JPS6283884A - 担体及び固定化酵素 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 常温、常圧の条件で種々の反応を触媒する酵素は微、生
物中の酵素あるいは抽出した酵素の形で利用されている
。

本発明は、この酵素を固定化して有効に利用するのに特
に有用な担体及びこれに酵素を固定化してなる固定化酵
素に関する。

（従来の技術） 酵素を利用した反応は常温常圧で反応が進行しその酵素
に特異的な基質のみとしか反応しないため種々の反応に
応用されているが、一般的に酵素は水可溶性であり一回
反応に利用したのち目的生成物からその酵素を取り除く
必要があり、その工程で酵素は失活してしまう。従って
１次に反応するときは新たに酵素を加えなければならな
い欠点を有している。酵素を使い捨てではなく繰り返し
て有効に使用する方法あるいは酵素反応を連続的に行う
方法として種々の酵素固定化方法が考案され例えば吸着
法、担体結合法あるいはゲル包括法によって酵素を水不
溶性担体に吸着、共有結合ないし包括させる方法等が知
られている。

（発明が解決しようとする問題点） このうち酵素を水不溶性担体に吸着固定する吸着法によ
る場合は比較的弱い結合（水素結合、疎水結合、イオン
結合）によって保持されているため酵素の固定化あるい
は基質との反応に際しては高温１強酸１強アルカリなど
の処理は避けねばならない。

これらの方法により酵素を水不溶性担体に固定化した固
定化酵素は基質濃度やイオン強度に影響され、基質濃度
又はイオン強度が高くなると酵素が水不溶性担体から脱
離しやすくおのずと基質濃度又はイオン強度を高くでき
ず、また活性の持続が短かく安定性も低い欠点を有して
いる。又、これら欠点を補うためジアルデヒド等の蛋白
質架橋試薬により酵素を架橋処理することによって酵素
の脱離を防止しようとする試みがなされている（特開昭
５７−３６９ａ６）が、使用する試薬濃度が低すぎると
架橋が充分おこなわれないため酵素の脱離を防止し得す
、またその濃度が高いと酵素の失活が激しく架橋反応の
設定条件が難かしいという欠点を有する。又、吸着法及
び高分子担体の格子中に包括するゲル包括法は固定化の
際の失活は少なく初期の活性は高いが、その後のｐＨや
緩衝液等の外部環境によって酵素の脱離が多く安定性に
乏しいという欠点を有している。

又・担体結合法としては例えばカルボジイミド類を用い
てカルボキシル基を有する担体と酵素のアミン基等を結
合させる方法、臭化シアンを用いて水酸基を活性化後、
酵素と反応させる方法等の共有結合法がある。共有結合
法は担体と酵素が共有結合によって強く結合しているた
め高濃度の基質溶液及び塩類溶液によって酵素が脱離す
ることが少ないが、イオン結合に比べて酵素を結合させ
る際の反応条件の設定が難かしく操作も複雑であり、場
合によっては酵素活性の低下を来たすという欠点がある
。

このように、従来公知の方法で得られる固定化酵素はそ
の製法の点で又はその使用上の点で欠点を有している。

（問題点を解決するだめの手段） 本発明者らは、前記欠点を解決すべく鋭意研究を重ねた
結果、水不溶性の弱塩基性アニオン交換体のアニオン交
換基にハロアセトアルデヒドを反応させてアルデヒド基
を導入した後、又はＩ・ロアセトアルデヒドジアルキル
アセタールを反応させ加水分解してアルデヒド基を導入
した後、酵素溶液を作用させるという簡単な操作により
得られる固定化酵素は、酵素と担体が強固に結合してお
り。

高い基質濃度やイオン強度においても酵素が脱離せず、
その結果、酵素活性が長期間に亘って安定であることを
見い出し本発明を完成する（至った。

即ち１本発明は。

１、水不溶性の弱塩基性アニオン交換体の交換基にハロ
アセトアルデヒドを反応させること−より又はハロアセ
トアルデヒドジアルキルアセタールを反応させて、加水
分解することにより得られる担体。

２、水不溶性の弱塩基性アニオン交換体の交換基にハロ
アセトアルデヒドを反応させることにより又はハロアセ
トアルデヒドジアルキルアセタールを反応させて加水分
解するごとにより得られる担体に酵素を固定化してなる
固定化酵素。

に関するものである。

本発明の担体及び固定化酵素は簡単に１例えば次のよう
にして製造することができる。

即ち、水不溶性の弱塩基性アニオン交換体にハロアセト
アルデヒド又はハロアセトアルデヒドジアルキルアセタ
ールを水中に分散あるいは溶解しアルデヒドジアルキル
アセタールが交換基と反応しハロアセトアルデヒドジア
ルキルアセタールの場合は更に加水分解することにより
アルデヒド基が弱塩基性アニオン交換体に導入される。

このようにして得られるアルデヒド基を含有する担体に
酵素水溶液を作用させると容易に共有結合した固定化酵
素が得られる。

本発明に用いる水不溶性の弱塩基性アニオン交換体とし
ては種々のものが使用でき特に限定されない。例えば、
交換基として１級、２級又は３級アミン基を有する種々
のイオン交換体が使用できる。

これらの例としてはアミノ基；メチルアミノ基。

エチルアミノ基、ヒドロキシアルキルアミン基。

アミノアルキルアミノ基等の２級アミン基；ジメチルア
ミノ基、ジエチルアミノ基、ビスヒドロキシエチルアミ
ノ基等の５級アミン基が挙げられる。

イオン交換体としては水不溶性の弱塩基性アニオン交換
体であれば種々の形体、用途、物質が使用でき１例えば
（１）イオン交換樹脂、（２）イオン交換ゲルクロマト
グラフィ用樹脂、（３）イオン交換膜又はイオン交換繊
維、（４）エマルジョン、（５）無機系担体、（６）カ
チオン性天然多糖類等があげられる。

更に具体的には（１）イオン交換樹脂（弱塩基性アニオ
ン交換樹脂）としては、例えば商品名アン・（−ライト
エＲＡ−３５，−４５，−６Ｂ、　　−９５゜−ｑａ、
−ｑｑ（ロームアンドＩ・−ス社製）、商品名ダウエッ
クス−６６，−ＷＧＲ−２（ダウケミカル社り、商品名
ダイヤイオンＷ　Ａ　−１０＋−１１，−２０，−２１
，−３０（三菱化成工業社ｙｎ＞等がある。

（２）イオン交換ゲルクロマトグラフィ用樹脂としては
ジエチルアミノ基等のジアルキルアミノ基等を有するゲ
ルクロマトグラフィ用樹脂が挙げられ。

例えば商品名ＤＥＡＩ！：　）ヨパール６５ｏＭ、（東
洋曹達社１！り、商品名ＤＫＡＥセファデックスＡ−２
５、−５０，ＤＥＡＲ−セファローズＣＬ−６Ｂ、ＤＫ
ＡＫ−セファセル（ファルマシアファインケミカルズ社
製）等がある。

（３）イオン交換膜又はイオン交換繊維としては弱塩基
性アニオン交換基を持つ膜又は繊維であればいずれでも
よく１例えばＤＥＡＫ−セルロースペーパー等がある。

（４）エマルジョンとしては１例えばジアルキルアミノ
アルキル（メタ）アクリレートを単独で、又はこれと共
重合可能なエチレン系不飽和単量体とを任意の割合で混
合しエマルジョン重合より得られた重合体等が挙げられ
１通常、水溶媒中でポリオキシエチレンアルキルフェニ
ルエーテル等の乳化剤存在下で通常のラジカル重合法よ
り得られ乳化剤は透析等の処理により除くことができる
。

（５）無機系担体としては多孔性ガラスあるいはシリカ
ゲル等があり、担体表面に例えば１級、２級又は３級ア
ミン基を有するシランカップリング試薬を作用させるこ
とによりアミン基等の弱塩基性アニオン交換基を導入し
１弱塩基性担体としたもの等が挙げられる。

（６）カチオン性天然多糖類としては例えばキトサン等
が挙げられる。

本発明に用いるへロア・セトアルデヒド及びＩ・ロアセ
トアルデヒドジアルキルアセタールトシては。

例えば、クロルアセトアルデヒド、ブロムアセトアルデ
ヒド、ヨードアセトアルデヒド、クロルアセトアルデヒ
ドジメチル（又はエチル）アセタール、ブロムアセトア
ルデヒドジメチル（又はエチル）アセタール、ヨードア
セトアルデヒドジメチル（又はエチル）アセタール等が
挙げられる。

ハロアセトアルデヒド又はハロアセトアルデヒドジアル
キルアセタールと弱塩基性アニオン交換体の交換基との
反応は単に弱塩基性アニオン交換体ト−・ロアセトアル
デヒド又は・・ロアセトアルデヒドジアルキルアセター
ルを含む溶液又は分散液とを混合するだけでよい。反応
温度は特に限定きれず１弱塩基性アニオン交換体がこわ
れない温度ならかまわないが、特に０〜５０℃が好まし
い。

弱塩基性アニオン交換体に反応させるハロアセトアルデ
ヒド又はハロアセトアルデヒドジアルキルアセタールは
弱塩基性アニオン交換体のイオン交換容量（Ｍｅｑ／＋
（）の０．２５当量以上反応させるのが好ましく、とり
わけ０，７５〜１．０当量が好ましいが１反応時に−・
ロアセトアルデヒド又は・・ロアセトアルデヒドジアル
キルアセタールは過剰量使用することができる。

ハロアセトアルデヒドジアルキルアセタールは弱塩基性
アニオン交換体の交換基と反応し加水分解することによ
りアルデヒド基が弱塩基性アニオン交換体に導入される
。加水分解条件としては無機酸溶液例えば塩酸、硫酸等
を用い、無機酸溶液の濃度は特に限定されないが、特に
５規定以上の濃度が好ましい。反応温度は特に限定され
ないが。

特に０〜７０℃が好ましい。反応終了後アルカリ溶液例
えば苛性ソーダ、炭酸ソーダにて中和しｐａを中性にも
どす。

未反応のハロアセトアルデヒド及びＩ・ロアセトアルデ
ヒドジアルキルアセタール又はその加水分解物は多量の
水で充分洗浄することにより除かれる。またメタノール
、アセトン等の親水性溶媒を用いてもよく親水性溶媒を
用いた場合は少量の使用でハロアセトアルデヒド及びノ
・ロアセトアルデヒドジアルキルアセタール又はその加
水分解物を除くことができ更に水洗することにより親水
性溶媒も容易に除くことができる。

本発明の固定化酵素は例えばバッチ法あるいはカラム法
により下記の如く製造することができる。

即ちバッチ法による場合は、上記のようにしてアルデヒ
ド基が導入された弱塩基性アニオン交換体を水に懸濁又
は浸して酵素溶液を加え適当な温度例えば４〜５０℃に
て数時間振とう等によるかくはんをつづけ反応させるこ
とにより製造される。

次いで適当な緩衝液（例えばリン酸緩衝液）にて充分洗
浄し未反応の不純蛋白や色素等を除去する。

更に濃厚塩類（例えば１モル食塩）を含有する緩衝液に
て数回振とり等による洗浄を繰り返してイオン結合等の
弱い結合で吸着されている酵素を除去し固定化酵素を１
、−　　　　．１　精製する。

またカラム法による場合は、アルデヒド基が導入された
弱塩基性アニオン交換体を水に懸濁又は浸してカラムに
詰めこれに酵素溶液を適当な速さで流下させ、適当な温
度（例えば４〜５０℃）にて反応させることにより製造
される。次いで適当な緩衝液にて充分洗浄し、更に濃厚
塩類を含有する緩衝液をカラムの上部または下部より連
節させ固定化酵素を精製する。

精製された固定化酵素は酵素反応において酵素の脱離が
なく更に酵素活性も高く長期間の反応に耐え、また酵素
の脱離がないため酵素反応後の反応生成物の精製に際し
、除蛋白等の工程の必要がない等の特徴を有する。

本発明の固定化酵素において、酵素は特に制限されず種
々の酵素を用いることができる。

例えば、アミノアシラーゼ、プレオマインン不活化酵素
、アミラーゼ、アスパラギナーゼ、インベルターゼ、ウ
レアーゼ、ウロキナーゼ、ア七チルコリンエステラーゼ
、トリズシン、キモトリプシン、パパイン、ペプシン、
ペニシリンアミダーゼ。

リパーゼ、ホスファターゼのような加水分解酵素。

グルコースオキシダーゼ、グルコース−６−リン酸デヒ
ドロゲナーゼ、グルタミン酸デヒドロゲナーゼ、カタラ
ーゼ、アミノ酸オキシダーゼ、グルコン酸デヒドロゲナ
ーゼのような酸化還元酵素。

フェニルアラニンアンモニアアーゼ、クルタミン酸デカ
ルボキ７ラーゼ、アスパルターゼのような脱離酵素、グ
ルコースイソメラーゼ、グルタミン酸ラセマーゼのよう
な異性化酵素、グルタミン酸−ビルピノ酸アミノトラン
スフェラーゼ、グルタミン酸−オキザロ酢酸アミントラ
ンスフェラーゼ、ロインンアミノベプテダーゼ、ピルビ
ン酸キナーゼ、クレアチンホスホキナーゼのような転移
酵素をあげる事ができる。

（実施例） 実施例１１０ｄのアンバーライトエＲＡ−６８（総交換
容量１・６Ｍｅｑ／ｇｇ以上の弱塩基性陰イオン交換樹
脂、ロームアンド・・−ス社製）を蒸留水で洗浄後、ｓ
、６９４ｆのブロムアセトアルデヒドジメチルアセター
ルを２０屑ｊの含水メタノール（メタノール：水＝１＋
１．以下含水メタノールと略す）に溶解したものを加え
る３７℃で１５時間振とうした。反応後の含水メタノー
ル中にはガスクロマトグラフィーによる分析の結果ブロ
ムアセトアルデヒドジメチルアセタールは検出されなか
った。

弱塩基性イオン交換体の交換基に反応したアンバーライ
トＩＲＡ−６Ｂに３０ｆｆｉ／のメタノールを加えよく
振とりし３＠繰り返して洗浄した。

次いで蒸留水で同様操作を５回繰り返しメタノールを除
去した。

次に６規定塩酸３０Ｊ！／にて６０℃、５時間振とうし
加水分解反応をおこなった。更に６規定苛性ンーダ３０
ｄを加えｐＨ＝　７．２とした。アルデヒド基が導入さ
れたアンバーライトエＲＡ−６８に３０罰の蒸留水を加
えよく振とうし５回繰り返して洗浄した。次に６００■
のアミノアシラーゼ（１ｓ　ｏ　ｏ　ｏ　ｕ７ｙ天野製
薬社製）を２０ｍ１のＭ／１５リン酸緩衝液（ｐＨ＝　
７．２　）に溶解したものをこれに加え、３７℃、４時
間振とうし固定化アミノアシラーゼ剤を得た。

得られた固定化アミノアシラーゼ剤をカラムに詰め、５
０ｄのＭ／１５リン酸緩衝液（ｐＨ＝７．２）を自然流
下させ未反応のアミノアシラーゼを除去した。更に５０
１１１ｔの２　Ｍ−ＮａＣ１を含有するＭ／１５リン酸
緩衝液を同様な操作で流出させイオン結合等で吸着され
ている未反応アミノアシラーゼ及び色素等を除去し精製
した。

実施例２１０ａｔのダイヤイオンＷＡ−３０（総交換容
量１−５　Ｍｅｑ７Ｍｇ以上のスチレン系弱塩基性陰イ
オン交換樹脂、三菱化成工業社製）を蒸留水で洗浄後、
２，９４５ｆのクロルアセトアルデヒドを含水メタノー
ルに溶解したものを加え３７℃。

１５時時間表うした。

アルデヒド化されたダイヤイオンＷＡ−５ＱＩＣ３０ａ
ｔのメタノールを加えよく振とうし５回繰り返して洗浄
した。次いで蒸留水で同様操作を５回繰り返しメタノー
ルを除去した。次に６００■のアミノアシラーゼ（１ｅ
　ｏ　ｏ　ｏ　ｕ７ｙ天野製薬社製）を２０ｄのＭ／１
５リン酸緩衝液（ｐＨニア４）に溶解したものをこれに
加え実施例１と同様にして処理し固定化アミノアシラー
ゼ剤を精製した。

実施例５　１．７ｆｆのＤＫＡＦｉセファデックスＡ−
２５（総交換容量５・５　Ｍｅｑ　／　９以上の弱塩基
性陰イオン交換担体ファルマシアファインケミカルズ社
ｇりを５０ｗ１のＭ／１５リン酸緩衝液（ｐＨニア、２
）に膨潤させ１，５７４ｆのブロムアセトアルデヒドジ
メチルアセタールを加え３７℃、１５時時間表うし実施
例１と同様にして固定化アミノアシラーゼ剤を精製した
。

比較例１１１０ｎ１のアンバーライトエＲＡ−６８を蒸
留水で洗浄後、６００■のアミノアシラーゼを２Ｑｄの
Ｍ／１５・リン酸緩衝液（ｐＨ＝　７．２）に溶解して
加え、３７℃、４時間振とうし実施例１と同様にして固
定化アミノアシラーゼ剤を精製した。

比較例２１０ｄのダイヤイオンＷＡ−ｓｏを蒸留水で洗
浄後、比較例１と同様にして固定化アミノアシラーゼ剤
を精製した。

比較例３　１．７７のＤＥＡＦ！セファデックス八−２
５へ３０ｍｇのＭ／１５リン酸緩衝液（ｐＬ＝７．２　
）に膨潤させ比較例１と同様にして固定化アミノアシラ
ーゼ剤を精製した。

試験例１　２ａｌの固定化アミノアンラーゼ剤を１ｒＪ
ｒｄのキャップ付き試験管に採取し４　ｔｗｌの０．０
５モルのＮ−アセチル−ＤＬ−フェニルアラニン水溶液
（ｐＨ＝７．２，５ｘ１０　モルＣＯ＋＋含有）を加え
反応温度３７℃１反応時間６０分にて振とうしながら酵
素反応をおこない、生成するＬ−フェニルアラニンを定
量し反応率を求めた。また固定化アミノア／ラーゼ剤を
繰り返し用いて同じ反応を繰り返し行い、３回目。

３０回目、６０回目、１５０回目における酵素活性を求
めた。本発明の固定化アミノアシラーゼ剤と従来の技術
による固定化アミノアンラーゼ剤の結果は下記の如くで
ある。

試験例２２Ｋｇの固定化アミノアシラーゼ剤を１ａ、１
ｇのキャップ付き試験管に採取し４ｄの０．０５モルＮ
−アセチル−ＤＬ−メチオニン水溶液（ｐＨ＝７＋２．
　　ｓ　ｘ　１ｏ　　モルｃｏ′＋＋含有）を加え反応
温度３７℃１反応時間６０分にて振とうしながら酵素反
応をおこない、生成するＬ−メチオニンを定量し反応率
を求めた。固定化アミノアシラーゼ剤を繰り返し用いて
同じ反応を繰り返し行い、３回目、５０回目、６０回目
、１５０回目における酵素活性を求めた。本発明の固定
化アミノアシラーゼ剤と従来の技術にょる固定化アミノ
アシラーゼ剤の結果は下記の如くであった。

試験例３２ゴの固定化アミノアシラーゼ剤を１０ｍ１の
キャップ付き試験管に採取し４　ｍｌの０．０５モルＮ
−アセテ、ＩＩ／　−Ｄ　Ｌ　−ハＩＪン水溶液（ｐＨ
＝７．２．５　Ｘ　１０　　モルＣｏ＋含有）を加え反
応温度５７℃１反応時間６０分にて振とうしながら酵素
反応をおこない、生成するＬ−バリンを定量し反応率を
求めた。また固定化アミノアシラーゼ剤を繰り返し用い
て同じ反応を繰り返し行い、３回目、３０回目、６０回
目、１５０回目における酵素活性を求めた。本発明の固
定化アミノアンラーゼ剤と従来の技術による固定化アミ
ノアシラーゼ剤の結果は下記の如くであった。

次に牛肝臓より抽出したプレオマイシン不活化酵素の固
定化の例を示す。

実施例４ 新鮮な牛肝臓２０７を１００Ｒｔの１／１５モルリン酸
緩衝液（ｐＨ＝　７．２　）とホモジエネートし。

１５．００　Ｏｒｐｍにて３０分遠心分離し、上清を集
めプレオマイシン不活化酵素液とする。別顛同緩衝液に
て平衡化したＩＩＩＥＡＫセファデックスＡ−２５（フ
ァルマシアファインケミカルズ社製）２０ゴに実施例２
と同様にしてクロルアセトアルデヒドを反応させ、未反
応クロルアセトアルデヒドを除去し、プレオマイシン不
活化酵素液１００ｙｒｌを加え、３７℃にて４時間ゆっ
くり振とうし、固定化した。これを保温ジャケット付き
カラムに充填し、１／１５モルリン酸緩衝液１００ｇＪ
、２Ｎ　−ＮａＣ１を含む同緩衝液４００　ｍｌ、更に
同緩衝液２００ゴにて洗浄し、未反応あるいは吸着した
酵素を洗い出した。

ジャケットに３７℃の温水を流し、基質としてプレオマ
イシンＢ２の１％同緩衝液溶液を２・５ゴ／時間の流速
で連続的に流した。

４ケ月間連続運転してプレオマイシンＢ２の加水分解率
は約８０％に低下し、その平均加水分解率は９５．２％
であった。

比較例４ 実施例４でクロルアセトアルデヒドを作用させない以外
実施例４と同様に操作し、４日間にてプレオマイシ７Ｂ
２の加水分解率は８０％に低下した。

実施例５ 多孔質ガラスＣｐＧ−ＴＯ（２０〜８０メツシユ、５ｓ
ｏＸ、エレクトロ―ヌクレオニックス社製）８２に１０
％ｒ−アミノプロピルトリエトキシシランＫＢＫ−９０
５（信越シリコーン社製）１６０ｒｔｌを加え、６Ｎ−
塩酸にてｐＨ＝　５．５に調整し、７５℃にて２時間振
とう後、Ｆ別し、水洗して乾燥器にて１２０℃、２時間
熱処理する。得られたアミノプロピルガラスを実施例４
と同様にクロルアセトアルデヒドと反応させ、プレオマ
イシン不活化酵素を固定し、酵素反応を行ったところ同
様の結果を得た。

比較例５ 実施例５でクロルアセトアルデヒドを作用させない以外
実施例５と同様に操作し、１０日間にてプレオマイシン
Ｂ２の加水分解率は８０％に低下した。

実施例６ 実施例１においてブロムアセトアルデヒドジメチルアセ
タールの代りにクロルアセトアルデヒドジメチルアセタ
ールを用いた以外は実施例１と同様にして固定化アミノ
アクラーゼ剤を得、これを用いて試験例１と同様にして
酵素反応を繰り返し行ったところ、実施例１の固定化ア
ミノアシラーゼ剤を用いた場合と同様な結果が得られた
。

実施例７ 実施例１においてブロムアセトアルデヒドジエチルアセ
タールの代りにブロムアセトアルデヒドジエチルアセタ
ールを用いた以外は実施例１と同様にして固定化アミノ
アシラーゼ剤を得、これを用いて試験例１と同様にして
酵素反応を繰り返し行ったところ、実施例１の固定化ア
ミノアシラーゼ剤を用いた場合と同様な結果が得られた
。

（発明の効果） 本発明においては、イオン結合法及び共有結合法による
従来の固定化酵素の欠点を解決し、水不溶性の弱塩基性
アニオン交換体の交換基に特定の化合物を反応させて得
た担体を用いることにより。

イオン結合法と同様の操作で酵素と担体とを共有・　結
合で結合させることが可能となった。

従って１本発明によればイオン結合法と同様の簡単な操
作により水不溶性の弱塩基性アニオン交換体から強固な
共有結合を持つ固定化酵素が得られ、その酵素活性も高
く、また高い基質濃一度も使用可能となり、＃素の脱離
もなくその耐久性も非常に長いため長期間の使用が可能
となった。

又１本発明によれば弱塩基性アニオン交換体を用いるこ
とによりハロアセトアルデヒド及び／Ｓロアセトアルデ
ヒドジアルキルアセタールによる反応が極めて容易に進
み、更に１弱塩基性アニオン交換体を用いることにより
酵素の固定化が短時間で極めて容易に行われ、従って本
発明の担体及び固定化酵素は簡単な手段で製造可能であ
る。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）水不溶性の弱塩基性アニオン交換体の交換基にハ
   ロアセトアルデヒドを反応させることにより又はハロア
   セトアルデヒドジアルキルアセタールを反応させて加水
   分解することにより得られる担体。
2. （２）水不溶性の弱塩基性アニオン交換体の交換基にハ
   ロアセトアルデヒドを反応させることにより又はハロア
   セトアルデヒドジアルキルアセタールを反応させて加水
   分解することにより得られる担体に酵素を固定化してな
   る固定化酵素。