JPS6160840B2 - - Google Patents
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- JPS6160840B2 JPS6160840B2 JP54101548A JP10154879A JPS6160840B2 JP S6160840 B2 JPS6160840 B2 JP S6160840B2 JP 54101548 A JP54101548 A JP 54101548A JP 10154879 A JP10154879 A JP 10154879A JP S6160840 B2 JPS6160840 B2 JP S6160840B2
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- planothiocin
- antibiotic
- methanol
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- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
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- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
本発明は新規抗生物質プラノチオシンＡ
（planothiocin Ａ）およびその製造法に関するも
のである。 本発明の抗生物質プラノチオンＡは、下記第１
表に示す物理化学的性質および生物学的性質を有
する新規な含硫ペプチド系抗生物質である。
（planothiocin Ａ）およびその製造法に関するも
のである。 本発明の抗生物質プラノチオンＡは、下記第１
表に示す物理化学的性質および生物学的性質を有
する新規な含硫ペプチド系抗生物質である。
【表】
【表】
【表】
【表】
以上の諸性質により本発明の抗生物質プラノチ
オシンＡは含硫ペプチド系抗生物質と認められる
もので、また公知の同様な含硫ペプチド系抗生物
質としては、チオストレプトン
（thiostrepton）、チオペプチン類
（thiopeptins）、スルフオマイシン類
（sulfomycins）、シオマイシン類（siomycins）、
Ａ−59、ペプチオマイシン類
（pepthiomycins）、サーモチオシン
（thermothiocin）、スポランギオマイシン類
（sporangiomycins）、アルチオマイシン
（althiomycin）、Ａ−7413、ノシヘプタイド
（nosiheptide）、Ｌ−13365、アクチノチオシン
（actinothiocin）、Ａ−10947が知られており、こ
れらの中で、抗生物質プラノチオシンＡと同一ア
ミノ酸組成を有する物質としてはノシヘプタイド
が挙げられる。また抗生物質プラノチオシンＡと
ノシヘプタイドについて、ノシヘプタイドは
416mμ（Ｅ１％１cm＝124）および440mμ（Ｅ１％１cm
＝
104.8）に極大吸収を有するが、抗生物質プラノ
チオシンＡにはその吸収はなく、またノシヘプタ
イドは淡黄色結晶であり、抗生物質プラノチオシ
ンＡは無色または白色結晶であり、さらにシリカ
ゲル薄層クロマトグラフイーでのRf値は明瞭に
異なり〔ノシヘプタイドのCHCl3：メタノール
（３：１）のRf＝0.87、酢酸エチル：メタノー
ル：水（10：２：１）のRf＝0.71〕、以上の通
り、抗生物質プラノチオシンＡは公知のいずれの
含硫ペプチド系抗生物質とも一致しないものであ
り、よつて本発明の抗生物質プラノチオシンＡは
新規な物質と認められるものである。 本発明の新規抗生物質プラノチオシンＡ産生放
線菌は、福井県三方郡美浜町のトウガラシ畑の土
壌より分離した放線菌であつて、アクチノプラネ
ス（Actinoplanes）属に属するものと同定し、ア
クチノプラネス・エス・ピー・A12526と称する
こととした（微生物受託番号通知書 微生物受託
番号「微工研菌寄第5063号FERM−ＰNo.
5063」）。 以下に本菌の菌学的諸性状について述べる。 〔〕 形態的性状 スターチ・無機塩寒天培地で、30℃、10〜14
日間培養し観察した所見は次の通りである。 基生菌糸は波状ないし屈曲状で分枝をなし、
直径0.8〜1.0μであり、気菌糸は形成しない。
基生菌糸より生じた短かい胞子のう柄に胞子の
うを着生し、胞子のうの形はほぼ球形ないし楕
円形で、大きさは５〜10×５〜15μであり、そ
の中に多数の胞子のう胞子を形成している。胞
子のう胞子はほぼ球形ないし亜球形で、直径１
〜1.5μであり、多数の鞭毛を有し、水中で運
動する遊走子である。 〔〕 ジアミノピメリン酸組成 全菌体分析によるジアミノピメリン酸は、主
成分としてメゾ−型が検出され、またヒドロキ
シ−型が少量検出された。 〔〕 培養的性状 各種培地上で、30℃、14日間培養し観察した
所見は第２表に示す通りである。多くの培地上
で、未発育の気菌糸を小量形成することが認め
られた。色の表示はColor harmony manual第
４版（1958年）（Container Corporation of
America）による色の分類に従つた。
オシンＡは含硫ペプチド系抗生物質と認められる
もので、また公知の同様な含硫ペプチド系抗生物
質としては、チオストレプトン
（thiostrepton）、チオペプチン類
（thiopeptins）、スルフオマイシン類
（sulfomycins）、シオマイシン類（siomycins）、
Ａ−59、ペプチオマイシン類
（pepthiomycins）、サーモチオシン
（thermothiocin）、スポランギオマイシン類
（sporangiomycins）、アルチオマイシン
（althiomycin）、Ａ−7413、ノシヘプタイド
（nosiheptide）、Ｌ−13365、アクチノチオシン
（actinothiocin）、Ａ−10947が知られており、こ
れらの中で、抗生物質プラノチオシンＡと同一ア
ミノ酸組成を有する物質としてはノシヘプタイド
が挙げられる。また抗生物質プラノチオシンＡと
ノシヘプタイドについて、ノシヘプタイドは
416mμ（Ｅ１％１cm＝124）および440mμ（Ｅ１％１cm
＝
104.8）に極大吸収を有するが、抗生物質プラノ
チオシンＡにはその吸収はなく、またノシヘプタ
イドは淡黄色結晶であり、抗生物質プラノチオシ
ンＡは無色または白色結晶であり、さらにシリカ
ゲル薄層クロマトグラフイーでのRf値は明瞭に
異なり〔ノシヘプタイドのCHCl3：メタノール
（３：１）のRf＝0.87、酢酸エチル：メタノー
ル：水（10：２：１）のRf＝0.71〕、以上の通
り、抗生物質プラノチオシンＡは公知のいずれの
含硫ペプチド系抗生物質とも一致しないものであ
り、よつて本発明の抗生物質プラノチオシンＡは
新規な物質と認められるものである。 本発明の新規抗生物質プラノチオシンＡ産生放
線菌は、福井県三方郡美浜町のトウガラシ畑の土
壌より分離した放線菌であつて、アクチノプラネ
ス（Actinoplanes）属に属するものと同定し、ア
クチノプラネス・エス・ピー・A12526と称する
こととした（微生物受託番号通知書 微生物受託
番号「微工研菌寄第5063号FERM−ＰNo.
5063」）。 以下に本菌の菌学的諸性状について述べる。 〔〕 形態的性状 スターチ・無機塩寒天培地で、30℃、10〜14
日間培養し観察した所見は次の通りである。 基生菌糸は波状ないし屈曲状で分枝をなし、
直径0.8〜1.0μであり、気菌糸は形成しない。
基生菌糸より生じた短かい胞子のう柄に胞子の
うを着生し、胞子のうの形はほぼ球形ないし楕
円形で、大きさは５〜10×５〜15μであり、そ
の中に多数の胞子のう胞子を形成している。胞
子のう胞子はほぼ球形ないし亜球形で、直径１
〜1.5μであり、多数の鞭毛を有し、水中で運
動する遊走子である。 〔〕 ジアミノピメリン酸組成 全菌体分析によるジアミノピメリン酸は、主
成分としてメゾ−型が検出され、またヒドロキ
シ−型が少量検出された。 〔〕 培養的性状 各種培地上で、30℃、14日間培養し観察した
所見は第２表に示す通りである。多くの培地上
で、未発育の気菌糸を小量形成することが認め
られた。色の表示はColor harmony manual第
４版（1958年）（Container Corporation of
America）による色の分類に従つた。
【表】
〔〕 生理的性状
生理的性状は以下の通りである。
(1) 炭素源の資化性
【表】
【表】
【表】
−：陰性
(2) 生育温度範囲：７〜40℃ (3) 脱脂牛乳：ペプトン化；陽性、凝固；陽性 (4) メラニン様色素の生成 チロシン寒天培地；陰性 ペプトン・イースト・鉄寒天培地；陽性、 (5) 澱粉の加水分解：陽性 (6) ゼラチンの液化：陽性 (7) セルロースの分解：陰性 (8) カゼインの加水分解：陽性 (9) チロシンの分解：陽性 (10) キサンチンの分解：陰性 (11) ヒポキサンチンの分解：陰性 (12) 硫化水素の生成：陽性 (13) 硝酸塩の還元：陽性 上述の通り、本菌A12526株は分枝をもつた基
生菌糸より生じた胞子のう柄に球形ないし楕円形
の胞子のうを形成し、胞子のう胞子は球形ないし
亜球形で、鞭毛を有して運動性があり、メゾジア
ミノピメリン酸が菌体より検出されることなどの
性状を有しており、これらの性状より判断する
と、アクチノプラネス属に属するものと認められ
るものである。 次に本発明を実施し、抗生物質プラノチオシン
Ａを得るに当つては、上記のアクチノプラネス・
エス・ピー・A12526株を用いてなる培養物から
の採取が好適である。またその使用菌としては上
記の菌はその一例であつて、本菌だけでなく、抗
生物質プラノチオシンＡ（以下単に、プラケチオ
シンＡという）を生産する菌はすべて本発明にお
いて使用でき、例えばアクチノプラネス属に属す
るプラノチオシンＡ生産菌またはその変異株が使
用される。 次いで、本発明を実施するに当つては、例えば
アクチノプラネス属に属するプラノチオシンＡ生
産菌を抗生物質を生産する通常の方法で培養す
る。培養の形態は液体培養でも、固体培養でもよ
く、工業的には深部通気撹拌培養を行なうのが有
利である。 培地の栄養源としては、微生物の培養に通常用
いられるものが広く使用され得る。炭素源として
は同化可能な炭素化合物であればよく、例えばグ
ルコース、シユクロース、ラクトース、マルトー
ス、スターチ、糖蜜、グリセリンなどが使用され
る。窒素源としては利用可能な窒素化合物であれ
ばよく、例えばコーン・スチープ・リカー、大豆
粉、綿実粉、小麦グルテン、ペプトン、肉エキ
ス、酵母エキス、乾燥酵母、カゼイン加水分解
物、アンモニウム塩、硝酸塩などが使用され、さ
らに必要に応じてリン酸塩、炭酸塩、マグネシウ
ム、硫酸塩、カルシウム、カリウム、ナトリウ
ム、銅、鉄、亜鉛、マンガン、コバルト、などの
塩類が使用される。 培養温度は菌が発育し、プラノチオシンＡを生
産する範囲内で適宜変更し得るが、特に好ましく
は25〜30℃である。培養時間は、条件により異な
るが、プラノチオシンＡが最高収量に達する時期
を見計つて適当な時期に培養を終了すればよく、
通常２〜４日程度である。 このようにして得られたプラノチオシンＡ生産
菌の培養物からプラノチオシンＡを採取するので
あるが、プラノチオシンＡの大部分はその菌体内
に蓄積され、また一部はその上清液中にも存在す
る。 さらにプラノチオシンＡの分離精製手段の一例
を示せば、まずプラノチオシンＡ生産菌を前述の
如く培養して得られる培養物からプラノチオシン
Ａを含有する菌体をドラムフイルターによる過
分離手段やバスケツト遠心による遠心分離手段を
用いて分離し、湿潤菌体と培養液とを得る。こ
の培養液は少量のプラノチオシンＡを含有して
いるものであつて、これより抽出分離採取しても
よいが、好適にはその菌体より抽出分離採取すれ
ばよい。次いでこの湿潤菌体より抽出分離採取す
るに当つて、例えばこの湿潤菌体にアセトンを加
えて抽出し、このアセトン抽出液を減圧濃縮した
後これに酢酸エチルを加えて抽出せしめ、この抽
出液を回収し、減圧濃縮して茶褐色のオイル状シ
ロツプを得、これにヘキサンを加えて目的物を含
有する褐色の沈澱物を得、これを回収し、さらに
これをクロロホルム−メタノール混液に溶解後減
圧濃縮を行ない、そのクロロホルムが除去され、
メタノール溶液となると灰白色の沈澱物を生じ、
これを採取してプラノチオシンＡ含有混合物を得
る。次いでこの粗製物を、例えばクロロホルム：
メタノール：酢酸（13：１：0.1）で作成したシ
リカゲルカラム上に、同一溶媒で溶解してチヤー
ジし、この溶媒で溶出してその活性フラクシヨン
を回収する。溶出に当つてまず抗菌活性を有する
物理化学的性質を異にする新規な抗生物質（プラ
ノチオシンＢと命名した）を含有する活性フラク
シヨンが得られ、次いで本発明のプラノチオシン
Ａを含有する活性フラクシヨンが得られる。次い
でこの各フラクシヨンを集め、濃縮することによ
り白色結晶を生じ、この結晶を回収し、さらにク
ロロホルム−メタノール混液に溶解後減圧濃縮し
てクロロホルムを除去することによりプラノチオ
シンＡの精製された白色針状結晶が得られる。さ
らにこれらはその結晶系を交換せしめてもよく。
例えば上述の如くして得られたプラノチオシンＡ
の白色針状結晶を、酢酸：クロロホルム：メタノ
ール（３：１：１）混液に溶解し、これを一夜室
温にて放置することにより無色柱状結晶を析出せ
しめ、これを採取し、減圧乾燥してプラノチオシ
ンＡの無色柱状結晶を得ればよい。 さらにこのようにして得られたプラノチオシン
Ａは、少なくともプラノチオシンＡを含有する粗
製物または精製物を用いて抗菌性治療用もしくは
予防用組成物または飼料用組成物として使用され
る。またこの組成物は、家畜、家禽または魚貝類
用組成物であつてもよく、例えば豚の飼料効率の
向上の効果および増体効果などの生育促進効果を
目的とする飼料用組成物としては好適にはプラノ
チオシンＡとしてその飼料に２〜20ppm程度含
有せしめたものでよく、またニワトリの生育促進
効果を目的とする飼料用組成物としては１〜
10ppm程度含有せしめたものでよく、さらに魚
貝類の生育促進効果の目的としてはその飼料に
0.1〜100ppm程度含有せしめたものでよく、また
それに使用される飼料としては、家畜、家禽、魚
貝類用としての市販の各々の飼料を用いればよ
く、これらを用いて適宜必要量のプラノチオシン
Ａを添加すればよい、さらに抗菌性治療用または
予防用として飼料に添加してもよく、通常１〜
500ppm程度使用すればよい。またこれらの組成
物は、家畜、家禽、魚貝類の食餌に良好な形態と
して適宜加工したものでよく、例えば家畜用組成
物においては、単にその飼料に混合せしめたもの
でよく、またこのアクチノプラネスＡを含有する
ペースト状製剤としてもよい。さらにこのペース
ト状製剤としては、例えばカルボキシメチル、セ
ルロース、メチルセルロース、アラビアガム、ア
ルギン酸ナトリウム、ゼラチンなどの増粘剤を水
に対して0.5〜５％程度使用し、またタルク、リ
ン酸水素カルシウム、リン酸水素マグネシウム、
ケイ酸マグネシウム、ケイ酸アルミニウム、メタ
ケイ酸マグネシウム、メタケイ酸アルミニウム、
酸化チタン、無水ケイ酸、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸マグネシウムなどのペーストの
流動性を減少せしめてペーストに適度の硬さを与
え、ペーストを安定にかつ均一に分散せしめる賦
形剤を全量に対し、10〜50％程度使用し、さらに
グルコース、フラクトース、シユクロース、Ｄ−
ソルビトール、ガラクトース、マルチツト、ソル
ビツトなどの家畜の好む甘味剤を20〜60％使用
し、さらに香料を使用して水性ペースト状製剤と
して、得ればよい。さらにこのペースト状製剤に
限られることなく、公知の製剤手段により、錠
剤、顆粒、ペレツト、シロツプなどの種々の経口
投与用の剤形とすればよい。 このようにして得られる組成物を家畜、家禽ま
たは魚貝類に投与することにより、抗菌性治療用
または予防用として効果を示すのみならず、家
畜、家禽、魚貝類の生育促進効果を示し、さらに
これらの効果により特に魚貝類の場合にはその産
卵の効果を改善せしめてなるものであつた。 さらにプラノチオシンＡは家畜、家禽、魚類の
臓器やその他の組織細胞内に残留することなく、
かつその急性毒性の徴候は全く見られず、かつ催
奇形作用も示さないものであつた。 次に本発明の実施例および参考例を挙げて具体
的に述べるが、本発明はこれにより何んら限定さ
れるものではない。 実施例 １ グルコース２％、可溶性スターチ２％、酵母エ
キス１％、カゼイン加水分解物（商品名：NZ−
Amine TypeA）１％、CaCO30.2％の組成を有
する水性培地を調整し、これを減菌した。その培
地100mlを500ml容三角フラスコに分注し、これに
アクチノプラネス・エス・ピーA12526株の斜面
培地からの細胞を移植し、これをロータリーシエ
ーカー上、250rpm、30℃で４日間振盪培養して
種母を得た。 次いで、シユクロース３％、大豆粉２％、
CaCO30.3％、CoCl2・6H2O0.001％、MgSO4・
7H2O0.001％の組成を有する滅菌培地20を含有
する30容ジヤーフアーメンターに、上記の種母
200mlを移植し、30℃，200rpmで撹拌し、毎分20
の無菌空気を通気しながら、４日間培養した。
得られた培養物は、遠心分離により、その湿潤菌
体と上清液とに分離し、この湿潤菌体にアセトン
10を加えて３時間撹拌後、過してアセトン抽
出液を得た。得られたアセトン抽出液は減圧濃縮
して２となし、これをPH6.5に調整後、酢酸エ
チル２を加えて激しく撹拌し、その酢酸エチル
抽出液を回収し、さらにこの抽出液を減圧濃縮し
て茶褐色のオイル状シロツプを得た。次いでこの
オイル状シロツプに、ヘキサン約200mlを加えて
褐色沈澱を生ぜしめ、遠心分離してこの沈澱物を
回収し、さらにこの沈澱物をクロロホルム：メタ
ノール（５：１）200mlに溶解し、減圧濃縮し、
これによりクロロホルム分を留去することにより
灰白色の沈澱物を生じた。この沈澱物を遠心分離
により回収し、乾燥して、プラノチオシンＡおよ
び抗生物質プラノチオシンＢを含有する混合物
240mg（純度約60％）を得た。さらにこの混合物
よりプラノチオシンＡおよび抗生物質プラノチオ
シンＢは、以下の如くして分離精製されるもので
ある。 実施例 ２ 実施例１で得られたプラノチオシンＡおよび抗
生物質プラノチオシンＢを含有する混合物170mg
を、あらかじめクロロホルム：メタノール：酢酸
（13：１：0.1）で作成したシリカゲルカラム
（120ml）上に、同一溶媒で溶解してチヤージし、
さらに同一溶媒で溶出した。１フラクシヨン18ｇ
にて分画を行ない、フラクシヨンNo.９〜15に抗生
物質プラノチオシンＢを含有する活性フラクシヨ
ンが得られ、フラクシヨンNo.16〜46にプラノチオ
シンＡを含有する活性フラクシヨンが得られた。
次いで、この各活性フラクシヨンを集め、各々濃
縮して、白色結晶を生ぜしめ、これを遠心分離に
より回収し、さらにクロロホルム：メタノール
（２：１）混液20mlに溶解し、室温に放置してク
ロロホルム分を徐々に除去して、プラノチオシン
Ａおよび抗生物質プラノチオシンＢの各々白色針
状結晶が析出し、この結晶を取し、乾燥して、
プラノチオシンA59mg、抗生物質プラノチオシン
B23mgを得た。 さらに、これらは以下の如くしてその結晶系を
交換したものとしてもよい。 上記で得られたプラノチオシンＡの白色針状結
晶50mgを酢酸：クロロホルム：メタノール（３：
１：１）混液10mlに溶解し、これを一夜室温に放
置せしめ、無色柱状結晶を析出せしめ、これを
取し、乾燥してプラノチオシンＡの無色柱状結晶
29mgを得た。 参考例 １ カルボキシメチルセルロース２％水溶液35ml
に、マルチツト40ｇを溶解し、これに炭酸カルシ
ウム２ｇ、タルク22ｇおよび上記実施例の如くし
て得られたプラノチオシンＡの白色針状結晶の微
細粉末12ｇを充分に混合練和し、その後さらにス
テアリン酸マグネシウム11ｇを加えて充分に混合
練合し、これをチユーブに充填してプラノチオシ
ンＡ含有ペースト状製剤を得た。 本品は豚用のペースト状製剤となし、豚用の抗
菌性治療用または予防用組成物として、その５〜
15ｇ（プラノチオシンＡ含量約0.5〜1.5ｇ）を豚
に経口投与するものである。 参考例 ２ 市販品たる豚用飼料（商品名：日本農産社製、
マルエイ完全飼料）１Kgに、プラノチオシンＡの
白色針状結晶の微細粉末1.5ｇを充分に混合せし
め、さらにこれを同一の豚用飼料99Kgを加えて混
合し、プラノチオシンＡ含有豚用飼料組成物を得
た。 本品の子豚（５週目）に10週間食餌せしめたと
ころ、対照（プラノチオシンＡを含有してない同
一の豚用飼料）に比べ約８〜14％の生育促進効果
を認めた。 また上記と同様に、プラノチオシンＡの代りに
抗生物質プラノチオシンB1.5ｇを用いて豚用の生
育促進効果を有する豚用飼料組成物を得た。 参考例 ３ 市販品たるニワトリ用飼料（クミアイ化学社
製、成鶏用17号マツシユの微粉末）20Kgにリグニ
ン粉末600ｇおよびプラノチオシンＡの白色針状
結晶の微細粉末0.15ｇを充分均一に混合せしめ、
さらにこれに水８％を添加して均一に混合せしめ
た後、打錠機にて径８×４mmのペレツトとなし、
これを105℃、８時間撹拌してプラノチオシンＡ
を含有するニワトリ用飼料組成物を得た。 本品をニワトリに食餌せしめたところ、プラノ
チオシンＡのニワトリの臓器および組織内残留は
認められず、かつその糞便中にプラノチオシンＡ
の摂取量の相当量が排泄されたものであつた。 参考例 ４ 上記実施例の如くして得られたプラノチオシン
Ａおよび抗生物質プラノチオシンＢを含有する混
合物（純度約60％）１ｇを、幼魚用飼料（日本配
合飼料社製）100Kgに均一に混合して、ハマチ用
飼料組成物を得た。 参考例 ５ 上記実施例の如くして得られたプラノチオシン
ＡおよびプラノチオシンＢを含有する混合物（比
率；プラノチオシンＡ：プラノチオシンＢ＝93：
７）を、飼料（子豚人工乳；組成：粗蛋白質
22.44％、粗脂肪5.14％、粗繊維0.74％、粗灰分
6.16％、カルシウム1.25、リン0.95；DCP21.38
％、TDN87.41％）に、第１区として無添加の対
照区、0.5ppm添加区、5ppm添加区、第２区とし
て無添加の対照区、10ppm添加区、20ppm添加
区の割合にて添加し、これらの飼料をもつて25日
令の子豚（１群10頭）を４週間飼育した。 その結果、飼育期間中の子豚の１頭当りの平均
体重、その平均増体量、増体指数は第３表に示す
通り、良好な生育促進効果を示すものであつた。
(2) 生育温度範囲：７〜40℃ (3) 脱脂牛乳：ペプトン化；陽性、凝固；陽性 (4) メラニン様色素の生成 チロシン寒天培地；陰性 ペプトン・イースト・鉄寒天培地；陽性、 (5) 澱粉の加水分解：陽性 (6) ゼラチンの液化：陽性 (7) セルロースの分解：陰性 (8) カゼインの加水分解：陽性 (9) チロシンの分解：陽性 (10) キサンチンの分解：陰性 (11) ヒポキサンチンの分解：陰性 (12) 硫化水素の生成：陽性 (13) 硝酸塩の還元：陽性 上述の通り、本菌A12526株は分枝をもつた基
生菌糸より生じた胞子のう柄に球形ないし楕円形
の胞子のうを形成し、胞子のう胞子は球形ないし
亜球形で、鞭毛を有して運動性があり、メゾジア
ミノピメリン酸が菌体より検出されることなどの
性状を有しており、これらの性状より判断する
と、アクチノプラネス属に属するものと認められ
るものである。 次に本発明を実施し、抗生物質プラノチオシン
Ａを得るに当つては、上記のアクチノプラネス・
エス・ピー・A12526株を用いてなる培養物から
の採取が好適である。またその使用菌としては上
記の菌はその一例であつて、本菌だけでなく、抗
生物質プラノチオシンＡ（以下単に、プラケチオ
シンＡという）を生産する菌はすべて本発明にお
いて使用でき、例えばアクチノプラネス属に属す
るプラノチオシンＡ生産菌またはその変異株が使
用される。 次いで、本発明を実施するに当つては、例えば
アクチノプラネス属に属するプラノチオシンＡ生
産菌を抗生物質を生産する通常の方法で培養す
る。培養の形態は液体培養でも、固体培養でもよ
く、工業的には深部通気撹拌培養を行なうのが有
利である。 培地の栄養源としては、微生物の培養に通常用
いられるものが広く使用され得る。炭素源として
は同化可能な炭素化合物であればよく、例えばグ
ルコース、シユクロース、ラクトース、マルトー
ス、スターチ、糖蜜、グリセリンなどが使用され
る。窒素源としては利用可能な窒素化合物であれ
ばよく、例えばコーン・スチープ・リカー、大豆
粉、綿実粉、小麦グルテン、ペプトン、肉エキ
ス、酵母エキス、乾燥酵母、カゼイン加水分解
物、アンモニウム塩、硝酸塩などが使用され、さ
らに必要に応じてリン酸塩、炭酸塩、マグネシウ
ム、硫酸塩、カルシウム、カリウム、ナトリウ
ム、銅、鉄、亜鉛、マンガン、コバルト、などの
塩類が使用される。 培養温度は菌が発育し、プラノチオシンＡを生
産する範囲内で適宜変更し得るが、特に好ましく
は25〜30℃である。培養時間は、条件により異な
るが、プラノチオシンＡが最高収量に達する時期
を見計つて適当な時期に培養を終了すればよく、
通常２〜４日程度である。 このようにして得られたプラノチオシンＡ生産
菌の培養物からプラノチオシンＡを採取するので
あるが、プラノチオシンＡの大部分はその菌体内
に蓄積され、また一部はその上清液中にも存在す
る。 さらにプラノチオシンＡの分離精製手段の一例
を示せば、まずプラノチオシンＡ生産菌を前述の
如く培養して得られる培養物からプラノチオシン
Ａを含有する菌体をドラムフイルターによる過
分離手段やバスケツト遠心による遠心分離手段を
用いて分離し、湿潤菌体と培養液とを得る。こ
の培養液は少量のプラノチオシンＡを含有して
いるものであつて、これより抽出分離採取しても
よいが、好適にはその菌体より抽出分離採取すれ
ばよい。次いでこの湿潤菌体より抽出分離採取す
るに当つて、例えばこの湿潤菌体にアセトンを加
えて抽出し、このアセトン抽出液を減圧濃縮した
後これに酢酸エチルを加えて抽出せしめ、この抽
出液を回収し、減圧濃縮して茶褐色のオイル状シ
ロツプを得、これにヘキサンを加えて目的物を含
有する褐色の沈澱物を得、これを回収し、さらに
これをクロロホルム−メタノール混液に溶解後減
圧濃縮を行ない、そのクロロホルムが除去され、
メタノール溶液となると灰白色の沈澱物を生じ、
これを採取してプラノチオシンＡ含有混合物を得
る。次いでこの粗製物を、例えばクロロホルム：
メタノール：酢酸（13：１：0.1）で作成したシ
リカゲルカラム上に、同一溶媒で溶解してチヤー
ジし、この溶媒で溶出してその活性フラクシヨン
を回収する。溶出に当つてまず抗菌活性を有する
物理化学的性質を異にする新規な抗生物質（プラ
ノチオシンＢと命名した）を含有する活性フラク
シヨンが得られ、次いで本発明のプラノチオシン
Ａを含有する活性フラクシヨンが得られる。次い
でこの各フラクシヨンを集め、濃縮することによ
り白色結晶を生じ、この結晶を回収し、さらにク
ロロホルム−メタノール混液に溶解後減圧濃縮し
てクロロホルムを除去することによりプラノチオ
シンＡの精製された白色針状結晶が得られる。さ
らにこれらはその結晶系を交換せしめてもよく。
例えば上述の如くして得られたプラノチオシンＡ
の白色針状結晶を、酢酸：クロロホルム：メタノ
ール（３：１：１）混液に溶解し、これを一夜室
温にて放置することにより無色柱状結晶を析出せ
しめ、これを採取し、減圧乾燥してプラノチオシ
ンＡの無色柱状結晶を得ればよい。 さらにこのようにして得られたプラノチオシン
Ａは、少なくともプラノチオシンＡを含有する粗
製物または精製物を用いて抗菌性治療用もしくは
予防用組成物または飼料用組成物として使用され
る。またこの組成物は、家畜、家禽または魚貝類
用組成物であつてもよく、例えば豚の飼料効率の
向上の効果および増体効果などの生育促進効果を
目的とする飼料用組成物としては好適にはプラノ
チオシンＡとしてその飼料に２〜20ppm程度含
有せしめたものでよく、またニワトリの生育促進
効果を目的とする飼料用組成物としては１〜
10ppm程度含有せしめたものでよく、さらに魚
貝類の生育促進効果の目的としてはその飼料に
0.1〜100ppm程度含有せしめたものでよく、また
それに使用される飼料としては、家畜、家禽、魚
貝類用としての市販の各々の飼料を用いればよ
く、これらを用いて適宜必要量のプラノチオシン
Ａを添加すればよい、さらに抗菌性治療用または
予防用として飼料に添加してもよく、通常１〜
500ppm程度使用すればよい。またこれらの組成
物は、家畜、家禽、魚貝類の食餌に良好な形態と
して適宜加工したものでよく、例えば家畜用組成
物においては、単にその飼料に混合せしめたもの
でよく、またこのアクチノプラネスＡを含有する
ペースト状製剤としてもよい。さらにこのペース
ト状製剤としては、例えばカルボキシメチル、セ
ルロース、メチルセルロース、アラビアガム、ア
ルギン酸ナトリウム、ゼラチンなどの増粘剤を水
に対して0.5〜５％程度使用し、またタルク、リ
ン酸水素カルシウム、リン酸水素マグネシウム、
ケイ酸マグネシウム、ケイ酸アルミニウム、メタ
ケイ酸マグネシウム、メタケイ酸アルミニウム、
酸化チタン、無水ケイ酸、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸マグネシウムなどのペーストの
流動性を減少せしめてペーストに適度の硬さを与
え、ペーストを安定にかつ均一に分散せしめる賦
形剤を全量に対し、10〜50％程度使用し、さらに
グルコース、フラクトース、シユクロース、Ｄ−
ソルビトール、ガラクトース、マルチツト、ソル
ビツトなどの家畜の好む甘味剤を20〜60％使用
し、さらに香料を使用して水性ペースト状製剤と
して、得ればよい。さらにこのペースト状製剤に
限られることなく、公知の製剤手段により、錠
剤、顆粒、ペレツト、シロツプなどの種々の経口
投与用の剤形とすればよい。 このようにして得られる組成物を家畜、家禽ま
たは魚貝類に投与することにより、抗菌性治療用
または予防用として効果を示すのみならず、家
畜、家禽、魚貝類の生育促進効果を示し、さらに
これらの効果により特に魚貝類の場合にはその産
卵の効果を改善せしめてなるものであつた。 さらにプラノチオシンＡは家畜、家禽、魚類の
臓器やその他の組織細胞内に残留することなく、
かつその急性毒性の徴候は全く見られず、かつ催
奇形作用も示さないものであつた。 次に本発明の実施例および参考例を挙げて具体
的に述べるが、本発明はこれにより何んら限定さ
れるものではない。 実施例 １ グルコース２％、可溶性スターチ２％、酵母エ
キス１％、カゼイン加水分解物（商品名：NZ−
Amine TypeA）１％、CaCO30.2％の組成を有
する水性培地を調整し、これを減菌した。その培
地100mlを500ml容三角フラスコに分注し、これに
アクチノプラネス・エス・ピーA12526株の斜面
培地からの細胞を移植し、これをロータリーシエ
ーカー上、250rpm、30℃で４日間振盪培養して
種母を得た。 次いで、シユクロース３％、大豆粉２％、
CaCO30.3％、CoCl2・6H2O0.001％、MgSO4・
7H2O0.001％の組成を有する滅菌培地20を含有
する30容ジヤーフアーメンターに、上記の種母
200mlを移植し、30℃，200rpmで撹拌し、毎分20
の無菌空気を通気しながら、４日間培養した。
得られた培養物は、遠心分離により、その湿潤菌
体と上清液とに分離し、この湿潤菌体にアセトン
10を加えて３時間撹拌後、過してアセトン抽
出液を得た。得られたアセトン抽出液は減圧濃縮
して２となし、これをPH6.5に調整後、酢酸エ
チル２を加えて激しく撹拌し、その酢酸エチル
抽出液を回収し、さらにこの抽出液を減圧濃縮し
て茶褐色のオイル状シロツプを得た。次いでこの
オイル状シロツプに、ヘキサン約200mlを加えて
褐色沈澱を生ぜしめ、遠心分離してこの沈澱物を
回収し、さらにこの沈澱物をクロロホルム：メタ
ノール（５：１）200mlに溶解し、減圧濃縮し、
これによりクロロホルム分を留去することにより
灰白色の沈澱物を生じた。この沈澱物を遠心分離
により回収し、乾燥して、プラノチオシンＡおよ
び抗生物質プラノチオシンＢを含有する混合物
240mg（純度約60％）を得た。さらにこの混合物
よりプラノチオシンＡおよび抗生物質プラノチオ
シンＢは、以下の如くして分離精製されるもので
ある。 実施例 ２ 実施例１で得られたプラノチオシンＡおよび抗
生物質プラノチオシンＢを含有する混合物170mg
を、あらかじめクロロホルム：メタノール：酢酸
（13：１：0.1）で作成したシリカゲルカラム
（120ml）上に、同一溶媒で溶解してチヤージし、
さらに同一溶媒で溶出した。１フラクシヨン18ｇ
にて分画を行ない、フラクシヨンNo.９〜15に抗生
物質プラノチオシンＢを含有する活性フラクシヨ
ンが得られ、フラクシヨンNo.16〜46にプラノチオ
シンＡを含有する活性フラクシヨンが得られた。
次いで、この各活性フラクシヨンを集め、各々濃
縮して、白色結晶を生ぜしめ、これを遠心分離に
より回収し、さらにクロロホルム：メタノール
（２：１）混液20mlに溶解し、室温に放置してク
ロロホルム分を徐々に除去して、プラノチオシン
Ａおよび抗生物質プラノチオシンＢの各々白色針
状結晶が析出し、この結晶を取し、乾燥して、
プラノチオシンA59mg、抗生物質プラノチオシン
B23mgを得た。 さらに、これらは以下の如くしてその結晶系を
交換したものとしてもよい。 上記で得られたプラノチオシンＡの白色針状結
晶50mgを酢酸：クロロホルム：メタノール（３：
１：１）混液10mlに溶解し、これを一夜室温に放
置せしめ、無色柱状結晶を析出せしめ、これを
取し、乾燥してプラノチオシンＡの無色柱状結晶
29mgを得た。 参考例 １ カルボキシメチルセルロース２％水溶液35ml
に、マルチツト40ｇを溶解し、これに炭酸カルシ
ウム２ｇ、タルク22ｇおよび上記実施例の如くし
て得られたプラノチオシンＡの白色針状結晶の微
細粉末12ｇを充分に混合練和し、その後さらにス
テアリン酸マグネシウム11ｇを加えて充分に混合
練合し、これをチユーブに充填してプラノチオシ
ンＡ含有ペースト状製剤を得た。 本品は豚用のペースト状製剤となし、豚用の抗
菌性治療用または予防用組成物として、その５〜
15ｇ（プラノチオシンＡ含量約0.5〜1.5ｇ）を豚
に経口投与するものである。 参考例 ２ 市販品たる豚用飼料（商品名：日本農産社製、
マルエイ完全飼料）１Kgに、プラノチオシンＡの
白色針状結晶の微細粉末1.5ｇを充分に混合せし
め、さらにこれを同一の豚用飼料99Kgを加えて混
合し、プラノチオシンＡ含有豚用飼料組成物を得
た。 本品の子豚（５週目）に10週間食餌せしめたと
ころ、対照（プラノチオシンＡを含有してない同
一の豚用飼料）に比べ約８〜14％の生育促進効果
を認めた。 また上記と同様に、プラノチオシンＡの代りに
抗生物質プラノチオシンB1.5ｇを用いて豚用の生
育促進効果を有する豚用飼料組成物を得た。 参考例 ３ 市販品たるニワトリ用飼料（クミアイ化学社
製、成鶏用17号マツシユの微粉末）20Kgにリグニ
ン粉末600ｇおよびプラノチオシンＡの白色針状
結晶の微細粉末0.15ｇを充分均一に混合せしめ、
さらにこれに水８％を添加して均一に混合せしめ
た後、打錠機にて径８×４mmのペレツトとなし、
これを105℃、８時間撹拌してプラノチオシンＡ
を含有するニワトリ用飼料組成物を得た。 本品をニワトリに食餌せしめたところ、プラノ
チオシンＡのニワトリの臓器および組織内残留は
認められず、かつその糞便中にプラノチオシンＡ
の摂取量の相当量が排泄されたものであつた。 参考例 ４ 上記実施例の如くして得られたプラノチオシン
Ａおよび抗生物質プラノチオシンＢを含有する混
合物（純度約60％）１ｇを、幼魚用飼料（日本配
合飼料社製）100Kgに均一に混合して、ハマチ用
飼料組成物を得た。 参考例 ５ 上記実施例の如くして得られたプラノチオシン
ＡおよびプラノチオシンＢを含有する混合物（比
率；プラノチオシンＡ：プラノチオシンＢ＝93：
７）を、飼料（子豚人工乳；組成：粗蛋白質
22.44％、粗脂肪5.14％、粗繊維0.74％、粗灰分
6.16％、カルシウム1.25、リン0.95；DCP21.38
％、TDN87.41％）に、第１区として無添加の対
照区、0.5ppm添加区、5ppm添加区、第２区とし
て無添加の対照区、10ppm添加区、20ppm添加
区の割合にて添加し、これらの飼料をもつて25日
令の子豚（１群10頭）を４週間飼育した。 その結果、飼育期間中の子豚の１頭当りの平均
体重、その平均増体量、増体指数は第３表に示す
通り、良好な生育促進効果を示すものであつた。
【表】
参考例 ６
上記実施例の如くして得られたプラノチオシン
Ａおよび抗生物質プラノチオシンＢを含有する混
合物（比率；プラノチオシンＡ：抗生物質プラノ
チオシンＢ＝93：７）を、飼料（幼雛用飼料；組
成：粗蛋白質20.0％、粗脂肪3.4％、粗繊維3.4
％、粗灰分5.5％、カルシウム1.03％、リン0.83
％、無機態リン0.43％；TDN70.3％、
GE349Cal／1000ｇ）に、雌区として無添加の対
照区、0.5ppm添加区、5ppm添加区、10ppm添加
区、20ppm添加区、雄区として無添加の対照
区、0.5ppm添加区、5ppm添加区、10ppm添加
区、20ppm添加区の割合にて添加し、これらの
飼料をもつて幼雛（１区25羽雌雄別）を４週間飼
育した。 その結果、第４表に示す通りで、良好な生育促
進効果を示した。
Ａおよび抗生物質プラノチオシンＢを含有する混
合物（比率；プラノチオシンＡ：抗生物質プラノ
チオシンＢ＝93：７）を、飼料（幼雛用飼料；組
成：粗蛋白質20.0％、粗脂肪3.4％、粗繊維3.4
％、粗灰分5.5％、カルシウム1.03％、リン0.83
％、無機態リン0.43％；TDN70.3％、
GE349Cal／1000ｇ）に、雌区として無添加の対
照区、0.5ppm添加区、5ppm添加区、10ppm添加
区、20ppm添加区、雄区として無添加の対照
区、0.5ppm添加区、5ppm添加区、10ppm添加
区、20ppm添加区の割合にて添加し、これらの
飼料をもつて幼雛（１区25羽雌雄別）を４週間飼
育した。 その結果、第４表に示す通りで、良好な生育促
進効果を示した。
【表】
なお、雌区においては、有意差は認められたも
のの、多少雌鶏に特有のバラツキがみられた。
のの、多少雌鶏に特有のバラツキがみられた。
第１図はプラノチオシンＡのメタノール中にお
ける紫外部吸収スペクトル、第２図はプラノチオ
シンＡのメタノール−酸性中における紫外部吸収
スペクトル、第３図はプラノチオシンＡのメタノ
ール−アルカリ性中における紫外部吸収スペクト
ル、第４図はプラノチオシンＡの赤外部吸収スペ
クトルを示す。
ける紫外部吸収スペクトル、第２図はプラノチオ
シンＡのメタノール−酸性中における紫外部吸収
スペクトル、第３図はプラノチオシンＡのメタノ
ール−アルカリ性中における紫外部吸収スペクト
ル、第４図はプラノチオシンＡの赤外部吸収スペ
クトルを示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 下記の物理化学的性質を有してなる新規抗生
物質プラノチオシンＡ 融点：266〜269℃（分解） 元素分析：Ｃ＝49.47％、Ｈ＝3.53％ Ｎ＝13.25％、Ｓ＝13.73％ 分子量：1438（アミノ酸分析より１分子中にス
レオニン１分子も含むとした最少分子量） 旋光度：〔α〕２３ Ｄ＝＋19.6（Ｃ＝0.7、ピリジ
ン） 紫外部吸収スペクトル：第１図（メタノール
中）、第２図（メタノール酸性中）、第３図（メタ
ノール−アルカリ性中）に示す通り、 赤外部吸収スペクトル：第４図に示す通り、 呈色反応：過マンガン酸カリウム脱色反応、ヨ
ード呈色反応は陽性、塩化第二鉄反応、ニンヒド
リン反応、モーリツシユ反応は陰性、 溶剤に対する溶解性：CHCl3−メタノール混
液、ピリジン、DMSO、氷酢酸に可溶性、ベンゼ
ン、アセトン、石油エーテル、ヘキサンに不溶
性。 酸性、中性、塩基性の区別：弱酸性物質 色性状：白色結晶 ２ 資化性の炭素源および窒素源ならびに無機物
質を含む培地にアクチノプラネス属に属する抗生
物質プラノチオシンＡ生産菌を接種した後培養
し、次いでその培養物より抗生物質プラノチオシ
ンＡを採取することを特徴とする抗生物質プラチ
オシンＡの製造法。 ３ アクチノプラネス属に属する抗生物質プラノ
チオシンＡ生産菌が、アクチノプラネス・エス・
ピー・A12526菌である特許請求の範囲第２項記
載の製造法。
Priority Applications (10)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10154879A JPS5626899A (en) | 1979-08-09 | 1979-08-09 | Novel antibiotic substance, planothiocin a and b, their preparation, and composition containing the same |
| DE19803028594 DE3028594A1 (de) | 1979-08-09 | 1980-07-28 | Neue planothiocin-antibiotika |
| AU60903/80A AU536657B2 (en) | 1979-08-09 | 1980-07-30 | Antibiotics planothiocins |
| US06/175,677 US4288429A (en) | 1979-08-09 | 1980-08-05 | Antibiotic planothiocins |
| NZ194565A NZ194565A (en) | 1979-08-09 | 1980-08-05 | Sulphur-containing antibiotics called planothiocin-a,-b,-c,d,-e,-f and -g |
| FR8017447A FR2463151A1 (fr) | 1979-08-09 | 1980-08-07 | Nouvelles planothiocines antibiotiques |
| CA000357917A CA1154756A (en) | 1979-08-09 | 1980-08-08 | Antibiotics planothiocins |
| GB8025894A GB2055794B (en) | 1979-08-09 | 1980-08-08 | Planothiocin antibiotics |
| DK341380AA DK149964B (da) | 1979-08-09 | 1980-08-08 | Fremgangsmaade til fremstilling af en blanding af antibiotiske stoffer betegnet planothiociner |
| JP61010802A JPS625989A (ja) | 1979-08-09 | 1986-01-21 | 新規抗生物質プラノチオシンｂおよびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10154879A JPS5626899A (en) | 1979-08-09 | 1979-08-09 | Novel antibiotic substance, planothiocin a and b, their preparation, and composition containing the same |
Related Child Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61010801A Division JPS6211A (ja) | 1986-01-21 | 1986-01-21 | 新規抗生物質プラノチオシンａまたはｂを含有してなる組成物 |
| JP61010802A Division JPS625989A (ja) | 1979-08-09 | 1986-01-21 | 新規抗生物質プラノチオシンｂおよびその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5626899A JPS5626899A (en) | 1981-03-16 |
| JPS6160840B2 true JPS6160840B2 (ja) | 1986-12-23 |
Family
ID=14303478
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10154879A Granted JPS5626899A (en) | 1979-08-09 | 1979-08-09 | Novel antibiotic substance, planothiocin a and b, their preparation, and composition containing the same |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5626899A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04108408A (ja) * | 1990-08-28 | 1992-04-09 | Sekisui Chem Co Ltd | 水切棚装置 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6433079U (ja) * | 1987-08-22 | 1989-03-01 |
-
1979
- 1979-08-09 JP JP10154879A patent/JPS5626899A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04108408A (ja) * | 1990-08-28 | 1992-04-09 | Sekisui Chem Co Ltd | 水切棚装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5626899A (en) | 1981-03-16 |
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