JPS6150975A - ベンゾチアゾリ−ルベンゼンスルホン酸アミド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 ルベンゼンスルホン酸アミド誘導体に関する。

−８８２２６号公報やアンチバイオティクス・アンド・
ケモセフビー（　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　　ａｎｄＣ
ｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　）第８巻，ｊｇ３３−３６頁
（１９５８年）に記載されている。

発明が解決しようとする問題点 特開昭５０−８８２２６号公報においては、防ダニ剤と
して有用な２−フエ二μベンゾチアゾー／Ｌ’ｌ１４４
体が開示され、また、Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃａ　ａｎｄ
Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　　には抗結核活性を有する
２−フエ二μベンゾチアゾ−／Ｓ／，ｆｉ−導体が開示
されているが、いずれの文献とも、ベンゾチアゾ−〃の
２位に結合するフエニル基にヌルレフ１モイル基が等大
された化合物に対しての言及が全くなく、また循環器系
に対する作用，制癌作用および止藺作用に関する言及も
全くない。

本発明者らは脳および心臓血管系疾患の予防・治療剤，
制癌剤．止瀉剤として有用な化合物を鋭意研究した結果
、優れた作用を有するベンゾチアン誓μベンゼンスμホ
ン酸アミド誘導体の合成ニ成効し、本発明を完成した。

問題点？解決するための手段 本発明は式 〔式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ水素または低級アル
コキンを示し、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ低級アルキ／
ｌ／またはｆｆｌ換されていてもよいアラルキル基を示
すか、または隣接する窒素原子とともに環を形成し、Ａ
は低級アルキレンを示す〕で表わされる化合物およびそ
の塩と提供するものである。

上記式（Ｉ）に関し、Ｒ１またはＲ２で示される低級７
μコキシ基としてはたとえばメトキシ。

エトキシ、プロポキク、インプロポキシ、グトキン、イ
ソブトキク、寓−エトキシ、　ｔｅｒｔ−ブトキクなど
の炭素数１〜４程度のア）ｖコキシ基があげら江る。

Ｒ３ま几はＲ４で示される低級アルキｐ基としてはメチ
〜、エチ〃、プロピρ、イソプロピ〃。

ブチ／Ｉ／ｌイソブチ／Ｌ／　、　５ｅｃ−グチル、ｔ
ｅｒｔ−グチルなどの炭素数１〜４程度のアルキル基が
あげられる。

ＲまたはＲ４で示されるアラルキル基としてはたとえば
ベンジμ、フェネチ〃、３−フェニｐプロピμ、α−メ
チルベンジ！、α−エチｐベンジ／Ｌ／、α−メチルフ
ェネチ〃、β−メチ〜フェネｆ　ｙ”　＋β−エチルフ
ェネチμなどのフエ二μ−低級（Ｃニー、）アルキル基
があげられ、該フ低級アルキレンア〃キρ基におけるフ
エニル基は１ないし３個の友とえはハロゲン（例、フッ
素、塩素、臭素、ヨウ素など）、低級（Ｃ１−４）アラ
キル基（例、メチρ、エチμ、プロピρ、ブチμナト）
。

低級（Ｃ）アルコキシ基（例、メトキン、ニトキシ、プ
ロポキン、イソプロポキシ、エトキシな１．メチレンジ
オキシ基、アミ７基、ニトロ基、ヒドロキン基などによ
って置換されていてもよい。かかる置換フェニ〃−低級
アルキμ基の例としてはたとえば、２−（４−クロロフ
ェニμ）ｘｆρ、２−（４−ヒドロキシフェニル）エチ
ｐ。

２−（４−メトキシフェニ／Ｉ／）エチμ、２−（３゜
４−ジメトキシベンジ／Ｉ／）エチ／Ｍ、２−（３，４
１５−トリメトキシフェニｌｖ）エチμ、　２−（３。

４−メチレンジオキシフェニ／ｌ／）エチル、２−（ｐ
−トリル）エチル、３．４−ジメトキシベンジｐ。

３．４−メチレンジオキシベンジル、３，４．５−トリ
メトキシベンジμ、４−エチルベンジル４−クロロベン
ジルなどがあげラレる。

Ｒ３　　およびＲ４　が隣接する窒素原子とともに形成
する環としては該窒素原子の他に鼠累，酸素。

硫黄などのへテロ原子ををしていてもよい環状アミノ基
があげられ、たとえばピロリジニル、モリホリニ／Ｉ／
，ピペリジ！，ビベラジニ！，ホモピペラジニルなどの
５なもし７員環の飽和または一部飽和したＢＦＪ環式の
環状アミ７基が含まれる。該環状アミノ基は置換可能な
位置に置換基を有していイＣ（イメミ てもよく、かかるＲ換基としてはたとえ曹テケ−４）ア
ルギμ（例、メチ／ｌ／，エチｐ，プロピμ，ブチｆｉ
／）、アリーμ，アラμキｐ，アシｐなどがあげられる
。

置換基としてのアリーμ基としてはたとえばフエニル基
があげられ、該フェニμ基は１ないし３個の九とえばハ
ロゲン（例、フッ素，塩素．臭素。

ヨウ素）、低級（Ｃニー４　）アルキル基（例、メチμ
，工ｆ／ｖｌプロピρ，グチ／’）ｌ低級（　Ｃ１−、
　）アルコキシ基（例、メトキシ、エトキン、プロポキ
シ、イソプロポキン、エトキシ）、メチレンジオキ７基
，アミノ基，ニトロ基，ヒドロキン基などによって置換
されていてもよい。また、置換基としてのアフ！キμは
たとえば、ベンジμ，フェネチｐなどのフェ二ｐ−低級
（Ｃニー、）アルキ名ベンヅヒドリルなどのジフェニμ
−低級（　Ｃ１−４）アルキｐおよびトリフェニル−低
級（’Ｃ１−，）アルキｐなどがあげられる。置換基と
してのアシｐとしてはたとえば、アセチμ，プロピオニ
ル、ブチリルなどの低級（Ｃよー，）脂肪酸残基，ベン
シイ！，シンナモイルなどの芳香族有機酸残基などがあ
げられる。該アフμキｐ基および芳香族有機酸残基にお
けるフエニル基け１ないし３個のたとえばハロゲン（例
、フッ累、塩宏、臭素、ヨウ素）。

低級（Ｃ１，）アルキμ基（例、メチル、エチμ。

プロピμ、ブチ／Ｌ／）、低級（Ｃ１，）アルコキン基
（例、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキ
シ、ブトキシ）、メチレンジオキシ基。

アミ７基、ニトロ基、ヒドロキシ基などによって臭化水
素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩などの無機酸塩、たと
えば酢酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩。

フマール葭塩、マレイン酸ａ＋）ルエンスｐホン酸塩、
メタンスｐホン酸塩などの有機酸との塩などの薬理学的
に許容されうる塩があげられる。

本発明化合物（１）はたとえば式 ％式％ 〔式中、各記号は前記と同意義〕と式 〔式中、各記号は前記と同意義〕で表わされる化合物と
を縮合反応させることによって製造することができる。

該縮合反応は水または適当な有機溶媒（例、ジオキサン
、テトラヒドロフラン、メタノ−！、塩化メチレン、ク
ロロホルム、Ｎ、Ｎ−ジメチ〜ホμムアミド、ジメ千μ
スルホキシドなど）およびこれらの任意の混合房媒中で
行なうことができる。反応温度は通常−２０°Ｃ〜＋１
００°Ｃ程度が好ましく、ｆｆ応速度を高めるためにた
とえばトリエチμアミン、ピリジン、Ｎ、Ｎ−ジメチル
アニリンなどの有機塩基、たとえば炭酸カリウム、炭酸
ナトリウム、炭酸水素ナトリウムなどの無機塩基を触媒
として添加してもよい。

化合物（Ｉ）はま次式 ％式％ 〔式中、Ｒ１，Ｒ２オＪ：びＡＬＩｉ前・記ト同意義、
又はハロゲンまたは式Ｒ′５ｏ２−ｏ−（式中Ｒ′は低
級（Ｃニー４　）ア！キ！、フェニ／Ｌ／またはｐ−ト
リ〃を示す）で表わされる基を示す〕で表わされる化合
物に一般式 〔式中、Ｒ３およびＲ４は前記と同意義〕で示されるア
ミン類を反応させても製造することができる。化合物（
、ＩＶ　）とアミン類（Ｙ）との反応は適当なｆａ溶謀
（例、メタノ−μ、エタノーμ、ジオキサン、アセトニ
トリμ、テトラヒドロフラン。

Ｎ、Ｎ−ゾメチルホμムアミド、ジメチμスルホキシド
およびこれらの任意の混合溶媒）中で行なうことができ
る。

反応温度は通常０°Ｃ〜＋１５０°Ｃ程度が好ま、しく
、反応速度を高めるためにたとえば、トリエチμアミン
、ピリジン、Ｎ、Ｎ−ジメチルアニリンなどの有機塩基
、たとえば炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナ
トリウムなどの無機塩基を触媒として添加してもよい。

かくして得られる本発明の目的化合物（１）は反応混合
物から通常の分離精製手段、たとえば抽出、＃縮、中和
、−過、再結晶、カフムクロマトグラフィー、薄層クロ
マトグラフィーなどの手段を用いることによって単離す
ることができる。

本発明の原料化合物（１）はたとえば次のに応式で示さ
れる方法によって容易に製造することができる。

（ＶＩ）　　　　　　　　　　　　　（１）（Ｒ’　お
よびＲ２は前記と同意義〕 上記反応式に示される（１）の製造法について、さらに
詳しく説明すると（ＶＩ）−（１）の反応はクロｆｉ／
、Ｘ−μホン酸と（Ｖ）ｔ−適当な溶媒中あるいは無溶
媒で反応させて製造することができる。溶媒としては、
塩化メチレン、クロロホルム、ベンゼンなどの有機溶媒
が用いられ、通常−２０°Ｃ〜＋１００°Ｃ程度の温度
範囲で反応が行われる。

また原料化合物（ｌＶ　）はたとえば次の反応式で示さ
れる方法によって製造できる。

（式中、Ｒ１，Ｒ２，！およびＡは前記と同意釦前記反
応式で得られた化合物（１）にアミノアルコ−ｔｖ　（
’ｙ＊　）を反応させて化合物（Ｙｌ　）　ｋ得る。

本反応は化合物（１）−（１）と同様の反応茶汁で行な
うことができる。ついで化合物（’ＶＩ［’）の水酸基
をハロゲン化する方法は例えば化合物（■）に塩化チオ
ニ／Ｌ／、三臭化リンなどのハロゲン化剤を反応させて
製造することができる。本反応は適当な有機溶Ｋ（例、
ベンゼン、ヘキサン、塩化メチレン、クロロホμム、酢
酸エチμ、テトラヒドロ７フンおよびこれらの任意の混
合溶媒）中で行なうことができる。反応温度は通常−２
０°Ｃ〜＋１００℃程度が好ましい。また反応速度？高
めるために有ａ塩基（例、ピリジン、トリエチμアミン
、４−ジメチルアミノピリジン、Ｎ、Ｎ−ジメチルアニ
リンなど）ｖＬ−反応系中に添加してもよい。

また化合物（■）のスルホン酸エステル化は、化合物（
Ｖｌ　）にスμホン酸クロリドｍ（例、）μエンスルホ
ン酸クロリド、メタンスルホン葭クロリドなど）を反応
させて製造することができる。

本反応は適当な有機溶Ｋ（例、ベンゼン、塩化メチレン
、クロロホμム、テトフヒドロフラン、ピリジン、Ｈ，
Ｈ−ジメチルホルムアミドなどおよびこれらの適当な混
合溶媒）中で行なうことができる。反応温度は通常−２
０°Ｃ〜＋１００°Ｃ程度が好ましい。ｔｆｃ有機塩基
（例、ピリジン、トリエチルアミン、４−ジメチルアミ
ノピリジン、ジメチルアニリンなど）ｔ−反応速度を促
進させるために共存させることが好ましい。

作用 本発明の化合物すなわち式（Ｉ）で示されるベンゾチア
シリ−μベンゼンスμホン酸アミド誘導体はカルシウム
結合蛋白（力ｐモジュリン）を不活性化させる作用が強
力であシ、またそれに続くミオシン軽鎖キナーゼの活性
を抑制する作用を有し、したがって細胞内力μシウムに
よる生理作用を抑制する作用が期待できることが明らか
とな）、まに平滑筋弛緩作用、血管拡張作用、心筋保護
作用およびホス条ジェステラーゼ阻害作用を有する。

かかる生物活性にもとづく血管拡張剤、狭心症治療剤、
脳ＷＪ環改善剤、血圧降下剤として脳および心臓血管系
の疾患の予防および治療剤、さらに制癌剤および止潟剤
（下痢止め）として宥用である。

本発明化合物は低毒性で経口投与でも吸収がよく、安定
性にもすぐれてちるので、上記の医薬として用いる場合
、それ自体あるいは適宜の薬理学的に許容される担体、
賦形剤、希釈剤と混合し、粉末、顆粒、錠剤、カプセル
剤、注射剤などの医薬組成物として経口的まｔは非経口
的に、人まｆＣは他の温血動物に安全に投与することが
できる。投与量は対象疾患の状態、投与ルートによって
も異なるが、九とえば高血圧症、脳血栓症、細菌性下痢
などの脱水を併なう腸疾患の治療の目的で成人患者に投
与する場合、経口投与では通常１回量約０．０１〜１０
０ダ／Ａｇとシわけ０．１〜ｔＯｑ／ｋｑ程度が好まし
く、これらの服用量？症状に応じて１日約１〜３回程度
投与するのが望ましい。

実施例 （以下余白） 参考例１ クロμスルホン酸９　ｙｔｌの溶液に、−２０〜−１０
°Ｃでかき混ぜながら、２−（２，３−ジメトキシフェ
ニ）Ｖ　）ベンゾチアゾ−１ｖ３．０　ｆｔ少Ｌｆり加
える。２時間かき混ぜた後反応液を氷水中に投入する。

生ずる淡黄色析出物をろ取し、水洗、乾燥し３−（２−
ベンゾチアシリ−／ｌ／）　−４、５〜ジメトキシベン
ゼンスルホン酸クロリドの粗生成物３．６Ｎｅ得る。氷
晶はＶｇｌすることなくつぎの反応に使用する。

参考例２ 参考例１で得７ｔ、３−（２−ベンゾチアシリ−ツリー
４．５−ジメトキシベンゼンスルホン酸クロリド２．９
ｙ’Ｔｈノオキサン３０ｚｌにＭｆｆｉした溶液に、３
−アミノプロパツール１．５ｆ１＆ニジオキサンＩＣＪ
ｔｌに溶解し九溶液？室温でかき混ぜながら滴下する。

１時間かき混ぜた後、反応液を減圧濃縮す゛る。残留物
１ｃ酢酸エチルに溶解し、水洗、乾燥後、減圧濃縮する
。残留物を含水エタノ−ｐから再結晶すると、３−（２
−ベンゾチアシリ−）Ｖ　）−４，５−ジメトキシ−Ｎ
−（３−ヒドロキシプロピ／Ｉ／）ベンゼンスルホン酸
アミドの白色結晶１．４５９を得る。

融点　Ｔａ２−１８６℃ ＮＭＲスペクト／Ｌ／（ｄ６−ＤＭｓｏ−Ｄ２ｏ）ａ（
ｐｐｒｎ）：１．４〜ｌ　、８（２Ｈ，ｍｕ：Ｌｔｉｐ
ｌｅｔ）、２．８５（２Ｈ。

ｔｒｉｐｌｅｔ、　、Ｔ−５Ｈｚ）　、３．３８（２Ｈ
，ｔｒｉｐｌｅｔ。

Ｊ−５Ｅ［ｚ）＋３．８３（３Ｈ，ｓｉｎｇｌｅｔ）、
４．０３（３Ｈ，ｓｉｎｇｌａｔ）、　７．３−７．７
（３Ｋ。

ｍｕｌｔｉｐｌｅｔ）＝　８．０〜８．２（２Ｈ）　、
８．４０（ＩＨ。

ｄｏｕｂｌａｔ＋　Ｊ−２Ｈｚ　） 元素分析値　Ｃ工。Ｈ２ｏＮ２ｏ５ｓ２として計算値：
　Ｃ＋５２−９３；　Ｌ４．９３；　Ｎ、６．８６夾測
値：’　Ｃ，５３，１５；　Ｅ［＋４−８６；　Ｎ、６
．８３参考例３ 参考例２で得た３−（２−ベンゾチアゾ！Ｊ　−／Ｌ’
）−４，５−ノメトキシーＮ−（３−ヒドロキシプロピ
ｌｖ）ベンゼンスルホン酸アミド３．５１［化メチレン
１００ｍ１に溶解し、塩化チオニル７　ｍｌを加え、５
時間加熱還流すΣ。反応液を減圧濃縮ｔ、、ＭＷ物を、
クロロホｐムーイソプロビρ工−テμから再結晶し、３
−（２−ベンゾチアゾリール）−Ｎ−（３−クロロプロ
ピ／Ｌ’）−４，５−ジメトキンベンゼンスルホン酸ア
ミドの白色結晶３．６１企得る。

融点　１８９−１９０°Ｃ ＮＭＲスペクト／Ｌ／（ＣＤＣｌ２−ｄ６−ＤＭＳＯ）
　Ｊ（ｐｐｍ）：１−７　２．１（２Ｈ，ｍｕｌ’ｔｉ
ｐｌｅｔ）、３．００（２ＥＩ。

ｑｕａｒｔｅｔ＋　　、Ｔ−４Ｈｚ）＋３．５７（２Ｈ
＋ｔｒｉｐｌｅｔ＋Ｊ＝４Ｈｚ）　、３．９８（３Ｈ，
ｓｉｎｇｌｅｔ）１４．０８（３１Ｌａｉｎｇｌｅｔ）
　、７．３−７．６（３Ｈ。

ｍｕｌｔｉｐｌｅｔ）、　７．８−８．２（２Ｈ）　、
８．５５（ＩＨ＋ｄｏｕｂｌｅｔ＋　Ｊ−２Ｈｚ）元素
分析値　Ｃ１８Ｎ１９　ＣｌＮ２　ｏ４ｓ　２　トして
計算値：　Ｃ，５０，６４；■、４．４９＋　ｙ、６．
５６実測値：　Ｃ，５０，７６；　Ｈ，４，６２＋　Ｎ
、６．３９参考例４ ２−（２−メトキンフェニ／Ｌ／）ベンゾチアシーツＶ
を実施例１と同様にクロルスルホン酸を反応させて、３
−（２−ベンゾチアゾリール）−４−メトキシベンゼン
スρホン酸クロリドの淡黄色粉末ヲ得る。氷晶はＭ製す
ることなくっぎの反応に使用することができる。

実施例１ ３−（４−７二二〃ビベヲジニ／Ｌ／）プロピルアミン
１．３１およびトリエチルアミン１１．６ｇ１Ｑクロロ
ホルム４５ｇ１に溶解した溶液に、参考例■で得九３−
（２−ベンゾチアゾリール）　−４、５−ジメトキシベ
ンゼンスルホン酸りロリ）”２　、　Ｏｆを室温でかき
混ぜながら少しずつ加え、２時間室温でかき混ぜる。反
応液を水洗、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧
下に留去する。得られる残留物をンリカゲｐのカフムク
ロマトグラフィー＜ｉ出ｉ：クロロホμムー酢酸二ｆ）
レー４＝１）で梢製する。得られる粗生成物を塩酸塩と
し、エタノ−／Ｌ’−Ｈ，Ｈ−ジメチルホルムアミドか
ら再結晶し、３−（２−ベンゾチアシリ−ＩＶ’）　−
４゜５−ジメトキシ−ｎ−（３−（４−フェニルピペフ
ジニル）プロピル〕ベンゼンスμホン酸アミド・塩酸塩
の無色針状晶１．６１を得る。

融点　２３２−２３４°Ｃ ７ＣＩＬ分析値　Ｃ２８Ｈ３２Ｈ４ｏ４Ｓ２・Ｈｃｌと
して計算（直：　ｃ、５７．０８；　ｌｉ、５．６５；
　Ｎ、９．５１火測値：　Ｃ，５７，０９；　Ｈ，５，
７８；　Ｎ、９．５１夾施例２ 実施例１と開織の方法によって、３−ジメチ〜アミノプ
ロピ〃アミン、！＝３−（２−ベンゾチアゾ！Ｊ−／Ｌ
／）−４，５−！／メトキシーベンゼンスルホン酸クロ
リドの反応よ）得られる３−（２−ベンゾチアシリ−／
ｖ）　−４１５−ジメトキシ−Ｎ−（３−ジメチμアミ
ノプロピ／Ｌ／）ベンゼンスルホン酸アジドをしゅう酸
処理してしゆう酸塩として得る。

メタノール−イソプロピルエーテルから再結晶シ、白色
結晶となる。

融点　２０８〜２１ビＣ 元素分析値　Ｃ２ｏＴ１２５Ｎ３ｏ４ｓ２・（ｃｏ２Ｈ
）２として計算ＷＬ：　Ｃ，５０，２８；　Ｈ，５，Ｉ
８；　Ｌ７．９９夾測値：　ｃ、５Ｇ、３５；　Ｈ＋５
−３３＋　ｙ、７．６５実施例３ 参考例３で得た３−（２−ベンゾチアゾリール）−Ｎ−
（３−クロロプロピル）−４，５−ジメトキシベンゼン
スルホン酸アミド２．１’、４−フェニルピペリジンＱ
、！１．）リエチルアミン１．１１１ｔ、ヨウ化カリウ
ム１．１１およびＮ、Ｎ−ジメチ！ホルムアミド１０ｇ
ｔの混合物を１００°Ｃで１時間かき混ぜる。反応液に
水を加え酢酸エチμで抽出する。存機層を水洗、無水硫
酸ナトリウムで乾燥後溶媒を減圧下に留去する。

得られる残留物を塩酸塩とし、エタノ−〜から再結晶し
、３−（２−ベンゾチアシリ−／Ｌ’）−４゜５−ジメ
トキシ−Ｎ−（３−（４−フェニ〃ビベリジニｐ）プロ
ピル〕ベンゼンス〃ホン酸アミド塩酸塩の淡黄色結晶１
．１１を得る。

融点　２２５〜２２７°Ｃ 元素分析値　０２９Ｈ３２Ｎ３０４　Ｓ２・ＨＣＩ・ｉ
／２Ｈ２０としてｔＨｆ、値：　ｃ、５Ｂ、３３；　Ｈ
，５，９１；　Ｎ、７．０４矢測値：　ｃ、５８．５１
＋　Ｈ＋５．８０；　Ｎ、７．１０夾施例４〜１１ 実施例３と同様の方法で３−（２−ベンゾチアシリ−／
Ｌ／）−Ｎ−（３−クロロプロピル）−４゜５−ジメト
キシベンゼンスルホン酸アミドとアミン類との置換反応
によシ！ｉ［！施例４〜１１の３−（２−ペンゾチアゾ
リー／ｌ／）　−４１５−ジメトキシベアミド類ルホン
酸アミド類を得る。

（ＪＸ″′Ｆ＃匂） 実施例１２ 参考例４で得た３−（２−ベンゾチアゾ！Ｊ−／Ｌ／）
−４−メトキシベンゼンスルホン酸クロリドと３−（４
−フェニルピペラジニル）プロピルアミンとを実施例１
と同様に処理し、３−（２−ベンゾチアゾリール）−４
−メトキシ−Ｎ−（３−（４−フェニルビベラジニル）
プロピμ〕ベンゼンスμホン酸アミド塩酸塩を得る。エ
タノール−Ｎ。

Ｎ−ジメチ！ホルムアミドから再結晶し淡黄色結晶とな
る。

融点　２４１〜２４３°Ｃ（分解点） 元素分析値　Ｃ２７Ｈ３ｏＮ４ｏ３ｓ２・■ｃ１として
計算値：　Ｃ，５８，００；　Ｈ，５，５９；　Ｎ、！
０．０２夾ｆｌｌｉ！１＊：　Ｃ，５７，９８；　Ｈ，
５，６３；　Ｎ、　９．９８発明の効果 試験例 腸間膜動脈に対する弛緩作用 家兎（日本在来種、体重的３Ａｇ）を放血致死後開腹し
、上陽間膜動脈を摘出する。血管を常法にＬ　タカイ、
２ＭＸ２５ＭＭＫ、ｇ旋状に切シ、９５％０ユニ５％Ｃ
Ｏ２の混合ガスを通したクレブス・ヘンスライド栄養液
を満たした２０ｔｔｌのオーガンパスに吊す。血管の一
方を等反注トランスデユーサ−に接続し、１．５１の荷
重をかけると、血管の収縮および弛緩反応がトランスデ
ユーサ−（日本光電ＦＤピックアップＴＢ−９１２Ｔ）
にか−る荷重として記録される。１５〜２ＱｍＭＫＣ１
でＫＣＩの最大収縮のは′：各収縮条件下に本発明化合
物を加え、その弛緩作用を観察した。その完全弛緩を１
００９６とし、５０９６弛緩させる濃度（ＥＤ５ｏ）を
表−２に示した。

表　　　２ ２５．３ ３　　　０．５４ ５４．０ Ｔ５．６ ８６．１ １１　　　０．３３ 試験例２ カルシウム、力ｐモジュリン依存性ＰＤＥに対する影響 酵素標品は豚大脳皮質よシ、既報　（Ｍｏｌ。

Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　　１５巻、４９頁、　１９７９
年およびＢｉｏｃｈｅｍ、　　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　　Ｒ
ｅａ、　　Ｃｏｍｍｕｎ、　８４巻。

２７７頁、１９７８年）に準じて部分精製して月い念。

実施条件は上記既報にしたがった。結果は表−３に示す
如くでちる。本発明化合物の酵素阻害活性の測定は、Ｃ
−および力！モジュリン依存性標品を用いて行なった。

非活性化度広は０　、２　ｍＭ−ＥＧＴＡ　　存在下で
測定し、一方、活性化反応は０　、２　ｍＭｃａｃ１λ
　８単位カル七シュリン存在下で行なった。その活性は
５０９６阻害に要する濃度（エタ２．μＭ）にて示した
。

表　　　３ 化合物Ｎａ　　　　　　Ｃ＆＋′および力〃モジュ（笑
施例番号）　　　　リン依存ホスホジェステラーゼ阻害
　工５４μＭ） 活性化　　　非活性化 Ｉ　　　　　　　　　Ｑ、７　　　　　　ｓｔ・３　　
　　　　　　１．４　　　　　　ａｔ。

４　　　　　　　　　’１．９　　　　　　ｅｔ。

５　　　　　　　　２．８　　　　　　ａｔ。

１１２．８ｓｔ。

試験例３ ミオシン＠鎖キナーゼに対する作用 ミオシン軽鎖キナーゼ（ＭＬＣＫ）の活性は、ミオシン
軽鎖（ＭＬＣ）に取シ込まれた　Ｐの量により測定した
。ＭＬ（、Ｋ　　はＡｄｅｌａｔｅｉｎとＫｌ　ｅ　ｅ
　％方法によシ、ＭＬＣはＰｅｒｒｉｅとＰｅｒｒｙの
方法（２）によシハイ鶏砂のうから調製した。ｙ応溶液
０．２ｍｌ中に２０　ｍＭ　Ｔｒｉｓ・ＨＣｌ　　０　
、０５　ｍＭ（、＋３２−Ｐ）ＡＴＰ（１μＣ１／ａｓ
ｓａｙ　ｔｕｂｅ　）　＋　５ｍＭＭｇＣ１１ｉＱμＭ
　　ＭＬＣ，２４ｎＭｃａ１ｍｏｄｕｌｉｎ　　Ｏ，１
ｍＭＣａＣｌ２　＋　０−１μｇ／ＭＩ　　ＭＬＣＫお
よび適当量の化合物を含む。反応は３０°Ｃで行い、４
分層２０９６’Ｌ’ＣＡを１ｙｓｌ添加することによシ
停止させた。さらに０　、１　ｇｔノＢｓＡ　（Ｍｆ／
ｍｌ　’）　ｌ”加え混和層、２０００ｆＩで１５分間
遠心し、その沈渣ｆｃ５＊ＴＣＡ　３　ｍｌで懸濁遠心
后ル渣を２ｔｖｌ　Ｉ　Ｉｆ　ＮａＯＨで溶かし、ラジ
オアクティビティをリキッドシンチレーションカウンタ
ーで測定した。化合物のＩＣ虻。

は対数正規確立紙を用いて求めた。

（１）　　Ａｄｅｌａｔｅｉｎ、　Ｒ，Ｓ、　ａｎｄ　
Ｋｌｅｅ、　Ｃ，Ｂ、　；：ｆ、　Ｂｉｏｌ、　　Ｃｈ
ｅｍ、　２５６：　７５０１−７５０９（２）　　Ｐｅ
ｒｒｉｅ、　Ｗ、Ｔ、　ａｎｄ　　Ｐａｒｒｙ、　Ｆ３
．Ｖ、　　；Ｂｉｏｃｈｅｍ、　ｉ、、　　１１９　：
　３ｌ−３８（１９７０）表　　　４ 化合物風　　　　　　ミオシン軽鎖キナーゼ阻害作用４
　　　　　　　　　　　　　　８．５５７．５

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＾１およびＲ＾２はそれぞれ水素または低級
   アルコキシを示し、Ｒ＾３およびＲ＾４はそれぞれ低級
   アルキルまたは置換されていてもよいアラルキルを示す
   か、または隣接する窒素原子とともに環を形成し、Ａは
   低級アルキレンを示す〕で表わされる化合物またはその
   塩。