寒天培地（２７℃
　培養） 発育は無色〜うす黄だいだい［２ｇ；、　Ｂａｍｂｏｏ
〕〜鈍だいだい［：４ｐｅ、　Ｏｒａｎｇｅ　Ｒｕ５ｔ
ｌ、気菌糸を着生せず、溶解性８素は赤茶色を帯びる程
度である。

（３）　　グリセリン・アスパラギン寒天培地（工ＳＰ
−培地５．２７℃培養） うすだいだい（５１ｃ、　Ｌｔ　Ａｍｂｅｒ３〜うす茶
［３１ｅ。

ＭａｐｌｅＪ〜茶灰［４１Ｂ茶入ｔ　８ｐｉａｅ　Ｂｒ
ｏｗｎｌの発育上に、うつすらと白゛の気菌糸を着生し
、溶解性色素は赤茶色を帯びる程度である。

（４）スターチ・無機塩寒天培地Ｃｌ８Ｐ−培地４゜２
７℃培養） うす黄茶〔５１ｇ、　Ａｄｏ’ｂｅ　Ｂｒｏｗｎコ〜う
す茶し４ｉｅ。

Ｃｏｒｋ　Ｔａｎ）〜茶入の発育上に、白〜茶白［３（
１０゜Ｎａｔｕｒａ１〕の気菌糸を着生し、溶解性色素
に赤茶色を帯びる程度である。

（５）　　チロシン寒天培地（工ＥｉＰ−培地７，２７
℃培養） うす茶〜灰味赤茶［５ｎｇ、Ｂｒ１ｃｋ　Ｒｅｄコの発
育上に白〜茶白の気菌糸を着生し、赤茶の溶解性色素ｔ
−産生する。

（６）栄養寒天培地（２７℃培養） 黄茶［３ｎｇ、　Ｙｒｌｏｗ　Ｍａｐｌ’ｅＪ　〜茶［
４ｎｊ−、○ｈｅｓｔ−ｎｕｔ　Ｂｒｏｗｎ〕　　の発
育上に、培養後２０日目頃よりわずかに白の気菌糸を着
生し、溶解性色素は茶色を帯びる程度である。

（７）　　イースト・麦芽寒天培地Ｃｌ５Ｐ−培地２．
２７℃培養） 黄茶〜うす茶〔５１ｅ、　Ｃｌｎｎａｍｏｎ〜３１ｇ、
　ＡｄｏｂｅＢｒｏｗｎ〕　の発育上に、白の気菌糸を
着生し、溶解性色素は赤茶色音帯びる程度である。

（８）オートミル寒天培地（工Ｓｒ−培地３．２７℃培
養） うすだいだい（３ｇｃ、　Ｌｔ　Ｔａｎ〕　　〜鈍だい
だい［３１ｃ、　Ｌｔ　Ａｍｂｅｒ　〜４１ａ、　Ｐａ
５ｔｅｌ　Ｏｒａｎｇｅ］〜うす赤味だいだい（５１ｃ
、　Ｌｅｔ　Ｐｅｒｓｉｍｍｏｎ）の発育上に、白〜茶
白（：５ｃｂ：ｌの気菌糸を着生し、溶解性色素は黄茶
色を帯びる程度である。

（９）　　グリセリン・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）
発育は、無色〜うす黄〔２ｇａ、　ＢａｍｂｏｏＪ〜う
す黄茶［３１ｅ、　０４ｎｎａｍｏｎ］、気菌糸は着生
せず１溶解性色素は茶色味を帯びる程度である。

（７）スターチ寒天培地（２７℃培養）うす黄茶〜鈍だ
いだい（４１ｃ、　Ｐａ５ｔｅｌ　Ｏｒａｎｇｅ〕の発
育上に、うつすらと白の気菌糸を着生し、溶解性色素は
わずかに茶色味を呈する程度である。

αｌ　　ＩＪンゴ酸石灰寒天培地（２７℃培養）無色〜
うす黄茶の発育上に、白〜茶白の気菌糸を着生し、溶解
性色素はわずかに黄色味を呈する程度である。

（２）セルロースＣＦ’紙片添加合成液、２７℃培養） うす黄〜うす黄茶の発育上に、白〜茶白の気菌糸を着生
し、溶解性Ｉ！！、累は認められない。

（２）　ゼラチン穿刺培養 単純ゼラチン培地（２０℃培養）、グルコース・ペプト
ン・ゼラチン培地（２７℃培養）共に、発育は無色、気
菌糸な着生せず、溶解性色素は認められない。

α◆　脱脂牛乳（３７℃培養） 発育繻うす黄茶〜うす茶、気菌糸は着生せず、溶解性色
素は茶色味を帯びる程度である。

五生理的性質 （１）生育温度範囲 イースト・スターチ寒天培地〔可溶性デンプン（小寒化
学社製）１．０％、酵母エキス（大五栄養化学社製）α
２％、ひも寒天Ｎｏ％、ｐＨ７，ｏ］ｉ用い、２０℃、
２４℃、２７℃、３０℃、３７℃、５０℃の各温度で試
験の結果、５０℃を除いて、そのいずれの温度でも生育
したが、最適温度は２７℃〜３７℃付近と推定される。

（２）セラチンの液化（１５１％単純ゼラチン、２０℃
培４９ニゲルコース・ペプトン・ゼラチン、２７℃培養
） 単純ゼラチン培地では、培養後１４日月頃よシ液化が始
まり、その作用は弱い万である。

グルコース・ペプトン・ゼラチン培地では培養後３０日
間の観察で、液化’ｔｌｌｉめなかった。

（３）スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天培地
、及びスターチ寒天培地、いずれも２７℃培養） スターチ・無機塩寒天培地の場合は、培養後５日目頃よ
シ、スターチ寒天培地では培養後１０日目頃より、共に
氷解性が認めらｎ、その作用は中等度でおる。

（４）脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、３７℃
培養） 培養後１４日目頃よシ凝固が始まシ、直ちに完了後、ペ
プトン化が始まる。ペプトン化は培養後２５日目頃に完
了する。その作用は共に中等度〜強い方である。

（５）　　メラニン様色素の生成（トリプトン・イース
トプロス、工８Ｆ−培地１：ペフトン・イースト、鉄寒
天、工日Ｐ−培地６：チロシン寒天、よりＰ−培地７、
いずれも２７℃培養）いずれの培地でも、メラニン様色
素の生成は認めらｎなかった。

（６）炭素源の利用（ブリドハム・ゴドリーブ寒天培地
、工ＳＰ−培地９．２７℃培養）Ｄ−グルコース、Ｌ−
アラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−７ラクトース、Ｌ
−ラムノース、ラフィノース、Ｄ−マンニトールを利用
して発育し、イノシトールを利用しない。

シュクロースは、おそらく利用していると推定される。

（７）リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天、２７℃
培養） 培養後１４日目頃から、発育周辺のリンゴ酸石灰を溶解
し、その作用は中等度である。

（８）硝酸塩の還元反応（α１チ硝酸カリ含有ペプトン
水、工ｓｐ−培地８．２７℃培養）陽性である。

以上の性状全要約すると、ＭＧ８０２−ＡＰ１株は、胞
子のうを認めず、気菌糸はかぎ状〜ら旋状を呈し、輪生
枝は認めらｎない。胞子の表面には、短かいとげ状の突
起１−［し、ま次、菌核様構造が認められる。

種々の培地で、うす黄〜うす茶〜茶入の発育上に、白〜
茶白の気菌糸を着生し、溶解性色素は、黄〜赤茶色を帯
びる。メラニン様色素の生成は陰性、スターチの氷解性
は中等度である。

たんばく分解力に、ゼラチンの液化性弱く、ミルクの凝
固・ペプトン化は、中等度〜強い万である。

ＭＧ８０２−ＡＩＭ株の細胞壁組成は、乙６−ジアミツ
ビメリン酸（ｄｉａｍｉｎｏｐｉｍｅｌｌｃ　ａａｌｄ
）はＬＬ−型、糖成分としてアラビノースを含有しない
。

こｎらの性状よｐ％　ＭＧ８０２−Ａｒ１株に菌核様構
造ｔＶするカイニア属に属する放線菌であると推定さｎ
る。更にカイニア属及びストレプトミセス（８ｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｅ）属より〜ＭＧ８０２−ＡＦＭ株に類似
の既知菌種を検索した結果、カイニア轡ルブラ（Ｏｈａ
ｉｎｉａ　ｒｕｂｒａ）　［インターナショナル　ジャ
ーナル　オプ　システマチック　バクテリオロジー（工
ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　、ｒｏｕｒｎａｌｏｆ日ｙ
ｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）第２２
巻、第３４７頁（１９７２）Ｅが近緑の種として挙げら
ｎた。

第１表に文献上のカイニア・ルブラとＭＧ８０２−Ａｒ
１株の比較を示す。

第１表から明らかなように、ＭＧ８０２−ＡＦＩ株とカ
イニア・ルブラの相異点は、ラフィノースの利用性であ
る。

ＭＧ８０２−ＡＦ１株は、形態上、特徴ある構造を示し
、胞子の表面には、ごく短かいとげ状の突起ｔＶする。

このとげは、数が少なく、食入υに観察しないと見失う
恐ｔ′Ｌもある。しかし、胞子の表面は、平滑とは表現
しにくく、くつきりとし九辺縁を示さない。そのことは
、文献中の胞子の表面構造の記載と合致している。

菌核様構造ｔＶすることも共通している。

ま次、気菌糸の色が異なるように見えるが、文献記載の
赤色系の色票番号からみると、ＭＧ８０２−ＡＩＦｌの
蒼白と一致している。更に発育の色でも、オートミール
寒天（工ＳＦ−培地３）で、だいだい色を呈し、カイニ
ア・ルブラの特徴ある記載と合致している。しかも、両
者とも菌体の裏側の色は、ｐＨインディケータ−ではな
く・苛性ソーダ、塩酸を加えてもほとんど変色しない。

たんばく分解力、硝酸塩の還元作用については、カイニ
ア・ルブラの文献記載がなく、比較出来ない。目下、カ
イニア・ルブラの菌株を入手して検討するよう準備を進
めている。

要するに、両者の相異点は、ラフィノースの利用性であ
るが、この点についても、両者を実地に比較検討するこ
とにしたい。

ｃｒｔらのことよジ、ＭＧ８０２−Ａ１１’１株は、カ
イニア・ルブラに近縁の菌種と推定され、カイニア・ル
ブラＭＧ８０２−ＡＦ１と同足し次。

なお、ＭＧ８０２−ＡＦ１株を工業技術院微生物工業技
術研究所に寄託申請し、昭和５９年１２月２４日、微工
研菌寄第８０２２号として受託さｎ友。本発明において
用いることのできる菌株は上記菌株、その変異株をはじ
め、カイニア属に属するＭＧ８０２−ＡＩＦｌ−Ａ生浬
菌のすべてが使用できる。

［ＭＧ８０２−ＡＩＦｌ−Ａの製造法コカイニア属に属
するＭＧＩ３０２−ＡＰ’１−Ａ生産菌株を栄養源含有
培地に接徨して好気的に発育させることによってＭＧ８
０２−ＡＰＩ−Ａを含む培養物が得られる。栄養源とし
ては放線菌の栄養源として使用しうるものが使用される
。例えば市販さｎているペプトン、肉エキス、コーン・
ステイープ・リカー、綿実粉、落花生粉、大豆粉、酵母
エキス、ＮＺ−アミン、カゼインの氷解物、硝酸ソーダ
、硝酸アンモニウム、。

硫酸アンモニウムなどの窒素源、及び市販されているグ
リセリン、しよ糖、でん粉、グルコース、ガラクトース
、マンノース、糖みつなどの炭水化物、あるいは脂肪な
どの炭素源、及び食塩、リン酸塩、炭酸カルシウム、硫
酸マグネシウムなどの無機塩を使用できる。その他必要
に応じて微量の金Ｍ［、消泡剤としての動、植。

鉱物油等を添加することもできる◎これらのものは生産
菌が利用し、ＭＧ８０２−ＡＦＭ−Ａの生産に役立つも
のであればよく、公知の放線菌の培養材料はすべて用い
ることができる。ＭＧ８０２−ＡＩＦｌ−Ａの大量生型
には液体培養が好ましく、培養温度は生産菌が発育し、
ＭＧ８０２−ＡＦｌ−Ａｔ−生産する範囲で適用でき、
通常２０〜４０℃、好ましくは２７〜３７℃である。

培養は以上に述べた条件を使用するＭＧ８０２〜ＡＦ１
−Ａ生産菌の性質に応じて適宜選択して行うことができ
る。

ＭＧ８０２−ＡＦｌ−Ａは培養Ｐ液及び菌体の両方に存
在する。培養ｒ液よ）は、ｐＨ１０以下で酢酸ブチル、
クロロホルム、ブタノール等水不混和性の有機溶剤で抽
出することができる。

菌体よりは、メタノール、アセトン等の有機溶剤で抽出
後、抽出液を減圧濃縮し培養ｆ液と同様の方法で更に抽
出することができる。上述の抽出法に加え、脂溶性物質
の採取に用いられる公知の方法、例えば吸着クロマトグ
ラフィー、ゲルｒ過クロマトグラフィー、薄層クロマト
グラフィーよりのかき取り、高速液体クロマトグラフィ
ー等を適宜組合わせあるいは繰返すことによって純粋に
採取することができる。

［：ＭＧ８０２−Ａｒｔ−Ａの理化学的性状〕理化学的
性状については前記のとおりであるが、細部について以
下説明する。

分子量：　４８（１１４８７（高分！解能マススペクト
ゝルによる）ＩＩＦＵ（フィールド・デスオープション
）マススペクトルで［４８０，４８２，４８４に同位体
ピークが見らｎ、強度比が塩素２個の場合と一致する九
め、元素分析のハロゲンに塩素であると推定される。し
たがって元素分析、分子量よシ分子式は、Ｃａ１ｌ　Ｒ
３００，ｏｔｚであると推定さｎる。

紫外部吸収スペクトル二本発明のＭＧ８０２−ＡＩＦｌ
−Ａの紫外部吸収スペクトルを第１図に示す。第１図の
グラフにおいて横軸は波長（ｎｍ）を縦軸は吸光度を示
す。各曲線の吸収極大は下記のとおりである。

吸収極大ｌｏｇε　　吸収極大１ｏｇｔ　　　吸収極大
　１ｏｇｓ２０５ｎｍ　　４２５　　２０５ｎｍ　　４
．２３　　　２０８ｎｍ　　４５４２５１　　　４１４
　　２５０　　　４．１８　　　２６５　　　五９９２
７０（ｓｈ、）４．０４　　２７０（８ｈ、）４０７　
　　２９８　　４．１８２９５（ａｈ、）１８７　　５
５９　　　１８１　　　３８５　　４００３６０　　　
　工８０ 赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠による赤外部吸
収スペクトルを第２図に示す。

第２図のグラフにおいて、横軸は波数（ｃｍ−’　）、
縦軸は透過率（％）を示す。

核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中のプロトン核
磁気共鳴スペクトルを第３図に示し、１３（）核磁気共
鳴スペクトルを第４図に示す。

第３図及び第４図において、横軸はｐｐｍ　ｆ：示す・ Ｒ４値　：メルク社製シリカゲル薄層（Ａｒｔ、　５７
１５）クロマトグラフィーでは、クロロホルムーメタノ
ール（４Ｑ：１）で展開してＲｆ＝　　　＆α４７、ト
ルエン−酢酸エチル（１０：１）で展開してＲｆ＝α２
８にそｎぞｎ単一スボ　　Ｚットを示した。

ＭＧ８０２−ＡＦｌ−Ａの、栄養寒天培地上　　ａでの
各種細菌に対する発育阻止濃度（寒天平板稀釈法による
）は第２表に示すとおりである。　　９６１　１゜ （Ｅｌｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｆ
ＤＡ２０９Ｐ）　　　　　　Ｉ　Ｌ（１３ｔａｐｈｙｌ
ｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　８ｍ１ｔｈ）　　　　
　　　を４五　スタフィロコッカス・アラレｆ）、ｘ、
ＭＢ８７１０五１２ （８ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　　Ｍ
Ｓ８７１０）　　　　　　　　１４（５ｔａｐｈｙｌｏ
Ｑｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ＭＢ　９６１０　）　　
　　　　　　Ｉ　Ｓ。

Ｓ　ミクロコツカスｅルテウス　ＦＤＡＩ　６　　　　
　　Ａｌ　２（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　１ｕｔｅｕｓ
　Ｆ　Ｄ　Ａ　１６　）ミクロコツカス・ルテウスエＦ
０３３３３１．５６ （Ｍｌｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　１ｕｔｅｕａ　工ｌＰＯ３
３３３）ミクロコツカス・ルテウスＰＣ１１００１五１
２ （Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　１ｕｔｅｕｓ　ＰＣＸ　１
００１　）バチルス−アンスラシス ｏ５６ （Ｂａｃｉｌｌ、ｕｓ　ａｎｔｈｒａｃｉｓ）バチルス
−サブチリスＮＲＲＬ　Ｂ−５５８五１２ （Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔｉｌｌｉｓ　ＮＲＲＬ　
Ｂ−５５８）バチルス・サブチリスＰＯＩ２１９ 五１２ （Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔｉｌｉｓ　ＰＣ！工２１
９）バチルス−セレウス　ＡＴＯＯ１０７０２五１２ （Ｂａｃｉｌｌ、ｕａ　ｃｅｒｅｕｓ　ＡＴＣＣ１０７
０２）コリネバクテリウム自ボビス１８１０ １．５６ （Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｏｖｉｓ　１８
１０　）エシェリヒアΦコリに−１２ （Ｋｅｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＭＬ１６２９）
（Ｓｈｉｇｅｌｌａ　ａｙｓｅｎｔａｒｉａｅ　ＪＥＩ
　１１９　ｊ　Ｏ）（Ｓｈｉｇｅｌｌａ　　５ｏｎｎｅ
ｉ　ＪＥ１１１７４６）（８ａ１ｍｏｎｅ１１ａ　ｔｙ
ｐｈｉ、Ｔ−６３）（Ｐｒｏｔｅｕｓ　ｖｕｌｇａｒｉ
ｓ　０Ｘ１９）（Ｐｒｏｔｅｕｅ　　ｍ１ｒａｂｉｌｉ
ｓ　　工ＦＭ　０Ｍ−９）（日ｅｒｒａｔｉａ　ｍａｒ
ｃｅｓｃｅｎｓ）シュードモナス・エルギノーザＡ３ （Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　　ｓｍｅｇｍａｔｉｓ
　　ＡＴＯＯ１７）（注）使用培地：ミュラー・ヒント
ン寒天培地 温　　度　　５７℃ 第　　２　　表　（２） 歳 Ｓ　シュードモナス−フルオレセンス ＆　シュードモナス・ラクリマンス ２　エルイニア・エロイデ （注）使用培地：ミュラー・ヒントン寒天培地温度２７
℃ 第　　２　　　ｆｉ　　（３） １、　カンジダ・トロピカリスＦ−１ 〉１００ （Ｏａｎｄｌａ　ｔｒｏｐｉｃａｌｌｓ　？−１）λ　
カンジダ・シュードトロピカリスＦ−２五　カンジダ・
アルビカンス３１４７ 歳　カンジダＹｕ−１２００ ＆　カンジダ・クルセイ　？−５ ＆　サツカロミセス俳セレビシェＦ−７ス　クリプトコ
ツカス・ネオホルマンス　Ｆ−１０ａ　ヘルミンソスボ
リウム・オリゼ ２　ピリキュラリア・オリゼ （Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ　ｏｒｙｚａｅ）１α　ベリ
キュラリア・フィラメントサ・ササキ（Ｐｅｌｌｉｃｕ
ｌａｒｉａ　ｆｉｌａｍｅｎｔｏｓａｓａｓａｋｉｉ）
１１、　　キサント永モナス・シトリ １２、キサントモナス・オリゼ （Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ　ｏｒｙｚａｅ）１五　アス
ペルジラス・ニカ−ＩＦ−１６１４、トリコツイートン
・アステロイデス４２９（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ　
ａｓｔｅｒｏｌｌｉｅｓ　４２９）１Ｓ、トリコツイー
トン・メンタグロフィテス（注）使用培地：普通寒天培
地 温度　２７℃ 第２表より明らかなようにＭＧＩ３０２−ＡＦｌ−Ａは
主にダラム陽性菌に対して抗菌活性全示し、更にスタフ
ィロコッカス・アウレウスＭＥ８７１０やＭＢ９６１Ｑ
等の多剤耐性菌にも同等の効果全示し九〇 ＭＧ８０２−ＡＦＩ−Ａを雌性工ＣＲマウスに腹腔内投
与し九時、ＬＤ６ｏは２５０　ｍｆ／ｋＣ９以上である
Ｏ 以上のとおシ、ＭＧ８０２−ＡＦｌ−Ａの理化学的性状
並びに生物学的性質について詳述したが、このような性
質に一致する既知物質はないので、ＭＧ８０２−ＡＩＰ
ｌ−Ａは新規抗生物質であると推定さｎる。

〔実施例〕

次に本発明を実施例によシ説明するが、本発明はこれに
限定されるものではない。

実施例１ 寒天斜面培地で培養し九カイニア・ルブラＭＧ８０２−
ＡＦＩ株（微工研菌寄第８０２２号）より、ガラクトー
ス２．０％、デキストリン２．０係、ソイペプトン（デ
ィフコ社製バクトソイトン）ｔｏ、１、コーン・ステイ
ープ・リカー（日本食品化工（株）製）α５％、硫酸ア
ンモニウムα２％、炭酸カルシウムα２％、消泡用シリ
コンオイルα０３チからなる液体培地（ｐＨ７，４）′
ｔ″１１０　ｍＬずつ分注したワツフル付三角フラスコ
２本に１白金耳ずつ接種し、２７℃で５日間振とう培養
し次。そ２′Ｌを種培養液として、同一培地ｆ　１１０
　ｍＡずつ分注し次ワツフル付三角フラスコ７０本に５
ｍＬずつ接種し、２７℃で３日間撮とり培養し次。

濾過によりｒ液と菌体を分別し、Ｐ液はｐＨ８にて等量
の酢酸ブチルで抽出した。菌体は２ｔのメタノールで抽
出後抽出液を減圧濃縮し、２ｔの水を加え、２ｔの酢酸
ブチルでｐＨ８にて抽出し友。それｔ−Ｆ液の酢酸ブチ
ル抽出液と合わせて減圧濃縮し、１．５１の褐色油状物
質全得意。

こｆ′Ｌ′ｔ−少量のトルエンに溶かし、トルエンで充
てんした１４０−ｍＬのシリカゲルカラムにかけクロマ
トグラフィーを行った。まずトルエン５ｏ。

ｍｉｓ次にトルエン−酢酸エチル（５〇二１）１゜５Ｌ
で溶出し、１５ｆずつ分画する。ミクロコツカス・ルテ
ウスエＩＦ０５３３３株を試験菌とするベーパー・ディ
スク法で活性を示す分画Ｎｏ、　５２−９２を集め、減
圧濃縮して４５０ｍＷの褐色油状物質を得た。この油状
物質４３０ｍｆｆ少量のメタノールに溶かし、あらかじ
めメタノールで膨潤させたセファデックスＬＥ［−２０
”　（７アルマシア社製）のカラム（３００ｍｔ、径２
１画）にかけ、メタノールで溶出して、薄層クロマトグ
ラフィーでＲｆ値α４７〔展開液クロロホルム−メタノ
ール（４０：１）コ’ｉ示す活性画分を集め、減圧濃縮
して２８０？Ｐｓｆ（２）Ｍｅ８Ｏ２−ＡＦｌ−Ａ粗物
質を得た。この粗物質５５ｍｆｆシリカゲル薄層（２０
×２０１−ｒｒｌ、メルク社Ａｒｔ５７１５）５枚でク
ロロホルム−メタノール（４０：ｊ）により展開し、Ｍ
ｅ２Ｏ２−ＡＦｊ−Ａ物質全かき取りメタノールで抽出
後減圧濃縮しｔｏそれを再度セファデックスＬト２０■
カラムクロマトグラフィー（２００ｍｔ、径２．１　ｃ
ｍ　）にかけ、メタノールで溶出し活性画分を集め減圧
濃縮し、４５ｍｆの純粋なＭｅ８Ｏ２−ＡＩＦｌ−Ａ’
ｉ黄褐色飴状物質として得た。これはシリカゲル薄層ク
ロマトグラフィー〔クロロホルム−メタノール（ａｏ：
　１）で展開〕で単一スポラトラ与え、ま九高速液体ク
ロマトグラフィー〔センシューバック８８０−ＯＤＳ−
１２５１Ｎ、Ｃ株）センシュー科学販売、４，６φＸ２
５０＋ｍ）で８５’Ｊメタノールを移動相として１．５
　ｍ１１分の流速において１４．４分に単一のピークを
与えた。

〔発明の効果コ 以上評細に説明した通シ、本発明によりグラム陽性菌に
有効な新規抗生物質及びその製造法が提供され次。本発
明による新規抗生物質は多剤耐性菌に有効な点で顕著な
効果′ｔ−有する。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明のＭｅ８Ｏ２−ＡＦＭ−Ａの紫外部吸収
スペクトル図、第２図にＭｅ８Ｏ２−ＡＦｌ−Ａの赤外
部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）図、第３図ｉｊ：ＭＧ８
０２−ＡＰＩ−Ａのプロトン核磁気共鳴スペクトル（Ｃ
Ｄ○１１溶液）図、第４図ＨＭＧ８０２−ＡＦｌ−Ａｏ
１３ｏ核磁気共鳴スペクトル（ＯＤＯ％溶液）図である
。 特許出願人　　財団法人　微生物化学研究会式　理　　
人　　　　中　　本　　　　　　宏量　　　　　　　井
　　上　　　　　　昭同　　　　　　　　吉　　嶺　　
　　　　栓口 手　続　補　正　書（自発） 昭和６０年８月５日 特許庁長官　宇　賀　道　部　殿 １、事件の表示　　　昭和６０年特許願第１１８８８４
号２発明の名称　　新規抗生物質ＭＧ８０２−Ａ？１−
Ａ及びその製造法 五補正をする者 事件との関係　　　特許出願人 住　所　　　東京部品用区上大崎３丁目１４番２３号名
　称　　財団法人微生物化学研究会 代表者　　市　川　篤　二 西新橋中央し３０２号電話（４３７）−５４６７＆補正
の対象 （υ　明細書の発明の詳細な説明の欄 ｌ補正の内容 明細書の発明の詳細な説明の欄を下記のとシフ補正する
。 （１）　　明細書第２０頁３行の「１Ｕ」を「ＩＰＤ」
と補正する。 （２）　　同第２７頁下から９行のｌ”ｆｉｌａｍｅｎ
ｔｏｓａｓａａａ−ｋｉｉ−Ｊを［ｆｉｌａｍｅｎｔｏ
ｓａ　５ａａａｋｉｉ　Ｊと補正する。 （３）　　同第３１頁下から８行の「販売」を削除する
。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記の特性： 形状：黄褐色飴状 元素分析（実測値）：炭素６１．４４％、水素６．４１
   ％、窒素０．００％、酸素１６．３１％、塩素１５．１
   ６％ 分子量：４８０．１４８７（質量分析による）分子式：
   Ｃ＿２＿５Ｈ＿３＿０Ｏ＿５Ｃ＿ｌ＿２比旋光度：〔α
   〕＾２＾７＿Ｄ＝＋４０．６°（ｃ＝０．５、エタノー
   ル） 紫外部吸収スペクトル（メタノール中）：吸収極大２０
   ５ｎｍ（ｌｏｇε４．２５）、２５１ｎｍ（ｌｏｇε４
   ．１４）、２７０ｎｍ（ｓｈ．ｌｏｇε４．０４）、２
   ９５ｎｍ（ｓｈ．ｌｏｇε３．８７）、３６０ｎｍ（ｌ
   ｏｇε３．８０） 赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）：３４００、２９２
   ０、１６４０、１６１０、１２５０、１０７０ｃｍ＾−
   ＾１溶解性：メタノール、アセトン、クロロホルム、酢
   酸エチル、エチルエーテル、ベン ゼンによく溶ける。水、ヘキサンに難溶 呈色反応：ギプス反応及びアニスアルデヒド反応は共に
   陽性 酸性、塩基性、中性の区別：弱酸性物質 を有することを特徴とする新規抗生物質ＭＧ８０２−Ａ
   Ｆ１−Ａ。 ２、カイニア属に属するＭＧ８０２−ＡＦ１−Ａ生産菌
   を培養し、その培養物から新規抗生物質ＭＧ８０２−Ａ
   Ｆ１−Ａを分離採取することを特徴とする新規抗生物質
   ＭＧ８０２−ＡＦ１−Ａの製造法。