JPS6136515B2

JPS6136515B2 -

Info

Publication number: JPS6136515B2
Application number: JP53107868A
Authority: JP
Inventors: Minoru Uchida; Takao Nishi; Kazuyuki Nakagawa
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1978-09-01
Filing date: 1978-09-01
Publication date: 1986-08-19
Also published as: JPS5535018A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規なアルカンアミド誘導体、さらに
詳しくは、一般式〔〕：〔式中、R¹は低級アルキル基、R²はシクロアルキ
ル基、Ａはメチレン基またはカルボニル基を示
し、ｎは１〜３の整数を意味する〕で表わされるアルカンアミド誘導体に関する。本発明の化合物は、血小板凝集抑制作用、消炎
作用またはホスホジエステラーゼ阻害作用を有
し、抗血栓剤、消炎剤、抗潰瘍剤、抗喘息剤とし
て有用である。上記一般式〔〕において低級アルキル基とし
ては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプ
ロピル、ブチル、tert−ブチルなどが包含され
る。また、シクロアルキル基としては例えばシク
ロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シ
クロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル
などが包含される。本発明の代表的な化合物としては、以下のもの
を挙げることができる。Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−４−〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕酪酸アミ
ド、Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−５−〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕吉草酸アミ
ド、Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−４−〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕−４−オキ
ソ酪酸アミド、Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−５−〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕−５−オキ
ソ吉草酸アミド、Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−３−〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕プロピオン
酸アミド、Ｎ−ブチル−Ｎ−シクロオクチル−４−〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕酪酸アミ
ド、Ｎ−エチル−Ｎ−シクロヘキシル−５−〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕−５−オキ
ソ吉草酸アミド、Ｎ−メチル−Ｎ−シクロプロピル−４−〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕−４−オキ
ソ酪酸アミド、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−シクロヘキシル−５−
〔６−（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕吉草
酸アミド。本発明の化合物は各種の方法で製造されるが、
その一例を挙げれば、下記反応式に示されるよう
に、公知のカルボン酸誘導体〔〕に、公知のア
ミン誘導体〔〕を反応させて製造される。〔式中、R¹、R²、Ａおよびｎは前記に同じ〕上記反応式にしたがい、本発明の化合物の製法
をさらに詳しく説明する。カルボン酸〔〕とアミン〔〕との反応は、
公知のアミド結合生成反応に用いられる条件が採
用でき、好ましくは、例えば混合酸無水物法が用
いられる。すなわち、カルボン酸〔〕をアルキ
ルハロカルボン酸を反応させて混合酸無水物と
し、これをアミン〔〕と反応させる。混合酸無
水物法において使用されるアルキルハロカルボン
酸としてはクロロギ酸メチル、ブロモギ酸メチ
ル、クロロギ酸エチル、ブロモギ酸エチル、クロ
ロギ酸イソブチルなどが挙げられる。混合物無水
物は通常のシヨツテン−バウマン反応により得ら
れ、これを通常単離することなくアミン〔〕と
反応させることにより一般式〔〕で表わされる
化合物が製造される。シヨツテン−バウマン反応
は該反応に慣用の塩基性化合物、例えば、トリエ
チルアミン、トリメチルアミン、ピリジン、ジメ
チルアニリン、Ｎ−メチルモルホリンなどの有機
塩基、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素
カリウム、炭酸水素ナトリウムなどの無機塩基の
存在下に行なわれ、一般に、−20〜100℃、好まし
くは０〜50℃、の温度下に、５分〜10時間、好ま
しくは５分〜２時間、処理することにより行なわ
れる。また、得られた混合酸無水物とアミン
〔〕との反応は−20〜150℃、好ましくは10〜50
℃、の温度下、５分〜10時間、好ましくは５分〜
５時間、の条件下に行なわれる。この反応は、通
常適当な溶媒、例えば、塩化メチレン、クロロホ
ルム、ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素
類、ベンゼン、トルエン、キシレンなどの芳香族
炭化水素類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフ
ラン、ジメトキシエタンなどのエーテル類、酢酸
メチル、酢酸エチルなどのエステル類、Ｎ・Ｎ−
ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、
ヘキサメチルリン酸トリアミドなどの非プロトン
性極性溶媒を用いて行なわれる。上記の方法におけるカルボン酸〔〕、アルキ
ルハロカルボン酸およびアミン〔〕の使用割合
は、通常、等モルずつで充分であるが、カルボン
酸〔〕に対してアルキルハロカルボン酸および
アミン〔〕を1.5倍モル程度まで使用してもよ
い。かくして製造される一般式〔〕の化合物は、
通常の分離手段により容易に単離精製できる。該
分離手段としては、例えば溶媒抽出法、溶媒稀釈
法、再結晶法、液体クロマトグラフイー、ガスク
ロマトグラフイーなどが挙げられる。つぎに実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明するが、本発明はこれらに限定されるもので
はない。実施例１４−〔６−（３・４−ジヒドロカルボスチリ
ル）〕酪酸0.7ｇをジメチルホルムアミド10mlに懸
濁させる。室温でかきまぜながらトリエチルアミ
ン0.4ｇを加えて溶解させる。これに氷冷下、撹
拌しながらクロロギ酸イソブチル0.5ｇを滴下
し、室温で30分間撹拌する。これにＮ−メチルシ
クロヘキシルアミン0.4ｇを滴下し、室温で１時
間撹拌する。反応液を水にあけて酢酸エチルで抽
出する。酢酸エチル溶液は希塩酸、飽和重炭酸ナ
トリウム水溶液および飽和食塩水で順次洗浄す
る。硫酸ナトリウムで乾燥し、酢酸エチルを留去
する。残渣をリグロインから再結晶して無色プリ
ズム状のＮ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−５−
〔６−（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕酪酸
アミド0.7ｇを得る。融点95〜98℃ 実施例２〜３前記実施例１と同様にして下記の化合物を得
る。Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−４〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕−４−オキ
ソ酪酸アミド、無色針状晶（再結晶溶媒；エタノ
ール）、融点207〜208℃ Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−５−〔６−
（３・４−ジヒドロカルボスチリル）〕−５−オキ
ソ吉草酸アミド、淡黄色粉末状晶（再結晶溶媒；
エタノール−リグロイン）、融点150〜152℃ 本発明の化合物の薬理試験結果を示す。＜薬理試験１＞サイクリツクアデノシンモノホスフエートホス
ホジエステラーゼ（Ｃ−AMP−PDE）の阻害作
用この試験はBiochimica et Biophysica Acta第
429巻第485〜497頁（1976年）及びBiochemical
Medicine第10巻第301〜311頁（1974年）に記載
の活性測定法に準じて行なわれる。即ちまず、家
兎PRPを3000rpmで10分間遠心分離して得た沈査
の血小板に、PH7.4の50ミリモル−トリス塩酸緩
衝液にMgCl₂の１ミリモルを加えた溶液10mlを加
えて上記血小板を浮遊させ、テフロンポツター型
ホモゲナイザーにて、血小板を磨砕し、次いで２
回凍結融解を繰り返し、更に200ワツトの超音波
を300秒間かけ破壊後100000Gで60分間超遠心分
離して、上清を粗酸素液とする。予め50ミリモル−トリス酢酸緩衝液（PH6.0）
にて緩衝化した1.5×20cmのDEAE−セルロース
カラムに、上記で調整した粗酸素液10mlを通し、
30mlの50ミリモル−トリス酢酸緩衝液にて洗浄溶
出し、この緩衝液に０〜１モルの酢酸ナトリウム
−トリス酢酸緩衝液にてリニアグラデイエントを
かけ溶出する（総溶出液量約300ml）。尚流速は
0.5ml／分とし、各フラクシヨンは５mlづつ分取
する。上記操作により、100μモルの高いＣ−
AMP基質濃度で2nモル／ml／分以下の弱い活性
を有しかつ0.4μモルの低いＣ−AMP基質濃度で
100pモル／ml／分以上の強い活性を有するフラ
クシヨンを集める。これをＣ−AMP−PDEとす
る。各濃度の供試化合物水溶液0.1mlと予め定めた
0.4μモルのＣ−AMP（トリチウムＣ−AMP）を
含むPH8.0、40ミリモル−トリス塩酸緩衝液（牛
血清アルブミン50μｇ及び４ｍモルのMgCl₂を含
む）との混合液合計0.2mlを基質液とし、これに
上記で調整した一定濃度のＣ−AMP−PDE溶液
0.2mlを添加し30℃で20分間反応させ、トリチウ
ムＣ−AMPからトリチウム５−AMPを生成させ
る。次に反応停止のため２分間沸騰水中に浸漬
後、反応液を氷水中で冷却し、これに5′−ヌクレ
オチダーゼとして蛇毒（１mg/ml）の0.05mlを加
え30℃で10分間反応させトリチウム5′−AMPを
トリチウム・アデノシンに変換させる。得られた
反応液全量を陽イオン交換樹脂［AG.50W×4200
〜400メツシユ（Bio−Rad社製品）、カラムサイ
ズ0.5×1.5cm］に添加したトリチウムアデノシン
のみを結合させ、６mlの蒸留水で洗浄後、3N−
アンモニア水1.5mlで溶出させる。この溶出液全
量にトリトン−トルエン型のシンチレーター10ml
を加え、液体シンチレーシヨンカウンターにて生
成されたトリチウムアデノシンを計測することに
よつて、PDE活性を測定する。上記方法に従い測定された各供試化合物PDE
活性値（Vs）及びコントロール値（Vc）（供試化
合物を含まない水）から、PDE阻害率（％）を
次式により算出する。 PDE阻害率（％）＝Ｖｃ−Ｖｓ／Ｖｃ×100 得られた阻害物（％）を第１表に示す。第１表
には対照化合物として公知のパパベリンを用いて
同様試験を行つた結果を併記する。供試化合物： No.1：Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−５−
［６−（３・４−ジヒドロカルボスチリル）］吉
草酸アミド No.2：Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル−５−
［６−（３・４−ジヒドロカルボスチリル）］−４
−オキソ酪酸アミド No.3：パパベリン（対照薬）

【表】＜薬理試験２＞血小板凝集抑制作用をAG−型の凝集計
（aggregometer）［ブライストン・マニユフアク
チユアリング・コンパニー（Bryston
Manufacturing Co.）製］を用いて測定した。兎
から採取した血液試料はクエン酸ナトリウムと全
血液の混合物でその混合比率は１：９（容量比）
である。該試料を1000rpmで10分間遠心分離し
て、血小板濃度の高い血清［Platelet rich
plasma（PRP）］を得る。得られたPRPを分離
し、残りの血液試料を3000rpmで15分間さらに遠
心分離して血小板濃度の低い血清［Platelet
poor plasma（PPP）］を得る。前記PRP中に含まれる血小板の数をブレツチヤ
ー・クロンカイト法（Brecher−Clonkite
Method）で測定し、PRPをPPPで希釈してアデ
ノシン・ジホスフエート（ADP）−誘発凝集試験
に供するため300000／mm²の血小板を含むPRP試料
を調整し、またコラーゲン−誘発凝集試験に供す
るため450000／mm²の血小板を含むPRP試料を調整
した。試験すべき化合物を予め定めた濃度で含有する
溶液0.01mlに上記で調整したPRPの試料0.6mlを
加え、混合物を温度37℃の恒温槽に１分間入れ
た。次に該混合物にADPまたはコラーゲン溶液
を0.07ml加えた。この混合物の透過度を測定し、
透過度の変化を撹拌器の回転速度1100rpmにて凝
集計を用いて測定した。この試験においてADP
またはコラーゲンの溶液を調整するためにオーレ
ン・ベロナール緩衝液（PH7.35）を用いた。上記
ADP溶液は濃度が7.5×10^-5Mになるよう調整
し、コラーゲン溶液は100mgのコラーゲンに上記
緩衝液５mlを加えてすりつぶし、上澄液をコラー
ゲン誘発剤として使用した。ADP−誘発凝集試
験及びコラーゲン−誘発凝集試験において対照物
質としてアスピリンを使用した。凝集抑制作用は
コントロールの凝集率に関して阻止率（％）とし
て測定した。凝集率は下式に従い計算する。凝集率＝ｃ−ａ／ｂ−ａ×100 ここでａ：PRPの透過度ｂ：PPPの透過度ｃ：試験化合物及び凝集誘発剤を含有するPRPの
透過度コラーゲン又はADPで誘発した兎の血小板凝
集に対する抑制作用を第２表に示す。なお、第２表における数値は阻止率（％）であ
る。また供試化合物No.1及び２は薬理試験１と
同一である。

【表】

Claims

【特許請求の範囲】１一般式〔式中、R¹は低級アルキル基、R²はシクロアルキ
ル基、Ａはメチレン基またはカルボニル基を示
し、ｎは１〜３の整数を意味する〕で表わされるアルカンアミド誘導体。