JPS6176432A - 新規アズレン誘導体およびこれを含有する抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、新規アズレン篩導体およびこれを含有する抗
腫瘍剤に関する。

従来の技術 本発明のアズレン誘導体に関する引例は見当らず、まだ
アズレン系骨格を有する化合物が抗腫瘍活性を示すとの
報告も見当らない。

発明が解決しようとする問題点 抗腫瘍活性等医薬上有用な活性を有する新規化合物の創
製、および実用性ある抗腫瘍剤の開発が望まれている。

問題を解決するための手段 本発明者らは、一般式 で示されるアズレン誘導体を新規に合成することに成功
し、さらにこの化合物がフレンドウィルス（Ｆ’ｒｉｅ
ｎｄ　Ｖｉｒｕｓ　）でトランスフオームしたマウス・
赤芽球細胞（Ｆｒ１ｅｎｄ細胞）、ムリンザルコーマウ
ィルス（Ｍｕｒｉｎｓ　Ｓａｒｃｏｍａ　Ｖｉｒｕｓ　
）のモロニー株（Ｍｏ１ｏｎｓｙ　）でトランスフオー
ムしたマウスノ線維芽細胞Ｍ−ＭＳＶ　Ｂａ１ｂ　３Ｔ
３　、ヒト白血病細胞ＨＬ−６０．ヒト子宮頚癌細胞ヘ
ラ（Ｈｅ１ｌａ　）に対して強い生育阻害作用を有し、
抗腫瘍剤あるいはその中間体として使用できることを見
出し、この発見に基いて本発明を完成するに到った。た
だし、上記式中、Ｒ１は水素原子、メチル、エチル、プ
ロピル等炭素数１〜１０のアルキルまたはアルケニル基
（アリル、イソプロペニル、インペンチル等）、ホ゛ ヒドロキシ基、またはアルコキシカル−ニル基（アルコ
キシは例えばメトキシ、エトキシ、ｉｓ。

、−プロポキシ等）を、Ｒ、Ｒは水素原子、メチル、エ
チル、プロピル等炭素数１〜１０のアルキルまたはアル
ケニル基（アリル、イソプロペニル、イソペンチル等）
を、それぞれ表わす。また、置換基ＲおよびＣＯＲは五
員環上いずれの位置でも両者が重ならない範囲で存在す
ることができ、一方置換基Ｒは七員環上いずれの位置で
も存在することができる。

本発明のアズレン誘導体は例えば次の如く製造すること
ができる。Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は前記と同じ意義を有
する。

［１１）　　　　　　　　　　　　　ＣＩ）化合物［１
０は公知方法例えばＷ、　ｖｏｎＤｏｅｒｉｎｇｅｔ、
　＊Ｌ、　、　Ｊ、　ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏａ、、
　７４．５６８８　：安並ら特開昭５７−１２６４２７
号明細書；安並ら第１４回非ベンゼン系芳香族化学討論
会予稿集８６頁。

１９８１年等により調製することができる。化合物（Ｉ
ｔ）の３位の側鎖を酸化するには酸化剤例えば２．３−
　Ｓ）クロロ−５，６−シシアンベンゾキノン（ＤＤＱ
　）で処理すればよい。溶媒としては水、アセトン、水
−アセトン等を使用するとよい。酸化終了後は減圧下溶
媒を除去し、反応物をジオキサンに溶解し不溶のＤＤＱ
−Ｈをろ別する。ジオキサン溶液を濃縮し更にベンゼン
に溶解して短いアルミナカラムに通液、処理すると目的
とするアズレン誘導体が極めて高純度で得られる。

１作用 本発明の化合物を有効成分として含有する抗腫瘍剤はヒ
トに包含される腫瘍は乳動物を治療する抗腫瘍剤として
有用であυ、そして経口投与として錠剤、カプセル剤ま
たはエリキシル剤のような調剤でまたは非経口投与とし
て無菌溶液剤または懸濁液剤で処方することによって生
体中の腫瘍を抑制せしめるために利用することができる
。

有効成分としての本発明の化合物の使用量についてはか
かる治療を必要とする患者（動物およびヒ））に対して
患者当たｊＤｏ、２〜５００〜の用量範囲で一般に数回
に分けて、従って１日当たり１〜２０００１９の全日用
量で投与することができる。

用量は病気の重さ、患者の体重及び当業者が認める他の
因子によって変化させることができる。

前記有効成分は生理学的に認められるベヒクル、担体、
賦形剤、結合剤、防腐剤、安定剤、香味剤などとともに
一般に認められた製剤実施に要求される単位用量形態で
混和される。

これらの組成物または製剤における活性物質の量は指示
された範囲の適当な用量が得られるようにするものであ
る。

錠剤、カプセル剤などに混和することができる具体的な
薬剤は次に示すものである：トラガント、アラビアゴム
、コーンスターチまたはゼラチンのような結合剤；微品
性セルロースのような賦形剤；コーンスターチ、前ゼラ
チン化デンプン、アルギン酸などのような膨化剤；ステ
アリン酸マグネシウムのような潤滑剤；ショ糖、乳糖ま
たはサッカリンのような甘味剤；イノ４−ミント、アカ
モノ油またはチェリーのような香味剤、調剤単位形態が
カプセルでおる場合には上記のタイプの材料に更に油脂
のような液状担体を含有することができる。

種々の他の材料は被覆剤としてまたは調剤単位の物理的
形態を別な方法で変化させるために存在させることがで
きる。例えば、錠剤はシェラツク、砂糖またはその両方
で被榎することができる。シロップまだはエリキシルは
活性化合物、甘味剤としてショ糖、防腐剤としてメチル
及びグロビルパラベン、色素及びチェリーまたはオレン
ジ香味のような香味剤を含有することができる。

注射のための無菌組成物は注射用水のようなベヒクル中
の活性物質、ゴマ油、ヤシ油、落花生油、綿実油などの
ような天然産出植物油またはエチルオレエートなどのよ
うな合成脂肪ベヒクルを溶解まだは懸濁させる通常の製
剤実施に従って処方することができる。緩衝剤、酸化防
止剤などが必要に応じて結合することができる。

実施例 本発明を実施例により具体的に説明する。

実施例１ メチル３−アセチル−７−イソプロビルアズレン−１−
カル？キシレートの製造 メチル−３−エチル−７−インプロビルアズレン−１−
カル？キシレート（５ｇ、　１．９５Ｘ１０−２モル）
を１０チ水〜アセトン１００ｆｎｔに溶解し、室温で攪
拌しなからＤＤＱ　（２，３−ジクロロ−５，６−ジシ
アツベンゾキノン＞　（９，７＃　４．２９Ｘ　１０−
２モル）を加えた。３０分後浴媒を減圧上除去し、５〇
−のジオキサンを加えた。析出したＤＤＱＨをろ過した
。

ろ液を再び減圧上除去し、残渣をベンゼンに溶解し、水
洗した後短かいアルミナカルムを通した。

ベンゼンを濃縮するとメチル−３−アセチル−７−イツ
グロビルアズレンー１−カル？キシレート（４，９１１
）が９３％の収率で得られた。ｎ−へキサンから再結晶
して赤色針状晶が得られる。融点１０４〜１０５℃。

同様にして、得られたアズレン誘導体およびその性質を
まとめて表ＩＫ示す。

火水ｄ９’Ｊ左　γ完肢瘍才、戎林、μ〜ａ）　ウィル
スニよシ形質転換されたフレンド（Ｆｒ１ｅｎｄ）細胞
に対する作用 Ｈａｍ’ｓ　Ｆ−１２粉末培地（Ｆｌｏｗ　Ｌａｂ、社
製）１ｇを１００−の二段蒸留水に溶解した後、０．１
４．９ＯＮａＨＣＯｓを加え溶解し、ミリポアフィルタ
−（０，２２μ）でろ過し、これに牛胎児血清（Ｆｌｏ
ｗ　Ｌａｂ、社製）１１ｍを加えた培地に予め３７℃、
５％ｃｏ２存在下３日間培養したフレンド細胞（井用洋
二、代謝、独、１４５（１９７８）参照）を加え（細胞
濃度＝１×１０／１ｎｔ）、この細胞懸濁液をマイクロ
テストプレート（Ｎｕｎｃ社製９６穴）に０，１−宛無
菌的に分注し、３時間５１　Ｃｏ２存在下３７℃で培養
した。

これにＯ〜５０μｙ／−の濃度の実施例１〜４で得られ
たアズレン誘導体を添加し、６日間培養した。

その後、生育量をトリパンツルー染色法にょシ生存細胞
数を計測して求めた。結果を表２に示す。

表２　フレンド細胞生育阻害効果 試料　　　濃度（μｇ／ａｔ　）　　　　　細胞生育阻
害効果１２．５　　　　　　　　　＋＋＋ ６．２５　＋ ３．１３　　　　　　　　　　　− １．５６　　　　　　　　　　　　　一実施例２　　　
　　５０　　　　　　　　＋＋＋＋２５　　　　　　　
　＋＋＋ １２．５　　　　　　　　＋ ６．２５　＋ ３．１３　　　　　　　− １．５６　　　　　　　　一 実施例３　　　　　５０　　　　　　　　＋＋＋＋２５
　　　　　　　　＋＋＋＋ １２．５　　　　　　　　　＋＋＋ ６．２５　　　　　　　− ３．１３　　　　　　　　一 実施例４　　　　　５０　　　　　　　　＋＋＋＋２５
　　　　　　　　　　　　　　＋＋＋＋１２．５　　　
　　　　　　＋＋＋ ６．２５　　　　　　　− ３．１３　　　　　　　− 細胞生育阻害効果判定基準 ＋＋＋＋　　完全に細胞死滅 十十十　　　生育量は無添加の２０％以下千十　　　生
育量は無添加の２０〜ｂ 十　　　　生育量は無添加の５０〜９０チー　　　　生
育量は無添加と同じ 表２から明らか彦如く、本発明のアズレン誘導体はフレ
ンド細胞に対し顕著な細胞生育阻害効果を示し、フレン
ド細胞に細胞毒性を与える事が分かる。

ｂ）　　ウィルスによりトランスフオームしたＭ−ＭＳ
Ｖ　Ｂａ１ｂ　３Ｔ３に対する作用ＭＥＭダルベツコ粉
末培地（Ｇｉｂａｏ社製）１１を１００−の二段蒸留水
に溶解した後、０．１４　、ＦのＮａＨＣＯｓを加え溶
解し、ミリポアフィルタ−（０，２２μ）でろ過し、こ
れに牛胎児血清（Ｆｌｏｗ　Ｌａｂ、社製）１１−を加
えた培地に予め、３７℃５　％　Ｃｏ２存在下３／８間
培養したＭ−ＭＳＶ　Ｂａ１ｂ　３Ｔ３　（Ａａｒｏｎ
ｓｏｎａｎｄ　Ｒｏｗ、　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ　４２．９
（１９７０））を８Ｘ　１０’　Ｃｅ１ｌ／−になるよ
うに分散させ、その培地０．２　ｍｔずつをマイクロプ
レート（Ｎｕｎｃ社製９６穴）に分注し、３時間５　％
　Ｃｏ２存在下、３７℃で培養した。これに０〜１００
μｇ／−の濃度になるように前記実施例１〜４で得られ
たアズレン誘導体を添加し、３日間培養した。その後、
生育量をトリパンツルー染色法により生存細胞を計測し
て求めた。表２に示す基準によシ細胞生育阻害度を示し
たものが表３でおる。

表３　　Ｍ−ＭＳＶ　Ｄａ　１　ｂ　３Ｔ３の細胞生育
阻害効果実施例１　　　　　１００　’　　　　　　　
＋＋＋＋１６．７　　　　　　　　　＋＋ ２．７８　　　　　　　− ０．４６　　　　　　　− ０．０７８　　　　　　　一 実施例２　　　　　１００　　　　　　　　＋＋＋＋１
６．７　　　　　　　　　　千十 ２．７８　　　　　　　− ０．４６　　　　　　　− ０．０７８　　　　　　　一 実施例３　　　　　１００　　　　　　　　＋＋＋＋１
６．７　　　　　　　　　＋＋ ２．７８　　　　　　　− ０．４６　　　　　　　− ０．０７８　　　　　　　　一 実施例４　　　　　１００　　　　　　　　　＋＋＋＋
１６．７　　　　　　　　　＋＋ ２．７８　　　　　　　　− ０．４６　　　　　　　　　　　　　−０．０７８　　
　　　　　− 細胞生育阻害効果判定基準 表３から明らかな如く、本発明のアズレン誘導体はＭ−
ＭＳＶ　Ｂａ１ｂ　３Ｔ３細胞に対し顕著な細胞生育阻
害効果を示し、Ｍ−ＭＳＶ　Ｂａ１ｂ　３Ｔ３細胞に細
胞胃性を示すことがわかる。

Ｃ）ヒト白血病細胞ＨＬ−６０に対する作用ＲＰＭ　１
−１６４０粉末培地（Ｇｉｂｅｏ社製）１ｇを１００−
の二段蒸留水に溶解した後、０．１４　ｌＩのＮａＨＣ
Ｏ３を加え溶解し、ミリポアフィルタ−（０，２２μ）
でろ過し、これに牛胎児血清（Ｆｌｏｗ　Ｌａｂ、社製
）１１−を加えた培地に、予め３７℃、５ｅｓＣ０２存
在下で３日間培養した）（Ｌ−６０細胞（Ｃｏ１１ｉｎ
ｓ、ｅｔａｌ、Ｎａｔｕｒｅ、　２７０．３４７−３４
９．　（１９７７））を５　Ｘ　１０’ｃｅ山Ｖ−にな
るように分散させ、その培地０．２　ｍｔずつマイクロ
プレート（Ｎｕｎｃ社製９６穴）に分注し、３時間５％
Ｃ０２存在下３７℃で培養した。これにＯ〜５０μｇ／
−の濃度に々るように実施例１〜４で得られたアズレン
誘導体を添加し５日間培養した。

その後、生育量をトリパンゾル−染色法によシ生存細胞
を計測して求めた。表２に示す基準により細胞生育阻害
度を示したのが表４である。

表４　　ＨＬ−６０細胞生育阻害効果 実施例１　　　　　　５０　　　　　　　　　　　＋十
＋十１０　　　　　　　　　　　＋＋＋＋ ２．０　　　　　　　　　　＋＋ ０．４＋ Ｏ，ＯＳ　　　　　　　　　一 実施例２　　　　　５０　　　　　　　　　＋＋＋十１
０　　　　　　　　　　　＋＋＋＋ ２．０　　　　　　　　　　＋＋ ０．４＋ Ｏ，ＯＳ　　　　　　　　　一 実施例３　　　　　　５０　　　　　　　　　　＋＋十
十１０　　　　　　　　　　＋十十十 ２．０　　　　　　　　　　　＋＋ ０．４＋ Ｏ，ＯＳ　　　　　　　　　　一 実施例４　　　　　　’５０　　　　　　　　　＋＋＋
＋１０　　　　　　　　　　　＋十干十 ２．０　　　　　　　　　　　＋＋ ０．４＋ Ｏ，ＯＳ　　　　　　　　　　− 細胞生育阻害効果判定基準 ＋＋千十　　　完全に細胞死滅 ＋十十　　　生育量は無添加の２０チ以下十十　　　　
生育量は無添加の２０〜５ｏチ＋　　　　生育量は無添
加の５０〜９ｏチー　　　　生育量は無添加と同じ 表４から明らかな如く、本発明のアズレン誘導体はＨＬ
−６０細胞に対し顕著な細胞生育阻害効果を示し、ＨＬ
−６０細胞に細胞毒性を与えるととがわかる。

ト ｄ）ヒ１子宮頚癌細胞Ｈｅ１ｍに対する作用ＭＥＭダル
ペツ書粉末培地（Ｇｌｂｃｏ社製）ＩＮを１００−の二
段蒸留水に溶解した後、０．１４　ＩｉのＮａＨＣＯｓ
を加え溶解し、ミリポアフィルタ−（０，２２μ）でろ
過し、これに牛胎児血清（Ｆｌｏｖｒ　Ｌａｂ、　社！
！Ｒ）１１−を加えた培地に、予め３７℃、５チＣＯ□
存在下３日間培養し九Ｈｅ１ｍの細胞（Ｇａｙ。

Ｋｕｂｉｃｅｋ、　ａｎｄ　Ｃｏｆｆｍａｎ、　Ｃａｎ
ｃｅｒ　Ｒｅｓ、、　１２．２６４（１９５２））を５
Ｘ１０’　ｃｅｌｌ／ｄになるように分散させ、その培
地０．２−ずつマイクロプレー）（Ｎｕｎｏ社製９６穴
）に分注し、３時間５　％　ＣＯ□存在下３７℃で培養
した。これに０〜５０μｍ１／−の濃度になるように実
施例１〜４で得られたアズレン誘導体単独あるいは両方
を添加し５日間培養した。その後、生育量をトリパンツ
ルー染色法により生存細胞を計測して求めた。表２に示
す基準によυ細胞生育阻害度を示したのが表５である。

表５　　おのおの単独及び併用投与に よるＨｅ１ａ細胞生育阻害効果 試料　　　　濃度（鋸−）　　　細胞生育阻害効果０．
５− ＡＴ−３６５，０＋＋＋ ＋０５− ＡＴ−３７５，０＋＋＋ ０．５− ＡＴ−３８５，０＋＋＋ 細胞生育阻害効果判定基準 十干千十　　　完全に細胞死滅 ＋＋十　　　生育量は無添加の２０％以下十十　　　　
生育量は無添加の２０〜５０チ＋　　　　生育量は無添
加の５０〜９０チー　　　　生育量は無添加と同じ 表５から明らかな如く、本発明のアズレン誘導体はＨｅ
１ａ細胞に対して顕著な細胞生育阻害効果を示し、Ｈｅ
１ａ細胞に細胞毒性を示すことが明らかＫなった。また
、本発明のアズレン誘導体を同時に存在させることによ
シ、単独で細胞毒性を示さなかった濃度でも顕著に細胞
毒性を示すことがわかる。

以上の結果より本発明のアズレン誘導体は単独あるいは
併用して作用させることにより、癌細胞の生育を阻害す
ることが明らかになり有効々抗腫瘍剤として期待できる
。

以上の結果よシ本発明のアズレン誘導体は単独あるいは
併用して作用させることにより、癌細胞の生育を阻害す
ることが明らかになり有効な抗腫瘍剤となり得る。

発明の効果 以上から明らかな如く、本発明のアズレン誘導体は、特
に医薬産業上有用であり、また特に抗腫瘍剤の有効成分
として極めて有用である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で示されるアズレン誘導体。ただし、式中、Ｒ＾１は水
   素原子、炭素数１〜１０のアルキルまたはアルケニル基
   、或いはヒドロキシカルボニルまたはアルコキシカルボ
   ニル基を；Ｒ＾２、Ｒ＾３は水素原子、炭素数１〜１０
   のアルキルまたはアルケニル基を、それぞれ表わす。 ２、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で示されるアズレン誘導体を含有する抗腫瘍剤。 ただし、式中、Ｒ＾１は水素原子、炭素数１〜１０のア
   ルキルまたはアルケニル基、或いはヒドロキシカルボニ
   ルまたはアルコキシカルボニル基を、Ｒ＾２、Ｒ＾３は
   水素原子、炭素数１〜１０のアルキルまたはアルケニル
   基を、それぞれ表わす。