JPS6183196A - 抗真菌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、医薬の分野で有用な抗真菌剤に関する。更に
詳述すればストレプトバーチシリウム族に属するネオエ
ナクチン生産菌を好気的に培養し、その培養液を国体よ
り抗真菌性物質ネオエナクチンを分離、精製し、製薬上
許容しうる方法により単離されたネオエナクチンを有効
成分とする抗真菌剤およびその製剤化に関する。

真菌による疾患は一般に難治とされ、近年この真菌症が
急速に増加する傾向があ。ポリエチレン系抗生物質は深
在性真菌症に対する治療剤として現在よく用いられてい
る。しかし、効果のある用ｍと渚性を示す用量の間が狭
く安全性に難点がある。

そこで本発明者等はポリエン系抗生物質（例りば、）Ｉ
Ｊコマイシン）トコレスチロールの拮抗を利用した新し
いスクリーニング方法〔ケミカルアンド７アーマセテイ
カルプリチン（Ｃｈａｍｉｃａｌ　ａｎｄ　１）１’ｌ
ｉｉｒｍ＆Ｃｅｕｔｉｏａｌ　Ｂｕｌｌｅｔｉｎ　）第
２１巻、２０５．７頁、１９７３）を考案し。

非ポリエン系抗生物質で抗真菌効果を有する物質、また
はポリエン系抗生物質の作用を増強する物質の探索を行
った。

この方法により本発明者等はストレプトミセス　ｑゼオ
ビリディス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙａｅａ　ｒｏａｅｏ　
−ｖｉｒｉｄｉａ）　Ｈ６４６−８Ｙ　３が工ｆｌｆン
ｒ−ジャーナル　オンアンチバイオティックス（Ｊｏｕ
−ｒｎ５ＬＬ　ｏｆ　、ａｎｔｉｂｉｏｔｉｏａ　）第
３０巻、１８２頁。

１９７７　）を生産している事を発見した。

エナクテンは、それ自身は真阿に対し強い抗菌力を有し
工いないが、トリコマイシンまたはアンホテリシンＢの
抗菌力を著しく増強する事を認めた。

更に９本スクリーニング方法を用い微生物培養液の検索
を行なったところストレプトバーチシリウム（Ｓｔｒ６
ｐｔＯＶ６ｒｔ１０１１１ｉｕ＋ｉ１）に属する一菌株
が強い抗真菌作用を有する新物質ネオエナクチ／を生産
している事を発見した。　　　本発明のネオエナクチン
は有用な抗真菌剤であり１例丸ば真菌であるカンジダ　
アルビカンス　Ｙｕ　−１２００Ｉｔｃ対し最小発育阻
止濃度０．３１３７１　ｆ／ｍｅを示し、ポリエン系抗
真菌剤トリコマイシンの抗菌−力を増強する。　　また
、ポリエン系の抗真菌剤の抗菌力を弱めるとされている
コレステロールの存在下においてもトリコマイシンの抗
真菌力を増強する。

本発明はネオエナクチ／またはその官能性紡導体ならび
にそれらの塩類を提供する事にある。

また１本発明はストレプトバーチシリウム属に属する菌
株１例えばストレプトバーチシリウム　オリボレテイキ
ューリ　サブエスピー　ネオエナクテイカス　Ｊ（８２
９−ＭＹＩＯ（Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｖｅｒｔｉｏｉｌｌｉ
ｕｍ　ｏｌｉｖｏｒｅｔｉｏｕｌｉ　ａｕｂａｐ、ｎｅ
ｏｅｎａｏｔ−１ｏｕｓ　）を培養して培養液および菌
体より抗真菌物質ネオエナクチンまたはその構成因子を
分離ｎＩ製する方法を提供す°ることにある。

ネオエナクチンは白色の無定形粉末であって。

融点６０．５〜６４．５℃を示す。　　ネオエナクチン
は低級アルコール、酢酸エチル、エーテル、りａロホル
ムに可溶で、水、ｎ−ヘキサン、石油エーテルに不溶で
ある。　　エナクチンの元素分析による百分率組成（平
均値）社次の通りである。

Ｃ，６３，４７％、　　Ｈ，１０，０４％、　　Ｎ、　
７．４４％。

（Ｏ，、１９，０５慢） ハロゲンおよびイオウは検出されなかった。

ネオエナクチンのメタノール溶液、　　０．１　　Ｎ　
　［酸−メタノール溶液、　　０．Ｉ　Ｑ　　苛性ソー
ダ−メタ、ノール溶液中における紫外部吸収を添付図１
に示す。

メタ、ノール溶液中　２０８ｎｍ（１”％＝１６６）ｃ
ｒｎ ＯｏＩＮ　　塩酸１　タ／　−ル溶液２０８　ｎ　ｍ　
（Ｅ　’、Ｆ＝１６１）０、ＩＮ　　苛性ンーダーメタ
ノール溶液中ネオエナクテン臭化カリウム錠中における
赤外吸収スペクトルを添付図２１Ｃ示す。

比旋光度 〔α）　’、”　＝　−１４，２°　（Ｃ＝３％、メタ
ノール中）ネオエナクチンの呈色反応 ニンヒドリン反応　　　　　　　　　　十ナフトレゾル
シノールーリン酸反応　　十Ｋ　Ｍｎ　Ｏ４＋ アンスロン−リン酸反応　　　　　　　−α−ナフトー
ル−リン酸反応　　　　　−ネオエナクチンの構成成分 ネオエナクチンをＩＮ塩酸で１１０１１：、１７時間加
水分解し、加水分解物をエーテルつづいて酢酸エチル抽
出した。　　水層を蒸発乾固し、水に溶解後、アンバー
２イト　エＲ−４５を通し１通過液を集め減圧上蒸発さ
せ答値を小さくした後エタノールを加えた。　　得られ
た白色沈澱はペーパークロマトグラフィーおよび赤外吸
収スペクトル・よりＬ−セリンと同定できた。

ネオエナクチンおよびエナクチンのペーパークロマトグ
ラフィーとシリカゲルＧ薄層りＵマドグラフィー 検出微生物としてカンジダ　アルビカンスＹｕ−１２０
０を使用する種々のペーパークローｒ）グラフィーとシ
リカゲルＧ薄層クロマトグラフィーの結果を表１および
２に示した。　　検出には補助的にニンヒドリン反応お
よび４０チ硫酸を噴霧し加熱する方法を用いた。

表１　ネオエナクチン、エナクチンのペーパークロマド
グ２フイー 表２　ネオエナクチン、エナクチンのシリカゲルＧ薄層
りａマドグラフィー 生産微生物の具体例としては例えばストレプトバーチシ
リウム属に属するストレプトバーチシリウム　オリボレ
ティキュリ　ッ゛ズエスビーネオエナティヵス　Ｈ８２
９−ＭＹＩ（＋　　カある。

この菌株は本発明者等が長崎系の土壌より分離した菌株
でその菌学的性質は次の通りである。

（１）形態；　本菌株は顕微鏡下でよく分枝した基生菌
糸を形成するが、気菌糸の成長は遅く。

はとんどの合成培地または有機培地上で気・菌糸は作ら
ないか、もし作っても非常に貧弱である。

胞子体は、はとんどがまっすぐで、第−次輪生技または
まれに第二次輪生枝を生成する。

ＪＪｔｉｌ子の形態は円筒−指骨様であり大きさは１〜
１、　ｚ　ミクロン位で胞子の表面は平滑である。

ストレプトミセス　ルテオカラー（８ｔｒｅｐｔｏｍ−
ｙａｅｓ　１ｕｔａｏｃｏｌｏｒ　）またはストレプト
バーチシリウム　パーティン２ス　（Ｓｔｒｅｐｔｏｖ
ｅｒｔｉｏｉｌｌｌ−ｕｍ　ｖｅｒｔｉｏｉｌｌｕｓ　
）　　に見られる球状構造体（Ｂａ−１１−１ｉｋｅ　
ｂｏｄｙ　）が時として胞子体の先端に確認される。

（２）各種培地上の生育状態 各種培地上の生育状態を表３に示す・ 表　　３ （３）生理的性質 １）生育温度範囲；マルトース−酵母エキス寒天培地に
おいて　２０〜３７℃の温度範囲において良好な生育を
する。

１１）ゼラチンの液化；中等度の液化能を有する。

■）デンプンの加水分解；　陰性 ｌｖ）　　脱脂乳の凝固；　陽性 脱脂乳のペグトン化；　陽性 ■）メラニン色素の生成；　陰性 （４）　　炭素源の利用性（プリトノ・ム、ゴツトリー
グ寒天培地） １）利用する；　メソ−イノシトール、　　Ｄ　−ガラ
クトース、デキストリン、マルトース。

グリセａ−ル １１）利用が疑わしい；　Ｌ−アラビノース。

Ｄ−７ラクトース、クフイノース、Ｄ−トレハロース ＩＩ＋）　　利用シナイ：　　Ｄ−キシロース、シュー
クロース、Ｄ−マンニトール、ククトースＨ８２９−Ｍ
ＹＩＯ株の菌学的性質を要約すると。

輪生技の生成、うす黄茶色の生育、白色の気菌糸そして
可溶性色素非生産性が挙げられる０１１８２９−ＭＹＩ
（１株のこのような性状はストレプトバーチシリウム属
の　ストレプトバーチシリウム　オリボレティキュリ（
８ｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉａｉｌ−１１ｕｍ　ｏｌｌｖ
ｏｒｅｔｉｏｕｌｉ）の性状とよく一致する。

すなわち　ストレプトバーチシリウム　オリボレテイキ
ュリは第一次、第二次輪生枝を生成し。

うす黄茶色の塞化菌糸を伸ばし、生理機能不明の球状構
造体を生成する。　　しかし　ストレプトバーチシリウ
ム　オリボレティキュリはクロモジェニックな型に属す
る事、イノシトールをほとんど利用しない事より　１１
８２９−ＭＹＪＯ株とは異る。　　以上の事より　Ｈ８
２９−Ｌ（ＹＩＯ株はストレプトバーチシリウム　オリ
ボレテイキュリのサブエスピーと、考えられ本発明者等
はネオエナクテン生産菌という事よりストレプトバーチ
シリウム　オリボレテイキュリ、サブエスビーネオエナ
クテイカス　オオタニ　エト　ナカムラ（５ｔｒｅｐｔ
ｏｖｅｒｔｉｏｉｌｌｌｕ１ｎ　ｏｌｉｖｏｒｅｔｉｏ
ｕｌｉｓｕｂｓｐ、　　ｎｅｏｅｎａａｔｉｏｕｓ　）
　　と命名した。

Ｈ８２９−ＭＹＪＯ株は他のストレプトバーチシリウム
属ま九はストレグ２セス属の場合にみらねるように、そ
の性状が変化しゃすく１例えば紫外線、エックス線、高
周波、放射線、薬品等を用いる人工的手段で変異しうる
ものであり。

このような変異株であってもネオエナクチンまたはネオ
エナクチン構成成分の生産能を有するものは全て本発明
の方法を使用する事が出来る。

なお、本菌株は、通商産業省技術−微生物工業技術研究
所に奇託されており、その微工研受託番号は微工研菌奇
第４３７６号（ＦＥＲＮ−Ｐ　４３７６）である。

本発明の方法では、上記菌株を通常微生物が利用し得る
栄養物を含有する培地で培養する。

栄養源としては従来ストレプトミセス属の菌の培養に利
用されている公知のものが利用できる。

例えば炭素源としてはグルコース、デンプン。

グリセリン、デキストリン、シュークロース。

水あめ、糖みつ、大豆油等を使用し得る。

また窒素源としてンーヤミール、乾燥乾母、コーンステ
イーグリカー、小麦胚芽、コツトンシードミール、４Ｊ
Ｉｔ酸アンモニウム、硝酸ソーダ等を使用し得る。　　
その他必要に応じて炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、
塩化カリ、リン酸塩、塩化マンガン、硫酸銅、硫酸第一
鉄、硫酸並鉛等の無機塩を添加するほか、菌の発育を助
はネオエナクチンの生産を促進する有機および無機物を
適当に添加する事が出来る。　　培養法としては一般に
抗生物質生産の方法と同じく液体培養が適している。　
　培養は好気的条件下で行なわれ、培養に適当な温度は
　２５〜３６℃であるが、多くの場合２８℃付近で培養
する。

ネオエナクチンの生産は振盪培養、タンク培養共に１〜
３日で最高に達する。　　以上述べたる。　　ネオエナ
クテンは菌体および培ｇ！ｒ液の両方に含まれるので両
者から抽出を行なう事が可能である。　　−例を示すと
培養ｒ液からはｐＨ８において酢酸エチル抽出を行なう
、ｉたは培ｇＩＰ液からアンパーライ）　ＸＡＤ−１１
に吸着させ、含水メタノールで溶出される。

また菌体からはメタノール抽出を行ない、減圧下でメタ
ノールを留去後ｐ■８で酢酸エチル抽出を行なう。　　
両酢酸エチル抽出７２クションに含まれるネオエナクテ
ンはｐＨ２において水層に逆転移できる。　　水層に移
行したネオエナクチンはｐＨ８で再び酢酸エチル７ラク
シヨ／に抽出される。　　この酢酸エチル抽出フックジ
ョンを減圧下、濃縮する事により粘性の高い油状物質を
得る。　　油状物質を号。Ｍ　１７ン酸緩衝液（ｐ）１
８．０　）を飽和した酢酸エチルに溶解し、！／、ｏＭ
リン酸緩衝液（ｐＨ８，０）に没し風乾したセルロース
粉末を同様な酢酸エチルを用いし、減圧下蒸発乾固し′
／２ｏＭリン酸緩衝液全緩衝液た酢酸エチルに溶解する
。　　これを再び同様なセルロース粉末のカラムに展開
する。

ネオエナクチンを含むフラクションを集め小姑の水で水
洗し、減圧下蒸発乾固し、ネオエナクチンの粉末をイ０
る。　　ネオエナクチンの各種微生物に対する抗菌スペ
クトルは表４および５に示す通りである。　　最小発育
阻止濃度は３７℃でグルコース入り普通寒天培地上で求
めた。

表５　ネオエナクデンの抗菌スペクトル上表より明らか
なようにネオエナクチンは７１１１菌に灼しほとんど抗
菌力を示さないが、酵母およびカビに対し抗菌力を示す
特性を有している。

また既知のポリエン系抗生物質、トリコマイシ／、アン
ホテリシンＢの抗菌力をコレステロールの存在、非存在
下において増強する。　　以上のような理化学的性質お
よび生物的性質を有するものは他の既知物質に該当する
ものがなく。

特異な性質を持った新抗生物質と認められる。

また、ネオエナクチンは酵母およびカビに対する作用だ
けではなく、ガン細胞（例えばエールリッヒ腹水ガン細
胞）に対し、３Ｈ−チミジンまたは３Ｈ・−ロイシンの
と９込みを抑制し、抗腫瘍作用を示す。

次に本物質の製剤化について述べる。

本物質は抗真菌剤として使用する場合、疾患の種類およ
び症状に応じて、薬効を（ｑるのに都合のよい形状で使
用でき、そして単独または製薬上許容しつる希釈剤およ
び他の薬剤との混合物として使用できる。

本物質はＩＱ　ｕ　１位形で提供することができる。

有効薬ａの有効成分が含有され、その形態としては経口
用として散剤、顆粒剤、錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、
シロップ剤、丸剤、懸濁剤、液剤、乳剤などである。非
経口用として注射液としてのアンプル、ピン形態などを
とり得る。また、層剤もとり（ｎる。希釈孜として固体
、液体、半固体でもよく、例えば次のものがあげられる
。すなわら、試形剤、増量剤、結合剤、湿潤化剤、崩解
剤、表面活性剤、潤沢剤、分散剤、ｖ１衝剤、香料、保
存料、溶解補助剤、溶剤等などである。

具体的な例としてあげると乳糖、しよ糖、ソルビット、
マンニット、でん粉、沈降性炭酸カルシウム、重質酸化
マグネシウム、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステ
アリン酸マグネシウム、セルロース又はその誘導体、ア
ミロペクチン、ポリビニルアルコール、ゼラチン、界面
活性剤、水、生理食塩水、エタノール、グリセリン、プ
ロピレングリコール、カカオ脂、ラウリン脂、ワセリン
、パラフィン、高級アルコール等である。

本発明の抗真菌活性は既知のいかなる方法でも製造し１
ｎる。本発明において用いられる組成物中の活性成分は
一般にｏ、　ｏｉ％から１００ｗｔ、％好ましくは０．
０５％から８０Ｗｔ、％含まれる。

本発明の抗真菌剤は経口的または非経口的に投与される
が経口投与が好ましい。経口的投与は舌下投与を含有す
る。非経口投与は注射投与（例えば皮下、筋肉、静脈注
射、点滴）、直腸投与などを含む。

本発明の抗真菌剤の投与量は動物か人間により、また年
令、個人差、病状などに影響されるので場合によっては
下記範囲外聞を投与する場合も生ずるが、一般に人間を
対象とする場合、本物質の経口的投与量は体重１　Ｋ’
Ｊ、１日当り０．１〜５００ｍｇ、好ましくは１〜２５
０ｑ、非経口的投与量は同じく、０．０１〜２００ＩＩ
ｔｇ、好ましくは０．１〜１ｏｏｍｇを１〜４回に分け
て投与する。

以下、本発明物質の実施例および製剤化例を示し本発明
をより詳細に説明する。下記製剤化例中の部は重量を示
す。

実施例１ ストレグトバーテシリウム　オリボレテイキュリ　サブ
エスピー　ネオエナクテイカスＨ８２９−ＭＹＩＯの保
存用斜面寒天より菌１エーゼと１チマルトース、０．２
％酵母エキ′ス、０．２％ポリペプトンを含む液体培地
（ｐＨ７，０）　ｘａｏｖｒｔｌｔｃｍ種２７℃、２４
時間振盪培養したものをＳ菌とし友。

３０１容のジャーファーメンタ−に１．５％可溶性デン
グン、１チグルコース、２％ソーヤミール、０．５％！
ビオス、０．２５％　Ｍａｉｌ　＋　０．３％　ＣａＣ
０＊　１ｏ、ｏ　ｏ　ｏ　ａ％ＭｎＣ１ｍ　’　４Ｈ＊
０．０．０００７％Ｃｕ’３０＋　ｊ　５ＨｓＯ＋０．
０００２％Ｚｎ５Ｏ＜　’　７ＨｔＯＩＯ，０００１９
６Ｆ’ｅ８０４’　７Ｈ＊０を含む培地（ｐＨ７，６、
滅菌前）１ｓｔを仕込み常法により培地を滅菌した。　
　種菌３００−を移植し１通気量毎分ｘｏｔ、１’Ｕ拌
数２５０　ｒｐｍ　、　　２７℃で３６時間通気撹拌培
゛養して培養菌体Ｉ　Ｋｆを得た。　　菌体を２倍容の
メタノールで３度抽出し、抽出液を合わせ、減圧乾固し
シロップとした。　　シロップをｐＨ８にして等鉦の酢
酸エチｎ、　１１＋１ｈ　ｌ口　シータ；も　Ｉ）４　
　　　　　　　ル’ｇ　１１１６１＋　　ｗ　　≦、爵
、１ｄ　　Ｉｆ　４＋番＋　　Ｕ＋したネオエナクチン
はｐＨ２，０の水２ｏｏｍｔテ逆抽出した。　　この水
層を再びｐＨ８とし＃ｉ量の酢酸エチルで抽出を行ない
、酢酸エチル層を水洗した後、減圧下蒸発乾固した。　
　粗エオクチン量は８０４　ｍｙであった。

実施例２ 粗ネオエナクチン５００　ｍｙを／２６　Ｍ　’）　：
ｙ　ｅｍ　衝液（ｐＨ８，０）　Ｋ浸した後風乾し昇。

Ｍ　リン酸緩衝液（ｐＨ８，０）で飽和した酢酸エチル
（以下Ｉと略す）を用いて調整したセルロース粉末のカ
ラム（５６Ｘ２ｃｍ　）　Ｋ展開し、活性フラクション
を分取した。　　活性フラクションを水洗し。

減圧下濃縮乾固し９３．６　ｍｇのネオエナクチンを得
た。　　このネオエナクチンを再び同様なセルロース粉
末のカラム（８７ｘ　１．５ａ＋＋）に展開し。

活性７ラクシヨンを分取し、水洗後、減圧下濃縮乾固し
た。　　収量は４３．３ｍｙであった。

乳糖　　　　　　　　　　　　　　　　　７５製剤化例
　２ 本物質（ネオエナクチン）　　　　　　４５（８１Ｓ）
澱粉　　　　　　　　　　　　　　　　　１５乳”　　
　　　　　　　　　　　　　　　　１６結晶セルロース
　　　　　　　　　　　　　２１ポリビニルアルコール
　　　　　　　　　　３水　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　３゜を均一に混合ａ
ｌｃｉ後、破砕造粒し９２燥し、ついで篩別して１４１
０〜１７１μの大きざの顆粒剤とする。

製剤化例　３ 製剤化例２と同様の方法で顆粒剤を作り、この′　　顆
粒剤９６部にステアリン酸カルシウム４部を加えて圧縮
成形して直径１０ＩＴＴｆｎの錠剤とする。

製剤化例　４ 製剤化例２の方法で得られた顆粒の９０部に結品セルロ
ース１０部、ステアリン酸カルシウム３部を加えて圧縮
成形して直径８＃の錠剤とし、これにシロップゼラチン
、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液を加えて糖衣錠とす
る。

非イオン系界面活性剤　　　　　　　　２．４生理食塩
水　　　　　　　　　　　　　　９７を加温混合後アン
プルに入れ滅菌して注射剤とする。

【図面の簡単な説明】

第１図はネオエナクチンのυＶ吸収を示す。 第２図はネオエナクチンのＩＲ吸収を示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）次の理化学的性状を有する抗真菌性物質ネオエナク
   チンおよびその官能性誘導体ならびにそれらの塩類を有
   効成分として含有する抗真菌剤。 （ａ）元素分析値 ネオエナクチンの元素分析値（元素分析による百分率組
   成（平均値）％は下記の通りである。 Ｃ：６３．４７ Ｈ：１０．０４ Ｎ：７．４４ （Ｏ：１９．０５） 但し、ハロゲン元素および硫黄は検出されない。 （ｂ）融点 ネオエナクチンの融点は、６０．５乃至６４．５℃であ
   る。 （ｃ）紫外部吸収スペクトルネオエナクチンの紫外部吸
   収スペクトルは第１図に示す通りである。また、各溶液
   中における吸収およびＥ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍの値は以
   下の通りである。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （ｄ）赤外部吸収スペクトル臭化カリウム錠剤法で測定
   したネオエナクチンの赤外部吸収スペクトルは第２図に
   示す通りである。 （ｅ）比旋光度 ネオエナクチンのメタノール中に於ける比旋光度は下記
   の通りである。 ［α］＾１＾２＿Ｄ＝−１４．２°（Ｃ＝３）％ （ｆ）溶剤に対する溶解性ネオエナクチンの溶解性は下
   記の通りである。 可溶：低級アルコール、酢酸エチル、エーテル、クロロ
   ホルム 不溶：水、Ｎ−ヘキサン、石油エーテル （ｇ）呈色反応 ネオエナクチンの呈色反応は下記の通りである。 ニンヒドリン反応　＋ ナフトレゾルシノール−リン酸反応　＋ ＫＭｎＯ＿４　＋ アンスロン−リン酸反応　− α−ナフトール−リン酸反応　− （ｈ）Ｒ＿ｆ値 ネオエナクチンのペーパークロマトグラフィーおよびシ
   リカゲルＧ薄層クロマトグラフィーで各種展開溶媒で得
   られる単一スッポトのＲ＿ｆ値は以下の通りである。 （ I ）ペーパークロマトグラフィー ▲数式、化学式、表等があります▼ （II）シリカゲルＧ薄層クロマトグラフィー▲数式、化
   学式、表等があります▼ （ｉ）外観 ネオエナクチンの外観は白色無定形の粉末である。 （ｊ）酸、アルカリに対する安定性 ネオエナクチンをＰＨ９．０、１００℃で５分間加熱す
   ると、ネオエナクチンの８０％が失活する。しかしなが
   ら、ネオエナクチンをＰＨ２．６１００℃で５分間加熱
   してもネオエナクチンのほぼ９０％の活性が保持される
   。