JPH02306953A - 新規な制癌抗生物質コナゲニン及びその製造法 - Google Patents

新規な制癌抗生物質コナゲニン及びその製造法

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JPH02306953A
JPH02306953A JP1127846A JP12784689A JPH02306953A JP H02306953 A JPH02306953 A JP H02306953A JP 1127846 A JP1127846 A JP 1127846A JP 12784689 A JP12784689 A JP 12784689A JP H02306953 A JPH02306953 A JP H02306953A
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邦夫 一色
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濱田　雅
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は新規な制癌抗生物質コナゲニン（Ｃｏｎａｇｅ
ｎｉｎ）及びその製造法に関する。
〔従来の技術〕
微生物の生産する抗生物質はこれまでに約５０００種類
が報告されており、この内のいくつかは癌や感染症の治
療に広く用いられている。ストレプトミセス属に属する
微生物の代謝産物のうち癌治療剤として現在使用されて
いる物質はアドリアマイシンＤ、マイトマイシンＣ，プ
レオマイシン、ダウノマイシン、アドリアマイシン、ア
クラシノマイシンなどが報告されている。
〔発明が解決しようとする課題〕
しかし、従来の制癌性抗生物質のそれと作用機能が異な
る制癌活性を有し、かつ毒性が低くて、人癌治療に有効
な制癌性の物質が望まれている。
本発明の目的は、その望ましい性質をもつ新規な制癌抗
生物質コナゲニン及びその製造法を堤供することにある
。
〔課題を解決するための手段〕
本発明を概説すれば、本発明の第１の発明は新規な抗生
物質コナゲニン及びその塩に関する。コナゲニンは下記
の式〔■〕　： で表わされる化合物である。
例えば、コナゲニンの塩としては、そのカルボン酸基に
おける金属塩、特にナトリウム又はカリウムの如きアル
カリ金属との塩、あるいはカルシウムの如きアルカリ土
類金属との塩が挙げられる。
また本発明の第２の発明は、制癌抗生物質コナゲニンの
製造法に関する発明であって、この方法は、ストレプト
ミセス属に属するコナゲニン生産菌を培養し、その培養
物からコナゲニンを採取することを特徴とする。
前記コナゲニンは癌細胞膜を修飾して制癌効果を示す物
質を得るために、コンカナバリンＡの癌細胞膜への結合
増加を指標として発見された物質であり、毒性が低く、
ｉｎ　ｖｉｖｏでマウスエールリッヒ固型癌に対して制
癌活性を示す制癌抗生物質である。
このコナゲニン生産菌の一例は昭和６３年２月。
神奈川県逗子市の土壌より分離された放線菌で、ＭＩ６
９６−ＡＦ３の菌株番号が付された菌株がある。この菌
株の菌学的性状は次のとおりである。
（ＭＩ６９６−へＦ３株の菌学的性状）１、形態 ＭＩ６９６−　ＡＦ３株は顕微鏡下で分枝した基中菌糸
より、比較的長いまっすぐな気菌糸を形成し、らせん形
成および輪生技は認められない。気菌糸の先端には５０
個以上の胞子の連鎖を認め、その大きさは０．６　Ｘ　
１．０〜１．２ミクロン位を示す。胞子の表面は平滑で
ある。
２、　各種培地における生育状態 色の記載について〔〕内に示す標準はコンテイナー・コ
ーポレーション・オブ・アメリカのカラー・ハーモニー
・マニュアル（ＣＯ口ｔａｉｎｅｒＣｏｒｐｏｒａｔｉ
ｏｎ　ｏｆ　ＡｍｅｒｉｃａのＣｏ１ｏｒ　ｌｌａｒｍ
ｏｍｙ　Ｍａｎｕａｌ）を用いた。
（１）シュクロース・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）無
色の発育上に、白〜ピンク白の気菌糸をうつすらと着生
し、溶解性色素は認められない。
（２）グルコース・アスパラギン寒天培地（２７℃培養
） 発育はうす黄（２ｃａ、　Ｌｔ、　Ｉｖｏｒｙ〜２ｅａ
　Ｌｔ、Ｗｈｅａｔ）。
気菌糸は白〜ピンク白（３ｃａ、　Ｐｅａｒｌ　Ｐｉｎ
ｋ）、溶解性色素は認められない６ （３）グリセリン・アスパラギン寒天培地（ＩＳＰ培地
５．２７℃培養） うす黄茶（３ｉｅ、　Ｃａｍｅｌ〕〜黄茶（３１ｅ、　
Ｃｉｎｎａｍｏｎ）の発育上に、ピンク白〜うすピンク
（４ｃａ、　ＦｌｅｓｈＰｉｎｋ）の気菌糸を着生し、
溶解性色素は黄茶を呈する。
（４）スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ培地４．２７
℃培養） うす黄（２ｅａ、　Ｌｔ、　Ｗｈｅａｔ）　〜うす黄茶
（２ｃｉ。
Ｈｏｎｅｙ　Ｇｏｌｄ）の発育上に、うすピンク（４ｃ
ａ、　ＦｌｅｓｈＰｉｎｋ）の気菌糸を着生し、溶解性
色素は認められない。
（５）チロシン寒天培地（ＩＳＰ培地７．２７℃培養）
発育はうす黄（２ｅａ、　Ｌｔ、　Ｗｈｅａｔ）　〜う
す黄茶（２ｉｃ、　）Ｉｏｎｅｙ　Ｇｏｌｄ）、気菌糸
は茶白（３ｃａ、　ＰｅａｒｌＰｉｎｋ）　、溶解性色
素は認められない。
（６）栄養寒天培地（２７℃培養） 発育は無色、気菌糸を着生せず、溶解性色素も認められ
ない。
（７）イースト・麦芽寒天培地（ｒｓｐ培地２，２７℃
培養） うす黄茶（２ｉｃ、　Ｈｏｎｅｙ　Ｇｏｌｄ　〜３Ｌｅ
、　Ｃｉｎｎａｍｏｎ）の発育上に、うすピンク　（４
ｃａ、　Ｆｌｅｓｈ　Ｐｉｎｋ〜５ｃａ、　Ｆｌｅｓｈ
　Ｐｉｎｋｌ　　の気菌糸を着生し、溶解性色素は認め
られない。
（８）オートミール寒天培地（ＩＳＰ培地３，２７℃培
養） 発育は無色、気菌糸はピンク白〜うすピンク（４ｃａ、
　Ｆｌｅｓｈ　Ｐｉｎｋ〜５ｃａ、　Ｆｌｅｓｈ　Ｐｉ
ｎｋ）　、溶解性色素は認められない。
（９）グリセリン・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）うす
黄（１ａａ、　Ｌｔ、　Ｙｅｌｌｏｗ）　〜黄茶（３ｎ
ｇ。
Ｙａｌｌｏｗ　Ｍａｐｌｅ）　　の発育上に、茶白　（
３ｃａ、　ＰｅａｒｌＰｉｎｋ　）の気菌糸を着生し、
黄茶の溶解性色素がわずかに認められる。
（１０）スターチ寒天培地（２７℃培養）発育はうす黄
〜うす黄茶（２ｇｃ、　Ｂａｍｂｏｏ）、気菌糸はうす
ピンク（４ｃａ、　Ｆｌｅｓｈ　Ｐｉｎｋ）、溶解性色
素は認められない。
（１１）リンゴ酸石灰寒天培地（２７℃培養）無色の発
育上に白の気菌糸を着生し、溶解性色素は認められない
。
（１２）セルロース（濾紙片添加合成液、２７℃培養）
無色の発育上に、白の気菌糸をうつすらと着生し、溶解
性色素は認められない。
（１３）ゼラチン穿刺培養 １５％単純ゼラチン培地（２０℃培養）、グルコース・
ペプトン・ゼラチン培地（２７℃培養）とともに、発育
は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素は認められない
。
（１４）脱脂牛乳（３７℃培養） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素はわずかに
茶色味をおびる。
３、生理的性質 （１）生育温度範囲 スターチ・イースト寒天培地（可溶性澱粉１．０％。
イーストエキス〔日本製薬■製〕０．２％、ひも寒天３
６０％、　ｐ１１７．０〜７．２）を用い、２０℃、２
４℃、２７℃、３０°Ｃ５３７℃、５０℃の各温度で試
験の結果、５０℃を除いて、そのいずれの温度でも発育
したが、最適生育温度は３０℃〜３７℃付近と思われる
。
（２）ゼラチンの液化（１５％単純ゼラチン、２０℃培
養：ゾルコース・ペグ１ヘン・ゼラチン。
２７℃培養） 単純ゼラチン培地では、培養後７日目頃より液化が認め
られ、その作用は中等度〜強い方である。
グルコース・ペプトン・ゼラチン培地では、培養後１１
１日目頃り液化が認められ、その速度はゆっくりと進み
、中等度である。
（３）スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天培地
及びスターチ寒天培地、いずれも２７℃培養） スターチ・無機塩寒天培地、スターチ寒天培地とともに
培養後３日目頃より氷解性が認められ。
その作用は強い方である。
（４）脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳３７℃培
養） 凝固を認めることなく、培養後８日目頃よりペプトン化
が始まり、その速度はゆっくりと進み、３週間目に完了
する。
（５）メラニン様色素の生成（トリプトン・イースト・
ブロス、ＩＳＰ培地１：ペプトン・イースト・鉄寒天培
地、ＩＳＰ培地６：　チロシン寒天培地、ＩＳＰ培地７
、いずれも２７℃培養）トリプトン・イースト・ブロス
、ペプトン・イースト・鉄寒天培地およびチロシン寒天
培地で陰性である。
（６）炭素源の利用性（プリドハム・ゴトリーブ寒天培
地、ＩＳＰ培地９，２７℃培養）叶グルコース、し−７
ラビノース、Ｄ−キシロース、ラムノース、ラクトース
を利用してよく発育し、イノシトール、Ｄ−フラクトー
ス、シュクロース。
叶マンニトール、ラフィノースは利用しない。
（７）リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天培地、２
７℃培養） 陽性である。
（８）硝酸塩の還元反応（０，１％硝酸カリウム含有ペ
プトン水、　ＩＳＰ培地８．２７℃培養）陽性である。
（９）セルロースの分解（濾紙片添加合成液、２７℃培
養） 陰性である。
以上の性状を要約すると、８１６９６−ＡＦ　３株の気
菌糸は直線状で、らせん形成および輪生技は認められず
、胞子の表面は平滑である。種々の培地で。
無色あるいはうす黄〜うす黄茶の発育上にピンク白〜う
すピンクの気菌糸を着生し、溶解性色素は認められない
か、あるいはわずかに茶色味をおびる。メラニン様色素
の生成は、トリプトン・イースト・ブロス、ペプトン・
イースト・鉄寒天培地。
チロシン寒天培地のいずれの場合も陰性である。
蛋白分解力は中等度〜強い方であり、スターチの氷解性
も強い。なお、細胞壁に含まれる２、６−ジアミノピメ
リン酸はＬＬ−型であった。
これらの性状より、ＭＩ６９６−ＡＦ３株はストレプト
ミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属に属するものと
考えられる。更に、近縁の既知菌種を検索すると、スト
レプトミセス・ロゼオスルス（銭匹匹憇匹且凹ｏｆｕｌ
ｖｕｓ；文献１）　ｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊ
ｏｕｒｎａｌ　ｏｆＳｙｓｔｅｍａｔｉｃ　８ａｃｔｅ
ｒｉｏｌｏｇｙＪ　１８巻、１６５頁、１９６８：文献
２）　ｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ
　ｏｆ　ＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇ
ｙＪ　３０巻、３９９頁、１９８０）およびストレプト
ミセス・ロゼオスポルス（Ｓｔｒｅ　ｔｏｎ　ｃｅｓｒ
ｏｓｅｏｓ　ｏｒｕｓ；文献ｒＴｎｔｅｒｎａｔｉｏｎ
ａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＳｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂ
ａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ」１８巻、３７０頁、１９６８
）があげられた。
そこで、ＭＩ６９６−ＡＦ３株とこれらの菌種について
実地に比較検討した。その結果をまとめると第１表のよ
うになる。
第１表から明らかなように、ＭＩ６９６−ＡＦａ株はス
トレプトミセス・ロゼオスポルスおよびストレプトミセ
ス・ロゼオスルスのいずれにも類似している。しかし、
後者とはＤ−フラクトース、シュクロース、ラフィノー
スの利用性で大きく異なり。
しかも後者が有するｐＨインディケータ−（酸化還元指
示薬）の溶解性色素をＭＩ６９６−ＡＦ３株は示さない
。一方、ストレプトミセス・ロゼオスポルスとＭＩ６９
６−　ＡＦ３株は、すべての点で酷似した成績を示した
。
従って、ＭＴ６９６−ＡＦａ株をストレプトミセス・ロ
ゼオスポルス（ｓｔ■蛙叩ハ図仔ｙ犯■二ｕｓ）　ＭＩ
６９６−ＡＦ：ＩＩと同定する。
なお、ＭＩ６９６−ＡＦＢ株を工業技術院微生物工業技
術研究所に寄託申請し、平成元年３月２日、微工研菌寄
第１０５９８号として受託された。
（コナゲニンの理化学的性状） 形　　状：無色板状晶 元素分析：炭素４７．９６％、水素７．６７％、窒素５
８６４％、酸素３８．１９％ 質量分析：　２５０．１２９１　（Ｍ÷Ｈ）“、（高分
解機能マススペクトルによる） 分子式”　Ｃ１０Ｈ１ｇ　Ｎ　Ｏｓ 融　　　点：１５９〜１６１℃ 比旋光度：（α〕も’　＋５５．４’（ｃ　１．０．メ
タノール）溶解性：メタノールに易溶、水に可溶、クロ
ロホルムに難溶。
紫外部吸収スペクトル：末端吸収（メタノール中）赤外
部吸収スペクトル：第１図に臭化カリウム錠による赤外
部吸収スペクトルを示す。
第１図において横軸は波数（ｃｍ−１）を。
縦軸は透過率（％）を表わす。
核磁気共鳴スペクトル二重ジメチルスルホキシド中のプ
ロトン核磁気共鳴スペクトルを第２図に示す０図の横軸
はｐｐｍを表わし、なお内部基準はテトラメチルシラン
である。
更にまた重メタノール中の１３０磁気共鳴スペクトルを
第２表に示す。
第２表 コナゲニンは各種スペクトルおよびＸｖ；Ａ結晶解析よ
り前記の式〔Ｉ〕の構造を有することが決定された。こ
の構造に一致する既知物質は報告されていないので、コ
ナゲニンは新規な抗生物質であると決定した。
（コナゲニンの生物学的性質） コナゲニンの毒性は低く、雌性ＩＣＲマウスに腹腔内投
与した時、ＬＤ、。は５０Ｂ／ｋｇ以上であった。
（イ）　コナゲニンのエールリッヒ固型癌担癌マウスに
対する治療実験は次のように行なった。すなわち、ＩＣ
Ｒマウスにエールリッヒ腹水癌細胞の懸濁液を細胞数２
×１０１個ｌマウスになる様に鼠跋部皮下に移植し、移
植後７日目よりコナゲニンを６．２５．３．Ｌ、１，５
６．０．７８．０．３９およびＯ，）９５ｍｇ／ｋｇ（
１群４匹、対照群８匹）を腹腔内に７回注射した。
１５５日目固型癌を取出し重量を測定し、対照群のマウ
スの固型癌の重量に対するフナゲニン投与群の固型癌の
重量の減少を抑制率として第３表に示した。第３表に示
すように、コナゲニンは、マウスエールリッヒ固型癌に
対して、著明な増殖抑制活性を示した。
第３表 （ロ）　コナゲニンの癌細胞膜表面に与える影響に対す
る実験は次のように行なった。すなわち、ｌＯ％牛血清
加最小必須培地（ＨＥＭ、日水製薬■製〕中に、ロイケ
ミアＬ１２１０細胞を２Ｘ１０’１０＋Ωになるように
懸濁し、試料として１　μｇ／ｒａＱ、０−５　μｇ／
ｍ１２．０．２５μｇ／ｇｌＱのコナゲニンを加え、炭
酸ガス卵器（ＣＯ□濃度５％）中で３７℃、２日間培養
した。培養終了１時間前に放射性ラベルされたコンカナ
バリンＡ（Ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ　Ａ　Ｎ−［ａｃ
ｅｔｙｌ−’Ｉｔ］　ａｃｅｔｙｌａｔｅｄ、アマジャ
ム社１２）の４０ｎＣｉ／ｍ１２を添加した。培養細胞
をセルハーベスタ−によって濾紙上に固定し、液体シン
チレーション・カウンターで放射能値を測定し、その測
定値について、対照群の放射能値を１００とした時の換
算の値を１１２１０１１１胞に対するコンカナバリンＡ
の結合増加値として第４表に示した。
第４表から明らかなように、コナゲニンはＬ１２１０細
胞に対するコンカナバリンＡの結合を増加させた。
第４表 〔実施例〕 次に本発明を実施例により説明するが、本発明はこれに
限定されるものではない。
尖五何上 寒天斜面培地で培養したストレプトミセス・ロゼオＸ：
ｔ’／ＬｚＸ（Ｓｔ匹扛蜆り並並二μ法１巨）ＭＩ６９
６−ＡＦ３株（微工研菌寄第１０５９８号）より、ガラ
クトース２．０％、デキストリン２．０％、ソイペプト
ン（ディフコ社製バクトソイトン）１．０％、コーン・
ステイープ・リカー〔日本食品化工■ｌ］　０．５％、
ｉ！ｔｅｌアンモニウム０．２％、炭酸カルシウム０，
２％、消泡用シリコーンオイル〔信越化学工業■製シリ
コンＫＭ７０）　０，０３％からなる液体培地（ｐ＋＋
　７．４）を１１０ｍＱずつ分注したワツフル付三角フ
ラスコ２本に１白金耳ずつ接種し、２７℃で３日間振ど
う培養した。
それを種培養液として用い、マルトース（）ＩＡＹＡＳ
）ＩＩＢＡＲＡ　ＢＩＯＣＨＥＭＩＣＡＬ社製）２．０
％、細菌用肉エキス〔極東製薬工業■製〕０．５％ペプ
トン（日本製薬■製ポリペプトン〕０．５％、粉末酵母
エキスＳ〔日本製薬■製〕０．３％、塩化ナトリウム０
．３％、硫酸マグネシウム（７水和物）０．１％、以上
の培地成分に無機塩として、硫酸銅（５水和物）２．８
ｇ、硫酸鉄（７水和物）　０．４ｇ、塩化マンガン（４
水和物）　３．２ｇ、硫酸亜鉛（７水和物）　０．８ｇ
を５００ｎ＋Ｑの蒸留水に溶解したものを１．２５ｍＱ
／Ｑとなるように加えた液体培地を、　　１１０ｍ（ｌ
ずつ分注したワツフル付三角フラスコ９１本に３ｍＱず
つ接種し、２７℃で４日間振どう培養した。培養液の濾
過により濾過液を菌体から分離し、その濾過液８１００
℃ｍＱに２００ｇの活性炭素を加え、濾別した。活性炭
素に吸着した有効成分は４Ｑの５０％アセトン水で抽出
し、減圧濃縮した。これを２Ｑの蒸留水に溶解しｐＨ３
にて等量のブタノールで抽出、Ｐｌ＋を８に戻した後、
Ｍ圧濃縮して、７゜５ｇの褐色油状物質を得た。
これを酢酸ブチル−ブタノール−酢酸−水（６二４　：
１：１）で充填した１５０＋ＩＩＱのシリカゲルカラム
にかけ、同溶液で溶出クロマトグラフィーを行った。
メルク社製Ａｒｔ、　５７１５シリカゲルプレートを用
いた薄層クロマトグラフィーでＲｆ値Ｏ，ＳＯ〜０．５
５（展開液ブタノール−酢酸−水（４：１：Ｉ））を示
すニンヒドリン発色分画を集め、減圧濃縮して１．２ｇ
のコナゲニン粗物質を得た。
この粗物質を高速液体クロマトグラフィー（センシュー
科学■製、センシューパックヌクレオジル（Ｎｕｃｌｅ
ｏｓｉｌ）５Ｃ１，，２０φＸ　３０Ｏｎ＋ａ＋］　に
かけ、５ｍｌ！／分の流速において、移動相を２０分間
で１０％メタノールから１００％メタノールへとグラジ
ェントをかけながら溶出し、その後２０分間メタノール
で溶出を行った。２１分のピークを分取し、減圧濃縮し
たところ無色結晶として３４　、８ｎ＋ｇのコナゲニン
が得られた。この結晶のメタノール溶液は、メルク社Ａ
ｒｔ、　５７１５シリ力ゲル薄層クロマトグラフィー〔
ブタノール−酢酸−水（４：１：１）で展開〕で単一ス
ポットを与え、純粋なコナゲニンを得たことがねかつた
。
〔発明の効果〕
以上詳細に説明した通り１本発明により新規な制癌抗生
物質としてコナゲニンが収得され、またその製造法が提
供された０本発明による新規抗生物質コナゲニンはマウ
スエールリッヒ固型癌に顕著な制癌効果を有する。
【図面の簡単な説明】
第１図は本発明のコナゲニンの赤外部吸収スペクトル図
、第２図はプロトン核磁気共鳴スペクトル図である。 手続ネ市正Ｊシ（自発） 平成　１年　８月１　日 持５’ｆ庁良官　殿 １、事件の表示 平成　１年特許願第１２７８４６号 ２、発明の名称 新規な制痛抗生物質コナグニン及びその４、代理人 〒１０５住　所　　東京都港区西新橋１丁目１番１５号
５、補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄 ６、補正の内容 （１）明細書第４頁第１８行の「Ｈａｒｍｏｍｙ　Ｊを
［Ｈａｒｍｏｎｙ　Ｊと補正する。 （２）　　同書第５負第５行の［ｃａ、　Ｌｔ、　Ｊを
［ｃａ。 ＬｔＪと補正する。 （３）　　同書第５負第５行の「ｅａＬｔ、Ｊを「ｅａ
。 ＬｔＪと補正する。 （４）同書第５負第６行、第５頁第１１行、第６頁第２
行、第６頁第１Ｏ行、第６負第１１行、第６頁第１６行
の２個所の［ｃａ、　Ｊ及び第６頁末行並びに第７頁第
５行の「ｃａ、　Ｊを「ｃａ、　Ｊと補正する。 （５）同書第５頁第１０行のｒ　ｉｅ、　Ｊを［ｉｅ、
　−Ｊと補正する。 （６）同書第５頁第１０行及び第６負第９行の「Ｉｅ、
　Ｊを［ｌｅ、　Ｊと補正する。 （力　同書第５負第１６行及び第６頁第１行の［ｅａ、
　Ｌｔ、　Ｊを［ｅａ、ＬｔＪと補正する。 １８）同書＠５頁第１６行の「Ｃ１」を「ｉｃ　Ｊと補
正する。 （９）同書第６負第２行及び第９行のｆ−ｉｃ、　Ｊを
「ｉｃ、　Ｊと補正する。 ０１　　同書第６負第１９行の［１ｅａ、　Ｌｔ、　Ｊ
を「１−ｉ　ｅａ、　Ｌｔ　Ｊと補正する。 ｕｌｌ　　１ＩＮＪ書第６貞第１９行のｒ　ｎｙ、　Ｊ
をｒ　ｎｙ、　Ｊと補正する。 ｉ１３　　同Ｗ＠７貝第４行の「グｃ、　Ｊを［Ｐｃ、
Ｊと補正する。 ｔｌ：Ｎ　　ｌａＪ杏第７負萌１５行及び第９負第１行
の「とともに」を「ともに」と補正する。 １１４１　　間８第７貞第１６行の「色素は」を「色素
も」と補正する。 （１シ　同書・ル９負第３行の「牛乳３７」を「牛乳。 ３７」と補正する。 ＋ｉ　　同書第１２負第１衣中の「ＭＩ６９６−ＡＦ３
　、Ｊの相の第４行目の「ピンク色」を「ピンク色」と
補正する。 ＋１７１　　同＄第１４負Ｍ１行〕「２５０．１２９１
Ｊ　ノ前Ｋ「ｍ／ｚ」を挿入する。 Ｕυ　同書第５頁第１０の「高分解機能」を「ＦＡＢ高
分解能」と補正する。 Ｑ９　　同書第５頁第１０行〜第１４行の「重ジメチル
スルホキシド」を「重メタノール」と補正する。 ■　同書第１４負第１８行の「トル」の次に［の化学シ
フ　ト（ｐｐｍ）　Ｊを挿入する。 ＣＤ　同書第１７負第３行の「卵」を「ふ卵」と補正す
る。 （２）同書第１９頁第４行の「０．５％」の次に句点「
、」を挿入する。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、下記の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） で表わされる化合物である抗生物質コナゲニン又はその
    塩。 ２、ストレプトミセス属に属するコナゲニン生産菌を培
    養し、その培養物から抗生物質コナゲニンを採取するこ
    とを特徴とするコナゲニンの製造法。
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US3856854A (en) * 1972-11-20 1974-12-24 R Schnettler Process of preparing alpha-hydroxymethyl aminoacids
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