JPS6256852B2

JPS6256852B2 -

Info

Publication number: JPS6256852B2
Application number: JP803479A
Authority: JP
Inventors: Akira Terahara; Minoru Kitami; Yumi Fukazawa
Original assignee: Sankyo Co Ltd
Current assignee: Sankyo Co Ltd
Priority date: 1979-01-26
Filing date: 1979-01-26
Publication date: 1987-11-27
Also published as: JPS55100335A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、コレステロール合成阻害作用、抗動
脈硬化作用、抗高脂血作用などを有する生理活性
物質ML−236B（特開昭50−155690）関連化合
物、特にML−236C（特開昭51−136886）を合成
するための有用な中間体３−（1′・2′・4′a・5′・
6′・7′・8′・8′a−オクタハイドロ−2′−メチル−
5′−ヒドロキシナフチル）プロピオン酸およびそ
の製法に関する。本発明はペニシリウム属菌を培養して培養物か
ら３−（1′・2′・4′a・5′・6′・7′・8′・8′a−
オク
タハイドロ−2′−メチル−5′−ヒドロキシナフチ
ル）プロピオン酸を採取する方法に関するもので
ある。本発明において用い得る微生物はペニシリウム
属に属する３−（1′・2′・4′a・5′・6′・7′・8′
・
8′a−オクタハイドロ−2′−メチル−5′−ヒドロキ
シナフチル）プロピオン酸生産菌であるが、本発
明者らが特に有効であると認める菌株は例えばペ
ニシリウム・チトリヌムSANK18767であつて本
菌株は通産省工業技術院微生物工業技術研究所に
寄託されており、その寄託番号は微工研菌寄第
2609号である。上記以外のペニシリウム属菌でも本物質生産能
を示すものであればその変種あるいは変異株を問
わず、使用し得ることはいうまでもない。上記の
菌は公知の菌であつてその菌学的性質は次の文献
に報告されている。レイパーら；「ア・マニユアル・オブ・ザ・ペ
ニシリア」（ジ・ウイリアムス・アンド・ウイル
キンス・コンパニー発行・1949年）（K.B.Raper
and C.Thom；Ａ Manual of the Penicillia、
The Williams and Wilkins Company、1949
年）３−（1′・2′・4′a・5′・6′・7′・8′・8′a−
オク
タハイドロ−2′−メチル−5′−ヒドロキシナフチ
ル）プロピオン酸は本物質を生産する菌株をカビ
の培養法として公知の培養法により好気的に培養
して培養物中に生産せしめられる。例えば本物質
生産菌株は、麦芽エキス２％、グルコース２％、
ペプトン１％、寒天２％からなる培地に継代培養
され、この寒天培地上の発育菌体を直接生産培地
に接種して培養出来る。又生産培地に発育させた
菌体を新しい生産培地に培養して、そこに本物質
を生産させることが出来る。本物質生産菌は７〜35℃で発育するが通常20〜
30℃が好ましい。本物質を生産するペニシリウム
属菌を培養するためには、カビその他の微生物の
培養に公知の栄養源はすべて利用できる。例え
ば、グルコース、マルトース、デキストリン、デ
ンプン、ラクトース、サツカロース、グリセリン
等を炭素源として利用できる。これらの炭素源の
中でグルコースおよびマルトースは好ましい炭素
源である。本物質を生産するため、カビその他微生物の発
育のため公知の窒素源はすべて利用できる。例え
ば、ペプトン、肉エキス、酵母、酵母エキス、大
豆粉、落花生粉、コーンスチープリカー、米ぬ
か、無機窒素源等を利用できる。また必要とする
ときは、無機塩、金属塩、あるいは重金属の微量
を加えることもできる。本物質はその生産菌を好気的に培養して得られ
るが、通常用いられる好気培養法、例えば、固体
培養法、振とう培養法、通気撹拌培養法が用いら
れる。培養あるいは培地滅菌中消泡を必要とする
ときはシリコーンオイル、界面活性剤等の消泡剤
が使用できる。培養温度は20〜30℃が好ましい。本物質は好適には、例えばペニシリウム・チト
リヌムSANK18767の生産する抗高脂血症物質ML
−236Bの製造過程において得られるML−236B再
結母液より単離することができる。すなわち、例
えば、ML−236B再結母液濃縮物を酢酸エチル、
ジクロルメタン、クロロホルム等の有機溶剤に溶
かし、この溶液を重炭酸ソーダ、水酸化ナトリウ
ム等のアルカリ水溶液で抽出して酸性区分を得
る。アルカリ抽出液を塩酸、硫酸等で酸性にした
のち、再度ジクロルメタン、クロロホルム、酢酸
エチルといつた有機溶媒で抽出する。ここで得ら
れた酸性抽出区分を濃縮したのちシリカゲルを用
いる吸着クロマトグラフイーを使用し、ベンゼン
−酢酸エチルの溶媒系を用いてクロマト分割する
ことにより本物質が結晶状に単離される。本物質〔３−（1′・2′・4′a・5′・6′・7′・8′
・
8′a−オクタハイドロ−2′−メチル−5′−ヒドロキ
シナフチル）プロピオン酸〕の諸性質は以下に記
述するごとくである。本物質は白色針状結晶、酸
性物質で、その元素分析値は、Ｃ：70.48、Ｈ：
9.51である。質量分析による分子量は238で分子
式はC₁₄H₂₂O₃である。本物質は127.5〜129.5℃の
融点を示し、比旋光度（〔α〕^１８ _Ｄ）は＋78.6
（C1.07、エタノール）である。紫外部吸収スペ
クトルにおいて本物質は末端吸収を示すのみであ
る。赤外部吸収スペクトル（第１図）では3300、
1750cm^-1にカルボン酸の吸収を示す。本物質の重
クロロホルム中の核磁気共鳴吸収スペクトル（第
２図）は以下のシグナルを示す。 0.84（二重線、Ｊ＝７Hz、

【式】）、 3.25（多重線、

【式】）、5.69（多重線、Ｊ＝10、４、２Hz、オレフインプロトン）、5.97
（二重線、Ｊ＝10Hz、オレフインプロトン）、
6.90ppm（ブロードシグナル、CO₂ Ｈ又はＯ
Ｈ）。以上の物理化学的性状並びに各誘導体の挙動か
ら本物質の構造は下記の如く決定され、文献未載
の新規物質であることが判明した。本物質はメタノール、エタノール、アセトン、
酢酸エチル、ジクロルメタン、クロロホルム、テ
トラヒドロフラン、ジメチルスルホキサイド、ジ
メチルホルムアルデヒド等の溶剤に可溶である
が、ヘキサン、石油エーテルには不溶である。本物質はコレステロール合成阻害作用、抗動脈
硬化作用、抗高脂血作用などを有する生理活性物
質ML−236関連化合物、特にML−236C合成の中
間体として有用である。次に、本発明の実施例および本物質を出発物質
としたML−236Cの合成例を参考例として示す。実施例グルコース２％、ペプトン（極東）0.1％、麦
芽エキス３％を含む培地3000を6000容培養タ
ンクにとり、ペニシリウム・チトリヌム
SANK18767を接種して温度28℃、通気量300／
分、撹拌190回転／分で90時間培養した。培養液
をフイルタープレスで濾過し、濾液2590を得
た。これを減圧下で濃縮して450とし、6N塩酸
でPH4.0としたのちメチレンクロライド（1000
）で抽出する。メチレンクロライド層を水洗後
濃縮したのち、濃縮物をエタノールから粗ML−
236Bを晶出させ母液と分離する。上記の操作を6000タンク培養４回について実
施し、得られた再結エタノール母液17について
下記の分離精製を実施した。溶媒エタノールを減圧濃縮して粘稠物約２Kgを
得る。これをベンゼン30に溶解し、ｐ−トルエ
ンスルホン酸（１ｇ）を加え、約５時間還流す
る。反応液を３％炭酸カリウム液（10×３）で
抽出する。この炭酸カリウム液を1N−塩酸でPH
3.0にしたのち酢酸エチル（10×３）で抽出し
たのち、この酢酸エチル層を飽和食塩水で水洗
後、乾燥濃縮すると黒色粘稠物質（600ｇ）を得
る。この黒色粘稠物質をシリカゲル（和光ゲル）
３Kgを用い、ベンゼン−酢酸エチル（１：1v／
ｖ％）の展開溶媒を使用してカラムクロマト分割
を実施し、フラクシヨン〜（各５）に分割
する。フラクシヨンを濃縮後、ベンゼンより再
結すると白色針状晶の本物質〔３−（1′・2′・
4′a・5′・6′・7′・8′・8′a−オクタハイドロ−2
′−
メチル−5′−ヒドロキシナフチル）プロピオン
酸〕156ｇが得られた。参考例３−（1′・2′・4′a・5′・6′・7′・8′・8′a−
オク
タハイドロ−2′−メチル−5′−ヒドロキシナフチ
ル）プロピオン酸からML−236Cの合成次の径路
により合成することができる。 (1) ３−（1′・2′・4′a・5′・6′・7′・8′・8′
a−オ
クタハイドロ−2′−メチル−5′−ヒドロキシナ
フチル）−プロピオン酸10ｇをエチルエーテル
（100ml）に溶かし、この溶液にジアゾメタン・
エーテル溶液を加えてエステル化すると(1)を定
量的に得ることが出来る。 (2) 化合物(1)0.6ｇ（0.024mole）に撹拌下、塩化
チオニル0.34ｇ（0..004mole）を加え、85℃、
１時間加熱する。反応後氷水中にあけ、ベンゼ
ン抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗滌したのち
芒硝で乾燥後溶媒を溜去すると薄黄色油状のク
ロル体(2)0.5ｇが得られる。収率76.9％ (3) 化合物(2)0.33ｇ（0.001mole）を無水テトラ
ヒドロフラン（20ml）に溶解し、この溶液にト
リエチルアミン（0.12ml）を加え、室温、撹拌
下にトリフルオロスルホン酸銀0.68ｇを加えた
後、50℃に２時間加熱する。反応液をPH6.8の
リン酸緩衝液に注ぎ、ベンゼンで抽出する。ベ
ンゼン層を飽和食塩水で洗滌後、芒硝で乾燥
し、シリカゲルカラムを通過後濃縮すると黄色
油状の脱クロル体(3)0.2ｇが得られた。収率
76.9％ (4) 三口フラスコに水素化リチウムアルミニウ
ム・ハイドライド1.14ｇ（0.03mole）をエチル
エーテル（30ml）と共に入れ、これに化合物(3)
2.3ｇ（0.01mole）を無水エチルエーテル（30
ml）に溶かした溶液を加えて、室温、撹拌下２
時間反応させる。反応後、氷冷下、酢酸エチル
で未反応のリチウムアルミニウムハイドライド
を分解したのち氷水を加える。反応液を塩酸酸
性にしたのち、酢酸エチルで抽出し、酢酸エチ
ル層を飽和食塩水で洗滌後、芒硝上乾燥し、溶
媒を溜去する。残溜物をシリカゲルカラムを用
いて精製し目的とするアルコール(4)2.0ｇを得
る。収率90％ (5) ピリジニウム・クロルクロメート4.6ｇ
（0.02mole）のメチレンクロライド溶液（50
ml）に化合物(4)2.2ｇ（0.01mole）のメチレン
クロライド溶液（10ml）を室温、撹拌下に加
え、30分間反応させる。反応液を氷水中に注
ぎ、塩酸酸性（PH3.0）としてメチレンクロラ
イドで抽出する。メチレンクロライド層を飽和
食塩水で洗滌後、芒硝乾燥したのち溶媒を溜去
する。残溜物をシリカゲルカラムで精製し、ア
ルデヒド体(5)1.4ｇを得る。収率64.2％ (6) 窒素ガス気流下、三口フラスコに無水テトラ
ヒドロフラン（40ml）を入れ、無水ベンゼンで
洗つたナトリウムハイドライド0.7ｇ
（0.027mole）を加え、−50℃に冷却したのちア
セト酢酸エチル（1.8ml、0.014mole）を加えて
−10℃で15分間撹拌する。この溶液にｎ−ブチ
ルリチウム10ml（0.014mole）を滴加し、−10〜
０℃に保つて20分間撹拌し、これに化合物(5)
1.4ｇの無水テトラヒドロフラン（10ml）溶液
を−60〜−50℃で滴加する。−60℃で30分間撹
拌後、反応液を2N−塩酸中に注ぎこみ、酢酸
エチルで抽出する。酢酸エチル層を飽和食塩水
で洗滌したのち芒硝乾燥後、溶媒を溜去し、残
溜物をシリカゲルカラムでで精製し、化合物(6)
1.6ｇを得る。収率69.6％ (7) 水素化硼素ナトリウム0.26ｇ（0.0069mole）
を無水エタノール（10ml）に溶解し、10℃で撹
拌下、化合物(6)1.6ｇ（0.0048mole）の無水エ
タノール（10ml）溶液を滴加し、25分間反応さ
せる。反応液を氷水中にあけ、酢酸エチルで抽
出し、酢酸エチル層を飽和食塩水で洗滌後、芒
硝乾燥したのち溶媒を溜去し、得られた残溜物
をシリカゲルカラムで精製し、アルコール体(7)
0.6ｇを得る。 (8) 化合物(7)0.6ｇを水（10ml）と30％水酸化ナ
トリウム液（0.9ml）の混液に加え、70℃、１
時間撹拌する。反応液を冷却後、ベンゼンで洗
滌抽出し、水層を10％塩酸で酸性にしたのちベ
ンゼンで抽出する。ベンゼン層を飽和食塩水で
洗滌後、芒硝乾燥、溶媒溜去するとカルボン酸
0.4ｇを得る。このカルボン酸（0.4ｇ）をベン
ゼン（10ml）に溶解し、触媒量のｐ−トルエン
スルホン酸を加えて70℃、１時間加熱する。反
応後、飽和食塩水で洗滌し、芒硝乾燥して溶媒
を溜去し、残溜物をシリカゲルカラムで精製し
て目的とするML−236C0.3ｇを得る。収率78.9
％ここで得られたML−236Cは次の物性を有す
る。赤外線吸収スペクトル（フイルム状）：3450、
1730cm^-1 質量分析スペクトル：ｍ／e290（C₁₈H₂₆O₃）
〔α〕^１８ _Ｄ＋66.04（C1.06、エタノール）核磁気共鳴吸収スペクトル（δppm、CCl₄）：
0.87（二重線、メチル）、2.51（二重線、メチ
レン）、4.37（多重線、HO−ＣＨ−）、4.73
（多重線、CO−Ｏ−ＣＨ−）、5.74（二重・二
重線、オレフインプロトン）5.91（二重線、オ
レフインプロトン）、5.74（多重線、オレフイ
ンプロトン）

【図面の簡単な説明】

第１図は３−（1′・2′・4′a・5′・6′・7′・8′
・
8′a−オクタハイドロ−2′−メチル−5′−ヒドロキ
シナフチル）プロピオン酸の赤外部吸収スペクト
ルを示し、第２図は同物質の核磁気共鳴吸収スペ
クトルを示す。

Claims

【特許請求の範囲】１３−（1′・2′・4′a・5′・6′・7′・8′・8′a
−オ
クタハイドロ−2′−メチル−5′−ヒドロキシナフ
チル）プロピオン酸２ペニシリウム属に属する３−（1′・2′・4′a・
5′・6′・7′・8′・8′a−オクタハイドロ−2′−メ
チ
ル−5′−ヒドロキシナフチル）プロピオン酸生産
菌を好気的に培養し、その培養物から３−（1′・
2′・4′a・5′・6′・7′・8′・8′a、−オクタハイ
ドロ
−2′−メチル−5′−ヒドロキシナフチル）プロピ
オン酸を採取することを特徴とする３−（1′・
2′・4′a・5′・6′・7′・8′・8′a−オクタハイド
ロ−
2′−メチル−5′−ヒドロキシナフチル）プロピオ
ン酸の製法。